专利名称：海产品提取液的抗氧化脱腥方法
技术领域：
本发明涉及一种海产品提取液的抗氧化脱腥方法。
海产品提取物作为保健食品的原料正越来越受到人们的重视，但由于海产品提取物均带有特殊的腥臭，使得用其所制造的食品口感差，不易为消费者所接受。日本特许公报昭63-39224公开了一种多步混合脱腥方法，其主要工艺过程是酶解→酵母发酵→蒸馏去腥→加调味剂掩盖，这是目前较为先进有效的方法，但该方法只适用于对海藻类的脱腥，而对动物类海产品如鲍鱼、海马、海龙、鳗鱼等的脱腥效果较差。因为动物类海产品的腥臭主要是由于其所含的不饱和酯肪酸氧化成过氧化物而造成的，若采用上述多步混合法脱腥，往往会加速海产品中对人体有益的不饱和脂肪酸，如廿碳五烯酸(EPA)、廿二碳六烯酸(DHA)、亚麻酸(GLA)等，氧化成对人体有害的过氧化物，同时也加重腥臭味的产生。所以，如何有效地去除海产品特别是动物类海产品提取物的腥臭并防止其中不饱和脂肪酸的进一步氧化，是目前亟待解决的问题。
本发明的目的是提供一种海产品提取液的抗氧化脱腥方法，该方法不论对植物类还是对动物类海产品均具有理想的脱腥效果，而且所用抗氧化脱腥剂无毒无害，同时具有抑菌保鲜作用。
本发明方法是采用黄酮类化合物5，7，4’-三羟基-3’，5’-二甲氧基黄酮(以下简称为黄酮A)及5，4’-二羟基-3’，5’-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黄酮(以下简称为黄酮B)作为抗氧化脱腥剂，该两种物质的结构式如下 5，7，4’-三羟基-3’，5’-二甲氧基黄酮 5，4’-二羟基-3’，5’-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黄酮本发明方法的具体工艺步骤是在按常规方法制得的海产品提取液(一般每ml相当于鲜料0.2g)中加入抗氧化脱腥剂黄酮A或黄酮B或者黄酮A和黄酮B，使海产品提取液中抗氧化脱腥剂的浓度为0.01～10mg/ml，在室温下放置1～6小时，经去沉淀后得到无腥味的海产品提取液，可直接用于制造各种营养保健食品。
黄酮A或黄酮B单独使用时，其用量一般为每毫升海产品提取液0.01～10mg。黄酮A和黄酮B同时使用具有协同增效作用，所以其用量可减少，一般为每毫升海产品提取液用黄酮A＋黄酮B＝0.01～1mg。黄酮A和黄酮B两者可以任意比例配合使用。
本发明方法所用的抗氧化脱腥剂黄酮A及黄酮B可以从水稻幼穗分化期至抽穗扬花期的茎叶中提取得到。具体方法是取该生长期的水稻新鲜茎叶，切碎匀浆，按重量每公斤加入0.5～6升70～95％的乙醇，搅拌，浸取3～10天，过滤除渣，将滤液浓缩(一般采用减压浓缩，至每公斤水稻茎叶50ml)；所得浓缩液即为水稻茎叶提取液(含黄酮A＋黄酮B＝25～50mg/ml)；还可以将第一次过滤的滤渣再按上述步骤浸取一次，将所得滤液与第一次滤液合并一起浓缩；浓缩液用石油醚∶乙醚＝(0.3∶0.7)～(0.7∶0.3)(体积比)萃取，去萃取液，余液(水相部分)再经乙酸乙酯萃取，去水相部分，取乙酸乙酯相部分过60～200目硅胶柱；然后分别用丙酮∶石油醚＝(15∶85)～(70∶30)(体积比)洗脱得A洗脱液和用丙酮∶石油醚＝(75∶25)～(90∶10)(体积比)洗脱得B洗脱液，将A、B两洗脱液分别经氯仿∶甲醇＝(9∶1)～(5∶5)(体积比)重结晶即得黄酮A和黄酮B，再经60℃干燥得纯品。
按照本发明的方法，可以直接将上述工艺过程中间得到的含有抗氧化脱腥剂黄酮A和黄酮B的水稻茎叶提取液按0.1～2％(体积比)的比例加入到海产品提取液中，其抗氧化脱腥效果与同时加入黄酮A和黄酮B相同。
