一种蓝莓酒发酵专用酵母的分离方法
【专利摘要】一种蓝莓酒发酵专用酵母的分离方法，包括以下步骤：（1)酵母菌分离培养基的配制；(2)涂布平板■’(3)培养：将平板倒置放入28°C恒温培养箱中培养48h-72h，直到观察到平板上长出菌落后取出；(4)根据平板上长出的菌落形态用平板划线法分离出各种不同菌落；（5)将所获菌株进行纯化，经显微镜镜检纯化后的菌株根据不同工艺要求进行产酒精、耐酒精、耐二氧化硫等测试之后，最终得到优良菌株。
【专利说明】一种蓝莓酒发酵专用酵母的分离方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及酵母菌分离领域，具体为一种蓝莓酒发酵专用酵母的分离方法。
【背景技术】
[0002] 我国的蓝莓酒酿造生产处于起步阶段，采用葡萄酒商业活性干酵母，会导致产品 的风味相似，没有因为产区、品种的不同而表现出独特的风味，且发酵成本偏高；而利用蓝 莓果表皮及环境中的微生物进行自然发酵，又导致产品的质量不稳定，产品易受杂菌污染， 不利于控制发酵过程。而且，不同产地的蓝莓质构差异较大，一株发酵性能优良的酵母菌也 不可能适用于所有地区的蓝莓发酵。因此，根据不同地区蓝莓质构特点筛选适合蓝莓红酒 发酵的专用菌株，提高菌株的发酵能力，应用于蓝莓酒酿造成为了特色蓝莓发酵酒生产的 基础和关键。而在发酵菌株分离筛选过程中，一般采用的方法都是先将目标物中的酵母菌 用酵母菌富集培养基培养得到单个菌落之后再进行纯化，采用这种方法初步获得的酵母菌 种类数量繁多，使之后的筛选工作量增大，并且，所获得的酵母菌有大部分在目的发酵液中 生长状态不佳。因此，我们经过几年的实验，研发了一种蓝莓酒发酵专用酵母的分离方法。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种蓝莓酒发酵专用酵母的分离 方法，以解决【背景技术】中的问题。
[0004] 一种浓香型蓝莓红酒的制作方法，包括以下步骤：
[0005] (1)酵母菌分离培养基的配制：将蓝莓榨汁过滤后得到800-1200份蓝莓汁， 添加葡萄糖12-18份，纯化琼脂粉16-24份，混匀后高压蒸汽灭菌压强102. 9kPa、温度 121-126°C，灭菌10-20min，待冷却到55-65°C在无菌环境下加入0. 1-0. 3份氯霉素，充 分混匀后倾注平板；（2)涂布平板：将稀释好的蓝莓果皮或者自然发酵蓝莓酒菌液采用涂 布平板的方法均匀涂到酵母菌分离培养基上；（3)培养：将平板倒置放入28°C恒温培养箱 中培养48h-72h，直到观察到平板上长出菌落后取出；（4)根据平板上长出的菌落形态用平 板划线法分离出各种不同菌落；（5)将所获菌株进行纯化，经显微镜镜检纯化后的菌株根 据不同工艺要求进行产酒精、耐酒精、耐二氧化硫等测试之后，最终得到最佳的优良菌株， 经鉴定之后用于生产。
[0006] 有益效果：
[0007] 本发明与现有技术相比，其优势在于：采用这种方法初步获得的酵母菌种类数量 繁多，所获得的酵母菌有大部分在目的发酵液中生长状态较好。
【具体实施方式】
[0008] 为了使本发明的技术手段、创作特征、工作流程、使用方法达成目的与功效易于明 白了解，下面结合具实施例，进一步阐述本发明。
[0009] 一种浓香型蓝莓红酒的制作方法，原料为重量份比例，包括以下步骤：
[0010] (1)酵母菌分离培养基的配制：将蓝莓榨汁过滤后得到800-1200份蓝莓汁， 添加葡萄糖12-18份，纯化琼脂粉16-24份，混匀后高压蒸汽灭菌压强102. 9kPa、温度 121-126°C，灭菌10-20min，待冷却到55-65°C在无菌环境下加入0. 1-0. 3份氯霉素，充 分混匀后倾注平板；（2)涂布平板：将稀释好的蓝莓果皮或者自然发酵蓝莓酒菌液采用涂 布平板的方法均匀涂到酵母菌分离培养基上；（3)培养：将平板倒置放入28°C恒温培养箱 中培养48h-72h，直到观察到平板上长出菌落后取出；（4)根据平板上长出的菌落形态用平 板划线法分离出各种不同菌落；（5)将所获菌株进行纯化，经显微镜镜检纯化后的菌株根 据不同工艺要求进行产酒精、耐酒精、耐二氧化硫等测试之后，最终得到最佳的优良菌株， 经鉴定之后用于生产。
[0011] 以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术 人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本 发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变 化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其 等效物界定。
【权利要求】
1. 一种蓝莓酒发酵专用酵母的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：（1)酵母菌分离 培养基的配制：将蓝莓榨汁过滤后得到800-1200份蓝莓汁，添加葡萄糖12-18份，纯化琼 脂粉16-24份，混匀后高压蒸汽灭菌压强102. 9kPa、温度121-126°C，灭菌10-20min，待 冷却到55-65°C在无菌环境下加入0. 1-0. 3份氯霉素，充分混匀后倾注平板；（2)涂布平 板：将稀释好的蓝莓果皮或者自然发酵蓝莓酒菌液采用涂布平板的方法均匀涂到酵母菌分 离培养基上；（3)培养：将平板倒置放入28°C恒温培养箱中培养48h-72h，直到观察到平板 上长出菌落后取出；(4)根据平板上长出的菌落形态用平板划线法分离出各种不同菌落； (5)将所获菌株进行纯化，经显微镜镜检纯化后的菌株根据不同工艺要求进行产酒精、耐酒 精、耐_氧化硫等测试之后，最终得到优良菌株。
【文档编号】C12N1/16GK104212727SQ201310232378
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2013年6月1日 优先权日:2013年6月1日
【发明者】李永霞, 龙世林, 文光琴, 聂飞, 王瑶 申请人:贵州省植物园