专利名称：一种耐低温沼气菌剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于微生物发酵技术领域，具体地说是一种复合微生物发酵菌剂的制备方法。
背景技术：
目前应于沼气生产的微生物，大都采用自然发酵或接种沼液、沼渣等方法。此种方 法受环境温度影响较大，尤其北方地区冬季，沼气池出现产气量小，或不产气等现象，致使 沼气池不能正常工作。大部分采取的措施为对沼气池采取加厚保温，或采取太阳能照射加 温保温暖圈等措施，其缺点是增加使用者的基建投资，对老旧沼水的改造，还出现基建难度 和进出料不方便等因素。
发明内容
本发明的目的在于提供一种由多种微生物组成，并在低温环境中生长、繁殖、发 酵、产能在低温环境中产生沼气的微生物菌剂。本发明的技术方案是一、本发明由以下菌种及其百分配重比，醋酸菌20-30%、乳酸菌20-30%、丁酸菌 10-20 %、酵母菌 5-10 %、甲烷菌 20-30 %。二、本发明的制备工艺过程1.在北方地区冬季气温低于0°C的地区，选择能产生沼气的沼气池10个以上，分 别取样50-100g。2.将上述10个样品在实验室进行分离鉴定，采用选择性培养基，分别选出醋酸菌 群、丁酸菌群、乳酸菌群、酵母菌群、甲烷菌群。3.将上述5个菌株群进行单独培养，培养条件为培养基为1 2%庶糖，5-10%豆饼粉、3-4%蛋白胨、0.5-1%牛肉膏、0.5-1% HIgSO4 · 7Η20、0· 03-0. 07 % (NH4)2SO4^O. 01-0. 03ΚΗ2Ρ04 和 0. 01-0. 05 % Na2HP04。培养时间 2-4天。培养温度从15°C开始每下降2°C做一次培养，直致菌数增殖小于20-100%为止。接 种量为1_5%，接种物为前一次温度递度下降菌液。4.由此选出酵母菌最低温度5 °C，乳酸菌最低温度3 °C，醋酸菌温度4°C，丁酸菌温 度8°C，甲烷菌温度7°C。将该低温菌接入斜面试管冷藏，同时接入固体培养基，培养3天后，得到每克 菌剂醋酸菌、乳酸菌、丁酸菌、酵母菌、甲烷菌，含菌数为0. 5-1.2X108、0. 3-0. 6X IO8, 0. 2-0. 4Χ108、0· 3-0. 4Χ108、1· 2-1. 6Χ IO8 个。5.将上述五个能在低温环境生长繁殖的菌种接种在斜面试管中进行菌种冷藏。6.将选择出五种菌种分别接种在上述培养基中培养，使每克固体培养基中醋 酸菌、乳酸菌、丁酸菌、甲烷菌含菌数达到0. 5-1. 2X108、0. 3-0. 6XlO8,0. 2-0. 4X IO8, 0. 3-0. 4Χ 108、1. 2-1. 6Χ IO8 个。
7.按各菌种百分配重比，醋酸菌20-30%、乳酸菌20-30%、丁酸菌10-20%、酵母 菌5-10%、甲烷菌20-30%进行复合，复合后各种菌数为1 X IO7以上，每克复合菌剂中有效 治菌数1-10 X IO8个，含水量彡10%。
具体实施例方式选取内蒙古、河北、山西、银川等地区冬季10个样品，分别在醋酸菌、丁酸菌、乳酸 菌、酵母菌、甲烷菌培养基中培养，镜检和培养基中观察选出各自菌株。将各自菌株接入 1. 5% 庶糖、6% 豆饼粉、3. 2% 蛋白胨、0. 8% 牛肉膏、0. 5% HIgSO4 · 7Η20、0· 04% (NH4)2SO4, 0. 02ΚΗ2Ρ04和0. 02 % Na2HPO4培养基中。接种量5% ΡΗ6. 5-7. 0，培养温度分别是摄氏度 15°C、13°C、11°C、9°C、8°C、7°C、6°C、5°C、4°C 培养。按增殖小于30%停止接种培养，达到酵母最低温度5°C，乳酸菌最低温度3°C，醋 酸菌温度4°C，丁酸菌温度8°C，甲烷菌温度7。C。将该低温菌接入斜面试管冷藏，同时接入固体培养基，培养3天后，得到每克 菌剂醋酸菌、乳酸菌、丁酸菌、酵母菌、甲烷菌，含菌数为0. 5-1.2X108、0. 3-0. 6X IO8, 0. 2-0. 4Χ108、0· 3-0. 4Χ108、1· 2-1. 6Χ IO8 个。该菌剂在沼气池试验8次，平均提高池温3-5°C，菌数增加60 %，产沼汽增加60 %， 效果显著。
权利要求
1.一种耐低温沼气菌剂及其制备方法，其特征在于在低温气候条件下，对沼气池微生 物菌群进行选育复配而成的。
2.根据权利要求1所述的耐低温沼气菌剂，其特征在于，是在低温环境中从沼液、沼渣 中分离出醋酸菌、乳酸菌、丁酸菌、酵母菌、甲烷菌。
3.根据权利要求1所述的耐低温沼气菌剂，其特征在于，醋酸菌、乳酸菌、丁酸菌、酵母 菌、甲烷菌，在培养温度低于15°C以下选育。
4.根据权利要求1所述的耐低温沼气菌剂，其特征在于，选育醋酸菌、乳酸菌、丁酸 菌、酵母菌、甲烷菌的培养基为1 2%庶糖、5-10%豆饼粉、3-4%蛋白胨、0. 5-1%牛肉膏、 0. 5-1% mgS04 · 7Η20、0· 03-0. 07% (NH4)2SO4^O. 01-0. 03ΚΗ2Ρ04 和 0. 01-0. 05% Na2HPO40
5.根据权利要求1所述的耐低温沼气菌剂，其特征在于，由以下菌种及其百分配重比 组成，醋酸菌20-30 %、乳酸菌20-30 %、丁酸菌10-20 %、酵母菌5_10 %、甲烷菌20-30 %。
6.根据权利要求1所述的耐低温沼气菌剂，其特征在于，以每克固体培养基中， 醋酸菌、乳酸菌、丁酸菌、酵母菌、甲烷菌，含菌数达到0. 5-1.2X108、0. 3-0. 6X IO8, 0. 2-0. 4Χ108、0· 3-0. 4Χ108、1· 2-1. 6Χ IO8 个。
全文摘要
本发明公开了一种耐低温沼气菌剂及其制备方法，它有效地解决了冬季沼气池产生气量少的缺点。所述的耐低温沼气菌剂是从北方冬季的沼气池取样选育出醋酸菌、乳酸菌、丁酸菌、酵母菌、甲烷菌五种菌株，并经低温选育，纯种固态培养而成，并按适合沼气生产的微生物菌群数量，按比例混合而成。该菌剂经选育后，制备方法简单成本低，它的使用能有效地提高北方地区冬季沼气池的利用率，极大地提高农村沼气使用的普及力度，提高农村人口生活质量，并改善农村环境。
文档编号C12P5/02GK102071158SQ20091022357
公开日2011年5月25日 申请日期2009年11月24日 优先权日2009年11月24日
发明者刘和仁, 段开红, 王君喜 申请人:刘和仁, 段开红, 王君喜