虫草蚕豆的制作方法
【技术领域】
[0001] 米用冬虫夏草（Ophiocordycepssinensis)和蛹虫草（Cordycepsmilitaris)， 以蚕豆为培养基，进行双菌混合固态发酵，属于生物工程技术领域。利用菌株Cordyc印s militaris保藏号为CICC14013,菌株Ophiocordycepssinensis保藏号为CICC14088,通 过双菌混合固态发酵生产得到营养保健蚕豆。
【背景技术】
[0002] 虫草属（Cordyceps)隶属于真菌界（Fungi)、子囊菌门（Ascomycota)、子囊菌 纲（Ascomycetes)、奠壳菌亚纲（Sordariomycetidae)、肉座菌目（Hypocreales)、麦角菌 科（Clavicipitaceae)。虫草属真菌大多数是药用真菌，其中冬虫夏草（Ophiocordyceps sinensis)普遍为人们所熟知，应用历史也最为久远，而蛹虫草（Cordycepsmilitaris)的 应用研宄最为深入。
[0003] 冬虫夏草据文献考证最早记载于公元710年《月王药诊》，以药记载始见于清代吴 仪洛《本草从新》（公元1757年），认为其"甘平，保肺益肾，止血化痰，已劳咳，治膈症皆良"。 冬虫夏草为我国传统名贵中药，它与人参、鹿茸同被誉为中国中药三宝。其具有补而不峻、 温而不火、滋而不腻的药效特点，更具有阴阳同补的独特功效，使它成为滋补圣药，被医学 家誉为"百药之王"。
[0004] 蛹虫草是我国非常珍贵的中药药材之一，它的药用价值在很早就有记载，李时珍 (1518)在《本草纲目》中指出，蝉花能主治"小儿天吊惊痫，夜啼，心悸"。蛹虫草易于规模 化人工培养，其活性成分和药理作用又与冬虫夏草相似。
[0005] 当前将冬虫夏草或蛹虫草应用于粮食原料发酵已经被广泛报道。例如：专利 200610117997. 4采用蛹虫草工业化培养废弃物制成米粉产品；专利200710050135. 9将 虫草粉碎后与炒熟的草青稞混合做成保健品；专利200710166278. 6采用小麦培养蛹虫草 子实体；专利200810068734. 8采用红曲协同发酵从而提高蛹虫草子实体及虫草菌素的产 量；专利200910218363. 1公开了一种通过茯苓与蛹虫草固体共发酵提高主要药用成分的 方法；专利201110055425. 9利用固态发酵生产蛹虫草发酵米；专利201110348239. 4以莲 子为基质，进行蛹虫草或冬草夏草的固态发酵；专利201110064459. 4公开了一种蛹虫草稻 谷食品的制备方法；专利201310150267. 4和201310151228. 6分别以黄豆和花生为基质， 接种蛹虫草后进行固态发酵，但过程中需添加昆虫酶解液，导致成本和质量难以控制；专利 201210064068. 7公开了一种以灵芝、桑黄等能够高效产纤维素酶的菌子实体作为培养基主 料、粮食原料为辅料，再接种入蛹虫草、冬虫夏草、香菇、猴头菌、金针姑等菌种进行混合培 养，制成保健品或添加剂，但该工艺复杂，食药用菌子实体价格昂贵，而且经高压灭菌后破 坏了食药用菌子实体的有效成分，再经其它菌种发酵后成分复杂而不可控，各种复杂的菌 种组合也将导致最终产品质量的不稳定。
[0006] 综上所述，当前蛹虫草或冬虫夏草的固态发酵过程均会添加无机盐、昆虫水解 液或其它药用成分，以期提高虫草菌体或虫草素产量及药效。不同的添加物会导致成分 复杂及导入外来的污染源，而且不容易建立质量指标体系。另外，蛹虫草的固态发酵过 程经常将虫草素（Cordycepin)作为重要的质量指标。虫草素，也被称为3' -脱氧腺苷 (3-deoxyadenosine)，自发现以来，其药理作用不断被揭晓。经研宄人员们研宄发现，虫草 素具有免疫调节、抗肿瘤、抗白细胞、抗真菌、抗病毒等多种药理作用。有趣的是，虫草素主 要存于蛹虫草中，而在冬虫夏草中的含量极微，但虫草素的缺失并未影响冬虫夏草的显著 功效。因此，冬虫夏草和蛹虫草这两种功效相似，但成分不完全相同的菌种具有互补性。
【发明内容】
