专利名称：：一种肠内营养制剂及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及食品生产领域，具体涉及一种专用于胃肠功能障碍病人的肠内营养制剂及其制备方法与应用。
背景技术：
：胃肠道是营养物质消化吸收的场所，胃肠道的运动、消化和吸收功能受损，会造成人体的营养不良，又进一步损害消化、吸收功能。在胃肠道疾病的治疗中，除了针对病因治疗外，如何补充营养以适应胃肠道功能及促进其恢复是治疗的重要部分。科学研究和医疗实践表明，多种原发性胃肠道疾病，采用肠内营养对治疗有利，原因在于肠内营养时的营养素齐全，要素肠内营养不需消化及非要素肠内营养易消化，通过较短的或粘膜面积较小的肠道即可吸收，能改变肠道菌丛、无渣及无乳糖以及对肠道与胰外分泌剌激较轻等，故临床上首选肠内营养。目前，市场上已出现了"安素"、"能全力"、"瑞素"、"百普素"、"力衡全"系列等产品。上市产品存在的突出问题在于其原材料主要来源于陆地动植物提取物，且大多产品采用的氮源是水解植物蛋白及其衍生物，动物蛋白相对较少，蛋白质的来源有的是单一蛋白，有的是蛋白质、多肽和氨基酸的混合物。研究表明，对于胃肠道具有一定功能的临床病人的营养支持，应当尽量采用含有部分整蛋白的营养制剂，便于病人在恢复营养的过程中保持胃肠道功能；同时，由于人体蛋白质类营养成分诸多是在二肽或者三肽等肽的形式被吸收，含有多肽或小肽的肠内营养制剂具有更好的吸收效率。因而，采用整蛋白类、肽类和氨基酸类三种不同形式的海洋生物氮源作为蛋白源，能达到更好的临床预期效果。由于其特殊的生活环境，牡蛎、军曹鱼、海水螺旋藻等海洋生物中蕴藏着大量功能特异、结构新颖的生理活性物质，包括蛋白质、功能肽、牛磺酸、糖蛋白、卵磷脂、多糖、益生元、维生素、矿物质等。利用新型海洋生物技术手段，分离纯化海洋生物活性成分，并以其为营养源开发适用于胃肠功能障碍病人的新型肠内营养制剂，将成为我国临床肠内营养研究和海洋生物资源综合利用的结合点，进而推动相关产业和技术的迅速发展。我国近20年牡蛎、螺旋藻等制品的开发，已经形成了海洋生物系列功能产品，但其中尚缺乏以海洋生物活性成分为核心的胃肠道功能营养制品，海洋生物蛋白肽制品的应用具有巨大的可提升空间。21世纪是海洋的世纪，开发海洋生物资源，向海洋索取食品、药品已经成为海洋生物资源可持续开发利用的重要内容。中国专利200610123806.5公开了一种海洋生物临床肠内营养剂，主要组分为贝肉酶解物、禽肉类粉、海藻粉、琼胶、卡拉胶、DNA、EPA。该制剂营养成分全面，可作为普通食品用于体弱人群或正常人群食用，也可以作为临床营养支持制剂用于病人。中国专利200610036597.0公开了一种易于调成流质的海洋生物食品，包括了水解鱼蛋白粉、贝肉酶解物、海水螺旋藻、枸杞，用于术后虚弱病人，补充膳食营养。以上两个专利都仅是从营养补充角度来设计配方制剂，没有从病人临床上普遍存在的胃肠功能障碍来根本解决。
发明内容本发明的目的在于根据现有营养制剂中存在的动物蛋白较少，功能成分有限等问题，提供一种含有丰富的动物蛋白的肠内营养制剂。本发明另一目的在于提供上述肠内营养制剂的制备方法。本发明还有一个目的在于提供上述肠内营养制剂的应用。本发明上述目的通过以下技术方案予以实现—种肠内营养制剂，包含如下按质量百分数计的组分海洋生物蛋白肽粉320%，大豆肽粉315%，海水螺旋藻粉13%，玉米油23%，鱼油12%，麦芽糊精5575%，果蔬粉35%。本发明肠内营养制剂采用海洋生物蛋白肽和大豆肽为蛋白源，玉米油和鱼油为脂肪来源，麦芽糊精为碳水化合物来源，海水螺旋藻和果蔬粉提供维生素和矿物质。