一种促进大鼠神经干细胞分化的培养基及其使用方法
【专利摘要】本发明公开了一种促进大鼠神经干细胞分化的培养基及其使用方法。该培养基是在Neurobasal-A?medium中含有B-27?Supplement?without?retinoic?acid，L-Glutamine，FBS，β-NGF，BDNF，RA，维生素E。该培养基不仅成本低，而且关键是解决了现有的神经干细胞分化效率低的问题，明显提高了神经干细胞分化成神经元的效率。
【专利说明】一种促进大鼠神经干细胞分化的培养基及其使用方法
【技术领域】
[0001]本发明属于神经干细胞培养分化的【技术领域】，具体涉及一种促进大鼠神经干细胞分化的培养基及其使用方法。
【背景技术】
[0002]传统观点普遍认为，中枢神经系统的自我修复能力有限，损伤后的神经元将不能再生。尽管如此，全世界的学者们都在努力试图挑战这种传统的观念。自从Reynolds和Weiss在20世纪90年代从小鼠的纹状体组织中分离、培养出神经干细胞以来，人们不仅从各类动物及人的胚胎，而且从成年动物及人的中枢神经系统组织内分离、培养出了神经干细胞，并且证明其具有很强的增殖及自我更新能力，打破了这一传统观念。学术界目前将神经干细胞的特性概括描述为一类具有增殖、自我更新和多向分化潜能力的母细胞，它通过不对等的分裂方式进行增殖，并且根据培养条件的不同，可分化出神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等神经组织的各类细胞。
[0003]神经干细胞向神经细胞的分化不仅可以应用于临床治疗各种神经系统的疾病，如帕金森症、脑卒中、脊髓病变等；另外也可以作为体外研究哺乳动物神经系统发育的模型，不但能获得均匀大量的细胞，而且能控制增殖速度和分化方向，易与宿主细胞形成正常的细胞联系。目前基于神经细胞的替代疗法主要有两类，一类是通过调控体内神经干细胞的增殖分化来实现；另一类是通过神经干细胞移植来替代丢失的神经组织。大脑损伤后，新生的神经元数量非常少，而且可能不具有功能，不能整合到宿主的大脑环路中。这时候可以选择移植神经干细胞到损伤区域，使其定向分化成神经元，但是，移植的细胞面临着同样的问题，那就是神经元样分化、成熟以及如何整合到宿主的神经功能网络中。因此，如何诱导神经干细胞增生并分化为神经元，提高神经干细胞分化成神经元的效率成为干细胞移植前非常关键的基础。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种促进大鼠神经干细胞分化的培养基及其使用方法，解决现有的神经干细胞分化效率低的问题，提高神经干细胞分化成神经元的效率。
[0005]一种促进大鼠神经干细胞分化的培养基，是在Neurobasal-A medium中含有
[0006]
【权利要求】
1.一种促进大鼠神经干细胞分化的培养基，其特征在于，是在Neurobasal-A medium中含有
2.根据权利要求1所述的促进大鼠神经干细胞分化的培养基，其特征在于，是在Neurobasal-A medium 中含有
3.权利要求1所述的促进大鼠神经干细胞分化的培养基的使用方法，其特征在于，初始状态的细胞数为5Χ 105-2X IO6个细胞/ml培养液，37°C、5% CO2条件下进行培养，分化培养时间为5-7天，培养过程中隔天半量换液。
4.根据权利要求3所述的促进大鼠神经干细胞分化的培养基的使用方法，其特征在于,25cm2培养瓶中培养基用量为5_6ml。
【文档编号】C12N5/0797GK104017771SQ201410288590
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年6月24日 优先权日:2014年6月24日
【发明者】李志远, 邓思浩, 薛志琴, 贺旭, 钟小林, 胡杏 申请人:中南大学