海产品的腥臭主要是由于其所含不饱和酯肪酸氧化而产生的。不饱和脂肪酸的自动氧化是一种自由基反应，氧分子具有二价自由基结构(·O-O·)，能夺取不饱和脂肪酸烯键α位的氢，引发由自基连锁反应，即不饱和脂肪酸的自动氧化。由于本发明选用黄酮类化合物黄酮A和黄酮B作抗氧化脱腥剂，这两种化合物所提供的活泼的羟基氢能够很好地阻止或延缓不饱和脂肪酸的自动氧化，同时，能使已被氧化产生的过氧化物(产生腥味的物质)还原而除去腥味，所以具有较好的抗氧化脱腥效果，不仅能去除海产品提取液的腥臭，而且能防止其中的不饱和脂肪酸继续氧化而再产生腥味。因此，本发明方法不论是对植物类还是动物类海产品均具有理想的抗氧化脱腥效果。
本发明所用的抗氧化脱腥剂黄酮A和黄酮B经NIH系小鼠腹腔灌胃试验，最大耐受量大于7g/kg，证明其属于实际无毒级。
黄酮A和黄酮B除了具有抗氧化脱腥作用外，还具有抑菌保鲜作用，以及抗衰老及治疗冠心病、脑动脉硬化等疾病的作用，所以经本发明方法处理的海产品提取液既无需加入掩盖腥味的调味剂，也无需加入防腐剂，而且具有保健作用，可制成纯天然的营养保健食品。
本发明方法中抗氧化脱腥剂的用量可根据海产品提取液的浓度及其腥味的轻重进行调节。稍过量的抗氧化脱腥剂不仅不会影响海产品提取液的质量，而且可起抗氧化及抑菌保鲜作用。
以下通过实施例对本发明作进一步说明。
实施例1斑海马(干品)50g，磨成过200目筛的干粉，加入0.5g木瓜蛋白酶和300ml去离子水，70℃水浴3小时，离心去沉淀，上清液加入15ml水稻茎叶提取液(黄酮A＋黄酮B含量10mg/ml，以下同)，室温放置2小时，离心去沉淀得到无腥味上清液，可直接制成口服液或其它营养保健食品。
实施例2鲜鳗鱼肉20g，匀浆，加入500ml去离子水，加pH7～9的磷酸盐缓冲液至终浓度为0.01M，加6g弹性蛋白酶，70℃水浴4小时，离心去沉淀，上清液加入水稻茎叶提取液2ml，室温放置3小时，离心去沉淀，得无腥味鳗鱼提取液。
实施例3海水螺旋藻(干品)20g，加入木瓜蛋白酶和纤维酶各0.5g，以及100ml去离子水，加入pH4.5的磷酸盐缓冲液至终浓度为0.01M，40～60℃水浴2小时，离心去沉淀，取上清液加入水稻茎叶提取液0.5ml，其余步骤及条件与实施例1相同。
实施例4尖海龙(干品)50g磨成粉状，加入250ml去离子水及0.5g纤维酶，40～70℃水浴3小时，离心去沉淀，上清液加入水稻茎叶提取液5ml，放置1小时，离心去沉淀，得无腥味海龙提取液。
实施例5海带(干品)100g，加去离子水1000ml浸泡2天，其中换水三次，每次重新加入去离子水1000ml，以去掉海带中过多的铅，防止制成的提取液铅含量超标。取出海带，匀浆，加去离子水2000ml，90℃热提20分钟，离心去沉淀，上清液加入水稻提取液10ml，放置2小时，离心去沉淀，得无腥味海带提取液。
实施例6新鲜鲍鱼(九孔鲍)肉50g，匀浆，加200ml去离子水和5g蛋白酶，加入pH4.0的磷酸盐缓冲液至终浓度为0.05M，70℃水浴3小时，离心去沉淀，上清液加入水稻茎叶提取液20ml，室温放置6小时，离心去沉淀，得无腥味鲍鱼提取液。
实施例7按实施例3方法制得的海水螺旋藻提取液，加入浓度为50mg/ml的黄酮A水溶液，至黄酮A终浓度为5mg/ml，室温放置2小时，过滤得无腥味海水螺旋藻提取液。
实施例8按实施例6制得的鲍鱼提取液，加入黄酮A水浴液至黄酮A终浓度为10mg/ml，室温放置3小时，过滤得无腥味鲍鱼提取液。
