一种提高动物免疫力的饲料添加剂的制备方法
【专利摘要】一种提高动物免疫力的饲料添加剂的制备方法，属于动物饲料添加剂制备领域。本发明以三七渣为原料，经过粉碎、超声预处理、酶解、浓缩干燥等生产得到高质量的动物饲料添加剂。本发明方法具有生产工艺连续、简单、稳定、资源综合利用率高、无有害物质排放等特点。本发明在生产过程中使用多种酶作为催化剂，通过两次酶解，大大提高了小分子活性物质的溶出率。采用本发明方法生产出的产品，可广泛应用于医药、饲料生产等行业中。
【专利说明】
一种提高动物免疫力的饲料添加剂的制备方法 一、
技术领域
[0001] 本发明属于制备动物饲料添加剂的技术领域，特别涉及一种提高动物免疫力的饲 料添加剂的制备方法。 二、 技术背景
[0002] 近年来，禽流感、蓝耳病、口蹄疫等多种动物疾病频繁爆发，动物疾病变得越来越 难治疗，直接给养殖场和养殖户造成了巨大的经济损失。要预防动物发生疾病，首先必须提 倡健康科学养殖，要先从根本上控制动物疾病的发生，就必须要从提高动物自身的免疫力 入手;要增强动物的体质，充分发挥动物机体的免疫机能，只有动物本身有足够强的病菌抵 御能力，才能有效减少疾病的发生，从而保证动物健康快速的生长。
[0003] 三七为五加科人参属植物，是我国传统名贵中药材，其根茎可以入药。三七作为一 种药食同源植物，自古以来都认为有活血化瘀，消肿定痛的功效。主要药用组分是皂苷，经 提取总皂苷后的三七渣中仍然含有淀粉、纤维素、蛋白质、氨基酸、生物碱及各种微量元素 等营养物质和药用组分，然而三七渣通常作为废弃物进行处置，极为浪费。若将其进一步开 发利用，可以变废为宝，提高资源的利用效率。
[0004] 现有制备动物饲料添加剂的方法，如2 012年10月0 3日授权公告的公告号为C N 102187939B "一种利用三七渣发酵生产保健饲料的方法"的发明专利，该专利公开的方法 是:先对三七渣进行预处理;再将其与水、氮源混合均匀，进行蒸汽灭菌处理;然后再接种霉 菌和酵母菌进行发酵;最后干燥后得到保健饲料。该方法存在的主要缺点有:①生产过程中 采用发酵工艺，产品生产周期长，操作复杂，条件苛刻;②采用霉菌和酵母菌共同组成的复 合微生物体系，不能充分水解三七渣，影响饲料营养价值;③发酵过程容易产生许多副产 物，影响产品质量。 三、
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是针对现有生产动物饲料添加剂方法的不足之处，提供一种提高动 物免疫力的饲料添加剂的制备方法，该方法具有生产工艺连续、简单、稳定、资源综合利用 率高、无有害物质排放等特点。采用本发明方法制备出的动物饲料添加剂具有性能稳定、安 全有效等特点。
[0006] 本发明的机理是:植物药中大多生物活性成分存在于细胞内，少量存在于细胞间 隙。植物细胞壁主要是由纤维素、半纤维素、果胶质等大分子组成，植物中小分子化学成分 渗透到溶液中，必须穿透植物细胞壁的障碍。利用超声振动对植物组织进行预处理，可引起 组织细胞内物质运动，由于超声的细微按摩，使细胞浆流动、细胞震荡、旋转、摩擦，从而产 生细胞按摩的作用，可以改变细胞膜的通透性，并且超声分散破坏植物组织，加速溶剂穿透 组织作用，以提高三七渣中的生物碱、氨基酸以及微量元素的溶出率。酶的催化作用能让物 质自体分解，较传统的高温连解或者低温速冻，能够更完全充分的提取活性物质。其中：漆 酶、木聚糖酶、果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶主要用于降解三七渣中的木质部分，让细胞里 面的活性物质释放更完全;淀粉酶和复合蛋白酶主要分别用于降解淀粉和蛋白质为多糖和 短肽。
