专利名称：含有牡荆素阿拉伯糖苷的口服用组合物的制造方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及以使用白落葵(Basella alba)作为原料为特征的、含有牡荆素呋喃阿拉伯糖苷(Arabinofuranosyl vitexin)和/或作为其水解物的牡荆素的口服用组合物的制造方法，详细地说，涉及含有上述化合物作为活性组分的、具有镇静作用和/或睡眠导入作用的口服用组合物的制造方法。另外，本发明涉及包含上述口服用组合物的饮食品、医药品。
背景技术：
类黄酮是主要在植物中被进行生物合成的具有黄烷衍生物骨架的化合物的总称。 类黄酮根据分子种类而存在具有优异的生理活性作用的类型。一般来说，植物的类黄酮大多数情况下以容易接受酶作用的“黄酮类0-葡萄糖苷 (O-Glucoside Flavonoid) ” (具有0-葡萄糖苷骨架的黄酮类配糖体)、或水不溶性的“糖苷配基”(不含糖成分的类黄酮)的形态存在。相对于此，“黄酮类C-葡萄糖苷(C-Glucoside Flavonoid) ” (具有C-葡萄糖苷骨架的黄酮类配糖体)由于与糖成分的结合是C-糖苷键，因此是相对于加热、水解、酶等难以被分解从而稳定性高的化合物。另外，由于是配糖体，因此对水的溶解性优异。而且，在其中某一分子种类的类型中，对抗氧化、细胞保护、抗炎症、抗癌、睡眠、抗焦虑等具有优异的生理活性作用的类型最近为人所知(参照非专利文献1)。但是，就黄酮类C-葡萄糖苷而言，含有其的原料的植物本身及其含量都非常少 (非专利文献2、，虽然也发现了效率高的萃取法的尝试(专利文献1)，但仍不是充分的状况。另外，例如在称为“Cotoneaster thymaefolia”的植物(蔷薇科枸子属、分布于中国喜马拉雅山的灌木)的叶子中，已知含有作为黄酮类C-葡萄糖苷的一种的牡荆素 2" -0-α -D-呋喃阿拉伯糖苷的情况(参照非专利文献3)，但是，植物原料的大量获取是困难的。而且，该植物并非食用植物，萃取该植物的黄酮类C-葡萄糖苷作为原料的该植物的利用是不现实的。因此，作为类黄酮的利用，大部分都是从含有易被分解的黄酮类0-葡萄糖苷的形态、或水不溶性的糖苷配基形态的类型的植物中将这些进行萃取或提纯而利用于功能性原料等中，黄酮类C-葡萄糖苷的有效利用并未进行。现有技术文献专利文献专利文献1 日本特开2006-265250号公报非专利文献非专利文献l:Cell Biol Int. (2009), 33 (2), 247-52非专利文献2 日本食品科学工学会誌(日本食品科学工学会杂志)000；3)50(1)， 32-34非专利文献3 =Phytochemistry (1994)，35 (5)，1381—
发明内容
发明所要解决的课题本发明的目的在于，解决上述课题，从“容易得到”且“ 口服方面的安全性高”的植物中，发现大量含有“具有优异的生理活性作用”的黄酮类C-葡萄糖苷的植物，并制造含有上述黄酮类C-葡萄糖苷作为活性组分的口服用组合物(尤其是饮食品、医药品)。解决课题的手段本发明人鉴于这样的情况对各种含有类黄酮的植物进行了探索，其结果发现在作为叶菜的食用植物白落葵(Basella alba)中大量含有作为黄酮类C-葡萄糖苷的牡荆素呋喃阿拉伯糖苷。另外，发现其结构为牡荆素2" -0-α-D-呋喃阿拉伯糖苷。而且，本发明人发现在以比正位反射消失的给药量少的用量对小鼠给予作为巴比妥类麻醉药的戊硫代巴比妥时，观察到了剧烈地打转的行为，但是，通过麻醉前给予牡荆素阿拉伯糖苷，该行为被抑制，作为牡荆素阿拉伯糖苷的生理活性作用而具有镇静和睡眠导入作用。另外，发现牡荆素呋喃阿拉伯糖苷能够通过水解而容易地分离为阿拉伯糖部分和牡荆素(黄酮类C-葡萄糖苷的主体)。 上述见解是本发明人最初发现的见解。然后，根据这些见解完成了本发明。也就是说，权利要求1涉及的本发明是提供含有牡荆素呋喃阿拉伯糖苷和/或作为其水解物的牡荆素的口服用组合物的制造方法，其特征在于，使用白落葵(Basella alba)作为原料。