专利名称：(2s,3s)-戊诺酰胺生物酶催化合成方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗癫痫新药(2S，3S)_戊诺酰胺的生物酶催化合成方法，属于医药技术领域。
背景技术：
在目前众多的抗癫痫药物中，丙戊酸(Valproic Acid，VPA)是临床应用广、疗效高和安全性较好的首选、广谱药物。虽然丙戊酸的使用存在不可忽视的副作用，如已孕妇女服用后会使新生儿的神经管缺陷的发生率显著提高，但其全球的销量仍然较大，其在2006年的销售额达20亿美元。因此通过对丙戊酸研究而寻找更高活性和低毒低副作用的替代物成为一直以来的研究热点。丙戊酸类似物之一有戊诺酰胺，它作为一种镇静安眠药，被广泛应用。戊诺酰胺·化学结构式中含有两个手性碳原子，目前市场上销售的是其四个异构体的混合物，即(s，s)型、(R，R)型、(S，R)型和(R，S)型的混合物。1997年，以色列一研究小组报道文献Clin.Pharmacol. Ther. 1997，61，442-449采用手性气相柱从戊诺酰胺的四个异构体中将(S，S)型异构体成功分离出来，研究表明(S，S)型戊诺酰胺即(2S，3S)_戊诺酰胺对抗癫痫具有高的活性和选择性。以色列研究小组于1999年报道的文献Tetrahedron: Asym. 1999,10,841是以
L-异亮氨酸为起始原料、Evans不对称烷基化反应为关键步骤的(2S，3S)-戊诺酰胺的合成
路线，共8步反应，总产率约为1%，反应路线如下
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上述以色列研究小组的合成路线，所采用的L-异亮氨酸原料昂贵，且后续工艺分离方法十分复杂，难以用于大批量生产。美国Neurocrine Biosciences, Inc.制药公司公开的以Myers不对称烧基化反应为关键步骤(Org. Process Res. Dev. 2009，13，463.)，进一步合成得到(2S, 3S)-戊诺酰胺的合成路线。该合成工艺具有总产率较高，原料便宜，操作简单，产物纯度高等特点，并且可以很可靠地放大到kg级，反应路线如下
权利要求
1.一种(2S，3S)_戊诺酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于步骤一，以(3S)-甲基戊酸为起始原料，经过酯化反应制得(3S)-甲基戊酸乙酯；步骤二，将步骤一制得的(3S)-甲基戊酸乙酯经由烷基化反应得到(3S)-3-甲基-2-乙基戊酸乙酯；步骤三，将步骤二制得的(3S)-3-甲基-2-乙基戊酸乙酯采用生物酶进行立体选择性催化反应制得中间体(2S, 3S)-3-甲基-2-乙基戊酸；步骤四，将步骤三制得的经过酰化反应制得(2S，3S)-戊诺酰胺。
2.根据权利要求I所述的(2S，3S)-戊诺酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步骤三包括先将PH值为6-9的磷酸二氢钾/磷酸氢二钾缓冲溶液升温至25°C -75°C，向其投入(3S)-3-甲基-2-乙基戊酸乙酯和脂肪酶，其中脂肪酶的质量为(3S)-3-甲基-2-乙基戊酸乙酯的质量的O. 05-0. 5倍，调节反应液的pH值为4-9，在反应温度20°C -60°C，反应时间I天-5天的条件下制得(2S，3S)-3-甲基-2-乙基戊酸。
3.根据权利要求2所述的(2S，3S)_戊诺酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步骤三中的脂肪酶为荧光假单胞菌脂肪酶或者洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的(2S，3S)_戊诺酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步骤三中的磷酸二氢钾/磷酸氢二钾缓冲溶液的pH值为6. 5-7. 5。
5.根据权利要求2所述的(2S，3S)_戊诺酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步骤三中的磷酸二氢钾/磷酸氢二钾缓冲溶液升温至30°C -50°C。
6.根据权利要求2所述的(2S，3S)_戊诺酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步骤三中的反应温度为32°C -38°C。
7.根据权利要求2所述的(2S，3S)_戊诺酰胺生物酶催化合成方法，其特征在于所述步骤三中的反应液pH值为7. 0-7. I。
全文摘要
本发明揭示了一种(2S,3S)-戊诺酰胺生物酶催化合成方法，以廉价易得的(3S)-甲基戊酸为起始原料，以生物酶不对称催化水解反应为关键步骤，最终制得(2S,3S)-戊诺酰胺。本发明通过利用酶不对称催化反应、高选择性的制备得关键中间体，从而制得高光学纯度的(2S,3S)-戊诺酰胺，使其纯度符合药品标准，工艺路线简单，操作简便，成本低，总产率较高，具有良好的工业应用前景。
文档编号C12P13/02GK102876744SQ201210363049
公开日2013年1月16日 申请日期2012年9月26日 优先权日2012年9月26日
发明者陈建戈, 李斌峰, 孙涛 申请人:暨明医药科技(苏州)有限公司