专利名称：细胞及细胞爬片集成制备盒的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种体外细胞培养及相关研究所需的实验用具，尤其是一种高效 率、高质量、操作简便的细胞及细胞爬片集成制备盒。
背景技术：
用体外培养的细胞作为研究对象可以排除体内实验的诸多干扰因素的影响，应用 各种处理因素对培养细胞进行处理也变得容易，同时，采用各种技术和方法来对细胞 进行观察和分析也更方便。因此，细胞培养技术是生物学、基础医学等生命科学领域 研究的重要技术之一。随着研究的深入，细胞研究方法及细胞检测指标日渐丰富，对 体外培养制备的细胞及细胞爬片的需求逐渐增大；同时，为了保证实验结果的客观性， 常常需要在相同的条件下制备细胞及细胞爬片，使细胞性状均一、同一性好，实验结 果之间更具有可比性。但是，目前此领域采用的方法存在不同程度的缺陷。
通常的方法是把多个细胞爬片直接置于培养皿底，细胞培养结束后，收集细胞爬 片及培养皿底生长的细胞，用于不同的研究方法和不同的指标检测。但是，这种方法
有以下缺点①细胞爬片容易在光滑的培养皿底滑动和重叠，使细胞在细胞爬片上的
生长条件不能统一；②为了减少细胞爬片之间的重叠，细胞爬片需要分散放置，同时， 细胞爬片占据了一部分培养皿底，因此，制备的细胞及细胞爬片都不多，难以满足实 验需要；③由于细胞爬片直接和培养皿底接触，细胞可以粘附在细胞爬片的背面，导 致细胞在细胞爬片双面生长，影响观察和后续实验处理；④细胞爬片直接置于培养皿 底导致细胞爬片与底部严密结合，很难分开，细胞爬片夹取非常困难。
也有的方法是将培养皿底制出多个有序的槽，或在培养皿中放置具有多个有序槽 的载片板(CN1928063A)，这些槽可以生长细胞或者容纳细胞爬片。这样，可以同时 制备细胞及细胞爬片，部分解决了细胞爬片滑动及重叠的问题。但是，也存在以下不 足①所制备的细胞及细胞爬片数量也有限；②细胞爬片由于背面和培养皿底或载片 板直接接触，细胞同样会双面生长；③细胞爬片又小又轻，加培养液时可能会被冲出 所在的槽或漂浮起来，也有可能产生爬片重叠及细胞生长不均的问题；④细胞爬片直 接置于培养皿底或载片板上也同样导致细胞爬片夹取困难。因此，这种方法的好处不多，实际意义并不太大。
另外，用细胞爬片进行实验时，由于要对每一张细胞爬片单独处理，比较浪费实 验材料和试剂；细胞爬片尺寸一般较小，取放、转移、观察等须精神集中，操作小心， 防止掉落、夹碎、颠倒正反面等，实验操作过程复杂，难度较大，耗时费力；制备的 细胞爬片储存时，为防止重叠、翻转、刮伤刮花，常需专门的存放装置，也增大了实 验成本。因此，这些问题也需要解决。
实用新型内容
本实用新型的目的是针对上述技术中的问题而提供一种可同时制备大量性质均 一、高质量的细胞及细胞爬片集成制备盒，以使实验效率更高，效果更好，材料和试 剂更为节约，操作也更简便，显著降低操作人员的劳动强度。
本新型的目的是这样实现的 一种细胞及细胞爬片集成制备盒，包括培养盒，细 胞爬片，还具有用作放置于所述培养盒内的爬片支架方框形的支架底座的底部设置 有支脚，支架底座上等间距、平行地固定有多根爬片固定条，该固定条的"工"字形 截面的縮窄部分形成爬片放置槽，相邻两固定条上的爬片放置槽为放置细胞爬片的部 位。
与现有技术相比，本新型的有益效果是
1、 可以同时大量制备性质均一、质量可靠的不同处理的细胞及细胞爬片。同一 个制备盒中制备的细胞和细胞爬片由于培养、处理过程集成在一起同时进行，所处环 境及操作过程等各种影响因素一致，因此性质均一，各种研究方法及指标检测结果具 有更好的可比性；
2、 细胞爬片由于在培养中处于悬空状态，细胞无法粘附于其背面(下面)而生 长，因此，只有其正面(上面)可以生长细胞，解决了以往的细胞双面生长的问题。 同时，也解决了以往细胞爬片因与培养皿底或培养皿底的载片板严密结合难以分开， 细胞爬片夹取困难的问题；