其中，所述海洋生物蛋白肽粉来源于贝类或鱼类，所述贝类优选牡蛎、文蛤、珍珠贝、扇贝、贻贝、波纹巴非蛤、蚬中的一种或几种的组合；所述鱼类优选鳕鱼、军曹鱼、黄鱼、带鱼、鲷科鱼类中的一种或几种的组合；所述果蔬粉是番茄粉、胡萝卜粉、南瓜粉、葡萄粉、苹果粉中的一种或几种的混合物。本发明肠内营养制剂的制备方法包括如下步骤将果蔬粉和麦芽糊精预先混合，玉米油和鱼油分别通过微胶囊化进行包裹后与海洋生物蛋白肽粉、海水螺旋藻粉、大豆肽粉按照等量递加混合法混合后，再加入混合好的果蔬粉和麦芽糊精进行二次混合510min，包装辐照灭菌68kGy。上述制备方法中，所述海洋生物蛋白肽粉的制备方法可以为如下步骤取贝类或鱼类去壳去内脏后加广3体积水，匀浆5min，超声10min，再加入蛋白酶酶解，加酶量为8003000U/g，酶解的pH为68，时间为410h，温度为4060°C，酶解结束后IO(TC灭酶10min，高速离心1520min，用活性炭脱苦、脱腥、脱色，再用200目尼龙筛过滤，对滤液进行干燥，得到海洋生物蛋白肽粉。其中，所述蛋白酶优选为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中的一种或几种的混合物。感官评价结果表明，本发明肠内营养制剂为均质固体粉末，溶解性较好，为均一的悬浊液。本发明肠内营养制剂可以用于胃肠功能障碍病人的营养支持，也可以作为普通病人的营养支持制剂，还可以作为普通食品为体弱人群或正常人群食用。本发明肠内营养制剂的营养成份，经分析结果如表1。表1肠内营养制剂的营养分析4<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注以每100g计算。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果(1)本发明肠内营养制剂营养成分全面，所采用的海洋生物蛋白肽同时含整蛋白类、肽类和氨基酸类三种不同形式的氮源，易于消化吸收，且矿物质和维生素含量较高，富含EPA、DHA等不饱和脂肪酸，对病人机体功能和胃肠道功能恢复具有重要作用，动物实验结果表明，本发明肠内营养制剂可以维持小鼠正常生理功能，提高小肠推进率，促进消化吸收，具有显著的增强免疫力的作用；(2)本发明肠内营养制剂既可作为普通食品为正常人群或体弱人群食用，还可作为营养制剂为胃肠道功能障碍病人的临床肠内营养支持，也可作为普通病人的营养支持制剂，补充日常所需的较全面的营养和功能成分。按目前国内所需营养支持的住院病人(2000万)的1%使用本营养品计算，若每位病人每年使用10Kg，本营养制剂的年需求量可达2000吨；按目前肠内营养品的平均价约150元/Kg计算，国内市场年销售额就可达到3亿元，因此本发明肠内营养制剂具有广阔的市场前景；(3)本发明肠内营养制剂可以在临床应用，由于其成本相对目前上市的国内外品种的成本较低，但其效果明显，因此可以大大降低消费者的经济负担，实现了海洋生物低值原料的高值化利用；而且本发明营养制剂的制备过程中采用了绿色技术，提高原料利用率，不产生"三废"，可以显著节约能源，有利于环境保护。具体实施例方式以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。实施例1取符合我国相关海产品食用标准的可食用牡蛎去壳去内脏后加两倍体积饮用水匀浆5min，超声lOmin，再加入菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解，加酶量分别为1200U/g和2400U/g，酶解条件为pH6，酶解时间4h，酶解温度6(TC，反应结束后IO(TC灭酶10min，高速离心15min，加活性炭1%，进行脱苦、脱腥、脱色，再用200目尼龙筛过滤，滤液进行喷雾干燥，获得牡蛎蛋白肽粉5g。