Vla－4抑制剂化合物的制作方法

专利名称：Vla－4抑制剂化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及选择性抑制配体与粘着受体，α4β1整联蛋白(也称作VLA-4)结合的化合物。本发明的化合物用于治疗和预防与VLA-4介导的细胞粘附有关的病变(例如炎性疾病和自身免疫性疾病)和肿瘤转移。
背景技术：
此类如炎性疾病和自身免疫性疾病的病变的主要特征是激活的白细胞在受影响组织地聚集。白细胞自循环移行到炎症部位的过程涉及一系列的相互作用，该过程分成4个主要步骤粘连和滚动、激活、牢固地粘附和移行(Springer，T.，Ann.Rev.Physiol.，57827(1995))。起初，白细胞轻轻地粘连于血管内皮上并沿着其表面滚动。其后经可溶性的趋化性刺激物介导的细胞激活，启动各白细胞和内皮细胞之间的更牢固的结合的发生。此后，这种牢固的结合引起白细胞通过内皮细胞连接的成功粘附和移行。这些步骤是连续发生的且每一步骤对于发生移行都是必需的。这也意味着移行可在每一个步骤中被调节，因而为药理学抑制作用提供许多潜在的靶子。
涉及白细胞移行的受体在很大程度上已被鉴定为属于特定的粘着分子家族(Carlos和Harlan，Blood，842068(1994))。最初的粘着和滚动步骤受称为选择蛋白的粘着受体家族的调节。牢固的粘着受白细胞表面整联蛋白与在内皮表面表达的免疫球蛋白超家族的分子的相互作用的调节。整联蛋白和免疫球蛋白-型粘着分子也主要参与白细胞的移行。移行后，白细胞依赖整联蛋白穿过细胞外基质并停留在炎症部位。
整联蛋白为由两个非共价结合的亚基，α和β组成的异二聚体糖蛋白的大家族(Hynes，R.，Cell，6911(1992))。至少有16种不同的α亚基(α1-α9、αL、αM、αD、αX、αE、αIIb、αV)和至少9种不同的β亚基(β1-β9)。根据β亚基，整联蛋白被分为若干个亚家族。白细胞表达不同的整联蛋白，包括α4β1、α5β1、α6β1、α4β7、αLβ2、αXβ2和αVβ3。
α4β1整联蛋白，也称作极迟抗原-4(VLA-4)或CD4 9d/CD29，被表达于单核细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞上，所有这些细胞在各种炎性疾病中都是重要的效应细胞(Helmer，M.，Ann.Rev.Immunol.，8365(1990))。α4β1整联蛋白作为对血管细胞粘着分子-1(VCAM-1)以及对细胞外蛋白纤连蛋白(FN)的受体起作用(Elices等，Cell，60577(1990))。在体内单克隆抗体阻断α4β1/VCAM-1途径后，已经证实抗炎作用和迟发疾病的发展(Lobb等，J.Clin.Invest.，941722-28(1994))。在肺部炎症的豚鼠模型中，抗-α4抑制抗原-诱导的支气管的过度反应性和在支气管肺泡灌洗液中的白细胞募集(Pretolani等，J.Exp.Med.，180795(1994))。对α4或VCAM-1的抗体预防小鼠气管的抗原-诱导的嗜酸性粒细胞浸润(Nakajima等，J.Exp.Med.，1791145(1994))。α4或VCAM-1的单克隆抗体治疗也延缓或防止了小鼠和猴的皮肤迟发性过敏反应(Chisholm等，Eur.J.Immunol.，23682(1993)；Silber等，J.Clin.Invest.，931554(1993)；在小鼠中的心脏同种异体移植排斥，伴有特异性的免疫抑制(Isobe等，J.Immunol.，1535810(1994)；骨髓移植后小鼠中的移植-对-宿主疾病(Yang等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，9010494(1993))；及在大鼠和小鼠中的实验的自身免疫性脑脊髓炎(Yednock等，Nature，35663(1992))；Baron等，J.Exp.Med.，17757(1993))。
合理的药物设计研究产生了可溶性的VCAM-Ig融合蛋白，这种蛋白含有与人IgG1恒定区融合的人VCAM-1的两个N-末端域。体内给予融合蛋白明显延迟非肥胖性糖尿病小鼠的过继转移的自身免疫糖尿病的发病(Jakubowski等，J.Immunol.，155938(1995))。另一种方法采用VCAM-1片段的三维晶体学结构合成环肽拮抗剂，该拮抗剂能很好地模拟α4整联蛋白与VCAM-1的结构域1的环的结合。合成的VCAM-1肽CQIDSPC能够抑制VLA-4-表达的细胞与纯化的VCAM-1的粘着(Wang等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，925714，(1995))。
另一种方法是阻断α4β1与它的其它反受体，即，含连接区段-1(CS-1)基元的纤连蛋白的可变剪接区的结合(E.A.Wayner，J.Cell.Biol.，116489(1992))。一种合成的CS-1四肽(苯基乙酸-Leu-Asp-Phe-d-Pro-酰胺)在体外抑制VLA-4-介导的淋巴细胞的粘着并减轻兔的心脏同种异体移植所加速的冠状动脉病(Molossi等，J.Clin.Invest.，952601(1995))。这些研究均提供了证据，即选择性地抑制α4β1/VCAM-1介导的粘着是治疗自身免疫和过敏性炎症疾病的得到证明的方法。
另外，虽然美国专利5821231和PCT申请WO 96/22966、WO97/03094、WO 98/04247和WO 98/04913描述了在体内结合测定法中显示VLA-4抑制活性的化合物，但都未描述显示口服给药效果的化合物。
因此，尽管有这些进展，仍然存在对VLA-4依赖性的细胞粘着的小的、非肽、特异性抑制剂的需求，所述抑制剂经口服后是可生物利用的并且适合用于对慢性炎性疾病和其它与白细胞移行和粘着有关的病变的长期治疗。发明简述
本发明的化合物选择性地抑制配体与α4β1的结合，因而用于抑制、预防和制止VLA-4介导的细胞粘附及与该粘附有关的病变，例如，炎症、哮喘、关节炎、糖尿病、自身免疫性反应、多发性硬化症、牛皮癣、移植排斥反应和肿瘤转移。
在一个实施方案中，本发明提供由式I代表的化合物或其盐，
其中W选自芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基；W1选自亚芳基、取代的亚芳基、亚杂芳基和取代的亚杂芳基；A选自＝O、＝S和＝NH；R选自一个直接键、亚链烯基和-(CH2)n-；
其中
n选自1和2；X选自-C(O)-、-CH2-和S(O)2；M选自
其中
为二价的4-、5-、6-或7-元杂环部分，
其中氮原子为与X的连接点；R1、R2和R3独立选自-H、-OH、-NH2、卤原子、烷基、取代的
烷基、芳基、取代的芳基、烷氧基、取代的烷氧基、一烷基
氨基、取代的一烷基氨基、二烷基氨基、取代的二烷基氨基、
环烷基氨基、取代的环烷基氨基、烷基磺酰基氨基、取代的
烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、取代的芳基磺酰基氨
基、芳氧基、取代的芳氧基、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、
苄氧基和取代的苄氧基，或R1、R2和R3中的两个结合在一起可形成由独立选自下列的1-3
个取代基任选取代的3-、4-、5-、6-或7-元碳环或杂环残
基-OH、卤原子、-NH2、烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、
烷基氨基、苄氧基和杂芳基；R4选自-H和低级烷基；Y为一个直接键或选自-C(O)-、-C(O)NH-、亚链烯基、亚链炔基
和-(CH2)kY2的二价基团，
其中
k选自1、2和3；和
Y2为一个直接键或选自-O-、-S-、-S(O)、-S(O)2-和-NY3-的
二价基团，
其中
Y3选自-H和低级烷基；
Z选自亚芳基、取代的亚芳基、亚杂环基、取代的亚杂
环基、亚环烷基和取代的亚环烷基；A1为一个直接键或选自亚链烯基、亚链炔基、-(CH2)t-和-O(CH2)v
的二价基团，
其中
t选自1、2和3；和
v选自0、1、2和3；和R5选自-OH、低级烷氧基、-N(H)OH、
其中
为二价的4-、5-、6-或7-元杂环部分，
其中氮原子为与X的连接点；R6和R7独立选自-H、-OH、卤原子、烷基和烷氧基；Y1为选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-和-NY4-的
二价基团，
其中
Y4选自-H和低级烷基；Z1为选自亚芳基、取代的亚芳基、亚杂环基、取代的亚杂
环基、亚环烷基和取代的亚环烷基的二价基团；A2为一个直接键或选自亚链烯基、亚链炔基和-(CH2)e的二
价基团，
其中
e选自1、2和3；和R8选自-OH、低级烷氧基、-N(H)OH、
其中L为
其中
为二价的4-、5-、6-或7-元杂环部分，任选由独立选自下列的1-3个取代基取代烷基、烷氧基、羟烷基、-OH、苄氧基、-NH2、卤原子、芳基和杂芳基，所述部分可以与1或2个另外的碳环或杂环残基稠合，所述碳环或杂环残基由独立选自下列的1-3个取代基任选取代烷基、芳氧基、烷氧基、羟烷基、-OH、苄氧基、-NH2、卤原子、芳基和杂芳基；m和q独立选自0、1、2和3；X1选自-CH＝和-N＝；R9选自-H和低级烷基；R10选自-COOH、低级烷氧基羰基、
和
和Z2选自-H、COOH和低级烷氧基羰基；和
其中R11选自-O-、
和-NR12-
其中
R12选自-H、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷
基、芳基、取代的芳基、苄基、取代的苄基、低级
链烯基、取代的低级链烯基和低级链炔基；
左手键为与-X-的连接点而右手键为与-Z3的连接点；Z3选自一个直接键、具有1-12个碳原子的二价脂族烃部分，
其中
一个或多个碳原子可以被-O-或-NR13-置换，
其中
R13选自-H和低级烷基，和
连接于脂族碳原子的一个或多个氢原子可被低级烷
基置换；和
其中x选自0和1；y选自1、2和3；和R14选自-H、-OH和卤原子，
和，当R11为-NR12，
其中
其中Z4选自
其中
R14a选自-H、-OH、低级烷基和卤原子；
和
其中
左手键为与R11的连接点而右手键为与Q2的
连接点；Q2为选自亚芳基、取代的亚芳基、亚杂环基、取代的亚杂
环基、亚环烷基、取代的亚环烷基的二价基团，
其中R15和R16独立选自-H、卤原子
和低级烷基；和
其中R17和R18独立选自-H、低级烷基、取代的低级烷基和低级链烯基；和L1选自-COOH和-COOR19
其中
R19为低级烷基。
在式I的优选实施方案中，M为
。在该实施方案中，更优选的化合物为其中A为＝O，R为-(CH2)n-和X为-C(O)-的化合物。Y优选自亚链烯基、亚链炔基、-(CH2)kY2、-CH2S(O)-和-CH2O-，更优选Y为-CH2O-。
该实施方案的优选化合物为其中W为未取代的苯基或在其邻位具有1或2个选自低级烷基和卤原子的取代基的苯基。W1优选为未取代的亚苯基或在相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的取代基的亚苯基。
在该实施方案的优选化合物中，A优选为＝O和A1为一个直接键或-(CH2)t-。更优选的化合物为其中A1为一个直接键和R5为-OH的化合物。
式I的优选化合物，其中M为
和A为＝O，列于表1中。关于-W1的表示方法，较低的键为与-NH-的连接点而较高的键为与-R-的连接点。称作--R---R5的条目描述由
表示的具体化合物的部分。
在式I的另一个优选实施方案中，M为
。在该实施方案中，更优选的化合物为其中A为＝O，R为-(CH2)n-和X为-C(O)-的化合物。Y优先选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-和-NY4，更优选为-O-。
该实施方案的优选化合物为其中W为未取代的苯基或在其邻位具有1或2个选自低级烷基和卤原子的取代基的苯基。W1优选为未取代的亚苯基或在相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的取代基的亚苯基。
在式I的该实施方案中，A优选为＝O和A2为一个直接键或-(CH2)e-。更优选的化合物为其中A2为一个直接键和R8为-OH的化合物。
其中M为
和A为＝O的式I的优选化合物列于表2中。关于-W1的表示方法，较低的键为与-NH-的连接点而较高的键为与-R-的连接点。称作--R---R8的条目描述由
表示的具体化合物的部分。
在式I的另一个优选实施方案中，M为
。在该实施方案中，更优选的化合物为其中A为＝O，R10为-CO2H和q为0或1的化合物。更优选其中R10为-CO2H和q为0或1，最优选q为0和m为2的化合物。
当A为＝O时，L优先选自
更优选，L选自
最优选，L选自
式I的优选化合物，其中R为-CH2-和X为＝O，为其中W为未取代的苯基或在其邻位具有1或2个选自低级烷基和卤原子的取代基的苯基的那些化合物。W1优选为未取代的亚苯基或在相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的取代基的亚苯基。
式I的优选化合物，其中M为
，A为＝O，R为-CH2-和X为＝O，列于表3中。关于-W1的表示方法，较低的键为与-NH-的连接点而较高的键为与-R-的连接点。称作--N---Z2的条目描述由
表示的具体化合物的部分。

式I的另一个优选的实施方案包括其中M为
的化合物。优选A为＝O，R为-CH2-和X为＝O。优选W为未取代的苯基或在其邻位具有1或2个选自低级烷基和卤原子的取代基的苯基。优选W1为未取代的亚苯基或在相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的取代基的亚苯基。
在其中Q2为
和Z3为二价脂族烃部分的化合物中，优选的化合物为其中R11为
或-NR12-，更优选为-NR12的那些化合物，其中R12选自-H、低级烷基和取代的低级烷基，最优选为二羟基低级烷基。对于Z3的优选的选择是具有4、5或6个碳原子的二价脂族烃部分。对于W1的一个优选的选择是在相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的取代基的亚苯基。
在其中Q2为
和Z3为
的化合物中，R11优选为-NR12-。在这些化合物中，x和y优选为1。对于R14的优选的选择包括-H、-OH和-F。对于W1的一个优选的选择是在相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的取代基的亚苯基。
在其中Q2为
和Z3为
的化合物中，R11优先选自-O-和-NR12-，优选其中R12选自-H和低级烷基。R17和R18优选各为-H。对于W1的一个优选的选择是在相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的取代基的亚苯基。
在其中Q2为
和Z3为
的化合物中，R11优选为-NR12-，其中R12优选为低级烷基。该实施方案的优选化合物也包括其中R17和R18中至少一个为低级烷基或取代的低级烷基的那些化合物。
在其中Q2为
和Z3为
的化合物中，R11优选为-NH-和R17和R18各优选为-H。对于W1的一个优选的选择是在相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的取代基的亚苯基。
在其中Q2选自芳基、取代的芳基和
(更优先选自苯基和在与Z3的连接点处取代的苯基)的化合物中，Z3优选为二价脂族烃部分。
本发明的另一个实施方案是由式II表示的化合物，
其中取代基W、W1、R11和Z3如在式I中所定义，而L3选自
，其中R20优先选自-H和低级烷基，
和
本发明的另一个实施方案是由式III表示的化合物，
其中取代基W、W1和R11如在式I中所定义，而d选自0和1和f选自1和2。
式I的优选化合物，其中M为
A为＝O，R为-CH2-和X为＝O，列于表4中。关于-W1的表示方法，较低的键为与-NH-的连接点而较高的键为与-R-的连接点。称作--R11---L1的条目描述由
表示的具体化合物的部分。
本发明的要点也包括在式I范围内的前药，其代表性的化合物，包括其中R5或R8为低级烷氧基的化合物，以及其中R10或R19为低级烷氧基羰基的化合物。
本发明的要点也提供抑制细胞粘附，尤其是在哺乳动物α4β1受体位点由VLA-4介导的细胞粘附的方法，其中该方法包括给予有效量的由式I表示的化合物。如本文所用的，抑制细胞粘附意欲包括抑制、制止和预防与VLA-4介导的细胞粘附有关的疾病，包括(但不限于)炎症和与细胞粘附有关的免疫和自身免疫性反应。
因此，本发明的要点也提供治疗与VLA-4介导的细胞粘附有关的疾病的方法，其中该方法包括给予需要此种治疗的哺乳动物有效量的由式I表示的化合物。这样的疾病包括(但不限于)，例如炎性和自身免疫性反应、糖尿病、哮喘、关节炎、牛皮癣、多发性硬化症、炎性肠道疾病、移植排斥反应和肿瘤转移。如本文所用的，哺乳动物的“治疗”还打算包括预防。
本发明的化合物可以作为单一疗法给予，或与抗炎药或免疫抑制剂联合给予。这样的联合疗法可包括作为单一剂型给予的多种药物，或作为在同一时间或不同时间给予的多个剂型。
可以采用任何合适的给药途径，以提供给患者有效量的本发明化合物。合适的给药途径可包括，例如，口服、直肠、鼻腔、颊、胃肠外(如静脉内、鞘内、皮下、肌内、胸骨内、肝内、损害内的(intralesional)、颅内、关节内和滑膜内)、经皮的(如贴剂)等。可优选口服剂型如片剂、糖锭剂、分散剂、悬浮液、溶液、胶囊、软明胶胶囊等，因为其给药方便。也可以采用控制或缓慢释放的方法和药物传递装置给药。此类剂型的制备方法是本领域熟知的。
掺入本发明化合物的药用组合物，除了其它治疗成分外，还可包括赋形剂、药学上可接受的载体。根据给药途径可适当地选择赋形剂如淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、润滑剂、粘合剂、着色剂、调味剂、成粒剂、崩解剂等。由于片剂和胶囊易于给药，它们代表最有利的口服单位剂型。如果需要，通过标准的水或非水技术可对片剂进行包衣。
本发明的化合物可以以衍生自无机碱或有机碱的药学上可接受的盐的形式使用。合适的药学上可接受的碱加成盐包括，但不限于，铵盐、碱金属盐、由铵、钙、锂、镁、钾、钠和锌制成的金属盐、由氯普鲁卡因、胆碱、N，N’-二苄基乙二胺、二环己胺、二乙醇胺、乙二胺、赖氨酸、葡甲胺(N-甲基葡糖胺)和普鲁卡因制成的有机盐，以及与氨基酸如精氨酸、赖氨酸等所成的盐。
当本发明化合物具有碱性部分如氨基时，所述化合物可以以药学上可接受的、非毒性的有机酸或无机酸的形式使用。这样的酸包括乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、甲磺酸、富马酸、葡糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、硝酸、扑酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对-甲苯磺酸等。特别优选的酸为柠檬酸、盐酸、马来酸、富马酸、磷酸、硫酸、酒石酸和对-甲苯磺酸。本发明化合物也可以是水合物的形式。发明详述
缩写和定义
在本公开全文中使用的下列术语和缩写具有指定的意义。293E HEK细胞 ＝293E人胚肾细胞Ac ＝乙酰基结合的抗-α4-PE ＝抑制整联蛋白α4亚基的单克隆抗体，结合
的藻红蛋白结合的抗-β1-FITC＝抑制整联蛋白β1亚基的单克隆抗体，结合
的荧光素α5β1 ＝整联蛋白α5β1，纤连蛋白受体，VLA-5αvβ3 ＝整联蛋白αvβ3，玻连蛋白受体α4β7 ＝整联蛋白α4β7Bn ＝苄基Boc ＝叔丁氧基羰基BSA ＝牛血清白蛋白c- ＝环-cDNA ＝互补DNACHO细胞 ＝中国仓鼠卵巢细胞p-ClPh ＝对-氯代苯基CMV启动子＝巨细胞病毒启动子m-CPBA ＝3-氯代过苯甲酸DAST ＝二乙基氨基三氟化硫DCM ＝二氯甲烷＝CH2Cl2DELFIA ＝解离增强的镧系元素荧光-免疫测定DIAD ＝偶氮二羧酸二异丙酯DIC ＝二异丙基碳二亚胺DIEA ＝N，N-二异丙基乙胺DMAP ＝4-N，N-二甲基氨基吡啶DMEM ＝Dulbecco’s改良Eagle’s培养基DMF ＝N，N-二甲基甲酰胺DTPA ＝二亚乙基三胺五乙酸EDC ＝1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺Et2O ＝乙醚FACS ＝荧光细胞分类术Fmoc ＝9-芴基甲氧基羰基GPIIb/IIIa＝整联蛋白αIIbβ3，纤维蛋白原受体HEPES ＝N-(2-羟乙基)哌嗪-N’-(2-乙磺酸)HMDS ＝1，1，1，3，3，3-六甲基二硅胺烷HOAc ＝乙酸HOBt ＝1-羟基苯并三唑人IgG1＝人免疫球蛋白GlICAM ＝细胞内粘着分子LDV ＝Leu-Asp-ValLFA-1和Mac-1 ＝淋巴细胞功能-相关抗原LiHMDS＝1，1，1，3，3，3-六甲基二硅胺烷锂Me＝甲基P-MeOPh ＝对-甲氧基苯基nM＝纳摩尔PBS ＝磷酸盐缓冲盐水PEG ＝聚乙二醇Ph＝苯基PhOH ＝苯酚PyBroP＝六氟磷酸溴代-三-吡咯烷基鏻RPMI培养基＝Russell Park Memorial Institute培养基TFA ＝三氟乙酸TFAA ＝三氟乙酸酐THF ＝四氢呋喃TLC ＝薄层层析TMS ＝三甲基甲硅烷基Ts ＝甲苯磺酰基VCAM-1(D1D7)＝血管细胞粘着分子(含1-7个免疫球蛋白域)VCAM-IgG融合蛋 ＝含附在IgG1分子铰链区上的人VCAM-1白的1-7个免疫球蛋白域(D1D7)的VCAM
IgG融合蛋白
“烷基”意欲包括直链或支链烃基及其1-20个碳的组合。“低级烷基”指1-约10个，优选1-约8个且最优选1-约6个碳原子的烷基。这样的基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、辛基等。
“亚烷基”指从“烷基”中除去一个氢原子所形成的二价基团。
“芳基”指由4-约16个碳原子，优选6-约12个碳原子且更优选6-约10个碳原子的芳烃环形成的基团。该环可任选被选自以下的1-3个取代基取代烷基、卤素、羟基、烷氧基、芳氧基、卤代烷基、苯基和杂芳基。芳基的实例为苯基、联苯基、3，4-二氯代苯基和萘基。
“亚芳基”指从“芳基”中除去一个氢原子所形成的二价基团。
“芳烷基”指包括连接于芳环的烷基的结构。实例包括苄基、苯乙基、4-氯苄基等。
“环烷基”指3-12个碳原子，优选3-8个碳原子的饱和烃环基。实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降冰片基、金刚烷基、桃金娘烷基(myrtanyl)等。“低级环烷基”指3-6个碳的环烷基。
“环亚烷基”意指从“环烷基”中除去一个氢原子所形成的二价基团。
“二价C1-C20脂族烃部分”包括亚烷基、亚环烷基、亚链烯基、亚链炔基及其组合。实例包括亚乙基、亚丙基、亚丙炔基、2，4-庚二烯亚基等。
“杂环基”指具有1-6个碳原子，优选3-6个碳原子和选自氧、氮和硫的1-4个杂原子的环基。实例包括吡咯基、吡啶基、吡唑基、三唑基、嘧啶基、哒嗪基、噁唑基、噻唑基、吡唑基、吲哚基、噻吩基、呋喃基、氮杂环丁烷基、四唑基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吡咯烷基、1.3-二氧戊环基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、异噁唑基、异噻唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，3-三唑基、1，3，4-噻二唑基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、哌啶基、1，4-二噻烷基、吗啉基、硫代吗啉基、吡嗪基、哌嗪基、1，3，5-三嗪基、1，2，5-三噻烷基、苯并(b)噻吩基、苯并咪唑基、喹啉基等。
“亚杂环基”意指从“杂环基”中除去一个氢原子所形成的基团。
“杂芳基”指具有1-12个碳原子、优选1-6个碳原子和选自氧、氮和硫的1-4个杂原子的芳环基；或含有选自氧、氮和硫的1-4个杂原子的二环9-或10-元杂芳环系。杂环基或杂芳基结构上的次甲基H原子可任选由烷基、烷氧基或卤素取代。实例包括咪唑基、吡啶基、吲哚基、噻吩基、苯并吡喃基、噻唑基、呋喃基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、嘧啶基、吡嗪基、四唑基、吡唑基等。
“亚杂芳基”意指从“杂芳基”中除去一个氢原子所形成的二价基团。
“烷氧基”指直链、支链或环烃的构型及其组合，包括1-20个碳原子，优选1-8个碳原子，更优选1-4个碳原子和在连接点上的一个氧原子。合适的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、环丙氧基、环己氧基等。“低级烷氧基”指具有1-4个碳原子的烷氧基。
“链烯基”指含有至少一个双键的不饱和无环烃基。“低级链烯基”指含有2-10个碳原子，优选2-8个碳原子和更优选2-6个碳原子的此类基团。合适的链烯基的实例包括丙烯基、丁烯-1-基、异丁烯基、戊烯-1-基、2-甲基丁烯-1-基、3-甲基丁烯-1-基、己烯-1-基、庚烯-1-基和辛烯-1-基等。
“亚链烯基”意指从“链烯基”中除去一个氢原子所形成的二价基团。
“链炔基”指含有至少一个三键的不饱和无环烃基。实例包括乙炔基、丙炔基等。
“亚链炔基”指从“链炔基”中除去一个氢原子所形成的二价基团。
“取代的烷基”意指其中至少一个连接于脂族碳的氢原子被下列取代基取代的直链或支链烷基例如，烷基、氨基、烷氧基、羟基、芳基、氰基、羧基、烷氧基羰基、一烷基氨基、烷氧基、氰基烷基、环烷基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、卤代烷基、酰基氨基、二烷基氨基、环氨基、卤原子和硝基。这样的取代基的实例包括甲基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氨基、甲基氨基、苯基、萘基、氯、氟等。
“取代的亚烷基”意指其中至少一个连接于脂族碳的氢原子被下列取代基取代的直链或支链亚烷基例如，烷基、氨基、烷氧基、羟基、芳基、氰基、羧基、烷氧基羰基、一烷基氨基、烷氧基、氰基烷基、环烷基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、卤代烷基、酰基氨基、二烷基氨基、环氨基、卤原子和硝基。
“取代的环烷基”意指其中至少一个连接于环碳原子的氢原子被下列取代基取代的环烷基例如，烷基、氨基、烷氧基、羟基、芳基、氰基、羧基、烷氧基羰基、一烷基氨基、烷氧基、氰基烷基、环烷基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、卤代烷基、酰基氨基、二烷基氨基、环氨基、卤原子和硝基。
“取代的亚环烷基”意指其中至少一个连接于环碳原子的氢原子被下列取代基取代的亚环烷基例如，烷基、氨基、烷氧基、羟基、芳基、氰基、羧基、烷氧基羰基、一烷基氨基、烷氧基、氰基烷基、环烷基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、卤代烷基、酰基氨基、二烷基氨基、环氨基、卤原子和硝基。
“取代的芳基”意指其中至少一个连接于芳族碳原子的次甲基氢原子被下列取代基取代的芳基例如，烷基、氨基、烷氧基、羟基、芳基、氰基、羧基、烷氧基羰基、一烷基氨基、烷氧基、氰基烷基、环烷基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、卤代烷基、酰基氨基、二烷基氨基、环氨基、卤原子和硝基。
“取代的亚芳基”意指其中至少一个连接于芳族碳原子的氢原子被下列取代基取代的亚芳基例如，烷基、氨基、烷氧基、羟基、芳基、氰基、羧基、烷氧基羰基、一烷基氨基、烷氧基、氰基烷基、环烷基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、卤代烷基、酰基氨基、二烷基氨基、环氨基、卤原子和硝基。
“取代的杂芳基”或“取代的杂环基”意指其中至少一个连接于其环的氢原子被下列取代基取代的杂芳基或杂环基例如，烷基、氨基、烷氧基、羟基、芳基、氰基、羧基、烷氧基羰基、一烷基氨基、烷氧基、氰基烷基、环烷基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、卤代烷基、酰基氨基、二烷基氨基、环氨基、卤原子和硝基。
“取代的亚杂芳基”或“取代的亚杂环基”意指其中至少一个连接于其环的氢原子被下列取代基取代的亚杂芳基或亚杂环基例如，烷基、氨基、烷氧基、羟基、芳基、氰基、羧基、烷氧基羰基、一烷基氨基、烷氧基、氰基烷基、环烷基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、卤代烷基、酰基氨基、二烷基氨基、环氨基、卤原子和硝基。
“取代的芳烷基”意指具有一个或多个下列取代基的芳烷基例如，烷基、氨基、烷氧基、羟基、芳基、氰基、羧基、烷氧基羰基、一烷基氨基、烷氧基、氰基烷基、环烷基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、羧基烷基、卤代烷基、烷氧基羰基烷基、酰基氨基、二烷基氨基、环氨基、卤原子和硝基。
“卤素”意欲包括，例如，氟、氯、溴和碘。
术语“前药”指在体内通过代谢过程转化为活性药物的化合物。[见例如，N.Boder和J.J.Kaminski，Ann.Rep.Med.Chem.22303(1987)和H.Bundgarrd，Adv.Drug Delivery Rev.，339(1989)]。本发明化合物的前药前体在本文描述的任何方法中的用途已被精心设计并包括在本发明的范围内。
本申请全文中使用涉及“保护的”、“保护”和/或“去保护”的官能团的术语。本领域技术人员应能很好地理解这些术语，它们用于对方法的文字描述中，这些方法涉及使用一系列试剂的连续的处理。由于这个原因，保护基团指在工艺步骤中用于掩蔽官能团的基团，否则该官能团在这些步骤中将会反应，而所述反应是不合需要的。保护基团在该步骤中防止反应发生，但其后可以除去，以暴露原始的官能团。在反应即其中官能团将会干扰的反应完成后可除去保护基团即“去保护”。因此，当实际上按照本发明的方法指定试剂的顺序时，普通的技术人员可容易地预想到这些将适合作为所涉及的官能团的“保护基团”的基团。
在本发明的情况下，必须保护的官能团为胺。为此目的的合适的基团在化学领域的标准教科书，如有机化学的保护基团，T.W.Greene[John Wiley & Sons，New York，1991]一书有描述，该书通过引用结合到本文中。应该特别注意标题为“氨基的保护”(309-405页)的章节。优选的保护基团包括BOC和Fmoc。这些基团的保护和去保护的示例性方法在Greene和Wuts(318-327页)中可发现。
进行本文描述的合成所用的材料称为固体载体、珠粒和树脂。这些术语意欲包括(a)珠、小丸、圆片、纤维、凝胶或颗粒如纤维素珠粒、多孔玻璃珠、硅胶、任选与二乙烯基苯交联和任选与聚乙二醇接枝的聚苯乙烯珠粒、聚丙烯酰胺珠粒、胶乳珠粒、任选与N，N’-双丙烯酰基乙二胺交联的二甲基丙烯酰胺珠粒、用疏水性聚合物包封的玻璃颗粒等，即具有刚性或半-刚性表面的物质；及(b)可溶性载体如聚乙二醇或低分子量的、非-交联的聚苯乙烯。固体载体可以(且通常)具有官能团如氨基、羟基、羧基或卤代基团，其中氨基是最常见的。
TentagelTM NH2(Rapp Polymere，Tubingen，Germany)为优选的胺官能化的聚乙二醇-接枝聚苯乙烯树脂。TentagelTM-S-PHB树脂具有一个对羟基苄基连接体，采用在二氯甲烷中的90％的三氟乙酸可以将该连接体裂解。使固体相表面官能化的技术是本领域熟知的。赖氨酸对珠粒上(增加可利用的位点数)氨基酸的附着和随后的连接体的附着以及在典型的组合合成中的其它步骤在，例如，PCT申请WO95/30642中有描述，该公开的内容通过引用结合到本文中。在WO95/30642描述的合成中，所述连接体为可光裂解的连接体，但该连接体的总的使用原则已被充分阐述。旋光异构体-非对映体-几何异构体
在此描述的一些化合物含有一个或多个不对称中心，因而可产生对映体、非对映体和其它立体异构体形式，可以按照绝对立体化学将这些形式氨基酸定义为(R)-或(S)-氨基酸或定义为(D)-或(L)-氨基酸。本发明意欲包括所有这些可能的非对映体以及它们的外消旋的和旋光纯的形式。旋光性(R)-和(S)-或(D)-和(L)-异构体可采用手性合成子或手性试剂来制备，或用常规方法拆分。当在此描述的化合物含烯烃双键或其它几何不对称性中心时，除非另外指明，则应该包括(E)-和(Z)-两种几何异构体。同样，打算包括所有的互变异构体形式。选择在此出现的任何碳-碳双键的构型仅仅为了方便而并不打算指定具体的构型；因此，在此随意描述为反式的碳-碳双键可以是顺式、反式或两种形式的任何比例的混合物。
根据上面的定义，本领域技术人员可以容易地理解在本申请全文中使用的其它化学术语。术语可以单独使用或以任何组合的形式使用。优选的和更优选链长的基团应用于所有此类组合。用途
本发明化合物显示出作为对VLA-4受体的选择性抑制剂的用途。在采用其它整联蛋白受体如β2(LFA-1和Mac-1)、β3(GPIIb/IIIa和αvβ3)和β1(α4β7)的直接结合测定和竞争性测定中，使用体外测定法测定试验化合物对C4β1受体的抑制浓度(IC50)和VLA-4的选择性。本发明的化合物具有＜1μM的Ki值。优选的本发明化合物为具有Ki值＜300nM，更优选＜100nM，甚至更优选＜50nM，最优选＜12nM的那些化合物。
具有Ki值＜50nM的优选化合物的实施例显示如下。
这些实施例的仅通过说明的方式提供，并不打算对本发明进行限制。
体外测定
采用直接结合测定法对所述化合物的抑制活性进行定量。在该测定中，将VLA-4-表达的细胞接种到96-孔微量滴定板上。使细胞生长2天直至汇合。将各种浓度的试验化合物与2nM铕标记的VCAM-IgG融合蛋白一起加入。于室温下使细胞在微孔中孵育至少30分钟。孵育后，排空各微孔并洗涤。通过时间分辨荧光测量法确定铕标记的VCAM-IgG融合蛋白结合的量。通过对各种浓度的试验化合物中的每一种，以及不含试验化合物的对照品的结合于微量滴定板的荧光定量，确定结合的抑制率。
用于该测定法中的VLA-4-表达的细胞为用人α4和β1亚基的cDNA稳定转染的CHO细胞系。细胞系的构建和维持描述于该测定方法中。含有附在IgG1分子铰链区上的人的VCAM-1的1-7个免疫球蛋白结构域(D1D7)的VCAM IgG融合蛋白用铕螯合物进行标记。融合蛋白的制备和标记在该测定方法中描述。
通过阻断Jurkat细胞对D1D7-VCAM IgG融合蛋白的粘附来测定试验化合物的细胞粘附抑制活性。Jurkat细胞为在细胞表面表达VLA-4的人淋巴细胞系。在该测定中，用75ng VCAM IgG融合蛋白包被96-孔微量滴定板中的每一孔。然后通过加入1％牛血清白蛋白除去非特异性粘着位点来封闭各孔。同时加入不同浓度的试验化合物和钙标记的Jurkat细胞。于室温下，在黑暗中使细胞粘着于VCAM包被的各孔1小时。孵育后，通过将微量滴定板的表面浸没在盛有磷酸盐缓冲盐水的容器中洗涤该板。用纸巾吸干各孔。经荧光测定确定粘附的细胞数量。降低的荧光表示细胞的粘附受到试验化合物的抑制。
对每种试验化合物在其它整联蛋白受体，即β2(LFA-1和Mac-1)、β3(GPIIb/IIIa和αvβ3)、β1(α5β1)和β7(α4β7)中的对α4β1的特异性进行检测。LFA-1与ICAM-1结合并介导白细胞移行进入炎症部位。Mac-1结合许多配体，包括ICAM-1和纤维蛋白原，并在中性粒细胞的吞噬作用和氧自由基的生成方面起重要作用。血小板表面的GPIIb/IIIa与血浆中的纤维蛋白原结合并诱导血小板聚集。αvβ3结合许多细胞外基质的蛋白，包括玻连蛋白，并介导细胞移行和防止细胞编程性死亡。α4β7分享相同的配体如VLA-4(VCAM-1、MAdCAM-1和纤连蛋白)，但具有不同的优先选择。这种受体被表达在淋巴样细胞上并参与淋巴细胞向粘膜组织的移行。
LFA-1、Mac-1、GPIIb/IIIa和αvβ3的测定涉及纯化的受体对96-孔微量滴定板的包被。这些受体的特异性配体用铕螯合物标记。在LFA-1和Mac-1的测定中，使用含有附在IgG1分子铰链区上的人ICAM-1的1-5个免疫球蛋白结构域(D1D5)的ICAM-1IgG融合蛋白。在GPIIb/IIIa和αvβ3的测定中，分别使用铕-标记的纤维蛋白原和玻连蛋白。在铕-标记的配体存在下，使纯化的受体在孔中与各种浓度的试验化合物一起孵育。孵育后，排空各孔并洗涤。通过时间分辨荧光测量法确定铕标记的配体结合的量。α4β7的测定类似于上述的VLA-4的粘附抑制测定，并使用α4β7-表达的细胞，RPMI-8886。含有人MAdCAM-1的1和2个免疫球蛋白结构域和粘蛋白-样重复域的MAdCAM-1 IgG融合蛋白被用作相应于α4β7的配体。
结合于CHO/VLA-4细胞的Eu3+-VCAM-1 IgG可如下测定。以3×104个/孔的浓度，将4B4细胞(CHO/VLA-4细胞)分配于96-孔微量滴定板的各孔中。将该微量滴定板于37℃，5％二氧化碳下孵育48小时，然后用洗涤缓冲液洗涤两次，再吸干。将用测定缓冲液(2％DMSO终浓度)稀释的50μl抑制剂溶液加入各孔中，接着加入用测定缓冲液稀释至2nM的50μl Eu3+-VCAM-1 IgG。于室温下孵育该板至少30分钟。每孔再用洗涤缓冲液洗涤4次并吸干。将100μl DELFIA增强溶液(Enhancement solution)加入各孔中，接着于室温下搅动该板5分钟。然后测量(如DELFIA荧光计1234，Wallace，Inc.，USA)每个样品的荧光。在该测定中，洗涤缓冲液含有25mM HEPES(pH 7.5)、150mM氯化钠、1mM氯化钙、1mM氯化镁和4mM氯化锰；测定缓冲液含有25mM HEPES(pH 7.5)、150mM氯化钠、1mM氯化钙、1mM氯化镁、4mM氯化锰、1％BSA和20μM DTPA。体内测定
VLA-4抑制剂可以在体内测定中进一步鉴定。一个这样的测定检查在小鼠(鼠的)模型中对嗜酸性粒细胞浸润到支气管肺泡灌洗液中的抑制作用。在该测定中，在第0天用环磷酰胺处理动物。在第2天和第14天，用猪蛔虫(Ascaris suum)提取物对动物腹膜内免疫接种。7天后，用各种剂量的VLA-4抑制剂处理动物。给药后不久，通过将猪蛔虫提取物滴注到气管中来攻击动物。48小时后，通过滴注生理盐水到肺对动物进行支气管肺泡的灌洗。测定灌洗液中的总细胞和嗜酸性粒细胞的计数。
在蛔虫诱导的支气管炎症的鼠模型中，一个代表性的化合物(实施例号32)在口服剂量30mg/kg时，抑制嗜酸性粒细胞浸润达49％。相对比，一个先有技术的代表性化合物，4-(N’-2-甲基苯基脲)苯基乙酰基-LDVP-OH(描述于WO 97/03094)，在口服剂量50mg/kg时，并不抑制嗜酸性粒细胞浸润(％抑制＝-2％)。
其它代表性的化合物也在鼠中进行了试验。代表性化合物(此后，所有的试验化合物用在合成实施例中提供的化合物编号表示)的剂量、给药途径和抑制效果示于表5中。
表51一天两次(0和8小时)2一天三次(0、8和16小时)
本发明化合物也可在其它的体内测定，如在大鼠中测试的嗜酸性粒细胞聚集模型中，进行进一步的特征鉴定。将50μg的化合物48/80注射到雄性Sprague Dawley大鼠的胸膜腔中。24小时后，用含有0.2％EDTA的Hank’s平衡盐水溶液洗涤各大鼠胸腔两次。测定总细胞和嗜酸性粒细胞的计数。静脉内、口服或皮下给予(b.i.d.，于0小时和8小时)试验化合物。试验化合物的剂量、给药途径和抑制效果示于表6中。
表6小鼠生物-测定法
将化合物以1mg/ml的浓度溶于或悬浮于适宜的溶剂中。口服给予雌性Balb/c小鼠(7-9周龄)该化合物。15分钟后，从麻醉小鼠的后腔静脉收集血样。制备血清并在-20℃贮存。经直接结合测定法，采用VLA-4表达的细胞和VCAM-IgG融合蛋白，从稀释血清的抑制活性测定化合物的血清浓度。采用这种方法测定的血清浓度与通过LC/MS/MS方法测定的浓度密切相关。试验化合物的剂量、给药途径和产生的抑制效果示于表7中。
表7药物动力学评价
在小鼠、大鼠和猴模型中的示例性化合物的药物动力学的参数示于表8、9和10中。
表81在血浆浓度(经LC/MS/MS方法测定)对时间曲线下的总面积2平均残留时间3表观的血浆清除率
表91在血浆浓度(经LC/MS/MS方法测定)对时间曲线下的总面积2平均残留时间3表观的血浆清除率