权利要求2涉及的本发明是提供权利要求1所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述牡荆素呋喃阿拉伯糖苷是牡荆素2" -Ο-α-D-呋喃阿拉伯糖苷。权利要求3涉及的本发明是提供权利要求1或2所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述口服用组合物的制造方法包括下述工序对上述作为原料的白落葵进行切碎、碎片化、或捣碎的任意一种处理的工序；之后进行溶液萃取而得到萃取液的工序。权利要求4涉及的本发明是提供权利要求1 3的任意一项所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述口服用组合物的制造方法包括下述工序使用乙醇或最终浓度为 55%以上的乙醇进行溶液萃取而得到萃取液的工序。权利要求5涉及的本发明是提供权利要求1 4的任意一项所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述口服用组合物的制造方法包括下述工序在得到上述萃取液之后用柱进行提纯的工序。权利要求6涉及的本发明是提供权利要求1 5的任意一项所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述口服用组合物是将牡荆素2" -0-α -D-呋喃阿拉伯糖苷和/或作为其水解物的牡荆素作为活性组分，并具有镇静作用和/或睡眠导入作用的物质。权利要求7涉及的本发明是提供包含通过权利要求1 6的任意一项所述的制造方法得到的口服用组合物的饮食品。权利要求8涉及的本发明是提供包含通过权利要求6所述的制造方法得到的口服用组合物的药剂。权利要求9涉及的本发明是提供含有牡荆素2" -Ο-α-D-呋喃阿拉伯糖苷作为活性组分，并具有镇静作用和/或睡眠导入作用的药剂。发明效果本发明能够将“容易得到”且“口服方面的安全性高”的植物作为原料，制造具有 “镇静和睡眠导入作用(优异的生理活性作用)”的口服用组合物。也就是说，在本发明中，由于作为活性组分的萃取原料使用作为叶菜能够容易地得到的白落葵，因此，原料的获取极其容易。另外，在口服方面安全性也高。另外，本发明的活性组分的化合物(黄酮类C-葡萄糖苷)，由于具有“对水的溶解性也高”、进而“作为配糖体难以分解而稳定性高”的性质，因此，在伴随有各种处理等的广泛的加工品中的应用也成为可能。另外，本发明能够制造包含上述口服用组合物的饮食品。另外，本发明能够制造包含上述口服用组合物的医药品。
图1是表示在实施例1中明确了的牡荆素2" -0-α -D-呋喃阿拉伯糖苷的结构的图。图2是表示实施例2中的牡荆素2 “ -0- α -D-呋喃阿拉伯糖苷的镇静和睡眠导入作用的图。
具体实施例方式以下，对本发明详细地进行说明。本发明涉及以使用白落葵(Basella alba)作为原料为特征的、含有牡荆素呋喃阿拉伯糖苷(Arabinofuranosyl vitexin)和/或作为其水解物的牡荆素的口服用组合物的制造方法，详细地说，涉及含有上述化合物作为活性组分的、具有镇静作用和/或睡眠导入作用的口服用组合物的制造方法。能够用于本发明的原料是属于落葵科落葵属植物的白落葵(Basella alba)。另外，只要是属于白落葵(Basella alba)种的物质，也可以使用任何品种、种系的物质(例如青茎种、红茎种)。作为用作本发明原料的白落葵的植物体部位，可以使用植物体的任何部分，但是， 从其含量方面来看优选地上部(主要为叶、茎)。另外，地上部(主要为叶、茎)是作为叶菜的白落葵的可食部分。另外，能够使用生的植物体、干物、加热处理品、冷冻品等，尤其优选使用生的植物体、干物。另外，在后述的萃取工序中使用“完全不含水的溶剂”(例如100%的乙醇等)的情况下，作为原料也优选使用不含水分的干物。在本发明的制造方法中，将上述作为原料的白落葵直接加以使用也可以，但优选对上述作为原料的白落葵进行切碎、碎片化、或捣碎的任意一种处理。