一种异香豆素类化合物及其制备方法与作为天然海洋生物防污剂的应用的制作方法
【专利摘要】一种异香豆素类化合物及其制备方法与作为天然海洋生物防污剂的应用，其特征在于所述异香豆素类化合物具有式I的结构：其中R1、R2各自独立地为H、且R1、R2中有一个为H；R3、R4各自独立地为H、OCH3，且R3、R4中有一个为H。式I化合物可通过对海洋真菌Eurotium sp.(HM991283)培养、发酵、色谱分离等手段制备得到。本发明提供一种高效、低毒的天然海洋生物防污剂，其特征在于以式I化合物或其盐作为有效成分，用于防治藤壶引起的海洋生物污损。
CGMCC No.7991
2013.08.12
【专利说明】一种异香豆素类化合物及其制备方法与作为天然海洋生物 防污剂的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种异香豆素类化合物，特别是涉及一种具有抑制藤壶幼虫附着活性 的异香豆素类化合物的制备方法与作为天然海洋生物防污剂的应用。
【背景技术】
[0002] 海洋生物污损是指海洋污损生物如藤壶、贻贝、苔藓虫等的幼虫在船体、鱼箱、油 井等海洋设施或其它海洋生物表面附着生长而形成群落，从而对被附着物造成巨大损害， 如加速金属腐蚀、降低海洋设施性能、影响水产养殖业产量和质量等。在海洋污损生物中， 藤壶是分布最广、危害最大的一类。全世界每年由于海洋生物污损导致的经济损失巨大。以 船舶为例，污损生物在船底附着，使船舶燃料消耗增加40 %，航行代价增加77 %，为此全球 航运每年损失约30亿美元。目前使用的防污损材料主要是在船体等设施表面涂布含有杀 虫剂或有机金属的有机涂料。这些防污损材料在发挥防污损作用的同时也严重破坏了海洋 环境，如有机锡氧化物（ΤΒΤ0)使许多鱼类和海洋生物的免疫系统遭到破坏，而杀虫剂对目 标污损生物和非目标生物都产生毒害，并直接危害人类健康。因此，寻找高效、低毒的天然 海洋生物防污剂已成为各国面临的重大课题。海洋高盐、高压、低温、寡营养、低光照等特殊 条件使海洋微生物能够产生大量结构新颖、活性独特的次级代谢产物，其中有些化合物具 有防污损活性，为寻找潜在的天然海洋生物防污剂提供了重要来源。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种来源于海洋真菌的异香豆素类化合物及其制备方法 与作为天然海洋生物防污剂的应用，它能满足现有技术的上述需求。菌种保藏信息：保藏单 位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区 北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所； 保藏日期：2013年8月12日；保藏编号：CGMCC7991 ;分类命名：Eurotium sp.。
[0004] -种式I结构的异香豆素类化合物或其盐：
[0005]
【权利要求】
1. 一种式I结构的异香豆素类化合物或其盐：
其中Rp R2各自独立地为H
,且R^R2中 有一个为H ;R3、R4各自独立地为H、OCH3，且R3、R 4中有一个为H。
2. 如权利要求1所述的式I化合物，其特征在于选自如下化合物：
3. 权利要求1或2所述的式I化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：先在菌 种培养基中对海洋真菌Eurotium sp. (HM991283)进行菌种培养，再在发酵培养基中对上述 海洋真菌进行发酵培养，将发酵液和菌体分离后，发酵液用乙酸乙酯萃取，萃取液减压浓缩 得到发酵液浸膏；菌体用甲醇浸提，减压浓缩得到菌体浸膏；合并发酵液浸膏和菌体浸膏， 进行色谱分离，得到式I化合物；其中所述的菌种培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、琼 月旨、粗海盐、水；所述的发酵培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、粗海盐、水；所述的色谱 分离为正相硅胶柱色谱分离和高效液相手性色谱分离。
4. 权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的菌种培养基含有葡萄糖 0· 1 % -5. 0 %、酵母膏(λ 01 % -2 %、蛋白胨(λ 01 % -2 %、琼脂(λ 1 % -3. 0 %、粗海盐 0.05% -5%，其余为水，上述百分含量均为重量百分比；培养温度为5-45°C ;培养时间为 3-10 天。
5. 权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的发酵培养基含有葡萄糖 0. 1% -5. 0%、酵母膏0. 01% -2%、蛋白胨0. 01% -2%、粗海盐0. 05% -5%，其余为水，上 述百分含量均为重量百分比；培养温度为5-45°C ;培养时间为5-50天。
6. 权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的正相硅胶柱色谱分离中采用的固定 相为200?300目硅胶，流动相为10% -40%的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂；所述的高效液 相手性色谱分离中采用的色谱柱为TBB手性色谱柱Kromasil，5 μ m，150X4. 6mm，流动相为 5% -15%的异丙醇-正己烷混合溶剂；上述混合溶剂百分比均为体积百分比。
7. -种海洋生物防污剂，其特征在于含有权利要求1或2所述的化合物或其盐作为有 效成分。
8. 权利要求1或2所述的式I化合物或其盐在防治藤壶引起的海洋生物污损中的应 用。
【文档编号】C12R1/645GK104230873SQ201310429588
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2013年9月11日 优先权日:2013年9月11日
【发明者】王长云, 邵长伦, 陈敏, 王开玲 申请人:中国海洋大学