一种核酸快速检测方法及其装置的制作方法

专利名称：：一种核酸快速检测方法及其装置的制作方法
技术领域：
：本发明属于医学检测领域，涉及一种核酸快速检测方法及其装置。
背景技术：
：近年来，多种烈性传染病诸如SARS，禽流感H5m，猪链球菌，甲型流感Hmi等在全世界范围内广泛流传，给人类造成巨大经济损失的同时严重威胁人类的生命健康。病原微生物检测方法主要有显微镜形态观察，免疫法检测，核酸检测等等。核酸检测较其他检测病原微生物检测法具有灵敏度高，特异性好，窗口期短，检测时间短等优点。核酸扩增技术已经广泛用于病原微生物的临床检测。目前病原微生物核酸检测方法主要有聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction，PCR)，滚环扩增技术(RollingCircleAmplification,RCA)，环介导等温扩增(Loop-mediatedisothermalAmplification,LAMP)等。现有的核酸检测技术中，PCR技术最为普遍，其中又以实时荧光PCR(Real-timePCR)技术最为常用。这种技术具有灵敏度高，特异性好等特点。但是需要比较昂贵的实时荧光PCR仪，其价格均在几十万元。这种高昂的成本限制了其在临床上的广泛应用。RCA技术和LAMP技术最大的特点就是等温扩增，因此不需要价格比较高的PCR仪，仅仅需要恒温水浴等恒温加热器即可进行反应。作为核酸扩增技术的一种，LAMP技术与传统PCR技术相比最大的优势就是灵敏度高，恒温反应不需要价格昂贵的PCR仪。目前对RCA产物和LAMP产物的检测大都是在反应结束后开管进行检测，在增加操作过程的同时，极易引起扩增产物的滞后污染。虽然核酸检测病原微生物技术已经广泛应用于临床，但是以上提到的一些缺点仍然难以根本解决。
发明内容本发明的目的是针对上述问题提供一种避免扩增产物滞后污染、灵敏度高、成本低的核酸快速检测方法。本发明另一个目的是提供上述检测方法所用的检测仪。发明人在研究工作中发现1.LAMP技术能够扩增病原微生物核酸样本，包括DNA和RNA，并且灵敏度很高；2.SYBRGreen1染料能够嵌入核酸双链结构内部，并且在激发光照射下产生荧光。基于这些，发明人提出如下技术方案一种核酸快速检测方法，该方法是在含有至少一个密封层的温控反应管内利用LAMP技术对病原微生物核酸进行扩增反应，扩增反应结束后不需要开管，升高反应管温度，使封有荧光染料的密封层溶解，释放荧光染料进行荧光检测。所述的检测方法，其中温控反应管含有二个密封层，核酸扩增反应所需试剂全部或部分封于在较低温度熔化的密封层中，荧光染料封于在较高温度熔化的密封层中，通过控制温度的变化实现二个密封层依次溶解，控制反应进程，进行核酸扩增反应及荧光可视化检测。所述的检测方法，其中荧光染料为SYBRGreen1染料。所述的检测方法，其中扩增反应和荧光检测直接在仪器内进行。所述的检测方法，其中荧光检测是荧光染料在激发光照射下产生荧光后采用肉眼观察或者采用照相或光电传感器进行图像或数据采集分析。上述检测方法采用的检测仪，该检测仪包括分别与中央控制电路相连的反应管震荡装置、温度调节装置、时间调节装置和荧光显色观测装置；还可以包括与中央控制电路相连的反应管升降装置；还可以包括温控反应管，该温控反应管含有至少一个在适当温度下熔化的密封层。密封层可以根据需要控制的反应进程的特点预先封入该反应进程所需的部分或全部试剂。所述的检测仪，其中反应管震荡装置包括反应管支架、支架震荡电机、支架震荡电机与反应管支架相连；反应管升降装置包括反应管支架升降驱动电机、反应管支架升降杆，反应管支架升降驱动电机与反应管支架升降杆相连，反应管支架升降杆与反应管支架相连。所述的检测仪，其中温度调节装置包括温度控制模块、加热装置、测温装置；加热装置和测温装置分别与温度控制模块相连，温度控制模块与中央控制电路相连或直接构成中央控制电路的一部分，测温装置的温度传感器位于反应管下部附近或者位于加热装置附近；温度调节装置还可以包括与温度控制模块相连的散热装置。