在猴模型中，单次静脉剂量(2mg/kg)的代表性化合物和ATENOLOL{4-[2’-羟基-3’-异丙基氨基)丙氧基]苯基乙酰胺；SigmaChemical Co.，代码号A-7655}的药物动力学参数和血清浓度的时间过程概括于表10和11中。
表101在血浆浓度(经LC/MS/MS方法测定)对时间曲线下的总面积2表观的血浆清除率
表111经LC/MS/MS方法测定VCAM-1对VLA-4表达细胞的结合测定
VCAM IgG融合蛋白的制备
在结合测定中，使用含有连接人IgG1的铰链(H)、CH2和CH3区的VCAM-1的1-7个免疫球蛋白结构域(D1D7)的VCAM IgG融合蛋白。
表达D1D7-VCAM IgG融合蛋白的稳定细胞系的构建
在CMV启动子的转录控制下，将一种基于Epstein-Barr病毒的、含D1D7-VCAM IgG融合基因的游离型质粒转染到293E人胚肾细胞中。用在含10％胎牛血清的DMEM中的250μg/ml潮霉素选择稳定转染的细胞。该细胞将D1D7 VCAM IgG融合蛋白分泌到培养基中，其过程累计最多可达9天。
D1D7 VCAM IgG融合蛋白的纯化
使细胞在含有10％胎牛血清的DMEM中培养2天，然后改变为CCM5培养基并再培养10天。将该培养物离心、过滤，然后与蛋白A琼脂糖4孵育过夜。充分洗涤蛋白A琼脂糖，用100mM柠檬酸(pH3)洗脱结合的D1D7 VCAM IgG融合蛋白。
铕标记的-D1D7 VCAM IgG融合蛋白的制备
将D1D7-VCAM IgG融合蛋白(1mg/ml)对50mM碳酸氢钠、0.9％氯化钠(pH 8.5)进行透析。将该融合蛋白加入一个铕标记的试剂(DELFIA标记的试剂盒，得自Wallac，Gaithersberg，MD；目录号1244-302)的管形瓶中并于室温下暗处孵育过夜。用琼脂糖G10柱纯化标记的蛋白，并测定铕含量和蛋白浓度。于-80℃贮存该蛋白直至使用。
表达VLA-4(CHO/VLA-4)的细胞系的构建
在结合测试中采用用α4和β1的cDNA稳定转染的CHO细胞系。人α4的基因得自American Type Culture Collection，并在哺乳动物的表达载体pCI-neo(Promega，Madison，WI)的Xhol和Xba位点之间再克隆。β1基因则通过得自人外周白细胞cDNA的PCR扩增并经基因工程改造，以使起始密码子置于共有Kozak序列的前后序列(context)中。将该基因再克隆到CMV启动子和嵌合内含子的pCI-neo下游中。
用编码α4和β1基因的质粒对CHO-K1细胞进行稳定的共转染，通过荧光细胞分类术(FACS)选择表达高水平的VLA-4的单一细胞。用于FACS分析的抗体有抗-α4-PE缀合抗体(PharMingen，San Diego，CA)和抗-β1-FITC缀合抗体(Biosource，Camarillo，CA)。表达400,000和300,000位点/细胞的α4和β1亚基的细胞系4B4分别用于结合测定中。通过FACS分析，采用Quantum Simply Cellular微珠(Flow CytometryStandards Corporation，Puerto Rico)作为标准品，测定亚基数。在含有10％胎牛血清、10mM HEPES，pH7.5、0.5mg/ml G418的F12培养基中，采用每周1∶48传代维持细胞。结合测定
将CHO/VLA-4细胞以30,000细胞/孔的浓度接种于96-孔微量滴定板中，并于37℃，5％二氧化碳下孵育48小时直至融合。在测定的当天，排空各孔，用含有25mM HEPES(pH 7.5)、150mM氯化钠、1mM氯化镁、1mM氯化钙、2mM氯化锰的350μl洗涤缓冲液洗涤两次。然后排空板，用纸巾吸干以除去缓冲液。
在2nM铕标记的D1D7-VCAM IgG融合蛋白的存在下，用测定缓冲液(加有0.1％牛血清白蛋白、20μM DTPA和1％二甲基亚砜的洗涤缓冲液)系列稀释试验化合物。所用的终浓度范围为0.1nM-10μM。将50μl的试验化合物的混合物的等份液一式两份加入微量滴定板的孔中。用于总结合的对照孔不接受试验化合物。非-特异性结合的孔含有抗-α4单克隆抗体(L25.3，Becton Dickinson，Bedford，MA)。
可以使细胞在铕标记的D1D7-VCAM IgG融合蛋白的存在下，与试验化合物的混合物一起在室温下孵育至少30分钟。然后用350μl洗涤缓冲液，采用Skatron板洗涤器洗涤细胞3次并吸干。将100μl等份的DELFIA增强溶液加入各孔中，接着于室温下轻轻搅动10分钟。通过时间分辨荧光测量法(型号VictorTM，Wallac，Inc.，Gaithersberg，MD)确定铕标记的VCAM-IgG融合蛋白结合的量。
如下式计算结合百分率[(FT-FNS)-(FI-FNS)]/(FT-FNS)×100，其中FT和FNS分别为在缺乏试验化合物和含有抗-α4单克隆抗体的情况下，铕标记的D1D7-VCAM IgG融合蛋白结合于细胞的荧光信号。FI为含有试验化合物的孔中的荧光。通过曲线拟合常规方法，PRIZM(GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA)测定IC50(抑制50％VACM结合于CHO/VLA-4细胞的抑制剂浓度)。VLA-4表达的细胞对VCAM-1的粘附
这种次级功能测定法用于测定试验化合物在抑制VLA-4介导的细胞粘着中的效力。
VCAM包被板的制备
将50μl等份的D1D7-VCAM IgG融合蛋白(1.5μl/ml在磷酸缓冲盐水中，PBS)加入96-孔Costar平底板(Costar，Franklin，Lakes，NJ，目录号2580)的各孔中。然后将该板于4℃孵育过夜。在测定的当天，排空各孔，用350μl PBS洗涤两次。然后于室温下用100μl的1％牛血清白蛋白(BSA，Sigma，目录号A9418)在PBS中封闭该板至少1小时。
细胞制备
从American Type Cultured Collection获得Jurkat细胞(克隆E6-1)，并采用每周1∶64传代，维持在RPMI培养基、10mM HEPES(pH 7.5)、1mM丙酮酸钠、10％FCS中。在临进行测试前，于室温下，在暗处用5μM钙黄绿素-AM(Molecular Probe，Eugene，OR，目录号C1430)在RPMI培养基中标记Jurkat细胞30分钟。标记后，用RPMI培养基洗涤洗涤细胞两次并以1×106个细胞/ml的浓度再悬浮。
细胞粘着测定
在临测定前，从VCAM包被板中排空BSA溶液。然后用RPMI培养基洗涤该板两次。将100μl等份的标记的Jurkat细胞加入各孔中，接着加入50μl的抑制剂溶液。最终的抑制剂浓度为1nM-10μM，每种浓度重复测试3次。使抑制剂和细胞于室温下、在暗处孵育1小时。孵育后，将该板小心地浸没在装有PBS的容器中然后在PBS中使板翻转面朝下。排干各孔并用一层纸巾吸干。将50μl等份的0.1％TritonX-100加入各孔中。在暗处孵育该板10分钟。在Millipore Cytofluor 2300System板读出仪(设定在485nM处激发和在530nM处发射)上对Jurkat细胞的粘着进行定量。通过曲线拟合常规方法，PRIZM(GraphPadSoftware，Inc.，San Diego，CA)测定IC50(抑制50％Jurkat细胞粘着的抑制剂浓度)。合成方法
技术领域：
本发明化合物可以通过标准化学合成方法，以及组合的化学方法，如在公开的PCT申请，WO 95/30642中所述的方法制备。合成实施例
通过下列实施例说明一般的合成方法。这些特定的实施方案仅作为说明的方式提出，并不打算限制本发明。对任何给定的原料或工艺步骤的修饰和变化对本领域技术人员而言将是显而易见的。除非另外指明，用于某些实施例的固相载体为TentagelTM-S-PHB树脂。该树脂具有对-羟基苄基连接体，它可通过采用在二氯甲烷中的90％三氟乙酸而被裂解。该树脂的载荷在0.27-0.30mmol/g之间变化，且不是双重载荷的。实施例1
将200ml THF和NaH(1.5g，62.9mmol)装入一500ml的3-颈园底烧瓶中。用15分钟将1-乙烯基-2-吡咯烷酮(6.9g，62.9mmol)和3-碘代苯甲酸甲酯(15.0g，57.3mmol)的THF(100ml)溶液滴加到该烧瓶中。加入完毕后，将该反应混合物加热至回流1小时。使反应容器冷却至室温，然后小心加入6N HCl(100ml)。真空浓缩该反应物以除去THF，再加入另一等份的6N HCl(100ml)，将该反应物回流14小时。通过加入碳酸氢钠直至pH为9来猝灭反应物，然后用乙酸乙酯提取该混合物3次。经硫酸镁干燥合并的有机物，真空浓缩得到一黄色油。
然后将该油置于甲醇(100ml)中冷却至-78℃。然后滴加硼氢化钠(3.5g，96.5)，用2小时使该反应物温热至室温。通过加入6N HCl直至呈酸性来猝灭反应物，然后通过加入40％氢氧化钠水溶液使呈碱性。用二氯甲烷提取该溶液3次，经硫酸镁干燥合并的有机物，然后真空浓缩得到11.4g黄色油。
通过将上面的胺置于50％二氧六环∶水(100ml)中并加入碳酸钾直至呈碱性来对该胺进行Boc-保护。向该溶液中加入Boc-酐(9.1g，41mmol)，然后于室温下搅拌14小时。通过加入1N HCl直至呈酸性来猝灭反应物。用乙酸乙酯提取该该溶液3次，经硫酸镁干燥并真空浓缩得到一粘的黄色油。将该油层析(25％EtOAc己烷)得到7.0g A。
将氯化氢(气体)鼓泡通入在100ml甲醇中的15.8g(73.5mmol)的2-溴代苯基乙酸中10分钟。使生成的溶液分配于100ml水和100ml二氯甲烷之间。经硫酸镁干燥有机层，减压除去溶剂，得到16.8g(73.5mmol)的2-溴代苯基乙酸甲酯，在氩气氛下，将其与9.0g(80.8mmol)的1-乙烯基-2-吡咯烷酮和100ml无水THF在一个250ml园底烧瓶中混合。
向该烧瓶中加入3.5g(147mmol)氢化钠(95％)，于室温下搅拌该溶液10分钟。加上回流冷凝器，将该混合物加热至回流1小时。将该溶液冷却至室温，减压除去溶剂。将30ml盐酸水溶液和50ml水加入生成的混合物中并在无冷凝器的情况下加热至回流，直至该溶液温度达到96℃，此时加上冷凝器，使该溶液回流16小时。将该溶液冷却至室温，用150ml 40％氢氧化钠水溶液使呈碱性，用3×125ml二氯甲烷提取，用饱和氯化钠水溶液洗涤合并的有机层，经硫酸镁干燥，减压除去溶剂，得到15.0g(63.0mmol，86％)的2-(2-溴代苄基)-1-pyrolline。
用15分钟向15g(63mmol)的2-(2-溴代苄基)-1-pyrolline在冷却至-78℃的80∶20甲醇∶乙酸水溶液中的溶液中分次加入5.3g(140.0mmol)硼氢化钠。将该混合物搅拌1小时，温热至室温，此时减压除去溶剂，加入150ml水，用氢氧化钠水溶液使其呈碱性，将其用10×100ml二氯甲烷提取，得到乳液。用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤合并的有机层，经硫酸镁干燥并真空除去溶剂，得到14.6g(60.8mmol，97％)苄基脯氨酸。
向14.6g(60.8mmol)苄基脯氨酸的70ml饱和碳酸氢钠水溶液和70ml二氧六环的溶液中加入15.1g(67.0mmol)二碳酸二叔丁酯，于室温下搅拌该混合物16小时。然后使该溶液分配于200ml盐酸水溶液和200ml乙酸乙酯之间。用200ml饱和氯化钠水溶液洗涤乙酸乙酯层，经硫酸镁干燥并减压除去溶剂，得到残留物，经快速柱层析(20％-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到11.5g(33.8mol，56％)纯净的A’。
将A(1.88g，5.0mmol)置于一个100ml园底烧瓶内并溶于DMF(50ml)中。向该溶液中加入乙酸钯(23mg，0.3mmol)、P(o-Tol)3(12mg，0.3mmol)、丙烯酸甲酯(0.47g，5.5mmol)和乙酸钠(0.5g，5.5mmol)。然后将该混合物加热至80℃14小时。再使该反应混合物冷却至室温，加入1N HCl(100ml)。然后用乙酸乙酯提取该溶液3次，经硫酸镁干燥，随后真空浓缩得到一棕色油。层析该油，用25％乙酸乙酯∶己烷洗脱，得到1.32g烯烃酯，为无色粘性的油。
然后使该烯烃酯(1.32g，4.1mmol)经受氢化作用。将该烯烃置于Parr氢化瓶中，在惰性气氛下加入乙酸乙酯(10ml)和10％Pd/C(100mg)。然后用45psi氢气对该瓶加压，于室温下振摇4小时。再通过硅藻土过滤该溶液，真空浓缩得到1.29g烷烃酯。
使该链烃酯(1.29g，4.0mmol)溶于THF(30ml)、甲醇(20ml)和水(10ml)中并用氢氧化锂(200mg，8.0mmol)皂化。于室温下搅拌该反应物3小时，然后倾入1N HCl(50ml)中。再用乙酸乙酯提取该溶液3次，经硫酸镁干燥并真空浓缩得到1.02g链烷酸，为黄色固体。
通过加入25％TFA/二氯甲烷溶液并于室温下搅拌2小时使该链烷酸(1.02g，3.3mmol)去保护。然后真空浓缩得到的混合物，通过使去保护的酸溶于50％二氧六环/水中，加入碳酸钾(1.2g)和Fmoc-Cl(1.08g，4.0mmol)来立即加以保护。于室温下搅拌该混合物14小时，然后倾入1N HCl(100ml)中。再用乙酸乙酯提取该溶液3次，经硫酸镁干燥并真空浓缩得到495mg的1，为白色结晶固体。
将干燥的树脂(500mg，0.14mmol)置于一个小的振摇容器中。然后将9ml DMF(2mg，0.42mmol)、DIC(102mg，0.84mmol)和DMAP(17mg，0.14mmol)加入该容器中。随后于室温下将容器振摇16小时。抽干内容物，用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤树脂3次。通过将10ml 50％哌啶/DMF加入到振摇容器中并于室温下振摇2小时除去Fmoc基团。用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤得到的胺树脂3次。
向上面的树脂中加入9ml DMF、4-[N’-(o-甲苯基脲)]-苯基乙酸(132mg，0.42mmol)、PyBroP(196mg，0.42mmol)和DIEA(107mg，0.84mmol)。于室温下将该内容物振摇14小时，然后抽干，用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤树脂3次。再从树脂上裂解该化合物，收集滤液，然后真空浓缩。通过将该油溶于甲醇中研磨得到的油，缓慢加入乙醚直至沉淀形成。收集沉淀物，真空干燥得到67mg 1’，为白色结晶固体。实施例2
将A(4.2g，11.3mmol)置于一个100ml园底烧瓶内并溶于NEt3(50ml)中。向该溶液中加入Pd(PPh3)2Cl2(0.16g，0.23mmol)、CuI(21mg，0.12mmol)和三甲基甲硅烷基乙炔(1.38g，13.5mmol)。于室温下搅拌该混合物14小时。通过加入1N HCl(100ml)猝灭反应混合物。然后用乙酸乙酯提取该溶液3次，经硫酸镁干燥，然后真空浓缩得到一黄色油。层析该油，用15％乙酸乙酯∶己烷洗脱，得到3.8g 2，为无色粘性的油。
于0℃，通过将硼烷-THF(12.0ml，12mmol)加入环己烯(2.3ml)的6ml无水THF溶液中生成二环己基硼烷的溶液。于0℃搅拌该溶液另外1小时。然后于0℃用15分钟滴加乙炔(2)(2.0g，5.84mmol)，然后用1小时使其温热至室温。再用MeOH(20ml)稀释该反应混合物，然后冷却至0℃。接着滴加2N氢氧化钠(6ml)和30％H2O2(3.5ml)。再于0℃搅拌反应混合物1小时，然后温热至40℃2.5小时。使该混合物冷却至室温，加入另外6ml的2N氢氧化钠。真空除去有机物，用乙醚提取剩下的水溶液3次，弃去有机物。用1N HCl酸化含水提取物，用乙酸乙酯提取，经硫酸镁干燥，然后真空浓缩得到1.7g苯基乙酸，为褐色结晶固体。
通过加入25％TFA/二氯甲烷溶液并于室温下搅拌2小时使所述酸(1.7g，5.6mmol)去保护。然后真空浓缩得到的混合物，通过使去保护的酸溶于50％二氧六环/水中，加入碳酸钾(15g)和Fmoc-Cl(1.4g，5.5mmol)立即加以保护。于室温下搅拌该混合物14小时，然后倾入1NHCl(100ml)中。再用乙酸乙酯提取该溶液3次，经硫酸镁干燥，然后真空浓缩得到1.7g的3，为白色结晶固体。
将干燥的树脂(500mg，0.14mmol)置于一个小的振摇容器中。然后将9ml DMF、3(180mg，0.42mmol)、DIC(102mg，0.84mmol)和DMAP(17mg，0.14mmol)加入该容器中。随后于室温下将容器振摇16小时。抽干内容物，用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤树脂3次。通过将10ml 50％哌啶/DMF加入到振摇容器中并于室温下振摇2小时除去Fmoc基团。用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤得到的胺树脂3次。
向上面的树脂中加入9ml DMF、4-[N’-(o-甲苯基脲)]-苯基乙酸(132mg，0.42mmol)、PyBroP(196mg，0.42mmol)和DIEA(107mg，0.84mmol)。于室温下将该内容物振摇14小时，然后抽干，用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤3次。再从树脂上裂解该化合物，收集滤液，然后真空浓缩。通过将该油溶于甲醇中研磨得到的油，缓慢加入乙醚直至沉淀形成。收集沉淀物并真空干燥得到52mg 3’，为白色结晶物质。实施例3
通过将2(0.75g，2.1mmol)置于甲醇(25ml)中并加入到这种氢氧化钾(1.4g)溶液中使乙炔(2)去保护。于室温下搅拌生成的溶液1小时。然后真空浓缩反应混合物，用1N HCl酸化。用乙酸乙酯提取生成的水溶液3次，经硫酸镁干燥合并的有机物，再真空浓缩得到0.56g去保护的乙炔，为棕色油。
将去保护的乙炔(0.56g，2.0mmol)加入THF(50ml)中并冷却至-78℃。然后滴加LiHMDS(1M溶液，4.7ml)，搅拌该反应物30分钟。再将二氧化碳气体鼓泡通入反应混合物中15分钟，将该反应物倾入二氧化碳固体上。通过加入1N HCl(100ml)猝灭该反应物，用乙酸乙酯提取该水溶液3次，经硫酸镁干燥合并的有机物，然后真空浓缩得到丙酸(0.71g)，为白色固体。
通过加入25％TFA/二氯甲烷溶液并于室温下搅拌2小时使链烷酸(0.71g)去保护。然后真空浓缩得到的混合物，通过使去保护的酸溶于50％二氧六环/水中，加入碳酸钾(15g)和Fmoc-Cl(1.29g，4.9mmol)立即加以保护。于室温下搅拌该混合物14小时，然后倾入1N HCl(100ml)中。再用乙酸乙酯提取该溶液3次，经硫酸镁干燥，然后真空浓缩得到4，为棕色油。然后层析该油，用5％甲醇∶二氯甲烷洗脱，得到110mg所需的化合物。
将干燥的树脂(500mg，0.14mmol)置于一个小的振摇容器中。然后将9ml DMF、4(184mg，0.42mmol)、DIC(102mg，0.84mmol)和DMAP(17mg，0.14mmol)加入该容器中。随后于室温下将容器振摇16小时。抽干内容物，用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤树脂3次。通过将10ml 50％哌啶/DMF加入到振摇容器中并于室温下振摇2小时除去Fmoc基团。用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤得到的胺树脂3次。
向上面的树脂中加入9ml DMF、4-[N’-(o-甲苯基脲)]-苯基乙酸(132mg，0.42mmol)、PyBroP(196mg，0.42mmol)和DIEA(107mg，0.84mmol)。于室温下将该内容物振摇14小时，然后抽干，用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤3次。再从树脂上裂解该化合物，收集滤液，然后真空浓缩。通过将该油溶于甲醇中研磨得到的油，缓慢加入乙醚直至沉淀形成。收集沉淀物并真空干燥得到27mg 4’，为白色结晶物质。实施例4
将碘化物(A)(0.5g，1.3mmol)置于THF(20ml)中，冷却至-78℃。滴加丁基锂(2.21ml，1.6M溶液)，然后移去冷浴，鼓泡通入气态二氧化碳10分钟。将该反应混合物倾入干冰中，加入1M HCl(100ml)。用乙酸乙酯提取该混合物3次，经硫酸镁干燥合并的有机物，然后真空浓缩得到0.32g苯甲酸，为白色结晶固体。
通过加入25％TFA/二氯甲烷溶液并于室温下搅拌2小时使该苯甲酸(0.32g，1.68mmol)去保护。然后真空浓缩得到的混合物，通过使去保护的酸溶于50％二氧六环/水中，加入碳酸钾(15g)和Fmoc-Cl(0.44g，1.67mmol)立即加以保护。于室温下搅拌该混合物14小时，然后倾入1N HCl(100ml)中。再用乙酸乙酯提取该溶液3次，经硫酸镁干燥，然后真空浓缩得到0.38g 5，为白色结晶固体。
将干燥的树脂(500mg，0.14mmol)置于一个小的振摇容器中。然后将9ml DMF、5(173mg，0.42mmol)、DIC(102mg，0.84mmol)和DMAP(17mg，0.14mmol)加入该容器中。随后于室温下将容器振摇16小时。抽干内容物，用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤树脂3次。通过将10ml 50％哌啶/DMF加入到振摇容器中并于室温下振摇2小时除去Fmoc基团。用DME、甲醇和二氯甲烷洗涤得到的胺树脂3次。
向上面的树脂中加入9ml DMF、4-[N’-(o-甲苯基脲)]-苯基乙酸(132mg，0.42mmol)、PyBroP(196mg，0.42mmol)和DIEA(107mg，0.84mmol)。于室温下将该内容物振摇14小时，然后抽干，用DMF、甲醇和二氯甲烷洗涤3次。然后从树脂上裂解该化合物，收集滤液，然后真空浓缩。通过将该油溶于甲醇中研磨得到的油，缓慢加入乙醚直至沉淀形成。收集沉淀物并真空干燥得到51mg 5’，为白色结晶物质。实施例5(E)-4-[2-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸
向冷(-78℃)的、搅拌的4-膦酰基甲基苯甲酸三乙酯(904mg，3.01mmol)的THF(20ml)溶液中加入LiHMDS(1.0M在THF中，3ml，3.00mmol)，于相同的温度下继续搅拌1小时。将在THF(10ml)中的N-Boc脯氨醛(prolinal)(500mg，2.51mmol)加入该混合物中，用1小时使该混合物温热至室温。搅拌2小时后，用水猝灭该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水(200ml)洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(8∶1，v/v)作为洗脱剂，得到713mg(82％)的(E)-4-[2-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸乙酯，为无色结晶固体。mp 68-70℃；IR(KBr)1710，1697，1681cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.39(12H，多个m)，1.77-1.93(3H，m)，2.11(1H，m)，3.47(2H，m)，4.34-4.54(共3H，m)，6.22(1H，m)，6.43(1H，d，J＝14.2Hz)，7.39(2H，J＝8.3Hz)，7.97(2H，d，J＝8.3Hz)；MS(FAB)m/z 346(M++1)；C20H27NO4的分析计算值C，69.54；H，7.88；N，4.05。实测值C，69.52；H，8.08；N，4.07。
向搅拌的(E)-4-[2-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸乙酯(700mg，2.03mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液中加入TFA(3ml)，搅拌得到的混合物3小时。浓缩该混合物，通过加入饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性。用氯仿(2×100ml)提取该混合物。经碳酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩，得到434mg(87％)的(E)-4-[2-(2-吡咯烷基)乙烯基]苯甲酸乙酯，为棕色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.39(3H，t，J＝7.3Hz)，1.52-2.06(4H，多个m)，2.93-2.99(1H，m)，3.07-3.13(1H，m)，3.74(1H，q，J＝7.3Hz)，4.37(2H，q，J＝7.3Hz)，6.34(1H，dd，J＝15.6，7.3Hz)，6.54(1H，d，J＝15.6Hz)，7.41(2H，d，J＝8.3Hz)，7.97(2H，d，J＝8.3Hz)。
将(E)-4-[2-(2-吡咯烷基)乙烯基]苯甲酸乙酯(434mg，1.77mmol)、4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(797mg，1.77mmol)、三乙胺(0.37ml，2.66mmol)在DMF(15ml)中的混合物搅拌15小时。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物。用盐水(2×200ml)洗涤该溶液，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)作为洗脱剂，得到906mg(q.y.)的(E)-4-[2-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸乙酯，为棕色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.39(3H，t，J＝7.3Hz)，1.83-2.20(4H，多个m)，2.24(3H，d，J＝4.9Hz)，3.63(4H，m)，4.36(2H，q，J＝7.3Hz)，4.62和4.84(共1H，m)，6.18-6.47(2H，m)，7.03-8.02(14H，多个m)。
将(E)-4-[2-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸乙酯(906mg，1.77mmol)在0.25N氢氧化钠(14ml)和THF(14ml)中的搅拌化合物在回流下加热3天。将该混合物倾入冰-1N HCl(200ml)中，抽滤收集沉淀。将该固体从氯仿-甲醇-正己烷中重结晶，得到453mg(53％)的6，为淡黄色结晶粉末。mp 165-168℃；IR(KBr)3282，2974，2663，2537，1700，1685cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.74-2.12(4H，m)，2.24(3H，d，J＝4.9Hz)，3.35-3.66(4H，m)，4.67-4.74(1H，m)，6.25-6.41(1H，m)，6.53(1H，s)，6.93(1H，t，J＝7.3Hz)，7.08-7.92(12H，多个m)，9.00(1H，m)，12.87(1H，br s)；MS(FAB)m/z 484(M++1)；C29H29N3O4·0.5H2O的分析计算值C，70.71；H，6.14；N，8.39。实测值C，70.46；H，6.07；N，8.39。实施例64-[2-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙基]苯甲酸
在剧烈搅拌下，将(E)-4-[2-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸酯(200mg，0.414mmol)和5％Pd/C(200mg)在甲醇(20ml)中的混合物于1个大气压下氢化1小时。过滤该混合物，浓缩滤液。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(4∶1)作为洗脱剂，得到201mg(q.y.)的7，为无色结晶粉末。mp 180-190℃；IR(KBr)3345，3124，3060，3027，2960，2927，2875，1706，1672cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.04-3.96(共16H，多个m)6.91-7.41(9H，m)，7.79-7.90(3H，m)，8.23(1H，br s)，9.31(1H，br s)；MS(FAB)m/z 486(M++1)；C29H31N3O4·2.25H2O的分析计算值C，66.21；H，6.80；N，7.99。实测值C，65.97；H，6.20；N，7.72。实施例7(S)-4-[2-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸
(S)-4-[2-[1-[3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸
(S)-4-[2-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸
8、9和10室温下向Boc-脯氨醇(prolinol)(3.00g，14.9mmol)、对-羟基苯甲酸乙酯(2.40g，14.5mmol)和三苯膦(3.91g，14.9mol)在THF(80ml)中的搅拌混合物中滴加偶氮二羧酸二乙酯(2.86g，16.4mmol)。加入完毕后，将得到的混合物在回流下加热2小时。冷却后，真空浓缩该混合物。使残留物溶于乙酸乙酯中，用1N氢氧化钠、水、盐水顺序洗涤。经硫酸镁干燥乙酸乙酯层并真空蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-正己烷(1∶4，v/v)作为洗脱剂，得到4.88g(93％)的(S)-4-(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸乙酯，为一种油。
向上面的(S)-4-(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸乙酯中加入甲醇(100ml)和1N氢氧化钠(50ml)。于室温下搅拌该混合物15小时。减压除去甲醇后，将水(50ml)加入残留的溶液中。用乙醚(x2)洗涤该水溶液，然后通过加入1N HCl酸化。用乙酸乙酯提取该混合物，用水、盐水洗涤，经硫酸镁干燥并真空蒸发，得到4.26g(95％)的(S)-4-(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸，为结晶固体。
向上面的(S)-4-(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸中加入二氯甲烷(10ml)和TFA(10ml)。于室温下搅拌该混合物1小时，将乙醚加入该混合物中，收集得到的固体。使该固体溶于水(100ml)、二氧六环(50ml)和碳酸氢钠(4.4g)中。将Fmoc-Cl(3.34g，12.9mmol)加入该溶液中，于室温下搅拌得到的混合物20小时。用乙醚(x2)洗涤该混合物，分离含水层。通过加入1N HCl酸化水层。用乙酸乙酯提取该混合物，用水、盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发，得到5.36g(91％)的(S)-4-(1-Fmoc-2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸，为粘性的油，将其静置结晶。
使Wang树脂(0.71mmol/g，400mg)悬浮于(S)-4-(1-Fmoc-2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸(500mg，1.13mol)、DMAP(35mg，0.29mmol)、HOBt(40mg，0.30mmol)和DIC(0.45ml，2.9mmol)在DMF(3ml)和二氯甲烷(7ml)的混合物中的溶液中。振摇该混合物20小时并抽干。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤树脂，减压干燥得到522mg树脂，将其用于制备8、9和10。
8 向上面的树脂(115mg)中加入哌啶-DMF(50％v/v，4ml)溶液，振摇该混合物1小时。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤该树脂。向该树脂中加入DMF(4ml)、二氯甲烷(2ml)、4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(70mg，0.25mmol)、PyBrop(115mg，0.25mmol)和DIEA(0.13ml，0.75mmol)。将该混合物振摇21小时并抽干。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤树脂。向该树脂中加入TFA的二氯甲烷溶液(50％v/v，4ml)，振摇该混合物2小时。过滤该混合物，真空浓缩滤液。使残留物经Sep-Pak柱纯化。除去溶剂后，将乙醚加入残留物中，收集产生的固体，得到25mg 8，为浅黄色结晶物质。MS(FAB)m/z 488(M++1)
9 向上面的树脂(60mg)中加入哌啶的DMF(50％v/v，3ml)溶液，振摇该混合物2小时。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤该树脂。向该树脂中加入DMF(2ml)、二氯甲烷(1ml)、3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(40mg，0.13mmol)、PyBrop(60mg，0.13mmol)和DIEA(0.060ml，0.34mmol)。将该混合物振摇40小时并抽干。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤树脂。向该树脂中加入TFA的二氯甲烷溶液(30％v/v，3ml)，振摇该混合物5小时。过滤该混合物，真空浓缩滤液。使残留物经Sep-Pak柱纯化。除去溶剂后，将乙醚加入残留物中，收集固体，得到8mg 9，为结晶固体。MS(FAB)m/z 504(M++1)
10 向上面的树脂(637mg)中加入哌啶的DMF(50％v/v，20ml)溶液，振摇该混合物4小时。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤该树脂。向该树脂中加入DMF(12ml)、二氯甲烷(8ml)、4-(Fmoc-氨基)苯基乙酸(530mg，1.42mmol)、PyBrop(660mg，1.43mmol)和DIEA(0.62ml，3.56mmol)。将该混合物振摇60小时并抽干。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤树脂，减压干燥得到617mg树脂。将57mg该树脂加入哌啶的DMF(40％v/v，2ml)溶液，振摇该混合物1小时。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤该树脂。将异氰酸2-氯代苯酯(0.050ml，041mmol)加入树脂在THF(1ml)和二氯甲烷(1ml)的悬浮液中。将该混合物振摇20小时并抽干。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤该树脂。向该树脂中加入TFA的二氯甲烷溶液(25％v/v，2ml)，振摇该混合物1.5小时。过滤该混合物，真空浓缩滤液。使残留物经Sep-Pak柱纯化。除去溶剂后，将乙醚加入残留物中，收集固体得到2mg 10，为结晶固体。MS(FAB)m/z 508(M++1)实施例8(S)-3-[2-[1-[3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]吡咯烷基]甲氧基]苯基乙酸
(S)-3-[2-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]吡咯烷基]甲氧基]苯基乙酸
11和12于室温下，向Boc-脯氨醇(3.51g，17.5mmol)、间-羟基苯基乙酸甲酯(2.90g，17.5mmol)、三苯膦(4.60g，17.6mol)在THF(50ml)中的搅拌混合物中滴加偶氮二羧酸二乙酯(3.05g，17.5mmol)。加入完毕后，将得到的混合物在回流下加热3小时。冷却后，真空浓缩该混合物。使残留物溶于乙酸乙酯中，用1N氢氧化钠、水、盐水顺序洗涤并经硫酸镁干燥。除去溶剂后，使残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-己烷(1∶4，v/v)作为洗脱剂，得到5.49g(90％)的(S)-3-(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基苯基乙酸甲酯，为一种油。
将上面的(S)-3-(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基苯基乙酸甲酯的甲醇(60ml)和1N氢氧化钠(20ml)中的混合物于室温下搅拌8小时。减压除去溶剂后，将水(50ml)加入残留物中。用乙醚(x2)提取该混合物，通过加入1N HCl酸化含水层。用乙酸乙酯提取该混合物。用水、盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥，然后真空浓缩，得到4.43g(88％)的(S)-3-(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基苯基乙酸，为一种粘性的油。
将上面的(S)-3-(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基苯基乙酸在二氯甲烷(10ml)和TFA(10ml)中的混合物于室温下搅拌1小时。将乙醚加入该混合物中并静置。经倾析移出上层，得到一种油。将该油在水(100ml)、二氧六环(30ml)和碳酸氢钠(6.0g)中的混合物加入Fmoc-Cl(2.86g，11.1mmol)中，于室温下搅拌混合物20小时。用乙醚(x2)提取该混合物，通过加入1N HCl酸化含水层。用乙酸乙酯提取该混合物。用水、盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空浓缩，得到5.08g(81％)的(S)-3-(1-Fmoc-2-吡咯烷基)甲氧基苯基乙酸，为一种粘性的油。
使Wang树脂(0.71mmol/g，400mg)悬浮于(S)-3-(1-Fmoc-2-吡咯烷基)甲氧基苯基乙酸(520mg，1.14mol)、DMAP(35mg，0.29mmol)、HOBt(40mg，0.30mmol)和DIC(0.45ml，2.9mmol)在DMF(3ml)和二氯甲烷(7ml)的混合物中的溶液中。振摇该混合物20小时并抽干。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤树脂，减压干燥得到593mg树脂，将其用于制备11和12。
11 向上面的树脂(70mg)的哌啶-DMF(40％v/v，3ml)中的混合物振摇1小时。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤该树脂。向该树脂中加入DMF(1.5ml)、二氯甲烷(1.5ml)、3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(42mg，0.14mmol)、PyBrop(70mg，0.15mmol)和DIEA(0.065ml，0.37mmol)。将该混合物振摇15小时并抽干。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤树脂。向该树脂中加入TFA的二氯甲烷溶液(25％v/v，2ml)，振摇该混合物3小时。过滤该混合物，真空浓缩滤液。使残留物经Sep-Pak柱纯化。除去溶剂后，将乙醚加入残留物中，收集固体得到8mg 11，为结晶固体。MS(FAB)m/z 518(M++1)
