专利名称：高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种液体酶的制备工艺，特别涉及一种高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺。
背景技术：
木瓜蛋白酶广泛应用于食品、化妆品、饲料、皮革加工等行业，用途广泛。目前全球 年生产木瓜蛋白酶达1000吨以上，而美国每年的需求量就在300吨左右，其中大部分靠进 口。我国目前木瓜蛋白酶市场需求量为300吨，但木瓜蛋白酶年产量仅为100吨左右，而且 多为粗制品，即木瓜浆的干燥制品。近年来，国际上木瓜蛋白酶的需求量每年都在以5%左 右的速度增长。市场对木瓜蛋白酶的需求量巨大。木瓜蛋白酶是一种植物蛋白酶，主要由从木瓜中提取。常见的木瓜蛋白酶有固体 和液体两种。固体酶虽然有利于长期保存，但是在生产操作中，存在酶的添加不均勻导致工 艺波动、酶的粉尘易致过敏等问题，故实际生产中，使用液体酶更为方便。目前，我国液体木瓜蛋白酶的生产工艺主要有以下二种①自然静置浸提，提取率 一般仅有70%左右，商品活力通常低于10万单位/毫升，生产效率低下且周期长，一般长达 15天；②将干木瓜乳研磨成浆状，杂质没有分离，商品活力不超过20万单位/毫升。工艺 ①的产品活力低、生产效率低下且周期长；工艺②的生产周期虽短，但杂质多，卫生指标也 差。由于木瓜蛋白酶产品的品质差，导致木瓜这一易于栽培的农作物的附加值低，也影响了 瓜农的收益。因此寻求一种产品活力高、卫生指标及经济性方面都较好的高活力液体木瓜蛋白 酶提取生产工艺非常重要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种简单、高效的高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺。本发明所采取的技术方案是
高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，包括以下步骤
1)将干木瓜乳与水混合，得到木瓜乳悬浊液，在木瓜乳悬浊液加入淀粉酶、果胶酶、 糖化酶，酶解；
2)将酶解液过滤，取滤液；
3)将滤液进行膜过滤除菌，得到高活力液体木瓜蛋白酶。优选的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入1000 3000U的淀粉酶。优选的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入1000 20000U的果胶酶。优选的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入5000 10000U的糖化酶。优选的，木瓜乳(干重)与水的质量比为10 100 :100。酶解的温度为21 57°C。本发明的工艺制备的液体木瓜蛋白酶，酶活不低于50万单位/ml，细菌数不高于
310000 个 /ml。本发明的工艺，生产周期短，5天之内即可完成整个生产过程，生产效率大大提高。 各工艺参数易于控制，使用的设备也易于维修。本发明的工艺，提取率可接近100%，大大减少了原料的浪费。本发明的工艺，能耗低，节能环保，综合生产成本较常规自然静置浸提降低30%以 上，是一种绿色、环保的提取工艺。
具体实施例方式高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，包括以下步骤
将干木瓜乳与水混合，得到木瓜乳悬浊液，在木瓜乳悬浊液加入淀粉酶、果胶酶、糖化 酶，酶解；
将酶解液过滤，取滤液；
将滤液进行膜过滤除菌，得到高活力液体木瓜蛋白酶。优选的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入1000 3000U的淀粉酶。优选的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入1000 20000U的果胶酶。优选的，每IOOg木瓜乳(干重)，加入5000 10000U的糖化酶。优选的，木瓜乳(干重)与水的质量比为10 100 :100。酶解的温度为21 57°C。下面结合实施例，进一步说明本发明。以下实施例中所使用的份数，如无特别说明，均指质量份。实施例1
将10份干木瓜乳与100份水混合，得到木瓜乳悬浊液，
1)按每IOOg干木瓜乳加入1000U淀粉酶、6000U果胶酶、6000U糖化酶的比例加入淀 粉酶、果胶酶、糖化酶，30°c酶解；
2)将酶解液通过鼓膜压榨过滤，取滤液；
3)将滤液超滤除菌，得到高活力液体木瓜蛋白酶。整个生产周期为4天5小时，木瓜蛋白酶的收率为99. 8%，酶活为60万单位/ml。实施例2
1)将50份干木瓜乳与100份水混合，得到木瓜乳悬浊液，
2)按每IOOg干木瓜乳加入1800U淀粉酶、10000U果胶酶、5000U糖化酶的比例加入 淀粉酶、果胶酶、糖化酶，37°C酶解；
3)将酶解液通过鼓膜压榨过滤，取滤液；
4)将滤液超滤除菌，得到高活力液体木瓜蛋白酶。整个生产周期为4天，木瓜蛋白酶的收率为99. 5%，酶活为70万单位/ml。实施例3
1)将30份干木瓜乳与100份水混合，得到木瓜乳悬浊液，
