专利名称：快速切片法的制作方法
技术领域：
本发明公开了一种快速切片法，涉及生物及人体组织冷冻切片技术。
当今，医疗手术中病理的诊断往往借助切片来进行检验和分析。而常用的二氧化碳及半导体冰冻切片机，切片操作在室内进行。这种切片方法会使切片极易与切片刀附着，切出的片较厚且破碎，技术要求也很高，且显落后，也渐被淘汰；目前，被各大中型医院采用的低温恒冷切片机，其技术虽先进，但价格昂贵，在基层医疗单位难以承受和推广，也限制了其使用范围，不利普及。
本发明的目的在于发明一种在普通冰柜内进行快速冰冻切片的方法，这种方法操作方便，快捷，实用。
本发明包括冰柜、切片机、砝码、组织托、培养皿、手术刀、毛笔、小镊子和温度计，所述的切片法是在冰柜内冰冻切片。
所述的冰冻切片是采用202型切片机、双门冰柜，平底砝码和组织托各至少2只，培养皿至少1只。
切片前，在冰柜内放入支架，把切片机置于支架上，把组织托、砝码、手术刀、毛笔、小镊子和温度计放入冰柜内待冷。
先给切片机添加适量的润滑液，开启冰机制冷，达到-20～-25℃的切片温度即可切片。
组织取材后，在组织背面涂上一层胶水后置于组织托上，用至少1只砝码压在其上冷冻1分钟，用手术刀插入组织与砝码之间，使组织与砝码分离。
在组织周围加适量胶水或白乳胶，再用另一只粘有无水乙醇的砝码压上1分钟，使砝码与组织分开，吸干砝码及组织表面的乙醇后，即可切片，切片厚度5-7um。
因组织切片会卷曲且容易从切片上滑落，在组织切全后留少许胶水部份与组织托相连，用毛笔和小镊子把切片展开贴片。贴片后，投放甲醇液固定1分钟，进行常规快速HE(苏木素伊红)染色，然后送显微镜检验。
本发明的切片在镜下显示细胞和组织结构清晰，没有冰晶形成而留下的孔状空隙，切片质量高，可与低温恒冷切片机媲美；切片时，组织经冷冻后，水分结冰，起到包埋剂的作用，使组织变硬，有利切成薄片；把切片机放入冰柜内，使切片环境能达到低温恒冷切片机技术条件，提高了切片质量；切片时间短，整个切片过程，从取材到出片镜检只需15分钟，实用价值高，设备投资少，适于在设备不足及没有低温恒冷切片机的广大基层医疗单位推广使用。
现结合附图和实施例进行说明。
图1为快速切片操作示意图；图1-1为本发明所使用的双门冰柜主视图2为切片显微放大图一食道鳞癌向粘膜下浸润性生长的切片显微放大图，HE×200(倍，下同)；图3为切片显微放大图—胃腺癌伴幽门淋巴结转移，淋巴内可见癌栓，HE×40；图4为切片显微放大图—结节性甲状腺肿伴部份呈腺瘤样增生，HE×100；图5为切片显微放大图—结肠平滑肌肉瘤，瘤细胞呈异形性，可见核分裂，HE×400。
切片前先备好料，把需要切片的组织采集完后，备好器材200g平底砝码2只，组织托2-4只，培养皿1只，手术刀、毛笔、小镊子、低温温度计各1个；采用双门冰柜14，，202型切片机。把35cm×25cm×20cm支架置于冰柜内，把切片机放于其上。在支架两旁与双门冰柜14内壁间各放一个纸盒，以盛装修整组织时产生的碎屑。把组织托、砝码、手术刀、毛笔、小镊子等放入柜内，于切片机上添加适量的低温润滑液。开启冰柜制冷，当冰柜温度达到-20～-25℃切片温度时即可进行冰冻切片。