[0007] 本发明的目的是这样实现的：一种动物饲料添加剂制备方法，以废弃三七渣为原 料，经过粉碎、超声预处理、酶解、浓缩干燥等生产得到。其具体的方法步骤如下：
[0008] (1)预处理
[0009] 以废弃的三七渣为原料，先将三七渣烘干至恒重，加入破碎机中，进行破碎处理； 再将破碎后的三七渣用100~150目的筛网，进行过筛处理，过筛结束后;然后再按照过筛后 的三七渣破碎粉(g):去离子水的体积(mL)之比为1:10~30的比例，在过筛后的三七渣破碎 粉中加入去离子水，在超声功率为150~200W、温度为35~45°C的条件下，进行超声波处理 10~20分钟，处理完成后收集混合液，备用。
[0010] ⑵初次酶解
[0011] 第（1)步完成后，将第（1)步收集的混合液，先用质量分数为2~6%的柠檬酸溶液 调节pH至4.5~5.5，再按照混合液的体积(mL):漆酶的质量(mg):木聚糖酶的质量(mg):果 胶酶的质量(mg):纤维素酶的质量(mg):半纤维素酶的质量(mg)之比为1:0.1~0.3:0.1~ 0.2:0.2~0.5:0.3~0.8:0.1~0.3的比例，加入到混合液中，搅拌均匀，在温度为45~55°C 的条件下，反应2~3小时。反应完成后，收集初次酶解反应混合液，备用。
[0012] ⑶再次酶解
[0013] 第(2)步完成后，将第(2)步收集的初次酶解反应混合液，先用质量分数为2~6% 的柠檬酸溶液调节pH至5.5~6.5,再按照第(2)步收集的初次酶解反应混合液的体积(mL): 淀粉酶的质量(mg):复合蛋白酶的质量(mg)之比为1:0.6~0.8:0.2~0.4的比例，加入淀粉 酶和复合蛋白酶，然后在温度为40~60°C的条件下，反应3~4小时。反应完成后，收集再次 酶解反应混合液，备用。
[0014] (4)制备浓缩液
[0015] 第(3)步完成后，将第(3)步收集的再次酶解反应混合液栗入压滤机中，控制滤膜 孔径为500~800目，进行压滤。压滤结束后，分别收集滤过液和滤渣。对于收集的滤过液，栗 入反渗透浓缩器中，在0.15~0.25MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少 至原体积的20~30%为止，分别收集反渗透透过液和反渗透截留液。对于收集的反渗透截 留液与滤渣混合后，就得到了浓缩液，用于下一步处理;对于收集的反渗透透过液，可再次 用于第（1)步预处理。
[0016] (5)喷雾干燥
[0017] 第(4)步完成后，将第(4)步得到的浓缩液栗入喷雾干燥机中，在进风温度为150~ 180°C、出风温度为90~110°C，转速为8000~12000转/分的条件下，进行喷雾干燥，收集干 燥粉末，就制备得到了动物饲料添加剂。
[0018] 本发明采用上述技术方案后，主要有以下效果：
[0019] 1、本发明制备得到的动物饲料添加剂由小分子蛋白、氨基酸、多糖或单糖组成，稳 定性好，更易于动物吸收，能有效地增强动物免疫力，提高存活率。
[0020] 2、本发明在生产过程中，使用多种类型的酶，而且还是多种酶一起同时作用，大大 提高了三七渣的降解率，能够最大限度地利用酶的同时更加完全的释放出有效物质，使产 品的效果更好。
[0021] 3、本发明在生产过程中，以提取三七皂苷后的三七废渣为原料，成本低廉且废物 利用;避免使用有毒有害溶剂，仅使用去离子水等无毒物质，且回收循环利用。
[0022] 4、本发明在生产过程中，主要使用破碎机、超声波、喷雾干燥等设备，生产设备简 单，操作简便且易于控制，因此生产安全又降低生产成本。 四、【具体实施方式】
[0023]下面结合【具体实施方式】，进一步说明本发明。
[0024] 实施例1
[0025] -种提高动物免疫力的饲料添加剂的制备方法，具体方法步骤如下：
[0026] (1)预处理
