美味牛肝菌提取物在降低动物血液中亚硝酸盐含量中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了美味牛肝菌提取物在降低动物血液中亚硝酸盐含量中的应用。本发明所提供的美味牛肝菌提取物在制备降低动物血液中亚硝酸盐含量的产品中的应用；所述美味牛肝菌提取物为用水从美味牛肝菌(Boletus?edulis)子实体中提取出来的水溶性物质。实验证明，本发明的美味牛肝菌(Boletus?edulis)水提物冻干粉能够显著降低大鼠血液中的亚硝酸盐含量；本发明的美味牛肝菌(Boletus?edulis)水提物冻干粉胶囊在降低大鼠血液中的亚硝酸盐含量中具有更好的药效。本发明的美味牛肝菌水提物冻干粉或美味牛肝菌(Boletus?edulis)水提物冻干粉胶囊可用于降低动物血液中的亚硝酸盐含量。
【专利说明】美味牛肝菌提取物在降低动物血液中亚硝酸盐含量中的应 用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物领域中美味牛肝菌提取物在降低动物血液中亚硝酸盐含量中的 应用。
【背景技术】
[0002] 亚硝酸盐是一类含有亚硝酸根离子（NCV)的无机化合物，白色或淡黄色结晶盐类 物质，味苦，外形极似食盐。亚硝酸盐是自然界氮循环中的重要中间物质，广泛存在于人类 生活环境中。水果和蔬菜中含有亚硝酸盐，海水、地下水、自来水中也同样含有亚硝酸盐。而 且随着环境污染的加剧，氮肥的过量使用，使得农产品中的亚硝酸盐含量日趋升高。而亚硝 酸盐作为一种允许使用的食品添加剂，被广泛应用于肉制品中，其可与肉品中的肌红素结 合，使其保持良好色泽外观，此外腌制食品和发酵食品中由于微生物的发酵作用也会产生 亚硝酸盐。
[0003] 过量摄入亚硝酸盐会引起中毒，主要机理是亚硝酸盐被血液吸收后，可使正常的 血红蛋白（Fe 2+)变成变性血红蛋白（Fe3+)，从而失去携氧能力，出现组织缺氧现象。同时亚 硝酸盐是一种致癌物质，亚硝酸盐与蛋白质代谢的中间产物仲胺反应，生成亚硝胺，亚硝胺 可诱发肝癌、食道癌和咽癌等。
[0004] 人亚硝酸盐的中毒量为〇· 2?0· 5克，致死量为3克。亚硝酸盐中毒潜伏期短，一 般为数十分钟或1?3小时，症状以紫绀为主。皮肤粘膜、口唇、指甲下最明显，并伴有头痛、 头晕、心率加快、呕吐、腹痛、腹泻等。亚硝酸盐中毒的治疗方法主要有吸氧、洗胃和用美兰 (亚甲蓝）处理。美蓝是亚硝酸盐中毒的特效解毒剂，能还原高铁血红蛋白，恢复正常输氧 功能。用量为每公斤体重1?2mg。同时高渗葡萄糖可提高血液渗透压，能增加解毒功能并 有短暂利尿作用。
[0005] 美味牛肝菌（Boletus edulis)又称大脚燕，是一种世界性的食用菌，美味牛肝 菌（Boletus edulis)属于担子菌门（Basidiomycota)、层菌纲（Hymenomycetes)、伞菌目 (Agaricases)、牛肝菌科(Boletaceae)，是一种食药兼用且经济价值很高的大型真菌。在我 国，美味牛肝菌（B. edulis)主要分布于云南、黑龙江、四川、贵州、西藏、内蒙古、福建等省 区，其他各地的森林中也有一定量的分布。国外在北美洲，拉丁美洲的墨西哥，欧洲北至斯 堪的纳维亚半岛、南到希腊、意大利等地区均有分布。
【发明内容】
[0006] 本发明所要解决的技术问题是如何降低动物血液中亚硝酸盐的含量。
[0007] 为解决上述技术问题，本发明首先提供了美味牛肝菌提取物在制备降低动物血液 中亚硝酸盐含量的产品中的应用。
[0008] 本发明所提供的美味牛肝菌提取物在制备降低动物血液中亚硝酸盐含量的产品 中的应用；
[0009]所述美味牛肝菌提取物为美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物；
[0010]美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物为用水从美味牛肝菌（B〇letus edulis)子 实体中提取出来的水溶性物质。