该工序是包括将上述作为原料的白落葵稍大地切成若干碎片、切碎成细小的小片、粉碎、捣碎等广泛行为的工序。优选能够通过形成为稍大地切成1 数cm左右的状态进行。上述白落葵的地上部(原料)，以每干重约0.5 1.5质量％ (具体为约1质量％)这样的作为天然物非常高的含有率含有牡荆素呋喃阿拉伯糖苷(尤其是牡荆素 2" -0- α -D-呋喃阿拉伯糖苷 O”-0-α -D-Arabinofuranosyl vitexin))。因此，在本发明的口服用组合物的制造中，为了使其含有牡荆素呋喃阿拉伯糖苷， 只要使其含有上述白落葵的植物体原料(优选如上述那样进行了将其切碎、碎片化、或捣碎的任意一种处理后的物质)即可，例如，也可以将该原料(优选如上述那样进行了将其切碎、碎片化、或捣碎的任意一种处理后的物质)直接加以使用并含有而形成为组合物的形态。但是，从纯度方面考虑，在本发明的口服用组合物的制造中，优选进行溶液萃取而得到萃取液。溶液萃取工序也可以直接对上述原料进行，但在萃取效率方面进一步优选对上述原料进行了切碎、碎片化、或捣碎的任意一种处理后而得到的物质进行。溶液萃取工序中所使用的溶剂能够使用水、缓冲溶液、有机溶剂、或这些的含水溶剂。作为有机溶剂，例如可以举出乙醇、甲醇、异丙醇、丁醇之类的低级脂肪族醇，或丙酮、乙酸乙酯、氯仿等。在这些溶剂中同样，在萃取效率或操作容易度、安全性方面尤其优选水、乙醇或含水乙醇。另外，由于通过使用最终浓度为55%以上、优选最终浓度为60%以上、进一步优选最终浓度为80%以上的乙醇进行萃取，能够抑制作为杂质的多糖类的洗脱，从而能够提高牡荆素呋喃阿拉伯糖苷的萃取效率，因此尤其优选。作为萃取条件，能够通过相对于上述原料(优选碎片化物质)加入1 50倍量 (重量比)、优选2 15倍量的上述溶剂，并在0°C 溶剂沸点的温度条件、优选室温 溶剂沸点以下的温度下浸渍或振荡5分钟 1个月、优选20分钟 1周而进行萃取。得到的萃取液，通过冷冻干燥或利用蒸发器等使其干燥，能够形成为浓缩干物。另外，溶液萃取工序也可以利用多种不同的溶剂进行多次。尤其在用水或低浓度的含水乙醇进行了第一次萃取的情况下，通过接着进行使用了上述特定浓度以上的乙醇的萃取，能够使牡荆素2 “ -0- α -D-呋喃阿拉伯糖苷的萃取效率提高。该萃取也可以伴随有如下的反应，即，通过使用含有酶或酸(例如盐酸等)的溶剂 (水或缓冲溶液)进行萃取而进行从上述原料中萃取出的“牡荆素呋喃阿拉伯糖苷”的水解，从而将作为黄酮类C-葡萄糖苷(C-Glucoside flavonoid)的主体的“牡荆素”分离的反应。另外，利用酶或酸进行的水解处理，既可以在上述萃取工序之后作为独立的工序进行，也可以在后述的提纯工序后进行。通过上述得到的萃取液、或使该萃取液干燥而得到的浓缩干物能够直接形成为本发明的口服用组合物。另外，通过对这些进行提纯工序，能够进一步提高纯度。作为提纯工序，能够通过液-液分离萃取、或利用硅胶、化学修饰硅胶、活性炭、合成吸附树脂担体等进行的柱提纯(Column purification)，而进行高纯度化。作为例子，例举用于将“牡荆素2" -0-α -D-呋喃阿拉伯糖苷”高纯度化的提纯条件。
首先，将未进行上述水解处理的萃取液(具体为经过了最终浓度为60%以上的乙醇萃取后的萃取液)的“浓缩干物”的水溶性物质供给至利用水平衡化后的多孔性合成吸附树脂(具体为夕· ^ ^ > (DIAION)HP-20[三菱化学公司制造])的柱中。然后，将水洗脱的成分除去后，通过将利用15 30%乙醇(具体为约20%乙醇)洗脱的洗脱液回收， 能够得到高纯度化了的“含牡荆素2 “ -0- α -D-呋喃阿拉伯糖苷的组合物(提纯物)”。另外，通过在上述括号内所述的适宜条件下进行萃取和提纯，能够得到纯度80% 以上的含牡荆素2" -0-α-D-呋喃阿拉伯糖苷的组合物(提纯物)。另外，对于“具有其他分子结构的牡荆素呋喃阿拉伯糖苷”或“作为水解物的牡荆素”，除了乙醇的适宜范围与上述稍有不同之外，也能够通过与上述大致相同的操作来进行提纯。