[0027]以废弃的三七渣为原料，先将三七渣烘干至恒重，加入破碎机中，进行破碎处理； 再将破碎后的三七渣用100目的筛网，进行过筛处理，过筛结束后；然后再按照过筛后的三 七渣破碎粉(g):去离子水的体积(mL)之比为1:10的比例，在过筛后的三七渣破碎粉中加入 去离子水，在超声功率为150W、温度为35°C的条件下，进行超声波处理10分钟，处理完成后 收集混合液，备用。
[0028] (2)初次酶解
[0029] 第（1)步完成后，将第（1)步收集的混合液，先用质量分数为2%的柠檬酸溶液调节 pH至4.5,再按照混合液的体积(mL):漆酶的质量(mg):木聚糖酶的质量(mg):果胶酶的质量 (mg):纤维素酶的质量(mg):半纤维素酶的质量(mg)之比为1:0.1:0.1:0.2 :0.3:0.1的比 例，加入到混合液中，搅拌均匀，在温度为45°C的条件下，反应2小时。反应完成后，收集初次 酶解反应混合液，备用。
[0030] (3)再次酶解
[0031] 第(2)步完成后，将第(2)步收集的初次酶解反应混合液，先用质量分数为2%的柠 檬酸溶液调节pH至5.5,再按照第(2)步收集的初次酶解反应混合液的体积(mL):淀粉酶的 质量(mg):复合蛋白酶的质量(mg)之比为1:0.6:0.2的比例，加入淀粉酶和复合蛋白酶，然 后在温度为40°C的条件下，反应3小时。反应完成后，收集再次酶解反应混合液，备用。
[0032] (4)制备浓缩液
[0033]第(3)步完成后，将第(3)步收集的再次酶解反应混合液栗入压滤机中，控制滤膜 孔径为500目，进行压滤。压滤结束后，分别收集滤过液和滤渣。对于收集的滤过液，栗入反 渗透浓缩器中，在〇.15MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原体积的 20%为止，分别收集反渗透透过液和反渗透截留液。对于收集的反渗透截留液与滤渣混合 后，就得到了浓缩液，用于下一步处理;对于收集的反渗透透过液，可再次用于第（1)步预处 理。
[0034] (5)喷雾干燥
[0035] 第(4)步完成后，将第(4)步得到的浓缩液栗入喷雾干燥机中，在进风温度为150 °C、出风温度为90°C，转速为8000转/分的条件下，进行喷雾干燥，收集干燥粉末，就制备得 到了动物饲料添加剂。
[0036] 实施例2
[0037] -种提高动物免疫力的饲料添加剂的制备方法，具体方法步骤如下：
[0038] (1)预处理
[0039] 以废弃的三七渣为原料，先将三七渣烘干至恒重，进行破碎处理;再将破碎后的三 七渣用120目的筛网，进行过筛处理;然后再按照过筛后的三七渣破碎粉(g):去离子水的体 积(mL)之比为1: 20的比例，在超声功率为180W、温度为40 °C的条件下，进行超声波处理15分 钟。
[0040] (2)初次酶解
[0041] 第（1)步完成后，将第（1)步收集的混合液，先用质量分数为4%的柠檬酸溶液调节 pH至5.0,再按照混合液的体积(mL):漆酶的质量(mg):木聚糖酶的质量(mg):果胶酶的质量 (mg):纤维素酶的质量(mg):半纤维素酶的质量(mg)之比为1:0.2:0.15:0.35:0.5:0.2的比 例，在温度为50°C的条件下，反应2.5小时。
[0042] (3)再次酶解
[0043]第(2)步完成后，将第(2)步收集的初次酶解反应混合液，先用质量分数为4%的柠 檬酸溶液调节pH至6.0,再按照第(2)步收集的初次酶解反应混合液的体积(mL):淀粉酶的 质量(mg):复合蛋白酶的质量(mg)之比为1:0.7:0.3的比例，然后在温度为50°C的条件下， 反应3.5小时。
[0044] (4)制备浓缩液