[0011]上述应用中，所述产品可为药物、保健品、食品或食品添加物；所述药物散剂（如 冻干粉）或胶囊（如冻干粉胶囊）。
[0012]所述药，可以包含其它药学上可接受的载体。可作为药学上可接受的载体或其组 分可为：糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和土豆淀粉；西黄蓍胶粉末；麦芽； 明胶；滑石；固体润滑剂，如硬脂酸和硬脂酸镁；硫酸钙；植物油，如花生油、棉籽油、芝麻 油、橄榄油、玉米油和可可油；多元醇，如甘油、甘露糖醇；海藻酸；乳化剂，如 Tween ;磷脂， 如卵磷脂，大S·磷脂，憐脂酰乙醇胺，憐脂酰甘油，憐脂酰肌醇，磷脂酰丝氨酸，硬脂酰胺；胆 固醇；大分子尚聚物，如聚乙烯亚胺，壳聚糖，透明质酸；润湿剂，如月桂基硫酸钠；着色剂； 调味剂；压片剂、稳定剂；抗氧化剂；防腐剂；无热原水；等渗盐溶液；和磷酸盐缓冲液等； 生理盐水、甘油和磷酸盐缓冲盐水。
[0013]上述应用中，所述美味牛肝菌提取物可为美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻 干粉。
[0014]所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉可以包含其它药学上可接受的 载体。可作$药学上可接受的载体或其组分可为：糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉 米淀粉和土豆淀粉；西黄蓍胶粉末；麦芽；明胶；滑石；固体润滑剂，如硬脂酸和硬脂酸镁； 硫酸钙；植物油，如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油；多元醇，如甘油、甘 露糖醇；海藻酸；乳化剂，如Tween ;磷脂，如卵磷脂，大豆磷脂，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰甘油， 磷脂酰肌醇，磷脂酰丝氨酸，硬脂酰胺；胆固醇；大分子高聚物，如聚乙烯亚胺，壳聚糖，透 明质酸；润湿剂，如月桂基硫酸钠；着色剂；调味剂；压片剂、稳定剂；抗氧化剂；防腐剂；无 热原水；等渗盐溶液；和磷酸盐缓冲液等；生理盐水、甘油和磷酸盐缓冲盐水。
[0015] 所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉可装填至胶囊中，得到美味牛肝 菌（Boletus edulis)水提物冻干粉胶囊。
[0016] 所述胶囊可为肠溶胶囊，具体可为牛骨胶胶囊；所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉胶囊中所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉的含量可 为0.02g/胶囊。
[0017] 上述应用中，所述美味牛肝菌提取物可为美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻 干粉胶囊。
[0018] 所述胶囊可为肠溶胶囊，具体可为牛骨胶胶囊；所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉胶囊中所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉的含量可 为0.02g/胶囊。
[0019] 上述应用中，所述动物可为哺乳动物，如大鼠。
[0020] 为解决上述技术问题，本发明还提供了美味牛肝菌在制备降低动物体内亚硝酸盐 含量的产品中的应用。
[0021] 上述应用中，所述产品可为药物、保健品、食品或食品添加物；所述药物可为肠道 用药。