3、 由于培养过程中，细胞爬片被有序地排放于爬片支架上，消除了以往细胞爬 片容易在操作中相互重叠，细胞生长不均匀，性质差异大的问题；
4、 细胞爬片的培养、固定、储存都一直在爬片支架上，减少了细胞爬片取放、 移动等操作，减少了以往细胞爬片操作繁琐、容易重叠、刮伤、弄碎、混淆正反面、 浪费实验材料和试剂等弊病；
45、 多种不同处理的细胞爬片可一起粘附在普通载玻片或专门的爬片实验板上， 集成为细胞爬片阵列，同时进行染色、杂交等处理。与以往的单片处理相比，统一了 操作过程，使每张细胞爬片所受到的处理更为一致，实验结果更为客观；同时，也简 化了操作，节约了抗体、染色剂等试剂及相关材料的消耗，经济高效；
6、 制备盒构造简单，功能齐全，制作工艺成熟，耗材少，成本低；制备盒同时 也是细胞爬片的储存盒，不再需要专门的储存盒；制备盒可以反复使用，节约资源。
图1是本新型细胞及细胞爬片集成制备盒的剖面图； 图2是图1的俯视图(剖切盒盖)； 图3是图1所示爬片支架的立体图。
具体实施方式
以下结合附图对本实用新型作进一步的详细说明。
图1图2示出，本新型包括培养盒，细胞爬片4，还具有用作放置于所述培养盒 内的爬片支架方框形的支架底座2的底部设置有支脚2a，支架底座2上等间距、平 行地排列有多根爬片固定条l，该固定条的"工"字形截面的縮窄部分形成的凹槽为 爬片放置槽3，相邻两固定条上的爬片放置槽3为放置细胞爬片4的部位。
细胞爬片可为正方形或圆形等形状，厚0. 1 0. 2mm。细胞爬片大小可按实验所需 制成各种尺寸规格，边长或直径为4 8mm等各种规格。所述爬片支架为多个截面为
"工"字形的爬片固定条并列在有四只脚的方框形的支架底座上。爬片固定条"工" 字形上下部分(上、下部分都为一板条)各宽2ram，厚1面，中间縮窄部分宽lmm，厚 0.2誦。爬片固定条縮窄部分形成的凹槽为爬片放置槽，槽深0.5mm，宽0.2mm(深指
"工"字形的X向，宽指Y向)，两个爬片固定条相对的爬片放置槽为水平放置细胞 爬片的部位，槽间的宽度以刚好能放入细胞爬片为宜。细胞爬片间留lmm空隙，方便 细胞爬片的取放，同时，也使细胞爬片上下方的培养液能流通，保证培养液的性质均 一。爬片放置槽为磨砂表面，使细胞爬片放置进去后位置固定，防止滑动。爬片固定 条"工"字形截面上部分板条两端各有30-60度内向斜角8，可方便细胞爬片的取放。 方框形支架底座高1 2mm，四只支脚位于底座的四个角上，高1 3mm。支架底座方 框可依据一次制备的细胞、细胞爬片的量制成边长4 10cm (高l 2mm，宽2 3mm) 等各种尺寸规格。爬片支架可用模具一次整体浇注而成。爬片支架放置在一个如普通培养皿一样的正方形或者圆形培养盒内，培养盒由边长4 10cm培养盒体和培养盒盖 组成，盒体与爬片支架相适应，正方形培养盒边长比所放置的细胞爬片支架边长大6 10mm，圆形培养盒以能够刚好放下爬片支架为宜，这样可以方便爬片支架的取放。盒 体的底厚l 2mm。培养盒盖的边长或直径比培养盒体的大6 10皿。圆形培养盒可用 现有的培养皿代替，这样可充分利用现有资源。细胞爬片、爬片支架及培养盒由耐高 温、耐酸碱、耐有机溶剂的透明材料制成。
上述方案中，所述的细胞爬片制备完成后，可置于普通载玻片或一种爬片实验板 上进行HE染色、免疫细胞化学(immunocytochemistry， ICC)、原位杂交(In situ hybridization, ISH)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH) 等各种实验处理。爬片实验板按实验所需制成长6 9cm，宽2 4cm各种规格，正面 (上面) 一端2cm宽的部分制成用于标记的磨砂面，其余部分制成与细胞爬片相适应 的多个有序排列的细胞爬片粘附槽。爬片粘附槽底平面处于或低于实验板平面，槽底 面处于或低于实验板平面，槽深与细胞爬片厚度相同，槽形状及大小与细胞爬片相同， 槽间隔0.2 0.3mm。此爬片实验板由耐高温、酸碱、有机溶剂的透明材料制成。
