专利名称：一类苝醌类化合物及其提取分离方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一类新的茈醌类化合物及其提取分离方法与应用，尤其涉及一类新茈醌类化合物(I-VI)及其由蜈蚣衣属植物地衣的内生真菌(Phaeosphaeria sp.)发酵液中提取分离的方法与其在制备抗真菌和抗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
茈醌类化合物除少数来自昆虫体内，大多数来是自真菌的次级代谢产物，在结构上是一类聚合的二萘酮类化合物，存在旋阻异构和许多手性中心，通常根据真菌来源命名；到目前为止，已从真菌代谢产物中分离获得茈醌类化合物10多个，常以茈醌母核的取代和来源的差异分为三种结构类型，即=C20 Compounds, Mold Perylenequinones， Aphid Perylenequinones (Carol A. Mulrooney, Barbara J.Morgan, Xiaolin Li, Marisa C. Kozlowski. Perylenequinonenatural products :enantioselective synthesis of the oxidized pentacyclic core. J. Org. Chem. 2010,75(1) 16-29.).目前，天然抗真菌，抗肿瘤化合物已经成为人们开发新药以及利用天然原料提取新药的重要来源，因此人们正在不断寻找活性较好，结构新颖的新型天然化合物。茈醌类化合物是天然的光敏化合物，具有较好的光敏杀伤作用，在抗肿瘤，抗菌，抗病毒方面，甚至食品和材料领域有较好的应用前景。因此，寻求新的茈醌类化合物迫在眉睫。
发明内容
针对上述现有技术，本发明要解决的问题是提供一类新的茈醌类化合物I-VI，及其由蜈蚣衣属植物地衣的内生真菌(Phaeosphaeria sp.)发酵液中提取分离的方法与其在制备抗真菌药物和抗肿瘤药物中的应用。本发明是通过以下技术方案实现的一类新的茈醌类化合物，包括下述通式(I-VI)的化合物
权利要求
1.下述通式(I-VI)的茈醌类化合物
2.权利要求1所述的茈醌类化合物的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤(1)制备真菌发酵液将蜈蚣衣属植物地衣的内生真菌在PDA培养基上25°C斜面培养 15天；然后取真菌菌落转染到锥形瓶中，每个锥形瓶中含有200ml的PDB，在22°C条件下， IlOrpm的摇床上培养7天；取IOml的发酵液加入到含有200ml PDA培养基的锥形瓶中，在 22°C条件下，IlOrpm的摇床上培养30天，得到真菌发酵液；(2)制备氯仿总提物将上述所得真菌发酵液减压过滤，过滤液在旋转蒸发仪50°C，真空度9. Ombar条件下，减压浓缩至相对密度115，用一倍量的氯仿(体积比)萃取5次，收集，合并氯仿萃取液，于50°C条件下旋转蒸除氯仿后得氯仿总提物；(3)分离将上述氯仿总提物用其1.5倍量的200 300目的硅胶拌样，进行硅胶柱层析，以石油醚-丙酮系统按常规比例梯度洗脱，在石油醚丙酮为20 1的洗脱部分用聚酰胺薄膜检测，展开剂为丙酮水=1 1，可见光下观察并以常规方法进行合并和浓缩得两部分黄色浸膏A和B;在石油醚丙酮为10 1的洗脱部分用聚酰胺薄膜检测，展开剂为丙酮水=1 1，可见光下观察并以常规方法进行合并和浓缩得黄色浸膏C ；在石油醚 丙酮为1 1的洗脱部分用聚酰胺薄膜检测，展开剂为丙酮水=1 1，可见光下观察并以常规方法进行合并和浓缩得黄色浸膏D ；(4)纯化将上述浸膏A进行S^hadexLH-20层析，先用氯仿甲醇=1 1的溶液洗脱，然后再用纯甲醇溶液洗脱，可见光下以常规方法合并和浓缩黄色流份，进行HPLC纯化， 得到化合物I和化合物II ；上述浸膏B进行S^hadex LH-20层析，以纯甲醇溶液洗脱，可见光下以常规方法合并和浓缩黄色流份，进行HPLC纯化，得到化合物V和化合物VI ；上述浸膏C进行Sephadex LH-20层析，以纯甲醇溶液洗脱，可见光下以常规方法合并和浓缩黄色流份，进行HPLC纯化，得到化合物III ；上述浸膏D进行进行S印hadex LH-20层析，以纯甲醇溶液洗脱，可见光下以常规方法合并和浓缩黄色流份，进行HPLC纯化，得化合物IV。
3.根据权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于所述PDA培养基的组成为2% 葡萄糖，20%土豆，1.8%琼脂，余量为水。
4.根据权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于所述PDB培养基的组成为2% 葡萄糖，20%土豆，余量为水。
5.根据权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于所述HPLC是安捷伦1100高效液相色谱，其中泵为Agilent 1100G1310A泵，脱气装置为Agilent 1100G1322脱气装置，检测器为 Agilent 1100G1314AVWD，检测波长为 210nm，反相柱为 ZORBAX SB-C18 5ym C18 反相柱，柱外径和长度为9. 4X 250mm。
6.根据权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于所述步骤(3)中，石油醚-丙酮系统为体积比从100 0到0 1。
7.权利要求1所述的茈醌类化合物在制备抗菌药物中的应用。
8.权利要求1所述的茈醌类化合物在制备抗真菌药物中的应用。
9.权利要求1所述的茈醌类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
10.权利要求1所述的茈醌类化合物在制备光敏抗肿瘤药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一类新的苝醌类化合物，包括通式I-VI)的化合物本发明的苝醌类化合物是由蜈蚣衣属植物地衣的内生真菌(Phaeosphaeria sp.)发酵液中提取分离得到的，其纯度达98％以上，抗菌活性实验表明部分化合物具有较好的抗真菌作用，抗肿瘤活性实验表明该类化合物具有较好的抗肿瘤作用，在加入光照条件下，表现出明显的光敏杀伤肿瘤细胞作用。在目前药物耐药严重的环境下，采用本发明的化合物I-VI具有良好的开发、利用和发展前景，同时也为研究开发新的抗真菌和抗肿瘤药物提供先导化合物开辟了一个新的途径。
文档编号C12P17/18GK102219768SQ20111010096
公开日2011年10月19日 申请日期2011年4月21日 优先权日2011年4月21日
发明者娄红祥, 李刚 申请人:山东大学