专利名称:鱼用抗菌药物的制作方法
本发明涉及鱼用抗菌药物，尤其是涉及用于防治鱼类由微生物或者水生微生物所引起的传染病的抗菌药物，它包括由通式(Ⅰ)表示的作为有效成分的喹啉衍生物，其盐类或它们的水合物，
式中R1代表氢原子、低烷基或低羟烷基，R2代表氢原子或低烷基。
近来由于200海里捕鱼区的问题和因捕捞过度引起鱼源短缺，所以养鱼业规模日益扩展。随着这种趋势，人们正致力于高效率产鱼的研究。特别是在高密度养鱼的养殖场里从事幼師鱼和鳗鱼等的养殖，会频繁发生传染病大量侵染鱼类的情况，如果对这种传染病不予治疗处理，则其破坏性有时可使整个养殖场的鱼遭到毁灭。即使破坏没有如此严重，但这些幸免于难的鱼也受到了损害，从而大大降低了商业价值。在许多地方都碰到这类问题，对此迫切需要及时和有效的解决办法。
鱼类的传染病大多数是由微生物或水生微生物引起的，为了防治传染病，需要用抗菌素药物，例如磺胺类，硝基呋喃，人工合成青霉素，四环素，大环内酯类抗菌素，萘啶酮酸，噁喹酸，吡咯嘧啶酸或氯霉素，按预定的周期，给鱼喂服这些药物，或将受感染的鱼置于含有溶解这类抗菌素的水中，即所谓药浴。然而已知上述抗菌素药物的缺点诸如抗菌谱范围窄，疗效差，安全范围(有效剂量与有毒剂量之间的界限)狭小，有不希望的副作用，使用不经济，因此并不令人满意。
现已发现应用上述通式(Ⅰ)表示的喹啉衍生物，其盐类或它们的水合物，对于由微生物和水生微生物引起的各种鱼类传染病具有广泛及优良的防治效果，而且对防止抗菌性和并发症效果极好。此外，这种药物毒性低，安全，及代谢快，是防治鱼类传染病极其适宜的抗菌素药物。本发明达到了这些要求。所述通式(Ⅰ)涉及到的“低烷基”或“低羟烷基”中的低烷基包括含有至多6个碳原子(最好至多为4个碳原子)的直链或支链烷基，如甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，仲丁基，异丁基，叔丁基等。R1的较佳特例包括氢原子，甲基，乙基和β-羟乙基。R2以氢原子，甲基和乙基为较佳。
用于本发明抗菌素药物中的有效成份的通式(Ⅰ)的喹啉衍生物的典型例子包括1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-哌嗪子基(piperazino)-喹啉-3-羧酸，1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-哌嗪子基-喹啉-3-羧酸甲酯，1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-哌嗪子基-喹啉-3-羧酸乙酯，1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-(4-甲基哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸，1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-甲基哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸乙酯，1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-乙基哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸，1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-乙基哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸乙酯，
1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-β-羟乙基-哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸。
通式(Ⅰ)的喹啉衍生物可以利用7位上哌嗪子基的碱性，采用酸加成盐的形式。这种酸加成盐的例子包括无机酸盐，如氢氯化物，氢溴化物，氢碘化物和硫酸盐;有机酸盐，如乙酸盐，柠檬酸盐，苯磺酸盐和4，4′-亚甲基双[3-羟基-2-萘羧酸盐](embonate或pamoate)。再者，在通式(Ⅰ)的喹啉衍生物中，当R2为氢原子时，3位上的羧基可以是盐的形式。这类盐包括碱金属盐，如钠盐或钾盐;碱土金属盐，如镁盐或钙盐以及铵盐等。
此外，通式(Ⅰ)的喹啉衍生物或其盐类可以采用它们的水合物形式。
通式(Ⅰ)的大多数喹啉衍生物都是公开了的已知化合物，例如在特开(laid-open)专利申请公报71683/82号和74667/83号中所公开的，并可用这些公报中所介绍的方法进行制备。
为了将通式(Ⅰ)的喹啉衍生物，其盐类或它们的水合物(以下简称为“通式(Ⅰ)的活性化合物”)喂饲鱼类，可以将这种抗菌素药物拌在鱼食料中口服，也可以将药物溶于水中，让病鱼在其中游动(即所谓的“药浴法”)。
可以将通式(Ⅰ)的活性化合物配制成适宜于这种服药方法的制剂形式，例如粉剂，粒剂或作为鱼的辅助食物的溶液;或可溶性分散剂或药浴溶液。配制这种药物形式的方法类似于配制防治急性传染病药物的常规方法。通常制备时加一种或多种不同的添加剂，其中有赋形剂，如大豆蛋白，乳糖，啤酒酵母和石灰石;稀释剂，如水;加溶剂，如苄醇，正丁醇等;增稠剂，如羟丙基甲基纤维素;pH调节剂，如氢氧化钾，氢氧化钠，乳酸，盐酸和乙酸，将这些添加剂与通式(Ⅰ)的活性化合物适当混合，配制成所需制剂形式。下面将更具体说明若干有代表性的药剂形式。
配方实施例一(用作鱼辅助食物的粉剂)通式(Ⅰ)的活性化合物 1～10份(重量)大豆蛋白 99～90份(重量)总量 100份(重量)将大豆蛋白加到通式(Ⅰ)的活性化合物，在混合器中均匀混合。
配方实施例二(用作鱼辅助食物或药浴的溶液)通式(Ⅰ)的活性化合物 0.5～10份(重量)氢氧化钾 0.08～1.5份(重量)苄醇 1.3～1.4份(重量)羟丙基甲基纤维素50 0～3.5份(重量)净化水 余量总量 100份(重量)将氢氧化钾加到净化水，搅拌至生成均匀体系，加入通式(Ⅰ)的活性化合物，苄醇和羟丙基甲基纤维素50，搅拌至均匀。
