一种提取水飞蓟分离蛋白的方法

文档序号:8304404阅读:489来源:国知局
一种提取水飞蓟分离蛋白的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种提取食品蛋白方法,特别是涉及一种提取水飞蓟分离蛋白的方法。
【背景技术】
[0002]水飞蓟,Silybum marianum (L.) Gaertn,别名水飞雉、奶蓟,为菊科一至二年生草本植物。水飞蓟很早就作为保肝的草药在民间流传。1947年,水飞蓟被收载于《美国处方齐U》中。水飞蓟果实中有较大药用价值的是水飞蓟素、水飞蓟油和水飞蓟蛋白。其中,水飞蓟素主要存在壳中,籽仁中主要含有蛋白质、油脂和糖类。经脱去油脂后的水飞蓟柏可用于提取水飞蓟素。提取水溶性水飞蓟素后的渣饼富含淀粉、蛋白质。有研究表明,水飞蓟蛋白是一种优质植物蛋白,不仅蛋白质含量高且氨基酸种类齐全,具有较高的营养价值,其效价介于大豆蛋白和小麦蛋白之间。

【发明内容】

[0003]本发明的目的在于提供一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,本发明利用蛋白质在碱条件下溶解度较高,而在等电点条件下溶解度很低的特性,通过调节分散体系PH值将蛋白质与淀粉和纤维素分离出来。通过实验对比,筛选出最适的提取溶剂和最优的提取条件。
[0004]本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,所述方法包括以下过程:
(1)将脱脂处理后的水飞蓟籽仁粉碎;过80目筛制得水飞蓟籽仁脱脂粉,装入实验袋,封好口,冷冻备用;
(2)以步骤(I)中制备的水飞蓟籽仁脱脂粉为原料,在一定的温度下用提取溶剂浸提。
[0005](3)浸提结束后,离心收集上清液;
(4)在收集的上清液中滴加HC1,以使上清液中蛋白质沉淀;
(5)离心,倾去上清液,收集沉淀;
(6)将收集到的蛋白质沉淀真空冷冻干燥12-18h,即得水飞蓟分离蛋白。
[0006]所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,所述步骤(I)中所述的脱脂处理为用乙醚脱脂处理三次。
[0007]所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,所述步骤(2)中的提取溶剂为0.05mol/L的Tris-HCl溶液(pH=8),其料液比为1: 16,浸提温度为40_50°C。浸提过程中不断搅拌,用lmol/L NaOH溶液调体系pH至11,浸提时间为60_80min。
[0008]所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,步骤(3)中所述的离心条件为低温冷冻4000r/min,离心 30min。
[0009]所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,步骤(4)中所述的HCl为lmol/L,调节反应体系的pH至5.5。
[0010]所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,步骤(5)中所述的离心条件为低温冷冻4000r/min,离心 30min。
[0011]所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,提取过程中浸泡原料用水、缓冲液的配置用水均为去离子水。
[0012]本发明的优点与效果是:
本发明通过单因素实验和响应面优化,筛选合适的提取剂和最优提取条件。该套提取技术操作简单、用时短,能较其他方法有效地提高蛋白质的提取率。
[0013]采用本发明的方法提取水飞蓟中的分离蛋白,工艺过程简单、合理、对环境无污染(酸碱中和)、蛋白质提取率高、操作时间短、具有很高的实用价值,可为与水飞蓟蛋白质相关的研究提供闻质量的样品。
【具体实施方式】
[0014]下面结合实施例对本发明进行详细说明。
[0015]实施例1不同提取液对SMP提取效果的影响结果
取5份2g过80目筛的水飞蓟籽仁脱脂粉,按1:16的料液比分别溶解于去离子水、
1.0mol/LNaCl 溶液、70% 乙醇溶液、0.1moI/LPBS 溶液(pH=8)、0.05mol/LTris-HCl 溶液(pH=8) ;5(TC水浴加热50min,然后4000r/min离心30min,取上清液;用凯氏定氮法测定上清液中的蛋白质含量。结果表明:pH=8的Tris-HCl溶液提取水飞蓟分离蛋白(SMPI)的得率最高,达41.52%,优于其他。
[0016]实施例2
