专利名称：从鱼中提取小分子胶原蛋白寡肽的方法
技术领域：
本发明涉及一种胶原蛋白寡肽的提取方法，具体是指一种采用酶解方式从鱼中提 取小分子胶原蛋白寡肽的方法。
背景技术：
胶原(Collagen)蛋白是一种重要的功能性蛋白质，它与细胞增生、分化、运动、免 疫、关节润滑、伤口愈合等密切相关。由于胶原蛋白的特殊功能，其提取物已被广泛应用于 医药、食品、日用化工、生物合成等工业领域，如医用胶囊、外科手术材料、食用明胶、照相明 胶、化妆品等。目前生产的胶原蛋白制品的原料主要来源是从猪、牛等陆生哺乳动物的皮、 骨和肌腱，因近年来随着全球生态环境恶化导致许多疯牛病、口蹄疫等流行病的发生，使得 从陆生动物皮、骨中提取胶原蛋白的危险性增大。欧美、日本等国家相继出台了不少法规， 限制从牛等哺乳动物皮骨中提取物用于食品医药等对人体直接影响的产品中。由此，人们 便开始寻求从水产动物中提取胶原蛋白，因而，从水生动物鱼体废弃物中提取安全、卫生、 无害的胶原蛋白已成为当前国内外业内人士研发的一个热门课题。经业内人士研究分析，胶原蛋白含量占鱼体总蛋白的25-30 %，主要分布于鱼鳞和 鱼皮中，且鱼鳞、鱼皮中的粗胶原蛋白就约占80%，而一般水产加工中都将鱼鳞、鱼皮作为 废弃物扔掉的，尤其是鱼鳞。因此，充分而合理地利用废弃物鱼鳞提取胶原蛋白不仅可推动 水产加工业的发展，而且能化废为宝、减少环境污染，更好地造福于人类。我国是世界上最 大的淡水鱼养殖国，据不完全统计，每年废弃鱼鳞约达5万吨，鱼鳞资源相当丰富，目前国 内已有多家鱼鳞收购公司，将鱼鳞晒干作为一种资源出口。国外如日本也十分看好中国鱼 鳞资源，并将在中国筹建生产基地共同开发鱼鳞胶原蛋白产品。目前，采用酶解方式从鱼鳞中提取小分子胶原蛋白寡肽的加工方法，有些加工企 业没有在酶解前，进行脱脂处理，故其酶解的时间很长，从而影响了生产效率；为了弥补上 述不足，还有些企业采用了酶解前脱脂的方案，但由于采用盐水或醇溶液进行脱脂处理，该 方案脱脂很不彻底，没有达到其预期的效果。上述企业还普遍存在所生产出来的胶原蛋白 分子量较大，不利于人体的吸收。
发明内容
为了克服上述之不足，本发明的目的在于提供一种脱脂效果好、生产效率高的从 鱼中提取小分子胶原蛋白寡肽的方法。为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是从鱼中提取小分子胶原蛋白 寡肽的方法，它包括以下步骤1、脂肪酶脱脂将洗净晾干的鱼鳞或鱼皮投入到提取罐，按其重量的3-15倍加水搅拌均勻，按鱼 鳞或鱼皮重量的0.01% -1%加入脂肪酶，进行酶解；2、清洗
放掉提取罐中的酶解液后，向提取罐内加水冲洗鱼鳞或鱼皮3-5遍；3、调整 PH 值:向提取罐内加入水，加水量为鱼鳞或鱼皮重量的3-15倍，升温至42V -68°C，用浓 度为3% -17%的NaOH及HCL将提取罐内液体的pH值调节为6. 8-9. 9 ；4、加入蛋白酶进行酶解再降温至38°C _68°C，按鱼鳞或鱼皮重量的-4%加入蛋白酶进行酶解，酶解时 间为1-6小时；5、灭酶酶解完毕后将酶解液升温至70°C -95°C，保持30分钟左右，灭酶后，降温至65°C调 节 pH 为 6. 5-8. 5 ；6、过滤、浓缩、干燥得到小分子胶原蛋白寡肽。上述方法中所用的脂肪酶即三酰基甘油酰基水解酶，它催化天然底物油脂水解， 生成脂肪酸、甘油和甘油单酯或二酯，脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸，通常只有一条多肽 链；蛋白酶采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠 萝蛋白酶、复合蛋白酶中的一种或者几种。本发明的有益效果在于由于采用脂肪酶对鱼鳞或鱼皮进行脱脂处理，故提高了 脱脂效果，从而不仅大大缩短了蛋白酶的酶解时间，提高了生产效率，而且加工出来的胶原 蛋白分子量更小，有利于人体的吸收。