从荷泽中食肽好生物制品厂购得大豆肽13g，从中国科学院南海海洋研究所购得海水螺旋藻粉lg，从苏州市佳禾食品工业有限公司购得微胶囊化玉米油，以玉米油重量计3g，从广州昊翔生物科技有限公司购得微胶囊化的鱼油，以鱼油重量计lg，从山东西王淀粉有限责任公司购得麦芽糊精72g，从新疆富源果蔬制品有限责任公司购得果蔬粉5g。将果蔬粉和麦芽糊精预先混合，其余原料螺旋藻粉、微胶囊化鱼油、微胶囊化玉米油、牡蛎肽按照等量递加混合法依次加入混合机中混合，然后加入预先混合好的果蔬粉和麦芽糊精进行二次混合，混合时间为5min，然后包装辐照灭菌8kGy即得。实施例2取符合我国相关海产品食用标准的可食用鳕鱼去内脏后加三倍体积饮用水匀浆5min，超声10min，先加入中性蛋白酶酶解，加酶量为3000U/g，酶解条件为pH7，酶解时间3h，而后将pH调至9，加入碱性蛋白酶酶解，加酶量800U/g，酶解时间3h，酶解温度保持55t:，反应结束后IO(TC灭酶10min，高速离心20min，加活性炭1%，进行脱苦、脱腥、脱色，再用200目尼龙筛过滤，滤液进行喷雾干燥，获得鱼蛋白肽粉18g。从临沂山生物制品有限公司购得大豆肽粉3g，从中国科学院南海海洋研究所购得海水螺旋藻粉lg，从苏州市佳禾食品工业有限公司购得微胶囊化玉米油，以玉米油重量计2g，从秦皇岛市瑞华和信国际贸易有限公司购得微胶囊化的鱼油粉，以鱼油重量计2g，从石家庄市银河变性淀粉有限公司购得麦芽糊精70g，从廊坊市隆源果蔬粉厂购得果蔬粉4g。将果蔬粉和麦芽糊精预先混合，其余原料螺旋藻粉、微胶囊化鱼油、微胶囊化玉米油、牡蛎肽按照等量递加混合法依次加入混合机中混合，然后加入预先混合好的果蔬粉和麦芽糊精进行二次混合，混合时间为8min，然后包装辐照灭菌6kGy即得。实施例3胃肠功能障碍病人专用的肠内营养制剂对小鼠肠道功能的影响1.实验动物及分组SPF级BALB/C小鼠，雄性，体重18_22g。按每组10只随机分为5组，其中阴性对照组灌胃生理盐水，阳性对照组灌胃进口肠内营养制剂百普素(P印i-2000)，低剂量组(0.04g/g*bw)、中剂量组(0.08g/g'bw)和高剂量组(0.16g/gAw)，灌胃胃肠道功能障碍病人专用肠内营养制剂。2.肠内营养制剂对小鼠体重和食物利用系数的影响按照O.lml/10g剂量每天灌胃小鼠各组营养液，连续10天。给小白鼠灌胃期间单笼喂养，每天测定其摄入食量，摄水量，湿便重量，每3天称1次体重，最终计算各组摄食量的增加、体重增加、计算食物利用系数。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>肠内营养制剂对小鼠体重的影响结果见表2.由结果可知，与阴性对照组比较，各剂量组小鼠的体重增加无显著性差异(P>0.05);与阳性对照组相比，各剂量组小鼠的体重增加也无显著性差异(P>0.05)。可见，该制剂对小鼠体重增长未见明显影响，可以维持小鼠的正常生理功能。肠内营养制剂对小鼠利用系数的影响结果见表3。由结果可知，与阴性对照组相比，低、中剂量组食物利用系数均有所增加，且有显著性差异(P<0.05)。可见，该制剂能提高小鼠食物利用系数，有利于消化吸收。