[0022] 所述药物可以包含其它药学上可接受的载体。可作为药学上可接受的载体或其组 分可为：糖类，如乳糖、葡甸糖和庶糖；淀粉，如玉米淀粉和土豆淀粉；西黄蓍胶粉末；麦芽； 明胶；滑石；固体润滑剂，如硬脂酸和硬脂酸镁；硫酸钥；植物油，如花生油、棉籽油、芝麻 油、橄榄油、玉米油和可可油；多元醇，如甘油、甘露糖醇；海藻酸；乳化剂，如 Tween;磷脂， 如卵磷脂，大Si粦脂，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰甘油，磷脂酰肌醇，磷脂酰丝氨酸，硬脂酰胺；胆 固醇；大分子高聚物，如聚乙烯亚胺，壳聚糖，透明质酸；润湿剂，如月桂基硫酸钠；着色剂； 调味剂；压片剂、稳定剂；抗氧化剂；防腐剂；无热原水；等渗盐溶液；和磷酸盐缓冲液等； 生理盐水、甘油和磷酸盐缓冲盐水。
[0023]上述应用中，所述动物为哺乳动物。
[0024]所述美味牛肝菌提取物、和/或所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物、和 /或所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉、和/或所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻千粉胶囊，也属于本发明的保护范围。
[0025]上文中，所述美味牛肝菌子实体可为新鲜的子实体或冷冻的子实体。所述冷冻的 子实体可为将新鲜的美味牛肝菌子实体在-20°C冻存一年的子实体。
[0026]上文中，所述美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物可按照如下方法获得：将在 15-25°C解冻的美味牛肝菌子实体或新鲜的美味牛肝菌子实体在4-101：粉碎后用水浸提， 收集水溶性物质得到所述美味牛肝菌提取物。
[0027] 上文中，所述美味牛肝菌子实体可粉碎至50-65目。
[0028]上文中，所述用水浸提可为在4-l(TC (如4。(：）用水浸提10-30分钟（如30分 钟）。
[0029]上述美味牛肝菌提取物的制备方法中，可采用离心分离所述水溶性物质。所述离 心采用的离心力可为8〇〇〇-l〇〇〇〇g (如8000g)，离心时间可为10-20分钟（如15分钟，10-15 分钟或15-20分钟）。
[0030] 上文中，所述水可为生理盐水（NaCl的浓度为0. 9% )。
[0031] 实验证明，本发明的美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉能够显著降低 大鼠血液中的亚硝酸盐含量，降低程度与美味牛肝菌的剂量成正比：与灌胃生理盐水的对 照组雄性SD大鼠血液中的亚硝酸盐含量相比，美味牛肝菌水提物冻干粉低剂量实验组和 高剂量实验组的雄性SD大鼠血液中的亚硝酸盐含量的峰均后移且峰值均降低，对照组雄 性SD大鼠血液中的亚硝酸盐含量在灌胃25min后达到最高值18. 45ymol/10yL,然后 逐步降低；低剂量实验组雄性SD大鼠血液中的亚硝酸盐含量的峰明显后移且峰值明显 降低，在灌胃451^11后达到最高值13.08 11111〇1/1(^1^，峰值比对照组降低了29.11%;高 剂量实验组雄性SD大鼠血液中的亚硝酸盐峰进一步后移且峰值更低，在55min时达到峰 值7. 25 μ mol/10 μ L，且峰形不明显，其峰值分别比对照组和低剂量组降低了 60. 70 %和 44. 57%。
[0032] 实验证明，本发明的美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉胶囊能够显著 降低大鼠血液中的亚硝酸盐含量：大鼠灌胃美味牛肝菌胶囊165min时，灌胃美味牛肝菌 水提物冻干粉胶囊的实验组大鼠血液中亚硝酸盐的含量为4. 73 μ mol/10 μ L，灌胃空胶囊 的对照组大鼠血液中亚硝酸盐的含量为6.78 μ mol/10 μ L，实验组大鼠血液中亚硝酸盐 的含量明显降低，降低了 30· 24%。