另外，如上述得到的含牡荆素呋喃阿拉伯糖苷的组合物(提纯物)或含有牡荆素的组合物(提纯物)，通过进一步供给至薄层色谱仪(TLC)(氯仿/甲醇/水 (65 25 4))、或20% (V/V)乙腈与水的混合溶剂的0DS_HPLC(十八烷基硅烷键合硅胶-高效液相色谱仪)中并采集目标峰值，能够将纯品单离、或将纯度显著地提高至被认为大致是纯品的程度(作为单离物而得到)。通过上述得到的“牡荆素呋喃阿拉伯糖苷(具体为牡荆素2〃 -Ο-α-D-呋喃阿拉伯糖苷参照下述化学式1)”、或“牡荆素(具体为8-β-D-吡喃葡萄糖苷-芹菜素(8- β -D-glucopyranosyl-apigenin)参照下述化学式2)，是黄酮类C-葡萄糖苷(C-Glucoside Flavonoid)(具有C-葡萄糖苷(C-Glucoside)骨架的黄酮类配糖体 (Flavonoid glycoside))的一禾中。这些由于糖苷配基与糖成分(構成糖，constituent sugar)的结合为C-糖苷 (C-glycoside)，因此是相对于加热、水解、酶等难以被分解且作为黄酮类配糖体稳定性高的化合物。另外，这些由于是配糖体，因此具有水溶解性，尤其是牡荆素呋喃阿拉伯糖苷的水溶解性优异。
权利要求
1.一种口服用组合物的制造方法，所述口服用组合物含有牡荆素呋喃阿拉伯糖苷和/ 或作为其水解物的牡荆素，其特征在于，使用白落葵(Basella alba)作为原料。
2.如权利要求1所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述牡荆素呋喃阿拉伯糖苷是牡荆素2" -0-α-D-呋喃阿拉伯糖苷。
3.如权利要求1或2所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述口服用组合物的制造方法包括下述工序对上述作为原料的白落葵进行切碎、碎片化、或捣碎的任意一种处理的工序；之后进行溶液萃取而得到萃取液的工序。
4.如权利要求1 3的任意一项所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述口服用组合物的制造方法包括下述工序使用乙醇或最终浓度为55%以上的乙醇进行溶液萃取而得到萃取液的工序。
5.如权利要求1 4的任意一项所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述口服用组合物的制造方法包括下述工序在得到上述萃取液之后用柱进行提纯的工序。
6.如权利要求1 5的任意一项所述的口服用组合物的制造方法，其中，上述口服用组合物是将牡荆素2" -O-α -D-呋喃阿拉伯糖苷和/或作为其水解物的牡荆素作为活性组分的、具有镇静作用和/或睡眠导入作用的物质。
7.一种饮食品，其包含通过权利要求1 6的任意一项所述的制造方法得到的口服用组合物。
8.—种药剂，其包含通过权利要求6所述的制造方法得到的口服用组合物。
9.一种药剂，其含有牡荆素2" -0-α-D-呋喃阿拉伯糖苷作为活性组分，并具有镇静作用和/或睡眠导入作用。
全文摘要
本发明的目的在于，从容易得到且在口服方面安全性高的植物中，发现大量含有具有优异的生理活性作用的黄酮类C-葡萄糖苷的植物，并制造含有上述黄酮类C-葡萄糖苷作为活性组分的口服用组合物(尤其是饮食品、医药品)。本发明提供口服用组合物的制造方法，所述口服用组合物含有牡荆素呋喃阿拉伯糖苷和/或作为其水解物的牡荆素，并具有镇静作用和/或睡眠导入作用，其特征在于，使用白落葵(Basella alba)作为原料；包含通过上述制造方法得到的口服用组合物的饮食品；以及包含通过上述制造方法得到的组合物的具有镇静作用和/或睡眠导入作用的药剂。
文档编号A23L1/30GK102387806SQ201080016900
公开日2012年3月21日 申请日期2010年3月8日 优先权日2009年4月10日
发明者草野崇一 申请人:富士产业株式会社