龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用。本发明通过脂肪酶抑制实验及动物实验证明了龙血竭提取物具有抑制脂肪酶活性、显著降低营养性肥胖大鼠体重的作用。
【专利说明】龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及医药、保健食品、饮料【技术领域】，具体地说是涉及中药提取物的用途，更具体地说是涉及龙血竭提取物用于制备减肥产品的用途。
【背景技术】
[0002]我国食品药品监督管理总局颁布的国家标准[WS3-082(Z-016)_99(Z)]中将百合科龙血树属植物剑叶龙血树Dranaena cochinchinensis (Lour.) S.C.Chen的含脂木材经提取得到的树脂定名为“龙血竭”。龙血竭为名贵中药材，现代药理研究表明其具有活血止血、抗炎镇痛、抗菌、抗氧化、促进表皮修复等作用。临床上已应用于多种病症的治疗:子宫肌瘤、子宫内膜异位症、闭经痛经、月经不调等妇科疾病；消化道出血、胃炎、胃溃疡、结肠炎、甲亢等内科疾病；跌打损伤、创伤骨折、烧伤烫伤、痔疮、脓疮久不收口等外科疾病；皮肤瘙痒、真菌感染、痤疮等皮肤科疾病。
[0003]目前已从龙血竭中分离检测出130多种化合物。虽然有研究表明龙血竭具有降血脂作用，但其对脂肪酶的抑制作用及在减肥方面的应用尚未有报道。
【发明内容】
[0004]本发明的目 的是提供龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用。
[0005]本发明的另一目的是提供龙血竭提取物的制备方法。
[0006]其中上述的减肥产品是药物制剂、保健食品或饮料中的任意一种。
[0007]其中所述的药物制剂、保健食品是口服制剂、皮肤外用制剂中任何一种临床可接受的制剂。
[0008]其中所述的龙血竭提取物的制备方法是以下任意一种:
[0009]a.取龙血竭药材，粉碎，过筛，装入萃取釜中，萃取压力10~30MPa，温度40~50°C，萃取时间I~5小时，CCV流量25~35kg / h ;收集萃取残余物，放入浸出器中，加入5~8倍重量的丙酮溶液，水浴加热，温度70~80°C，反复抽提4~8小时，抽提完全后，提取物回收溶剂并浓缩至干，将所得提取物再置于真空干燥器中50~70°C减压干燥2~3小时，取出，粉碎、过筛，即得龙血竭提取物；
[0010]b.取龙血竭药材，加入8~10倍量50~95%乙醇浸泡I~3小时后，加热回流提取I~3次，每次I~3小时，过滤或离心，合并提取液即为醇提取液，减压浓缩，真空干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物；
[0011]C.取龙血竭药材，加5~10倍量乙酸乙酯回流提取I~3次，每次I~3小时，得龙血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并浓缩至干，提取物粉碎后用20~40倍量的0.1~I %的NaOH搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调pH，静置，倾出上清液，沉淀离心滤过，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物；
[0012]d.市售。
[0013]上述的制备方法，优选的技术方案为:[0014]a.取龙血竭药材，粉碎，过筛，装入萃取釜中，萃取压力20MPa，温度45°C，萃取时间2小时，CCV流量30kg / h;收集萃取残余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加热，温度80°C，反复抽提8小时，抽提完全后，提取物回收溶剂并浓缩至干，将所得提取物再置于真空干燥器中60°C减压干燥2小时，取出，粉碎、过筛，即得龙血竭提取物；
[0015]b.取龙血竭药材，加入10倍量65%乙醇浸泡I小时后，加热回流提取3次，每次2小时，过滤或离心，合并提取液即为醇提取液，减压浓缩，真空干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物；
[0016]c.取龙血竭药材，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小时，得龙血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并浓缩至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调PH，静置，倾出上清液，沉淀离心滤过，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物；
[0017]d.市售。