大鼠灌胃美味牛肝菌胶囊后210-360min，实验组大鼠 血液中亚硝酸盐的含量明显降低，且在灌胃210min后，实验组大鼠血液中亚硝酸盐的含 量的峰逐步向后推移：在灌胃210min后，实验组大鼠血液中亚硝酸盐的含量分别在灌胃 后的 210min、255min、3l5min 出现峰，峰值分别为 6· 46 μ mol/10 μ L、6· 54 μ mol/l〇 μ L、 8. 61μπιο1/10μ L，对照组大鼠血液中亚硝酸盐的含量分别在灌胃后的210min、240min、 285min 出现峰，峰值分别为 9· 63 μ mol/10 μ L、10. 08 μ mol/10 μ L、13. 20 μ mol/10 μ L, 实验组大鼠血液中亚硝酸盐的含量的峰的峰值的降低率分别是32· 92 %、35. 12 %和 34. 70%。
[0033] 实验证明，相同剂量的本发明的美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉胶 囊的药效高于本发明的美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉：美味牛肝菌水提物 冻千粉胶囊灌胃大鼠实验表明，与空胶囊对照组相比，按照2〇mg美味牛肝菌水提物冻干粉 /100g体重的标准对大鼠灌胃美味牛肝菌水提物冻干粉胶囊后的l2〇-36〇min内，大鼠血液 中亚硝酸盐的含量显著降低，降低血液中亚硝酸盐含量的活性持续时间大于240min ;美味 牛肝菌水提物冻干粉灌胃大鼠实验表明，与灌胃生理盐水的对照组相比，按照20mg美味牛 肝菌水提物冻干粉/l〇〇g体重的标准对大鼠灌胃美味牛肝菌水提物冻干粉后的75-100min 内，大鼠血液中亚硝酸盐的含量显著降低，美味牛肝菌的降低血液中亚硝酸盐含量的活性 持续时间为75_l〇〇min。说明本发明的美味牛肝菌水提物冻干粉或美味牛肝菌（ Boletus edulis)水提物冻干粉胶囊可用于降低动物血液中的亚硝酸盐含量。
【专利附图】
【附图说明】
[0034]图1为美味牛肝菌提取物冻千粉灌胃雄性SD大鼠后雄性SD大鼠血液中亚硝酸盐 含量的变化。其中，对照表不对照组雄性SD大鼠；2〇mg/100g表示灌胃20mg美味牛肝菌提 取物冻干粉/100g体重的雄性SD大鼠，即低剂量实验组雄性SD大鼠；40mg/100g表示灌胃 4〇mg美味牛肝菌提取物冻干粉/i〇〇g体重的雄性SD大鼠 ，即高剂量实验组雄性SD大鼠。 [0035]图2为美味牛肝菌水提物冻干粉胶囊灌胃雄性SD大鼠后雄性SD大鼠血液中亚硝 酸盐含量的变化。
【具体实施方式】
[0036]下面结合【具体实施方式】对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐 明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
[0037]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
[0038]下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0039]下述实施例中的SD大鼠 （Sprague Dawley大鼠 ），由中国人民解放军军事医学科 学院实验动物中心（许可证号：SCXK-(军）2007-004)提供。
[0040]下述实施例中的生理盐水均是指NaCl的浓度为〇. 9%的NaCl水溶液。
[0041]下述实施例中的美味牛肝菌（Boletus edulis)(高悦，吴小芹· 6种外生菌根菌对 3种松苗叶f录素含量及叶绿素荧光参数的影响·南京林业大学学报（自然科学版）.2〇1〇年 第06期）采自中国云南楚雄，公众可从野外采集，或从云南当地的野生食用菌市场购买，也 可从中国农业大学获得，以重复本申请实验。
[0042]下述实施例中的亚硝酸盐均为亚硝酸钠（北京化学试剂公司，货号7632_00- 〇)。
[0043]实施例1、美味牛肝菌水提物冻干粉对大鼠血液中亚硝酸盐含量的降低作用
[0044] 一、美味牛肝菌提取物的制备