12 向上面的树脂(70mg)的哌啶-DMF(40％v/v，3ml)中的混合物振摇1小时。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤该树脂。向该树脂中加入DMF(1.5ml)、二氯甲烷(1.5ml)、4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(40mg，0.14mmol)、PyBrop(70mg，0.15mmol)和DIEA(0.065ml，0.37mmol)。将该混合物振摇15小时并抽干。用DMF(x3)、甲醇(x3)、二氯甲烷(x3)洗涤树脂。将该树脂在TFA-二氯甲烷(25％v/v，2ml)中的混合物振摇3小时。过滤该混合物，真空浓缩滤液。使残留物经Sep-Pak柱纯化。除去溶剂后，将乙醚加入残留物中，收集固体得到11mg 12，为结晶固体。MS(FAB)m/z502(M++1)实施例94-[2-[1-[3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙炔基]苯甲酸
向N-boc-脯氨醛(5.98g，30mmol)和三苯膦(62.95g，240mmol)在二氯甲烷(200ml)中的搅拌的冷(-50℃)溶液中缓慢加入CBr4(39.80g，120mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液，于0℃继续搅拌1小时。向该混合物中加入饱和碳酸氢钠，用氯仿提取该混合物。用水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿和正己烷-乙酸乙酯(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到7.84g(74％)的1-(叔丁氧基羰基)-2-(2，2-二溴乙烯基)吡咯烷，为无色片状物。mp 61-63；IR(KBr)1693cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.46(9H，s)1.72-2.19(4H，m)，3.35-3.45(2H，m)，4.35(1H，br s)，6.36(1H，br s)；MS(FAB)m/z 352，354，356，358；C11H17NO2Br2的分析计算值C，37.21；H，4.83；N，3.94。实测值C，37.14；H，4.83；N，4.00。
用10分钟向搅拌的冷(-78℃)的1-(叔丁氧基羰基)-2-(2，2-二溴乙烯基)吡咯烷(7.81g，22mmol)的THF(200ml)溶液中加入正丁基锂(1.59M在己烷中，28ml，44mmol)，于相同温度下继续搅拌2小时。通过加入饱和氯化铵猝灭该反应物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4.15g(97％)的1-(叔丁氧基羰基)-2-乙炔基吡咯烷，为浅黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(9H，s)，1.82-2.21(4H，m)，3.30-3.45(2H，m)，4.41-4.52(1H，m)。
将4-碘代苯甲酸乙酯(1.7ml，10mmol)、Pd(PPh3)4(578mg，0.5mmol)和CuI(190mmol，1mmol)在i-Pr2NH(20ml)中的悬浮液在氮气氛下搅拌0.5小时。用10分钟向该混合物中加入1-(叔丁氧基羰基)-2-乙炔基吡咯烷(1.95g，10mmol)的i-Pr2NH(20ml)溶液。于室温下搅拌3小时后，将该混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到2.77g(81％)的1-(叔丁氧基羰基)-2-(2-(4-乙氧基羰基苯基)乙炔基)吡咯烷，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.37(3H，t，J＝6.8Hz)，1.49(9H，s)1.85-2.12(4H，m)，3.37-3.51(2H，m)，4.37(2H，q，J＝6.8Hz)，4.54-4.77(1H，m)，7.44(2H，d，J＝7.8Hz)，7.96(2H，d，J＝7.8Hz)
向1-(叔丁氧基羰基)-2-[2-(4-乙氧基羰基苯基)乙炔基]吡咯烷(2.75g，8mmol)在二氯甲烷(5ml)的搅拌溶液中加入TFA(5ml)，将得到的混合物搅拌过夜。真空浓缩该混合物，用饱和碳酸氢钠使呈碱性，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥，蒸发得到1.95g(q.y.)的2-[2-(4-乙氧基羰基苯基)乙炔基]吡咯烷，为一种浅黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.38(3H，t，J＝6.8Hz)，1.82-2.16(4H，m)，3.01-3.48(2H，m)，4.00-4.11(1H，m)，4.37(2H，q，J＝6.8Hz)，4.54-4.77(1H，m)，7.44-7.46(2H，m)，7.95-7.97(2H，m)。
将3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(180mg，0.6mmol)、2-(2-(4-乙氧基羰基苯基)乙炔基)吡咯烷(146mg，0.6mmol)、EDC(173mg，0.9mmol)、DMAP(73mg，0.6mmol)和催化的HOBt在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入1N HCl中，抽滤收集固体。使残留物溶于氯仿中，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到192mg(61％)的4-[2-[1-[3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙炔基]苯甲酸乙酯，为淡黄色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.38(3H，t，J＝6.8Hz)，1.98-2.24(4H，m)，3.48-3.89(2H，m)，3.53(2H，s)，3.62(3H，s)，4.33-4.40(2H，m)，4.78-5.04(1H，m)，6.77-8.00(14H，m)。
向4-[2-[1-[3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙炔基]苯甲酸乙酯(184mg，0.35mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(4ml)。将得到的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入水中，通过加入1N HCl(1ml)使呈酸性。抽滤收集固体并使之溶于氯仿中。经硫酸镁干燥该溶液并蒸发。残留物从氯仿-正己烷中重结晶，得到65mg(37％)的13，为白色结晶粉末。mp 154-157℃；IR(KBr)3346，2952，2615，1712，1693cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ 1.92-2.29(4H，m)，3.32-3.82(2H，m)，3.78(2H，s)，3.80(3H，s)，4.87-5.11(1H，m)，6.77-9.26(14H，m)，13.10(1H，br s)；MS(FAB)m/z 498(M++1)实施例104-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙炔基]苯甲酸
向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(1.45g，4.6mmol)、2-(2-(4-乙氧基羰基苯基)乙炔基)吡咯烷(1.12g，4.6mmol)、EDC 1.32g(6.9mmol)、DMAP(562mg，4.6mmol)在DMF(20ml)中的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入1N HCl中，抽滤收集固体。使该固体溶于氯仿中，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到2.20g(89％)的4-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙炔基]苯甲酸乙酯，为白色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.37-1.41(3H，m)，1.94-2.22(4H，m)，2.29(3H，s)，3.41-3.89(2H，m)，3.62(3H，s)，3.69(2H，s)，4.34-4.40(2H，m)，4.72-5.01(1H，m)，6.33(1H，br s)，6.80-8.06(12H，m)。
向4-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙炔基]苯甲酸乙酯(2.16g，4mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(32ml)，并继续搅拌过夜。将该混合物倾入水中，通过加入1N HCl(8ml)酸化。抽滤收集产生的沉淀并使之溶于氯仿中。经硫酸镁干燥该溶液并蒸发。残留物从氯仿-正己烷中重结晶，得到555mg(27％)的14，为白色结晶粉末。mp 161-164℃；IR(KBr)3338，2954，2875，1707，1691cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.96-2.10(4H，m)，2.24(3H，s)，3.32-3.81(2H，m)，3.62(2H，s)，3.81(3H，s)，4.87-5.10(1H，m)，6.76-8.58(13H，m)；MS(FAB)m/z 512(M++1)实施例113-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙炔基]苯基乙酸
将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(141mg，0.45mmol)、2-[2-(3-乙氧基羰基甲基苯基)乙炔基]吡咯烷(116mg，0.45mmol)、EDC(130mg，0.68mmol)、DMAP(55mg，0.45mmol)、催化的HOBt在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入1N HCl中，抽滤收集固体。使该固体溶于氯仿中，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到一种油，将其溶于THF(5ml)中。搅拌下，将0.25N氢氧化钠(4ml)加入该溶液中。搅拌过夜后，将该混合物倾入1N HCl(20ml)中。抽滤收集产生的沉淀并使之溶于氯仿中。经硫酸镁干燥该溶液并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到92mg(39％)的15，为白色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.96-2.18(7H，m)，3.50-3.88(9H，m)，4.78-4.98(2H，m)，6.72-7.99(14H，m)；MS(FAB)m/z526(M++1)实施例124-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]间苯二酸
向4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(2.32g，5.15mmol)、(S)-4-(2-吡咯烷基甲氧基)间苯二酸二甲酯(1.51g，5.15mmol)的DMF(20ml)的搅拌溶液中加入三乙胺(1.0ml，6.65mmol)，并将混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释得到的混合物。用盐水洗涤该溶液，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.58g(55％)的4-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]间苯二酸二甲酯，为黄色结晶固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.87-2.25(m，共7H)，3.50-3.65(m，4H)，3.85(s，3H)，3.89(s，3H)，4.18-4.31(m，2H)，4.44(m，1H)，6.95-8.45(m，共13H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]间苯二酸二甲酯(1.56g，2.79mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(20ml)，将反应混合物在回流下加热过夜。将得到的混合物倾入1N HCl中并收集固体。用乙醚洗涤粗品固体，得到574mg(39％)的16，为黄色无定形固体。IR(KBr)1710cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.83-2.18(m，4H)，2.24(s，3H)，3.36-4.28(m，8H)，6.91-9.02(多个m，共13H)，12.89(br s，1H)；MS(FAB)m/z 532(M++1)实施例134-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸
于0℃，用15分钟向4-[2-[2-(N-叔丁氧基羰基)吡咯烷基乙烯基]苄腈(2.26g，7.57mmol)的二氯甲烷(23ml)的搅拌溶液中滴加1.5M氢化二异丙基铝(甲苯溶液)(6.06ml，9.09mmol)。于0℃将生成的溶液搅拌3小时。通过加入饱和氯化铵猝灭该溶液。通过硅藻土过滤得到的混合物，用乙酸乙酯提取滤液。用盐水洗涤滤液，经硫酸钠干燥并真空蒸发，得到1.89g(83％)的4-[2-[2-(N-叔丁氧基羰基)吡咯烷基]乙烯基]苯甲醛，为黄色浆状物。
于0℃，用0.5小时向氢氧化钠(1.00g，25.1mmol)在水(10ml)中的搅拌溶液中加入硝酸银(2.13g，12.5mmol)的乙腈(10ml)溶液。于0℃，用20分钟向上面的搅拌的混合物中滴加4-[2-[2-(N-叔丁氧基羰基)吡咯烷基]乙烯基]苯甲醛(1.89g，6.27mmol)的乙腈(10ml)溶液。然后于室温下搅拌得到的混合物另外3小时。抽滤该混合物，然后用热水洗涤。用乙酸乙酯洗涤滤液后，通过小心加入1N HCl酸化含水层，再用氯仿提取。经硫酸钠干燥提取物并真空蒸发，得到0.700g(两步35％)的4-[2-[2-(N-叔丁氧基羰基)吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸，为淡黄色结晶物质。
于室温下，向4-[2-(2-(N-叔丁氧基羰基)吡咯烷基)乙烯基]苯甲酸(0.700g，2.21mmol)的甲醇-苯(1∶4，v/v，30ml)的搅拌溶液中滴加2M的TMSCHN2的正己烷溶液(1.32ml，2.65mmol)。于室温下搅拌该溶液0.5小时后，真空蒸发该溶液。得到的油状残留物经硅胶层析，用乙酸乙酯-正己烷(1∶6，v/v)作为洗脱剂，得到0.64g(88％)的4-[2-[2-(N-叔丁氧基羰基)吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸甲酯，为淡黄色结晶物质。
于室温下，向4-[2-[2-(N-叔丁氧基羰基)吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸甲酯(0.64g，1.93mmol)的二氯甲烷(5ml)的搅拌溶液中加入TFA(5ml)。于室温下搅拌该混合物1小时后，真空蒸发该混合物。用饱和碳酸氢钠处理该残留物，用二氯甲烷提取。经硫酸钠干燥提取物并真空蒸发，得到0.45g(100％)的4-[2-(2-吡咯烷基)乙烯基]苯甲酸甲酯，为淡黄色结晶物质。
于室温下，向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(285mg，0.906mmol)、4-[2-(2-吡咯烷基)乙烯基]苯甲酸甲酯(210mg，0.906mmol)的DMF(4ml)的搅拌混合物中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)(209mg，1.09mmol)、1-羟基苯并三唑(HOBt)(147mg，1.09mmol)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(11mg，0.0906mmol)。于室温下搅拌得到的混合物48小时后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，用乙酸乙酯提取。经硫酸钠干燥提取物并真空蒸发。残留物经硅胶层析，用丙酮-甲苯(1∶4-1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到0.47g(98％)的4-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸甲酯，为白色结晶物质。
向4-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸甲酯(0.47g，0.891mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(5.36ml)。于室温下搅拌得到的混合物20小时。用1N HCl酸化该混合物。用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发，得到430mg(94％)的17，为白色结晶物质。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.78-2.13(4H，m)，2.50(3H，s)，3.44-3.68(4H，m)，3.75和3.82(3H，s)，4.71(1H，m)，6.26-8.59(15H，m)。实施例144-[2-[1-[3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸
于室温下，向3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(305mg，1.01mmol)、4-[2-(2-吡咯烷基)乙烯基]苯甲酸甲酯(235mg，1.01mmol)的DMF(4ml)的搅拌溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(232mg，1.21mmol)、1-羟基苯并三唑(HOBt)(164mg，1.21mmol)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(12mg，0.101mmol)。搅拌该混合物48小时后，通过加入1N HCl酸化该混合物。用乙酸乙酯提取混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发，得到一种油状残留物。使残留物经硅胶层析，用丙酮-甲苯(1∶4-1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到0.43g(83％)的4-[2-[1-[3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸，为白色结晶物质。
于室温下，向4-[2-[1-[3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸甲酯(0.43g，0.837mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(5.04ml)溶液。搅拌得到的混合物20小时后，通过小心加入1N HCl酸化该混合物。用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发，得到397mg(95％)的18，为白色结晶物质。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.78-2.13(4H，m)，3.17-3.68(4H，m)，3.74，3.82(3H，s)，4.71(1H，m)，6.27-9.28(16H，m)。实施例154-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙基]苯甲酸
于室温下，将4-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙烯基]苯甲酸(184mg，0.358mmol)和5％Pd-C(368mg)在甲醇中的混合物于1个大气压下氢化。于室温下搅拌该混合物21小时后，过滤除去不溶性催化剂，真空蒸发滤液。残留物经硅胶层析，用甲醇-氯仿(1∶4-1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到123mg(66％)的19，为白色结晶物质。1H-NMR(DMSO-d6)δ 1.55-2.03(m，6H)，2.24(s，3H)，2.60(m，2H)，3.17-3.59(m，4H)，3.83(s，3H)，3.97(m，1H)，6.61-8.57(m，13H)；MS(FAB)m/z 516(M++1)。实施例163-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲硫基苯甲酸
向间-碘代苯酚(20.0g，90.9mmol)的DMF(200ml)的溶液中加入1，4-二氮杂双环[2，2，2]辛烷(20.4g，181.8mmol)和二甲硫基氨基甲酰氯(16.9g，136.4mmol)。于35℃将生成的浑浊溶液搅拌0.5小时，然后于75℃加热0.5小时。冷却后，将300ml水加入该混合物中。收集固体，用水洗涤并减压干燥，得到27.63g(99％)的O-间-碘代苯基二甲硫基氨基甲酸酯，为淡黄色结晶粉末。IR(KBr)1540，1463，1278，1193，1166，1124cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 3.33(s，3H)，3.45(s，3H)，7.05-7.14(m，2H)，7.43(d，J＝1.9Hz，1H)，7.58(dd，J＝1.0，7.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z 307(M++1)；C9H10INOS的分析计算值C，35.19；H，3.28；N，4.56。实测值C，35.23；H，3.40；N，4.41。
将O-间-碘代苯基二甲硫基氨基甲酸酯(10.0g，32.6mmol)的Ph2O(25ml)溶液于230℃加热10小时。冷却后，该反应混合物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到9.31g(93％)的S-间-碘代苯基二甲硫基氨基甲酸酯，为淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ3.08(br s，6H)，7.11(t，J＝7.8Hz，1H)，7.46(d，J＝7.3Hz，1H)，7.71(d，J＝7.3Hz，1H)，7.85(s，1H)；MS(FAB)m/z 307(M++1)
向S-间-碘代苯基二甲硫基氨基甲酸酯(5.01g，16.31mmol)的甲醇(20ml)溶液中加入28％-甲醇钠的甲醇溶液(3.46ml，17.94mmol)。于室温下搅拌得到的混合物3.5小时，然后于70℃加热过夜。冷却后，加入1N HCl。减压除去溶剂，残留物用乙酸乙酯稀释。用水、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压浓缩有机层。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到3.42g(89％)间-碘代苯硫酚，为一种油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ3.45(s，1H)，6.95(t，J＝7.8Hz，H)，7.23(d，J＝7.8Hz，1H)，7.48(d，J＝7.3Hz，1H)，7.64(t，J＝1.5Hz，1H)；MS(EI)m/z 236(M+)。
向N-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲醇(4.30g，20.0mmol)的吡啶(40ml)的搅拌溶液中加入对-TsCl(5.72g，30.0mmol)。于室温下搅拌得到的混合物3小时。用水猝灭该反应混合物，再蒸发除去水。用乙酸乙酯稀释残留物。用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(2∶1，v/v)作为洗脱剂，得到5.76g(81％)的N-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基对-甲苯磺酸酯，为一种无色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.36和1.41(各为s，共9H)，1.82(br m，2H)，1.96(br m，2H)，2.44(s，3H)，3.30(br m，2H)，3.89(br s，1H)，3.96(br s，1H)，4.09(br m，1H)，7.34(br s，2H)，7.77(d，J＝8.3Hz，2H)；MS(FAB)m/z 356(M++1)。
向间-碘代苯硫酚(2.67g，11.31mmol)和N-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基对-甲苯磺酸酯(3.34g，9.43mmol)的吡啶(9.4ml)的搅拌混合物中加入8N氢氧化钾(1.77ml)。于室温下搅拌得到的混合物过夜。用乙酸乙酯稀释反应混合物。用水、饱和氯化铵溶液、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压浓缩有机层，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.79g(45％)的[N-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲基3-碘代苯基硫化物，为一种油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.45(s，9H)，1.78-2.01(br m，4H)，2.71(dt，1H)，3.32-3.49(br m，3H)，3.90-4.02(br m，1H)，7.12(d，J＝7.8Hz，1H)，7.18(d，J＝7.8Hz，1H)，7.57(dd，J＝2.0，8.3Hz，2H)；MS(FAB)m/z 420(M++1)。
向[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲基3-碘代苯基硫化物(1.76g，4.20mmol)的DMSO(20ml)和甲醇(16ml)的搅拌溶液中加入三乙胺(1.28ml，9.24mmol)、Pd(OAc)2(47.1mg，0.21mmol)和1，3-双(二苯基膦基)丙烷(86.6mg，0.21mmol)，然后鼓泡通入CO气体5分钟。于70℃将得到的混合物搅拌过夜。冷却后，浓缩该混合物。用乙酸乙酯稀释残留物。用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.28g(87％)的3-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲硫基苯甲酸甲酯，为一种油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.42和1.45(各为s，9H)，1.79-2.05(br m，4H)，2.83(dt，J＝10.8，30.3Hz，1H)，3.34-3.54(br m，3H)，3.92(s，3H)，3.92和4.05(d，J＝7.8Hz，1H)，7.36(t，J＝7.8Hz，1H)，7.63(br d，J＝14.7Hz，1H)，7.83(br d，J＝12.7Hz，1H)，8.04(s，1H)；MS(FAB)m/z 352(M++1)。
于0℃向3-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲硫基苯甲酸甲酯(1.46g，4.16mmol)的二氯甲烷(30ml)的搅拌溶液中加入TFA(15ml)。于室温下搅拌得到的混合物1小时。减压除去溶剂，用1N氢氧化钠处理残留物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到947mg(91％)的3-(2-吡咯烷基)甲硫基苯甲酸甲酯，为棕色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.45-1.54(m，1H)，1.72-2.00(m，4H)，2.88-3.10(m，4H)，3.30(m，1H)，3.92(s，3H)，7.34(t，J＝7.8Hz，1H)，7.52(m，1H)，7.84(m，1H)，8.01(t，J＝2.0Hz，1H)；MS(FAB)m/z 252(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(1.18g，3.77mmol)、EDC(1.08g，5.65mmol)、DMAP(23mg，0.19mmol)和HOBt(25mg，0.19mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌1小时，将3-(2-吡咯烷基)甲硫基苯甲酸甲酯(947mg，3.77mmol)加入该混合物中，将得到的混合物搅拌过夜。加入DMAP(460mg，3.77mmol)和HOBt(835mg，6.18mmol)后，再搅拌5小时。用乙酸乙酯稀释该反应混合物。用盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(2∶3，v/v)作为洗脱剂，得到294.3mg(14％)的3-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲硫基苯甲酸甲酯，为淡黄色无定形物质。IR(KBr)2875，1724，1620，1284，1182cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.86-2.05(m，4H)，2.31(s，3H)，2.84(dd，J＝9.3，13.7Hz，1H)，3.43-3.59(m，5H)，3.73(s，3H)，3.92(s，3H)，4.33(m，1H)，6.16(s，1H)，6.77-6.80(m，2H)，7.04(s，1H)，7.1 6(t，J＝8.3Hz，1H)，7.38(t，J＝7.8Hz，1H)，7.49(t，J＝7.8Hz，1H)，7.73(dt，J＝1.0，7.8Hz，1H)，7.79(dd，J＝2.0，6.8Hz，1H)，8.01(d，J＝2.0Hz，1H)，8.05(dd，J＝2.4，7.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z 548(M++1)。
向3-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲硫基苯甲酸甲酯(148.2mg，0.271mmol)的THF(7.4ml)和水(1.8ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(19.4mg，0.812mmol)，于室温下搅拌得到的混合物9小时。用1N HCl处理混合物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经制备性TLC纯化，用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)洗脱，从正己烷-乙酸乙酯中结晶得到89.7mg(62％)的20，为白色粉末。IR(KBr)2960，1708cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.82-2.01(m，4H)，2.24(s，3H)，2.93(dd，J＝9.3，12.7Hz，1H)，3.40-3.54(m，5H)，3.86(s，3H)，4.13(br m，1H)，6.74(d，J＝8.3Hz，1H)，6.87(d，J＝1.5Hz，1H)，6.94(t，J＝7.8Hz，1H)，7.10-7.17(m，2H)，7.42(t，J＝7.8Hz，1H)，7.70(d，J＝7.8Hz，1H)，7.74(d，J＝8.3Hz，1H)，7.79(d，J＝7.8Hz，1H)，7.84(s，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，1H)，8.48(s，1H)，8.57(s，1H)；MS(FAB)m/z 534(M++1)。实施例173-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基磺酰基]苯甲酸
于0℃，向3-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲硫基]苯甲酸甲酯(131.8mg，0.241mmol)的二氯甲烷(3ml)的搅拌溶液中加入m-CPBA(130.5mg，0.529mmol)。于室温下将该反应混合物搅拌0.5小时。用氯仿稀释混合物，用饱和硫代硫酸钠溶液猝灭。分离有机层，用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，得到3-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基磺酰基]苯甲酸甲酯，为无定形固体。向该粗品化合物的THF(7.4ml)和水(1.8ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(17.3mg，0.723mmol)，于室温下继续搅拌过夜。用氯仿稀释反应混合物，用1NHCl，然后用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经制备性TLC纯化，用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)作为洗脱剂，使粗品固体从正己烷-乙酸乙酯中重结晶得到69.9mg(51％)的21，为白色结晶粉末。mp 243-245；IR(KBr)3354，2974，1533cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.80-2.00(m，4H)，2.24(s，3H)，3.19-3.62(m，6H)，3.82(s，3H)，4.18(m，1H)，6.67(d，J＝8.8Hz，1H)，6.80(d，J＝1.0Hz，1H)，6.93(t，J＝7.3Hz，1H)，7.10-7.17(m，2H)，7.66(t，J＝7.8Hz，1H)，7.78(d，J＝8.3Hz，1H)，7.91-7.99(m，2H)，8.20(d，J＝7.3Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.48(s，1H)，8.56(s，1H)；MS(FAB)m/z 566(M++1)。C29H31N3O7S·1HCl·1H2O的分析计算值C，56.17；H，5.53；N，6.78。实测值C，55.92；H，5.58；N，6.71。实施例184-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基磺酰基]苯甲酸
于0℃，向4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲硫基]苯甲酸甲酯(300mg，0.548mmol)的二氯甲烷(6ml)的搅拌溶液中加入m-CPBA(297mg，1.206mmol)，于室温下将反应混合物搅拌1小时。用氯仿稀释混合物，用饱和硫代硫酸钠溶液猝灭。用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤分离的有机层并经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，得到4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基磺酰基]苯甲酸甲酯，为粗品黄色油状物。向该粗品化合物的THF(4.4ml)和水(1.1ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(39.4mg，1.643mmol)，于室温下继续搅拌过夜。用氯仿稀释反应混合物，用1NHCl，然后用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经制备性TLC纯化，用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)洗脱，从正己烷-乙酸乙酯中结晶得到128.0mg(41％)的22，为白色粉末。IR(KBr)3388，2974，1537，1298，1155cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.80-1.98(m，4H)，2.24(s，3H)，2.54(s，1H)，3.20-3.70(m，5H)，3.82(s，3H)，4.16(br m，1H)，6.67(dd，J＝1.5，8.3Hz，1H)，6.80(d，J＝1.5Hz，1H)，6.93(d，J＝7.3Hz，1H)，7.10-7.16(m，2H)，7.78(d，J＝7.3Hz，1H)，7.95(d，J＝8.3Hz，2H)，7.98(d，J＝8.3Hz，1H)，8.14(d，J＝8.3Hz，2H)，8.49(s，1H)，8.57(s，1H)；MS(FAB)m/z 566(M++1)。C29H31N3O7S·3H2O的分析计算值C，56.21；H，6.02；N，6.78。实测值C，56.76；H，5.37；N，6.70。实施例194-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲硫基]苯甲酸
向对-碘代苯酚(20.0g，90.9mmol)的DMF(200ml)的搅拌溶液中加入1，4-二氮杂双环[2，2，2]辛烷(20.4g，181.8mmol)和二甲硫基氨基甲酰氯(16.9g，136.4mmol)。于75℃将生成的溶液搅拌3.5小时，冷却后，加入300ml水。抽滤收集固体，并使之溶于乙酸乙酯中。用水洗涤乙酸乙酯层，经硫酸钠干燥并减压蒸发。粗品固体从水中重结晶，得到26.75g(96％)的O-对-碘代苯基二甲硫基氨基甲酸酯，为淡黄色结晶粉末。IR(KBr)1479，1207，827cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 3.37(s，3H)，3.45(s，3H)，6.83(d，J＝8.8Hz，2H)，7.69(d，J＝8.3Hz，2H)；MS(FAB)m/z 307(M++1)；C9H10INOS的分析计算值C，35.19；H，3.28；N，4.56。实测值C，35.17；H，3.35；N，4.44。