所述的检测仪，其中荧光显色观测装置包括荧光激发光源、荧光显色观察或采集装置；荧光显色观察装置为带或不带滤镜的观察窗；荧光显色采集装置为图像采集装置或光电转换数据采集分析装置；荧光激发光源发光照射反应管中的反应液，荧光显色观察或采集装置可观察或采集反应管中反应液发出的荧光信号。所述的检测仪，其中中央控制电路还包括控制信息输入或程控反应类型选择装置。为节约仪器成本，荧光显色观测装置优选采用观察窗方式，温度、时间、震动等信息调节优选采用在中央控制电路预先设定程控反应类型的方式。激发光源波长及滤镜过滤波长根据该荧光染料激发光波长及发射荧光波长确定。本发明涉及SYBRGreenI荧光染料，其主要特征是在497nm被激发，发射荧光波长为520nm。本发明采用的温控反应管至少含有一个密封层，将需要控制的反应进程所需的反应试剂封于密封层中，通过控制温度的变化实现密封材料的熔化，释放被密封的反应试剂，从而实现反应进程的控制。当密封层为多层时，根据不同反应进程的先后顺序将密封层设置于该密封层熔化(实际上是构成该密封层的密封材料熔化，为表述方便而采用“密封层熔化”的描述，下同)后该密封层中的反应试剂能与前一反应进程反应体系(通常是反应液)相接触的位置，各密封层的熔化温度小于等于对应的反应进程的反应温度且高于在先反应进程的反应温度并低于与在后反应进程对应的密封层的熔化温度(最先的反应进程若采用密封层时因不存在在先反应进程而不考虑该密封层的熔化温度是否高于在先反应进程的反应温度，同理，最后熔化的密封层由于不存在在后反应进程对应的密封层而不考虑低于该密封层的熔化温度是否低于在后反应进程对应的密封层的熔化温度)。各密封层熔化顺序的设置按照反应温度从低至高的顺序。所述的反应管，根据需要采用密封层控制的不同反应进程的先后顺序依次设置密封层，最外层的密封层(即最接近反应管管口的密封层)对应在先进行的反应进程。所述的反应管，该反应管温度调节按照所需控制的反应进程分段调节，高于等于相应反应进程的反应温度且低于在后反应进程对应的密封层的熔化温度。优选将反应管温度调节至相应反应进程所需的反应温度，与相应反应进程对应的密封层因熔点小于等于该反应温度而熔化，将预先封于该密封层内的试剂释放，使相应的反应进程能够进行。所述的反应管，其中反应管温度调节应按照反应进程的先后顺序从低温向高温调节。所述的反应管，其中不同的密封层采用不同熔点的物质作为密封材料。不同熔点的物质为不同熔点的石蜡或不同熔点的的低熔点聚四氟乙烯。所述的反应管，根据所需反应阶段的数目设计密封层的数量；不同温度的反应进程其相应密封层的熔点不同。所述的反应管，其中密封层中的反应试剂混合在密封材料中或由密封材料隔开。制备温控反应管时首先在管内加入相应反应阶段所需试剂，然后在所需试剂表面加入选择适当的石蜡(以石蜡为例，亦可采用其他密封层材料)，加热至石蜡融化，冷却至室温后实际即被石蜡密封。根据整个反应中需要采用密封层控制的不同进程的数量和反应温度设计反应管中密封层的数量和次序(或位置)，根据不同反应进程的温度选择熔点合适的石蜡作为密封层材料。由于本发明主要涉及等温扩增的LAMP技术和荧光检测反应，因此，实际使用的温控反应管只需要设置一或二个密封层即可。本发明的优点本发明提供的快速检测仪器能够将核酸恒温扩增技术和荧光技术结合起来，在反应结束后利用荧光检测核酸扩增产物。本仪器的最大优点是反应试剂配制完成后，放入仪器进行反应，核酸扩增反应结束后自动进行荧光检测，不需要将反应管取出，亦不需打开反应管，可以在减少操作步骤的同时最大可能的避免反应产物的滞后污染。本发明既降低了反应仪器的成本，又能实现核酸扩增反应和检测反应偶联进行，克服了核酸扩增产物的滞后污染，同时具有结构简单，便于携带，成本较低，操作方便，反应快速的特点，适合作为临床或野外现场快速检测仪器。本发明同时还提供的能够通过温度改变控制反应进程的反应管，通过改变温度，释放预先保存于反应管内的试剂，从而实现控制反应起始、终止和检测等进程。这种技术有效避免了反应开始前频繁打开反应管可能造成的模板污染以及反应结束后打开反应管造成的滞后污染，在一定程度上还可以控制反应起始时间，提高反应的特异性。这种反应管可以广泛应用于生物医学领域的基础研究以及生物分析、病原微生物检测、疾病诊断的领域。图1检测仪结构图。