实施例1:
图1、 2所示，将细胞爬片4放置于爬片支架的爬片放置槽内，爬片支架放入相 适应的培养盒体6中，加入适量细胞悬液，盖上培养盒盖5，细胞由于重力作用，可 铺在细胞爬片4正面(上面)及培养盒底7上，然后贴壁生长。多个培养盒中的细胞 可施加不同的处理。培养结束后，将爬片支架从培养盒体6中取出，置于另外的正方 形培养盒中，加入没过细胞爬片支架的细胞固定液固定细胞爬片4上的细胞，细胞固 定结束后，弃去细胞固定液，将正方形培养盒做好标记，低温保存，供服染色、ICC、 ISH、 FISH等各种实验处理使用。原来的培养盒底7生长的细胞可按常规的方法消化 收集起来，进入核酸、蛋白质制备等实验流程，供各种相应的研究方法及指标检测实 验所用。
实施例2:
以ICC实验流程为例讲解一下细胞爬片4的具体的使用方法。如图4所示，在普 通载玻片或爬片实验板上滴加一小滴胶水(无色透明、黏着牢固、黏着时间短、耐酸 碱及有机溶剂等的腐蚀的胶水，如UV胶)，取实施例l制备的不同处理组的细胞爬片 4，正面(上面)朝上粘附到载玻片或爬片实验板上，滤纸吸去多余的胶水。细胞爬
6片4集成为阵列，按常规组织切片免疫组织化学染色(IHC)的方法流程对此细胞爬 片阵列整体地进行处理、封片，然后镜下观察、拍照，即可高质量、高通量、迅速简 便地完成大量不同处理的细胞爬片4的ICC实验。
权利要求1、一种细胞及细胞爬片集成制备盒，包括培养盒，细胞爬片(4)，其特征是，还具有用作放置于所述培养盒内的爬片支架方框形的支架底座(2)的底部设置有支脚(2a)，支架底座(2)上等间距、平行地排列有多根爬片固定条(1)，该固定条的“工”字形截面的缩窄部分形成爬片放置槽(3)，相邻两固定条上的爬片放置槽(3)为放置细胞爬片(4)的部位。
2、 根据权利要求1所述细胞及细胞爬片集成制备盒，其特征是所述爬片 固定条(1)"工"字形截面上部分板条两端各有30 60。内向斜角。
3、 根据权利要求2所述细胞及细胞爬片集成制备盒，其特征是所述爬片 固定条(1)上的爬片放置槽(3)深0.5mm，宽0. 2mra，为磨砂表面。
4、 根据权利要求3所述细胞及细胞爬片集成制备盒，其特征是所述支架 底座(2)的边长4 10cm，高1 2腿，宽2 3mm，支架底座四角上有四支脚(2a)， 支脚高1 3國。
5、 根据权利要求4所述细胞及细胞爬片集成制备盒，其特征是所述细胞 爬片(4)为正方形或圆形，厚O. 1 0.2mm，细胞爬片边长或直径为4 8mm。
6、 根据权利要求5所述细胞及细胞爬片集成制备盒，其特征是培养盒为 正方形或圆形，并由培养盒体(6)和培养盒盖(5)组成；正方形培养盒体边长 比爬片支架边长大6 10mm，圆形培养盒体刚好能放入爬片支架，培养盒体底部 厚度1 2mm，培养盒盖的边长或直径比培养盒体的大6 10mm。
7、 根据权利要求1 6任一权利要求所述细胞及细胞爬片集成制备盒，其特 征是所述培养盒、细胞爬片(4)以及爬片支架均由耐高温、耐酸碱、耐有机 溶剂的透明材料制成。
专利摘要一种细胞及细胞爬片集成制备盒，包括培养盒，细胞爬片，还具有用作放置于所述培养盒内的爬片支架方框形的支架底座的底部设置有支脚，支架底座上等间距、平行地排列有多根爬片固定条，该固定条的“工”字形截面的缩窄部分形成爬片放置槽，相邻两固定条上的爬片放置槽为放置细胞爬片的部位。它能使实验效率高、效果更好、材料和试剂更节约、操作简便、显著降低操作人员的劳动强度。
文档编号C12M3/04GK201424477SQ200920080719
公开日2010年3月17日 申请日期2009年5月8日 优先权日2009年5月8日
发明者洪 李, 烨 杨, 毛樱逾, 波 罗, 郑小莉 申请人:泸州医学院