[0045]取50〇g在_2〇 C冻存一年的子实体，加入500ml蒸馏水，在15-25-C解冻后，在41： 用组织捣碎机粉碎至50-65目，4°C下抽提30min。抽提液在4-C 8000g离心15min，得到的 上清液（750ml)即为美味牛肝菌水提物，每克美味牛肝菌子实体得到丨.5ml美味牛肝菌水 提物。
[0046]将美味牛肝菌水提物在-80°C冷冻，然后用冻干机冻干，得到25000mg美味牛肝菌 水提物冻干粉，平均每克鲜美味牛肝菌子实体得到50mg美味牛肝菌水提物冻干粉。
[0047]二、美味牛肝菌水提物冻干粉对大鼠血液中亚硝酸盐含量的降低作用
[0048]以45只体重为200-25〇g的雄性SD大鼠为实验材料，将这45只雄性SD大鼠随机 分为三组，每组15只雄性SD大鼠，即低剂量实验组、高剂量实验组和对照组。
[0049]分别用生理盐水溶解步骤一中的美味牛肝菌水提物冻干粉，分别得到浓度为 50mg/ml的美味牛肝菌水提物溶液（将此溶液称为低剂量美味牛肝菌水提物溶液）和 100mg/ml的美味牛肝菌水提物溶液（将此溶液称为高剂量美味牛肝菌水提物溶液）。
[0050]按照7mg亚硝酸盐/l〇〇g体重的标准对这45只雄性SD大鼠灌胃亚硝酸盐，灌胃 的亚硝酸盐溶液的浓度为0· 02g/ml。3分钟后，按照20mg美味牛肝菌水提物冻干粉/l〇〇g 体重的标准对低剂量实验组的每只雄性SD大鼠灌胃〇· 8-lml上述低剂量美味牛肝菌水提 物溶液，按照40mg美味牛肝菌水提物冻干粉/i〇〇g体重的标准对高剂量实验组的每只雄性 SD大鼠灌胃0· 8_lml上述高剂量美味牛肝菌水提物溶液，对对照组的每只雄性SD大鼠 进行 灌胃0. 8-lml的生理盐水。
[0051]在这三组雄性SD大鼠灌胃后2h内采用尾静脉取血的方法分别取血，在灌胃后的 5-75min内间隔10min取1次血，在灌胃后的75-120min内间隔15min取1次血，分别得到 低剂量实验组5min血样、低剂量实验组15min血样、低剂量实验组25min血样、低剂量实验 组 35min血样、低剂量实验组45min血样、低剂量实验组55min血样、低剂量实验组65min血 样、低剂量实验组75min血样、低剂量实验组 9〇min血样、低剂量实验组l〇5min血样、低剂 量实验组l2〇min血样、高剂量实验组5min血样、高剂量实验组15min血样、高剂量实验组 25min血样、高剂量实验组35min血样、高剂量实验组45min血样、高剂量实验组55min血 样、高剂量实验组65min血样、高剂量实验组75min血样、高剂量实验组90min血样、高剂量 实验组105min血样、高剂量实验组l 2〇min血样、对照组5min血样、对照组15min血样、对 照组25min血样、对照组35min血样、对照组45min血样、对照组55min血样、对照组65min 血样、对照组75min血样、对照组90min血样、对照组105min血样和对照组120min血样。 [0052] 将得到的血样经退色剂和沉淀剂处理，用格林斯反应法检测血样中的亚硝酸盐的 含量。格林斯反应法检测亚硝酸盐的具体步骤如下：
[0053] 将每次在间隔时间点取的10 μ L尾静脉血样与抗凝剂充分混合，加入1.3mL去 离子水和250 μ L NaOH(20g/L)，混匀后加入250 μ L ZnS04(120g/L)，再次混匀，60°C水浴 10min，冷却至室温，充分混匀后静置沉淀。充分沉淀后取500 μ L上清，加入40 μ L对氨基 苯磺酸（4g/L)，混匀，静置3-5min，再加入盐酸萘乙二胺（2g/L)，静置15rain后，得到待测样 品。测定待测样品在538nm下的吸光值。以亚硝酸钠（北京化学试剂公司，货号7632-00-0) 为标准品，根据标准品的标准曲线获得血样中亚硝酸根离子的含量。实验结果见图1。