其中1、电源及中央控制电路；2、时间调节装置(定时模块)；3、温度控制模块；4、加热装置；5、支架震荡装置；6、反应管支架；7、观测窗口；8、样品放入口；9、温控反应管；10、激发光源；17、反应管支架升降驱动电机；18、反应管支架升降杆；19、散热装置，20、测温装置。图2检测仪模块示意图。其中1、电源及控制电路；2、定时模块；3、温度控制模块；4、加热装置；5、支架震荡装置；6、反应管支架；10、激发光源；19、散热装置，20、测温装置。图3检测仪外观示意图。其中7、观测窗口；8、样品放入口。图4激发光源示意图。其中9、温控反应管；10、激发光源。图5升降与振荡装置示意图。其中4、加热装置；5、震荡电机；6、反应管支架；9、温控反应管；10、激发光源；17、反应管支架升降驱动电机；18、反应管支架升降杆。图6温控反应管示意图。其中11、密封材料一；12、密封材料二；13、试剂一；14、试剂二；15、管身；16、管盖。密封材料一与试剂一构成密封层一，密封材料二与试剂二构成密封层二。图7本发明温控反应管不同温度密封层示意图。具体实施例方式以下通过实施例对本发明作进一步的阐述。实施例1检测仪构造及工作过程1、构造结合图15，该检测仪包括分别与中央控制电路1相连的反应管震荡装置、温度调节装置、时间调节装置2(定时模块2)和荧光显色观测装置；还可以包括与中央控制电路1相连的反应管升降装置；(还可以包括温控反应管9，温控反应管详情参见实施例2)。其中反应管震荡装置包括反应管支架6、支架震荡电机(如凸轮电机)5，支架震荡电机与反应管支架相连；反应管升降装置包括反应管支架升降驱动电机17、反应管支架升降杆18，反应管支架升降驱动电机与反应管支架升降杆相连，反应管支架升降杆与反应管支架相连。反应管震荡装置可在反应进程中震动反应管，混勻反应体系和促进反应进程的完成；反应管支架升降装置可方便取放反应管，或者可将反应管接近(置于)或远离加热装置。温度调节装置包括温度控制模块3、加热装置4、测温装置20；加热装置和测温装置分别与温度控制模块相连，温度控制模块与中央控制电路相连或直接构成中央控制电路的一部分，测温装置的温度传感器位于反应管下部附近或者位于加热装置附近(当反应管接近或置于加热装置上，加热装置的温度与反应管装有反应液的部分的温度基本一致时)；加热装置可位于反应管支架下方，或者安置在仪器内其他部位采用送风等方法将加热后的热空气送至反应管所在区域(当反应管装液量较多时，可避免对反应管底部直接加热造成局部温度过高，使反应液温度保持均勻)；温度调节装置还可以包括与温度控制模块相连的散热装置19。荧光显色观测装置包括荧光激发光源10、荧光显色观察或采集装置；荧光显色观察装置为带或不带滤镜的观察窗7；荧光显色采集装置为图像采集装置或光电转换数据采集分析装置；荧光激发光源10发光照射反应管9中的反应液，荧光显色观察或采集装置可观察或采集反应管中反应液发出的荧光信号。为节约仪器成本，优选采用观察窗方式。中央控制电路还可以包括控制信息输入装置。时间设置及温度设置的装置也可以整合到控制信息输入装置中，其他如反应过程中是否需要震动反应管，反应管震动时间和频率，反应管支架是否需要升降等信息的输入可以从控制信息输入装置中输入中央控制电路，或者直接事先写入中央控制电路的程序中。控制反应进程的时间调节、温度调节、震动调节等信息均可事先写入中央控制电路的程序中，相应程控反应的类型可在控制信息输入装置上选择。中央控制电路接受控制信息和反馈信息后，调节相应装置(加热装置、散热装置、反应管支架升降或震动装置、激发光源等)的工作。2、工作过程1)、(接通电源)通过样品放入口8将装有反应体系的温控反应管9放入仪器内，置于反应管支架6上(若设有反应管支架升降装置可方便取放反应管)。2)、通过定时模块2设定相应反应进程的反应时间，通过温度控制模块3设定相应反应进程的反应温度，相关控制信息经中央控制电路1调控(或者选择预先写入中央控制电路的程序反应类型)。完成设置后加热装置4开始工作，加热至设定温度，经测温装置20的温度传感器反馈，停止加热(若温度过高可启动散热装置19)，核酸扩增反应开始进行(根据反应需要确定是否震荡反应管)。