专利名称：分析设备与方法
技术领域：
本发明涉及一种分析设备，尤其是特别适用于灵敏快速检验诊断设备的合成一步放大分析系统；以及涉及分析方法和分析用成套用具。
在很广范围的应用中，例如在临床免疫测定中，日益使用一步快速检验系统；例如用于妊娠，性传染病，食物试验，细菌学感染，变态反应检测，兽医试验，环境控制，毒素，生物试剂等的检验中。然而在许多其他情况下，尤其在样品中待检测的物质浓度已经极低的情况下，来自当前快速检验中的信号的灵敏度不是以提供定性或定量的结果，例如检测唾液或血液中HIV抗体，其他病毒感染，或指示特殊疾病发作的尿或粪便中低含量的细菌。
一步分析最好是使用一种几乎不需要熟练操作的简单、便宜、可随意使用的设备。将样品置入该设备的操作是作为一个单独的步骤来实施的，最好不需要随后的洗涤或流体变更。用一种可见信号给出结果，这种信号容易读出，且不需要用仪器去做这件事情。
这种快速试验设备通常涉及一些颗粒，例如彩色乳胶、碳或金；正是这些颗粒负责生成最终信号。妊娠检验药箱是这类设备中的一个众所周知的实例，用此药箱检验尿中激素βHCG的含量。在这些设备中，跟用于βHCG的抗体结合的金或乳胶负责生成一个可见的信号。
在EP-B-176799和EP-B-291194中示出这种已知设备的一些实例。
为了直接生成一个可见信号，重要的是，负责生成该信号的颗粒是有一定尺寸的。在金颗粒的情况下，为了保证生成清晰可见的信号，颗粒尺寸应当大于10nm，最好大于40nm。然而，在这些快速一步检验的灵敏度方面，存在一些限制，使其实用性受到局限。
为了检测含量很低的分析物，要求快速诊断检验有更高的灵敏度。虽然唾液中分析物的浓度通常比血中分析物浓度低100倍，但常常优选非损伤性的取样法。
本发明提供一种高度灵敏的快速检测设备。
根据本发明提供的一种用于检测样品中是否存在一种分析物的分析设备，其中指示所述分析物是否存在的可见信号是在支持体上的检测部位产生的，具体特征在于借助于在一个被标记的第一粘合剂与一个标记显影剂之间的信号加强反应，生成或加强所述的信号；其中第一粘合剂与标记显影剂被安排成用一个单独的分析步骤，但用一种使第一粘合剂在标记显影剂的前头到达检测部位的顺序方式，送到检测部位。
尤其是，本发明提供一种包括下述部件的设备(a)一个多孔的元件；(b)一个第一粘合剂，它专门粘合一个分析物，在一种进入检测区的液体的影响下可以穿过多孔元件，并且包含一种不可见的标记物；(c)一个第二粘合剂，它或者用一种跟第一粘合剂互补的方式专门粘合所述分析物，或者同所述分析物竞争，用于粘合所述的第一粘合剂；并且它可在所述检测部位内固定；和(d)标记显影剂，它可以在一种进入所述检测部位的液体的影响下，跟在所述第一粘合剂后面移动，所述的标记显影剂可使不可见的标记物变成可见。
在此所用的术语‘不可见标记物’指的是那些通常肉眼看不见的或仅是依稀可见的标记物，甚至在一个分析位置的俘获区或检测部位中被浓缩时亦如此。这类标记物的实例包括酶标记物或颗粒标记物，它们或者是收集的数量不足以提供良好的可见信号，或者是尺寸特别小，例如尺寸小于10nm；尺寸小于5nm是适宜的，最好是从1至2nm。
标记显影剂包括一种能够显影不可见标记物，使它变成可见，从而生成一个信号的试剂。显影剂的性质将取决于所用不可见标记物的性质。
例如，当不可见标记物是一种酶标记物时，标记显影剂可以包括二氨基联苯胺或其他已知酶显影剂。
当标记物包括一种颗粒标记物时，显影剂可以把物质淀积到这些颗粒上，使它们变成可见的。适宜的颗粒标记物包括能够被加强的金属标记物，例如金、银、硒或铂标记物；或者颗粒状乳胶标记物，只要它们涂上一层能够被加强的物质，例如酶或金属涂层即可。颗粒标记物包括一种颗粒金属标记物是比较可取的，而最可取的是包括一种颗粒金标记物。
当使用一种颗粒金属标记物时，适宜的显影剂包括一种银试剂，例如同氢醌之类的适宜显影液在一起的乳酸银，其实例如Holgate等人在《J.Hisotchem.Cytochem，31，938-944》中所描述的那样。在多孔部件的适当区域以干燥方式适宜地保持银试剂，它将在此保持到由穿过该区域流向检测部位的液体重新悬浮为止。
银加强试剂是可从市场上买到的，例如可从位于Golden Gate，TyGlas Avenue，cardiFF，Uk.的British Biocell International Ltd处买到。
使用与银加强系统结合的颗粒金标记物可能意味着信号强度被增加100-1000倍，从而使本发明的分析检验设备的应用范围要比迄今为止可能的范围宽广得多。信号显影速度将取决于银溶液的成分，和取决于金颗粒的尺寸以及设备的几何排列。虽然诸颗粒可以处于例如1-100nm的尺寸范围，但它们最好是小于5nm的颗粒。采用小颗粒之优点在于这些为数众多的颗粒，由于减小空间需求而在随后的加强中能够聚集于检测区中。这同未强化的较大尺寸颗粒相比，可提供明显增强的信号。
在用一步过程进行这类分析的地方，必须保证那种被怀疑含有分析物的样品以及标记第一粘合剂，在标记显影剂之前到达检测部位。这类安排可以采用一些物理的形式，其中一种安排包括一个液体通路，例如在英国专利申请号No.2231150A中所示。在一步分析中把提供标记显影剂的液体通路用于一个预先形成的信号，是迄今未见透露的。
使用这一技术，借助一系列实质上不可渗透的阻挡层，为液体穿过不同区域而建立一些不同长度或宽度的通道。一种特殊形式的液体通路，即印刷液体通路，包括一层或多层滤纸或膜，在其上印有一种建立实质上不可渗透的阻挡层的石蜡图形。可以在该设备适当的部位上干燥分析所需的试剂。用通道的长度和形状控制液体到达通路不同部分，尤其是在本例中的检测部位的时间。用通道的宽度控制液体的压力。
各区域被这样安排，使得那种被怀疑含有分析物的液体样品和第一粘合剂，在标记显影剂之前到达检测部位。如果被怀疑含有分析物的液体样品是与第一粘合剂分别施加的，则它穿过的区域必须这样安排，使得任何分析物在第一粘合剂之前到达检测部位，以保证生成一个准确的信号。