[0018]本发明的应用中，所述的药物制剂及保健食品是口服制剂、皮肤外用制剂中任何一种临床可接受的制剂。为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如:填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、胶粘剂、保湿剂、赋形剂、软化剂等，填充剂包括:淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、鹿糖等，崩解剂包括:淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素纳等，润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等，助悬剂包括:聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等，粘合剂包括:水、乙醇、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素，明胶溶液、蔗糖溶液、聚乙烯比咯烷酮等，甜味剂包括:糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等，矫味剂包括:甜味剂及各种香精，胶粘剂包括明胶、淀粉、琼脂、甘露聚糖、海藻酸、聚丙烯酸、聚丙烯酸盐类、糊精、甲基纤维素、PVP,甲基乙烯基醚、顺丁烯二酸酐的共聚物、阿拉伯胶、西黄芪胶、梧桐胶`、槐树豆胶等，保湿剂包括乙二醇、二甘醇、聚乙二醇、甘油、山梨醇、丙二醇等，赋形剂包括高岭土、粘土、滑石粉、碳酸钙、氧化锌等，软化剂包括蓖麻油及其他油脂等。
[0019]实施方式
[0020]为了更好地理解本发明，发明人提供以下研究资料，说明本发明的技术效果，以下实施例用于进一步说明，但不限于本发明。
[0021]实施例1硬胶囊剂的制备
[0022]取龙血竭药材500g，粉碎，过筛，装入萃取釜中，萃取压力20MPa，温度45°C，萃取时间2小时，CO2流量30kg / h ;收集萃取残余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加热，温度80°C，反复抽提8小时，抽提完全后，提取物回收溶剂并浓缩至干，将所得提取物再置于真空干燥器中60°C减压干燥2小时，取出，粉碎、过筛，即得龙血竭提取物，加入适量淀粉，以聚丙烯酸树脂制粒，装胶囊，制粒，即得。
[0023]实施例2软胶囊剂的制备
[0024]取龙血竭药材600g，加入10倍量65%乙醇浸泡I小时后，加热回流提取3次，每次2小时，过滤或离心，合并提取液即为醇提取液，减压浓缩，真空干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物，加入玉米油、大豆磷脂、蜂蜡制成的混合油基质适量，充分混合，用胶体磨研至均匀，制粒，即得。
[0025]实施例3颗粒剂的制备
[0026]取龙血竭药材800g，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小时，得龙血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并浓缩至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH溶液搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调PH，静置，倾出上清液，沉淀离心滤过，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成细粉，加入适量的蔗糖和淀粉，或加入适量的糊精，制成颗粒，干燥，加入适量羧甲基纤维素钠，制粒，即得。
[0027]实施例4片剂的制备
[0028]取龙血竭药材700g，粉碎，过筛，装入萃取釜中，萃取压力lOMPa，温度40°C，萃取时间I小时，CO2流量25kg / h ;收集萃取残余物，放入浸出器中，加入5倍重量的丙酮溶液，水浴加热，温度70°C，反复抽提4小时，抽提完全后，提取物回收溶剂并浓缩至干，将所得提取物再置于真空干燥器中50°C减压干燥2小时，取出，粉碎、过筛，即得龙血竭提取物，加入硬脂酸镁混合均匀压制成片，即得。
[0029]实施例5滴丸剂的制备
[0030]取龙血竭药材50g，加入8倍量50%乙醇浸泡I小时后，加热回流提取I小时，过滤或离心，提取液即为醇提取液，减压浓缩，真空干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物，加入适量聚乙二醇4000，加热熔化，混匀，滴入甲基硅油冷却剂中，制丸，包薄膜衣，即得。
[0031]实施例6浓缩丸的制备
[0032]取龙血竭药材400g，加5倍量乙酸乙酯回流提取I小时，得龙血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并浓缩至干。提取物粉碎后用20倍量的0.1 %的NaOH溶液搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调PH，静置，倾出 上清液，沉淀离心滤过，沉淀，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成细粉，加入适量水，泛制成丸，低温干燥，制成浓缩丸，即得。