3)、核酸扩增反应结束后，通过设定温度控制模块3将温度设定至密封层融化所需温度(或由中央控制电路预先设定的程控反应类型调节)，加热装置工作，升高至设定温度，使反应管中封有荧光染料的密封层融化。通过震荡装置5将荧光染料与反应产物混合均勻。4)、启动激发光源10照射反应管，通过观测窗口7观测荧光产生情况或者采用照相或光电传感器等对反应管中荧光信息进行采集分析。实施例2温控反应管石蜡供应厂商南阳石蜡精细化工厂。石蜡规格及特性<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结合图7，根据不同反应进程的先后顺序将密封层设置于该密封层熔化后该密封层中的反应试剂能与前一反应进程反应体系(通常为反应液，对于首次反应，由于不存在前一反应进程，故反应体系通常为待检物以及首次反应所需的不包含被密封的反应试剂的其他反应试剂)相接触的位置，各密封层的熔化温度小于等于对应的反应进程的反应温度且高于在先反应进程的反应温度(对应首次反应的密封层不考虑此条件，如本例中30°C密封层)并低于与在后反应进程对应的密封层的熔化温度(对应最后熔化的密封层不考虑此条件，如本例中80°C密封层)。各密封层中的反应试剂分别混合在构成各反应进程对应的密封层的密封材料中或由该密封材料隔开。进行反应时，反应管温度调节按照所需控制的反应进程分段调节，高于等于相应反应进程的反应温度且低于在后反应进程对应的密封层的熔化温度(为避免反应管温度高于相应反应进程的反应温度时会对某些反应进程造成不利影响，本例中各阶段反应管温度调节至相应反应进程所需的反应温度即可)。假设图7中各反应进程的反应温度依次为300C、40°C、50°C、60°C、70°C,80构成各反应进程对应的密封层的密封材料(如石蜡)的熔化温度分别为2830°C、3840°C、4850°C、58606870°C、7880°C，起始反应温度为30°C。加入待检物，反应管温度升至30°C时，30°C密封层熔化，释放第一阶段所需的反应试剂，第一阶段反应进行，熔化的石蜡浮于反应液上部；反应适当时间后，再将反应管温度升至40°C，4(TC密封层熔化，释放第二阶段所需的反应试剂，第二阶段反应进行，熔化的石蜡浮于反应液上部；反应适当时间后，再将反应管温度升至50°C，50°C密封层熔化，释放第三段阶段所需的反应试剂，第三阶段反应进行，熔化的石蜡浮于反应液上部；以此类推，在60°C进行第四阶段反应，在80°C进行第五阶段反应。反应结束后，降低温度(或冷却)，浮于反应液上部的全部或部分石蜡凝固将反应液密封，避免滞后污染。实施例3本实施例针对猪流感Hmi的HA基因设计了六条引物，LAMP扩增体系如下表LHmiLAMP引物<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>Y:t/u或c;R:g或a。25μLLAMP反应体系<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>LAMP反应程序63°C/1.5h—80°C/5min温控反应管设有一个事先采用石蜡(如90#)密封有荧光染料(如SYBRGreenI)的密封层，反应管中加入核酸扩增体系以及待测样品后，将反应管放入本发明设计的检测仪中，按LAMP反应程序将反应体系加热至反应所需温度反应相应时间，反应结束后，不需要开管，升高温度使密封层熔化，释放荧光染料，震荡，使核酸扩增产物与荧光染料充分混合，作用适当时间，激发光源照射反应管，从观察窗即可观测反应管荧光产生情况，用于分析待测样本是否含有病原微生物，如产生荧光则待测样品含有检测病原微生物。该方法可直接在仪器中进行核酸扩增反应和荧光检测，无需将反应管取出。实施例4采用温控反应管实现反应终止本方案通过温度控制密封层内反应终止剂的释放，实现温度控制反应终止，主要针对RCA、LAMP等恒温反应的终止。本方案可以使用简单的恒温装置，实现对反应的控制，适合在病原微生物、疾病诊断等快速检验条件下使用。在反应管底加入反应终止剂如乙二铵四乙酸钠(EDTA)溶液或其他金属络合剂以及蛋白变性剂。在其上表面加入10μ1石蜡(_。将反应管加热到石蜡熔点使石蜡融化，将反应管取出冷却，使石蜡重新凝固形成密封层。