[0045]第(3)步完成后，将第(3)步收集的再次酶解反应混合液栗入压滤机中，控制滤膜 孔径为650目，进行压滤。分别收集滤过液和滤渣。对于收集的滤过液，栗入反渗透浓缩器 中，在0.20MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原体积的25%为止，分 别收集反渗透透过液和反渗透截留液。
[0046] (5)喷雾干燥
[0047] 第(4)步完成后，将第(4)步得到的浓缩液栗入喷雾干燥机中，在进风温度为160 °C、出风温度为100°C，转速为10000转/分的条件下，进行喷雾干燥，收集干燥粉末，就制备 得到了动物饲料添加剂。
[0048] 实施例3
[0049] -种提高动物免疫力的饲料添加剂的制备方法，具体方法步骤如下：
[0050] (1)预处理
[00511以废弃的三七渣为原料，先将三七渣烘干至恒重，进行破碎处理;再将破碎后的三 七渣用150目的筛网，进行过筛处理;然后再按照过筛后的三七渣破碎粉(g):去离子水的体 积(mL)之比为1:30的比例，在超声功率为200W、温度为45°C的条件下，进行超声波处理20分 钟。
[0052] (2)初次酶解
[0053]第（1)步完成后，将第（1)步收集的混合液，先用质量分数为6%的柠檬酸溶液调节 pH至5.5,再按照混合液的体积(mL):漆酶的质量(mg):木聚糖酶的质量(mg):果胶酶的质量 (mg):纤维素酶的质量(mg):半纤维素酶的质量(mg)之比为1:0.3:0.2:0.5 :0.8:0.3的比 例，在温度为55°C的条件下，反应3小时。
[0054] (3)再次酶解
[0055]第(2)步完成后，将第(2)步收集的初次酶解反应混合液，先用质量分数为6%的柠 檬酸溶液调节pH至6.5,再按照第(2)步收集的初次酶解反应混合液的体积(mL):淀粉酶的 质量(mg):复合蛋白酶的质量(mg)之比为1:0.8:0.4的比例，然后在温度为60°C的条件下， 反应4小时。
[0056] (4)制备浓缩液
[0057] 第(3)步完成后，将第(3)步收集的再次酶解反应混合液栗入压滤机中，控制滤膜 孔径为800目，进行压滤。分别收集滤过液和滤渣。对于收集的滤过液，栗入反渗透浓缩器 中，在0.25MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原体积的30%为止，分 别收集反渗透透过液和反渗透截留液。
[0058] (5)喷雾干燥
[0059] 第(4)步完成后，将第(4)步得到的浓缩液栗入喷雾干燥机中，在进风温度为180 °C、出风温度为110 °C，转速为12000转/分的条件下，进行喷雾干燥，收集干燥粉末，就制备 得到了动物饲料添加剂。
[0060] 以下仅以上述实施例1作试验，通过试验例来验证本发明的功效。其中，给药剂量 均以生药量计。
[0061 ] 1、对小鼠外周血T淋巴细胞数量的影响
[0062] 取昆明种小鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别为对照组、饲料添加剂高、中、低 剂量组。按组别灌胃给药(见表1)，给药体积为0.2mL/10g，每日1次，连续5天，其中空白对照 组给予生理盐水。
[0063]表1饲料添加剂对小鼠外周血T淋巴细胞数量的影响
[0065]由表可见，饲料添加剂高、中、低剂量组能明显增加小鼠外周血T淋巴细胞数量。 [0066] 2、对小鼠胸腺及脾脏重量的影响
[0067] 取小鼠40只，随机分为4组，即对照组，饲料添加剂剂高、中、低剂量组，每组10只。 按组别灌胃给药(见表2)，给药体积为0.2mL/10g，每日1次，连续5天，其中空白对照组给予 生理盐水。
[0068]表2饲料添加剂剂对小鼠胸腺及脾脏重量的影响
[0070] 注：与对照组比较，*p<0 · 001，*林p<0 · 05