实施例9鲜海月，去壳取肉30g，匀浆，加200ml去离子水和2g蛋白酶，加入pH6.5的磷酸盐缓冲液至终浓度为0.01M，45～70℃水浴2小时，离心去沉淀，上清液加入浓度为50mg/ml的黄酮B水溶液，至黄酮B终浓度为8mg/ml，室温放置4小时，过滤得无腥味的海月提取液。
实施例10按实施例5制得的海带提取液，加入黄酮B水溶液至黄酮B终浓度为0.5mg/ml，室温放置3小时，过滤得无腥味海带提取液。
实施例11按照实施例2，将其中加入水稻茎叶提取液2ml改为加入黄酮A和黄酮B混合水溶液(含黄酮A和黄酮B各为25mg/ml，以下同)，至黄酮A和黄酮B终浓度各为0.4mg/ml，其它条件与实施例2相同。
实施例12紫菜(干品)50g，加水浸泡后取出匀浆，加200ml去离子水，50℃水浴3小时，过滤去滤渣，取滤液加入黄酮A和黄酮B混合水溶液，至黄酮A和黄酮B终浓度各为0.05mg/ml，室温放置1小时，过滤得无腥味的紫菜提取液。
权利要求
1.一种海产品提取液的抗氧化脱腥方法，其特征是以黄酮类化合物5，7，4’-三羟基-3’，5-二甲氧基黄酮及5，4’-二羟基-3’，5’-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黄酮作为抗氧化脱腥剂，在海产品提取液中加入该两种抗氧化脱腥剂或者只加入其中一种，使海产品提取液中抗氧化脱腥剂的浓度为0.01～10mg/ml，室温放置1～6小时，经去沉淀后得到无腥味的海产品提取液。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征是所用的抗氧化脱腥剂是从水稻茎叶中提取得到的；其提取方法是将幼穗分化期至抽穗扬花期的水稻茎叶切碎匀浆，按重量每公斤加入0.5～6升70～95％的乙醇，搅拌，浸取3～10天，过滤除渣，将滤液浓缩，所得浓缩液即为水稻茎叶提取液，将该浓缩液用石油醚∶乙醚＝(0.3∶0.7)～(0.7∶0.3)(体积比)萃取，去萃取液，余液再经乙酸乙酯萃取，去水相部分，取乙酸乙酯相部分过60～200目硅胶柱，然后分别用丙酮∶石油醚＝(15∶85)～(70∶30)(体积比)洗脱得A洗脱液和用丙酮∶石油醚＝(75∶25)～(90∶10)(体积比)洗脱得B洗脱液，将A、B两洗脱液分别经氯仿∶甲醇＝(9∶1)～(5∶5)(体积比)重结晶得5，7，4’-三羟基-3’，5’-二甲氧基黄酮和5，4’-二羟基-3’，5’-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黄酮，再经干燥可得纯品。
3.按照权利要求2所述的方法，其特征是直接将含有抗氧化脱腥剂的水稻茎叶提取液按体积比为0.1～2％的比例加入到海产品提取液中。
全文摘要
本发明涉及一种海产品提取液的抗氧化脱腥方法。该方法以黄酮类化合物5，7，4′-三羟基-3′，5′-二甲氧基黄酮及5，4′-二羟基-3′，5′-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黄酮作抗氧化脱腥剂，只需将其加入到海产品提取液中，即能起到理想的抗氧化脱腥效果，不论对植物类还是对动物类海产品均具有同样效果，而且具有抑菌保鲜作用，无需再加入防腐剂。本发明工艺简单，效果好，所用的抗氧化脱腥剂可从水稻茎叶中提取得到。
文档编号A23L1/325GK1140563SQ9510728
公开日1997年1月22日 申请日期1995年7月19日 优先权日1995年7月19日
发明者许东晖, 许实波 申请人:中山大学