专利名称：利用玉米浆浸泡豆粕制备小肽蛋白的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种小肽蛋白的制备，特别涉及一种利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法。
背景技术：
玉米浆是制造玉米淀粉的副产物。玉米浆中含有丰富的可溶性蛋白、生长素、植酸和一些前体物质且富含乳酸菌和酵母菌。玉米浆是微生物生长很普遍应用的有机氨源，它能促进青霉素等抗生素的生物合成。目前制药行业是玉米浆使用的最大行业。由于玉米浆中含植酸盐和亚硝酸盐，所以不能直接用作饲料蛋白。但我国玉米浆产量巨大，玉米淀粉加工企业环保压力很重，所以玉米浆价值低廉(200元/T)，造成蛋白资源的巨大浪费。豆柏是大豆提取豆油后得到的一种副产品。豆柏的蛋白含量在42-48%，广泛使用于饲料加工，使用比例在20-30%。豆柏是一种优质的饲料用蛋白资源，但是由于豆柏中的抗原因子、抗胰蛋白酶、皂角素等物质及分子大小、小肽水平等因素，影响了幼崽动物的适口性及消化率，特别是在高档乳仔猪料及水产料使用中收到限制。所以，利用生物酶解的方法降低乃至消除豆柏中得不利因素，提高豆柏的品质，替代日趋高涨的鱼粉等高品质蛋白源，降低饲料生产成本，就显得十分重要与紧迫。我国严重缺乏蛋白资源，特别是高品质蛋白资源，充分利用现有资源，变废为宝，利用生物工程技术生产高品质蛋白饲料为饲料行业的发展趋势。
发明内容
本发明的目的就在于提供一种利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法，该利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法能制备出分子量为2000-3000Da，小肽为50% (占蛋白的百分比，下同)以上的豆柏小肽(原料豆柏分子量为12000Da，小肽为5%)，该豆柏小肽是一种能替代鱼粉的高品质的植物性蛋白源。本发明的技术方案是:一种利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法，该利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法包括以下步骤:
步骤一、将玉米浆放入中和罐中，然后加入石灰乳，边加石灰乳边搅拌，中和至pH为7-8后，再搅拌I小时；然后用板框分离，得滤饼和滤液；
步骤二、将豆柏输送入浸泡灌，加滤液和水，浸泡6小时后打浆，再将豆柏浆液泵入85°C高温瞬时灭菌机；控制灭菌后豆柏浆液温度为53-58°C，再将豆柏浆液泵入酶解灌，调PH 为 6-7 ；
步骤三、再向酶解灌中加入中性复合蛋白酶，保温于53-58°C并搅拌；然后再调pH为
3.5-4.5，再加入酸性复合蛋白酶，保温于53-58°C并搅拌，得豆柏酶解液； 步骤四、将豆柏酶解液泵入均质机均质，再将均质后的豆柏酶解液泵入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，干燥后得豆柏小肽蛋白。作为优选，所述步骤二中豆柏重量:滤液体积:纯水体积为1:2:4，所述重量单位为千克，体积单位为升。作为优选，所述步骤三中所述中性复合蛋白酶量为豆柏量的5-8%。，搅拌时间为4-6小时；所述步骤三中所述酸性复合蛋白酶为豆柏量的5-8%。，搅拌时间为4-6小时。作为优选，所述步骤四中所述喷雾干燥条件为转速8000-12000r/min、进风温度120-160°C、出风温度 70-80°C。本发明的发明原理为:在中性条件下保持一定的温度和时间，用中性复合蛋白酶断切部分氨基酸长链；在酸性条件下，保持一定的温度和时间，用酸性复合蛋白酶，断切部分氨基酸长链。本发明的有益效果在于:
(I)充分利用了价格低廉且影响环保的玉米浆。并从中还分离出制备高附加值肌醇的原料一植酸钙，变废为宝。没有“三废”产生。属于绿色生物化工产品。(2)采用本发明方法制备出的豆柏小肽蛋白含量高达50%，比原豆柏提高900%。平均分子量降至2000-3000Da，比原料豆柏下降83-75% ;原豆柏(原豆柏价格4000元/T)所制备的豆柏小肽蛋白(价格为8000元/T)能替代鱼粉(鱼粉价格12000元/T)。饲料成本将下降33 %。经济效益非常显著。(3)生产工艺简单:本发明所采用的生物酶解法能耗低，生产成本低；所用设备为常规通用设备，便于推广应用、便于工业化规模生产。
具体实施例方式实施例1
将玉米浆(市售)放入中和 罐中，然后加入石灰乳，边加石灰乳边搅拌，中和至pH为7-8后，再搅拌I小时。然后用板框分离，得滤饼(即为植酸钙，可用于制备肌醇)和滤液A (即为已除去植酸盐和亚硫酸盐的玉米浆蛋白液)。将豆柏(市售)输送入浸泡灌，按豆柏(Kg):滤液A (L):纯水(L)为1:2:4的比例，浸泡6小时后打浆，再将豆柏浆液泵入85°C高温瞬时灭菌机。控制灭菌后豆柏浆液温度为53-58°C，再将豆柏浆液泵入酶解灌，调pH为6-7。再向酶解灌中加入以豆柏质量计5%。的中性蛋白酶，保温于53_58°C并搅拌4小时；然后再调PH为3.5-4.5，再加入以豆柏质量计5%。的酸性复合蛋白酶，保温于53-58°C并搅拌4小时，得豆柏酶解液。将豆柏酶解液泵入均质机均质，再将均质后的豆柏酶解液泵入喷雾干燥机中，在转速为8000r/min进风温度为120°C、出风温度为70°C的条件下进行喷雾干燥。收集干燥细粉，即为制备出的豆柏小肽蛋白。检测制备出的豆柏蛋白小肽(指豆柏酶解后其蛋白由大分子变为小分子蛋白)，其分子量为2700Da(检测方法:中性甲醛法，用0.0lmolNaOH滴定)，豆柏蛋白小肽(检测方法:三氯乙酸蛋白沉淀法)为52.8%。实施例2
将玉米浆(市售)放入中和罐中，然后加入石灰乳，边加石灰乳边搅拌，中和至pH为7-8后，再搅拌I小时。然后用板框分离，得滤饼(即为植酸钙，可用于制备肌醇)和滤液(即为已除去植酸盐和亚硫酸盐的玉米浆蛋白液)B。
将豆柏(市售)输送入浸泡灌，按豆柏(Kg):滤液B (L):纯水(L)为1:2:4的比例，浸泡6小时后打浆，再将豆柏浆液泵入85°C高温瞬时灭菌机。控制灭菌后豆柏浆液温度为53-58 0C，再将豆柏浆液泵入酶解灌，调pH为6-7。再向酶解灌中加入以豆柏质量计6.5%。的中性复合蛋白酶，保温于53_58°C并搅拌5小时；然后再调pH为3.5-4.5，再加入以豆柏质量计6.5%。的酸性复合蛋白酶，保温于53-58°C并搅拌5小时，得豆柏酶解液。将豆柏酶解液泵入均质机均质，再将均质后的豆柏酶解液泵入喷雾干燥机中，在转速为lOOOOr/min进风温度为140°C、出风温度为75°C的条件下进行喷雾干燥。收集干燥细粉，即为制备出的豆柏小肽蛋白。检测制备出的豆柏小肽蛋白，(指豆柏酶解后其蛋白由大分子变为小分子蛋白)，其分子量为2400Da (检测方法:中性甲醛法，用0.0lmolNaOH滴定)，豆柏蛋白小肽(检测方法:三氯乙酸蛋白沉淀法)为55%。实施例3