2)按每IOOg干木瓜乳加入1300U淀粉酶、1000U果胶酶、7000U糖化酶的比例加入淀 粉酶、果胶酶、糖化酶，57°C酶解；
3)将酶解液通过鼓膜压榨过滤，取滤液；4)将滤液超滤除菌，得到高活力液体木瓜蛋白酶。整个生产周期为3天15小时，木瓜蛋白酶的收率为97. 2%，酶活为50万单位/ml。实施例4
1)将80份干木瓜乳与100份水混合，得到木瓜乳悬浊液，
2)按每IOOg干木瓜乳加入2500U淀粉酶、20000U果胶酶、10000U糖化酶的比例加入 淀粉酶、果胶酶、糖化酶，42°C酶解；
3)将酶解液通过鼓膜压榨过滤，取滤液；
4)将滤液超滤除菌，得到高活力液体木瓜蛋白酶。整个生产周期为4天14小时，木瓜蛋白酶的收率为99. 0%，酶活为67万单位/ml。实施例5
1)将100份干木瓜乳与100份水混合，得到木瓜乳悬浊液，
2)按每IOOg干木瓜乳加入3000U淀粉酶、15000U果胶酶、8500U糖化酶的比例加入 淀粉酶、果胶酶、糖化酶，21°C酶解；
3)将酶解液通过鼓膜压榨过滤，取滤液；
4)将滤液超滤除菌，得到高活力液体木瓜蛋白酶。整个生产周期为4天20小时，木瓜蛋白酶的收率为98. 5%，酶活为68万单位/ml。本发明通过选取合适的酶以及合适的量，可以快速地将木瓜蛋白酶从木瓜乳中释 放出来，有效缩短了整个工艺流程，提高了生产效率。虽然高温下也可以进行提取，但是整个生产工艺的温度可控制在40°C以下，这样 可以保持木瓜蛋白酶的酶活在较高的水平。同时，过滤、超滤都是纯物理操作，处理量大，能 耗低，可进一步提高生产效率，降低生产成本。本发明的工艺制备的液体木瓜蛋白酶，酶活不低于50万单位/ml，细菌数不高于 10000个/ml，是一种性能优异的产品。这一工艺的实施，也将进一步提高木瓜的附加值，有 利于提高瓜农的收入。本发明的工艺，生产周期短，5天之内即可完成整个生产过程，生产效率大大提高。 各工艺参数易于控制，使用的设备也易于维修。本发明的工艺，提取率可接近100%，大大减少了原料的浪费。本发明的工艺，能耗低，节能环保，综合生产成本较常规自然静置浸提降低30%以 上，是一种绿色、环保的提取工艺。
权利要求
高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，包括以下步骤1)将干木瓜乳与水混合，得到木瓜乳悬浊液，在木瓜乳悬浊液加入淀粉酶、果胶酶、糖化酶，酶解；2) 将酶解液过滤，取滤液；3) 将滤液进行膜过滤除菌，得到高活力液体木瓜蛋白酶。
2.根据权利要求1所述的高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，其特征在于每IOOg木 瓜乳(干重)，加入1000 3000U的淀粉酶。
3.根据权利要求1所述的高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，其特征在于每IOOg木 瓜乳(干重)，加入1000 20000U的果胶酶。
4.根据权利要求1所述的高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，其特征在于每IOOg木 瓜乳(干重)，加入5000 10000U的糖化酶。
5.根据权利要求1所述的高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，其特征在于木瓜乳悬 浊液中还添加有木瓜乳(干重)质量0. 1 1. 2%的螯合剂。
6.根据权利要求5所述的高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，其特征在于螯合剂为 EDTA-Na20
7.根据权利要求1所述的高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，其特征在于酶解的温 度为21 57°C。
8.根据权利要求1所述的高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，其特征在于木瓜乳(干 重)与水的质量比为10 100 :100。
全文摘要
本发明公开了高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺，包括将干木瓜乳与水混合，得到木瓜乳悬浊液，在木瓜乳悬浊液加入淀粉酶、果胶酶、糖化酶，酶解；将酶解液过滤，取滤液；将滤液进行膜过滤除菌，得到高活力液体木瓜蛋白酶。本发明的工艺制备的液体木瓜蛋白酶，酶活不低于50万单位/ml，细菌数不高于10000个/ml。本发明的工艺，生产周期短，5天之内即可完成整个生产过程，生产效率大大提高。各工艺参数易于控制，使用的设备也易于维修。本发明的工艺，提取率可接近100%，大大减少了原料的浪费。本发明的工艺，能耗低，节能环保，综合生产成本较常规自然静置浸提降低30%以上，是一种绿色、环保的提取工艺。
文档编号C12N9/50GK101962636SQ20101051588
公开日2011年2月2日 申请日期2010年10月22日 优先权日2010年10月22日
发明者聂振泰 申请人:江门市天成生物科技有限公司