因此，本发明的一个实施例是关于分析检验设备的，它包括(a)一个多孔元件，它被分成多个区域，各区实质上互相不可渗透，但它们在一个检测部位相交；(b)一个第一粘合剂，它专门粘合一种分析物；所述的粘合剂位于一个区域，在进入所述检测部位的液体的影响下，可穿过多孔元件；所述的第一粘合剂包含一种不可见的标记物；(c)一个第二粘合剂，它或者以一种跟第一粘合剂互补的方式专门粘合所述的分析物，或者同所述的分析物竞争，以粘合所述的第一粘合剂，并且在所述检测部位内是不动的；和(d)标记显影剂，位于所述的那个区域之外的区域中，并可在进入所述检测部位的液体的影响下移动；所述的标记显影剂能够使不可见的标记物变成可见的。
相适应地，在沿着多孔元件移动的液体的影响下，第一粘合剂和标记显影剂均会向着检测部位移动。此外，一种被怀疑含有分析物的液体将向着检测部位移动，它或者同第一粘合剂结合，或者沿着为此而在设备中提供的一个更远的区域移动。还可把不同的液体加到每个区或区群中，并能把它们独立地加到在各区中安排的取样区或取样井中。
然而，在一个优选实施例中，设备被这样安排，使得在将包含被检验样品的相同液体的影响下，至少第一粘合剂和标记显影剂是向着检测部位移动的。由此得出一步快速分析系统。
在设备中适当安排各区或区群，使同一个样品可以同时加到全部取样区或区群中，由此它可穿过多孔部件到达检测部位。例如，虽然在任一区中不可渗透阻挡层可安排成，确定一个比在其他区中长的液体路径，但各区的安排成具有实质上相邻平行的关系。
这就使该分析检验设备可用作快速一步分析系统，因为样品将携带第一粘合剂以及标记显影剂到达检测部位。
然而，也可用其他方法去保证把第一粘合剂和标记剂相继地送到检测区。这些方法包括使用慢速释放的组份，它们保证标记显影剂迟于第一标记粘合剂释放。
这类释放剂可以包括明胶和其他蛋白质，聚乙二醇(PEG)，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和其他聚合物，表面活化剂，阿拉伯树胶，蔗糖和其他糖类，粘上，油、类脂化合物、树脂，盐和例如制药工业中使用的其他慢速释放剂。这类慢速释放剂的施加浓度一般为0.1-5％w/v，最好为1％w/v量级。
控制试剂从膜释放以流向检测区的其他方法包括，改变这些区中膜的疏水性，使样品湿润这些区的程度受到控制的方法。这类方法包括使用某些疏水的表面活化剂，例如三硝基甲苯×705，高盐浓度溶液(例如5％Nacl)，某些酯肪酸，或聚氨基酸，例如Poly Ltryphophan(Sigma)；它们都具有高疏水性，且能浸入膜中。
另一方面，可以把流动的标记粘合剂和标记显影剂包装在例如明胶、甘油、聚合物等半渗透阻挡层之内或之外，以便它们在样品渗透这些阻挡层以溶解试剂时可以相继地释放出来。选择阻挡材料，用这种方法，调节移向俘获区的试剂的溶解和释放速率。
在另一个实施例中，活动标记粘合剂和/或标记显影剂加在多孔材料的一个独立层上，它通过下述方式接触多孔元件穿过多孔元件的液体首先在独立多孔层下流过，随着更多液体的流动，它被逐渐吸入多孔层中，最后，液体会流过该设备，从而收集在此处施加的第一粘合剂或标记显影剂。在适宜的情况下，多孔层还可包括膜、纸或玻璃纤维垫片。
在又一个实施例中，通过下述方式在多孔元件上安排标记的第一粘合剂和标记显影剂标记的第一粘合剂能够随着液体样品的层流流动而直接流向检测区，而标记显影剂并不遭遇检测区。然而，如果在显影剂的通路上放一个适当的阻挡层，则虽然转移过程必然会阻滞液体的行进，但它可以转向检测区。可以在携带标记显影剂的液体的通路上从内部安放阻挡层，但最好是标记显影剂本身有助于产生阻挡层，以便在标记第一粘合剂与标记显影剂的到达时间之间产生稍长的延时。
在标记物是象金之类的颗粒金属，且显影剂是使物质淀积于金属颗粒表面上的象银式剂之类的试剂的情况下，本实施例是很适合的。例如，通过下述方式把小金属颗粒安排成固定于标记显影剂路径上的多孔元件上如果扩展，则它们形成一个阻挡层，该层会把标记显影剂引向检测区(如下面所述)。在使用中，标记显影剂首先遇到这些颗粒，并且在其上形成淀积物。随着淀积物的积累，变大的颗粒对含有标记显影剂的液体的继续层流流动构成一个阻挡层，借此使标记显影剂转移。
这一原理可以用于宽广范围的分析，在此，需要液体在分析过程中被转移，以产生例如顺序反应或反应阶段。不一定需要标记显影剂去加强产生的任何信号，虽然显然它会使事情简化；如果需要这样两种功能，则它们可结合于一个单独的标记显影剂中。
应用这一原理的分析设备构成本发明的又一个方面。
本发明的设备可以适用于‘夹层’或‘竞争’分析策略。在夹层分析中，第二粘合剂用一种跟第一粘合剂互补的方式粘合所述的分析物。在这种情况下，第一粘合剂在被怀疑含有分析物的液体样品的影响下移入检测区。任何已粘合分析物的试剂都会在标记显影剂到达之前聚集于检测部位，随后会产生一个可见的信号。
在竞争分析中，第二粘合剂同分析物竞争，以粘合于第一粘合剂。第一粘合剂在试验时液体样品的影响下，重新移入检测区中；但在这种情况下，任何已粘合分析物的试剂都不会保持于检测部位。只有未粘合的第一粘合剂会在此聚集，并产生可见的信号。在这种情况下，信号越大，则样品中存在的分析物越少。
在这种分析中，还可提供另外一种粘合剂，它专门粘合第一粘合剂或者以跟第一粘合剂互补的方式专门粘合分析物。在沿样品路径的检测部位之外的俘获部位，固定这个另外的粘合剂。这个另外的粘合剂会在俘获部位，聚集那些被粘合的分析物/第一粘合剂合成物或轭合物，随后在信号显影剂到达时产生一个可见的信号。这样，为了对检验样品中存在的分析物数量提供额外的定性评价，可以比较由粘合第一粘合剂生成的信号和未粘合第一粘合剂生成的信号。