在进行RCA或LAMP反应时，在石蜡密封层上加入反应体系。恒温反应(60°C)结束后，将反应管加热至石蜡熔点，由于石蜡密度小于水，故石蜡融化后会漂浮于液体表面上层，反应体系则会与石蜡密封层下的反应终止剂混合，使反应终止。将反应管取出冷却后，石蜡会再次凝固，使液体表面与空气隔绝，避免了反应产物可能造成的滞后污染。实施例5采用温控反应管实现产物检测本方案通过温度控制密封层内产物指示剂的释放，实现扩增反应和产物指示在同一管内进行。本方案主要针对RCA、LAMP等等温扩增反应，可以实现病原微生物现场快速、简便、可视化检测。在反应管底部加入产物指示剂如SYBGreen,GoldView等。在其上表面加入10μ1石蜡(64#)。将反应管加热至石蜡熔点，使石蜡融化。取出反应管冷却至室温，使石蜡重新凝固形成密封层。在进行RCA或LAMP反应时，在石蜡密封层上加入反应体系。恒温反应(60°C)结束后，将反应管加热至石蜡熔点，由于石蜡密度小于水，故石蜡融化后会漂浮于液体表面上层，反应体系则会与产物指示剂混合，产生肉眼可观测到的变化，实现对扩增产物的可视化检测。本方案设计的检测方法一方面避免了在反应体系内加入产物指示剂造成的对扩增反应的抑制，另一方面实现了在同一反应管内实现反应和监测，不需要打开反应管，避免了产物的滞后污染。实施例6采用温控反应管实现普通耐热聚合酶热启动及显色反应结合图6，本方案通过温度控制密封层二内反应体系中关键成分的释放，实现在低温下非特异扩增反应被抑制，同时通过更高的温度控制密封层一内的显色试剂释放，即在单管内实现普通耐热聚合酶的热启动及显色反应。本方案主要针对PCR反应，可以实现使用价格低廉的普通耐热聚合酶进行热启动PCR并且对PCR产物进行显色检测。在反应管15的底部加入产物指示剂如SYBGreen,GoldView等(即试剂一)。在其上表面加入10μ1石蜡一(95#)(即密封材料一)。将反应管加热至石蜡一熔点，使石蜡一融化。取出反应管冷却至室温，使石蜡一重新凝固形成密封层一。在密封层一表面加入PCR反应的关键成分，如耐热聚合酶、镁离子、dNTP等的一种或几种(即试剂二)。在其上表面加入10μ1石蜡二(85#)(即密封材料二)，其温度低于PCR变性温度且低于密封层一的石蜡一的熔点。将反应管加热至石蜡二的熔点，使石蜡二融化。取出反应管冷却至室温，使石蜡二重新凝固形成密封层二。在进行PCR反应前，在石蜡密封层二上加入除密封层内关键成分外反应体系，盖上管盖16。在进行反应时，首先加热到石蜡二的熔点之上并恒温5分钟，使石蜡二充分融化。由于石蜡密度小于水，故石蜡二融化后会漂浮于液体表面上层，反应体系将会与石蜡二之下的反应关键成分(即试剂二)混合，反应管温度符合扩增反应所需温度，从而启动扩增反应。扩增反应结束后，将反应管加热至石蜡一的熔点，由于石蜡密度小于水，故石蜡一融化后会漂浮于液体表面上层，反应体系则会与产物指示剂(即试剂一)混合，反应管温度符合产物指示剂所需温度，产生肉眼可观测到的变化，实现对扩增产物的可视化检测。本方案设计能够利用普通耐热聚合酶进行热启动反应，抑制了非特异扩增反应，提高了PCR反应的特异性的同时能够进行在同一管内对扩增产物进行显色反应。(二个密封层的反应管也可以针对RCA、LAMP等等温扩增反应，核酸扩增反应所需试剂全部或部分封于在密封层二(较低温度熔化)中，荧光染料封于密封层一(较高温度熔化)中，通过控制温度的变化实现二个密封层依次溶解，控制反应进程，进行核酸扩增反应及荧光可视化检测。)序列表<110>华东医学生物技术研究所<120>一种核酸快速检测方法及其装置<160>6<210>1<211>19<212>DNA<213>人工序列<220><223>HmiLAMP引物F3<400>1ggtgctataaacaccagcc19<210>2<211>19<212>DNA<213>人工序列<220><223>HmiLAMP引物B3<400>2tgatggtgataaccgtacc19<210>3<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223>HmiLAMP引物