专利名称：一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的工艺的制作方法
一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的工艺
技术领域：
本发明涉及一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的工艺。背景技术：
乙醇脱氢酶(Alcohol dehydronose, EC 1. 1. 1. 1，缩写ADH)属氧化还原酶类，是体内一种含Zn的金属酶，它在乙醇代谢途径中起着关键酶的重要作用。催化反应如下
ADH
权利要求
1.一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，包括以下步骤1)混合液将CBP液和α-淀粉酶液按体积比为5 1-2混合均勻，得混合溶液；取啤酒酵母和上述混合液置反应罐中，搅拌均勻；2)在搅拌下调ρΗ值至6.5-7. 5，在37-42°C条件下搅拌反应23h_25h，得酶解啤酒酵母液；3)上述酶解啤酒酵母液经离心、超滤浓缩，得浓缩液；4)上述浓缩液经干燥得乙醇脱氢酶酶粉。
2.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，所述步骤1) 的α-淀粉酶液由以下方法制得混合步骤3)的残渣和步骤4)的残渣得混合物，将所述混合物加入ΡΗ6. 0-pH7. 0、0. 01mol/L磷酸缓冲液，混合物的质量g与磷酸缓冲液的体积ml之比为1 2，搅拌0.5h，经离心、超滤浓缩，得α-淀粉酶液。
3.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，步骤2)中的所述啤酒酵母为废弃啤酒酵母泥，即生产啤酒后过滤出的啤酒酵母。
4.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的工艺，其特征在于，步骤1)中，所述啤酒酵母的质量g与混合溶液的体积ml之比为1 2。
5.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，所述步骤3) 具体包括301)上述酶解啤酒酵母液抽入离心机，经1200-1500r/min常温离心收集上清液，残渣压滤再收集上清液，合并两次上清液，残渣保留备用；302)上述合并上清液抽入离心机，经14000-17000r/min常温离心收集上清液，残渣保留备用；303)将步骤302)所得的上清液经超滤浓缩，得浓缩液。
6.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，所述步骤4) 具体为，上述浓缩液转入冷冻干燥机中冷冻干燥，或用_15°C以下的冷丙酮洗涤脱水干燥， 得乙醇脱氢酶酶粉。
全文摘要
本发明涉及一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，包括以下步骤1)混合液将CBP液和α-淀粉酶液按体积比为5∶1-2混合均匀，得混合溶液；取啤酒酵母和上述混合液置反应罐中，搅拌均匀；2)在搅拌下调pH值至6.5-7.5，在37-42℃条件下搅拌反应23h-25h，得酶解啤酒酵母液；3)上述酶解啤酒酵母液经离心、超滤浓缩，得浓缩液；4)上述浓缩液经干燥得乙醇脱氢酶酶粉。本发明的原料获取简单，制备设备简单、过程操作简单且时间不长。
文档编号C12N9/04GK102206615SQ20111010745
公开日2011年10月5日 申请日期2011年4月27日 优先权日2011年4月27日
发明者徐凤彩, 程京燕, 胡永刚, 苏保荣 申请人:珠海市御品堂生物科技有限公司