将O-对-碘代苯基二甲硫基氨基甲酸酯(10.0g，32.6mmol)的Ph2O(25ml)搅拌溶液于230℃加热5.5小时。冷却后，该反应混合物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到2.55g(26％)的S-对-碘代苯基二甲硫基氨基甲酸酯，为白色结晶粉末。IR(KBr)3299，1651，1469，1371cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 3.03(br s，3H)，3.08(br s，3H)，7.21(d，J＝8.3Hz，2H)，7.70(d，J＝8.3Hz，2H)；MS(FAB)m/z308(M++1)；C9H10INOS的分析计算值C，35.19；H，3.28；N，4.56。实测值C，35.49；H，3.28；N，4.43。
向S-对-碘代苯基二甲硫基氨基甲酸酯(2.55g，8.31mmol)的甲醇(10ml)溶液中加入甲醇钠(495mg，9.14mmol)，于70℃将得到的混合物搅拌过夜。冷却后，加入1N HCl。减压浓缩该混合物，残留物用乙酸乙酯稀释。用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压浓缩有机层，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.75g(89％)对-碘代苯硫酚，为淡黄色结晶固体。IR(KBr)2559，1097，1002，806cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 3.43(s，1H)，7.10(d，J＝8.3Hz，2H)，7.53(d，J＝8.3Hz，2H)；MS(FAB)m/z 236(M++1)。C6H5IS的分析计算值C，30.53；H，2.13。实测值C，30.57；H，2.15。
于室温下，向对-碘代苯硫酚(1.75g，7.43mmol)和N-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基对甲苯磺酸酯(2.39g，6.75mmol)的吡啶(12.7ml)的搅拌混合物中加入8N氢氧化钾(1.27ml)，于室温下搅拌得到的混合物4小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物。用水、饱和氯化铵、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压浓缩有机层。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.49g(53％)的[N-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲基4-碘代苯基硫化物，为一种淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(s，9H)，1.78-2.01(br m，4H)，2.71(dt，1H)，3.32-3.49(br m，3H)，3.90-4.02(br m，1H)，7.12(d，J＝7.8Hz，1H)，7.18(d，J＝7.8Hz，1H)，7.57(dd，J＝2.0，8.3Hz，2H)；MS(FAB)m/z 420(M++1)。
向[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲基4-碘代苯基硫化物(1.49g，3.56mmol)的DMSO(16ml)和甲醇(13ml)的搅拌溶液中加入三乙胺(1.09ml，7.84mmol)、Pd(OAc)2(40mg，0.178mmol)和1，3-双(二苯基膦基)丙烷(73.4mg，0.178mmol)。向搅拌的得到的混合物中通入CO气体5分钟。于70℃将混合物搅拌过夜。冷却后，将该混合物浓缩至小体积。用乙酸乙酯稀释残留物。用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.16g(93％)的4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲硫基苯甲酸甲酯，为一种油。1H-MR(400MHz，CDCl3)δ 1.51和1.47(各为s，9H)，1.78-2.05(br m，4H)，2.77(dt，J＝10.8，37.1Hz，1H)，3.34-3.58(m，3H)，3.89(s，3H)，4.03(br d，J＝27.3Hz，1H)，7.38(d，J＝7.3Hz，1H)，7.47(d，J＝7.3Hz，1H)，7.92(br s，2H)；MS(FAB)m/z 352(M++1)。
向4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲硫基苯甲酸甲酯(1.16g，3.32mmol)的二氯甲烷(20ml)的搅拌溶液中加入TFA(4ml)，于室温下搅拌混合物1.5小时。减压除去溶剂，用1N氢氧化钠处理残留物，用氯仿提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经氢氧化钾干燥并减压浓缩，得到767mg(92％)的4-(2-吡咯烷基)甲硫基苯甲酸甲酯，为黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ(dt，J＝3.9，12.7Hz，1H)，1.85-2.09(m，2H)，2.13(m，1H)，3.11-3.27(m，3H)，3.40(dd，J＝6.8，13.2Hz，1H)，3.54(dd，J＝7.3，15.1Hz，1H)，3.89(s，3H)，5.07(br，1H)，7.38(d，J＝8.3Hz，2H)，7.91(d，J＝8.3Hz，2H)；MS(FAB)m/z 252(M++1)。
于0℃，向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(1.30g，4.136mmol)、三乙胺(0.63ml，4.549mmol)在DMF(20ml)的搅拌混合物中加入三氟乙酸五氟苯酯。于室温下将得到的混合物搅拌1小时。将该混合物倾入水(60ml)中，抽滤收集沉淀。用0.1N HCl、水、正己烷洗涤粗品固体，于40℃干燥，得到1.91g(96％)的3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯，为淡黄色结晶粉末。IR(KBr)1785，1224，1216cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 2.29(s，3H)，3.76(s，3H)，3.90(s，2H)，6.49(s，1H)，6.81(d，J＝1.5Hz，1H)，6.91(dd，J＝1.5，8.3Hz，1H)，7.15(t，J＝7.3Hz，3H)，7.24(m，1H)，7.50(d，J＝7.8Hz，1H)，8.17(d，J＝7.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z 481(M++1)。C30H33N3O5S·1/4H2O的分析计算值C，57.51；H，3.57；N，5.83。实测值C，57.40；H，3.75；N，5.68。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(1.47g，3.05mmol)、4-(2-吡咯烷基)甲硫基苯甲酸甲酯(767mg，3.05mmol)、三乙胺(0.51ml，3.66mmol)在DMF(15ml)中的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释反应混合物。用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(1∶2，v/v)作为洗脱剂，得到1.366g(82％)的4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲硫基]苯甲酸甲酯，为白色结晶粉末。IR(KBr)1785，1224，1216cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.88-1.99(m，4H)，2.30(s，3H)，2.75(dd，J＝9.8，13.2Hz，1H)，3.43-3.55(m，3H)，3.56(s，2H)，3.64(dd，J＝1.1，14.2Hz，1H)，3.73(s，3H)，3.88(s，3H)，4.33(m，1H)，6.29(s，1H)，6.78-6.81(m，2H)，7.11-7.26(m，5H)，7.50(d，J＝8.3Hz，3H)，7.93(d，J＝8.8Hz，2H)，8.07(d，J＝7.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z 548(M++1)。C30H33N3O5S·1/4H2O的分析计算值C，65.26；H，6.12；N，7.61。实测值C，65.48 H，6.20；N，7.47。
向4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲硫基]苯甲酸甲酯(300mg，0.548mmol)的THF(5.5ml)和水(1.1ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(39.4mg，1.643mmol)，将反应混合物于室温下搅拌过夜，于50℃搅拌9小时。用氯仿稀释该混合物。用1N HCl、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从正己烷-乙酸乙酯-甲醇中重结晶得到218.6mg(75％)的23，为白色结晶粉末。IR(KBr)3318，2952，1596，1536，1299，1155cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.82-2.05(m，4H)，2.25(s，3H)，2.91(dd，J＝9.8，13.2Hz，1H)，3.47-3.52(m，3H)，3.57(s，2H)，3.87(s，3H)，4.14(br m，1H)，6.76(d，J＝1.5，8.3Hz，1H)，6.89(d，J＝1.5Hz，1H)，6.94(t，J＝7.3Hz，1H)，7.11-7.19(m，2H)，7.57(d，J＝8.3Hz，2H)，7.80(d，J＝8.3Hz，1H)，7.83(d，J＝8.3Hz，2H)，8.02(d，J＝8.3Hz，1H)，8.49(s，1H)，8.58(s，1H)；MS(FAB)m/z 534(M++1)。C29H31N3O5S·5/4H2O的分析计算值C，62.63；H，6.07；N，7.36；S，5.77。实测值C，62.62；H，5.74；N，7.36；S，5.67。实施例204-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基亚磺酰基]苯甲酸
于0℃，向4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲硫基]苯甲酸甲酯(264mg，0.482mmol)的二氯甲烷(5.2ml)的搅拌溶液中加入m-CPBA(118.8mg，0.482mmol)，于室温下将混合物搅拌1小时。用氯仿稀释混合物，用饱和硫代硫酸钠溶液猝灭。用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤分离的有机层，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，得到4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基亚磺酰基]苯甲酸甲酯，为粗品无定形固体。向该粗品化合物的THF(4ml)和水(1ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(34.6mg，1.45mmol)，于室温下继续搅拌过夜。用氯仿稀释该混合物，用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从正己烷-氯仿-甲醇中重结晶得到193.2mg(73％)的24，为白色结晶粉末。IR(KBr)3338，2956，1708，1529，1299，1207，1155cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.70-2.06(m，4H)，2.24(s，3H)，2.90(dd，J＝8.3，13.2Hz，1H)，3.02-3.08(m，1H)，3.16-3.25(m，1H)，3.41-3.60(m，3H)，3.84(s，3H)，4.40(br s，1H)，6.74(d，J＝7.8Hz，1H)，6.87(s，1H)，6.94(d，J＝7.3Hz，1H)，7.11-7.17(m，2H)，7.75-7.81(m，3H)，7.98-8.05(m，1H)，8.10(d，J＝8.3Hz，2H)，8.46(s，1H)，8.56(s，1H)；MS(FAB)m/z 550(M++1)，572(M++Na)。C29H31N3O6S·3/2H2O的分析计算值C，60.40；H，5.94；N，7.29。实测值C，60.15；H，5.82；N，6.90。实施例21(S)-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-羟基苯甲酸甲酯(1.96g，12.88mmol)、N-Boc-脯氨醇(2.59g，12.87mmol)和三苯膦(4.06g，15.48mmol)在THF(40ml)中的搅拌溶液中加入DIAD(3.10ml，15.74mmol)。将得到的混合物在回流下加热14小时。真空蒸发该混合物，残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到3.34g(77％)的(S)-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯，为一种油。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.67(d，J＝9.3Hz，1H)，1.87-2.03(m，3H)，3.36-3.43(m，2H)，3.87-4.09(m，1H)，4.13-4.20(m，2H)，6.94(d，J＝8.3Hz，2H)，7.98(d，J＝8.3Hz，2H)。
于室温下，将(S)-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(3.34g，9.96mmol)的TFA(20ml)和二氯甲烷(35ml)中的混合物搅拌15小时。真空浓缩该混合物，用饱和碳酸氢钠使呈碱性。用氯仿提取混合物，用盐水洗涤，经碳酸钠干燥。蒸发有机层得到1.70g(73％)的(S)-4-(2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯，为黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.54-1.61(m，1H)，1.77-1.86(m，2H)，1.87-1.97(m，1H)，2.00(bs，1H)，2.93-3.06(m，2H)，3.52-3.57(m，1H)，3.88(s，3H)，3.90-3.99(m，2H)，6.92(d，J＝9.0Hz，2H)，7.98(d，J＝9.0Hz，2H)
将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(428mg，1.36mmol)、(S)-4-(2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯(330mg，1.40mmol)、EDC(312mg，1.63mg)、HOBt(220mg，1.63mmol)和催化量的DMAP在DMF(15ml)中的混合物搅拌6小时。用乙酸乙酯稀释得到的混合物。用0.5NHCl、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空蒸发掉溶剂，得到油状残留物。将其经硅胶层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到540mg(75％)的(S)-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3)δ 1.81-2.12(m，4H)，2.88(bs，3H)，3.48-3.61(m，共7H)，3.88(s，3H)，4.10-4.21(m，2H)，4.42-4.46(m，1H)，6.75-8.08(多个m，共13H)。
向(S)-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(540mg，1.02mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(10ml)。将得到的混合物在回流下加热16小时。将该混合物倾入1N HCl中，收集固体。用乙醚洗涤粗品固体，得到278mg(53％)的25，为白色无定形固体。IR(KBr)1708cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.83-2.14(m，4H)，2.21(s，3H)，2.46(s，2H)，3.78(s，3H)，3.95-4.02(m，1H)，4.13-4.16(m，1H)，4.24(bs，1H)，6.51-7.98(多个m，12H)，8.43(s，1H)，8.53(s，1H)，12.57(bs，1H)；MS(FAB)m/z 517(M+)。实施例221-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯甲酰基]-L-脯氨酰基]-4-哌啶基乙酸
于室温下，将3-甲氧基-4-硝基苯甲酸(229mg，1.16mmol)、4-(1-脯氨酰基哌啶基)乙酸叔丁酯(344mg，1.16mmol)、HOBt(188mg，1.39mmol)、DMAP(14.2mg，0.116mmol)和EDC(267mg，1.39mmol)在DMF(7ml)中的混合物搅拌22小时。用乙酸乙酯(50ml)稀释混合物，用1N HCl、饱和碳酸氢钠和水洗涤。经硫酸钠干燥有机层并真空蒸发。残留物经硅胶层析，用甲醇∶氯仿(1∶30，v/v)作为洗脱剂，得到520mg(94％)的1-(3-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)脯氨酰基-4-(1-哌啶基)乙酸叔丁酯，为白色结晶物质。1H-NMR(CDCl3)δ1.12-1.33和1.62-2.23(各为m，9H)，1.44(s，9H)，2.65，3.13，3.47，3.67，4.44和4.61(各为m，8H)，3.99(s，3H)，5.05(m，1H)，7.21(d，J＝8.3Hz，1H)，7.31(s，1H)，7.86(d，J＝8.3Hz，1H)。
于室温下，将1-(3-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)脯氨酰基-4-(1-哌啶基)乙酸叔丁酯(0.52g，1.09mmol)和5％Pd-C(2.08g)的甲醇(10ml)中的搅拌混合物于1个大气压下氢化94小时。除去不溶性催化剂，真空蒸发滤液。残留物经硅胶层析，用甲醇-氯仿(1∶40-1∶6，v/v)作为洗脱剂，得到279mg(57％)的1-(4-氨基-3-甲氧基苯甲酰基)脯氨酰基-4-(1-哌啶基)乙酸叔丁酯，为白色结晶物质。1H-NMR(CDCl3)δ 1.16-2.17，2.69，3.06，3.67，4.12和4.59(各为m，17H)，3.86(s，3H)，5.10(m，1H)，6.64(m，1H)，7.12(各为m，2H)。
于室温下，向1-(4-氨基-3-甲氧基苯甲酰基)-L-脯氨酰基-4-(1-哌啶基)乙酸叔丁酯(279mg，0.627mmol)和三乙胺(0.0876ml，0.627mmol)的THF(4ml)的搅拌溶液中滴加异氰酸邻-甲苯基酯(0.0777ml，0.627mmol)，将得到的混合物于室温下再搅拌21小时。将冰水加入该混合物中，抽滤收集沉淀。粗品固体经硅胶柱层析纯化，用甲醇∶氯仿(1∶40，v/v)作为洗脱剂，得到254mg(70％)的1-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯甲酰基]-L-脯氨酰基]-4-(1-哌啶基)乙酸叔丁酯，为结晶固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.43(s，9H)，1.13-1.25和1.76-2.14(各为m，9H)，2.60，3.18，3.71，4.06和4.57(各为m，8H)，3.67(s，3H)，5.06(m，1H)，6.63和6.90(s，2H)，6.98-7.23和7.64(各为m，5H)，7.56(d，J＝7.8Hz，1H)，8.21(d，J＝8.8Hz，1H)。
于室温下，将1[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯甲酰基]脯氨酰基]-4-(1-哌啶基)乙酸叔丁酯(254mg，0.440mmol)的二氯甲烷(6ml)和TFA(6ml)溶液搅拌5小时。将该混合物倾入冰水中。抽滤收集固体，用水洗涤并风干，得到179mg(78％)的26，为白色结晶固体。1H-NMR(DMSO-d6)δ 0.47，1.05，1.44和1.62-1.99(各为m，9H)，2.49(s，3H)，2.15-2.30，2.35，2.56，2.78，3.09，3.04-3.80，4.05，4.15和4.32(各为m，8H)，3.92(s，3H)，4.92(m，1H)，6.82，6.95，7.11，7.77，8.20，8.57和8.75(m，9H)；MS(FAB)m/z 523(m++1)；C28H34N4O6的分析计算值C，64.35；H，6.56；N，10.72。实测值C，55.58；H，5.89；N，8.75。实施例23(S)-3-甲氧基-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于0℃，向4-羟基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(3.00g，15.29mmol)、(S)-N-Boc-脯氨醇(3.08g，15.30mmol)、三苯膦(4.81g，18.34mmol)在THF(50ml)中的搅拌溶液中加入DIAD(3.61ml，18.33mmol)。将得到的混合物在回流下加热6.5小时。冷却至室温后，蒸发该混合物，经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到(S)-3-甲氧基-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸乙酯，为一种胶状物。使上面的(S)-3-甲氧基-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸乙酯溶于二氯甲烷(50ml)和TFA(45ml)中。于室温下将该混合物搅拌2天。真空浓缩得到的混合物，用饱和碳酸氢钠使呈碱性。用二氯甲烷提取混合物，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。蒸发溶剂，残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(20∶1，v/v)作为洗脱剂，得到3.27g(两步77％)的(S)-3-甲氧基-4-(2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸乙酯，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ 1.39(t，3H，J＝7.1Hz)，1.52-1.59(m，1H)，1.76-1.88(m，2H)，1.92-2.01(m，1H)，2.92-3.06(m，2H)，3.56-3.63(m，1H)，3.90(s，3H)，3.91-4.02(m，2H)，4.35(q，2H，J＝7.1Hz)，6.89(d，1H，J＝8.3Hz)，7.54 (d，1H，J＝2.0Hz)，7.65(dd，1H，J＝2.0，8.3Hz)。
向(S)-3-甲氧基-4-(2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸乙酯(424mg，1.52mmol)的DMF(8ml)的搅拌溶液中加入3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(728mg，1.52mmol)和三乙胺(0.26ml，1.87mmol)。于室温下，将得到的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用1N HCl、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空蒸发掉溶剂，残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到830mg(95％)的(S)-3-甲氧基-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸乙酯，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ 1.38(t，3H，J＝7.3Hz)，1.88-2.20(m，4H，m)，2.24(m，3H)，3.44-3.50(m，1H)，3.53-3.58(m，7H)，3.82(s，3H)，4.09-4.17(m，1H)，4.22-4.25(m，1H)，4.35(q，2H，J＝7.3Hz)，4.38-4.49(m，1H)，6.71-6.78(m，1H)，6.99(d，1H，J＝8.3Hz)，7.04-7.07(m，1H)，7.16-7.19(m，2H)，7.49-7.66(m，3H)，8.06(d，1H，J＝8.3Hz)。
向(S)-3-甲氧基-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸乙酯(760mg，1.32mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(10ml)。将得到的混合物在回流下加热过夜。冷却至室温后，将该混合物倾入1N HCl(100ml)中，收集固体。用乙醚洗涤粗品固体，得到429mg(59％)的27，为黄色无定形固体。mp 132-135；IR(KBr)1707 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.84-2.18(m，4H)，2.25(s，3H)，2.49-2.51(m，2H)，3.29-3.59(m，4H)，3.80(s，3H)，3.82(s，3H)，4.00-4.05(m，1H)，6.53-8.01(m，10H)，8.45(s，1H)，8.54(s，1H)，12.63(bs，1H)；MS(FAB)m/z 548(M++1)。实施例24(S)-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]邻苯二酸
于0℃，向4-羟基邻苯二甲酸二甲酯(3.00g，14.27mmol)、N-Boc-脯氨醇(2.87g，14.26mmol)、三苯膦(4.49g，17.12mmol)在THF(50ml)中的搅拌溶液中加入DIAD(3.40ml，17.27mmol)。将得到的混合物在回流下加热过夜。蒸发得到的混合物，残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到5.75g(q.y.)的(S)-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲氧基]邻苯二甲酸二甲酯，为一种油。1H-NMR(CDCl3)δ 1.47(s，9H)，1.86-2.05(m，4H)，3.36-3.40(m，2H)，3.87(m，3H)，3.91(s，3H)，3.96-4.19(m，3H)，7.03-7.24(m，2H)，7.80(m，1H)。
向(S)-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲氧基]邻苯二甲酸二甲酯(5.75g，14.62mmol)的二氯甲烷(25ml)的溶液中加入TFA(20ml)，于室温下，将得到的混合物搅拌50分钟。真空浓缩得到的混合物，用饱和碳酸氢钠使呈碱性。用二氯甲烷提取混合物，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到790mg(18％)的(S)-4-(2-吡咯烷基甲氧基)邻苯二甲酸二甲酯，为一种棕色油。1H-NMR(CDCl3)δ 1.48-1.57(m，1H)，1.72-1.84(m，2H)，1.89-1.98(m，2H)，2.91-3.03(m，2H)，3.48-3.54(m，1H)，3.82-3.97(m，共8H)，6.98(dd，1H，J＝2.4，8.8Hz)，7.06(d，1H，J＝2.4Hz)，7.78(d，1H，J＝8.8Hz)。
向(S)-4-(2-吡咯烷基甲氧基)邻苯二甲酸二甲酯(212mg，0.72mmol)的DMF(8ml)的搅拌溶液中加入3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(346mg，0.72mmol)和三乙胺(120ml，0.86mmol)，将混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释得到的混合物，用1N HCl、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空蒸发掉溶剂，得到413mg(97％)的(S)-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]邻苯二甲酸二甲酯，为一种油。1H-NMR(CDCl3)δ 1.92-2.12(m，4H)，2.29(br s，3H)，3.51-3.64(m，7H)，3.87(s，3H)，3.89(s，3H)，4.10-4.19(m，2H)，4.44(m，1H)，6.73-8.02(多个m，共12H)。
于室温下，向(S)-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]邻苯二甲酸二甲酯(413mg，0.70mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(10ml)，然后将得到的混合物在回流下加热过夜。冷却至室温后，将该反应混合物倾入1N HCl(100ml)中。收集固体，用水洗涤并风干。用乙醚洗涤粗品固体，得到310mg(79％)的28，为黄色无定形固体。IR(KBr)1701cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.87-2.18(m，4H)，2.25(s，3H)，2.50(s，2H)，3.38-3.60(m，4H)，3.83(s，3H)，4.00-4.14(m，1H)，6.74-8.02(多个m，10H)，8.46(s，1H)，8.54(s，1H)；MS(FAB)m/z 562(M++1)。实施例253-氯-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸
于室温下，向3-氯-4-羟基苯甲酸甲酯(600mg，3.215mmol)、N-叔丁氧基羰基脯氨醇(647.1mg，3.215mmol)和三苯膦(1.01g，3.858mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中滴加偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)(0.8ml，3.890mmol)，于室温下，将混合物搅拌3天，于70℃搅拌18小时。真空蒸发反应混合物，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.147g(97％)的3-氯-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯，为一种油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.46，1.48(各为s，9H)，1.59-1.63(br，1H)，1.88(br s，1H)，2.05(s，1H)，2.05-2.21(m，2H)，3.34-3.45(br m，1.5H)，3.89(s，3H)，3.97(br m，0.5H)，4.21(br s，2H)，7.05(d，J＝8.8Hz，1H)，7.90(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，8.04(d，J＝2.0Hz，1H)；MS(FAB)m/z 370(M++1)。
于0℃，向3-氯-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(1.14g，3.10mmol)的二氯甲烷(20ml)的搅拌溶液中加入TFA(5ml)，于室温下搅拌反应混合物2小时。减压除去溶剂，用1N氢氧化钠处理残留物，用氯仿提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经氢氧化钾干燥并减压浓缩，得到741mg(89％)的3-氯-4-(2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯，为黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.60-1.67(m，1H)，1.78-2.02(m，3H)，2.93-2.98(m，1H)，3.03-3.09(m，1H)，3.59(dt，J＝2.0，9.3Hz，1H)，3.89(s，3H)，3.98(dd，J＝6.3，8.8Hz，1H)，4.05(dd，J＝4.9，9.3Hz，1H)，6.93(d，J＝8.8Hz，1H)，7.90(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，8.04(d，J＝2.0Hz，1H)；MS(FAB)m/z 270(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(500mg，1.04mmol)、3-氯-4-(2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(281mg，1.04mmol)、三乙胺(0.17ml，1.25mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌1小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到3-氯-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸甲酯(620mg，1.04mmol)，为白色结晶固体。向该化合物的THF(8ml)和水(2ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(74.9mg，3.126mmol)，于室温下将该混合物搅拌2天。用氯仿稀释该混合物，用1N HCl处理。用盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥并真空蒸发。使粗品固体从正己烷-乙酸乙酯-氯仿中重结晶得到561.2mg(98％)的29，为白色结晶物质。IR(KBr)1676，1599，1487，1267，758，754cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.82-2.24(m，4H)，2.25(s，3H)，3.48-3.60(m，4H)，3.78(s，3H)，4.18(m，2H)，4.31(m，1H)，6.74(dd，J＝1.5，8.3Hz，1H)，6.84(d，J＝2.0Hz，1H)，6.91-6.95(m，1H)，7.11-7.17(m，3H)，7.79(dd，J＝2.0，8.3Hz，2H)，7.85(d，J＝2.0Hz，1H)，7.98(d，J＝8.3Hz，1H)，8.53(s，1H)，8.58(s，1H)；MS(FAB)m/z 552(M++1)。实施例263，5-二氯-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸
于室温下，向3，5-二氯-4-羟基苯甲酸甲酯(600mg，2.714mmol)、N-叔丁氧基羰基脯氨醇(546mg，2.714mmol)和三苯膦(854mg，3.257mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中滴加DIAD(0.68ml，3.283mmol)，于室温下，将混合物搅拌3天，于70℃搅拌18小时。浓缩反应混合物，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到988.8mg(90％)的4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3，5-二氯苯甲酸甲酯，为一种淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.44(s，9H)，1.88-2.15(br m，3H)，2.34(br s，1H)，3.40-3.44(m，2H)，3.92(s，3H)，3.92，4.14(m，1H)，4.18(br s，2H)，7.98(s，2H)；MS(FAB)m/z 404(M++1)。