表2肠内营养制剂对小鼠体重的影响(g，文士S)组别初体重(g)终体重(g)增重(g)阴性对照组23.12±1.7227.66±2.524.54±0.28阳性对照组22.62±1.8827.64±2.275.02±0.33低剂量组22.42±2.0127.56±2.885.14±0.28中剂量组23.56±2.8628.31±2.594.75±0.46高剂量组22.37±2.6127.70±3.125.33±0.37注各剂量组与阴性对照组相比，*P<0.05;各剂量组与阳性对照组相比，#P<0.05。表3肠内营养制剂对小鼠食物利用系数的影响(g，文士S)组别湿便质量(g)摄食量(g)摄水量(g)食物利用系数(％)阴性对照组1.37±0.143.15±0.274.61±0.580.177±0.011阳性对照组1.64±0.273.52±0.183.73±0.680.226±0扁低剂量组1.73±0.353.94±0.414.39±0.320.208土0.01(f中剂量组1.53±0.213.68±0.393.82±0.410.204±0.008*高剂量组1.50±0.234.02±0.234.0.6±0.640.186±0.015注各剂量组与阴性对照组相比，*P<0.05;各剂量组与阳性对照组相比，#P<0.05。3.肠内营养制剂对小肠推进的影响按照0.lmL/10g剂量每天灌胃小鼠各组营养液，连续7天。试验前禁食24h，试验当天给受试物1次，给营养液30min后，各组小白鼠灌胃5%的炭末混悬液(包含10%阿拉伯胶、5%植物炭末和10%淀粉)0.2mL/10gbw。20-30min后，将小白鼠颈椎脱臼处死，立即解剖取出小肠全长，不加牵引平铺呈直线，测其全长并记录炭末前沿至贲门的距离，计算小肠推进率。小肠推进率=,鹏(Cm)x100%肠内营养制剂对小鼠推进率的影响见表4，与阴性对照组比较，各剂量组的墨汁推进率具有显著的提高(P<0.05)，说明肠内营养制剂对小鼠小肠推进率具有明显的促进作用，对胃肠平滑肌推进性蠕动加快，具有促进消化功能的作用。表4肠内营养制剂对小鼠小肠推进率的影响(％j±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注各剂量组与阴性对照组相比，*P<0.05;各剂量组与阳性对照组相比，#P<0.05。4.肠内营养制剂对小鼠小肠吸收的影响按照0.lmL/10g剂量每天灌胃小鼠各组营养液，连续7天。给营养液的第六天禁食不禁水24h，最后一次给营养液后lh给与50g/L右旋木糖液20mL/kg，lh后眼眶取血，分离血清。取出40L血清加入4ml显色剂(取间苯三酚0.5g加入100ml冰乙酸及6ml浓盐酸)，混匀，IO(TC水浴加热lOmin，流水冷却至室温，用554nm波长，以蒸馏水加显色剂管清零，测量各管的吸收度。肠内营养制剂对小鼠小肠吸收的影响结果见表5，与阴性对照组比较，各剂量组都具有抑制利血平造成的小肠运动亢进，其中低剂量组效果显著(P<0.05)。说明该制剂对小鼠的消化吸收具有明显的促进功能。表5肠内营养制剂对小鼠小肠吸收的影响(mmol/L，文士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注各剂量组与阴性组相比3P<0.05;各剂量组与阳性对照组相比，ftP<0.05。实施例3胃肠道功能障碍病人专用肠内营养制剂对小鼠免疫功能的影响1.实验动物及分组SPF级BALB/C小鼠，雄性，体重18_22g。按每组10只随机分为5组。其中模型组，灌胃环磷酰胺20mg/kg;阳性对照组，灌胃百普素(P印ti-2000);实验组分为低剂量组(0.04g/g*bw)、中剂量组(0.08g/g'bw)和高剂量组(0.16g/g*bw)，灌胃牡蛎肽肠内营养制剂(OPEN)。