一种提高蚕桑生物质中dnj含量的微生物发酵法
【专利摘要】本发明涉及一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法，是将蚕桑生物质自然干燥或热风干燥，粉碎，过筛，备用；灵芝菌株经活化后培养灵芝菌液；按(4-5):(1.0-1.2):(0.8-1.0)的比例分别称取蚕桑生物质、葡萄糖和KNO3溶于18-20倍体积的水中，混匀，调pH值至中性，120℃灭菌20-30min，接种体积比为2-3%的活化灵芝菌液，室温摇床振荡发酵培养2-3天；收集经灵芝菌株发酵的产物，在60℃下热风干燥、粉碎，经处理后，蚕桑生物质的DNJ含量显著提高，大分子物质的含量显著降低，工艺简便，易于工业化生产。
【专利说明】—种提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种利用微生物发酵技术提高蚕桑生物质中1-脱氧野尻霉素含量的方法，属于发酵工艺技术应用领域。
【背景技术】
[0002]1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin, DNJ)是一种多羟基哌唳生物碱,具有通过抑制α-葡萄糖苷酶活性，进而抑制餐后血糖升高(降血糖)、抗病毒、抗肿瘤等多种生物学活性，在食品、医药等领域中具有重要的应用价值。自然界中含有DNJ的生物如桑树、鸭跖草、风信子、沙参属植物、爵床科植物、链霉菌属及芽孢杆菌属，其中以桑树的含量最为丰富，然而，桑叶中DNJ含量约为0.10%，相对于临床需求仍然偏低，用桑叶加工成的药品或保健品功效不明显；其次，桑树生长期较长，产量易收到季节影响，难以稳定持续地供应市场；而且，桑叶中DNJ的含量受诸多因素影响，如季节、叶位、大气环境和土壤微环境等。因此，限制了以桑树为来源的DNJ在医药、食品上的应用。市场迫切需要一种能够有效提高含生物材料DNJ含量的方法。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的方法，来源易于获得，制备工艺简单。
[0004]为了达到上述目的，本发明实现目的所采用的技术方案如下:
[0005]一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法，包括以下步骤:
[0006](1)蚕桑生物质的处理:将蚕桑生物质如桑叶、桑根、桑枝、蚕粪、家蚕幼虫，自然干燥或热风干燥，粉碎，过40目筛,备用；
[0007](2)微生物菌株的选择及菌液培养:选用灵芝菌株，经活化后在普通PDA培养液中培养至长满菌丝球，即为灵芝菌液。
[0008](3)发酵:按(4-5): (1.0-1.2): (0.8-1.0)的重量比例分别称取蚕桑生物质、葡萄糖和KNO3，溶于18-20倍体积的水中，混匀，调pH值至中性，120°C灭菌20_30min，接种体积比为2-3%的活化灵芝菌液，在25°C -28°C下，IOOrpm摇床振荡发酵培养2_3天；
[0009](4)干燥粉碎:收集经灵芝菌株发酵的产物，在60°C下热风干燥、粉碎，即得富含DNJ的原料粉。
[0010]本发明的微生物发酵方法提高蚕桑生物质中DNJ含量的优点和有益效果:
[0011]1、采用微生物发酵法，将灵芝菌株的菌液加入到蚕桑生物质中，经液体发酵后蚕桑生物质的DNJ含量显著提高，技术工艺简便，易于工业化生产；
[0012]2、以桑树枝条为原料，或者以桑叶为食的家蚕(具有累积DNJ的作用，研究表明，5龄第3天家蚕幼虫体内DNJ的含量是桑叶中的2.7倍)为原料，易于获得，来源广泛；
[0013]3、经微生物发酵后蚕桑生物质中大分子物质(如蛋白质、核酸等)或不利于消化物质(生物碱、脂肪等)可进行降解作用，提高其消化吸收率。【具体实施方式】
[0014]下面通过实施例对本发明的微生物发酵提高蚕桑生物质中DNJ含量的方法进行进一步具体描述:
[0015]实施例1
[0016]一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法，包括以下步骤:
[0017](I)分别收集以下蚕桑生物质:成熟桑叶、桑根、桑枝、蚕粪、5龄家蚕幼虫，自然干燥或60°C热风干燥，经普通粉碎机粉碎过40目筛。
[0018](2)微生物菌株的选择与培养:
[0019]选用灵芝菌株(中国科学院微生物研究所)，经活化后(采用常规微生物活化技术)在普通PDA培养液中培养灵芝菌液，至长满菌丝球，即为灵芝菌液。
[0020](3)微生物发酵:
[0021]按5:1:0.8的重量比分别称取蚕桑生物质、葡萄糖和KNO3溶于20倍体积的水中，混匀，调pH值至6.97，120°C灭菌20min ;然后，接种1/50体积的活化灵芝菌液，在26°C下，IOOrpm摇床振荡发酵培养2_3天。
[0022](4)干燥粉碎:
[0023]收集经灵芝菌株 发酵的蚕桑生物质产物，在60°C下热风干燥、粉碎，即得富含DNJ的原料粉。
[0024]实施例1各种蚕桑生物质经发酵后DNJ含量和大分子物质(如蛋白质、核酸等)含量比较数据见表1:
[0025]表1
[0026]
【权利要求】
1.一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法，包括以下步骤: (1)蚕桑生物质的处理:将蚕桑生物质自然干燥或热风干燥，粉碎，过40目筛，备用； (2)微生物菌株的选择:选用灵芝菌株，经活化后在普通PDA培养液中培养至长满菌丝球，得到灵芝菌液，备用； (3)发酵:按(4-5): (1.0-1.2): (0.8-1.0)的重量比分别称取蚕桑生物质、葡萄糖和KNO3，溶于18-20倍体积的水中，混匀，调pH值至中性，120°C灭菌20_30min，接种体积比为2-3%的活化灵芝菌液，在25°C _28°C下，摇床振荡发酵培养2_3天； (4)干燥粉碎:收集经灵芝菌株发酵的产物，干燥、粉碎，即得富含DNJ的原料粉。
2.根据权利要求1所述的提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法，其特征在于所述的蚕桑生物质是桑叶、桑根、桑枝、蚕粪或家蚕幼虫。
【文档编号】C12R1/645GK103789367SQ201410019238
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2014年1月16日 优先权日:2014年1月16日
【发明者】桂仲争, 贾俊强, 蒋运钢 申请人:江苏科技大学