于0℃，向4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3，5-二氯苯甲酸甲酯(988mg，3.248mmol)的二氯甲烷(20ml)的搅拌溶液中加入TFA(5ml)，于室温下搅拌反应混合物2小时。减压除去溶剂，用1N氢氧化钠处理残留物，用氯仿提取该溶液。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到672mg(68％)的3，5-二氯-4-(2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯，为淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.62-1.69(m，1H)，1.78-1.86(m，2H)，1.89-1.99(m，1H)，2.92-2.98(m，1H)，3.04-3.09(m，1H)，3.55-3.60(m，1H)，3.91(s，3H)，4.01(dd，J＝6.8，8.8Hz，1H)，4.08(dd，J＝4.9，8.8Hz，1H)，7.97(s，2H)；MS(FAB)m/z 304(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(385.8mg，0.803mmol)、3，5-二氯-4-(2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(244.3mg，0.803mmol)、三乙胺(0.13ml，0.964mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌1小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(1∶2，v/v)作为洗脱剂，得到3，5-二氯-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸甲酯，为油状物。向该化合物的THF(8ml)和水(2ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(57.7mg，2.409mmol)，于室温下将该混合物搅拌过夜。真空浓缩该混合物，用氯仿稀释残留物，用1N HCl、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从正己烷-甲醇-氯仿中重结晶得到428.2mg(91％)的30，为白色结晶粉末。IR(KBr)1618，1535，1454，1257，754cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.83-2.24(m，4H)，2.24(s，3H)，3.50-3.58(m，4H)，3.84(s，3H)，3.98-4.05(m，1H)，4.15(dd，J＝2.9，8.7Hz，1H)，4.29(br m，1H)，6.74(d，J＝8.3Hz，1H)，6.87(s，1H)，6.93(t，J＝7.3Hz，1H)，7.11(d，J＝7.8Hz，1H)，7.16(d，J＝8.3Hz，1H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，7.86(s，1H)，7.87(d，J＝9.8Hz，1H)，7.99(d，J＝8.3Hz，1H)，8.49(s，1H)，8.58(s，1H)；MS(FAB)m/z 586(M++1)。实施例274-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-硝基苯甲酸
于室温下，向4-羟基-3-硝基苯甲酸(3.00g，0.0164mol)的甲醇-苯(1∶4，v/v)的搅拌溶液中滴加2.0M的TMSCHN2的正己烷溶液(8.2ml，0.0164mol)。于室温下搅拌生成的溶液4小时后，真空蒸发该混合物。油状残留物经硅胶层析，用氯仿作为洗脱剂，得到4.23g(79％)的4-羟基-3-硝基苯甲酸甲酯，为淡黄色结晶物质。
于0℃，向N-叔丁氧基羰基脯氨醇(1.02g，5.07mmol)、4-羟基-3-硝基苯甲酸甲酯(1.00g，5.07mmol)和三苯膦(1.46g，5.58mmol)的THF(10ml)的搅拌混合物中滴加偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)(95％)(1.16ml，5.58mmol)。将得到的混合物在回流下加热46小时。冷却后，真空蒸发混合物。使残留物溶于二氯甲烷(10ml)中，加入TFA(10ml)。于室温下搅拌该溶液0.5小时后，真空蒸发该溶液。将水加入残留物中并用乙酸乙酯洗涤。通过加入饱和碳酸氢钠中和含水层，用乙酸乙酯提取。经硫酸钠干燥提取物，真空蒸发，得到0.698g(49％)的3-硝基-4-(2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯，为一种胶状物。
于室温下，将3-硝基-4-(2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯(0.668g，2.38mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(1.12g，3.57mmol)、1-羟基苯并三唑(HOBt)(0.482g，3.57mmol)、4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(43.6mg，0.357mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)(0.684g，3.57mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌15小时。将乙酸乙酯加入该混合物中，用1N HCl、饱和碳酸氢钠和盐水顺序洗涤。经硫酸钠干燥有机层并真空蒸发。残留物经硅胶层析，用乙醇-氯仿(1∶20，v/v)作为洗脱剂，得到0.927g(68％)的4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-硝基苯甲酸甲酯，为黄色结晶物质。
将4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-硝基苯甲酸甲酯(0.917g，1.59mmol)在THF(10ml)和1N氢氧化钠(2.38ml，2.38mmol)中的混合物在回流下加热2小时。冷却后，将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发，得到0.826g(92％)的31，为黄色结晶固体。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.91，2.09(1H，3H，各为m)，2.28(3H，s)，3.54-3.62(4H，m)，3.64(3H，s)，4.15，4.59(各为1H，各为d，J＝7.8Hz)，4.46(1H，m)，6.66，7.22(各为1H，各为s)，6.72(1H，d，J＝8.3Hz)，7.11-7.28(4H，m)，7.46(1H，d，J＝7.8Hz)，7.74(1H，d，J＝7.8Hz)，7.85(1H，s)，8.17(1H，dd，J＝2.0，8.8Hz)，8.48(1H，d，J＝2.4Hz)；MS(FAB)m/z 563(M++1)。实施例283-氨基-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
将4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-硝基苯甲酸(101mg，0.190mmol)和5％Pd-C(0.247g)的甲醇中的搅拌混合物于1个大气压下氢化48小时。除去不溶性催化剂，真空蒸发滤液。残留物经硅胶层析，用乙醇-氯仿(1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到61.0mg(60％)的32，为结晶物质。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.95(4H，m)，2.23(3H，s)，3.60，3.91，4.10，4.34(5H，各为m)，3.81(3H，s)，4.88(2H，m)，6.74(1H，d，J＝8.3Hz)，6.86-7.28(5H，m)，7.78 (1H，d，J＝7.8Hz)，7.99(1H，d，J＝8.3Hz)，8.30(1H，s)，8.45，8.55(各为1H，各为s)；MS(FAB)m/z 533(M++1)。实施例294-[2-[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙炔基]苯甲酸
向4-氨基-3-甲氧基苯基乙酸苄酯(1.36g，5mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-氟代苯酯(561μl，5mmol)和催化量的三乙胺。搅拌得到的混合物3小时。通过加入水(10ml)猝灭该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发，残留物经硅胶层析，用氯仿作为洗脱剂，得到2.06g(q.y.)的4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸苄酯，为绿色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ 3.63(2H，s)，3.82(3H，s)，5.14(2H，s)，6.79-7.37(12H，m)，8.01(1H，d，J＝7.8Hz)，8.09-8.14(1H，m)。
向4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸苄酯(2.04g，5mmol)的THF(40ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(40ml)。将得到的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入1N HCl(10ml)中，抽滤收集产生的沉淀。使残留物从氯仿-乙醇中重结晶，得到1.04g(66％)的4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸，为白色结晶粉末。mp 185-188(d)；1H-NMR(DMSO-d6)δ 3.50(2H，s)，3.82(3H，s)，6.78(1H，dd，J＝1.4和8.3Hz)，6.92(1H，d，J＝1.4Hz)，6.95-7.01(1H，m)，7.10-7.14(1H，m)，7.19-7.24(1H，m)，8.01(1H，d，J＝8.3Hz)，8.14-8.18(1H，m)，8.72(1H，s)，9.17(1H，s)；MS(FAB)m/z 319(M++1)。C16H15N2O4F的分析计算值C，60.37；H，4.75；N，8.80。实测值C，60.20；H，4.82；N，8.67。
将4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(255mg，0.8mmol)、2-[2-(4-乙氧基羰基苯基)乙炔基)吡咯烷(195mg，0.8mmol)、EDC(230mg，1.2mmol)、DMAP(98mg，0.8mmol)在DMF(20ml)中的混合物搅拌过夜。将该反应混合物倾入1N HCl中，抽滤收集产生的沉淀，并使其溶于氯仿中。经硫酸镁干燥该溶液并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到所需化合物，将其溶于THF(8ml)中。将0.25N氢氧化钠(8ml)加入该溶液中，搅拌得到的混合物过夜。将该混合物倾入1N HCl中，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。使残留物从氯仿-正己烷中重结晶，得到144mg(37％)的33，为淡黄色结晶粉末。mp 152-155(d)；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.92-2.27(4H，m)，2.50(2H，s)，3.33-3.78(2H，m)，3.80和3.82(共3H，各为s)，4.88-5.12(1H，m)，6.77-7.24和7.99-8.20(共7H，m)，7.48和7.52(2H，d，J＝8.3Hz，各自)，7.91(2H，d，J＝8.3Hz)，8.72(1H，s)，9.18(1H，s)，13.11(1H，br-s)；MS(FAB)m/z 516(M++1)。C29H26N3O5F·2H2O的分析计算值C，63.15；H，5.48；N，7.62。实测值C，63.58；H，5.15；N，7.22。实施例304-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]-3-甲基苯甲酸
于室温下，向4-碘-2-甲基苯酚(465mg，1.987mmol)、N-叔丁氧基羰基脯氨醇(400mg，1.987mmol)和三苯膦(625mg，2.384mmol)的THF(7ml)的搅拌溶液中滴加DIAD(0.5ml，2.404mmol)，于70℃，将混合物搅拌1 3小时。真空浓缩反应混合物，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(9∶1，v/v)作为洗脱剂，得到645.3mg(78％)的4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-1-碘-3-甲基苯，为一种淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.47(s，9H)，1.83-1.89(m，1H)，1.96-2.04(m，3H)，2.16(s，3H)，3.37-3.43(br m，2H)，3.81，3.94(各为br m，1H)，4.08-4.18(m，2H)，6.62(br s，1H)，7.42(s，2H)；MS(FAB)m/z 418(M++1)。
向4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-1-碘-3-甲基苯(645.3mg，1.546mmol)的DMSO(7ml)和甲醇(6ml)的搅拌溶液中加入三乙胺(0.47ml，3.401mmol)、Pd(OAc)2(17.4mg，0.077mmol)和1，3-双(二苯基膦基)丙烷(31.46mg，0.077mmol)。向搅拌的混合物中通入CO气体10分钟。于70℃将混合物搅拌2天并浓缩。用乙酸乙酯稀释残留物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到301.6mg(56％)的4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3-甲基苯甲酸甲酯，为一种油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.47(s，9H)，1.86-2.10(br m，4H)，2.33(s，3H)，3.32-3.50(br m，2H)，3.88(s，3H)，3.88，4.04(各为br m，1H)，4.13-4.20(m，2H)，6.89(br m，1H)，7.82(s，1H)，7.85(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z350(M++1)。
于0℃，向4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3-甲基苯甲酸甲酯(301.6mg，0.863mmol)的二氯甲烷(6ml)的搅拌溶液中加入TFA(1.2ml)，于室温下搅拌混合物1小时。减压除去溶剂，通过加入1N氢氧化钠使残留物呈碱性。用氯仿提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到192.5mg(90％)的3-甲基-4-(2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯，为一种油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.58-1.65(m，1H)，1.78-2.00(m，3H)，2.24(s，3H)，2.97(dt，J＝6.8，10.2Hz，1H)，3.05(dt，J＝5.9，6.8Hz，1H)，3.54-3.58(m，1H)，3.87(s，3H)，3.92(dd，J＝6.3，9.3Hz，1H)，3.99(dd，J＝4.9，9.3Hz，1H)，6.81(d，J＝8.3Hz，1H)，7.83(s，1H)，7.85(dd，J＝2.0，8.3Hz，1H)；MS(FAB)m/z 250(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(211.3mg，0.44mmol)、3-甲基-4-(2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(109.7mg，0.44mmol)、三乙胺(73.6ul，0.528mmol)在DMF(2ml)中的混合物搅拌1.5小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]-3-甲基苯甲酸甲酯(241.6mg，q.y.)，为一种油。向该化合物的THF(4.4ml)和水(1.1ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(32mg，1.32mmol)，于室温下将该反应混合物搅拌过夜。用氯仿稀释混合物，通过加入1N HCl酸化。用盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从正己烷-乙酸乙酯-氯仿-甲醇中重结晶得到126.3mg(54％)的34，为白色结晶粉末。IR(KBr)1685，1606，1454，1257，752cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.87-2.10(m，4H)，2.12(s，3H)，2.25(s，3H)，3.51-3.71(m，4H)，3.76(s，3H)，4.08-4.18(m，2H)，4.34(m，1H)，6.74(dd，J＝1.5，9.8Hz，1H)，6.84(d，J＝1.5Hz，1H)，6.94(t，J＝6.8Hz，1H)，7.06(d，J＝8.8Hz，1H)，7.12(d，J＝7.8Hz，1H)，7.16(d，J＝7.8Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.76(dd，J＝2.0，8.3Hz，1H)，7.79(d，J＝7.8Hz，1H)，7.99(d，J＝8.3Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.54(s，1H)；MS(FAB)m/z 532(M++1)。C30H33N3O6·1/2H2O的分析计算值C，66.65；H，6.34；N，7.77。实测值C，66.16；H，6.37；N，7.50。实施例31(S)-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]间苯二酸
向4-乙酰氧基间苯二酸二甲酯(1.52g，6.03mmol)的甲醇(70ml)的溶液中加入饱和碳酸氢钠，于室温下，将得到的混合物搅拌3小时。将得到的混合物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。蒸发溶剂得到1.27g(q.y.)的4-羟基间苯二酸二甲酯，为白色结晶粉末。1H-NMR(CDCl3)δ 3.91(s，3H)，3.99(s，3H)，7.01(d，1H，J＝8.8Hz)，8.11(dd，1H，J＝2.4，8.8Hz)，8.55(d，1H，J＝2.4Hz)
于室温下，向4-羟基间苯二酸二甲酯(1.27g，6.04mmol)、(S)-N-Boc-脯氨醇(1.22g，6.06mmol)、三苯膦(1.90g，7.24 mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入DIAD(1.43ml，7.26mmol)。将得到的搅拌的混合物在回流下加热15小时。冷却至室温后，蒸发得到的混合物，残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到2.10g(88％)的(S)-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲氧基]间苯二酸二甲酯，为一种黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ 1.26(s，9H)，1.85-2.16(m，3H)，3.36-3.46(m，2H)，3.90(s，6H)，4.11-4.31(m，2H)，4.95-5.02(m，2H)，7.09(dd，1H，J＝9.3，24.9Hz)，8.11-8.14(m，1H)，8.46(d，1H，J＝9.3Hz)
于室温下，将(S)-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲氧基]间苯二酸二甲酯(2.01g，5.11mmol)、TFA(20ml)和二氯甲烷(25ml)的混合物搅拌1.5小时。真空浓缩得到的混合物，用饱和碳酸氢钠使呈碱性。用二氯甲烷提取混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(9∶1，v/v)作为洗脱剂，得到0.80g(53％)的(S)-4-(2-吡咯烷基甲氧基)间苯二甲酸二甲酯，为一种黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ 1.71(m，1H)，1.89(m，2H)，2.00(m，1H)，3.05-3.13(m，2H)，3.67(m，1H)，3.90(s，3H)，3.91(s，3H)，4.05-4.18(m，2H)，7.00(d，1H，J＝8.8Hz)，8.14(dd，1H，J＝2.4，8.8Hz)，8.50(d，1H，J＝2.4Hz)。
向(S)-4-(2-吡咯烷基甲氧基)间苯二甲酸二甲酯(616mg，2.10mmol)的DMF(13ml)的搅拌溶液中加入3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟代酯(1.00g，2.08mmol)和三乙胺(425μl，3.12mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌3.5小时。用乙酸乙酯稀释得到的混合物，用1N HCl、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.41g(q.y.)的(S)-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]间苯二甲酸二甲酯，为一种黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ 1.86-2.29(m，4H)，2.30(s，3H)，3.47-3.57(m，2H)，3.58(s，3H)，3.59(s，2H)，3.83(s，3H)，3.91(s，3H)，4.22-4.37(m，2H)，4.42-4.47(m，1H)，6.44-8.46(多个m，12H)。
向(S)-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]间苯二甲酸二甲酯(1.41g，2.39mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(20ml)，将得到的混合物在回流下加热过夜。冷却至室温后，将该混合物倾入1N HCl(150ml)中，收集固体。使粗品固体从氯仿-甲醇中重结晶，得到140mg(10％)的35，为白色结晶粉末。1H-NMR(CDCl3)δ1.83-2.18(m，4H)，2.24(s，3H)，3.44-3.55(m，4H)，3.59(s，2H)，3.80(s，3H)，4.05-4.24(m，2H)，4.28-4.32(m，1H)，6.73-8.55(多个m，共12H)。MS(FAB)m/z 562(M++1)。C30H31N3O8·4H2O的分析计算值C，56.87；H，6.20；N，6.63。实测值C，56.73；H，5.56；N，6.52。实施例323-甲氧基-4-[2-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]乙炔基]苯甲酸
将3-甲氧基-4-硝基苯甲酸甲酯(1.20g，5.7mmol)和5％Pd-C(1.0g)的乙醇(30ml)和THF(20ml)中的搅拌混合物于1个大气压下氢化过夜。过滤该混合物，蒸发滤液。残留物经硅胶层析，用氯仿作为洗脱剂，得到的固体通过从氯仿-正己烷中重结晶进一步纯化，得到805mg(78％)的4-氨基-3-甲氧基苯甲酸甲酯，为白色片状物。mp 126-128；IR(KBr)3475，1700cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ 3.86(3H，s)，3.89(3H，s)，4.21(2H，br s)，6.66(1H，d，J＝8.3Hz)，7.45(1H，d，J＝1.9Hz)，7.54(1H，dd，J＝1.9和8.3Hz)；MS(FAB)m/z 182(M++1)；C9H11NO3的分析计算值C，59.66；H，6.12；N，7.73。实测值C，59.65；H，6.15；N，7.65。
于0℃，将4-氨基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(725mg，4mmol)的乙醇(10ml)的搅拌溶液加入稀硫酸(由0.5ml硫酸和10ml水制备)中。将亚硝酸钠(331mg，4.8mmol)的水(10ml)溶液加入该混合物中。于相同温度下搅拌0.5小时后，将该混合物倾入冷(0℃)的、搅拌的KI(1.83g，11mmol)和催化剂Cu在水(100ml)的悬浮溶液中。于室温下剧烈搅拌该混合物1小时，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-碘-3-甲氧基苯甲酸甲酯和3-甲氧基苯甲酸甲酯的混合物(748mg)，为一种无色油。
向该油中加入Pd(PPh3)4(150mg，0.13mmol)、CuI(57mg，0.3mmol)和i-Pr2NH(10ml)。在氮气氛下搅拌该混合物1小时，将1-(叔丁氧基羰基)-2-乙炔基吡咯烷(488mg，2.5mmol)的i-Pr2NH(10ml)中的溶液加入该混合物中。搅拌2小时后，将该混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到431mg(48％)的1-(叔丁氧基羰基)-2-[2-(2-甲氧基-4-甲氧基羰基苯基)乙炔基]吡咯烷，为一种黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ 1.49(9H，s)，1.77-2.14(4H，m)，3.36-3.51(2H，m)，3.90(3H，s)，3.91(3H，s)，4.60-4.81(1H，m)，7.36-7.39(1H，m)，7.51(1H，s)，7.55-7.57(1H，m)。
向1-(叔丁氧基羰基)-2-[2-(2-甲氧基-4-甲氧基羰基苯基)乙炔基]吡咯烷(395mg，1.1mmol)的二氯甲烷(3ml)的搅拌溶液中加入TFA(3ml)。搅拌得到的混合物1小时。真空浓缩该混合物，通过加入饱和碳酸氢钠使呈碱性，用氯仿提取。用水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发，得到238mg(84％)的2-[2-(2-甲氧基-4-甲氧基羰基苯基)乙炔基]吡咯烷，为一种黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.81-2.16(4H，m)，2.97-3.17(2H，m)，3.91(6H，s)，4.13-4.15(1H，m)，7.41(1H，d，J＝8.3Hz)，7.51(1H，s)，7.56(1H，d，J＝8.3Hz)。
将2-[2-(2-甲氧基-4-甲氧基羰基苯基)乙炔基]吡咯烷(233mg，0.9mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(314mg，1mmol)、EDC(268mg，1.4mmol)、DMAP(110mg，0.9mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入1N HCl中，抽滤收集产生的固体。使得到的固体溶于氯仿中，经硫酸镁干燥该溶液并蒸发。残留物经硅胶短柱层析，用乙酸乙酯作为洗脱剂，得到一种油。使该油溶于THF(5ml)中，搅拌下将0.25N氢氧化钠加入该溶液中。将该溶液倾入冰-1N HCl中得到固体。收集该固体，用水洗涤并风干。使粗品固体从氯仿-正己烷中重结晶得到215mg(44％)的36，为白色结晶粉末。mp 141-145；IR(KBr)3338，2956，2935，2875，2593，1711cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.91-2.14(4H，m)，2.24(3H，s)，3.38-3.68(4H，m)，4.88-5.08(1H，m)，6.76-8.56(12H，m)；MS(FAB)m/z 542(M++1)。实施例333-N，N-二甲基氨基-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将4-羟基-3-硝基苯甲酸甲酯(3.22g，0.0163mol)和5％Pd-C(12.9g)的甲醇(30ml)中的搅拌混合物于1个大气压下氢化70小时。除去不溶性催化剂，真空蒸发滤液。残留物经硅胶层析，用乙醇-氯仿(1∶20，v/v)作为洗脱剂，得到1.89g(69％)的3-氨基-4-羟基苯甲酸甲酯，为淡棕色浆状物。
于室温下，将3-氨基-4-羟基苯甲酸甲酯(1.07g，6.40mmol)和5％Pd-C(2.14g)在甲醇(20ml)、37％甲醛水溶液(1.08ml，0.0122mol)和1NHCl(6.1ml)中的搅拌混合物于1个大气压下氢化26小时。除去不溶性催化剂，真空蒸发滤液。残留物经硅胶层析，用乙酸乙酯-正己烷(1∶10，v/v)作为洗脱剂，得到0.817g(70％)的3-(N，N-二甲基氨基)-4-羟基苯甲酸甲酯，为一种浆状物。
于0℃，向3-(N，N-二甲基氨基)-4-羟基苯甲酸甲酯(0.817g，4.18mmol)、N-叔丁氧基羰基脯氨醇(0.926g，4.60mmol)、三苯膦(1.21g，4.60mmol)的THF(20ml)的搅拌混合物中滴加DIAD(95％)(0.953ml，4.60mmol)。将得到的混合物在回流下加热41小时。冷却后，真空蒸发混合物。残留物经硅胶层析，用乙酸乙酯-正己烷(1∶10-1∶6，v/v)作为洗脱剂，得到一种浆状物，该浆状物可无需进一步纯化而用于随后的反应。使该浆状物溶于二氯甲烷(10ml)中，加入TFA(10ml)。于室温下搅拌该溶液5小时后，真空蒸发该溶液。将水加入残留物中，用氯仿洗涤。通过加入饱和碳酸氢钠中和含水层，用氯仿提取。经硫酸钠干燥提取物，真空蒸发，得到1.03g(89％)的3-(N，N-二甲基氨基)-4-(2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯，为一种胶状物。
于室温下，将3-(N，N-二甲基氨基)-4-(2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯(0.529g，1.90mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(0.597g，1.90mmol)、HOBt(0.308g，2.28mmol)、4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(23.2mg，0.190mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)(0.437g，2.28mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌15小时，通过小心加入1N HCl中和该混合物，用乙酸乙酯提取。经硫酸钠干燥提取物并真空蒸发，得到0.607g(56％)的3-N，N-二甲基氨基-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯，为白色结晶物质。
于室温下，将3-N，N-二甲基氨基-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(0.600g，1.04mmol)在THF(10ml)和0.25N氢氧化钠(5ml，1.25mmol)中的混合物搅拌21小时。将氯仿加入该混合物中，用水(100ml)-1N氢氧化钠(4ml)的混合物提取。用饱和氯化铵中和提取物，用氯仿提取。经硫酸钠干燥提取物并真空蒸发，得到428mg(70％)的37，为白色结晶固体。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.88，1.99和2.11(4H，各为m)，2.24(3H，s)，2.67(6H，s)，3.33(2H，m)，3.58(2H，m)，4.05-4.32(3H，m)，6.75(1H，d，J＝7.3Hz)，6.92-6.95(1H，m)，7.05(1H，d，J＝8.3Hz)，7.11-7.17(2H，m)，7.42(1H，s)，7.52(1H，d，J＝7.8Hz)，7.79(1H，d，J＝7.8Hz)，8.00(1H，d，J＝7.8Hz)，8.31(1H，s)，8.46，8.55(各为1H，各为s)；MS(FAB)m/z 533(M++1)。实施例343-氟-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸
于室温下，向4-溴-2-氟代苯酚(217ul，2.002mmol)、N-叔丁氧基羰基脯氨醇(403mg，2.002mmol)和三苯膦(630mg，2.403mmol)的THF(7ml)的搅拌溶液中加入DIAD(477ul，2.423mmol)。将得到的混合物于室温下搅拌6小时，然后于70℃搅拌过夜。真空浓缩混合物，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到549.4mg(73％)的1-溴-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3-氟代苯，为一种油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.46(s，9H)，1.85(br m，1H)，1.90-2.10(br s，3H)，3.30-3.47(m，2H)，3.85，4.04(各为br s，1H)，4.11-4.20(m，2H)，6.82-6.98(m，1H)，7.13-7.26(m，2H)；MS(FAB)m/z 374(M++1)。
向1-溴-4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3-氟代苯(549.4mg，1.468mmol)的DMSO(6ml)和甲醇(5ml)的搅拌溶液中加入三乙胺(448ul，3.229mmol)、Pd(OAc)2(36.2mg，0.161mmol)和1，3-双(二苯基膦基)丙烷(66.4mg，0.161mmol)。向该混合物中通入CO气体10分钟。在CO气流下，于70℃将得到的混合物搅拌2天。浓缩该混合物后，用乙酸乙酯稀释残留物。用盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到323.0mg(62％)的4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3-氟苯甲酸甲酯，为淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.87(br s，1H)，1.95-2.10(m，3H)，3.34-3.44(br m，2H)，3.89(s，3H)，3.94和4.11-4.26(各为br m，3H)，7.03-7.11(m，1H)，7.75-7.80(m，2H)；MS(FAB)m/z 354(M++1)。
于0℃，向4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3-氟苯甲酸甲酯(323.0mg，0.914mmol)的二氯甲烷(6.5ml)的搅拌溶液中加入TFA(1.3ml)，于室温下搅拌混合物1.5小时。减压除去溶剂，通过加入1N氢氧化钠使残留物呈碱性。用氯仿提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到174.8mg(76％)的3-氟-4-(2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯，为一种棕色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.54-1.63(m，1H)，1.76-2.02(m，3H)，2.93-3.07(m，2H)，3.57(ddd，J＝4.9，6.9，14.3Hz，1H)，3.89(s，3H)，3.97(dd，J＝6.8，9.3Hz，1H)，4.04(dd，J＝5.0，8.8Hz，1H)，6.98(t，J＝17.6Hz，1H)，7.73(dd，J＝2.0，11.7Hz，1H)，7.78(dt，J＝2.0，8.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z 253(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(324.5mg，0.676mmol)、3-氟-4-(2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(171.1mg，0.676mmol)、三乙胺(113ul，0.811mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(1∶2，v/v)作为洗脱剂，得到3-氟-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]-苯甲酸甲酯(365.1mg，0.664mmol)，为一种油。向该化合物的THF(4.4ml)和水(1.1ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(46.3mg，1.932mmol)，于室温下将该反应混合物搅拌过夜。用氯仿稀释混合物，通过加入1N HCl酸化。用盐水洗涤分离的有机层，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从正己烷-乙酸乙酯-氯仿中重结晶得到102mg(30％)的38，为白色结晶粉末。mp 123-126；IR(KBr)1616，1537，1282，756cm-1；1H-MR(400MHz，DMSO-d6)δ1.87-2.09(m，4H)，2.25(s，3H)，3.48-3.57(m，2H)，3.60(s，2H)，3.83(s，3H)，4.11-4.16(m，1H)，4.24(dd，J＝2.9，9.8Hz，1H)，4.28-4.34(br s，1H)，6.74(dd，J＝1.5，8.3Hz，1H)，6.87(s，1H)，6.94(t，J＝7.3Hz，1H)，7.12(d，J＝7.8Hz，1H)，7.1 5(t，J＝8.3Hz，1H)，7.34(t，J＝8.8Hz，1H)，7.66(dd，J＝2.0，12.2Hz，1H)，7.73(d，J＝9.3Hz，1H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，7.99(d，J＝7.8Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.55(s，1H)；MS(FAB)m/z 536(M++1)。C29H30FN3O6·0.5H2O的分析计算值C，63.96；H，5.74；N，7.72；F，3.49。实测值C，64.11；H，5.80；N，7.39；F，3.54。实施例354-[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基-3-甲氧基苯甲酸
