专利名称：防治生姜青枯病的生防菌株3yw8的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种防治温室生姜青枯病的生防菌株3YW8，属于植物保护技术领域，专用 于生姜青枯病的无公害防治。背景技术：
生姜青枯病俗称“姜瘟病，，，是由茄科劳尔氏菌(Malstonia soIanacearum)^\起的一种 细菌性病害。这种土传病原菌主要分布于热带亚热带，其寄主范围十分广泛，可以侵染50 多个科300多种作物。该病原菌主要由土壤传播，根部侵染后在维管束中大量繁殖造成维 管束的堵塞，影响寄主作物的水分运输，从而造成萎蔫死亡。这种病害由于地理分布范围 广，寄主范围广，所以一旦侵染非常容易造成毁灭性打击，到目前为止还没有有效的防治手 段。生姜是我国重要的经济作物，姜瘟病在20世纪50年代既有报道，近年来发病趋势 逐渐严重，据调查，田间一般发病株率为10% 20%，重病田高达30% 40%，局部地块甚 至绝产失收。而且由于发病降低品质，造成了严重的经济损失。长期以来，国内外对姜瘟病的防治多从农业防治和化学防治出发，防治效果不 明显，而且造成了一定程度的环境污染。因此，生物防治由于其自身的优点开始受到越来 越多的重视。综上所述，开发新的、更为高效和安全的微生物杀菌剂控制姜瘟病的发生是提 高社会生产总量的需要，同时更是农业安全可持续发展的需要，符号社会发展需求。
三
发明内容
1技术问题
针对现有技术中没有对生姜青枯病有较高防效的生防制剂的现状，提供开发一种防治 生姜青枯病的单一生防菌菌株及其菌剂，该菌剂对这种重要土传病害的防效可以达到50% 以上。技术方案
防治温室生姜青枯病的生防菌株3YW8，为拟气味类香菌菌O^roiife1S odoratiminius), 于2010年8月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市 朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC NO. 4042。生防菌株3YW8用于制备生防菌剂的方法为
将上述生防菌株3YW8在LB培养液180 rpm振荡培养12-16 h，然后6000 rpm离 心10 min，然后6000 rpm离心10 min，用灭菌水进行稀释制成菌剂，菌剂成品中活菌总浓 度为 IXlO9 -IXlO10 CFU/mL。上述生防菌剂在防治生姜青枯病方面的应用方法为3YW8菌株制剂在作物移栽 前浸种使用半小时，或者每亩9升3YW8菌株制剂，稀释100倍后在移栽时灌根使用。
3有益效果本发明的优点和积极效果表现在本发明是专门针对生姜青枯病开发的生防制剂。由 于是生物制剂，完全没有因化学农药的使用所带来的一系列问题，因而有利于蔬菜的无公 害生产，农民可以不用或减少其他化学农药的用量，这不仅可为农民节省开支，而且有利于 蔬菜的出口。同时，该菌剂还有增产功能，可为农民增加收入。温室实验表明该菌制剂能显著降低生姜上青枯病的发生。该菌剂可以稀释100 倍后在生姜种植时浸种处理姜块，或者在移栽时灌根处理。在温室条件下对于生姜青枯病 的防效可以达到53. 36% (表1)。四
具体实施例方式
1 3YW8生防菌剂的制备
本发明涉及一种防治生姜青枯病的生防菌株3YW8，为2008年在山东莱芜生姜病田健 株上分离得到。将上述生防菌株3YW8在LB培养液180 rpm振荡培养12-16 h，然后6000 rpm离心10 min，然后6000 rpm离心10 min，用灭菌水进行稀释制成菌剂，菌剂成品中活菌 总浓度为 1 X IO9 -1 X 101° CFU/mL。
2温室盆钵试验检测3YW8生防菌剂对生姜青枯病的防效
移栽之前，用生防菌3YW8 (IO7 CFU/mL)浸种处理姜块30min;移栽时采用20mL IO7 CFU/mL菌剂灌根处理，移栽一周后接种IO7 CFU/mL青枯菌Tfe/sioflia solanacearum 3721 (J G Li ete厶2008)菌悬液20mL。另外不用生防菌3YW8处理，直接接种青枯菌处理的作 为对照处理。每个处理组M株，三次重复。在温度25 28°C，相对湿度40%，光照12h/12h 条件下，培养4周后调查病级数，计算病害严重度和防效。按照Kempe和kqueria 1983年提出的病害分级标准，病害严重度和防效的计算 公式如下
DI 0，无发病；
DI 1，<25%的叶片萎蔫;
DI 2,25 - 50%的叶片萎蔫；
DI 3，50 - 75%的叶片萎蔫；
DI 4，75 - 100% 的叶片萎蔫(Kempe and Sequeria, 1983)。
权利要求
1.一种防治温室生姜青枯病的生防菌株3YW8，为拟气味类香菌Qiyroides odomtimimus),干2QYQ年8月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中 心，菌种保藏号为CGMCC NO. 4042。
2.用权利要求1所述防治温室生姜青枯病的生防菌株3YW8制备的生防菌剂。
3.用权利要求1所述防治温室生姜青枯病的生防菌株3YW8制备生防菌剂的方法，其特 征在于将权利要求1所述防治温室蔬菜生姜青枯病的生防菌株3YW8在LB培养液180 rpm振荡培养12-16 h，然后6000 rpm离心10 min，用灭菌水进行稀释制成菌剂，菌剂成品 中活菌总浓度为1 X IO9 -1 X 101° CFU/mL。
4.权利要求2或3所述生防菌剂在防治生姜青枯病方面的应用。
全文摘要
本发明涉及一种防治温室生姜青枯病的生防菌株3YW8，属于植物保护技术领域。3YW8菌株在LB培养液28℃180rpm振荡培养12-16小时，然后6000rpm离心10min，其菌剂成品中活菌总浓度为1×109-1×1010CFU/mL，稀释10-100倍后在生姜种植时浸种处理，或者在移栽时进行灌根处理，对生姜青枯病的防效在59.68%。
文档编号C12N1/20GK102146350SQ20111000471
公开日2011年8月10日 申请日期2011年1月12日 优先权日2011年1月12日
发明者杨威, 郭坚华 申请人:南京农业大学