一种含有纳他霉素的微乳液的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及食品防腐保鲜技术领域，特别是涉及一种具有抑制霉菌的含有纳他霉素的微乳液。
【背景技术】
[0002]纳他霉素是一种高效、广谱的真菌抑制剂，其分子是一种具有活性的环状四烯化合物，含3个以上的结晶水，其外观白色(或奶油色)，为无色、无味的结晶粉末，分子式C33H47NO13，分子量为665.73。能有效地抑制酵母菌和霉菌的生长，阻止丝状真菌中黄曲霉毒素的形成。其能与细胞膜上的甾醇化合物反应，导致细胞膜结构改变，使细胞内容物渗漏和细胞死亡。
[0003]纳他霉素微溶于水、甲醇，溶于稀酸、冰醋酸及二甲苯甲酰胺，难溶于大部分有机溶齐U。在PH值高于9或低于3时，其溶解度会有所提高，在大多数食品的pH范围内非常稳定。纳他霉素作为一种天然的食品防腐剂已被批准应用于某些乳制品、肉类、水果、饮料等许多食品工业中。
[0004]微乳液具有稳定性高、增溶量大、界面张力低等特点，被广泛应用于食品、医药、日用化工等领域，应用前景十分广阔。在食品领域中，微乳技术在饮料生产、热敏性物料包埋、食品防腐等方面的应用逐渐增多，目前成为研究热点。目前微乳液的制备方法主要包括超声波乳化或者高压均质乳化等方法，在乳化和均质过程中需添加适当的表面活性剂。
[0005]柑橘黑腐病主要是由柑橘链格孢菌引起的柑橘等水果产生的病害，具有黑心型、黑腐型、蒂腐型和干疤型等类型，对柑橘类果实造成了一定的危害。目前研究人员正在研发新型安全和闻效的抑菌剂，以减少传统农药造成的残留等危害。
[0006]发明基于纳他霉素作为高效的真菌防腐剂的特点以及微乳液具有的稳定等特征，通过向纳他霉素悬浮液中添加丙二醇、食用油、吐温等表面活性剂，采用超声波乳化结合高压均质处理相结合的方式，获得了具有良好稳定性和分散性的微乳液，该乳液对链格孢引起的柑橘黑腐病病害具有较好的防治效果，克服了纳他霉素不溶解导致的分散不均等不良特点，也为柑橘黑腐病的防治提供了新的方法。
【发明内容】
[0007]1.为了克服上述现有技术的不足，本发明提供了一种(具有抑制霉菌的微乳液，该微乳液主要含有纳他霉素、色拉油、吐温20、吐温80、丙二醇和水等成分，经超声波乳化和高压均质后，解决了纳他霉素的不溶性问题，同时得到具有良好稳定性的微乳液，该乳液具有良好的抑制柑橘黑腐病致病菌链格孢菌的效果)。
[0008]2.目前，纳他霉素的应用过程中存在分散不均、溶解性不好的问题，且目前少未有将纳他霉素作为抑菌成分进行微乳化处理的研究，为了提高纳他霉素应用过程中的均匀性和应用效果，采用超声乳化和高压均质技术对含有纳他霉素、吐温、色拉油和丙二醇的溶液进行如何和均质处理，得到了稳定的微乳液。
[0009]3.与现有技术相比，本发明的有益效果是提高了纳他霉素的应用效果，获得了具有抑制链格孢的稳定性好的微乳液，在柑橘黑腐病防治上显示了良好的应用效果。
[0010]4.本发明所采用的技术方案是:
[0011](I)精确称量一定量的纳他霉素，以丙二醇为溶剂制成一定浓度的纳他霉素丙二醇溶液，
[0012](2)吸取一定的纳他霉素溶液于大试管中，添加丙二醇溶液至适量，依次添加适量的色拉油、吐温20和吐温80，并以去离子水补充至10mL,以上各步骤均充分摇动试管，使试管内溶液混合均匀，
[0013](3)将混合好的溶液置于超声波清洗器中进行超声乳化处理，采用200W功率处理几分钟，随后将乳化液置于高压均质机(ATS engineering INC)进行高压均质处理，其中压力 200_600bar，均质时间 2_8min，
[0014](4)对所得到的微乳液，采用激光粒度分布仪进行粒度分析，
[0015](5)将得到的微乳液适量滴加于链格孢生长的平板上，相比较滴加无菌水的平板，培养7天后，对比考察微乳液对链格孢菌落生长的抑制情况。
【附图说明】
[0016]图1为纳他霉素微乳液粒径分布图。
[0017]图2为100 μ L0.5% (m / v)纳他霉素微乳液抑菌效果图。
【具体实施方式】
[0018]实施例1