将4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(318mg，1mmol)、2-(2-甲氧基-4-乙氧基羰基)苯氧基甲基吡咯烷(279mg，1mmol)、EDC(288mg，1.5mmol)和DMAP(122mg，1mmol)在DMF(20ml)中的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入1N HCl中，抽滤收集产生的固体。使固体溶于氯仿中，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到一种油，使该油溶于THF∶甲醇(4∶1，v/v，10ml)中。将0.25N氢氧化钠(8ml)加入该溶液中，使得到的搅拌的混合物在回流下加热3小时。将该混合物倾入1N HCl中。抽滤收集产生的固体。使溶于氯仿中，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物从氯仿-正己烷-乙醚中重结晶得到329mg(60％)的39，为白色结晶粉末。mp140-144；IR(KBr)3338，2956，2875，2607，1709cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.95-2.25(4H，m)，3.45-4.50(12H，m)，6.66-8.15(12H，m)；MS(FAB)m/z552(M++1)。实施例362-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸
于0℃，向6-羟基烟酸(500mg，3.594mmol)的苯(8ml)和甲醇(2ml)的搅拌溶液中滴加TMSCHN2(1.97ml，3.953mmol)，将混合物于室温下搅拌过夜。通过加入乙酸猝灭反应混合物，真空浓缩得到的混合物。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到269.8mg(49％)的2-羟基吡啶-5-甲酸甲酯，为白色结晶粉末。IR(KBr)3062，1657，1654，1612，1435，1300，1113，775，642cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 3.87(s，3H)，6.58(d，J＝9.8Hz，1H)，7.99(dd，J＝2.4，9.8Hz，1H)，8.19(d，J＝2.4Hz，1H)；MS(FAB)m/z 154(M++1)。C7H7NO3·1/4H2O的分析计算值C，53.33；H，4.80；N，8.89。实测值C，53.58；H，4.65；N，8.87。
于室温下，向2-羟基吡啶-5-甲酸甲酯(269.8mg，1.762mmol)、N-叔丁氧基羰基脯氨醇(354.6mg，1.762mmol)和三苯膦(554.6mg，2.114mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中缓慢加入DIAD(0.42ml，2.114mmol)，将得到的混合物于70℃搅拌6小时。浓缩反应混合物，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到262.5mg(44％)的2-[[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯，为一种油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.85-1.98(m，4H)，3.37(br s，2H)，3.92(s，3H)，4.12-4.33(br m，2H)，4.4(br s，1H)，6.75(m，1H)，8.15(m，1H)，8.79(m，1H)；MS(FAB)m/z 337(M++1)。
于0℃，向2-[[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯(262.5mg，0.870mmol)的二氯甲烷(5.3ml)的搅拌溶液中加入TFA(1.1ml)，于室温下搅拌得到的混合物1小时。减压除去溶剂，通过加入1N氢氧化钠使残留物呈碱性，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到173.1mg(94％)的2-[(2-吡咯烷基)甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯，为淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.49-1.58(ddt，J＝6.8，8.8Hz，1H)，1.72-1.87(m，2H)，1.90-1.99(m，1H)，2.92-3.05(m，2H)，3.50-3.57(ddd，J＝4.4，7.3，15.1Hz，1H)，3.91(s，3H)，4.23(dd，J＝7.8，10.7Hz，1H)，4.38(dd，J＝4.4，10.7Hz，1H)，6.78(d，J＝8.8Hz，1H)，8.15(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，8.80(d，J＝2.4Hz，1H)；MS(FAB)m/z237(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(351.7mg，0.732mmol)、2-[(2-吡咯烷基)甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯(173.0mg，0.732mmol)、三乙胺(122.4μl，0.878mmol)在DMF(5.2ml)中的混合物搅拌1小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(1∶5，v/v)作为洗脱剂，得到2-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯(338.4mg，87％)，为一种油。向该化合物的THF(5.6ml)和水(1.4ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(45.7mg，1.91mmol)，于室温下将该反应混合物搅拌过夜。用氯仿稀释混合物，用饱和氯化铵处理，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从正己烷-乙醚-氯仿-甲醇中重结晶得到193.8mg(59％)的40，为白色结晶粉末。mp 125-128；IR(KBr)1716，1600，1533，1255cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.67-2.03(m，4H)，2.50(s，3H)，3.33-3.42(m，1H)，3.52(m，2H)，3.58(d，J＝4.4Hz，1H)，3.83(s，3H)，4.27-4.31(m，2H)，4.42-4.47(m，1H)，6.73(d，J＝7.8Hz，1H)，6.87-6.95(m，3H)，7.11-7.17(m，2H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，7.99(d，J＝8.3Hz，1H)，8.14(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.56(s，1H)，8.69(d，J＝2.0Hz，1H)，13.06(br s，1H)；MS(FAB)m/z 519(M++1)。C28H30N4O6·1/2H2O的分析计算值C，63.75；H，5.92；N，10.62。实测值C，63.61；H，5.94；N，10.27。实施例373-甲氧基-4-[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苄基]-4-噻唑基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向五硫化二磷(27.4g，123.34mmol)和新鲜配制的无水硫化钠(4.8g，61.67mmol)的THF(200ml)的搅拌溶液中加入对-硝基苄基氰化物(2.0g，12.33mmol)。于室温下将得到的混合物搅拌17小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用10％磷酸钾洗涤。用二氯甲烷提取水层。经硫酸钠干燥提取物并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1-2∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.53g(64％)的4-硝基苄基硫代甲酰胺(carbothioamide)，为淡黄色结晶物质。IR(KBr)1529，1446，1326，1315，858cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 4.15(s，2H)，7.51(d，J＝8.3Hz，2H)，8.24(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(FAB)m/z197(M++1)；C8H8N2O2S的分析计算值C，48.97；H，4.11；N，14.28；S，16.34。实测值C，48.69；H，4.06；N，14.07；S，16.10。
向4-硝基苄基硫代甲酰胺(502.0mg，2.558mmol)的乙醇(5ml)的搅拌溶液中加入1，3-二氯-2-丙酮(649.6mg，5.16mmol)，将该混合物在回流下加热1小时。浓缩该混合物，用氯仿稀释残留物。用1N氢氧化钠、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到495.2mg(72％)4-[2-(4-硝基苄基)噻唑基]甲基氯，为一种淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 4.43(s，2H)，4.68(s，2H)，7.23(s，1H)，7.49(d，J＝8.8Hz，2H)，8.20(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(FAB)m/z 269(M++1)。
于0℃，向香草酸乙酯(308.0mg，1.570mmol)和甲醇钠(89mg，1.570mmol)的甲醇(6.5ml)中的搅拌溶液中加入在甲醇(1.4ml)中的4-[2-(4-硝基苄基)噻唑基]甲基氯(211.0mg，0.785mmol)。于室温下搅拌得到的混合物16小时，在回流下加热1天。减压除去溶剂，用氯仿提取残留物。用水、盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(2∶1，v/v)作为洗脱剂，得到201.7mg(60％)3-甲氧基-4-[2-(4-硝基苄基)-4-噻唑基]甲氧基苯甲酸乙酯，为一种淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.39(t，J＝7.3Hz，3H)，3.93(s，3H)，4.36(q，J＝7.3Hz，2H)，4.44(s，2H)，5.31(s，2H)，6.97(d，J＝8.3Hz，1H)，7.28(s，1H)，7.48(d，J＝8.8Hz，2H)，7.57(d，J＝2.0Hz，1H)，7.64(dd，J＝2.0，8.3Hz，1H)，8.20(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(FAB)m/z 429(M++1)。
将3-甲氧基-4-[2-(4-氨基苄基)-4-噻唑基]甲氧基苯甲酸乙酯(201.7mg，0.471mmol)和5％Pd/C(40mg)在乙醇(8ml)中的搅拌溶液于1个大气压下氢化24小时。过滤该混合物，浓缩滤液。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到87.8mg(47％)的3-甲氧基-4-[2-(4-氨基苄基)-4-噻唑基]甲氧基苯甲酸乙酯，为黄色结晶粉末。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.38(t，J＝7.3Hz，3H)，3.93(s，3H)，4.21(s，2H)，4.35(q，J＝7.3Hz，2H)，5.30(s，2H)，6.66(dd，J＝2.0，6.4Hz，2H)，6.97(d，J＝8.3Hz，1H)，7.09(d，J＝8.3Hz，2H)，7.18(s，1H)，7.56(d，J＝2.0Hz，1H)，7.64(dd，J＝2.0，8.3Hz，1H)；MS(FAB)m/z 399(M++1)。
向3-甲氧基-4-[2-(4-氨基苄基)-4-噻唑基]甲氧基苯甲酸乙酯(87.8mg，0.220mmol)的四氢呋喃(2.0ml)溶液中加入三乙胺(30.5ul，0.220mmol)和异氰酸邻-甲苯基酯(30μl)，将反应混合物于室温下搅拌21小时。将反应混合物加入冰水中，滤去产生的沉淀。用氯仿提取滤液。用水、盐水洗涤。经硫酸钠干燥提取物。减压除去溶剂，得到110.4mg(94％)3-甲氧基-4-[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苄基]-4-噻唑基]甲氧基苯甲酸乙酯，为淡黄色结晶粉末。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.38(t，J＝7.3Hz，3H)，2.28(s，3H)，3.92(s，3H)，4.28(s，2H)，4.35(q，J＝7.3Hz，2H)，5.29(s，2H)，6.20(s，1H)，6.47(s，1H)，6.97(d，J＝8.8Hz，1H)，7.20(s，1H)，7.24(s，2H)，7.27(s，2H)，7.33(d，J＝8.3Hz，2H)，7.49(d，J＝7.3Hz，1H)，7.56(d，J＝2.0Hz，1H)，7.63(dd，J＝2.0，8.3Hz，1H)；MS(FAB)m/z532(M++1)。
向3-甲氧基-4-[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苄基]-4-噻唑基]甲氧基苯甲酸乙酯的THF(1.6ml)和水(0.4ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(6.0mg，0.249mmol)，于室温下将该混合物搅拌1小时，再在回流下加热8小时。浓缩该混合物，用氯仿稀释。通过加入1N氢氧化钠使该溶液呈碱性。通过加入1N HCl酸化含水提取物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从正己烷-乙酸乙酯-乙醇中重结晶得到59.6mg(57％)的41，为白色结晶粉末。mp 243-245；IR(KBr)3282，1685，1637，1600，1554，1516，1278，1234，763，748cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.27(s，3H)，3.83(s，3H)，4.30(s，2H)，5.21(s，2H)，6.97(t，J＝7.3Hz，1H)，7.15-7.24(m，3H)，7.29(d，J＝8.8Hz，2H)，7.47(d，J＝8.3Hz，2H)，7.50(s，1H)，7.58(d，J＝8.3Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.86(d，J＝7.8Hz，1H)，7.97(s，1H)，9.09(s，1H)，12.70(br s，1H)；MS(FAB)m/z504(M++1)。C27H25N3O5S·1/4H2O的分析计算值C，63.83；H，5.06；N，8.27。实测值C，63.74；H，4.99；N，8.10。实施例384-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-甲基-2-吡咯烷基]甲氧基]-3-硝基苯甲酸
于室温下，向N-叔丁氧基羰基脯氨酸(6.00g，0.0279mol)的甲醇∶苯(1∶4，v/v)的搅拌溶液中滴加TMSCHN2的2.0M正己烷溶液(16.7ml，0.0334mol)。将得到的溶液于室温下搅拌1小时后，真空蒸发该混合物，得到6.39g(100％)的N-叔丁氧基羰基脯氨酸甲酯，为黄色浆状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)，1.85-1.98(m，4H)，2.21-2.28(m，2H)，3.72(s，3H)，4.29(m，1H)。
于-78℃，用5分钟向二异丙胺(2.02ml，0.0144mol)的THF(30ml)的搅拌溶液中滴加正丁基锂的1.59M正己烷溶液(9.06ml，0.0144mol)。于-78℃搅拌得到的溶液20分钟。于-78℃，用5分钟向该溶液中滴加N-叔丁氧基羰基脯氨酸甲酯(3.00g，0.0131mmol)的THF(30ml)溶液。于-78℃搅拌得到的溶液10分钟。于-78℃，向该溶液中滴加入MeI(0.900ml，0.0144mol)。于-78℃搅拌得到的溶液30分钟。通过加入饱和氯化铵猝灭该溶液。用氯仿提取得到的混合物。用水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发，得到3.20g(q.y.)N-叔丁氧基羰基-2-甲基脯氨酸甲酯，为黄色浆状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.33(s，9H)，1.38(s，3H)，1.72-2.20(m，4H)，3.27-3.59(m，2H)，3.63(d，J＝6.3Hz，3H)。
于室温下，向N-叔丁氧基羰基-2-甲基脯氨酸甲酯(3.20g，0.013lmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(15.7ml)。搅拌得到的混合物24小时后，用水稀释该混合物，用乙酸乙酯洗涤。通过加入1N HCl酸化分离的含水层，用乙酸乙酯提取。经硫酸钠干燥并真空蒸发提取物，得到1.71g(57％)的N-叔丁氧基羰基-2-甲基脯氨酸，为黄色浆状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.42(s，9H)，1.48(s，3H)，1.88-2.31(m，4H)，3.34-3.57(m，2H)，9.35(br s，1H)。
于室温下，向N-叔丁氧基羰基-2-甲基脯氨酸(1.10g，4.80mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中滴加BH3-SMe2(0.546ml，5.76mmol)。于80℃搅拌得到的混合物6小时后，真空蒸发该混合物。用甲醇稀释残留物，用正己烷(3×)洗涤，真空蒸发，得到0.648g(60％)的N-叔丁氧基羰基-2-羟甲基-2-甲基吡咯烷，为黄色浆状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.76-2.05(m，4H)，3.28-3.48(m，2H)，3.66(m，2H，d)。
于0℃，向N-叔丁氧基羰基-2-羟甲基-2-甲基吡咯烷(0.648g，3.01mmol)、4-羟基-3-硝基苯甲酸甲酯(0.593g，3.01mmol)和三苯膦(0.868g，3.31mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中滴加DIAD(95％)(0.686ml，3.31mmol)。于80℃搅拌得到的混合物24小时后，真空蒸发该混合物。用二氯甲烷(5ml)稀释残留物，加入TFA(5ml)。于室温下搅拌得到的混合物2小时后，真空蒸发该混合物。用0.5N HCl稀释残留物，用氯仿提取。用饱和碳酸氢钠中和含水层并用氯仿提取。经硫酸钠干燥提取物，并真空蒸发，得到0.188g(21％)的3-硝基-4-(2-甲基-2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯，为黄色浆状物。
于室温下，将3-硝基-4-(2-甲基-2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯(0.188g，0.920mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(0.289g，0.920mmol)、HOBt(0.149g，1.10mmol)、DMAP(11.2mg，0.0920mmol)和EDC(0.211g，1.10mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌14小时。将乙酸乙酯加入该混合物中，用0.5N HCl、饱和碳酸氢钠和盐水顺序洗涤该溶液。经硫酸钠干燥有机层并真空蒸发，得到0.489g(q.y.)的4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-甲基-2-吡咯烷基]甲氧基]-3-硝基苯甲酸甲酯，为黄色结晶物质。1H-NMR(CDCl3)δ1.26(d，J＝5.9Hz)，1.85-4.50(m，10H)，2.30(s，3H)，3.67(s，2H)，3.92(s，3H)，6.36(s，2H)，6.75-7.52(m，7H)，8.02(d，J＝7.8Hz，1H)，8.15(d，J＝8.8Hz，1H)，8.47(s，1H)。
将4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-甲基-2-吡咯烷基]甲氧基]-3-硝基苯甲酸酯(0.489g，0.828mmol)在甲醇(5ml)和1N氢氧化钠(1.24ml)中的搅拌混合物在回流下加热2小时。冷却后，用水稀释混合物，用氯仿提取。用1N HCl酸化含水层，用氯仿提取。经硫酸钠干燥提取物并真空蒸发，得到0.366g(99％)的42，为黄色结晶物质。实施例394-[4-羟基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-甲氧基苯甲酸
将4-[4-苄氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-甲氧基苯甲酸酯(440mg，0.645mmol)和5％Pd/C(400mg)在乙酸∶乙醇(1∶1，v/v，100ml)中的搅拌混合物于1个大气压下氢化5小时。过滤该混合物以除去催化剂，真空浓缩滤液。残留物经硅胶层析，用氯仿∶乙醇(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到90mg(24％)的4-[4-羟基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-甲氧基苯甲酸乙酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.39(3H，t，J＝7.3Hz)，2.04-2.37(共5H，m)，3.44-4.70(16H，多个m)，6.63(1H，s)，6.70-6.80(2H，m)，6.84(1H，d，J＝8.3Hz)，7.11(1H，t，J＝7.8Hz)，7.20-7.24(3H，m)，7.45(1H，d，J＝2.0Hz)，7.59(2H，dd，J＝8.3，2.0Hz)，8.01(1H，d，J＝7.8Hz)。
将4-[4-羟基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-甲氧基苯甲酸乙酯(90mg，0.152mmol)在0.25N氢氧化钠(5ml，1.25mmol)和THF(5ml)中的搅拌的混合物在回流下加热过夜。将该混合液倾入冰-1N HCl(200ml)中。抽滤收集沉淀，从氯仿-甲醇-正己烷中重结晶得到40mg(47％)的43，为无色无定形固体。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.92-2.11(2H，m)，2.24(3H，s)，3.31-5.07(14H，多个m)，6.73(1H，d，J＝8.3Hz)，6.84(1H，s)，6.93(1H，t，J＝7.8Hz)，7.01-7.17(3H，m)，7.44(1H，s)，7.52(1H，d，J＝8.8Hz)，7.79(1H，d，J＝8.3Hz)，7.99(1H，d，J＝7.8Hz)，8.46(1H，s)，8.55(1H，s)，12.67(1H，br s)；MS(FAB)m/z 564(M++1)。实施例40(2S，4R)-3-氨基-4-[4-羟基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
向(2S，4R)-4-苄氧基-1-(叔丁氧基羰基)-2-脯氨醇(891mg，2.9mmol)、4-羟基-3-硝基苯甲酸甲酯(572mg，2.9mmol)和三苯膦(839mg，3.2mmol)的THF(6ml)的搅拌溶液中加入DIAD(630ml，3.2mmol)，将该混合物在回流下加热过夜。除去溶剂后，残留物经硅胶层析，用正己烷∶乙酸乙酯(1∶1)和甲苯∶乙酸乙酯(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到700mg(50％)的(2S，4R)-4-[4-苄氧基-1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯，为淡黄色油状物。
向(2S，4R)-4-[4-苄氧基-1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯(681mg，1.4mmol)的二氯甲烷(2ml)的搅拌溶液中加入TFA(2ml)，将得到的混合物搅拌2小时。浓缩反应混合物后，通过加入饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性，用氯仿提取。用水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发，得到511mg(95％)的(2S，4R)-4-[4-苄氧基-2-吡咯烷基]甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯，为黄色油状物。
将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(409mg，1.3mmol)、(2S，4R)-4-(苄氧基-2-吡咯烷基)甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯(502mg，1.3mmol)、EDC(383mg，2mmol)和DMAP(159mg，1.3mmol)在DMF(20ml)中的混合物搅拌3天，将该混合物倾入1N HCl中，抽滤收集产生的沉淀。使残留物溶于氯仿中，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(200∶1，v/v)作为洗脱剂，得到680mg(91％)的(2S，4R)-4-氨基-4-[4-苄基氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯，为白色无定形固体。
将(2S，4R)-4-[4-苄基氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯(676mg，0.99mmol)和5％Pd-C(1g)的乙醇∶乙酸(1∶1，v/v，30ml)溶液于1个大气压下氢化6小时。过滤该混合物，蒸发滤液得到一种油状物，通过加入饱和碳酸氢钠使其呈碱性。用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。使残留物从氯仿-乙醇-正己烷的洗脱液中重结晶，得到120mg(22％)的44，为淡黄色结晶粉末；MS(FAB)m/z 549(M++1)。实施例414-[[4-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]-3-甲氧基苯甲酸
将4-[4-苄氧基-1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(1.189g，2.449mmol)和5％ Pd-C(240mg)在乙醇(10ml)中的搅拌混合物于室温下氢化过夜。过滤该混合物以除去催化剂，真空浓缩滤液得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-4-羟基-2-吡咯烷基]甲氧基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(735.3mg，76％)，为淡黄色油状物。向搅拌的冷(-78℃)DAST(0.491ml，3.718mmol)的二氯甲烷(7.4ml)溶液中滴加该化合物的二氯甲烷(2ml)溶液，将得到的混合物搅拌过夜。用水猝灭该混合物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷∶乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到418.7mg(57％)的4-[1-(叔丁氧基羰基)-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基-3-甲氧基苯甲酸乙酯，为一种油状物。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.39(t，J＝7.3Hz，3H)，1.49(s，9H)，2.16(br m，1H)，2.58(dd，J＝15.6，19.0Hz，1H)，3.60-3.75(m，2H)，3.91(s，3H)，3.97(t，J＝9.3Hz，1H)，4.35(q，J＝7.3Hz，2H)，4.33-4.53(m，2H)，5.25(d，J＝52.7Hz，1H)，7.04(dd，J＝7.8，56.2Hz，1H)，7.55(s，1H)，7.65(br s，1H)；MS(FAB)m/z 398(M++1)。
于0℃，向4-[1-(叔丁氧基羰基)-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(482.2mg，1.213mmol)的二氯甲烷(10.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(1.9ml)，于室温下将混合物搅拌2小时。减压除去溶剂，通过加入1N氢氧化钠使残留物呈碱性，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到348.7mg(97％)的4-(4-氟-2-吡咯烷基)甲氧基-3-甲氧基苯甲酸乙酯，为棕色油状物。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.39(t，J＝6.8Hz，3H)，1.97(ddt J＝1.5 5.4，14.7Hz，1H)，2.27(dddd，J＝5.9，8.8，14.7，32.7Hz，1H)，3.02(ddd，J＝3.9，13.1，35.2Hz，1H)，3.36(dd，J＝12.7，21.5Hz，1H)，3.65(m，1H)，3.90(s，3H)，4.09(m，1H)，4.35(q，J＝6.8Hz，2H)，5.17，5.31(各为br m，1H)，6.90(d，J＝8.3Hz，1H)，7.75(d，J＝2.0Hz，1H)，7.65(dd，J＝2.0，8.3Hz，1H)；MS(FAB) m/z 298(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟代苯酯(404.0mg，0.840mmol)、4-(4-氟-2-吡咯烷基)甲氧基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(250.0mg，0.840mmol)、三乙胺(141μl，1.009mmol)在DMF(4.0ml)中的混合物搅拌1小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(1∶3，v/v)洗脱，得到502mg(q.y.)的4-[[4-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]-3-甲氧基苯甲酸乙酯，为一种黄色油。向该化合物的THF(8.0ml)和水(2.0ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(60.4mg，2.520mmol)，于室温下将该混合物搅拌过夜，于50℃搅拌1天。用氯仿稀释混合物，用1N氢氧化钠提取。通过加入1N HCl酸化含水层，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从乙酸乙酯-氯仿-乙醇-正己烷中重结晶得到294.8mg(62％)的45，为白色结晶粉末。IR(KBr)2958，2937，1687，1601，1531，1454，1419，1267，1214，1029cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.86-2.09(m，5H)，2.06(s，3H)，2.25(s，3H)，3.47-3.67(m，6H)，3.76(s，3H)，4.05-4.12(m，2H)，4.30-4.31(m，1H)，6.51(s，1H)，6.55(s，1H)，6.73-6.95(m，2H)，7.11-7.17(m，2H)，7.64(s，1H)，7.79(d，J＝7.8Hz，1H)，7.99(d，J＝7.8Hz，1H)，847(s，1H)，8.55(s，1H)；MS(FAB)m/z 566(M++1)。C30H32FN3O7·1/2H2O的分析计算值C，62.71；H，5.79；F，3.31；N，7.31。实测值63.13；H，6.17；F，3.12；N，7.04。实施例423-乙酰氨基-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]苯甲酸
于室温下，将3-氨基-4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸(130mg，0.244mmol)和DMAP(2.9mg，0.0244mmol)的吡啶(5ml)和乙酸酐(5ml)溶液搅拌2小时。真空蒸发该混合物(过量的乙酸酐与甲苯共沸除去)。将水加入残留物中，用氯仿提取。经硫酸钠干燥提取物并真空蒸发。残留物经硅胶层析，用甲醇∶氯仿(1∶15-1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到29mg(21％)的46，为白色结晶物质。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.80-2.30(m，4H)，2.04(s，3H)，2.26(s，3H)，3.33(s，3H)，3.40-4.80(m，7H)，6.59(s，1H)，6.74(d，J＝8.3Hz，1H)，6.79(d，J＝8.8Hz，1H)，7.07-7.57(m，6H)，7.75(d，J＝8.8Hz，1H)，8.07(d，J＝8.3Hz，1H)，8.41和8.96(各为s，为1H)；MS(FAB)m/z575(M++1)。实施例433-氯-2-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸
于0℃，向3-氯-2-羟基吡啶-5-甲酸(1g，5.762mmol)的苯(16ml)和甲醇(4ml)的搅拌溶液中滴加TMSCHN2(3.17ml，6.338mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌过夜。通过加入乙酸猝灭反应混合物，蒸发该混合物。使残留物悬浮于水中并收集沉淀。用乙醚洗涤粗品固体，减压干燥，得到728.1mg(67％)的3-氯-2-羟基吡啶-5-甲酸甲酯，为白色结晶粉末。IR(KBr)1655，1282，1245，769cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.79(s，3H)，8.01(s，1H)，8.06(s，1H)；MS(FAB)m/z 188(M++1)。C7H6ClNO3的分析计算值C，44.82；H，3.22；Cl，18.90；N，7.47。实测值C，44.74；H，3.22；Cl，19.00；N，7.34。
于室温下，向3-氯-2-羟基吡啶-5-甲酸甲酯(300mg，1.599mmol)、N-叔丁氧基羰基脯氨醇(321.9mg，1.599mmol)和三苯膦(503mg，1.919mmol)的THF(3ml)的搅拌溶液中缓慢加入DIAD(378μl，1.919mmol)。将混合物于70℃搅拌13小时。浓缩混合物，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到235.6mg(40％)的3-氯-2-[[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯，为一种淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.46(s，9H)，1.87(m，1H)，2.05(br s，3H)，3.43(br s，2H)，3.92(s，3H)，4.17，4.26(各为br s，1H)，4.45-4.5 1(m，1H)，4.50(s，1H)，8.21(s，1H)，8.67(d，J＝2.0Hz，1H)；MS(FAB)m/z 371(M++1)。
于0℃，向3-氯-2-[[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯(235.6mg，0.635mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(1.0ml)，于室温下搅拌得到的反应混合物2小时。减压除去溶剂，通过加入1N氢氧化钠使残留物呈碱性，用氯仿提取。经硫酸钠干燥提取物，减压浓缩得到172.3mg(q.y.)的3-氯-2-[(2-吡咯烷基)甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯，为淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.55-1.63(m，1H)，1.76-1.99(m，3H)，2.93-2.99(m，1H)，3.02-3.08(m，1H)，3.57-3.62(m，1H)，3.92(s，3H)，4.33(dd，J＝7.3，10.7Hz，1H)，4.44(dd，J＝4.4，10.7Hz，1H)，8.21(d，J＝2.0Hz，1H)，8.67(d，J＝2.0Hz，1H)；MS(FAB)m/z 271(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(317.0mg，0.660mmol)、3-氯-2-[(2-吡咯烷基)甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯(172.0mg，0.635mmol)、三乙胺(105μl，0.756mmol)在DMF(2.0ml)中的混合物搅拌1小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，得到3-氯-2-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯，为一种棕色油。向该化合物的THF(6.0ml)和水(2.0ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(45.3mg，1.89mmol)，于室温下将该反应混合物搅拌5小时。用正己烷稀释混合物，用1N氢氧化钠提取。通过加入1N HCl酸化含水层，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从正己烷-乙酸乙酯-乙醇中重结晶得到242.2mg(70％)的47，为橙色结晶粉末。mp 122-125；IR(KBr)3354，1709，1593，1535，1454，1257cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.67-2.03(m，4H)，2.50(s，3H)，3.33-3.42(m，1H)，3.52(m，2H)，3.58(d，J＝4.4Hz，1H)，3.83(s，3H)，4.27-4.31(m，2H)，4.42-4.47(m，1H)，6.73(d，J＝7.8Hz，1H)，6.87-6.95(m，3H)，7.11-7.17(m，2H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，7.99(d，J＝8.3Hz，1H)，8.14(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.56(s，1H)，8.69(d，J＝2.0Hz，1H)，13.06(br s，1H)；MS(FAB) m/z 553(M++1)。C28H29ClN4O6的分析计算值C，60.81；H，5.29；N，10.31。实测值60.98；H，5.50；N，9.46。实施例442-[[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸
于0℃，向6-羟基烟酸(2g，14.38mmol)的苯(32ml)和甲醇(8ml)的搅拌溶液中滴加TMSCHN2(1.97ml，3.953mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌2小时。通过加入乙酸猝灭混合物，减压浓缩。使残留物悬浮于水中并收集固体。用乙醚洗涤粗品固体，减压干燥，得到1.566g(71％)的2-羟基吡啶-5-甲酸甲酯，为浅棕色结晶粉末。IR(KBr)1655，1645，1610，1433，1300，1113，777，642cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.77(s，3H)，6.37(d，J＝9.8Hz，1H)，7.99(dd，J＝2.4，9.8Hz，1H)，8.03(d，J＝2.4Hz，1H)；MS(FAB)m/z 154(M++1)。C7H7NO3的分析计算值C，54.90；H，4.61；N，9.15。实测值C，54.89；H，4.60；N，9.13。
于室温下，向2-羟基吡啶-5-甲酸甲酯(1.00g，6.529mmol)、N-叔丁氧基羰基脯氨醇(1.31g，6.529mmol)和三苯膦(2.06g，7.836mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入DIAD(1.54ml，7.836mmol)，将得到的混合物于70℃搅拌13小时。浓缩混合物，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到712.3mg(32％)的2-[[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯，为一种淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.85-1.98(m，4H)，3.37(br s，2H)，3.92(s，3H)，4.12-4.33(br m，2H)，4.48(br s，1H)，6.75(m，1H)，8.15(m，1H)，8.79(m，1H)；MS(FAB)m/z 337(M++1)。
于0℃，向2-[[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯(232.3mg，0.691mmol)的二氯甲烷(4.6ml)的搅拌溶液中加入TFA(0.9ml)，于室温下搅拌反应混合物2小时。减压除去溶剂，通过加入1N氢氧化钠使残留物呈碱性，用氯仿提取水溶液，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压蒸发溶剂，得到146.2mg(90％)的2-(2-吡咯烷基)甲氧基吡啶-5-甲酸甲酯，为一种油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.49-1.58(m，1H)，1.72-2.18(m，3H)，2.92-3.05(m，2H)，3.50-3.57(m，1H)，3.91(s，3H)，4.23(dd，J＝8.0，10.7Hz，1H)，4.38(dd，J＝4.4，10.3Hz，1H)，6.78(d，J＝8.8Hz，1H)，8.15(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)8.80(d，J＝2.4Hz，1H)；MS(FAB)m/z237(M++1)。
于室温下，将4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基-苯基乙酸五氟苯酯(314.8mg，0.650mmol)、2-[(2-吡咯烷基)甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯(146.2mg，0.619mmol)、三乙胺(103μl，0.743mmol)在DMF(1.5ml)中的混合物搅拌1小时。用乙醚稀释混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，得到2-[[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯，为淡黄色粗品油。
向该化合物的THF(6.0ml)和水(2.0ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(44.5mg，1.857mmol)，于室温下将该反应混合物搅拌17小时。用正己烷稀释混合物，通过加入1N氢氧化钠使呈碱性。用1N HCl酸化含水层，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，使得到的粗品固体从正己烷-乙酸乙酯-乙醇中重结晶得到202.5mg(63％)的48，为白色结晶粉末。IR(KBr)1602，1537，1456，1265，752cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.67-2.03(m，4H)，2.50(s，3H)，3.33-3.42(m，1H)，3.52(m，2H)，3.58(d，J＝4.4Hz，1H)，3.83(s，3H)，4.27-4.31(m，2H)，4.42-4.47(m，1H)，6.73(d，J＝7.8Hz，1H)，6.87-6.95(m，3H)，7.11-7.17(m，2H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，7.99(d，J＝8.3Hz，1H)，8.14(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.56(s，1H)，8.69(d，J＝2.0Hz，1H)，13.06(br s，1H)；MS(FAB)m/z 523(M++1)。C27H27FN4O6·1/2H2O的分析计算值C，61.01；H，5.31；N，10.54。实测值C，61.52；H，5.39；N，10.01。实施例454-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-]-哌嗪基乙酸
于室温下，向1-苄基哌嗪(5g，28.4mmol)和碳酸钾(5.89g，42.6mmol)的DMF(30ml)的搅拌悬浮溶液中加入溴代乙酸乙酯(4.74g，28.4mmol)。搅拌得到的混合物另外3小时。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水(2×100ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙醇(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到7.45g(q.y.)的4-苄基-1-哌嗪基乙酸乙酯，为一种黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，2.88-2.96(8H，m)，3.20(2H，s)，3.52(2H，s)，4.18(2H，q，J＝7.3Hz)，7.22-7.32(5H m)。
将4-苄基-1-哌嗪基乙酸乙酯(2.00g，7.62mmol)和5％Pd/C(2g)的乙酸∶乙醇(1∶1，40ml)中的搅拌溶液于1个大气压下氢化8小时。过滤该混合物，真空浓缩滤液。通过加入饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性。用氯仿(2×200ml)提取。经碳酸钾干燥合并的提取物并蒸发，得到1.16g(88％)的1-哌嗪基乙酸乙酯，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.26-1.30(3H，m)，1.67(1H，br s)，2.55(4H，m)，2.92-2.96(4H，m)，3.19-3.20(2H，m)，4.16-4.22(2H m)。
于室温下，向N-Boc-L-脯氨醇(1.00g，5.02mmol)和1-哌嗪基乙酸乙酯(864mg，5.02mmol)的甲醇∶乙酸(10∶1，v/v，11ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(664mg，10.0mmol)。搅拌过夜后，将该混合物倾入冰水(100ml)中，通过加入碳酸氢钠使呈碱性。用氯仿(2×200ml)提取该混合物。经碳酸钠干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙醇(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.20g(67％)的4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯，为一种无色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.46-1.47(9H，m)，1.79-3.96(总19H，多个m)，4.19(2H，q，J＝7.3Hz)。
将4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.20g，3.38mmol)在TFA(5ml)和二氯甲烷(5ml)中的混合物搅拌过夜。除去溶剂后，通过加入饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性。用氯仿(2×200ml)提取该混合物。经碳酸钠干燥合并的提取物并蒸发，得到386mg(45％)的4-(2-吡咯烷基甲基)-1-哌嗪基乙酸乙酯，为黄色油状物。MS(FAB)256(M++1)。
向4-(2-吡咯烷基甲基)-1-哌嗪基乙酸乙酯(380mg，1.49mmol)和3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(468mg，1.49mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC.HCl(428m，2.24mmol)、HOBt和DMAP(cat.)。搅拌过夜后，用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水(2×200ml)洗涤，经碳酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析，用氯仿-乙醇(9∶1，v/v)作为洗脱剂，得到257mg(31％)的4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯，为黄色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.24-1.29(3H，m)，1.69-4.24(共29H，多个m)，6.41(1H，m)，6.81(2H，m)，7.13-7.26(4H，m)，7.52(1H，d，J＝7.3Hz)，8.04(1H，d，J＝8.3Hz)。
向4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(250mg，0.453mmol)的THF(4ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.6ml)。将得到的混合物搅拌过夜。通过加入1N HCl将该混合物调节至pH 7.5，用氯仿-甲醇(4∶1，3×100ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。使粗品固体从氯仿-甲醇-正己烷中重结晶，得到40mg(17％)的49，为无色结晶粉末。mp 160-170℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.74-4.08(共27H，多个m)，6.73(1H，d，J＝7.8Hz)，6.87(1H，s)，6.93(1H，t，J＝7.8Hz)，7.11-7.17(2H，m)，7.79(1H，d，J＝7.8Hz)，8.00(1H，dd，J＝7.8，2.4Hz)，8.47(1H，s)，8.56(1H，s)；MS(FAB)524(M++1)。C28H37N5O5·HCl·H2O的分析计算值C，58.17；H，6.97；N，12.11。实测值C，58.26；H，7.26；N，11.53。实施例46
向4-氨基苯基乙酸(10g，66mmol)在1∶1二氯甲烷∶丙酮(100ml)中的悬浮液中加入异氰酸邻-甲苯基酯(8.8g，66mmol)。将该混合物加热至回流4小时，此时形成白色沉淀。过滤沉淀物，用大量的1∶1二氯甲烷∶丙酮洗涤该固体。用热甲醇使该固体重结晶，真空干燥得到14.1g(收率75％)所需的4-(邻-甲苯基脲基)苯基乙酸50。实施例47
向2-氨基-4-噻唑基乙酸(4g，25mmol)在1∶1二氯甲烷∶丙酮(100ml)中的悬浮液中加入异氰酸邻-甲苯基酯(3.5g，26mmol)。将该混合物加热至回流8小时，此时形成黄色沉淀。过滤沉淀物，用大量的1∶1二氯甲烷∶丙酮洗涤该固体。用热甲醇使该固体重结晶，真空干燥得到4.8g(收率66％)所需2-(邻-甲苯基脲基)-4-噻唑基乙酸51。实施例484-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基氨基]苯甲酸
将4-氨基苯甲酸甲酯(1.52g，10.04mmol)和1-叔丁氧基羰基脯氨醛(3.00g，15.06mmol)在甲苯(30ml)中的搅拌混合物在回流下加热3小时。冷却至室温后，真空蒸发溶剂。使该固体溶于甲醇(27ml)和乙酸(3ml)中，然后将NaBH3CN(1.33g，20.08mmol)加入该混合物中，于室温下将得到的混合物搅拌过夜。用水猝灭反应混合物，减压除去溶剂。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用水、盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到2.17g(65％)的4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基氨基]苯甲酸酯，为一种淡黄色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.51-2.09(m，4H)，3.05-3.07和3.43-3.48(br m，1H)，3.18(brs，1H)，3.36(br s，2H)，3.84(s，1H)，4.06-4.08，4.20-4.24(各为br m，1H)，6.49-6.65(m，2H)，7.84(d，J＝8.3Hz，2H)；MS(FAB)m/z335(M++1)。
于0℃，向4-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基氨基]苯甲酸甲酯(2.17g，6.490mmol)的二氯甲烷(44ml)中的搅拌溶液中加入TFA(8.7ml)，于室温下将得到的混合物搅拌过夜。减压除去溶剂，用1N氢氧化钠处理残留物。用二氯甲烷提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得到1.34g(88％)的4-(2-吡咯烷基甲基氨基)-苯甲酸甲酯，为棕色油状物，其可无需进一步纯化而用于随后的反应。
将上面的4-(2-吡咯烷基甲基氨基)-苯甲酸甲酯(397.8mg，1.69mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(587.1mg，1.87mmol)、EDC(HCl)(486mg，2.54mmol)、HOBt(23mg，0.17mmol)和DMAP(21mg，0.17mmol)在DMF(4ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到882mg(98％)的4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基氨基]苯甲酸甲酯，为棕色无定形固体，其可无需进一步纯化而用于随后的反应。
向4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基氨基]苯甲酸甲酯(882mg，1.662mmol)的THF(18ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(5.0ml，5.000mmol)。将混合物在回流下加热3天。浓缩该混合物。残留物用1N HCl处理并用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发。使固体从正己烷-二异丙醚-氯仿-甲醇中重结晶，得到180.5mg(21％)的52，为淡黄色无定形固体。IR(KBr)1604，1535，1511，1454，1255，1224，1174cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.79-1.99(br m，4H)，2.25(s，3H)，2.90-2.94(m，1H)，3.35-3.62(m，6H)，3.87(s，3H)，4.12-4.15(br s，1H)，6.63-6.78(m，4H)，6.89-6.95和7.11-7.17(各为m，3H)，7.65(d，J＝8.3Hz，2H)，7.80(d，J＝8.3Hz，1H)，8.02(d，J＝8.3Hz，1H)，8.47(s，1H)，8.57(s，1H)，12.0(br s，1H)；MS(FAB)m/z 517(M++1)。C29H32N4O5·1H2O的分析计算值C，65.15；H，6.41；N，10.48。实测值C，65.45；H，6.33；N，10.02。实施例494-[N-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]苯甲酸
向4-[N-(2-吡咯烷基)甲基氨基]苯甲酸甲酯(600mg，1.794mmol)、37％-甲醛(1.79ml，23.32mmol)和NaBH3CN(368mg，5.561mmol)的乙腈(6.0ml)的混合物中滴加乙酸(0.205ml，3.588mmol)，于室温下将得到的混合物搅拌2小时。通过加入饱和碳酸氢钠猝灭反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到645mg(100％)的4-[N-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]苯甲酸甲酯，为一种无色油。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.50(s，9H)，1.76-1.91(m，4H)，3.07(s，3H)，3.15-3.43(m，3H)，3.67-3.71(m，1H)，3.85(s，3H)，4.11-4.17(m，1H)，4.37(s，1H)，6.75(d，J＝8.3Hz，2H)，7.89(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(FAB)m/z349(M++1)。
于0℃，向4-[N-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]苯甲酸甲酯(645mg，1.794mmol)的二氯甲烷(6.5ml)中的搅拌溶液中加入TFA (1.3ml)，于室温下将混合物搅拌过夜。减压除去溶剂，用1N氢氧化钠溶液处理残留物。用二氯甲烷提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥，减压浓缩溶剂，得到363.2mg(82％)的4-[N-(2-吡咯烷基)甲基-N-甲基]氨基苯甲酸甲酯，为黄色油状物，其可无需进一步纯化而用于随后的反应。
将4-[N-(2-吡咯烷基)甲基-N-甲基)氨基苯甲酸甲酯(191.8mg，0.772mmol)、3-甲氧基-4-(N’-2-甲基苯基脲基)苯基乙酸(258.1mg，0.811mmol)、EDC(盐酸盐)(221.9mg，1.158mmol)、HOBt(10.0mg，0.077mmol)和DMAP(9.4mg，0.077mmol)在DMF(2.0ml)中的混合物于室温下搅拌3小时。用乙醚稀释该反应混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，得到482.5mg的4-[N-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]苯甲酸甲酯，为白色无定形粉末，其可无需进一步纯化而用于随后的反应。
向4-[N-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]苯甲酸甲酯的THF(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(6.2ml，6.2mmol)。将混合物在回流下加热3天。真空浓缩该反应混合物。残留物用1N HCl中和，用二氯甲烷提取。用饱和氯化铵、盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发。使粗品固体从正己烷-氯仿-甲醇-异丙基醚中重结晶，得到102.8mg(25％，两步)的53，为淡黄色无定形固体。mp 144-146；IR(KBr)3325，1600，1529，1454，1284，1257，1184cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.73-1.91(m，3H)，2.03-2.11(m，1H)，3.03(s，3H)，3.16(dd，J＝9.3，14.2Hz，1H)，3.37-3.60(m，4H)，3.76-3.80(m，1H)，3.86(s，3H)，4.25(br s，1H)，6.75(dd，J＝1.5，8.3Hz，1H)，6.86(d，J＝1.5Hz，1H)，6.90(d，J＝8.8Hz，2H)，6.95-7.01(m，1H)，7.12(t，J＝7.8Hz，1H)，7.20-7.25(m，1H)，7.73(d，J＝8.8Hz，2H)，8.01(d，J＝7.8Hz，1H)，8.16-8.20(m，1H)，8.73(s，1H)，9.19(d，J＝2.0Hz，1H)，12.0(br s，1H)；MS(FAB)m/z 535(M++1)。C29H31FN4O5·1/2H2O的分析计算值C，64.08；H，5.93；N，10.31，F，3.49。实测值C，64.17；H，5.84；N，10.06；F，3.26。实施例504-[N-[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]-3-硝基苯甲酸
向4-氟-3-硝基苯甲酸甲酯(1.58g，4.666mmol)和[I-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基]甲胺(500mg，2.333mmol)在DMF(8.0ml)中的混合物中加入碳酸钾(967mg，6.999mmol)，于室温下搅拌得到的混合物3小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到834.9mg(91％)的4-[N-[1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基]氨基-3-硝基苯甲酸甲酯，为一种淡黄色油，其可无需进一步纯化而用于随后的反应。
于室温下，向上面的油状物的二氯甲烷(8.3ml)中的冰-冷却溶液中加入TFA(1.7ml)，于室温下将反应混合物搅拌过夜。减压除去溶剂。用1N氢氧化钠处理残留物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并减压蒸发，得到553.6mg(90％)的4-[N-(2-吡咯烷基甲基)-N-甲基]氨基-3-硝基苯甲酸甲酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.31-1.40(m，1H)，1.74-2.05(m，4H)，2.73-2.79(m，1H)，2.81-2.99(m，1H)，2.94(s，3H)，3.29-3.55(m，2H)，3.89(s，3H)，7.14(d，J＝9.3Hz，1H)，7.98(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，8.42(d，J＝2.0Hz，1H)；MS(FAB)m/z294(M++1)。
将3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酸(630.0mg，1.979mmol)、3-硝基-4-[N-(2-吡咯烷基)甲基-N-甲基氨基]苯甲酸甲酯(553.0mg，1.885mmol)、EDC(盐酸盐)(542.0mg，2.827mmol)、HOBt(25.5mg，0.189mmol)和DMAP(23.1mg，0.189mmol)在DMF(5.0ml)中的混合物于室温下搅拌2小时。用乙醚稀释该混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压除去溶剂，残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(30∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1.18g(100％)的4-[N-[1-(3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]-3-硝基苯甲酸甲酯，为黄色泡沫物，其可无需进一步纯化而用于随后的反应。
向4-[N-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]-3-硝基苯甲酸甲酯(2.50mg，0.421mmol)的THF(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.5ml，1.500mmol)。将混合物在回流下加热过夜。冷却后，将该混合物浓缩至小体积。残留物用1N HCl处理，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发。使粗品固体从正己烷-乙醚-氯仿-甲醇中重结晶，得到194.9mg(80％)的54，为黄色无定形固体。IR(KBr)1685，1610，1529，1454，1284，1259，1228cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.63-1.91(m，3H)，2.04-2.07(br s，1H)，2.60(br s，1H)，2.80(s，1H)，2.99(s，2H)，3.05-3.10(m，1H)，3.32-3.58(m，3H)，3.76-3.81(m，1H)，3.81(s，3H)，4.25(br s，1H)，6.68(t，J＝3.9Hz，1H)，6.71(d，J＝8.8Hz，1H)，6.81-6.96(m，1H)，7.07(t，J＝7.3Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.8，9.8Hz，1H)，7.48(t，J＝7.8Hz，1H)，7.85(d，J＝8.8Hz，1H)，7.97(t，J＝8.8Hz，1H)，8.11-8.20(m，2H)，8.68(s，1H)，9.14(s，1H)，12.8(br s，1H)；MS(FAB)m/z580(M++1)。C29H30FN5O7·1/4H2O的分析计算值C，59.63；H，5.26；N，11.99，F，3.25。实测值C，59.68；H，5.34；N，11.80，F，3.21。实施例513-氨基-4-[N-甲基-[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基-苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]苯甲酸
将4-[N-[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基-苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]-3-硝基苯甲酸甲酯(901.0mg，1.518mmol)的甲醇(18.0ml)中的搅拌的溶液经5％Pd-C(1.35g)于45psi下氢化过夜。过滤该混合物，真空浓缩滤液。用1N氢氧化钠溶液使残留物呈碱性，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥，减压除去溶剂。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(24∶1，v/v)作为洗脱剂，得到283.7mg(48％)的3-氨基-4-[N-[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基-苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]苯甲酸甲酯，为棕色无定形固体，其可无需进一步纯化而用于随后的反应。
向上面化合物的THF(3.0m1)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠溶液(1.5ml，1.500mmol)，将该混合物回流过夜。浓缩该混合物，用1N HCl处理，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并减压蒸发。使固体从正己烷-乙醚-氯仿-甲醇中重结晶，得到179.8mg(65％)的55，为白色无定形固体。IR(KBr)1614，1601，1537，1454，1228，1219，1184cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.60-2.20(m，4H)，2.61-2.68(m，1H)，2.89(s，3H)，3.13-3.18(m，1H)，3.40-3.61(m，4H)，3.85(s，3H)，4.01(br m，1H)，4.93(br s，2H)，6.50-7.31(m，8H)，8.01(dd，J＝2.9，8.3Hz，1H)，8.18(t，J＝8.3Hz，1H)，8.71(s，1H)，9.17(d，J＝1.5Hz，1H)，12.3(br s，1H)；MS(FAB)m/z550(M++1)。C29H32FN5O5·1/4H2O的分析计算值C，62.86；H，5.91；N，12.64，F，3.43。实测值C，62.71；H，6.00；N，12.39，F，3.16。实施例524-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]苯甲酸
于室温下，向4-[(2-吡咯烷基)甲基氨基]苯甲酸甲酯(220mg，0.94mmol)、4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(285mg，0.94mmol)、4-DMAP(140mg，1.13mmol)和催化量的HOBT的DMF(7ml)的搅拌混合物中加入EDC·HCl(220mg，1.13mmol)。于室温下将得到的混合物搅拌20小时。将该混合物倒入冰水中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体经硅胶(20ml)柱层析纯化，用氯仿-乙酸乙酯(3∶1，v/v)至氯仿-乙醇(9∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]苯甲酸甲酯(400mg，85％)，为一种浆状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.75-2.05(多个m，4H)，2.24(s，3H)，3.18和3.27(各为m，各为1H)，3.51(m，2H)，3.60(s，2H)，3.83(s，3H)，4.52(m，1H)，6.52(m，3H)，6.81(s，1H)，7.11-7.25(多个m，7H)，7.53(m，1H)，7.81(d，J＝8.8Hz，2H)。
于60-70℃，将4-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]苯甲酸甲酯(280mg，0.56mmol)的THF(3ml)和0.25N氢氧化钠(6.8ml，1.75mmol)中的混合物搅拌3小时。冷却后，将该混合物倾入冰-1N HCl(3ml)中。收集固体，用水洗涤并风干。使粗品结晶物质从氯仿-乙醇-IPE中重结晶，得到56(180mg，66％)，为细的针晶。MW 486.56 IR(KBr)n 3367，3294，1712，1606，1539cm-1；1H-NMR(CDCl3-DMSO-d6)δ1.80-2.05(多个m，4H)，2.26(s，3H)，2.94(m，1H)，3.38和3.56(多个m，3H)，3.57(s，2H)，4.23(m，2H)，6.48(br s，1H)，6.69(d，J＝8.8Hz，2H)，6.91(t，J＝7Hz，1H)，6.91(m，4H)，7.39(d，J＝8.3Hz，2H)，7.66(d，J＝8.8Hz，2H)，7.80(m，2H)，8.88(s，1H)，11.76(s，1H)；MS(FAB)m/z 487(M++1)。C28H30N4O4·0.75×H2O的分析计算值C，67.24；H，6.45；N，11.20。实测值C，67.13；H，6.32；N，11.01。实施例534-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯
4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
向2S-吡咯烷甲醇(15.1g，149.5mmol)的二氧六环(100ml)的搅拌溶液中加入(Boc)2O(32.6g，164.4mmol)的二氧六环(100ml)溶液。于室温下将反应混合物搅拌18小时并减压浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-己烷(1∶5，v/v)作为洗脱剂，得到(1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基)甲醇(31.6g，定量)，为一种无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.60-2.00(m，3H)，3.25-3.70(4H，m)，3.92-4.00(m，1H)。
于0℃，向(1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基)甲醇(4.02g，20.0mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(3.04g，20.0mmol)和三苯膦(6.28g，24.0mmol)的THF(50ml)的搅拌溶液中加入DIAD(4.85g，24.0mmol)。于室温下将该反应混合物搅拌18小时。真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-(1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(5.4g，81％)，为一种淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.88-2.04(m，4H)，3.41(m，2H)，3.91(s，3H)，3.90-3.92(m，1H)，4.11-4.16(m，2H)，6.94(d，J＝8.6Hz，2H)，7.94(d，J＝8.3Hz，2H)。
于0℃，向4-(1-叔丁氧基羰基-2S-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(2.1g，6.27mmol)的二氯甲烷(9.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(6.0ml)。于室温下将该反应混合物搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗品产物可无需进一步纯化而用于随后的反应。于0℃下，向粗产物(470mg，2.0mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(669mg，2.0mmol)、HOBt(405mg，3.0mmol)和三乙胺(554ml，4.0mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(576mg，3.0mmol)。于室温下将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠洗涤提取物。经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶4，v/v)作为洗脱剂，得到57(900mg，82％)，为无色油状物。MW 552.021H-NMR(CDCl3)δ2.04-2.10(m，4H)，3.51-3.70(m，6H)，3.87(s，3H)，4.11-4.18(m，2H)，6.77-6.88(m，4H)，7.23-7.34(m，4H)，7.91-7.96(m，2H)，8.17-8.19(m，1H)。