除模型组外，其余组动物均每天腹腔注射环磷酰胺20mg/mL，同时灌胃给予营养液0.2mL/10g，连续给予15天。2.肠内营养制剂对血液生化指标检测和脏器系数的影响各组给予营养液期间，每周测量体重两次，每天进行日常观察一次。两周后脱颈处死，眼眶取血，计算脾脏、胸腺的脏器指数，测定总蛋白、白蛋白含量，进行营养评定。肠内营养制剂对免疫抑制小鼠的血液生化指标及脏器系数的影响结果见表6。与模型组相比，各剂量组总蛋白和白蛋白的含量均有所增加，其中中剂量组总蛋白和白蛋白具有显著性差异(P<0.05)，高剂量组白蛋白增加具有显著性意义(P<0.05);各剂量组胸腺、脾脏和体重比值无显著性差异。与阳性对照组比较，各剂量组的胸腺和脾脏体重比以及各项血液生化指标均没有显著性差异(P>0.05)。说明肠内营养制剂可以维持小鼠的正常生理生化功能，改善机体营养不良的状况。表6肠内营养制剂对小鼠血液生化指标和脏体比的影响(文士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注各剂量组与模型组相比3P<0.05;各剂量组与阳性对照组相比，ftP<0.05。3.肠内营养制剂对小鼠细胞免疫的影响采用小鼠脾淋巴细胞转化实验，参照卫生部《保健食品检验与评价规范》(2003年版)的方法。小鼠脾淋细胞在ConA剌激下的增殖百分率见表7。由结果可知，与模型组比较，各剂量组的脾淋巴细胞增殖率均有所增加，其中低、高剂量组脾淋巴细胞增殖率明显增高(P<0.05)，说明该制剂能对抗环磷酰胺所致的免疫低下小鼠脾脏T淋巴细胞增殖的下降，能明显增强机体的细胞免疫活性，改善机体免疫机能受抑状态，增强机体的特异性免疫功能。表7肠内营养制剂对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响(文士S)组别给药量动物数光密度值模型组环磷酰胺20mg/mL+蒸馏水0.2mL/10g100.041±0.012阳性组环磷酰胺20mg/mL+百普素lg/mL100.159±0.021低剂量组环磷酰胺20mg/mL+OPENlg/mL100.114±0.023*中剂量组环磷酰胺20mg/mL+OPENlg/mL100.078±0.023高剂量组环磷酰胺20mg/mL+OPENlg/mL100.103±0.034*注各剂量组与模型组相比^P<0.05;各剂量组与阳性对照组相比，ftP<0.05。4.肠内营养制剂对小鼠单核_巨噬细胞功能的影响采用小鼠碳粒廓清实验，参照卫生部《保健食品检验与评价规范》(2003年版)的方法。肠内营养制剂对小鼠单核-巨噬细胞功能的影响由表8结果可知，与模型组比较，各剂量组的吞噬指数均有所提高，其中低剂量组吞噬指数有明显的增高(P<0.05)，中剂量组和高剂量组有增高的趋势，但无显著性差异，说明低剂量组能增强小鼠巨噬颗粒异物的能力。由此推断，该制剂可能具有促进单核_巨噬细胞吞噬功能的作用，增强机体的非特异性免疫功能。_表8肠内营养制剂对小鼠单核_巨噬细胞功能的影响(文士S)组别给药量动物数吞噬指数模型组生理盐水O.lmIVlOg104.13±1.21阳性组O.lmIVlOg105.27±0.86低剂量组0.1mL/10g105.14±0.97*中剂量组O.lmL/lOg104.85±0.91高剂量组O.lmL/lOg104.46±1.06注各剂量组与模型组相比3P<0.05;各剂量组与阳性对照组相比，ftP<0.05。5.肠内营养制剂对小鼠NK细胞活性的影响采用乳酸脱氢酶测定法，参照卫生部《保健食品检验与评价规范》(2003年版)的方法。