配方实施例三(药浴用的可溶性粉剂)通式(Ⅰ)的活性化合物 1～10份(重量)(一种水溶性化合物)乳糖 99～90份(重量)总量 100份(重量)将乳糖加到通式(Ⅰ)的活性化合物，在混合器中均匀混合。
将通式(Ⅰ)的活性化合物作为抗菌素药物用于鱼类时，用药剂量根据用药目的(防病或治病)和被治疗的鱼的种类、大小和感染程度而有所区别。然而，一般每天剂量在5～1000毫克/千克鱼重，较佳为20～100毫克/千克鱼重，可以一天一次也可以一天数次用药。显然，上述剂量仅是一个粗略标准，可以根据鱼龄、鱼重和症状轻重等予以增减。用药期限并无特殊限制，但是一般用药1至10天左右即可获得显著疗效。
本发明提供的抗菌素药物对于诱发鱼类传染病的各种微生物和水生微生物具有广谱抗菌作用。例如本药物对下属细菌具有很强的抗菌作用气单胞菌属(genus Aeromonas)，爱德华氏菌属(genus Edwardsiella)，巴斯德氏菌属(genus Pasteurella)，假单胞细菌属(genus Pseudomonas)，链球菌属(genus Streptococcus)和弧菌属(genus Vibrio)，因此非常适用于防治饲养的淡水鱼和海水鱼的传染病，这类鱼有幼
鱼、
鱼、鳗鱼，ayus，鲑鱼，鳟鱼和鲤鱼等，以及水族馆中的金鱼和热带鱼。
本发明抗菌素药物的这种极好的疗效是使用下列化合物经以下各体内和体外的试验而得到证明的。
化合物A1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-哌嗪子基-喹啉-3-羧酸的氢氯化物(分解温度319～321℃)化合物B1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-哌嗪子基-喹啉-3-羧酸的氢氯化物的一水合物化合物C1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-甲基哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸的氢氯化物(分解温度345～347℃)化合物D1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-乙基哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸化合物E1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-乙基哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸的氢氯化物二水合物化合物F1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-β-羟乙基-哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸的氢氯化物(分解温度327～333℃)化合物G1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-乙基哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸的embonate(盐)化合物H1-环丙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-7-(4-乙基哌嗪子基)-喹啉-3-羧酸乙酯(分解温度187～189℃)化合物OA(对照)1-乙基-1，4-二氢-6，7-亚甲二氧基-4-氧代-3-喹啉羧酸试验例一对鱼类病原菌的抗菌活性(试管内)将各个试验菌株培养过夜，并将各个培养肉汤(含有约106细胞/毫升接种到穆勒-欣顿琼脂培养基(DIFCO)中，该培养基加有1.0-2.0%氯化钠和含有各种特定浓度的试验化合物。经25～30℃培养20小时后，测定了每一种的化合物的最小生长抑制浓度(MIC)。结果列于表1。
试验例二化合物D对各种鱼类病原菌的抗菌活性(试管内)将各个试验菌株培养过夜，并将生成的培养肉汤(含有约106细胞/毫升)接种到穆勒-欣顿琼脂培养基(DIFCO)中，该培养基加有1.0～2.0%氯化钠和含有特定浓度的试验化合物。经25～30℃培养20小时后，测定了每一种的化合物的最小生长抑制浓度(MIC)。结果列于表2。
在上述试验例中所用的这些活性化合物中，给出一个化合物H的制备实施例，以供参考。
制备实施例一将24克96%浓硫酸滴入溶于120毫升乙醇的18克1-环丙基-7-(4-乙基-1-哌嗪基)-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-羧酸的悬浮液中，生成的混合物回流12小时，经减压去除多余的乙醇后，将残余物溶于200毫升冰水。在用冰冷却条件下，加入19.2克氢氧化钠溶于100毫升水的冷却溶液，使系统的pH变为12～14，然后将其间生成的沉淀物质进行吸滤。用水洗涤沉淀物，并在100℃条件下，减压干燥。经从甲苯/轻苯再结晶，得到10克1-环丙基-7-(4-乙基-1-哌嗪基)-6-氟-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-羧酸乙酯(理论值的52.5%)，熔点为187～189℃。
权利要求
1.鱼用抗菌药物，含有下列通式所表示的有效成份为喹啉衍生物或其盐类或它们的水合物，
式中，R1为氢原子、低烷基或低羟烷基，R2为氢原子或低烷基。
专利摘要
鱼用抗菌药物，含有下列通式所表示的有效成分为喹啉衍生物或其盐类或它们的水合物。
文档编号C07D215/56GK87100799SQ87100799
公开日1987年9月16日 申请日期1987年2月18日
发明者北尾忠利, 关口升, 速水稔夫 申请人:拜尔公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan