专利名称：具有减重功能的饮食品组成物的制作方法
技术领域：
本发明与具有减重功能的饮食品组成物有关，特别是指一种由胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus pi ant arum)及野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)组成的饮食品组成物。
背景技术：
目前市售的乳酸菌产品主要诉求为整肠及过敏，近年来也有部分厂商宣称乳酸菌具有减肥效果，但并无实际具公信力研究单位的实验数据左证，多数以明星或民众代言方式营销于社会大众。此外，市售的乳酸菌产品皆有搭配其他健康食品成分，例如:山茶花、绿茶、甲壳素、芦荟、红曲或寡糖等天然物成分，用以加强诉求功能的效果，但此复合配方中的有效活性成份正如药物的交互作用一样，也会发生竞争与抑制作用，而可能导致产品效果增强、减弱，甚至无效的情形。再者，异常的血脂肪是造成心脏血管疾病及粥状动脉硬化的主因之一(Hunninghake, 2001),此外，三酸甘油酯(Triglycerides, TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol, HDL-c)及低密度脂蛋白胆固醇(Low densitylipoprotein cholesterol, LDL-c)的浓度与心脏血管疾病也有极大的相关性(Pekkanenet al.，1990 ；Manson et al.，1992)。临床上血中的胆固醇浓度可作为一个很好的预测指标，根据美国国家胆固醇教育计划(National Cholesterol Education Program, NCEP),定义血中总胆固醇达240mg/dl为过高，介于200至239mg/dl则谓的边缘型高血胆固醇，低于200mg/dl则为较可接受的浓度范围。意即胆固醇值高者罹患心脏血管相关疾病的机会将会提高，同时死亡率亦会提高。当血液中的胆固醇降低1%时，将减少2 3%心血管疾病的发生(Manson et al., 1992)。有鉴于此，故如何提供一种可有效降低血液中的胆固醇及三酸甘油脂浓度的饮食品组成物，即为本发明的首要课题，因此本案发明人在经过不断地苦思及试作后，才终于有本发明的产生。
发明内容
本发明的主要目的，在于提供一种具有减重功能的饮食品组成物，其具有对改善血脂质及整肠有显着的功效。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案:—种具有减重功能的饮食品组成物，其特征在于:它是由胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus pi ant arum)及野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)组成，该胚芽乳酸杆菌，保藏于德国DSMZ菌种保存中心，保藏地址为Inhoffenstra β e7B, 3812姐raunschweig, GERMANY，保藏日期为 2010 年 7 月 15 日，保藏编号为 DSM23780。如上所述的具有减重功能的饮食品组成物，优选地:所述胚芽乳酸杆菌占饮食品组成物的重量比例为20 30%。如上所述的具有减重功能的饮食品组成物，优选地:所述野生型山苦瓜萃取物占饮食品组成物的重量比例为70 80%。如上所述的具有减重功能的饮食品组成物，优选地:所述饮食品组成物还添加有鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、嗜热链球菌(Streptococcusthermophlius)、副干酪乳酸杆菌(Lactobacillus paracasei)及发酵乳酸杆菌(Lactobacillus fermentum),并与所述胚芽乳酸杆菌构成复合益生菌。如上所述的具有减重功能的饮食品组成物，优选地:所述复合益生菌占饮食品组成物的重量比例为20 30%。如上所述的具有减重功能的饮食品组成物，优选地:所述野生型山苦瓜萃取物占饮食品组成物的重量比例为70 80%。本发明的有益效果在于:采用本发明提供的胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)与野生型苦瓜萃取物(Glycostate)的组合物进行动物试验，并评估其体重变化、脂肪细胞大小及小鼠体内的血质改善等试验，发现胚芽乳酸杆菌混合野生型苦瓜萃取粉后，对小鼠肠道的乳酸菌确实有促进生长的效果，且可改善血液中的胆固醇及三酸甘油脂浓度，瘦素(Leptin)含量也显着性降低，脂肪组织重量及细胞大小也明显减少，而对改善血脂质及整肠皆有显着的功效。
图1为本发明动物试验的体重变化图。图2为本发明胆固醇降解情形的分析比对图。图3为本发明高密度脂蛋白(HDL)与低密度脂蛋白(LDL)比值的分析比较图。图4为本发明瘦素(I印tin)含量的分析比较图。图5为本发明进行动物粪便乳酸菌测试的菌数分析比较图。图6为本发明进行腹腔脂肪组织细胞大小的分析比较图。
具体实施例方式本发明提供一种具有减重功能的饮食品组成物，主要由含有胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)的复合益生菌加上野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)组成，该胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)占饮食品组成物的重量比例为20 30%,而该野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)占饮食品组成物的重量比例为70 80% ;该胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)保藏于德国DSMZ菌种保存中心，保藏地址为Inhoffenstra β e 7B, 38124Braunschweig, GERMANY,保藏日期为 2010 年 7 月 15 日，保藏编号为 DSM 23780。较佳地，该复合益生菌由胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophlius)、副干酪乳酸杆菌(Lactobacillus paracasei)及发酵乳酸杆菌(Lactobacillus fermentum)组成，且该复合益生菌占饮食品组成物的重量比例为20 30%，而该野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)占饮食品组成物的重量比例为70 80%。以下，以实验例搭配实验结果图，进一步说明本发明及其可达成的功效。改善血■脂质的动物体内试验
(I)喂食已诱导高胆固醇血症的小鼠:实验使用的C57BL6/J品系的雄性小鼠，购自国家实验动物繁殖及研究中心。7 8周大，随机分组，每组6只，分别喂养于独立隔离的鼠笼(IVC)，室温维持于25°C，并定时12小时光照与黑暗；饲料及无菌逆渗透水均任由自由取食，而在一星期的适应环境期间，所喂食的饲料均为 AIN-93标准配方(Manufactured by MP Biomedicals Inc.，France),但分组后则喂食不同成分比例的饲料，详述如后。(2)诱发高胆固醇血症及治疗分组:饲养一周后实验喂食的饲料配方主要以AIN-76为基础，其成分包括:酪蛋白、玉米淀粉、玉米油、纤维质、矿物质混合物、维生素混合物、蔗糖、胆固醇以及胆酸等，各组均将大豆油比例提高至15%并添加0.5%的胆固醇，以诱发高胆固醇血症，喂食高胆固醇时间为4周，接着进行2周的治疗，即实验组添加乳酸菌冷冻干燥粉末或野生型苦瓜萃取原料或两者混合于标准饲料中，再于每日固定时间管灌喂食各组的小鼠一次，小鼠以平均25g计，每只喂食剂量为15mg。所喂食的饲料皆保存于4°C冰箱，且每天更换新鲜的饲料及无菌水。分组如下:A:负对照组(Negative control group)-此组的小鼠仅喂食添加胆固醇饲料。B:药物对照组——此组的小鼠的饲料中添加2%的考来烯胺(cholestyramine)临床药物于饲料中，即于每只每日喂食剂量15mg中约含有0.3mg的cholestyramine临床药物。C:野生型苦瓜萃取粉组一将苦瓜萃取粉添加于饲料中，浓度为40%。即于每只每日喂食剂量15mg中约含有6mg的苦瓜萃取粉。D:复合益生菌组一仅以101(lCFU/g的本发明复合益生菌的冷冻干燥粉末，使其终浓度为I X 1010CFU/g并将AIN-93标准配方的玉米淀粉作适当的调整，于每只每日喂食剂量15mg中约含有1.5mg的复合益生菌冷冻干燥粉末。E:本发明的实验组一由本发明的复合益生菌(101(lCFU/g) +野生型苦瓜萃取粉添加于饲料中组成，本实验例中，在每只每日喂食剂量15mg中含有1.5mg的复合益生菌冷冻干燥粉末以及6mg的苦瓜萃取粉。较佳地，复合益生菌冷冻干燥粉末与苦瓜萃取粉两者的重量比例为:复合益生菌冷冻干燥粉末约占20 30 %，而山苦瓜萃取粉约占70 80 %。(3)检验分析项目:a.体重测量——每周记录小鼠体重。b.血液分析——收集的血液以3000rpm低速离心10分钟后，吸取上层血清后立刻冷冻于_80°C，直到进行胆固醇及HDL、LDL分析，并计算HDL/LDL比例。分析方法以血液生化分析仪进行，瘦素则以酶联免疫分析试剂盒(ELISA kit)进行分析。c.分析粪便中及肠道各部份的复合益生菌分布情形与存活菌数一于喂食2周治疗期之后，收集各组每只小鼠的粪便，称重后以适当的无菌PBS进行序列稀释，再以Rogosa agar进行分析乳酸菌菌数。另外，将喂食复合益生菌组的小鼠，随机选出3只以颈椎分离术，快速剪取各段消化部位，包括胃、小肠段、大肠及盲肠段。分别秤重后以重量比200倍的无菌PBS进行组的均质破碎，使消化菌道内的细菌充分释出，最后连续稀释进行乳酸菌计数。d.脂肪组织分析——分析方法参考Hirsch等人(1968)的方法后修饰。将腹腔脂肪组织取出以四氧化锇(osmium tetroxide)固定,再以250 μ m的膜过滤纸进行过滤,并以PBS冲洗以去除结缔组织，然后再以25 μ m将滤液去除，并使细胞固定在滤纸上，随机观察100个脂肪细胞的大小并记录。