专利名称：一种裂褶菌菌种保藏方法
技术领域：
本发明属于农业技术领域，具体涉及一种裂褶菌菌种保藏方法。
背景技术：
WMMiSchizophylIum commune Fr.)是一种具重要应用价值的经济真菌，已进行人工栽培。该菌的应用价值主要表现在食用和药用方面。此外，该菌含有较强活性的纤维素酶，并能产生苹果酸，菌丝深层发酵时可产生大量有机酸，还可产生植物生长调节剂吲哚乙酸等，在食品工业、医药卫生、生物化学等方面也具有较广泛的应用价值。菌种是重要的生物资源，是菌类及其相关产品生产的重要生产资料，也是菌类科研、教学上的重要材料。菌种保藏即在人为创造的条件下，使菌种的新陈代谢活动处于不活泼状态，从而较长时间地保持菌种的生命力和原有性状。裂褶菌的菌种保藏是从事裂褶菌栽培、菌种生产经营和相关教学、科研单位的一项重要工作。关于裂褶菌及其它丝状真菌的菌种保藏，过去常用的保藏方法有
1、斜面低温保藏法这是菌种保藏最常用的方法。即将着生于试管斜面培养基上的菌丝体置于4 6°C的冰箱中保存。这种保藏方法需要每4 6个月移植转管一次，即每隔 4 6个月需将保藏的菌种转接在新的试管斜面培养基上，待菌种在新的试管斜面培养基上生长到合适的状态时再置于4 6°C的冰箱中保存。2、石蜡保藏法(即矿物油保藏法)在着生有菌丝体的试管斜面上注入一层无菌的液体石蜡，使菌丝体与空气隔绝，以降低代谢活性，从而达到保藏的目的。此法一般可保藏2 3年，但最好1 2年移植一次。这种保藏方法也可以在室温下保藏菌种。使用这种保藏方法保存的菌种时，可用接种铲直接挑取少许菌丝，接种于另一斜面培养基上。刚从液体石蜡菌种中移出的菌丝体，常沾有较多的石蜡，生长较弱，需再转管1次，方能恢复正常。3、自然基质保藏法根据培养菌丝体的基质不同，可进一步分为麸皮保藏法、木屑保藏法和麦粒保藏法等。即将菌丝体培养在麸皮、木屑和麦粒等自然基质为主要原料配成的培养基上，然后在冰箱中或常温下保存，其保存时间一般不超过2年。
发明内容
本发明的目的在于提供一种常温下能长期保持裂褶菌菌种生命力的裂褶菌菌种保藏方法。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案，一种裂褶菌菌种保藏方法，包括如下步骤
(1)先将裂褶菌的试管斜面菌种接种到瓶装或袋装的木屑培养基上，培养成裂摺菌木屑菌种；
(2)在段木上打孔；
(3)将培养好的裂褶菌木屑菌种接种到段木上的孔中，封住孔口；
(4)按照段木栽培食用菌的常规方式对接种后的段木进行管理，使段木上长出裂褶菌子实体；
(5)待段木上长出的裂褶菌子实体覆盖段木表面15% 35%时，把长有裂褶菌子实体的段木移到干燥通风的环境中，使其自然干燥；
(6)将制好的裂褶菌保藏菌种保存于室内自然条件下。裂褶菌木屑菌种接种到段木上的孔中后，孔口用树皮盖或蜡封住。裂褶菌可生长在许多树种的枯木上，故制作裂褶菌保藏菌种可以选用很广泛树种的枝干作段木，为便于长期保藏，可选用栎、苹果、梨、桃等材质较硬树种的枝干作段木。段木的大小视保藏位置的空间而定，一般可选择直径IOcm左右的枝干，截成50cm左右的长度，段木的准备过程和干湿度控制，同食用菌栽培所用的段木。用电钻或打孔器在段木上打孔，孔在段木上以三角形排列，行距7cm左右，孔距 20cm左右，孔径Icm左右，深度1. 5cm左右。