葡糖糖酸内酯在诱导纤维素酶表达中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及葡糖糖酸内酯在诱导纤维素酶表达中的应用，所述葡糖糖酸内酯为δ-葡萄糖酸内酯，结构式如下所示：本发明为从原料和后期分离纯化工艺两方面降低纤维素酶的生产成本提供了新的途径，并且新类型纤维素酶表达诱导物的发现对于科研方面更进一步揭示纤维素酶诱导表达调控机制具有促进作用。
【专利说明】葡糖糖酸内酯在诱导纤维素酶表达中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及葡糖糖酸内酯在诱导纤维素酶表达中的应用，特别涉及δ-葡萄糖酸内酯(δ-gluconolactone)在诱导纤维素酶表达中的应用，属生物工程【技术领域】。
【背景技术】
[0002]地球上存在丰富的木质纤维素资源，其在可循环替代能源及基础化合物生产方面具有巨大的应用潜力。众所周知，纤维素的降解终产物是葡萄糖，葡萄糖作为一种工业原料可进行多种衍生物的合成。纤维素降解方法主要有化学法和生物法两种方法，前者主要是通过强酸或者强碱破坏木质纤维素的天然结构，并使木质纤维素进行不同程度的降解，后续处理麻烦对环境危害极大；后者主要是通过微生物对木质纤维素进行生物降解，条件温和且对环境友好，有利于可持续发展。
[0003]自然界存在许多可有效降解转化木质纤维素的微生物，其对木质纤维素的降解过程构成了地球碳循环的一个重要方面，其中瑞氏木霉(Trichoderma reesei)是最重要的代表菌株。它通过分泌纤维素酶来降解纤维素，主要包括外切葡聚糖苷酶、内切葡聚糖苷酶、β_葡萄糖苷酶等。真菌所产生的纤维素酶大部分都是诱导酶，添加高效诱导物是提高纤维素酶诱导表达的一种有效方法。目前为止，已有大量文献报道微晶纤维素(Avicel)，纤维糊精(cellodextrin),纤维二糖(Cellobiose),乳糖(Lactose),槐糖(Sophorose)等均具有诱导纤维素酶表达能力。其中微晶纤维素属不溶性底物，其作为诱导物给后续的纤维素酶分离纯化带来一定的麻烦，纤维糊精，纤维二糖，槐糖具有明显的纤维素酶诱导效果，但由于其价格昂贵造成成本过高。另外，一个制约纤维素生物降解的关键性因素就是降解速度过慢。
[0004] 因此，寻找新的价格适当的新型纤维素酶诱导物对于更深层次的探索纤维素酶诱导表达调控机制以便通过遗传手段提高纤维素降解菌利用纤维素的效率，促进纤维素酶工业生产，实现木质纤维素类物质合理利用具有及其重大的意义。
【发明内容】
[0005]本发明针对现有技术的不足，提供葡糖糖酸内酯在诱导纤维素酶表达中的应用。
[0006]葡糖糖酸内酯在诱导纤维素酶表达中的应用，所述葡糖糖酸内酯为δ-葡萄糖酸内酯，结构式如下所示:
[0007]
【权利要求】
1.葡糖糖酸内酯在诱导纤维素酶表达中的应用，所述葡糖糖酸内酯为S-葡萄糖酸内酯，结构式如下所示:
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤为:向以S-葡萄糖酸内酯为碳源的诱导培养基中接种产纤维素酶的微生物，使诱导培养基中S-葡萄糖酸内酯的质量浓度为0.2~0.5%，经诱导培养，即可。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述δ-葡萄糖酸内酯的质量浓度为0.25%。
4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产纤维素酶的微生物选自瑞氏木霉TU-6。
5.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述维素酶为纤维素外切酶CBHl，氨基酸序列如SEQ ID N0.1所示。
6.如权利要求2所述 的应用，其特征在于，所述诱导培养基，每升组分如下:
【文档编号】C12N9/42GK103695395SQ201310705686
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月19日 优先权日:2013年12月19日
【发明者】刘巍峰, 寇艳波, 陈冠军, 徐金涛, 张伟欣, 王志星, 赵国蕾 申请人:山东大学