[0007] 基于当前的情况，本发明以蚕豆为培养基，在不添加任何其它添加物的情况下，仅 将蚕豆进行膨化处理，灭菌后同时接种冬虫夏草和蛹虫草进行混合培养，最终得到高虫草 素含量和高生物活性的养生保健蚕豆。该方法实施简单，质量可控，具有广阔的应用开发前 景。
[0008] 本发明所用的冬虫夏草菌株Ophiocordycepssinensis保藏号为CICC14088,蛹 虫草菌株Cordycepsmilitari保藏号为CICC14013。
[0009] 本发明的技术方案如下：
[0010] (1)部分蚕豆采用含有三个区段的双螺杆挤压膨化机进行处理。第1区段为预 热区，使用温度为40-60°C，第2区为运输区，温度为120-160°C，第3区为熟化区，温度为 140-180 °C。膨化前蚕豆的含水量为10% -20%。
[0011] (2)部份蚕豆机械粉碎至粒径为0.l-2mm。
[0012] (3)将挤压膨化的蚕豆与机械粉碎的蚕豆以一定比例混合，挤压膨化的蚕豆所占 比例为1-100%。混合后补充水分使含水量达20% -70%，121°C保温20分钟灭菌。冷却 后，接入冬虫夏草，接种量为1-10%。同时，接入蛹虫草，接种量为1-10%。起始pH和发酵 过程pH均为自然，发酵温度为15-28°C，环境相对湿度为60% -100%，发酵周期为5-25天。 最
[0013] 终虫草素的含量最高可达8. 2%。
[0014] 本发明所用的冬虫夏草和蛹虫草菌种保存用斜面培养基配方均为：葡萄糖20g/ 1，马铃薯汁200g/l，琼脂20g/l，pH自然。
[0015] 本发明的冬虫夏草和蛹虫草的种子培养基配方均为：葡萄糖20g/l，马铃薯汁 200g/l，pH自然。将斜面菌种接种到装有种子培养基的三角瓶后，种子的培养时间为96小 时，种子的培养温度为25°C。
[0016] 虫草素含量采用液相色谱法测定。测定方法详见：韦会平，叶小莉，张华英，李 学刚，钟运俊，用蛹虫草固体发酵法高效生产虫草素的研宄，中国中药杂志，1998, 33 (19)， 2159-2162。
[0017] 本发明的有益效果：通过膨化，在短时间内使蚕豆淀粉糊化和蚕豆蛋白质变性。膨 化蚕豆与机械粉碎蚕豆混合后进行发酵，一方面使得菌体可以快速利用膨化过程所产生的 营养物质，另一方面机械粉碎蚕豆相当于是固态发酵载体使发酵基质保持疏松有利菌体生 长，当菌体生长旺盛时菌体产生大量胞外酶又可以进一步分解利用机械粉碎蚕豆。该过程 无需添加其它物质，保证发酵产品的质量高度可控。冬虫夏草和蛹虫草两种性质类似菌种 的共发酵，一方面相似性质菌种的发酵产物不会改变总体的药理药学性状，另一方面可以 调和两种菌种发酵产物各自的缺陷。该方法简单可行，易于实现规模化生产，具有广泛的应 用前景。
【具体实施方式】
[0018] 实施例1
[0019] 采用济南聚贤机械设备有限公司生产的DS56-III型双螺杆挤压膨化机处理蚕豆， 所用的蚕豆为市售，经水分测定仪测定其含水率为12. 1%。设定进料速度为120kg/h。表 1列出了三个区段的温度组合及膨化度。由表1可以看出当预热区、运输区、熟化区的温度 分别为60、160、190°C时蚕豆的膨化度最高，在此温度条件下进一步往蚕豆中补充少量无 菌水或者将蚕豆进一步烘干，考察不同含水量时的膨化度。由表2可以看出，含水率为在 12-18%左右时膨化效果良好，因此可以直接用市售蚕豆进行膨化。
[0020] 表1 :挤压膨化机不同各区段不同温度组合得到膨化蚕豆的膨化度
[0021]
【主权项】
1. 本发明采用蚕豆为基质，进行冬虫夏草和蛹虫草混合固态发酵。
2. 根据权利要求1所述的混合固态发酵，其特征在于部分蚕豆需进行膨化处理。
【专利摘要】以蚕豆为培养基，采用冬虫夏草和蛹虫草进行双菌混合固态发酵，属于生物工程技术领域。本发明通过双菌生物转化得到的蚕豆，具有养生保健之功效，具有良好的应用前景。
【IPC分类】A23L1-20, A23L1-29, A01G1-04
【公开号】CN104824574
【申请号】CN201510126480
【发明人】蔡宇杰, 王小梅, 白玉, 管政兵, 廖祥儒, 张大兵
【申请人】江南大学
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年3月20日