[0033]实施例7贴剂的制备
[0034]取龙血竭药材800g，加入10倍量95%乙醇浸泡3小时后，加热回流提取3次，每次3小时，过滤或离心，合并两次提取液即为醇提取液，减压浓缩至适量，加入适量的由橡胶、松香等制成的基质中，制成涂料，进行涂膏；盖衬，切片，或收卷，即得。
[0035]实施例8咀嚼片的制备
[0036]取龙血竭药材500g，加10倍量乙酸乙酯回流提取3次，每次3小时，得龙血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并浓缩至干。提取物粉碎后用40倍量的1%的NaOH溶液搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调PH，静置，倾出上清液，沉淀离心滤过，沉淀，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成细粉，加硬脂酸镁混合，压片，包衣、灭菌，即得。
[0037]实施例9固体饮料的制备
[0038]取龙血竭药材800g，粉碎，过筛，装入萃取釜中，萃取压力30MPa，温度50°C，萃取时间5小时，CO2流量35kg/h ;收集萃取残余物，放入浸出器中，加入8倍重量的丙酮溶液，水浴加热，温度80°C，反复抽提8小时，抽提完全后，提取物回收溶剂并浓缩至干，将所得提取物再置于真空干燥器中70°C减压干燥3小时，取出，粉碎、过筛，即得龙血竭提取物，加入蔗糖、水搅拌，造粒，烘干，过筛，高温杀菌，即得。
[0039]实施例10对胰脂肪酶的抑制作用
[0040]1、实验药物、材料[0041]1.1 药物
[0042]桔梗水提物:桔梗500g，粉碎，加水浸泡30分钟，加入6倍量蒸馏水，煎煮2次，过滤，合并两次滤液，减压浓缩，得桔梗水提物；
[0043]药物1:取龙血竭药材500g，粉碎，过筛，装入萃取釜中，萃取压力20MPa，温度45°C，萃取时间2小时，CCV流量30kg / h ;收集萃取残余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加热，温度80°C，反复抽提8小时，抽提完全后，提取物回收溶剂并浓缩至干，将所得提取物再置于真空干燥器中60°C减压干燥2小时，取出，粉碎、过筛，即得龙血竭提取物；
[0044]药物I1:取龙血竭药材500g，加入10倍量65%乙醇浸泡I小时后，加热回流提取3次，每次2小时，过滤或离心，合并提取液即为醇提取液，减压浓缩，真空干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物；
[0045]药物II1:取龙血竭药材500g，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小时，得龙血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并浓缩至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH溶液搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调PH，静置，倾出上清液，沉淀离心滤过，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物。
[0046]1.2 材料
[0047]猪胰脂肪酶、4-硝基苯棕榈酸酯、阿拉伯树胶粉、奥利司他，sigma公司。
[0048]Tris, Amersco0
[0049]异丙醇，国药集团化学试剂有限公司。
[0050]脱氧胆酸钠，国`药集团化学试剂有限公司。
[0051]DMS0，国药集团化学试剂有限公司。
[0052]盐酸，南京化学试剂有限公司。
[0053]酶标仪，moleculardevices spectraMax M2e。
[0054]天平，MettlerToledo AL104。
[0055]离心机，Eppendorf5424。
[0056]2、实验方法
[0057]2.1试剂配制
[0058]药品配制:称取样品溶于DMSO中配制成50mg / mL母液(奥利司他配制成
0.5mg / mL母液)，-20°C保存。缓冲液配制:50mM Tris-HCl溶液，含0.1%阿拉伯树胶粉和
0.2%脱氧胆酸钠，pH值为10.0。酶溶液配制:用缓冲液配制1.2mg / mL酶，混匀，5000rpm离心5分钟，取上清，分装，-70°C保存。底物溶液配制:称取0.302g pNPP，加入32ml异丙醇，超生乳化，即为25mM pNPP，分装，4°C保存。
[0059]2.2脂肪酶抑制剂活性测定
[0060]在96孔细胞培养板中，加入198 μ I缓冲液，再加入2μ I各样品母液，混匀，使其稀释100倍。脂肪酶用缓冲液稀释120倍，底物用缓冲液稀释50倍。以上稀释后的试剂待用。取96孔细胞培养板，按照表1中不同的分组分别加入缓冲液、抑制剂和脂肪酶，37°C孵育10分钟。脂肪酶和抑制剂预孵育10分钟后，每孔加入100 μ I底物，37°C反应60分钟。在酶标仪0D405nm处测量各孔的吸光值。
[0061 ] 表1脂肪酶抑制剂筛选反应体系(200 μ I)
【权利要求】
1.龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用，其特征在于，所述的龙血竭提取物中龙血竭总黄酮或总酚含量大于50%。
2.根据权利要求1所述的龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用，其特征在于，所述的减肥产品是以下产品中的任意一种:药物制剂、保健食品、饮料。
3.根据权利要求2所述的龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用，其特征在于，所述的药物制剂及保健食品是口服制剂、皮肤外用制剂中任何一种临床可接受的制剂。
4.根据权利要求1所述的龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用，其特征在于，所述的龙血竭提取物的制备方法是以下任意一种: a.取龙血竭药材，粉碎，过筛，装入萃取釜中，萃取压力10~30MPa，温度40~50°C，萃取时间I~5小时，CO2流量25~35kg / h ;收集萃取残余物，放入浸出器中，加入5~8倍重量的丙酮溶液，水浴加热，温度70~80°C，反复抽提4~8小时，抽提完全后，提取物回收溶剂并浓缩至干，将所得提取物再置于真空干燥器中50~70°C减压干燥2~3小时，取出，粉碎、过筛，即得龙血竭提取物； b.取龙血竭药材，加入8~10倍量50~95%乙醇浸泡I~3小时后，加热回流提取I~3次，每次I~3小时，过滤或离心，合并提取液即为醇提取液，减压浓缩，真空干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物； c.取龙血竭药材，加5~10倍量乙酸乙酯回流提取I~3次，每次I~3小时，得龙血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并浓缩至干，提取物粉碎后用20~40倍量的0.1~1%的NaOH搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调pH，静置，倾出上清液，沉淀离心滤过，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物； d.市售。`
5.根据权利要求4所述的龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用，其特征在于，所述的龙血竭提取物的制备方法是以下任意一种: a.取龙血竭药材，粉碎，过筛，装入萃取釜中，萃取压力20MPa，温度45°C，萃取时间2小时，CCV流量30kg / h;收集萃取残余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加热，温度80°C，反复抽提8小时，抽提完全后，提取物回收溶剂并浓缩至干，将所得提取物再置于真空干燥器中60°C减压干燥2小时，取出，粉碎、过筛，即得龙血竭提取物； b.取龙血竭药材,加入10倍量65%乙醇浸泡I小时后，加热回流提取3次，每次2小时，过滤或离心，合并提取液即为醇提取液，减压浓缩，真空干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物； c.取龙血竭药材，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小时，得龙血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并浓缩至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸调PH，静置，倾出上清液，沉淀离心滤过，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成细粉，即得龙血竭提取物； d.市售。
6.根据权利要求1所述的龙血竭提取物在制备减肥产品中的应用，其特征在于，所述的肥胖是指非药物性肥胖。
【文档编号】A23L1/29GK103768345SQ201410043396
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2014年1月24日 优先权日:2014年1月24日
【发明者】萧伟, 王振中, 费洪强, 李娜, 曹亮, 刘文君, 齐晓辉, 孟兆青, 丁岗, 王跃生, 徐海娟 申请人:江苏康缘药业股份有限公司