肠内营养制剂对小鼠NK细胞活性的影响结果见表9，由结果可知，与模型组比较，10各剂量组NK细胞活性有所增加，其中低、中剂量组具有显著性意义(P<0.05)。由此可见，该制剂具有增强小鼠NK细胞活性的作用，可以增强小鼠的非特异性免疫能力。表9肠内营养制剂对小鼠NK细胞活性的影响(％，文士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注各剂量组与模型组相比3P<0.05;各剂量组与阳性对照组相比，ftP<0.05。权利要求一种肠内营养制剂，其特征在于包含如下按质量百分数计的组分海洋生物蛋白肽粉3~20％，海水螺旋藻粉1~3％，果蔬粉3~5％，大豆肽粉3~15％，玉米油2~3％，鱼油1~2％，麦芽糊精55~75％。2.根据权利要求1所述的肠内营养制剂，其特征在于所述海洋生物蛋白肽粉的制备方法是取贝类或鱼类去壳去内脏后加13体积水，匀浆5min，超声10min，再加入蛋白酶酶解，加酶量为8003000U/g，酶解的pH为68，时间为410h，温度为4060°C，酶解结束后IO(TC灭酶10min，高速离心1520min，用活性炭脱苦、脱腥、脱色，再用200目尼龙筛过滤，对滤液进行干燥，得到海洋生物蛋白肽粉。3.根据权利要求1所述的肠内营养制剂，其特征在于所述海洋生物蛋白肽粉来源于贝类或鱼类，所述贝类是牡蛎、文蛤、珍珠贝、扇贝、贻贝、波纹巴非蛤、蚬中的一种或几种的组合；所述鱼类是鳕鱼、军曹鱼、黄鱼、带鱼、鲷科鱼类中的一种或几种的组合。4.根据权利要求1所述的肠内营养制剂，其特征在于所述果蔬粉是番茄粉、胡萝卜粉、南瓜粉、葡萄粉、苹果粉中的一种或几种的混合物。5.权利要求14中任意一条权利要求所述肠内营养制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤将果蔬粉和麦芽糊精预先混合，玉米油和鱼油分别通过微胶囊化进行包裹后与海洋生物蛋白肽粉、海水螺旋藻粉、大豆肽粉按照等量递加混合法混合后，再加入混合好的果蔬粉和麦芽糊精进行二次混合510min，包装辐照灭菌68kGy。6.根据权利要求5所述肠内营养制剂的制备方法，其特征在于所述蛋白酶为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中的一种或几种的混合物。7.权利要求14中任意一条权利要求所述肠内营养制剂的应用，其特征在于所述营养制剂作为普通食品，为体弱人群或正常人群食用。8.根据权利要求7所述肠内营养制剂的应用，其特征在于所述营养制剂作为胃肠功能障碍病人的营养支持制剂。全文摘要本发明公开了一种肠内营养制剂及其制备方法和应用。本发明肠内营养制剂包含如下按质量百分数计的组分海洋生物蛋白肽粉3~20％，海水螺旋藻粉1~3％，果蔬粉3~5％，大豆肽粉3~15％，玉米油2~3％，鱼油1~2％，麦芽糊精55~75％。本发明肠内营养制剂为均质固体粉末，溶解性较好，为均一悬浊液，该肠内营养制剂的营养成分全面，易于消化吸收，且矿物质和维生素含量较高，富含EPA、DHA等不饱和脂肪酸，可作为胃肠功能障碍病人的营养支持，对胃肠功能障碍病人机体功能和胃肠道功能恢复具有重要作用，还可以促进消化吸收，显著增强免疫力。本发明肠内营养制剂的生产成本较低，可显著节约能源，提高原料利用率。文档编号A23L1/305GK101785560SQ20101013125公开日2010年7月28日申请日期2010年3月19日优先权日2010年3月19日发明者万鹏,吴园涛,孙小钰,孙恢礼,张偲,蔡冰娜,陈华申请人:中国科学院南海海洋研究所