取2g过80目筛的水飞蓟籽仁脱脂粉,按1:16的料液比加入到0.5mol/L的Tris-HCl溶液中,调节PH为8 ;在50°C条件下水浴加热50min ;然后4000r/min离心30min。收集上清液,滴加HCl,使上清液中蛋白质沉淀。4000r/min离心30min,倾去上清液,将收集到的蛋白质沉淀真空冷冻干燥12-18h,即得水飞蓟分离蛋白。
[0017]实施例3
除以下区别外,其他同实施例2。
[0018]取2g过80目筛的水飞蓟籽仁脱脂粉,分别按液料比为1:14加入到0.5!1101/1的Tris-HCl溶液中,调节pH=9。在45°C条件下水浴加热50min ;然后4000r/min离心30min。收集上清液,滴加HCl,使上清液中蛋白质沉淀。4000r/min离心30min,倾去上清液,将收集到的蛋白质沉淀真空冷冻干燥12_18h,即得水飞蓟分离蛋白。
[0019]本研究在对比水飞蓟蛋白质提取方法的基础上,筛选出最佳的提取方法为碱提酸沉法,结合单因素试验,并通过响应面分析,得到了提取水飞蓟籽仁中蛋白质的最佳工艺条件为:pH=8,液料比1:16,温度50°C,最佳提取液为Tris-HCl溶液。
【主权项】
1.一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,其特征在于,所述方法包括以下过程: (1)将脱脂处理后的水飞蓟籽仁粉碎;过80目筛制得水飞蓟籽仁脱脂粉,装入实验袋,封好口,冷冻备用; (2)以步骤(I)中制备的水飞蓟籽仁脱脂粉为原料,在一定的温度下用提取溶剂浸提; (3)浸提结束后,离心收集上清液; (4)在收集的上清液中滴加HC1,以使上清液中蛋白质沉淀; (5)离心,倾去上清液,收集沉淀; (6)将收集到的蛋白质沉淀真空冷冻干燥12-18h,即得水飞蓟分离蛋白。
2.根据权利要求1述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,其特征在于,所述步骤(I)中所述的脱脂处理为用乙醚脱脂处理三次。
3.根据权利要求1所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,其特征在于,所述步骤(2)中的提取溶剂为0.05mol/L的Tris-HCl溶液(pH=8),其料液比为1:16,浸提温度为40-50 0C ; 浸提过程中不断搅拌,用lmol/L NaOH溶液调体系pH至11,浸提时间为60_80min。
4.根据权利要求1所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,其特征在于:步骤(3)中所述的离心条件为低温冷冻4000r/min,离心30min。
5.根据权利要求1所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,其特征在于:步骤(4)中所述的HCl为lmol/L,调节反应体系的pH至5.5。
6.根据权利要求1所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,其特征在于:步骤(5)中所述的离心条件为低温冷冻4000r/min,离心30min。
7.根据权利要求1所述的一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,其特征在于:提取过程中浸泡原料用水、缓冲液的配置用水均为去离子水。
【专利摘要】一种提取水飞蓟分离蛋白的方法,涉及一种提取食品蛋白方法,包括以下过程:(1)将脱脂处理后的水飞蓟籽仁粉碎;过80目筛制得水飞蓟籽仁脱脂粉,装入实验袋,封好口,冷冻备用;(2)以步骤(1)中制备的水飞蓟籽仁脱脂粉为原料,在一定的温度下用提取溶剂浸提。(3)浸提结束后,离心收集上清液;(4)在收集的上清液中滴加HCl,以使上清液中蛋白质沉淀;(5)离心,倾去上清液,收集沉淀;(6)将收集到的蛋白质沉淀真空冷冻干燥12-18h,即得水飞蓟分离蛋白。采用本发明的方法提取水飞蓟中的分离蛋白,工艺过程简单、合理、对环境无污染(酸碱中和)、蛋白质提取率高、操作时间短、具有很高的实用价值,可为与水飞蓟蛋白质相关的研究提供高质量的样品。
【IPC分类】A23J1-14
【公开号】CN104621339
【申请号】CN201510032681
【发明人】岳静, 侯雅文, 李博望, 邱雪松
【申请人】沈阳化工大学
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2015年1月23日
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1