专利名称：一种细胞培养池的制作方法
技术领域：
本实用新型属于生物技术领域，具体涉及生物科学研究中用于培养细胞的培养容器，尤其是在同一容器中能先隔离培养两种不同细胞使其分别贴壁生长形成细胞群，而后使两细胞群继续延伸生长直至相互接触并形成明显细胞交界区的细胞培养池。
背景技术：
目前，生物科学研究中用于培养细胞的培养瓶、培养板、培养池、培养皿等细胞培养容器的底部均为平面，当研究人员接种某种细胞于培养容器中时，由于接种入的细胞是与液态的培养基一同注入培养容器中，细胞在培养基中处于悬浮状态，故接种入培养容器的细胞将均勻地随着液态的培养基分布于整个容器范围，静置一段时间后根据接种入的细胞种类的不同，有的种类的细胞将贴壁生长，有的种类的细胞将悬浮生长，贴壁生长的细胞将均勻分布并贴附于容器底部，悬浮生长的细胞将均勻分布于容器里的培养基中。当只需要研究一种细胞的特性时，一个培养容器中只需培养一种待研究的细胞，研究人员使用常用的平底型细胞培养容器就能达到研究目的。但是当需要研究两种不同种类的细胞之间的相互作用时，如果在常用的平底型细胞培养容器中直接接种入这两种待研究的细胞，那么两种细胞将相互混勻并均勻地分布于培养容器中，使得研究者只有可能得到两种不同种类的细胞相互混勻生长时的情况，而无法得到两种细胞先分别独立生长为细胞群再继续生长直至相互接触并形成的一个明显的细胞群交界区的情况。也就是说，使用常用的平底型细胞培养容器无法研究两细胞群交界区处细胞之间相互接触时的生物学行为情况，局限了细胞生物学研究。
实用新型内容为了达到使两种不同种类的细胞先分别独立生长为细胞群，然后继续生长直至相互接触并形成的一个明显的细胞群交界区，且便于进一步观察两种细胞群交界处的细胞生物学行为情况的目的，本实用新型提供一种细胞培养池，能够在同一容器中实现使两种不同种类细胞在接种初期分别独立生长为细胞群而后继续生长至相互接触的要求，并能得到明显的细胞群交界区，便于研究者观察两种细胞群交界区细胞之间相互作用时的生物学行为情况。本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是该培养池设计为一由侧壁和底壁构成的容器状结构。在侧壁的顶端分布有数个向外伸展的侧翼，用来搁于六孔板各孔口的边缘处，以便于取放。底壁由位于底壁中部的平台部和位于该平台部两侧的弧面及斜坡状平面构成。位于底壁中部的平台部为供两细胞群形成细胞交界处的区域，将其设计为平面，是为了便于研究者直接于显微镜下观察细胞交界区的细胞生物学行为。平台部与斜坡状平面之间设置有弧面，即以弧面平滑连接平台部和斜坡状平面。 以弧面连接是为了利于细胞从平台部两边的斜坡状平面爬行延伸生长至平台部。[0007]平台部两侧的斜坡状平面向外下方延伸至侧壁底端并与侧壁相连接。两侧的斜坡状平面分别为两种细胞贴壁生长并形成细胞群的区域。斜坡状平面与侧壁所成的夹角范围是30度到75度。该角度范围设计利于接种初期细胞的隔离生长以及后期细胞群向平台部的延伸生长。以上结构设计中位于平台部两侧的弧面及斜坡状平面均关于平台部的长轴对称。 细胞培养池侧壁和底壁之间严密接合或整个细胞培养池一体化成型以保证不漏水。当接种入两种不同种类的细胞时，一种细胞接种于平台部的一侧，另一种细胞接种于平台部的另一侧，液体培养基的液面高度不超过平台部，这样两种细胞即可隔离生长。 将培养池置入六孔细胞培养板中以保持无菌，并放入细胞培养箱中培养。当两种细胞均贴壁生长为细胞群后，增加培养基的量，使培养基液面升至略高于平台部，则两种细胞群均会向平台部生长延伸，当两细胞群生长至在平台部相互接触时，即可通过免疫细胞化学染色技术处理并在显微镜下观察其交界区处两种细胞相互作用时的生物学行为情况，并与非交界区的细胞进行对比。本实用新型的有益效果是能够在同一容器中实现使两种不同种类细胞在接种初期分别独立生长为贴壁的细胞群，而后继续生长直至两群细胞相互接触的要求，并能得到明显的细胞群交界区，便于研究者观察两种细胞群交界区处细胞相互作用时的生物学行为。特别适合肿瘤细胞侵袭正常组织细胞的细胞生物学模型和免疫细胞杀伤肿瘤细胞的细胞生物学模型的建立。结构简单，便于批量生产。
以下结合附图和实施例对本实用新型进一步说明。图1是细胞培养池第一个实施例的整体结构图(根据机械制图规范，图中线代表所标示面为曲面，不代表任何实体结构)。图2是细胞培养池第一个实施例垂直于平台部4长轴的纵剖面结构图。图3是图2的A-A，剖视图。图4是细胞培养池第一个实施例过平台部4长轴的纵剖面结构图。图5是图4的B-B，剖视图。图6是细胞培养池第二个实施例的整体结构图。图7是细胞培养池第二个实施例垂直于平台部4长轴的纵剖面结构图。图8是图7的C-C’剖视图。图9是细胞培养池第二个实施例过平台部(4)长轴的纵剖面结构图。图10是图9的D-D，剖视图。