在段木上打孔，目的是为了将木屑菌种接种于孔中，让段木上生出作为保藏菌种的子实体，其他具有相同作用的洞、穴等，均应视作孔的替代形式；段木上孔的排列方式，不影响菌种保藏的效果。为了长久保持裂褶菌子实体的生命力，作为保藏菌种的子实体要着生于段木上， 连同段木一起保藏，而不可从段木上采下来单独保藏。本发明保藏方法可保持裂褶菌菌种的生命力20年以上。段木栽培食用菌的常规方式比较粗放、简单，各地采用的方法也不太一致，但都能达到一定的效果，故本发明步骤(4)中对段木栽培食用菌的具体方法不做特殊要求。用本发明方法保存的菌种进行生产或扩大繁殖时，先从段木上采下所需数量的裂褶菌子实体，在子实体被面(无菌褶的面)喷水雾，使子实体吸收水分舒展开来，然后按照孢子弹射分离法获得菌丝体菌种供生产或扩大繁殖使用。接种和培养基制作均遵循微生物实验的无菌操作要求。本发明裂褶菌菌种保藏方法的优点为1、本方法保藏的菌种是处于干燥状态的休眠子实体，能保持菌种生命力长达数十年(20年以上)；2、本发明保藏方法不需要特殊的保藏设备，存放于室内的标本柜中即可；3、本发明保藏方法保藏的菌种同时具有标本的作用， 可直接反映出用该菌种生产出子实体的性状。
具体实施例方式实施例1采用本发明的方法保存裂褶菌菌种的方法如下所述
(1)先用裂褶菌的试管斜面菌种接种到袋装的木屑培养基上，培养成裂摺菌木屑菌
种；
(2)在段木上用电钻打孔，孔在段木上以三角形排列，行距7cm，孔距20cm，孔径1cm，深度 1. 5 cm ；
(3)将培养好的裂褶菌木屑菌种接种到段木上的孔中，孔口用蜡封住；
(4)按照段木栽培食用菌的常规方式对接种后的段木进行管理，使段木上长出裂褶菌子实体；
(5)待段木上长出的裂褶菌子实体覆盖段木表面25%时，不再采取保湿措施，并把长有裂褶菌子实体的段木移到干燥通风的环境中，使其自然干燥，以这种着生于干燥段木上的裂褶菌子实体作为保藏菌种；
(6)将制好的裂褶菌保藏菌种保存于室内自然条件下。
权利要求
1.一种裂褶菌菌种保藏方法，其特征在于，该方法包括如下步骤(1)先将裂褶菌的试管斜面菌种接种到木屑培养基上，培养成裂摺菌木屑菌种；(2)在段木上打孔；(3)将培养好的裂褶菌木屑菌种接种到段木上的孔中，封住孔口 ；(4)对接种后的段木进行管理，使段木上长出裂褶菌子实体；(5)待段木上长出的裂褶菌子实体覆盖段木表面15% 35%时，将段木移到干燥通风的环境中，使其自然干燥；(6)将制好的裂褶菌保藏菌种保存于室内自然条件下。
2.根据权利要求1所述的裂褶菌菌种保藏方法，其特征在于，步骤(3)所述封住孔口是用树皮盖住或用蜡封住孔口。
全文摘要
本发明属于农业技术领域,具体涉及一种裂褶菌菌种保藏方法。该方法如下所述(1)先用裂褶菌的试管斜面菌种接种到木屑培养基上，培养成木屑菌种；(2)在段木上打孔；(3)将培养好的裂褶菌木屑菌种接种到段木上的孔中，封住孔口；(4)按照常规方式对接种后的段木进行管理，使段木上长出裂褶菌子实体；(5)待段木上长出的裂褶菌子实体覆盖段木表面15%～35%时，将其移到干燥通风的环境中，使其自然干燥；(6)将制好的裂褶菌保藏菌种保存于室内自然条件下。该方法可长期保持裂褶菌菌种的生命力，且不需要特殊的保藏设备，常温自然条件保存即可。
文档编号C12N1/04GK102154109SQ201110054518
公开日2011年8月17日 申请日期2011年3月8日 优先权日2011年3月8日
发明者侯军, 崔林开, 李永丽, 林晓民, 王少先 申请人:河南科技大学