如果必要或要求，在本发明的设备中，例如在包括不可渗透阻挡层的设备的一些区中，或者只是在样品液流方向上加到膜表面的试剂的前面，可以提供过滤装置，以便在这些区或区域中从样品去除不需要的元素。这些过滤装置可以包括物理过滤器，或免疫学或生物化学粘合剂，它们可粘合不需要的元素。例如，当对血清样品进行血清分析时，如果例如用血清作为标记显影剂的第一粘合剂的运载液体，或者甚至作为如下所述的洗涤液，则全范围的血清抗体的存在可能导致一系列的假阳性现象。在这种情况下，这些抗体可以通过提供一个例如免疫学阻挡层而在相关区中从血清中去除；该阻挡层包括抗IgG的抗体，例如抗一人体IgG的抗体，通过下述方式把这些抗体固定在多孔部件上保证血清在到达检测部位之前穿过这个阻挡层。
在分析中使用这种过滤装置构成本发明的又一个方面。
使用液体通路技术之类的技术会把一些附加的步骤并入分析中。例如，可以提供和安排一个或多个附加区，以便把洗涤液送入检测部位。例如可以要求在第一粘合剂之后但在标记显影剂到达之前送入洗涤液。这会产生洗涤检测部位的效果，该部位不含任何标记第一粘合剂，该粘合剂在产生信号之前未在此粘合。洗涤液可以包括样品本身，它在穿过相关区期间是随意地过滤的，以去除污染物和过量试剂。
在例如血液样品那样的血清分析情况下，附加的洗涤步骤可能是特别适用于从检测部位去除过量血清和非特异抗体的。
同样，可以提供一个另外的区，该区被安排成把最好重新从样品本身生成的液体送到检测部位，以此作为一个最终步骤，如果这是适宜的话，就可以终止导致产生信号的标记显影。
本发明的设备能够被这样安排，使得一系列的反应相继地产生，并在时间上分隔开；这样做取决于，例如在液体通路情况下，在多孔部件的各个液体不可渗透区内确定的液体通道的长度，或者取决于慢速释放的性质或提供给不同试剂的阻挡层的性质。
在一个优选实施例中，能够把一些灯芯或吸液区装入液体或过量试剂中，以便使液体或过量试剂在参加反应之前和之后受到引导。这可改进设备中的液体流动状况。
在任何特定情况下选择第一粘合剂和第二粘合剂，都取决于被检验的分析物的性质。当分析物包括一个抗原蛋白或多肽，例如一个象βPCG之类的激素时，第一和第二粘合剂可以包括一些对这些蛋白具有特异性的抗体或抗体粘合碎片，正如技术上常规情况一样，尤其涉及夹层分析和竞争分析技术。另一方面，本发明的设备可以适用于血清分析，在此，分析物自身可以包括一种特异的抗体，例如HIV抗体。在这种情况下，第二粘合剂相应地包括一种抗原，它能特异地被目标抗体粘合；而第一粘合剂则包括一种粘合分析物抗体的抗抗体。在这种情况下，分析物抗体是在引入标记的抗抗体之前相应地固定于检测部位的；该抗抗体通过下述方式施加例如把它施加到液体通路的不同区，使它在一个稍后的时间到达检测区。
此外，分析物可以包括一种核酸，例如RNA或DNA。在这种情况下，第一和第二粘合剂可以包括核酸粘合组分，例如在检验时与核酸杂交的标记核酸探子。
适合用于该设备的多孔元件包括一些在技术上熟知的多孔膜和纸。它们包括硝化纤维素膜。
该设备包括一个简单的测验片。根据设备的几何形状，该片可稍宽于在塑料衬垫物上安装的常用测验片，在其表面上未涂复保护层。另一方面，该设备可封装于一个外壳内，例如一个开有一个用于样品的小孔的塑料外壳内。另一方面，它可以采用层压卡的形式，在此，通过在使用之前直接割或切层压片而露出样品端部，然后浸泡样品。平卡可以成为另一种形式，在平卡上装有全部的化学物质、阻挡层和通路，还用一个不可渗透膜，例如喷涂的塑料膜复盖此卡。
下面结合所附简图通过实例详细地描述本发明。在附图中
图1是一个示意图，说明以前使用的分析检验设备安排；图2是一个示意图，说明在分析结束时图1的设备；图3是一个示意图，说明利用竞争分析的分析检验设备的安排；图4是一个示意图，说明专用于血清分析且加入洗涤步骤的分析检验设备；图5是一个示意图，说明用于血清分析的检验设备的又一个实施例；
图6是一个示意图，说明适用于涉及血清分析的检验设备，它利用血清样品作输送介质；图7是一个示意图，说明一种分析检验设备，在有信号加强的一步夹层分析中，试剂被相继地释放和受控地扩散；图8是一个示意图，说明一种分析检验设备，它类似于图7，但用一个扩散区取代漏斗；图9是一个示意图，说明一种分析检验设备，其中用一种加强反应实现把试剂相继地送入一个检测区，以便在使用时自动地改变液体流动状况；图10A和B分别是前视和侧视示意图，说明一种分析检验设备，从膜表面相继地释放和线性地流动试剂，以使随后在夹层分析中加强信号；图11A和B分别是前视和侧视示意图，说明一种分析检验设备，从膜表面和从重叠衬垫相继地释放试剂，以便随后在夹层分析中加强信号；图12是一个示意图，说明一种分析检验设备，在慢速溶解的阻挡层的背后淀积试剂，以便在夹层分析中信号加强的情况下用顺序的方式逐渐地释放和流动；和图13A示出一个示意图，说明一种分析检验设备，试剂从一个重迭或交迭下部灯芯相继地释放到一个载有固定目标粘合蛋白的膜中，以便在随后的夹层分析中得到加强；图13B示出同一设备的侧视图。
检验设备(图1)包括一个多孔膜(1)，它通过一个不可渗透阻挡层(2)被分成第一区(3)和第二区(4)，两区在俘获部位(5)相交。
在第一区的一个端部(7)内提供一个用于分析物的抗体(6)。抗体(6)同一个在尺寸上小于5nm的金颗粒(8)相结合。在俘获部位(5)的多孔膜(1)上固定一个也粘合该分析物的俘获抗体(9)。
在第二区(4)的端部(7)提供一个像乳酸银之类的干燥银试剂(10)和像氢醌之类的显影剂。在确定一个通道(12)的第二区(4)提供一系列的不可渗透阻挡层(11)。
在使用中，把端部(7)浸入一个被怀疑含有分析物的液体样品中。样品穿过多孔膜(1)。穿过第一区(3)的样品收集标记过的抗体(6)，并把它携带到俘获部位(5)。如果分析物(13)(图2)存在于样品中，则它会粘合于抗体(6)。在进入俘获部位(5)以后，分析物-抗体联合体会粘合于俘获抗体(9)。
穿过第二区(4)的样品会收集银试剂(10)，然后按箭头方向穿过通道(12)。因此，它要花较长的时间才能到达俘获部位(5)。当它到达时，如果存在分析物，则俘获部位(5)含有某一浓度的金标记颗粒。银试剂(10)会同这些颗粒发生反应，从而产生一个棕-黑色可见信号(14)。
在图3的替代设备中，能够进行一种竞争分析。这个实施例包括一个多孔卡(1)，在其上确定三个通道(15，16和17)；其中第一通道(15)包含一个金标记抗体(18)，例如小鼠抗体，且第二通道包含一个乳酸银/氢醌联合体(19)，在检测部位(21)固定一个抗原(20)，它同分析物竞争，以便粘合于抗体(18)。在俘获部位(23)固定一个抗抗体(22)，例如抗小鼠抗体。
通道15，16和17被这样安排，使得沿它们移动的液体相继地到达检测部位(21)和俘获部位(23)。一个吸液区(24)被这样安排，一旦液体流过俘获部位(23)，就接收它。
在使用中，卡(1)的下端(25)被浸入到一种被怀疑含有分析物的液体样品中，使它流过诸通道(15，16，17)。在最短通道(15)中，样品内任何分析物都同金标记抗体(18)粘合，然后沿通道前进，以便在检测部位(21)跟被固定的抗原(20)相遇。已粘合分析物的标记抗体(18)会穿过这个区域，而以前未粘合的标记抗体(18)则会在此聚集。
穿过检测部位(21)的粘合标记抗体(18)会遇到抗抗体(22)，从而聚集于俘获部位(23)。
然后，在第二个最长通道(16)中移动的样品把银/氢醌试剂(19)推动到检测部位(21)和俘获部位(23)，在此它遇到在这些部位聚集的任何金标记抗体(18)。加强金标记物，以产生可见的棕黑色信号，其强度取决于在这些部位中存在的抗体(18)的数量。
最后，在第三个通道(17)中移动的样品，到达检测部位(21)和俘获部位(23)，并且在此洗涤银加强金配位复合体。全部过剩的液体被吸入到吸入区(24)中。
图4示出本发明的分析设备的又一个实施例-专用于检测血清抗体的血清学免疫分析。该设备包括一个多孔支持器(26)，在其上确定了长度逐渐加长的第一、第二和第三通道(27，28，29)，其中每个通道都在它的一个端区提供一个液体接收窗口(30，31和32)。
在检测区(34)固定抗原(33)，以便粘合血清抗体或分析物。在第二个通道(28)提供金标记抗抗体(35)；并且把银/氢醌显影剂(36)驱入第三通道(29)中。在使用时，把血清样品引入第一通道(27)内的窗口(30)，并把洗涤液放入其他窗口(31，32)。样品沿着第一通道(27)前进，并且遇到抗原(33)，特异样品抗体粘合于此抗原。样品中非特异抗体进入一个吸入区(37)。
同时，来自第二通道(28)中窗口(31)的洗涤液把金标记抗体(35)推向检测部位(34)，在此它遇到和粘合任何在此固定的血清抗体。银/氢醌(36)稍后到达，并由来自第三通道中窗口(32)的洗涤液推动；它加强任何粘合的金配位物，从而给出一个指示样品中血清抗体存在的可见信号。
图5说明一种修改形式的图4分析设备，它在各个分析粘合反应之间和在分析结束时加入一些中间的洗涤步骤。这是靠引入一些附加的通道(40，41，42)实现的，全部通道都被安排成，接收置于储存区(39)的洗涤液。诸通道(40，41，42)被安排成，把洗涤液分别送入检测部位(34)，以便(a)在金标记抗体(35)到达之前洗涤在该部位形成的洗涤抗原/血清抗体复合体，(b)在银/氢醌显影剂到达之前洗涤抗原/血清抗体/金标记抗体，和(c)在检测部位(34)洗涤银加强复合体，从而终止加强。
这个实施例可按图6所示进行修改，以便在需要时使血清样品供洗涤步骤之用。在这种情况下，必须保证除了正在第一通道(27)移动的血清之外的全部血清都接触被固定的抗人类IgG，以便滤除血清抗体，使其余血清起洗涤液的作用。按照延伸穿过每个相关通道的横向阻挡层的形式，适当提供被固定的抗人类IgG(43)。这就免除提供一个单独的洗涤液储槽的需求。
在一个替代实施例中，该设备可以包括一个载有一些适当试剂的膜；这些试剂通过下述方式定位在所加样品的影响下，它们相继地移向一个检测区。图7说明一个这类实施例。一个固相载体(45)，例如上述的纸膜、硝化纤维素膜、玻璃纤维膜或其他多孔材料膜，按照下述方式适当地涂以试剂一些试剂保持移动，而另一些试剂则是不动的。该设备可以按照图7中虚线(46)所示，用一个不可渗透的阻挡层来适当成形或涂复，使各试剂成漏斗状流向检测区。
可以把样品加到下缘(47)，或者通过下述方式变通地加到位于载体下部的一些窗口利用毛细作用使样品移向一个移动标记粘合剂(48)，例如金标记抗体，和标记显影剂或移动加强剂(49)，例如银加强剂。样品沿载体(45)前进，超越活动标记粘合剂(48)和活动加强剂(49)，直接移向固定的粘合剂(50)，例如在检测区中的俘获抗体。为了安排适当的事件顺序，可以在不同释放剂中载体上淀积活动试剂(48)和(49)，以提供离开载体的不同释放时间。通过选择适当的释放剂，有可能调节标记试剂(48)和加强试剂(49)的释放顺序和速度，并且控制它们在其中被暂时固定和随后发生反应的环境。
这样，诸试剂按箭头方向相继地移向检测区，最好通过它，由毛细管作用吸入上区(51)。为了帮助粘合剂(50)同活动试剂(48)和(49)进行适当的相互作用和均匀的暴露，可以提供扩散剂(52)，并把它正好定位于样品路径上检测区的前面。这可以采用固定物质形式，例如蛋白质(诸如牛血清白蛋白或BSA)，聚合物(诸如聚乙烯醇(PVA)，PEG，PVP等)，盐或其他适宜的物质，例如甘油，阿拉伯树胶，类脂化合物；这类物质淀积于膜上，甚至在诸试剂流过检测区时也能使它们被分散。该膜也可以是用织物结构的可渗透或不可渗透材料浸渍的，以便引起扩散区发生这类混合或扩散。这样一种不可渗透的材料可以包括淀积于膜上的蜡；在淀积时使用一个高分辨率的热蜡打印机，且由一个图形计算机程序驱动，以产生所需的图形。一种适用的热蜡打印机是可从Tetronix Europe，UK买到的phaser340型。一种适用的图形设计软件包是从Autodesk Inc.USA买到的Autosketch。另一方面，通过在扩散区中这个膜的表面上放置一个像玻璃纤维衬垫之类的单独材料，也可以实现扩散。
