阿氏芽孢杆菌及其在防治烟草黑胫病中的应用的制作方法
【专利摘要】阿氏芽孢杆菌及其在防治烟草黑胫病中的应用，本发明所述的阿氏芽孢杆菌命名为阿氏芽孢杆菌J-6（Bacillus?aryabhattai?J-6），已在保藏单位保藏，保藏单位名称：中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏日期为2013年10月17日，保藏编号为CCTCC?NO：M2013475。该阿氏芽孢杆菌J-6（Bacillus?aryabhattai?J-6）应用于防治烟草黑胫病。本发明的优点在于阿氏芽孢杆菌J-6具有对人、畜、农作物安全和环境友好的特点，对烟草黑胫病防治有显著效果。
【专利说明】阿氏芽孢杆菌及其在防治烟草黑胫病中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及微生物【技术领域】，特别是涉及一种具有较好防治烟草黑胫病能力的微生物菌株及其在防治烟草黑胫病中的应用。
【背景技术】
[0002]烟草是我国重要的经济作物之一，黑胫病是烟草生产中危害最严重的病害之一，每年因黑胫病造成的经济损失达I亿元以上。烟草黑胫病的致病菌为烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitca var.nicotianae Tucker),主要表现为烟草矮化、萎焉、叶片发黄、根和茎基部坏死，平均发病率为5%~14%，重者损失达到75%，甚至绝收。目前对该病主要采用化学防治为主，抗病品种和栽培措施为辅的综合防治方法。由于长期使用甲霜灵和代森锰锌及其混剂等此类化学农药，使病原菌产生不同程度的抗药性，导致防治效果差，甚至难以控制病原菌危害。另外过多施用化学药剂，造成的农药残留对人畜危害和环境污染，对生态环境造成 不可逆转的影响。
[0003]针对施用化学农药产生的抗药性给烟草黑胫病防治工作带来阿氏困难，同时也给农药的开发和生产带来严峻的挑战，近年来应用生物方法预防植物病害的研究越来越受到人们的关注，诱导植物产生抗性的方法就是一种比较成功的方法。诱导植物抗性是指利用物理、化学以及生物的方法，预先处理植物，诱导植物启动自身的防御机制，增强对后续病原物的抵抗力，是植物防御植食者的基本策略之一，它使得植物只在需要的时候、需要的部位产生必要数量的防御物质，从而节省能量，诱导植物产生的抗性在反应、效果、信息等方面具有很高的特异性。
[0004]微生物方法中利用芽孢杆菌诱导植物植株抗病性已有较多报道。芽孢杆菌普遍存在于环境中，芽孢杆菌中的许多菌株都有一些特别的功能，在工业、农业及医学上均有广泛的应用。近年来农业上芽孢杆菌作为生防菌来减轻有害动物、植物的危害程度成为研究关注热点、重点之一，如国内外关于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有抑制植物病害的功能已有较多的研究报道，以及应用在一些生物肥和农药上。但阿氏芽孢杆菌抑制植物病害的研究较少，利用阿氏芽孢杆菌诱导烟叶产生黑胫病的抗病性或抑制烟叶黑胫病鲜见报道。
[0005]应用微生物方法，诱导植物抗性具有多抗、高抗和安全等优点，对烟草安全生产及可持续性发展具有极大的应用前景。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于解决上述现有技术存在的问题，提供一种可从灯盏花中分离到的内生芽孢杆菌一阿氏芽孢杆菌J-6 (Bacillus aryabhattai J_6)以及将其用于防治烟
草黑胫病。
[0007]本发明所述的阿氏芽孢杆菌命名为阿氏芽孢杆菌J-6 (Bacillus aryabhattaiJ-6),已在保藏单位保藏，保藏单位名称:中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏日期为2013年10月17日，保藏编号为CCTCC NO:M2013475。
[0008]本发明所述阿氏芽孢杆菌J-6 (Bacillus aryabhattai J-6)应用于防治烟草黑胫病。
[0009]本发明所述的阿氏芽孢杆菌J-6菌株经PCR技术，DNA测序仪分析，该菌株的16SrDNA序列由1533个碱基组成。用BLAST程序对J-6菌株的16S rDNA序列和GenBank中已登录的16S rDNA序列进行核苷酸同源性比较，结果与已报道的阿氏芽孢杆菌Bacillusaryabhattai (登录号EFl 14313.2)的16S rDNA序列同源性达到99%，鉴定其为阿氏芽孢杆菌Bacillus aryabhattai。构建了 J-6菌株的系统发育进化树。
[0010]本发明的优点在于阿氏芽孢杆菌J-6具有对人、畜、农作物安全和环境友好的特点，对烟草黑胫病防治有显著效果。
【专利附图】
【附图说明】
[0011]图1为本发明所述的阿氏芽孢杆菌J-6在LB培养基上培养特征(正面)。
[0012]图2为本发明所述的阿氏芽孢杆菌J-6菌体特征(扫描电镜12000倍)。
[0013]图3为本发明所述的阿氏芽孢杆菌J-6菌株的系统发育进化树。
[0014]图3中，分支节点上的数字表示经过1000次bootstrap分析所支持的结果。线段标尺0.005表不0.5%的序列差异的分支长度。
【具体实施方式】
[0015]本发明是采用从云南灯盏花上分离到的内生细菌——阿氏芽孢杆菌J-6作为发酵菌株，来进行烟草黑胫病防治效果测定。它是以LB液体培养基为原料，通过液态发酵方式，采用实验室和室外盆栽及大田试验相结合，评价菌株J-6诱导烟株产生烟草黑胫病的抗性作用。
[0016]本发明的阿氏芽孢杆菌命名为阿氏芽孢杆菌J-6 (Bacillus aryabhattai J-6),已在保藏单位保藏，保藏单位名称:中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏日期为2013 年 10 月 17 日，保藏编号为 CCTCC NO:M2013475。
[0017]1、阿氏芽孢杆菌J-6菌株的鉴定
[0018]阿氏芽孢杆菌菌株J-6的菌落形态特征:菌株J-6菌落突起，表面有皱褶，呈乳白色，直径0.32mm~1.91mm。如图2所示。
[0019]菌株J-6的显微形态特征:菌体形态为杆状，为无芽孢的革兰氏阳性菌，兼性厌氧。
[0020]菌株J-6生理生化特征:见表1。
[0021 ] 表1阿氏芽孢杆菌菌株J-6生理生化特征[0022]
【权利要求】
1.阿氏芽孢杆菌，其特征在于，本发明所述的阿氏芽孢杆菌命名为阿氏芽孢杆菌J-6(Bacillus aryabhattai J_6),已在保藏单位保藏,保藏单位名称:中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏日期为2013年10月17日，保藏编号为CCTCC NO:M2013475。
2.权利要求1所述阿氏芽孢杆菌在防治烟草黑胫病中的应用，其特征在于，阿氏芽孢杆菌J-6 (Bacillus aryabhattai J-`6)应用于防治烟草黑胚病。
【文档编号】C12R1/07GK103614319SQ201310559441
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年11月12日 优先权日:2013年11月12日
【发明者】李祖红, 曾嵘, 赖泳红, 张拯研, 高华锋, 林选知, 张瑞勤 申请人:云南省烟草公司曲靖市公司, 云南大学