[0054] 从图1中可以看出，低剂量实验组和高剂量实验组的雄性SD大鼠血液中的亚硝 酸盐含量的峰均后移且峰值均降低：对照组雄性SD大鼠血液中的亚硝酸盐含量有一个明 显的峰，在灌胃25min后达到最高值is· 4δμ mol/10 μ L，然后逐步降低；低剂量实验组雄性 SD大鼠血液中的亚硝酸盐含量的峰明显后移且峰值明显降低，在灌胃45min后达到最高值 13. 08 μ mol/10 μ L，峰值比对照组降低了 29· 11 % ;高剂量实验组雄性SD大鼠血液中的亚 硝酸盐峰进一步后移且峰值更低，在55min时达到峰值7· 25μιηο1/10μ L,且峰形不明显， 其峰值分别比对照组和低剂量组降低了 60. 7〇%和44. 57%。美味牛肝菌对低剂量实验组 大鼠血液中亚硝酸盐含量的影响在灌胃美味牛肝菌水提物冻干粉的75min后消失，美味牛 肝菌对高剂量实验组大鼠血液中亚硝酸盐含量的影响在灌胃美味牛肝菌水提物冻干粉的 lOOmin后消失。表明美味牛肝菌能够显著降低大鼠血液中的亚硝酸盐含量，降低程度与美 味牛肝菌的剂量成正比。
[0055]实施例2、美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉胶囊对大鼠血液中亚硝酸 盐含量的降低作用
[0056]将实施例1中步骤一得到的美味牛肝菌水提物冻干粉装填牛骨胶胶囊，平均每个 牛骨胶胶囊含有〇· 〇2g美味牛肝菌水提物冻干粉，得到美味牛肝菌水提物冻干粉胶囊。 [0057]以3〇只体重为 2〇〇-220g的雄性SD大鼠为实验材料，将这3〇只雄性SD大鼠随机 分为两组，每组15只雄性SD大鼠，即实验组和对照组。
[0058]将实验组的每只雄性SD大鼠灌胃2颗美味牛肝菌水提物冻干粉胶囊，灌胃剂量即 为18. 2-20mg美味牛肝菌水提物冻千粉/l〇〇g体重（与实施例1中低剂量组的灌胃剂量 相当），按照5mg亚硝酸盐/100g体重的标准分别在胶囊灌胃后的〇min、9〇mi n、i8〇min和 270min对实验组的每只雄性SD大鼠灌胃亚硝酸盐，在亚硝酸盐灌胃后的〇-360min内采用 尾静脉取血的方法每间隔15min取血1次，分别得到实验组〇min血样、实验组i5min血样、 头验组30min血样、头验组45min血样、实验组60min血样、实验组75min血样、实验组90min 血样、实验组l〇5min血样、实验组l2〇min血样、实验组135min血样、实验组150min血样、 实验组165min血样、实验组l8〇min血样、实验组195min血样、实验组210min血样、实验组 225min血样、实验组24〇min血样、实验组255min血样、实验组270min血样、实验组285min 血样、实验组300min血样、实验组315min血样、实验组330min血样、实验组345min血样、 实验组360min血样。
[0059] 按照上述方法，将实验组的每只雄性SD大鼠替换为对照组的每只雄性SD大鼠，将 2颗美味牛肝菌水提物冻干粉胶囊替换为2颗空牛骨胶胶囊，其它步骤不变，分别得到对照 组Omin血样、对照组l 5min血样、对照组30min血样、对照组45min血样、对照组60min血 样、对照组75min血样、对照组90min血样、对照组l〇5min血样、对照组120min血样、对照组 135min血样、对照组150min血样、对照组165min血样、对照组180min血样、对照组195min 血样、对照组210min血样、对照组225min血样、对照组240min血样、对照组255min血样、 对照组270min血样、对照组285min血样、对照组300min血样、对照组315min血样、对照组 33〇min血样、对照组345min血样、对照组360min血样。
[0060] 按照实施例1所述的格林斯反应法检测亚硝酸盐的步骤分别得到上述血样中亚 硝酸盐的含量，结果见图2。