[0071] 由表可见，饲料添加剂高、中、低剂量组能显著地增加胸腺及脾脏重量。
[0072] 饲料添加剂的功能主治是增强动物免疫力。以上实验结果表明饲料添加剂对模型 动物有明显的增强免疫力的作用，为临床合理应用提供了实验依据。其他实施例的动物实 验具有相当的效果，在此不重复。
[0073]最后需要说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制技术方 案，尽管
【申请人】参照较佳的实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当 理解，那些对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本技术方案的宗旨和范 围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
【主权项】
1. 一种提高动物免疫力的饲料添加剂的制备方法，其特征在于具体方法步骤如下： (1) 预处理 以废弃的三七渣为原料，先将三七渣烘干至恒重，加入破碎机中，进行破碎处理;再将 破碎后的三七渣用100~150目的筛网，进行过筛处理，过筛结束后;然后再按照过筛后的三 七渣破碎粉:去离子水的体积之比为1 g: 10~30mL的比例，在过筛后的三七渣破碎粉中加入 去离子水，在超声功率为150~200W、温度为35~45°C的条件下，进行超声波处理10~20分 钟，处理完成后收集混合液，备用； (2) 初次酶解 第（1)步完成后，将第（1)步收集的混合液，先用质量分数为2~6%的柠檬酸溶液调节 pH至4.5~5.5，再按照混合液的体积:漆酶的质量:木聚糖酶的质量:果胶酶的质量:纤维素 酶的质量：半纤维素酶的质量之比为lmL: 0 · 1~0 · 3mg: 0 · 1~0 · 2mg: 0 · 2~0 · 5mg: 0 · 3~ 0.8mg:0.1~0.3mg的比例，加入到混合液中，搅拌均勾，在温度为45~55°C的条件下，反应2 ~3小时;反应完成后，收集初次酶解反应混合液，备用； (3) 再次酶解 第(2)步完成后，将第(2)步收集的初次酶解反应混合液，先用质量分数为2~6%的柠 檬酸溶液调节pH至5.5~6.5，再按照第(2)步收集的初次酶解反应混合液的体积:淀粉酶的 质量:复合蛋白酶的质量之比为lmL: 0.6~0.8mg: 0.2~0.4mg的比例，加入淀粉酶和复合蛋 白酶，然后在温度为40~60°C的条件下，反应3~4小时；反应完成后，收集再次酶解反应混 合液，备用； (4) 制备浓缩液 第(3)步完成后，将第(3)步收集的再次酶解反应混合液栗入压滤机中，控制滤膜孔径 为500~800目，进行压滤;压滤结束后，分别收集滤过液和滤渣;对于收集的滤过液，栗入反 渗透浓缩器中，在0.15~0.25MPa下，进行反渗透浓缩，直到反渗透截留液的体积减少至原 体积的20~30%为止，分别收集反渗透透过液和反渗透截留液;对于收集的反渗透截留液 与滤渣混合后，就得到了浓缩液，用于下一步处理;对于收集的反渗透透过液，可再次用于 第（1)步预处理； (5) 喷雾干燥 第(4)步完成后，将第(4)步得到的浓缩液栗入喷雾干燥机中，在进风温度为150~180 °C、出风温度为90~110°C，转速为8000~12000转/分的条件下，进行喷雾干燥，收集干燥粉 末，就制备得到了动物饲料添加剂。
【文档编号】A23K10/37GK105831422SQ201610214781
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年4月8日
【发明人】张 杰, 何佳林, 李小琴, 田玲, 梁睿君, 聂益芳
【申请人】重庆工商大学