专利名称：模拟失重下多细胞联合培养装置的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种模拟失重环境下的多细胞联合培养装置。
背景技术：
在体情况下，机体生理功能的调控并非由单一种类的细胞孤立地完成，而是由多种细胞组成复杂的调控网络共同实现。同时，受细胞分泌的细胞因子及相邻细胞间通讯的相互作用，不同组织细胞之间的功能也有相互影响。因此，单纯对于一种细胞的孤立性研究所得出的结果，不能完全反映细胞的在体功能状态，甚至得出与细胞在体情况下相矛盾的结果。然而，目前对于多细胞的联合培养技术全部是基于常规培养条件设计的，而缺乏模拟失重环境下的多细胞联合培养装置。当前，由于装置的限制，对于细胞水平的模拟失重研究还仅仅停留在单一种类细胞的研究阶段，迫切需要发明一种联合培养装置开展失重水平的多细胞联合研究，以取得准确的研究结果。因此，研制一种模拟失重环境下的大样本、操作简便的多细胞联合培养装置十分必要。
发明内容
现有细胞水平的模拟失重研究限于硬件条件的限制，仅能开展单一种类的细胞研究，无法真实反映细胞的在体功能状态。为了克服单一种类细胞研究的不足，本发明提供一种大样本、操作简便的多细胞联合培养模拟失重装置。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是模拟失重下多细胞联合培养装置由培养瓶体、培养瓶旋盖、半透膜、夹持片和十字形支架五部分组成，半透膜、夹持片及十字形支架用于培养细胞，培养瓶体、培养瓶旋盖组成多细胞联合培养瓶，并实现与细胞模拟失重装置的对接。本发明的有益效果是根据研究目的的不同，本装置既可以进行单一种类的细胞学研究，也可以进行两种或两种以上的多细胞研究，从而实现细胞收率高、操作简便、可重复使用、并准确反映细胞在体功能状态的目的。下面结合附图对本发明进一步说明。
图1示模拟失重下多细胞联合培养装置的基本结构。图1中1.培养瓶旋盖，2.培养瓶体，3.夹持片，4.半透膜，5.十字形支架。图2示模拟失重下多细胞联合培养装置内部组件图。图2中A.半透膜，B.夹持片，C.十字形支架俯视图，D.十字形支架侧位图。
具体实施例方式在图1及图2中，夹持片(3)为刚性材料，分为上下两个页，呈中空“口”字形并以轴相连接，两页可以一定阻尼上下开合，其作用为将半透膜(4)固定于两页之间。十字形支架(5)为刚性结构，十字形支架( 的四个末端各有两个滑槽，固定有半透膜(4)的夹持片 (3)可垂直插入十字形支架( 的滑槽中并固定组成样本架，每个十字形支架( 可最多插入四个夹持片C3)，以实现细胞的大批量培养。培养瓶旋盖(1)和培养瓶体( 均为透明聚苯乙烯注塑，培养瓶体( 呈中空圆柱形，圆柱形上端开口并有外螺纹，下端密闭，培养瓶旋盖(1)具有内螺纹，可与培养瓶体( 上的外螺纹连接组成密闭完整的培养瓶结构。样本架可放入培养瓶体O)中，当培养瓶旋盖(1)拧紧后可通过挤压作用将十字形支架(5) 固定在培养瓶体内部。培养瓶体( 可夹持固定在细胞模拟失重装置上实现细胞水平的模拟失重。为研究模拟失重环境下细胞接触及近距离细胞通讯对两种不同种类贴壁细胞间的相互影响，使用时，将半透膜(4)裁剪至适宜尺寸，固定于夹持片(3)的上下两个半页之间，根据实验目的，获取并传代两种不同种类的贴壁细胞。稳定培养后，在实验前以0.5% 的胰蛋白酶消化一种细胞，用含血清培养液终止消化并制成细胞悬液，以lX105/ml的密度接种于半透膜的A面，细胞贴壁后，制作另一种细胞的悬液，翻转半透膜(4)至B面向上，再以相同密度接种另一种目的细胞，待细胞贴壁完全后备用，各面做好标记。将消毒好的十字形支架( 置于培养瓶体O)中，加满37°C预热的细胞培养液，将上述制备好的夹持片( 分别插入十字形支架(5)的末端滑槽中，每个十字形支架( 最多可插四个夹持片(3)。吹打培养液以消除培养瓶中粘附的气泡，拧紧培养瓶旋盖(1)，并仔细观察细胞培养体系，以培养瓶体O)内无气泡为合格。将培养瓶体O)固定于细胞模拟失重装置上完成后续研究工作。如为研究细胞因子等远距离通信对两种不同贴壁细胞间的相互影响，则可将不同种类的细胞单面贴壁于不同的半透膜(4)上，做好标记插在十字形支架( 上，每个十字形支架( 上各插入两片含相同种类细胞的夹持片(3)，拧紧培养瓶旋盖(1)后连接在细胞模拟失重装置上，完成后续试验。如为研究多细胞间的相互影响，则将各种类的细胞分别接种于不同的半透膜上，做好标记插于十字形支架( 上，其余步骤同上述。
权利要求
1. 一种模拟失重下多细胞联合培养装置，可用于细胞水平的模拟失重研究，由培养瓶旋盖(1)、培养瓶体O)、夹持片(3)、半透膜(4)和十字形支架( 五部分组成，其特征为 半透膜(4)固定在夹持片C3)上后，双面可各接种一种不同的细胞，将接种细胞后的夹持片 (3)插入十字形支架( ，并转入培养瓶体( 中，充满细胞培养液，旋紧培养瓶旋盖(1)，形成一个密闭完整的多细胞联合培养体系。本装置可与细胞模拟失重装置对接，实现多细胞的模拟失重效应。
全文摘要
本发明提供一种可用于模拟失重研究的多细胞联合培养装置，由培养瓶体、培养瓶旋盖、半透膜、夹持片和十字形支架五部分组成，半透膜、夹持片及十字形支架用于培养细胞，培养瓶体、培养瓶旋盖组成多细胞联合培养瓶并实现与细胞模拟失重装置的对接。本装置既可用于模拟失重下单一种类细胞的培养，又可用于模拟失重下两种或多种细胞的联合培养，并充分考虑到细胞间的接触及细胞通讯影响，可最大程度地满足模拟失重环境下多细胞联合培养的要求，解决了现有模拟失重装置仅能培养单一细胞的不足，而且操作简便，可反复使用。
文档编号C12M3/00GK102485878SQ201010574419
公开日2012年6月6日 申请日期2010年12月1日 优先权日2010年12月1日
发明者孙喜庆, 张舒, 王永春 申请人:中国人民解放军第四军医大学