[0019]本实施例中微乳液的配方含有纳他霉素、丙二醇、色拉油、吐温、水等成分。首先配制0.05g / mL纳他霉素丙二醇溶液，通过移液枪、吸量管等吸取纳他霉素溶液0.1-ο.3mL,丙二醇4.7-4.9mL，色拉油l_3mL，吐温201_3mL，吐温801_3mL，置于大试管中，用漩涡振荡器l-5min，至混匀成稳定状态，然后通过边混合边逐渐少量多次加入的方法加入蒸馏水，至混合物溶液总量为100mL。然后采用超声波对混合溶液进行超声处理，处理功率200W，处理时间为3-5min,之后再通过高压均质机进行均质处理,均质压力200_600bar,均质时间2-8min，即可得均匀一致的微乳液，高压均质后，乳液的粒径明显变小，稳定性显著提高，在PDA培养基中滴加50 μ L微乳液于链格孢菌落上，空白对照滴加50 μ L蒸馏水，于28°C培养3天，滴加微乳液的菌落直径为滴加纯净水菌落直径的50 %，说明了微乳液的明显抑菌性。
[0020]实施例2
[0021]本实施例中微乳液的配方含有纳他霉素、丙二醇、色拉油、吐温、水等成分。首先配制0.05g / mn纳他霉素丙二醇溶液，吸取纳他霉素溶液4mL，丙二醇46mL，色拉油20_40mL，吐温2010-30mL，吐温8010_30mL，置于烧杯中，采用磁力搅拌器搅拌5_10min，至混合成为较为均匀的状态，之后在搅拌过程中滴加蒸馏水至总量为1000mL。然后采用超声波对混合溶液进行超声处理，处理时间为5-10min，之后再通过高压均质机进行均质处理，均质压力400-800bar，均质时间4_10min，即可得均匀一致的微乳液，高压均质后，乳液的粒径明显变小，稳定性显著提高。接种10 μ L链格孢孢子悬浮液于打孔的柑橘上，并加入50 μ L纳他霉素微乳液，对照加入50 μ L纯净水，将柑橘用薄膜包装后置于恒温培养箱培养15天。滴加微乳液的柑橘腐烂率为对照样品柑橘的40%，说明了微乳液良好的抑菌菌效果。
【主权项】
1.一种(含有纳他霉素的微乳液)，其特征在于:(微乳液含有纳他霉素、色拉油、吐温20、吐温80、丙二醇和水等成分，经超声波乳化和高压均质后，解决了纳他霉素的不溶性问题，同时得到具有良好稳定性的微乳液，该乳液具有良好的抑制柑橘黑腐病致病菌链格孢菌的效果)。
2.根据权利要求1所述的(一种含有纳他霉素的微乳液)，其特征在于: (1)一种含有纳他霉素的微乳液，该微乳液含有具有抑菌成分的纳他霉素，其含量(m / V)在 0.01-0.15%。 (2)—种含有纳他霉素的微乳液，该微乳液中还含有色拉油、吐温20、吐温80、丙二醇和无菌水等成分，其中丙二醇百分比(V / V)为4.7-4.9%，色拉油百分比(V / V)为1% _3%，吐温20百分比(V / V)为1% -3%，吐温80百分比(v / V)为1% _3%，其余为去尚子水，乳液总量为100份。 (3)一种含有纳他霉素的微乳液，该微乳液制备的具体方法如下: ①精确称量一定量的纳他霉素，以丙二醇为溶剂配制为0.01-0.05g/L的纳他霉素丙二醇溶液， ②吸取0.1-0.3mL的纳他霉素溶液于大试管中，添加丙二醇溶液至5mL，依次添加色拉油、吐温20和吐温80各l_3mL，并以去离子水补充至10mL,以上各步骤均充分摇动试管，使试管内溶液混合均匀， ③将混合好的溶液置于超声波清洗器中进行超声乳化处理，采用200W功率处理3-5min,随后将乳化液置于高压均质机(ATS engineering INC)进行高压均质处理,其中压力 200_600bar，均质时间 2_8min， ④所得微乳液一部分用于粒度分析，采用激光粒度分布仪(BT-9300H，丹东市百特仪器有限公司)进行粒度分析测定，一部分用于抑菌实验。 (4)一种含有纳他霉素的微乳液，该微乳液结合了超声波乳化和高压均质机均质两项技术，乳化和均质处理后，微乳液各成分分散均匀一致，达到稳定的状态，解决了纳他霉素不溶解的问题，且实际应用中纳他霉素用量少，成本低。 (5)一种含有纳他霉素的微乳液，该微乳液具有良好的拮抗链格孢生长的作用，配制纳他霉素百分含量(m / V)分别为0.01%、0.02%、0.05%、0.1%的微乳液，各取5(^1^滴加于链格孢生长的平板上，相比较滴加无菌水的平板，培养7天后，链格孢菌落生长明显受到抑制，抑制率分别为94 %，74 %，61 %和40 %。显示了良好的抑菌效果。
【专利摘要】本发明公开了一种含有纳他霉素的微乳液，属于食品保鲜技术领域。该乳液含有纳他霉素、色拉油、吐温20、吐温80、丙二醇和水等成分，经超声波乳化和高压均质处理后，提高了纳他霉素的溶解能力和抗菌应用效果，所得到的微乳液具有良好的稳定性，在抑制柑橘黑腐病致病菌链格孢菌方面显示了较好的应用效果。
【IPC分类】A23B7-155
【公开号】CN104770468
【申请号】CN201410016042
【发明人】蔡成岗, 蒋新龙, 陈蔚青, 刘彩琴, 张建芬, 陈虹, 柯薇
【申请人】浙江树人大学
【公开日】2015年7月15日
【申请日】2014年1月13日