[0061 ] 结果显不，大鼠 灌胃美味牛肝菌水提物冻干粉胶囊165min时，实验组大鼠 血液中亚硝酸盐的含量为4. 73 μ mol/10 μ L，对照组大鼠血液中亚硝酸盐的含量为 6.78μηι〇1/10μ?，实验组大鼠血液中亚硝酸盐的含量明显降低，降低了 30.24%。除此之 夕卜，大鼠灌胃美味牛肝菌水提物冻千粉胶囊后120-195min内，实验组大鼠血液中亚硝酸盐 的含量降低率均小于20%，说明美味牛肝菌水提物冻千粉胶囊在大鼠肠道内的溶解速度较 慢。大鼠灌胃美味牛肝菌水提物冻千粉胶囊后210-360min，实验组大鼠血液中亚硝酸盐 的含量明显降低，且在灌胃210min后，实验组大鼠血液中亚硝酸盐的含量的峰逐步向后推 移：在灌胃210min后，实验组大鼠血液中亚硝酸盐的含量分别在灌胃后的210min、255min、 31 5min 出现峰，峰值分别为 6. 46 μ mol/10 μ L、6. 54 μ mol/10 μ L、8. 61 μ mol/10 μ L，对照 组大鼠血液中亚硝酸盐的含量分别在灌胃后的210min、240min、285min出现峰，峰值分别 为 9· 63 μ mol/10 μ L、10. 08 μ mol/10 μ L、13. 20 μ mol/10 μ L，实验组大鼠血液中亚硝酸盐 的含量的峰的峰值的降低率分别是32. 92%、35. 12%和34. 70%。
[0062]用美味牛肝菌水提物冻干粉胶囊灌胃实验大鼠的空排实验证明美味牛肝菌水提 物冻千粉胶囊在实验大鼠胃中不溶化，进入小肠后才溶化。每只200-220g的雄性SD大鼠 灌胃1-2颗美味牛肝菌水提物冻干粉胶囊均能顺利进入小肠，灌胃3颗及3颗以上美味牛 肝菌水提物冻干粉胶囊有时不能全部进入小肠，所以实验中采用灌胃2颗胶囊。
[0063] 与对照组相比，大鼠灌胃美味牛肝菌水提物冻千粉胶囊后0-105min内，大鼠血液 中的亚硝酸盐含量没有变化，，大鼠灌胃美味牛肝菌水提物冻千粉胶囊后120-360min内， 大鼠血液中亚硝酸盐的含量显著降低，而且降低血液中亚硝酸盐含量的活性持续时间大于 240min;美味牛肝菌水提物冻干粉灌胃大鼠实验表明，与灌胃生理盐水的对照组相比，按照 2〇mg美味牛肝菌水提物冻干粉/l〇〇g体重的标准对大鼠灌胃美味牛肝菌水提物冻干粉后 的75-100min内，大鼠血液中亚硝酸盐的含量显著降低，降低血液中亚硝酸盐含量的活性 持续时间为75-100min。
[0064]与直接灌胃的相同剂量（低剂量实验组）相比，美味牛肝菌冻干粉降低血液中亚 硝酸盐的活性物质在实验大鼠肠道内的活性持续时间和亚硝酸盐降低率都显著提高，说明 美味牛肝菌冻干粉降低血液中亚硝酸盐的活性物质在实验大鼠肠道内的稳定性显著高于 在胃中的稳定性。
[0065]可通过食用美味牛肝菌或美味牛肝菌水提物冻干粉或肠溶胶囊包装的美味牛肝 菌冻干粉来降低动物血液中的亚硝酸盐含量。
【权利要求】
1. 美味牛肝菌提取物在制备降低动物血液中亚硝酸盐含量的产品中的应用； 所述美味牛肝菌提取物为用水从美味牛肝菌（Boletus edulis)子实体中提取出来的 水溶性物质。
2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述美味牛肝菌提取物为美味牛肝菌 (Boletus edulis)水提物冻干粉。
3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述美味牛肝菌提取物为美味牛肝菌 (Boletus edulis)水提物冻干粉胶囊。
4. 权利要求2所述的美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉。
5. 权利要求3所述的美味牛肝菌（Boletus edulis)水提物冻干粉胶囊。
6. 美味牛肝菌在制备降低动物动物血液中亚硝酸盐含量的产品中的应用。
7. 根据权利要求1或6所述的应用，其特征在于：所述动物为哺乳动物。
【文档编号】A23L1/28GK104189019SQ201410442813
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月2日 优先权日:2014年9月2日
【发明者】王贺祥, 张薇薇, 耿雪冉, 刘芹, 陈稳稳, 石瑶, 杨冬雪 申请人:中国农业大学