切片时，组织取材为1.3cm×1.3cm×0.2cm，取材后，在组织背面涂上一层胶水2后，置于组织托1上，用1只砝码压在其上，冰冻1分钟，用手术刀插入组织与砝码间，使组织与砝码分离，在组织周围加适量普通胶水或白乳胶，再用另1只粘有无水乙醇的砝码压上1分钟，就可将砝码与组织分开，用卫生纸吸干砝码及组织表面的乙醇后即可进行切片操作，切片厚度为5-7um。
如图1，切片时，组织切片3会卷曲，且易从切片刀上滑落，在组织切全后留少许胶水2部份与组织托1相连，打开切片机夹头4，把组织切片3取出，用毛笔和镊子把切片展开，粘贴固定在玻璃片上。贴片后投放甲醇液固定1分钟，进行常规快速HE(苏木素伊红)染色，染色后再把切片送显微镜检验，检验结果显示细胞及组织结构清晰，无冰晶形成而留下的孔状空隙，其切片质量可与低温恒冷切片机的切片效果相同。
图2-图5为各切片显微放大图。图中所示是采用本冷冻切片法所切出的组织切片经镜下检验所显示的结果。(因绘图与实际拍摄照片效果相差甚远，故附上原照相片与绘图作对照，以利真实比较)。各图的显示如下图2(照片2)显示食道鳞癌向粘膜下浸润性生长的病变示例，HE×200，可见食道鳞癌组织5，食道纤维结缔组织6。
图3(照片3)，显示胃腺癌伴幽门淋巴结转移，淋巴内可见癌栓，HE×40，示出了淋巴结7，淋巴结内的转移癌8。
图4(照片4)，显示结节性甲状腺肿胖部分呈腺样增生，HE×100，显出了增生的纤维结缔组织9，甲状腺滤泡10，腺瘤样增生的包膜组织11和腺瘤样增生的甲状腺组织12。
图5(照片5)，显示结肠平滑肌肉瘤，瘤细胞呈异形性，可见核分裂，HE×400，显现出肿瘤细胞核分裂13。
权利要求
1．一种快速切片法，包括切片机、冰柜、砝码、组织托、培养皿、手术刀、毛笔、小镊子和温度计，其特征在于，所述的切片法是在冰柜内冰冻切片。
2．据权利要求1所述的快速切片法，其特征在于，所述的冰冻切片选用202型切片机、双门冰柜，平底砝码和组织托各至少2只，培养皿至少1只。
3．据权利要求1所述的快速切片法，其特征在于，切片前在冰柜内放置支架，把切片机置于支架上；把组织托，砝码，手术刀，毛笔，小镊子和温度计放入冰柜内待冷。
4．据权利要求1、2或3所述的快速切片法，其特征在于，先给切片机添加适量润滑液，开启冰机制冷，达到-20～-25℃的切片温度即可切片。
5．据权利要求1所述的快速切片法，其特征在于，组织取材后，在组织背面涂上一层胶水后置于组织托上，用至少1只砝码压在其上冷冻1分钟，用手术刀插入组织与砝码之间，使组织与砝码分离。
6．据权利要求1或5所述的快速切片法，其特征在于，在组织周围加适量胶水或白乳胶，再用另一只粘有无水乙醇的砝码压上1分钟，使砝码与组织分开，吸干砝码及组织表面的乙醇后，即可切片，切片厚度5-7um。
7．据权利要求1或5所述的快速切片法，其特征在于，在组织切全后留少许胶水部分与组织托相连，用毛笔和小镊子把切片展开贴片。
全文摘要
本发明公开了一种快速切片法,涉及生物及人体组织冷冻切片技术,它是在冰柜内进行的快速冰冻切片,把切片机,砝码,组织托,培养皿等器具置于冰柜内至冰柜制冷至－20～－25℃时则可进行生物组织切片。本发明切片操作方便,快捷,实用,因冰冻后的组织切片没有冰晶形成而留下的孔状空隙,使切片质量高,本发明适于基层设备不足的医疗单位进行快速切片诊断之用。
文档编号A61B10/00GK1296803SQ0010843
公开日2001年5月30日 申请日期2000年5月23日 优先权日2000年5月23日
发明者陈广峰, 陈连红, 钱世铃 申请人:陈广峰