存在于样品中的分析物首先同第一标记试剂(48)发生反应，然后通过检测区继续前进。它可能由于分析物与粘合剂(50)的相互作用而形成一个夹层。由于第一粘合剂(48)上的标记物是不可见的(例如一种酶或小的金或其他金属颗粒或未加强的标记物)，故不会直接检测到信号。随后样品通过检测区的移动会产生一种跟着发生这种夹层构造的洗涤效应。随后释放加强试剂(49)会使它移向和通过检测区，从而产生所需的信号加强，以给出一个间接的信号。样品在这种加强后的进一步移动会洗涤膜，使俘获区中产生一个在背景上的清晰信号。
另一方面，可以采用膜的单独窄条形式，如图8所示，在条的下部并排紧靠地安放活动试剂(48)和(49)。在使用适宜慢速释放剂情况下，可使各种试剂相继地移向检测区中的粘合剂(50)；由于在紧靠检测区的前面安放扩散剂(52)，可使各试剂在到达检测区之前发生扩散。这样，层流将保证，各试剂要在它们相继地到达扩散剂处时才混合。
意外地发现，随着银加强试剂使银金属淀积于检测区内的金标记粘合蛋白质之上，银形成一个半渗透阻挡层，使银加强试剂进一步流过该区。这就产生一种改变诸试剂流过检测区的路径的效应，从而有效地使最终反应产物改变设备的几何形状。这可导致整个俘获区被银离子均匀地扩散，容许在检测区内均匀地加强金颗粒。这样，穿过检测区的试剂的层流流动就被自动地扩散到整个区。
在进一步的试验中发现，由于金颗粒在适当的部位持久地淀积于膜上，故银加强试剂引起银金属聚集，从而有效地改变穿过膜的液体的流动。这样，可以安排，把诸试剂相继地送到检测区，而无需不可渗透的阻挡层或慢速释放剂。
一个这类实施例示于图9中。在这个实施例中，在载体(45)上这样定位标记试剂(48)，使得它能够在层流流动时直接流向检测区中的粘合剂(50)。这样定位加强试剂(49)如果它在层流流动下前进，则它会绕过检测区。然而，在加强试剂(49)的路径上，有金颗粒(53)淀积于载体上，从而当样品继续沿载体流动时，就在加强试剂(49)的路径上形成一个阻挡层，于是把液流有效地转向进入检测区，如箭头所示。
另一方面，该设备可以采用简单的量杆形状，如图10所示，在此，全部试剂都在不同区中穿过窄条而淀积，并且通过在各区施加适宜的释放试剂来影响它们的受控释放。这样，样品被施加到窄条的下缘(47)，并且流过各区，由毛细管作用吸向上部(51)。样品在不引起立即释放的情况下流过加强试剂(49)，并且继续流到标记粘合蛋白质(48)，在此，在释放标记粘合蛋白质的同时，在样品分析物与标记粘合蛋白质(48)之间发生一种相互作用。然后它移向俘获粘合蛋白质(50)，进一步发生相互作用；如果样品中存在这类特异分析物，就形成一个夹层，如前所述。剩余的样品液体流过俘获区，到达窄条的上区(51)，该区可能具有一个重选的灯芯或较大的表面积(未示出)，使样品有效地流过检测区。
其后，由于样品液体继续流动，发生加强试剂(49)的释放，这一释放是由选择慢速择释放试剂来控制的，如前所述。加强试剂(49)同样被拉过检测区，使信号变成可见。
可以用这种方法在膜的下部淀积任何数量的试剂，使任何数量的顺序反应得以发生。使用继之以银加强的小金颗粒标记物，或继之以彩色反应物质的酶标记物，同在目前所用的常规快速前试验系统中由较大金或特别标记物给出的直接信号相比，可提供较大的间接信号强度。此外，该方法容许有一个在俘获区的诸反应之间的洗涤步骤。由样品自身提供洗涤。此外，可以有在检测区中固定的多于一个的俘获粘合剂，用于同时检测多于一个的来自样品的分析物。
另一方面，可以把活动标记粘合试剂和/或加强试剂淀动积于可渗透膜、纸或玻璃纤维等的各独立层上，这些层接触于设备膜的表面上，使样品液体在这个第二层的支配下首先向着俘获区移动；从而在一个受控制的时间间隔之后，通过它释放标记粘合试剂或标记显影剂。这可用图11来说明；图11示出一个实施例，其中，加强试剂(49)放在一个玻璃纤维衬垫(54)上，而该垫又固定于载体(45)的表面上。通过选择形成第二层的材料和通过选择这个第二层内的释放剂，可以控制标记粘合试剂或标记显影剂释放以前的时间间隔。用一种适宜的阻塞剂去预先处理该膜或第二层材料，可控制穿过设备膜的试剂的移动速度；这类阻塞剂有表面活性剂，聚合物，蛋白，糖，树脂等，或者单独用或者联合用。
通过引伸这一原理，可以在同一个位置上加入好几层这类膜，每层膜携带不同的反应物质，它们可相继地溶解，并转移到设备的膜上。这些层可用或可不用未涂复膜来隔离，以便不同物质更准确地相继释放到设备的膜中。这种分层结构的一个优点在于，标记粘合试剂和/或标记显影剂在开始时未进入设备的膜体中，从而容许样品流体自由地流入俘获区。
这类设备可以按以上所述用于夹层分析，也可以按照上面对液体通路设计的描述，用于竞争分析。在竞争分析格式中，第二粘合剂(50)可用于粘合第一粘合试剂(48)的样品分析物进行竞争。第一粘合试剂(48)在试验时的液体样品影响下移动到检测区中；但在这种情况下，任何已粘合样品分析物的试剂不会保持在检测区中。只有那种未粘合的第一标记粘合试剂(48)才会在此聚集，并随后产生可见的信号。在这种情况下，信号愈大，则样品中存在的分析物愈少，从而指示样品中分析物不足。立即标记的粘合试剂(48)在检测区是不可见的，但随后由于相继到达的加强试剂(49)的加强作用而使标记物变成可见的，且其强度高于目前采用的常规直接标记物的强度。