具体实施方式
实施例1在图1所示实施例1中，该细胞培养池设计为一圆柱状容器，材料为无色高透明度晶体级聚苯乙烯。容器内径30mm，侧壁1高度16mm，侧壁1厚度1mm，可置入普通六孔细胞培养板中。侧壁1顶端均勻分布有3个向外平行伸展的侧翼3，侧翼长2mm，宽2mm，厚1mm。 容器底壁2厚度为1mm，底壁2由位于底壁2中部的平台部4和位于该平台部4两侧的弧面5及斜坡状平面6构成。平台部4为一水平平面，宽3mm，其长轴方向与侧壁1相连接。平台部4与斜坡状平面6之间设置有弧面5，即以弧面5平滑连接平台部4和斜坡状平面6， 该弧面5弧度为0. 394。平台部4两侧的斜坡状平面5向外下方延伸至与侧壁(1)相连接， 斜坡状平面5与侧壁1所成的夹角为67. 4度。整个细胞培养池一体化成型。本实施例的使用方法是当接种入两种不同种类的细胞时，一种细胞接种于平台部4的一侧，另一种细胞接种于平台部4的另一侧，液体培养基的液面高度不超过平台部4， 这样两种细胞即可隔离生长。将培养池置入六孔细胞培养板中以保持无菌，并放入细胞培养箱中培养。当两种细胞均贴壁生长为细胞群后，增加培养基的量，使培养基液面升至略高于平台部G)，则两种细胞群均会向平台部(4)生长延伸，当两细胞群生长至在平台部相互接触时，即可通过免疫细胞化学染色技术处理并在显微镜下观察其交界区处两种细胞相互作用时的生物学行为情况，并与非交界区的细胞进行对比。本实施例的有益效果是能够在同一容器中实现使两种不同种类细胞在接种初期分别独立生长为贴壁的细胞群，而后继续生长直至两群细胞相互接触的要求，并能得到明显的细胞群交界区，便于研究者观察两种细胞群交界区处细胞相互作用时的生物学行为。 特别适合肿瘤细胞侵袭正常组织细胞的细胞生物学模型和免疫细胞杀伤肿瘤细胞的细胞生物学模型的建立。结构简单，便于批量生产。实施例2在图6所示实施例2中，该细胞培养池设计为一正四棱柱状容器，材料为无色透明的玻璃。四棱柱状侧壁1边长20mm，侧壁1高度10mm，侧壁1厚度1mm，可置入普通六孔细胞培养板中。侧壁1顶端的4个角处分别有4个向外平行伸展的侧翼3，侧翼3长2mm，宽 2mm,厚1mm。容器底壁2厚度为1mm，底壁2由位于底壁2中部的平台部4和位于该平台部 4两侧的弧面5及斜坡状平面6构成。平台部4为一长方形水平平面，宽3mm长20mm。平台部4与斜坡状平面6之间设置有弧面5，即以弧面5平滑连接平台部4和斜坡状平面6， 该弧面5弧度为0. 358。平台部4两侧的斜坡状平面5向外下方延伸至与侧壁1相连接，斜坡状平面5与侧壁1所成的夹角为69. 5度。细胞培养池各部分之间严密接合。本实施例的使用方法与有益效果与实施例1相同。
权利要求1.一种细胞培养池，由侧壁⑴和底壁⑵构成的容器状结构，其特征在于，在侧壁 (1)的顶端分布有向外伸展的侧翼(3)，底壁(2)由位于底壁(2)中部的平台部⑷和位于该平台部(4)两侧的弧面( 及斜坡状平面(6)构成。
2.根据权利要求1所述的细胞培养池，其特征在于，底壁( 中部的平台部(4)为一水平平面，平台部(4)与斜坡状平面(6)之间设置有弧面(5)，即以弧面( 平滑连接平台部 (4)和斜坡状平面(6)。
3.根据权利要求1所述的细胞培养池，其特征在于，位于底壁(2)中部的平台部(4)两侧的斜坡状平面(6)向外下方延伸至至侧壁(1)底端并与侧壁(1)相连接。
4.根据权利要求1或2所述的细胞培养池，其特征在于，斜坡状平面(6)与侧壁(1)所成的夹角范围是30度到75度。
5.根据权利要求1或2所述的细胞培养池，其特征在于，该细胞培养池由无色透明的塑料或玻璃制成。
专利摘要一种细胞培养池，能够在同一容器中实现使两种不同种类细胞先分别独立生长为细胞群，而后生长至两群细胞相互接触形成细胞交界区要求的细胞培养池。它是一种透明容器，包括侧壁(1)和底壁(2)，侧壁(1)的顶端分布有数个向外伸展的侧翼(3)，底壁(2)由位于底壁(2)中部的平台部(4)，位于该平台部(4)两侧的弧面(5)和斜坡状平面(6)构成。研究人员分别接种两种细胞于平台部(4)两侧，培养基液面须低于平台部(4)，两种细胞即可隔离生长，待细胞贴壁形成细胞群后，加培养基至平台部(4)以上，两种细胞即向拱顶平面生长延伸，当两细胞群生长至相互接触时，即可于显微镜中观察拱顶平面细胞交界处两种细胞相互作用时的生物学行为情况。
文档编号C12M3/04GK202220173SQ20112028768
公开日2012年5月16日 申请日期2011年8月9日 优先权日2011年8月9日
发明者李挥力, 王国斌, 王继亮, 陶凯雄, 黄坤 申请人:华中科技大学同济医学院附属协和医院