具体实施例实施例1从鱼中提取小分子胶原蛋白寡肽的方法，它包括以下步骤1、脂肪酶脱脂将洗净晾干的鱼鳞或鱼皮投入到提取罐，按其重量的3倍加水搅拌均勻，加入 0.01%的脂肪酶进行酶解；2、清洗放掉提取罐中的酶解液后，向提取罐内加水冲洗鱼鳞或鱼皮3遍；3、调整 PH 值向提取罐内加入水，加水量为鱼鳞或鱼皮重量的3倍，升温至42°C，用浓度为3% 的NaOH及HCL将提取罐内液体的pH值调节为6. 8 ；4、加入蛋白酶进行酶解再降温至38°C，按鱼鳞或鱼皮重量的加入蛋白酶进行酶解，酶解时间为6小 时；5、灭酶酶解完毕后将酶解液升温至70°C，保持30分钟左右，灭酶后，降温至65°C调节pH 为 6.5 ；6、过滤、浓缩、干燥得到小分子胶原蛋白寡肽。脂肪酶即三酰基甘油酰基水解酶，它催化天然底物油脂水解，生成脂肪酸、甘油和 甘油单酯或二酯，脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸，通常只有一条多肽链；蛋白酶采用胃蛋
4白酶。实施例2从鱼中提取小分子胶原蛋白寡肽的方法，它包括以下步骤1、脂肪酶脱脂将洗净晾干的鱼鳞或鱼皮投入到提取罐，按其重量的9倍加水搅拌均勻，按鱼鳞 或鱼皮重量的0. 05%加入脂肪酶，进行酶解；2、清洗放掉提取罐中的酶解液后，向提取罐内加水冲洗鱼鳞或鱼皮4遍；3、调整 PH 值向提取罐内加入水，加水量为鱼鳞或鱼皮重量的3-15倍，升温至42V -68°C，用浓 度为10%的NaOH及HCL将提取罐内液体的pH值调节为8 ；4、加入蛋白酶进行酶解再降温至53°C，按鱼鳞或鱼皮重量的2. 5%加入蛋白酶进行酶解，酶解时间为4小 时；5、灭酶酶解完毕后将酶解液升温至82V，保持30分钟左右，灭酶后，降温至65°C调节pH 为 7.5 ；6、过滤、浓缩、干燥得到小分子胶原蛋白寡肽。上述方法中，蛋白酶采用胰蛋白酶。实施例3从鱼中提取小分子胶原蛋白寡肽的方法，它包括以下步骤2、脂肪酶脱脂将洗净晾干的鱼鳞或鱼皮投入到提取罐，按其重量的15倍加水搅拌均勻，按鱼鳞 或鱼皮重量的加入脂肪酶，进行酶解；2、清洗放掉提取罐中的酶解液后，向提取罐内加水冲洗鱼鳞或鱼皮5遍；3、调整 PH 值向提取罐内加入水，加水量为鱼鳞或鱼皮重量的15倍，升温至68°C，用浓度为 17%的NaOH及HCL将提取罐内液体的pH值调节为9. 9 ；4、加入蛋白酶进行酶解再降温至68°C，按鱼鳞或鱼皮重量的4%加入蛋白酶进行酶解，酶解时间为1小 时；5、灭酶酶解完毕后将酶解液升温至95°C，保持30分钟左右，灭酶后，降温至65°C调节pH 为 8.5 ；6、过滤、浓缩、干燥得到小分子胶原蛋白寡肽。上述方法中，蛋白酶采用胃蛋白酶。
权利要求
一种从鱼中提取小分子胶原蛋白寡肽的方法，其特征在于从鱼中提取小分子胶原蛋白寡肽的方法，它包括以下步骤①脂肪酶脱脂将洗净晾干的鱼鳞或鱼皮投入到提取罐，按其重量的3 15倍加水搅拌均匀，按鱼鳞或鱼皮重量的0.01％ 1％加入脂肪酶，进行酶解；②清洗放掉提取罐中的酶解液后，向提取罐内加水冲洗鱼鳞或鱼皮3 5遍；③调整PH值向提取罐内加入水，加水量为鱼鳞或鱼皮重量的3 15倍，升温至42℃ 68℃，用浓度为3％ 17％的NaOH及HCL将提取罐内液体的pH值调节为6.8 9.9；④加入蛋白酶进行酶解再降温至38℃ 68℃，按鱼鳞或鱼皮重量的1％ 4％加入蛋白酶进行酶解，酶解时间为1 6小时；⑤灭酶酶解完毕后将酶解液升温至70℃ 95℃，保持30分钟左右，灭酶后，降温至65℃调节pH为6.5 8.5；⑥过滤、浓缩、干燥得到小分子胶原蛋白寡肽。
全文摘要
本发明公开了一种从鱼中提取小分子胶原蛋白寡肽的方法。它包括以下步骤脂肪酶脱脂将洗净晾干的鱼鳞或鱼皮投入到提取罐，按其重量的3到15倍加水搅拌均匀，按鱼鳞或鱼皮重量的0.01％-1％加入脂肪酶进行酶解，然后经清洗、调整PH值、加入蛋白酶进行酶解、灭酶、过滤、浓缩、干燥得到小分子胶原蛋白寡肽。蛋白酶进行酶解的过程为温度在38℃-68℃，按鱼鳞或鱼皮重量的1％-4％加入蛋白酶进行酶解，酶解时间为1-6小时。由于采用脂肪酶对鱼鳞或鱼皮进行脱脂处理，故提高了脱脂效果，从而不仅大大缩短了蛋白酶的酶解时间，提高了生产效率，而且加工出来的胶原蛋白分子量更小，有利于人体的吸收。
文档编号C12P21/06GK101892278SQ20091003955
公开日2010年11月24日 申请日期2009年5月18日 优先权日2009年5月18日
发明者张嘉强, 林国, 马晓英 申请人:湛江中南岛生化有限公司