本发明的设备还可用于检测血清、唾液或其他体液中或来自其他来源的已制备样品液体中的特异抗体。图12示出一个在这方面特别适合的实施例。其设备形式显著地类似于图7所示的设备形式。然而，在这种情况下，所固定的俘获试剂(50a)可以是一种对被检测抗体具有特异性的抗原。所标记的粘合试剂(48)可以是一个适宜的粘合蛋白，例如蛋白A或蛋白AG，或抗人体IgG等，它是用小的金颗粒或其他颗粒状材料或酶等加以标记的。加强试剂(49)也可以是银加强试剂，酶基片，或染料等，如前所述。相继地释放这些粘合试剂，容许在检测区发生一些时控的反应。
含有特异和非特异抗体的样品首先移过一个无阻挡的间隙(55)，以便在检测区中同所固定的抗原(50a)直接发生反应。所标记试剂(48)的随后释放，使它同当时固定于检测区的样品抗体发生反应。受控地相继释放标记的粘合试剂(48)和加强的试剂(49)，是通过如上所述的类似释放物质，或通过也是如上所述的随后淀积的物质或在半渗透阻挡层之内淀积的物质来提供的。样品继续穿过检测区，从而在随后释放的加强试剂(49)提供一个可见的信号之前提供一个洗涤步骤。
为了减少样品中存在的非特异抗体附着于标记的粘合试剂(48)，可以用一个抗IgG带(56)部分地屏蔽该试剂。在这种安排下，样品流过抗IgGg带(56)，引起标记粘合试剂(48)的释放和流动，并随后引起加强试剂(49)的释放和流动，但从这部分样品中滤除特异的和非特异的IgG。
如果需要，可以提供一些吸液区，以便把样品加到膜的下缘和上部，以便利用毛细管作用使样品顺利地拉过检测区。该设备可以按图12所示来适当地形成，使通过扩散剂(52)和检测区或俘获区的样品和试剂被集中。
另一方面，设备可以采用图10所示的形式，其中全部试剂都越过该窄条而淀积于不同的区中，并且通过在各个区施加适宜的释放材料而影响它们的受控释放。这样，样品可以加到窄条的下缘，并且流过每个区，由毛细管作用吸向上部(51)。在这种情况下，这样安置诸试剂，使得样品可以流过加强试剂(49)和标记粘合剂(48)，而不引起这些试剂中任何一种的立即释放。样品流过检测区，在此，样品分析物专门粘合于俘获试剂(50)。样品液体的进一步流动会引起标记粘合试剂(48)的随后释放，该试剂然后流向和流过俘获区，从而粘合在此固定的来自样品的特异抗体。样品液体的进一步流动引起加强试剂(49)的随后释放，该试剂然后流向俘获区，以加强标记物，且产生可见信号。
在一个优选实施例中，该设备采用图13所示的简单量杆的形式，在此，活动试剂(48、49)在不同区中淀积于例如由玻璃纤维组成的下衬垫或灯芯(57)上，并且装于像阿拉伯树胶之类的慢速释放材料之内，如上面所述，适当地控制不同试剂的释放。把样品施加到窄条的下缘(47)，并且在吸向检测区的毛细管作用下使它流过各个试剂区。样品流过下灯芯(57)而不引起加强试剂(49)的立即释放；且继续流到标记粘合试剂(48)，在此，在释放标记粘合试剂(48)的同时，在样品分析物与标记粘合试剂(48)之间发生相互作用。然后所得液体转入一个膜(58)中，并且移向粘合试剂(50)；如前所述，如果样品中存在这类特异分析物，就进一步相互作用，以形成一个夹层。剩余的样品液体通过检测区流到一个上区(51)，可在此处提供一个重迭的灯芯(59)或较大的表面积，以便把样品有效地拉过检测区。样品液体的随后流动使加强试剂(49)从下灯芯释放和流动，从而使它们随后转入膜内，并流向检测区，在此产生标记物的加强。样品的进一步流动会引起来自目标区的剩余加强试剂的洗涤。
一种类似的但更简单的安排把慢速释放试剂用于标记粘合试剂，在上面示于图7至13中的任一实施例中用一种可见的标记物可作出这种安排，它不需要用随后的加强去使信号变成可见。
本发明的分析设备可以完整地提供，也可以用装有多孔元件的成套用具形式提供；多孔元件例如包括适当的不可渗透阻挡层和/或一些指示在何处添加试剂或指示带或抗体等的标志。适当的试剂可以构成成套用具的一部分，也可以不构成它的一部分。
下面的实例只供说明之用。
实例1把一个实质上如图10所示的设备设计如下。从Advanced MicroDevices，New Delhi，Lndia得到一种8μm微孔尺寸的和支承于硬塑料垫片上的硝化纤维素膜。一条这种膜被切成5mm宽和80mm长。为了简单地论证本发明，把一种兔子IgG(Sigma chemicals ltd，Poole，Uk)在去离子水中稀释到1mg/ml，并且它是使用一个专用于诊断设备的打印蛋白质的压电喷墨打印机(生物打印机，British Biocell InternationalLtd.Cardiff，Uk)以1μ1/cm的强度在离开底缘4cm处越过该窄条而施加的。该蛋白条在37℃下干燥15分钟。然后在一种0.1％吐温(Tween)20和1％聚乙烯吡咯烷(Sigma Uk)的溶液中浸泡，使该条阻塞。把该条在37℃下干燥30分钟。把结合于1nm金颗粒的山羊抗兔IgG(BritishBiocell，Uk)在一种0.1％吐温20[注1]和1％聚乙烯吡咯烷的溶液中稀释成1μg/ml的抗体浓度，并且在离开底缘约3cm处把5μl溶液移入该窄条中。一种包括一个引发剂和一个显影剂的光学显微镜银加强成套用具，SELK15(British Biocell International Ltd)被购得。在阿拉伯树胶(SigmaChemicals，Uk Ltd)的1％水溶液中，按1∶1独立地稀释引发剂和显影剂。每种试剂都以2μl移入膜条中，在离开底级1cm处移入引发剂，在离开底缘2cm处移入加强剂。在37℃下把窄条干燥30分钟。然后把窄条放入一个含有100μl磁酸盐缓冲盐水的微井中。金标记的山羊抗兔IgG向着固定的兔IgG移动，并且在一分钟之内被俘获，但没有明显的信号。在又一个两分钟之内，引发剂和显影剂向窄条上方移动到俘获金标记抗体，并产生一个强烈的黑色信号。