LF<400>3ggacattytccaattgtg18<210>4<211>19<212>DNA<213>人工序列<220><223>HmiLAMP引物LB<400>4ttgccggtttcattgaagg19<210>5<211>56<212>DNA<213>人工序列<220><223>HmiLAMP引物FIP<400>5ctgtrgccagtctcaattttgtgttttctgaagtyccatttcagaatatacatccr56<210>6<211>54<212>DNA<213>人工序列<220><223>H1N1LAMP引物BIP<400>6atcccgtctattcaatctagaggcttttctgaagatccatctaccatccctgtc5权利要求一种核酸快速检测方法，其特征是在含有至少一个密封层的温控反应管内利用LAMP技术对病原微生物核酸进行扩增反应，扩增反应结束后不需要开管，升高反应管温度，使封有荧光染料的密封层溶解，释放荧光染料进行荧光检测。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于温控反应管含有二个密封层，核酸扩增反应所需试剂全部或部分封于在较低温度熔化的密封层中，荧光染料封于在较高温度熔化的密封层中，通过控制温度的变化实现二个密封层依次溶解，控制反应进程，进行核酸扩增反应及荧光可视化检测。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于荧光染料为SYBRGreenl染料。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于扩增反应和荧光检测直接在仪器内进行。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于荧光检测是荧光染料在激发光照射下产生荧光后采用肉眼观察或者采用照相或光电传感器进行图像或数据采集分析。6.权利要求1所述检测方法采用的检测仪，其特征在于该检测仪包括分别与中央控制电路相连的反应管震荡装置、温度调节装置、时间调节装置和荧光显色观测装置；还可以包括与中央控制电路相连的反应管升降装置；还可以包括温控反应管，该温控反应管含有至少一个在适当温度下熔化的密封层。7.根据权利要求6所述的检测仪，其特征在于反应管震荡装置包括反应管支架、支架震荡电机，支架震荡电机与反应管支架相连；反应管升降装置包括反应管支架升降驱动电机、反应管支架升降杆，反应管支架升降驱动电机与反应管支架升降杆相连，反应管支架升降杆与反应管支架相连。8.根据权利要求6所述的检测仪，其特征在于温度调节装置包括温度控制模块、加热装置、测温装置；加热装置和测温装置分别与温度控制模块相连，温度控制模块与中央控制电路相连或直接构成中央控制电路的一部分，测温装置的温度传感器位于反应管下部附近或者位于加热装置附近；温度调节装置还可以包括与温度控制模块相连的散热装置。9.根据权利要求6所述的检测仪，其特征在于荧光显色观测装置包括荧光激发光源、荧光显色观察或采集装置；荧光显色观察装置为带或不带滤镜的观察窗；荧光显色采集装置为图像采集装置或光电转换数据采集分析装置；荧光激发光源发光照射反应管中的反应液，荧光显色观察或采集装置可观察或采集反应管中反应液发出的荧光信号。10.根据权利要求6所述的检测仪，其特征在于中央控制电路还包括控制信息输入或程控反应类型选择装置。全文摘要本发明属于医学检测领域，公开了一种核酸快速检测方法及其装置。该方法是在含有至少一个密封层的温控反应管内利用LAMP技术对病原微生物核酸进行扩增反应，扩增反应结束后不需要开管，升高反应管温度，使封有荧光染料的密封层溶解，释放荧光染料进行荧光检测。该方法可直接在仪器中进行核酸扩增反应和荧光检测，无需将反应管取出。该装置结构简单，成本较低，操作简便，可作为病原微生物核酸现场快速检测仪器。文档编号C12Q1/70GK101824486SQ20091026417公开日2010年9月8日申请日期2009年12月30日优先权日2009年12月30日发明者周国华,李传军,梁超申请人:华东医学生物技术研究所