(4)生物统计:本实施例中的每个分析项目皆进行三重复试验，实验结果以SPSS 10.0软件包于计算机中进行统计分析，均先经单向变方分析(one way ANOVA, analysis of variance)检定处理效应是否有显着差异，再以邓肯氏多变域测验(Duncan’s multiple range test)测定各组间的差异，显着性差异的判断标准为P < 0.05,实验结果以SigmaPlot 10.0软件作图。(5)食品原料对本发明的抑制作用试验:利用琼脂扩散法(Well-agar diffusion method)进行乳酸菌菌液的抑菌能力评估，步骤参考Lin et al.(2006)的方法。将灭菌的琼脂_培养基(MRS agar, Difco公司)倒入细菌培养皿中，待凝固后以无菌玻璃管在培养皿上打出直径7mm的孔洞，再将隔夜培养的本发明的复合益生菌液稀释至约107cfu/mL，以无菌棉棒均匀涂抹于培养皿上，待菌液稍微干后加入100 μ L溶于水中的各种食品原料(10%)于孔洞中，切勿使菌液溢出而造成误差。每个样品进行三重复，最后将培养盘正面放置于37°C培养箱，16^18小时后测量其抑菌圈直径大小。(6)储存安定性试验:野生型苦瓜萃取粉(Glycostate)与本发明的复合益生菌粉混合后，显示无抑制乳酸菌的现象，因此，将野生型苦瓜萃取粉(Glycostate) 10%与本发明的复合益生菌粉10%,再加上80%玉米淀粉等复合物，分别装入血清瓶中并锁紧，接着避光贮存于4°C冰箱及室温(25±3°C)中，以及37°C的烘箱中，于第O及30天贮存期间，采样分析乳酸菌存活菌数。实验结果:(I)小鼠体重测量:每周记录小鼠体重。结果如图1所示，显示药物组及本发明的实验组于治疗2周后，体重较负对照组有显着降低的现象。野生型苦瓜萃取粉组也有体重降低的现象，但统计上无显着差异。(2)血液分析:血脂质分析的实验结果如图2及图3所示，显示喂食药物组的胆固醇降解效果最佳36.2% ;其次为本发明的实验组，达30.8%，而单纯喂食复合益生菌组的小鼠的胆固醇也有显着性降低现象，达26.6%。在HDL与LDL胆固醇的比值方面，发现喂食药物组及本发明的实验组的HDL/LDL比值皆有较高现象。瘦素也发现在药物治疗及乳酸菌投予组皆有明显降低现象，如图4所示。整体来看，本发明由复合益生菌+野生型苦瓜萃取粉的组合配方有较佳的降血脂效果，因此证明两者有协同效应。
(3)分析粪便中及肠道各部份的乳酸菌分布情形与存活菌数:由下表一及图5为分析粪便中乳酸菌的存活菌数，由结果明确可知治疗2周后喂食乳酸菌的各组小鼠，其粪便中的乳酸菌菌数明显高于无乳酸菌喂食的组别，而由图5即可清楚看出本发明的复合益生菌具有极良好的整肠效果，分析粪便菌数可达9Log CFU/g。另外，分析小鼠的各部位消化器官，发现本发明的复合益生菌有高浓度存活于大肠及盲肠部位。表一、小鼠治疗2周后小鼠的粪便乳酸菌菌数分析
权利要求
1.一种具有减重功能的饮食品组成物，其特征在于:它是由胚芽乳酸杆菌及野生型山苦瓜萃取物组成，该胚芽乳酸杆菌，保藏于德国DSMZ菌种保存中心，保藏地址为Inhoffenstra β e 7B, 38124Braunschweig, GERMANY,保藏日期为 2010 年 7 月 15 日，保藏编号为 DSM 23780。
2.如权利要求1所述的具有减重功能的饮食品组成物，其特征在于:所述胚芽乳酸杆菌占饮食品组成物的重量比例为20 30%。
3.如权利要求1所述具有减重功能的饮食品组成物，其特征在于:所述野生型山苦瓜萃取物占饮食品组成物的重量比例为70 80%。
4.如权利要求1所述具有减重功能的饮食品组成物，其特征在于:所述饮食品组成物还添加有鼠李糖乳酸杆菌、嗜热链球菌、副干酪乳酸杆菌及发酵乳酸杆菌，并与所述胚芽乳酸杆菌构成复合益生菌。
5.如权利要求4所述具有减重功能的饮食品组成物，其特征在于:所述复合益生菌占饮食品组成物的重量比例为20 30%。
6.如权利要求4所述具有减重功能的饮食品组成物，其特征在于:所述野生型山苦瓜萃取物占饮食品组成物的重量比例为70 80%。
全文摘要
本发明提供了一种具有减重功能的饮食品组成物，其特征在于它是由胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)及野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)组成，该胚芽乳酸杆菌，保藏于德国DSMZ菌种保存中心，保藏地址为Inhoffenstraβe7B,38124Braunschweig,GERMANY，保藏日期为2010年7月15日，保藏编号为DSM 23780。采用本发明提供的组合物进行动物试验，发现对小鼠肠道的乳酸菌确实有促进生长的效果，且可改善血液中的胆固醇及三酸甘油脂浓度，瘦素含量也显着性降低，脂肪组织重量及细胞大小也明显减少，而对改善血脂质及整肠皆有显着的功效。
文档编号A23L1/29GK103190609SQ20121020863
公开日2013年7月10日 申请日期2012年6月19日 优先权日2012年1月4日
发明者黄琼莹 申请人:绿立生医国际股份有限公司