实施例2为检测尿中βHCG而产生一种夹层分析，如图10所示。一种在塑料衬片上的8μm微孔尺寸的硝化纤维素膜)AMD，India(是，用生物打印机在水中以1μl/cm的浓度在单克隆抗αHCG(Sigma ChemicalsLtd，Uk)的1mg/ml溶液情况下剥离的。在37℃下把窄条干燥15分钟。在一种0.1％Tween20和1％聚乙烯吡咯烷的混合液(Sigma ChemicalsLtd，Uk)中浸泡一分钟，以阻塞膜条，然后使膜条在37℃下干燥30分钟。把结合于1nm金颗粒的单克隆抗βHCG(British Biocell，Uk)在一种0.1％吐温20和1％聚乙烯吡咯烷溶液中稀释到1μg/ml的抗体浓度，并且在离开底缘约3cm处把5μl这种溶液移入窄条中。
把加强剂和引发剂按如上所述加到窄条中，并且在37℃下把窄条干燥30分钟。把窄条放入一个含有100μl尿的微井中，该尿来自一名妊娠4周的妇女。样品使金结合物从窄条向俘获区移动，同时和样品βHCG分析物发生反应。在3分钟之内，样品使银加强试剂从膜条向俘获区移动，以产生一个指示分析物存在的深黑线。样品的进一步流动使窄条得以洗涤任何背景污染。
实例3
为了在一个图10所示形式的标准样品中检测肝炎B表面抗原而准备另一种夹层分析。一种在塑料衬片上的8μm微孔尺寸的硝化纤维素膜(AMD，India)是，用生物打印机在水中以1μl/cm的浓度在单克隆抗肝炎表面抗原(Genzyme，Uk)的1mg/ml溶液中剥离的。在37℃下把窄条干燥15分钟。通过在一种0.1％吐温20和1％聚乙烯吡咯烷混合液(Sigma Chemicals Ltd，Uk)中浸泡一分钟，阻塞膜条，然后使膜条在37℃下干燥30分钟。一种结合于1nm金颗粒的第二单克隆抗肝炎B表面抗原(British Biocell，Uk)，在0.1％吐温20和1％聚乙烯吡咯烷混合液中被稀释成1μg/ml的抗体浓度，并把5μl这种溶液在离开底缘约3cm处移入窄条。加强剂和引发剂按照如上所述加到窄条中，并且在37℃下把窄条干燥30分钟。把窄条放入一个含有100μlPBS的微井中，PBS是用标准浓度的肝炎B表面抗原(Genzyme，Uk)强化的。样品使金结合物在同样品肝炎分析物发生反应的同时，从窄条向俘获区移动。在3分钟之内，样品使银加强试剂从膜条向俘获区移动，以产生一个指示分析物存在的深黑线。
实例4根据图13的优选实施例，设计一个设备如下一种8μm微孔尺寸和支持于硬塑料衬片上的硝化纤维素膜(Advanced Micro Devices，NewDelhi，India)被切成5mm宽和25mm长。把一个上纸芯用2mm的搭接加到膜上。在离开底缘约4cm距离的地方，用生物打印机在水中以1μl/cm的浓度在单克隆抗αHCG(Sigma Chemicals Ltd，Uk)的一种1mg/ml溶液中，剥离窄条。在37℃下把窄条干燥15分钟。通过在一种0.1％吐温20和1％聚乙烯吡咯烷混合液(Sigma Chemicals Ltd，Uk)中浸泡一分钟，阻塞膜窄条，然后在37℃下干燥30分钟。结合于1nm金颗粒的单克隆抗βHCG(British Biocell，Uk)在0.1％吐温20和1％聚乙烯吡咯烷混合液中，被稀释到1μg/ml的抗体浓度，并且把5μl这种稀释液在离开底缘约2cm处，移入一个尺寸为5×30mm的玻璃纤维的单独窄璃条中。通过在表面上以互相隔开5mm的距离把每种溶液各5μl移入一些单独的区中，就把来自一个银加强成套用具(SEKL15，British Biocell InternationalLtd，Uk)的加强剂和引发剂也加到一个单独的玻璃纤维窄条(Whatman，Uk)中，并且在37℃下干燥15分钟。在载有硝化纤维素膜的塑料衬片上用一层双面粘着带把玻璃纤维条固定就位，使它跟膜重叠1mm。把组装条以其下端放入一个含有100μl尿中的微井中，该尿来自一名妊娠4周的妇女。样品使金结合物在与样品βHCG分析物发生反应的同时，从玻璃纤维条向俘获区移动。在3分钟之内，样品使银加强试剂从玻璃纤维条移向硝化纤维素膜，并向上移向俘获区，以产生一个指示分析物存在的深黑线。
实例5一个如图7所示的设备是用一个25mm宽和80mm长的硝化纤维素条(Micro D-evices，India)制备的，该条是用一支标志笔和不溶性油墨在其上印制边框的，如图7的虚线所示。这项设计不建立任何单独的试剂通道，但容计试剂向检测区集中。在通道的整个宽度上和在离开底缘的4cm的距离处，用生物打印机在水中以1μl/cm的浓度在单克隆抗αHCG(Sigma Chemicals ltd，Uk)的1mg/ml溶液中在检测区上印制窄条。在37℃下把窄条干燥15分钟。通过在0.1％吐温20和1％聚乙烯吡咯烷混合液(Sigma Chemicals Ltd，Uk)中浸泡一分钟，阻塞膜条，然后在37℃下干燥30分钟。结合于1nm金颗粒的单克隆抗βHCG(BritishBiocell，Uk)在0.1％吐温20和1％聚乙烯吡咯烷混合液中，被稀释到1μg/ml的抗体浓度；并且把5μl这种溶液，在离开底缘约1cm且正好位于中心右侧处，移入图7所示的窄条上标志为48的区中。加强剂和引发剂来自一种银加强成套用具(SEKL15，British Biocell internationalLtd.Uk)，把它们加到用49表示的区，正好在中心左侧处，两种试剂大约隔开5mm，每种试剂各移入3μl，并且在37℃下把膜干燥15分钟。在离开底缘约2cm，且正好位于中心左侧处，定位银加强试剂。该条以其下端放入一个含有100μl尿的井中，该尿来自一名妊娠2周的妇女。样品使金结合物从该条向俘获区移动，同时与样品βHCG分析物发生反应。在3分钟之内，样品使银加强试剂从玻璃纤维条移向硝化纤维素膜，并且向上移向俘获区，以产生一个指示分析物存在的深黑线。来自底缘的样品的进一步流动，对从膜移入上区的剩余试剂提供一种洗涤。
上述的设备容许使用一步程序以快速的方式进行一种很灵敏的分析。可以依据要进行的分析、可用的试剂、和所需的分析类型来设想许多不同的安排，这些安排都是本发明的组成部分。
权利要求