将玉米浆(市售)放入中和罐中，然后加入石灰乳，边加石灰乳边搅拌，中和至pH为7-8后，再搅拌I小时。然后用板框分离，得滤饼(即为植酸钙，可用于制备肌醇)和滤液C (即为已除去植酸盐和亚硫酸盐的玉米浆蛋白液)。将豆柏(市售)输送入浸泡灌，按豆柏(Kg):滤液C (L):纯水(L)为1:2:4的比例，浸泡6小时后打浆，再将豆柏浆液泵入85°C高温瞬时灭菌机。控制灭菌后豆柏浆液温度为53-58 0C，再将豆柏浆液泵入酶解灌，调pH为6-7。再向酶解灌中加以豆柏入质量计8%。的中性复合蛋白酶，保温于53_58°C并搅拌6小时；然后再调pH为3.5-4.5，再加入以豆柏质量计8%。的酸性复合蛋白酶，保温于53-58°C并搅拌6小时，得豆柏酶解液。将豆柏酶解液泵入均质机均质，再将均质后的豆柏酶解液泵入喷雾干燥机中，在转速为12000r/min进风温度为160°C、出风温度为80°C的条件下进行喷雾干燥。收集干燥细粉，即为制备出的豆柏小肽蛋白。检测制备出的豆柏小肽蛋白，(指豆柏酶解后其蛋白由大分子变为小分子蛋白)，其分子量为2080Da (检测方法:中性甲醛法，用0.0lmolNaOH滴定)，豆柏蛋白小肽(检测方法:三氯乙酸蛋白沉淀法)为57.8%。
权利要求
1.一种利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法，其特征在于该利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法包括以下步骤: 步骤一、将玉米浆放入中和罐中，然后加入石灰乳，边加石灰乳边搅拌，中和至pH为7-8后，再搅拌I小时；然后用板框分离，得滤饼和滤液； 步骤二、将豆柏输送入浸泡灌，加滤液和水，浸泡6小时后打浆，再将豆柏浆液泵入85°C高温瞬时灭菌机；控制灭菌后豆柏浆液温度为53-58°C，再将豆柏浆液泵入酶解灌，调PH 为 6-7 ； 步骤三、再向酶解灌中加入中性复合蛋白酶，保温于53-58°C并搅拌；然后再调pH为3.5-4.5，再加入酸性复合蛋白酶，保温于53-58°C并搅拌，得豆柏酶解液； 步骤四、将豆柏酶解液泵入均质机均质，再将均质后的豆柏酶解液泵入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，干燥后得豆柏小肽蛋白。
2.根据权利要求1所述的利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法，其特征在于:所述步骤二中豆柏重量:滤液体积:纯水体积为1:2:4，所述重量单位为千克，体积单位为升。
3.根据权利要求1所述的利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法，其特征在于:所述步骤三中所述中性复合蛋白酶量为豆柏量的5-8%。，搅拌时间为4-6小时；所述步骤三中所述酸性复合蛋白酶为豆柏量的5-8%。，搅拌时间为4-6小时。
4.根据权利要求3所述的利用玉米浆浸泡豆柏制备小肽蛋白的制备方法，其特征在于:所述步骤四中所述喷雾干燥条件为转速8000-12000r/min、进风温度120_160°C、出风温度 70-80°C。`
全文摘要
本发明公开了一种利用玉米浆浸泡豆粕制备小肽蛋白的制备方法，涉及一种小肽蛋白的制备，包括以下步骤将玉米浆放入中和罐中，然后加入石灰乳，边加石灰乳边搅拌，中和后，再搅拌1小时；然后分离得滤饼和滤液；将豆粕输送入浸泡灌，加滤液和水，浸泡后打浆，再将豆粕浆液泵入高温瞬时灭菌机；控制灭菌后豆粕浆液温度，再将豆粕浆液泵入酶解灌，调pH；再向酶解灌中加入中性复合蛋白酶，保温并搅拌；然后再调pH，再加入酸性复合蛋白酶，保温并搅拌，得豆粕酶解液；将豆粕酶解液泵入均质机均质均质后泵入喷雾干燥机中进行喷雾干燥得豆粕小肽蛋白。与现有的相比，本发明能制备出分子量为2000-3000Da，小肽为50%以上的豆粕小肽。
文档编号C12P21/06GK103074405SQ20131000217
公开日2013年5月1日 申请日期2013年1月5日 优先权日2013年1月5日
发明者孙烽, 徐君, 毛建, 龙旭, 杨新明, 邓继辉, 姜光丽, 何利平 申请人:成都起点投资有限公司, 成都农业科技职业学院, 成都自然而燃生物科技有限公司