专利名称：一种酪蛋白磷酸肽的制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及乳源性原料酪蛋白磷酸肽制备新工艺研究。
背景技术：
酪蛋白磷酸肽(CPP)是以牛乳酪蛋白为原料，通过生物技术制得的具有生物活性 的多肽，可用于各种营养、保健食品，能有效促进人体对钙、铁、锌等二价矿物营养素的吸收 和利用。酪蛋白磷酸肽(CPP)的研究早在50多年前就开始了，Mellander等首次从酪蛋白的 胰蛋白酶水解物中分离得到磷酸肽，这些肽的钙盐在生理PH下具有非常好的溶解性，无论 正常婴儿还是佝偻病患儿， 对CPP形式的钙比自然状态的钙都能更好的利用。1958年Reeve 从酪蛋白的水解物中分离得到CPP，并且证明其具有防止磷酸钙沉淀的功能。Peterson也 从酪蛋白的胰蛋白酶水解物中分离得到一种纯的磷酸肽，并且测定了其氨基酸组成。 尽管早在50年代，国外就开始了对CPP的研究，但工业化制备的研究工作直到近年才真正 开始，而我国在酪蛋白磷酸肤的研究方面尚未完全实现产业化生产，现有的生产中往往采 用单一酶水解，存在水解度低、酶消耗量大、底物浪费、CPP成本高的问题。因此提高酶的转 化率、研究生产天然、CPP,实现大规模生产，不断满足人们的生活需要将是CPP发展必然趋 势。钙是人体中含量最多的微量元素，长期缺钙会导致骨骼和牙齿发育不全、骨质疏 松症、贫血，甚至于高血压和冠心病等。而我国居民平均每日钙摄入量只有405. 4mg,只占每 日推荐量的50%左右，在有些地区儿童佝偻病的发病率高达40%，骨质疏松症也是困扰老 人的常见疾病之一，因此补钙是当务之急。而CPP能有效地促进钙的吸收，所以一种高效、 安全的，成本低，工艺简单的制备方法尤显重要。
发明内容
本发明目的是提供一种制备乳性酪蛋白磷酸肽的新工艺，其具有成本低、无毒副 作用，有利于人体对钙、铁、锌等二价矿物营养素的吸收和利用。本发明的实施方案为，一种酪蛋白磷酸肽的制备工艺，包括以下步骤(1)将干酪素原料用水溶解，溶解后底物浓度为5-20% ；(2)利用胰蛋白酶进行酶解，胰蛋白酶的加入量为干酪素原料重量的0. 2-0.8%, 反应温度为20-100°C，反应时间l-20h, pH为1-13 ；(3)酶解后在 80-100°C下灭活 IO-3Omin ；(4)采用超滤膜分离，得到2000-4000的分子量范围的酪蛋白磷酸肽液，冷冻干燥
喷雾干燥后得干粉。优化的是，步骤(1)和步骤(2)中，底物浓度为8-15%，胰蛋白酶加入量为干酪素 原料重量的0. 4-0. 6%，pH为4-5，温度为40-700C O步骤(3)中，在PH4-8条件下80-90°C持续IOmin灭活。本发明制备的乳源性酪蛋白磷酸肽的分子量在2000-4000之间。
本发明利用胰蛋白酶解乳源性酪蛋白，天然，安全，无毒副作用。本发明酶解乳源性酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽，是一种成本低，工艺简单的制备方 法，适合工业化生产。本发明提供制备的酪蛋白磷酸肽可用于食品、药品、保健品、能有效促进人体对 钙、铁、锌等二价矿物营养素的吸收和利用。
具体实施例方式实施例1 一种制备乳性酪蛋白磷酸肽的新工艺，具体步骤为准确称取干酪素原料，加入原料重量5倍的水溶解，在溶液中加入干酪素原料重 量0. 5 %的日本产胰蛋白酶进行酶解，反应温度50 0C，反应时间IOh，酶解在PH 8时进行，酶 解后在80°C下IOmin灭活，采用超滤膜分离，得到2000-4000的分子量范围的酪蛋白磷酸肽 液，冷冻干燥喷雾干燥后得干粉。实施例2:称取干酪素原料，加入水溶解，使底物浓度为5 %，在溶液中加入干酪素原料重量 0. 2%的诺维信胰蛋白酶进行酶解，反应温度40°C，反应时间20h，酶解在pH 10时进行，酶 解后在80°C下IOmin灭活，采用超滤膜分离，得到2000-4000的分子量范围的酪蛋白磷酸肽 液，冷冻干燥喷雾干燥后得干粉。实施例3:称取干酪素原料，加入水溶解，使底物浓度为15 %，在溶液中加入干酪素原料重量 0. 8%的诺维信胰蛋白酶进行酶解，反应温度70°C，反应时间12h，酶解在pH 7时进行，酶解 后在85°C下IOmin灭活，采用超滤膜分离，得到2000-4000的分子量范围的酪蛋白磷酸肽 液，冷冻干燥喷雾干燥后得干粉。
权利要求
一种酪蛋白磷酸肽的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤(1)将干酪素原料用水溶解，溶解后底物浓度为5-20％；(2)利用胰蛋白酶进行酶解，胰蛋白酶的加入量为干酪素原料重量的0.2-0.8％，反应温度为20-100℃，反应时间1-20h，pH为1-13；(3)酶解后在80-100℃下灭活10-30min；(4)采用超滤膜分离，得到2000-4000的分子量范围的酪蛋白磷酸肽液，冷冻干燥喷雾干燥后得干粉。
2.根据权利要求1所述的酪蛋白磷酸肽的制备工艺，其特征在于，步骤(1)和步骤(2) 中，底物浓度为8-15%，胰蛋白酶加入量为干酪素原料重量的0. 4-0. 6%，pH为4_5，温度为 40-70 "C。
3.根据权利要求1所述的酪蛋白磷酸肽的制备工艺，其特征在于步骤(3)中，在pH4-8 条件下80-90°C持续IOmin灭活。
全文摘要
本发明提供一种酪蛋白磷酸肽的制备工艺，是将干酪素原料用水溶解，利用采用超滤膜分离，得到2000-4000的分子量范围的酪蛋白磷酸肽液，冷冻干燥喷雾干燥后得干粉。本发明利用胰蛋白酶解乳源性酪蛋白，天然，安全，无毒副作用，成本低，工艺简单，适合工业化生产。所制备的酪蛋白磷酸肽可用于食品、药品、保健品、能有效促进人体对钙、铁、锌等二价矿物营养素的吸收和利用。
文档编号C12P21/02GK101812495SQ20101015981
公开日2010年8月25日 申请日期2010年4月29日 优先权日2010年4月29日
发明者伍淑华, 曹庸, 陈雪香 申请人:广州绿萃生物科技有限公司