1.一种用于检测样品中存在分析物的分析设备，其中一个指示所述分析物存在或不存在的可见信号是在一个支持体上的检测部位产生的；其特征在于，所述的信号是借助于在一个被标记的第一粘合试剂与一个标记显影剂之间的一个信号加强反应来生成或加强的；所述的第一粘合试剂与标记显影剂被安排成，用一个单独的分析步骤，但用一个使第一粘合试剂在标记显影剂之前到达检测部位的顺序的方式，送到检测部位。
2.一种分析设备，包括(a)一个多孔元件；(b)一个专门粘合一种分析物的第一粘合试剂，它可以在进入检测区的液体的影响下穿过多孔元件，且包括一种不可见的标记物；(c)一个第二粘合试剂，它或者以一种与第一粘合试剂互补的方式专门粘合所述的分析物，或者与所述的分析物竞争，以粘合于所述的第一粘合试剂，它被固定于所述的检测部位内；和(d)一个标记显影剂，它可以在进入所述检测部位的液体的影响下在所述第一粘合试剂的后面移动，所述的标记显影剂能够使不可见的标记物变成可见的。
3.根据权利要求2所述的分析设备，其中所述的不可见标记物包括一种颗粒状金属标记物，且标记显影剂包括一种在所述金属的表面上淀积固态物质的试剂。
4.根据权利要求3所述的分析设备，其中，标记物颗粒的尺寸处于从1至100nm的范围内，最好是小于5nm。
5.根据权利要求3所述的分析设备，其中，标记物是一种颗粒状金属标记物。
6.根据权利要求5所述的分析设备，其中，标记显影剂包括一种含银试剂。
7.根据权利要求2至6中任何一项所述的分析设备，其中，所述的多孔元件被分成多个区，各区实质上互不渗透，但在所述的检测部位相交；所述的第一粘合试剂置于所述诸区之一，而所述第二粘合试剂则置于一个不同的区，液体流过所述不同区的路径长度长于所述诸区之一的长度。
8.根据权利要求7所述的分析设备，其中诸区是由一个蜡制阻挡层确定的。
9.根据权利要求7所述的分析设备，其中诸区是由多孔元件中的槽或间隙确定的。
10.根据权利要求2至6中任何一项所述的分析设备，其中，所述的标记显影剂是这样加入多孔元件的使得它在有液体存在的情况下从该元件的释放迟于第一标记粘合试剂的释放。
11.根据权利要求10所述的分析，其中，标记显影剂是以一种包含一个慢速释放剂的混合物的形式施加的。
12.根据权利要求10或11所述的分析，其中，标记显影剂是装在一个和该多孔元件接触的第二多孔元件内的。
13.根据权利要求12所述的分析设备，其中，第二多孔元件是一个玻璃纤维衬片。
14.根据权利要求10至13中任何一项所述的分析设备，其中，第一粘合试剂是加在一种包含一个慢速释放剂的混合物中的。
15.根据权利要求2至6中任何一项所述的分析设备，其中，从多孔元件膜释放活动试剂是通过更改多孔元件的疏水性来控制的。
16.根据权利要求2至6中任何一项所述的分析设备，其中，至少标记显影剂穿过多孔元件的移动是由一个半渗透的阻挡层来抑制的。
17.根据权利要求3至6中任何一项所述的分析设备，其中，标记显影剂被安排成首先接触存在于多孔元件上的标记物，使所述标记物上的淀积物可建立一个阻挡层，该层使流向检测区的液体转向。
18.根据上面诸权利要求中任何一项所述的分析设备，还包括一个外壳；打开外壳可以引入样品，并且外壳使检测区可以被观察。
19.根据上面诸权利要求中任何一项所述的分析设备，包括至少一个吸液芯或吸液区，它被安排成帮助液体流过该设备。
20.根据上面诸权利要求中任何一项所述的分析设备，其中，扩散剂是这样提供的，以致于诸试剂在检测区中发生反应之前得以均匀地分布。
21.
22.根据上面诸权利要求中任何一项所述的分析设备，它被这样安排，使得检测区是在各个反应阶段之间被洗涤的。
23.根据权利要求22所述的分析设备，其中，被怀疑含有分析物的液体样品被用作洗涤液。
24.根据权利要求23所述的分析设备，它装有一种过滤剂，用于从所述的洗涤液中去除不需要的元素。
25.根据权利要求24所述的分析设备，它适合用作血清学分析；其中，过滤剂包括一种抗抗体，它被如此安排，使得它从血清样品中去除抗体。
26.根据权利要求1至24中任何一项所述的分析设备，其中，所标记的第一粘合试剂包括一个标记的核酸探子，并且所述的分析物包括一个固定于检测区中的核酸族。
27.一种用于检测液体样品中是否存在分析物的方法，该方法包括把所述的液体样品加到上述诸权利要求中任何一项所述的分析设备中，和记录是否出现一个可见的信号。
28.一种诊断分析设备，其中，容许一种液体穿过一个多孔元件，以产生一个指示某一分析物存在或不存在的信号；所述的系统包括一个第一试剂和一个第二试剂，它们被如此安排，以致于它们在分析过程中一起反应，以产生一个使流过多孔元件的液体转向的物理阻挡层。
29.一种分析设备，其中，一些反应步骤是在多孔元件上的一个检测部位实现的；并且其中，洗涤液是在至少两个所述反应之间加到所述部位的；其特征在于，洗涤液包括已穿过装于所述元件上的过滤剂的样品的一部分。
30.根据权利要求29所述的分析设备，其中，分析设备适合于血清学分析，并且过滤剂包括在多孔元件表面上的一层固定抗抗体；该多孔元件被这样安置，使得准备用作洗涤液的一部分样品是在穿过它以后，到达检测部位的。
31.一套用具，它包括一个多孔元件适合用于根据权利要求27所述的方法。
全文摘要
用于检测样品中分析物存在的分析设备,其中指示所述分析物存在或不存在的可见信号是在支持体上的检测部位产生的,其特征在于所述信号是借助于在被标记的标记第一粘合试剂与标记显影剂之间的信号加强反应来产生或加强的,它们被安排成用一个单独的分析步骤,但用一种使第一粘合试剂在标记显影剂之前到达检测部位的顺序方式,送到检测部位。把各试剂顺序地送到检测部位是用液体通路、慢速释放剂等技术实现的。进行分析的方法和用于分析的成套用具构成本发明的又一个方面。
文档编号C12Q1/68GK1176698SQ96192179
公开日1998年3月18日 申请日期1996年2月1日 优先权日1995年2月3日
发明者约汉·安东尼·钱德勒 申请人:英国生物电池国际有限公司