将该混合物于70℃搅拌24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集得到的固体，用水洗涤，真空干燥得到58(640mg，94％)，为白色结晶固体。MW 537.99 mp 126-130℃；IR(KBr)3324，2938，2877，1604，1533，1249，1166，750cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.93-2.05(m，4H)，3.52-3.61(m，5H)，3.82(s，3H)，3.99-4.01(m，2H)，4.18-4.20(m，1H)，4.29(m，1H)，6.74-6.76(d，1H，J＝8.3Hz)，6.87(s，1H)，6.99-7.04(m，3H)，7.25-7.29(m，1H)，7.41-7.43(d，1H，J＝8.1Hz)，7.86-7.91(m，2H)，7.95-7.97(m，1H)，8.09-8.11(d，1H，J＝8.3Hz)，8.87-8.92(m，1H)；MS(FAB) m/z 538(M++1)。C28H28N3O6·0.5H2O的分析计算值C，61.48；H，5.34；N，7.68；Cl，6.48。实测值C，61.46；H，5.36；N，7.62；Cl，6.50。对于58的钠盐C28H27N3O6·Na·1.5H2O的分析计算值C，57.29；H，5.15；N，7.16。实测值C，57.48；H，5.04；N，6.99。实施例544-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(2S-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(470mg，2.0mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(758mg，2.0mmol)、HOBt(405mg，3.0mmol)和三乙胺(554ml，3.0mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(576mg，3.0mmol)。于室温下将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶4，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(1.0g，84％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.04-2.10(m，4H)，3.52-3.54(m，1H)，3.62(s，2H)，3.70(s，3H)，3.88(s，3H)，4.13-4.19(m，2H)，6.79-6.94(m，4H)，7.20-7.31(m，1H)，7.91-8.12(m，2H)，8.13-8.15(m，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(780mg，1.31mmol)的THF(10.0ml)和MeOH(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(2.0ml，2.0mmol)。将该混合物于70℃搅拌24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集得到的固体，用水洗涤，真空干燥得到59(730mg，96％)，为白色结晶固体。MW 582.44，mp 120-125℃；IR(KBr)3318，2938，1604，1529，1166，1025cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.92-1.96(m，4H)，3.52-3.60(m，5H)，3.82(s，3H)，3.98-4.02(m，1H)，4.16-4.19(m，1H)，4.29(m，1H)，6.75(d，J＝8.3Hz，1H)，6.87(m，1H)，6.94-7.04(m，3H)，7.29-7.33(m，1H)，7.57-7.59(m，1H)，7.85-7.96(m，4H)，8.72(s，1H)，8.91(s，1H)；MS(FAB)m/z582(M++1)。C28H28N3O6Br·1.0H2O的分析计算值C，56.01；H，5.04；N，7.00；Br，13.31。实测值C，56.12；H，4.98；N，6.96；Br，13.57。实施例553-氨基-4-[1-[4-[N’-(2-羟基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于0℃，向2-硝基苯酚(10.0g，72.0mmol)和碳酸钾(9.96g，72.0mmol)的DMF(150ml)的搅拌溶液中滴加苄基溴(9.40ml，79.2 mmol)。于室温下搅拌3小时后，用水稀释反应混合物，将其用乙醚提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥，浓缩至干。残留物经层析，用正己烷-乙酸乙酯(2∶1，v/v)作为洗脱剂，得到2-苄氧基硝基苯(14.7g，89％)，为黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ5.24(s，2H)，7.04(t，J＝7.8Hz，1H)，7.12(d，J＝7.8Hz，1H)，7.31-7.50(m，5H)，7.51(d，J＝1.5Hz，1H)，7.86(dd，J＝7.8，1.5Hz，1H)。
于0℃，向2-苄氧基硝基苯(9.92g，43.3mmol)和NiCl2(20.3g，157mmol)的甲醇(350ml)的搅拌溶液中滴加硼氢化钠(8.09g，214mmol)。原料消失后(经TLC监测)，蒸发该混合物。将黑色的沉淀溶于1N HCl中，然后通过加入1N氢氧化钠碱化该酸性溶液，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并浓缩至干。残留物经层析，用氯仿作为洗脱剂，得到2-苄氧基苯胺(8.60g，100％)，为红色油。1H-NMR(CDCl3)δ3.71(宽s，2H)，5.06(s，2H)，6.68-6.86(m，4H)，7.32-7.44(m，5H)。FAB-MS m/z 200(M++1)。
于0℃，向2-苄氧基苯胺(1.15g，5.77mmol)的苯(60ml)溶液中加入三光气(1.27g，6.35mmol)和三乙胺(2.60ml，17.3mmol)。将该反应混合物在回流下加热20小时。过滤得到的混合物，用己烷洗涤，浓缩滤液得到红色油，将其经层析，用己烷-乙酸乙酯(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[N’-(2-苄氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(2.38g，89％)，为黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)，3.44(s，2H)，3.78(s，3H)，5.07(s，2H)，6.73(dd，J＝8.0，1.7Hz，1H)，6.78(d，J＝1.7Hz，1H)，6.90-6.98(m，3H)，7.07(s，1H)，7.29(s，1H)，7.33-7.38(m，5H)，7.91(d，J＝8.0Hz，1H)，8.14(m，1H)。
于0℃，向4-[N’-(2-苄氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(2.35g，5.08mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入TFA(25ml)。于室温下搅拌3小时后，浓缩该混合物。使残留物溶于1N氢氧化钠中，用乙醚洗涤。将碱性水层倾入冰-1N HCl中，用氯仿-甲醇(4∶1，v/v)提取得到的混合物。用盐水洗涤该提取物，经硫酸钠干燥并蒸发至干。使残留物溶于异丙基醚中，将己烷加入该溶液中直至完成结晶。收集固体，得到4-[N’-(2-苄氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(1.59g，77％)，为棕色固体。1H-NMR(DMSO-d6)δ3.50(s，2H)，3.85(s，3H)，5.26(s，2H)，6.76(d，J＝8.3Hz，1H)，6.83-6.89(m，2H)，6.91(s，1H)，7.01(dd，J＝8.3，2.3Hz，1H)，7.31(t，J＝7.3Hz，1H)，7.39(t，J＝7.3Hz，12H)，7.49(d，J＝7.3Hz，2H)，7.97(dd，J＝8.3Hz，1H)，8.04(d，J＝8.3Hz，1H)，8.80(s，1H)，8.86(s，1H)，12.24(宽s，1H)；FAB-MS m/z 407(M++1)。
向4-[N’-(2-苄氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(1.12g，2.76mmol)、4-(2-吡咯烷基甲氧基)-3-硝基苯甲酸甲酯(890mg，2.76mmol)、HOBt(74.0mg，0.55mmol)、DMAP(67.0mg，0.55mmol)和三乙胺(0.58ml，4.13mmol)的THF(15ml)的溶液中加入EDC·HCl(792mg，4.13mmol)。于室温下搅拌12小时后，用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发至干。残留物经层析，用乙酸乙酯作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-苄氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-硝基苯甲酸甲酯(1.52g，82％)，为黄色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.91(m，1H)，1.95-2.17(m，3H)，3.47-3.53(m，2H)，3.56(s，2H)，3.60(m，1H)，3.68(s，3H)，3.90(s，3H)，4.11(d，J＝7.3Hz，1H)，4.45(m，1H)，5.08(s，2H)，6.70(dd，J＝8.3，1.9Hz，1H)，6.75(d，J＝1.9Hz，1H)，6.91-6.99(m，3H)，7.16(s，1H)，7.18(d，J＝8.3Hz，1H)，7.33-7.40(m，6H)，7.91(d，J＝8.3Hz，1H)，8.11-8.16(m，2H)，8.46(s，1H)。
于室温下，将4-[1-[4-[N’-(2-苄氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-2-吡咯烷基甲氧基]-3-硝基苯甲酸甲酯(1.52g，2.27mmol)的甲醇(20ml)和THF(5ml)溶液经5％Pd-C(湿，52.2％，1.21g)于氢气氛(4kg/cm2)下氢化。搅拌17小时后，滤去催化剂，浓缩滤液至干。残留物经层析，用乙酸乙酯作为洗脱剂，得到3-氨基-4-[1-[4-[N’-(2-羟基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.12g，90％)，为棕色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.97-2.10(m，4H)，3.44(s，3H)，3.52-3.63(m，2H)，3.85(s，3H)，4.10-4.18(m，2H)，4.53(m，1H)，6.65-6.67(m，4H)，6.93-7.02(m，3H)，7.33(d，J＝2.2Hz，1H)，7.36(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.60(s，1H)，7.69(d，J＝8.3Hz，1H)，8.08(s，1H)，9.47宽s，1H)；FAB-MS m/z 549(M++1)。
向3-氨基-4-[1-[4-[N’-(2-羟基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.12g，2.04mmol)的THF-甲醇(4∶1，v/v，20ml)的溶液中加入1N氢氧化钠(4.20ml，4.20mmol)，于室温下搅拌24小时后，浓缩反应混合物。用水稀释残留物，于0℃用1N HCl中和。用氯仿-甲醇(4∶1，v/v)提取该混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干。残留物经层析，用氯仿-甲醇(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到60(352mg，32％)，为淡黄色无定形固体。MW 534.56 IR(KBr)3282，3062，3025，2952，2865，1629，1546，1509，1454，1419cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.87-2.04(m，4H)，3.48-3.57(m，2H)，3.60(s，2H)，3.79(s，3H)，3.94(dd，J＝9.5，7.6Hz，1H)，4.12(dd，J＝9.5，3.9Hz)，4.35(m，1H)，4.87(宽s，1H)，6.70-6.91(m，6H)，7.16(dd，1H，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.26(d，J＝2.0Hz，1H)，7.96(d，J＝8.3Hz，1H)，7.97(d，J＝8.3Hz，1H)，8.80(s，1H)，8.82(s，1H)；FAB-MS m/z 535(M++1)。C28H30N4O7·4.5H2O的分析计算值C，55.63；H，6.39；N，9.10。实测值C，55.08；H，5.06；N，8.69。实施例565-[[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]吡啶-2-甲酸
5-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]吡啶-2-甲酸
于室温下，向5-(甲氧基羰基)吡啶-2-甲酸(2.5g，13.8mmol)和4-DMAP(340mg，2.8mmol)的叔丁醇(15ml)的搅拌溶液中加入Boc2O(6g，27.6mmol)。于室温下搅拌2小时后，将冰和0.2N HCl(20ml)加入该混合物中并用二氯甲烷提取。用饱和碳酸氢钠洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶(50ml)层析，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到6-叔丁氧基羰基烟酸甲酯(2.92g，89％)，为针状物。IR(KBr)2729，1736，1720，1590，1570cm-1；MS(FAB)m/z 238(M++1)。C12H15NO4的分析计算值C，60.75；H，6.37；N，5.90。实测值C，60.72；H，6.46；N，5.78。
于室温下，将6-叔丁氧基羰基烟酸甲酯(1.2g，5.06mmol)在THF(15ml)和0.25N氢氧化钠(40ml，10mol)中的混合物搅拌0.5小时。将该混合物倾入冰-1N HCl(10ml)中。收集固体，用水洗涤并风干。使粗品固体从氯仿-乙醇-IPE中重结晶，得到6-叔丁氧基羰基烟酸(850mg，76％)，为针状物。IR(KBr)n3095，1728，1705cm-1；1H-NMR(DMAO-d6)δ1.63(s，9H)，8.09(m，1H)，8.17(m，1H)，8.42(dt，J＝2.4和8.3Hz，1H)，9.21(t，J＝2.4和8.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z 224(M++1)。C29H33N3O6的分析计算值C，36.18；H，3.18；N，3.84。实测值C，36.85；H，3.35；N，3.79。
于室温下，向6-叔丁氧基羰基烟酸(1.9g，8.51mmol)和三乙胺(1.17g，11.49mmol)在叔丁醇(30ml)和甲苯(30ml)中的搅拌的混合物中加入二苯基磷酰基叠氮化物(2.93g，10.64mmol)的甲苯(3ml)溶液。然后将该混合物在回流下加热5小时。冷却后，将冰和1N HCl(5ml)加入该混合物中并用甲苯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶(50ml)层析，用甲苯∶乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到5-叔丁氧基羰基氨基-2-吡啶甲酸叔丁酯(1.9g，76％)，为浆状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.53(s，9H)，1.63(s，9H)，6.82(br s，1H)，8.01(d，J＝8.8Hz，1H)，8.17(m，1H)，8.46(d，J＝2.4Hz，1H)。
向5-叔丁氧基羰基氨基-2-吡啶甲酸叔丁酯(1.9g，6.45mmol)的二氯甲烷(20ml)搅拌混合物中加入TFA(5ml)。蒸发该混合物，使残留物溶于乙醇(30ml)。将HCl-气体通入该溶液中，同时于0-10℃搅拌10分钟。然后将得到的搅拌的混合物在回流下加热10小时。冷却后，通入氮气以除去大量过量的HCl-气体15分钟，蒸发该混合物。通过加入饱和碳酸氢钠使残留物碱化，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发，残留物经硅胶(30ml)层析，用氯仿-乙醇(98∶2，v/v)作为洗脱剂，得到5-氨基-2-吡啶甲酸乙酯(700mg，65％)，为结晶物质。IR(KBr)n 3423，3190，1708，1657，1587，3338，3296，1691，1641cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.42(t，J＝7.0Hz，3H)，4.11(br s，1H)，4.43(q，J＝7.0Hz，2H)，6.99(dd，J＝2.7和8.5Hz，1H)，7.95(d，J＝8.5Hz，1H)，8.16(d，J＝2.7Hz，1H)；MS(FAB)m/z 167(M+)；C27H29ClN4O6的分析计算值C，57.47；H，6.63；N，16.76。实测值C，57.27；H，5.99；N，16.72。
将5-氨基-2-吡啶甲酸乙酯(660mg，3.95mmol)和1-叔丁氧基羰基脯氨醛(1.1g，5.33mmol)在甲苯(10ml)中的搅拌混合物在回流下加热1小时，在此期间用Dean-Stark分水器共沸除去水。冷却后，真空蒸发该混合物。使残留物溶于甲醇-乙酸(9∶1，v/v，30ml)中。于0-5℃，向该搅拌的溶液中加入NaBH3CN(500mg，7.90mmol)。于室温下再搅拌得到的混合物12小时。将该混合物倾入冰-饱和碳酸氢钠(50ml)中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶(50ml)层析，用氯仿-乙酸乙酯(98∶2，v/v)作为洗脱剂，得到5-[N-[2-(1-叔丁氧基羰基)吡咯烷基]甲基氨基]吡啶-2-甲酸乙酯(1.1g，70％)，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.38(s，9H)，1.42(s，6H)，3.93(s，3H)，4.29(s，2H)，4.67(br s，1H)，7.15(d，J＝8.8Hz，1H)，8.18(dd，J＝1.7和8.8Hz，1H)，8.52(d，J＝1.7Hz，1H)。
于室温下，将5-[[2-(1-叔丁氧基羰基)吡咯烷基]甲基氨基]吡啶-2-甲酸乙酯(800mg，2.29mmol)在二氯甲烷(17ml)和TFA(3ml)中的混合物搅拌3小时。蒸发该混合物，用饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性。用二氯甲烷提取混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠-碳酸钠干燥并蒸发，得到5-[(2-吡咯烷基)甲基氨基]吡啶-2-甲酸乙酯(460mg，81％)，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.32(t，J＝7Hz，3H)，1.58-2.10(多个m，4H)，3.12-3.28(多个m，3H)，3.65(m，1H)，4.30(be q，J＝7Hz，2H)，6.27(br，1H)，6.59(dd，J＝2.4和8.5Hz，1H)，7.65(d，J＝8.5Hz，1H)，7.94(d，J＝2.4Hz，1H)。
于室温下，向5-[(2-吡咯烷基)甲基氨基]吡啶-2-甲酸乙酯(220mg，0.88mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(300mg，0.88mmol)、4-DMAP(135mg，1.10mmol)在DMF(7ml)中的搅拌混合物中加入EDC·HCl(215mg，1.10mmol)。于室温下搅拌得到的混合物20小时。将该混合物倾入冰-水中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体经硅胶(30ml)柱层析纯化，用氯仿-乙醇(98∶2，v/v)作为洗脱剂，用乙醚结晶得到5-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]吡啶-2-甲酸酯(420mg，84％)，为细的针状物。IR(KBr)3319，1703，1628，1585，1529cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.38(t，J＝7Hz，3H)，1.73-2.17(多个m，4H)，3.19和3.54(各为m，各为1H)，3.63(s，2H)，3.70(s，3H)，4.39(be q，J＝7Hz，2H)，4.55(m，1H)，6.02(br s，1H)，6.78-6.84(多个s和m，3H)，6.98(dt，J＝2.4和8.0Hz，1H)，7.16(s，1H)，7.21-7.26(多个m，3H)，7.34(dd，J＝2.4和8.0Hz，1H)，7.90(d，J＝8.3Hz，1H)，7.98(m，2H)，8.16(dd，J＝1.2和8.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z 566(M++1)。C29H32ClN5O5·H2O的分析计算值C，59.63；H，5.87；N，12.37。实测值C，60.06；H，5.76；N，11.95。
于室温下，将5-[[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]吡啶-2-甲酸乙酯(300mg，0.53mmol)的THF∶甲醇(1∶1，v/v，16ml)和0.25N氢氧化钠(11ml，2.75mmol)中的混合物搅拌3小时。将该混合物倾入冰-1N HCl(3ml)中，收集固体，用水洗涤并风干。用二氯甲烷-乙醚收集粗制结晶物质，得到61(180mg，63％)，为无定形固体。MW 537.99 IR(KBr)3319，1701，1620，1585，1533cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1H-NMR(DMSO-d6)δ1.80-2.05(多个m，4H)，2.99(m，1H)，3.50-3.59(多个m，3H)，3.60(s，2H)，3.86(s，3H)，4.11(m，1H)，6.78(d，J＝8.5Hz，1H)，6.91(s，1H)，6.94(m，1H)，7.02(m，1H)，7.14(dd，J＝2.5和8.5Hz，1H)，7.28(t，J＝7.0Hz，1H)，7.45(d，J＝8.0Hz，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，1H)，7.97(d，J＝8.3Hz，1H)，8.08(br s，1H)，8.11(m，1H)，8.89(s，1H)，8.94(s，1H)；MS(FAB)m/z538(M++1)。C27H28ClN5O5·1.5×H2O的分析计算值C，57.39；H，5.53；N，12.39。实测值C，57.37；H，5.54；N，11.74。
于室温下，向5-[(2-吡咯烷基)甲基氨基]吡啶-2-甲酸乙酯(230mg，0.923mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸乙酯(290mg，0.923mmol)、4-DMAP(145mg，1.15mmol)在DMF(7ml)中的搅拌混合物中加入EDC·HCl(225mg，1.15mmol)。于室温下搅拌得到的混合物20小时。将该混合物倾入冰-水中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体经硅胶(30ml)柱层析纯化，用氯仿-乙醇(98∶2，v/v)作为洗脱剂，得到5-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]吡啶-2-甲酸乙酯(400mg，80％)，为细的针状物。IR(KBr)n 3325，1709，1618，1585，1531cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.39(t，J＝7Hz，3H)，1.73-2.07(多个m，4H)，2.28(s，3H)，3.12和3.49(各为m，各为1H)，3.60(s，2H)，4.39(br q，J＝7Hz，2H)，4.53(m，1H)，6.07(br s，1H)，6.23(br s，1H)，6.75-6.77(多个s和m，2H)，6.82(dd，J＝3.0和8.5Hz，1H)，7.09-7.22(多个m，3H)，7.49(d，J＝8.0Hz，1H)，7.90(d，J＝8.5Hz，1H)，7.98(d，J＝2.6Hz，1H)，8.06(d，J＝8.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z546(M++1)。C30H35N5O5·1.5×H2O的分析计算值C，52.92；H，6.69；N，12.23。实测值C，63.11；H，6.48；N，11.96。
于室温下，将5-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]吡啶-2-甲酸乙酯(D91-4596)(290mg，0.53mmol)的THF甲醇(1∶1，v/v，16ml)和0.25N氢氧化钠(11ml，2.75mmol)中的混合物搅拌3小时。将该混合物倾入冰-1N HCl(3ml)中，收集固体，用水洗涤并风干。用二氯甲烷-乙醚收集粗制结晶物质，得到62(170mg，62％)，为无定形固体。MW 517.58 IR(KBr)3283，1701，1618，1529 cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1H-NMR(DMSO-d6)δ1.78-2.04(多个m，4H)，2.25(s，3H)，2.95-3.55(多个m，4H)，3.59(s，2H)，3.87(s，3H)，4.11(m，1H)，6.75-7.24(多个m，7H)，7.83-7.97(多个m，3H)，8.01(d，J＝8.3Hz，1H)，8.13(d，J＝2.6Hz，1H)，8.11(m，1H)，8.47(s，1H)，8.57(s，1H)；MS(FAB)m/z 518(M++1)。C28H31N5O5·2.5×H2O的分析计算值C，60.50；H，6.39；N，12.60。实测值C，60.31；H，6.28；N，12.10。实施例572-[1-[[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基]吡啶-5-甲酸
于0-10℃，向2-羟基-5-吡啶甲酸甲酯(2.0g，13.06mmol)、三苯膦(4.2g，15.93mmol)和1-叔丁氧基羰基-(L)-脯氨醇(2.63g，13.06mmol)的THF(25ml)的搅拌溶液中加入DIAD(3.3g，15.67mmol)的THF(5ml)溶液。然后将得到的搅拌混合物在回流下加热3小时。冷却后，真空蒸发该混合物。残留物经硅胶(120ml)层析，用正己烷-乙酸乙酯(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到2-[2-(1-叔丁氧基羰基)吡咯烷基]甲氧基吡啶-5-甲酸甲酯(3.0g，68％)，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，1.82-2.04(多个m，4H)，3.45(m，2H)，3.91(s，3H)，4.10-4.32(多个m，2H)，4.48(m，1H)，6.32(br，1H)，6.75(d，J＝8.8Hz，1H)，8.15(dd，J＝2和8.8Hz，1H)，8.79(d，J＝2Hz，1H)。
于室温下，将2-[2-(1-叔丁氧基羰基)吡咯烷基]甲氧基吡啶-5-甲酸甲酯(2.9g，8.62mmol)在二氯甲烷(80ml)和TFA(20ml)中的混合物搅拌3小时。蒸发该混合物，用饱和碳酸氢钠使残留物碱化。用二氯甲烷提取该混合物，用盐水洗涤提取物，经硫酸钠-碳酸钠干燥并蒸发，得到2-(2-吡咯烷基)甲氧基吡啶-5-甲酸甲酯(1.2g，59％)，为一种胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.58-2.050(多个m，4H)，2.90-3.02(多个m，2H)，3.87和3.90(各为s，3H)，4.23(m，1H)，4.37(m，1H)，6.33(br，1H)，6.78(d，J＝8.5Hz，1H)，8.15(dd，J＝2.2和8.8Hz，1H)，8.79(d，J＝2.2Hz，1H)。
于室温下，向2-(2-吡咯烷基)甲氧基吡啶-5-甲酸甲酯(370mg，1.57mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(525mg，1.57mmol)、4-DMAP(230mg，1.88mmol)在DMF(10ml)中的搅拌混合物中加入EDC·HCl(360mg，1.88mmol)。于室温下搅拌得到的混合物20小时。将该混合物倾入冰-水中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体经硅胶(30ml)柱层析纯化，用氯仿-乙醇(98∶2，v/v)作为洗脱剂，用乙醚结晶得到2-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯(600mg，69％)，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ.21和2.01(各为m，4H)，3.45-4.50(多个s和m，13H，含酰胺异构体)，6.58-8.83(多个s和m，12H，含酰胺异构体)。
于室温下，将2-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]吡啶-5-甲酸甲酯(230mg，0.415mmol)的THF(1ml)和0.25N氢氧化钠(4ml，1mmol)中的混合物搅拌14小时，于60℃搅拌3小时。冷却后，将该混合物倾入冰-1N HCl(2ml)中，收集固体，用水洗涤并风干。通过制备性TLC板纯化粗品结晶物质，用氯仿∶乙醇(9∶1，v/v)作为洗脱剂，用乙醚结晶得到63(150mg，67％)，为无定形固体。MW 538.98；IR(KBr)3329，1709，1601，1533 cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.85-2.05(多个m，4H)，3.50-3.60(多个m，2H)，3.82(s，3H)，3.86(s，2H)，4.29(m，1H)，4.42(m，1H)，6.72-7.05(多个m，4H)，7.28(m，1H)，7.43(d，J＝8Hz，2H)，7.95(d，J＝8.3Hz，1H)，8.09(d，J＝8.3Hz，2H)，8.64(m，1H)，8.89(s，1H)，8.93(s，1H)；MS(FAB)m/z 539；(M+)。C27H28ClN4O6·1.3×H2O的分析计算值C，57.55；H，5.47；N，9.94。实测值C，57.94；H，5.00；N，9.45。实施例585-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]吡啶-2-甲酸
于室温下，向5-(2-吡咯烷基)甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯(370mg，1.57mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(595mg，1.57mmol)、4-DMAP(230mg，1.88mmol)在DMF(10ml)中的搅拌混合物中加入EDC·HCl(360mg，1.88mmol)。于室温下搅拌得到的混合物20小时。将该混合物倾入冰-水中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体经硅胶(30ml)柱层析纯化，用氯仿-乙醇(98∶2，v/v)作为洗脱剂，用乙醚结晶得到5-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]吡啶-2-甲酸甲酯(650mg，69％)，为无定形固体。IR(KBr)n 3323，1720，1624，1601，1527 cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.22和2.00(各为m，4H)，3.48-4.55(多个s和m，13H，含酰胺异构体)，6.93-8.82(多个s和m，12H，含酰胺异构体)。MS(FAB)m/z 597(M+-1)和599(M++1)。C28H30BrN4O6·1.0×H2O的分析计算值C，54.55；H，5.23；N，9.09。实测值C，54.13；H，5.03；N，9.33。
于室温下，将5-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]吡啶-2-甲酸甲酯(300mg，0.5mmol)的THF∶甲醇(1∶1，v/v，2ml)和0.25N氢氧化钠(4ml，1mmol)中的混合物搅拌3小时，于60℃搅拌5小时。冷却后，将该混合物倾入冰-1N HCl(2ml)中。收集固体，用水洗涤并风干。通过制备性TLC板纯化粗品结晶物质，用氯仿∶乙醇(9∶1，v/v)作为洗脱剂，用乙醚结晶得到64(180mg，62％)，为无定形固体。MW 583.43 IR(KBr)n 3319，1705，1685，1601，1529 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.82-2.05(多个m，4H)，3.48-3.58(多个m，2H)，3.82(s，3H)，3.86(s，2H)，4.42-4.55(多个m，3H)，6.72-6.98(多个m，4H)，7.32(t，J＝8Hz，1H)，7.60(d，J＝8Hz，1H)，7.95(m，2H)，8.08(m，1H)，8.63(m，1H)，8.64(m，1H)，8.89(s，1H)，8.93(s，1H)；MS(FAB)m/z583(M+)；C27H28BrN4O6·2.0×H2O的分析计算值C，52.26；H，5.20；N，9.03。实测值C，52.72；H，4.63；N，8.50。实施例594-[1-[3-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-2-甲氧基-6-吡啶基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向3-氨基-2-甲氧基-6-吡啶基乙酸乙酯(1.61g，7.66mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-溴代苯酯(948ml，7.66mmol)和三乙胺(107ml，0.776mmo1)。搅拌过夜后，将该混合物倾入水(100ml)中，用氯仿-甲醇(4∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。使残留物从氯仿-甲醇-己烷中重结晶，得到3-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-2-甲氧基-6-吡啶基乙酸乙酯(2.91g，93％)，为无色结晶粉末。mp 160-163℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.19(dt，J＝7.1，0.7Hz，3H)，3.69(s，2H)，3.95(s，3H)，4.07-4.13(m，2H)，6.90(d，J＝7.8Hz，1H)，6.99(t，J＝7.8Hz，1H)，7.33(t，J＝7.8Hz，1H)，7.61(d，J＝7.8Hz，1H)，7.96(dd，J＝7.8，1.5Hz，1H)，8.3 1(d，J＝7.8Hz，1H)，8.82(s，1H)，9.12(s，1H)。MS(FAB)m/z408(M+)，410(M++2)。C17H18BrN3O4·0.25H2O的分析计算值C，49.47；H，4.52；N，9.96。实测值C，49.34；H，4.48；N，9.96。
将3-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-2-甲氧基-6-吡啶基乙酸乙酯(2.90g，7.10mmol)、0.25N氢氧化钠(56.8ml，14.2mmol)和THF(50ml)的混合物搅拌5小时。用1N HCl中和该混合物，过滤收集产生的沉淀。使残留物从氯仿-甲醇-己烷中重结晶，得到3-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-2-甲氧基-6-吡啶基乙酸(2.40g，89％)，为无色结晶粉末。mp 195-197℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ3.59(s，2H)，3.95(s，3H)，6.88(d，J＝8.1Hz，1H)，6.97-7.01(m，1H)，7.33(t，J＝7.3Hz，1H)，7.61(d，J＝8.1Hz，1H)，7.95-7.97(m，1H)，8.29(d，J＝8.1Hz，1H)，8.81(s，1H)，9.10(s，1H)，12.35(br s，1H)；C15H14BrN3O4的分析计算值C，47.39；H，3.71；N，11.05。实测值C，47.27；H，3.59；N，10.86。
向3-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-2-甲氧基-6-吡啶基乙酸(751mg，1.97mmol)和(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基苯甲酸甲酯(500mg，1.97mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(566mg，2.96mmol)、DMAP(cat.)和HOBt(cat.)。搅拌过夜后，使该混合物分配于乙酸乙酯(200ml)和盐水(200ml)之间。分离各相。用盐水(100ml)洗涤有机相，经硫酸镁干燥并蒸发。使得到的残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-[3-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-2-甲氧基-6-吡啶基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.16g，96％)，为黄色粘性固体。
将4-[1-[3-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-2-甲氧基-6-吡啶基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.16g，1.88mmol)、0.25N氢氧化钠(15ml，3.75mmol)和THF(15ml)的混合物搅拌过夜。用1N HCl中和该混合物，用氯仿-甲醇(4∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。得到的残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(40∶1-10∶1)作为洗脱剂，得到65，为淡黄色无定形固体。MW 601.42，1H-NMR(DMSO-d6)δ2.27-2.39(m，2H)，3.33-4.84(多个m，10H)，5.33-5.53(m，1H)，6.87-6.90(m，1H)，6.99(t，1H，J＝7.6Hz)，7.08(d，2H，J＝9.0Hz)，7.34(t，1H，J＝7.6Hz)，7.61(d，1H，J＝7.8Hz)，7.88(d，2H，J＝9.0Hz)，7.97(d，1H，J＝8.3Hz)，8.28-8.32(m，1H)，8.81-8.82(m，1H)，9.10-9.12(m，1H)，12.66(br s，1H)；MS(FAB)m/z 601(M+)，603(M++2)。C27H26BrFN4O6的分析计算值C，53.92；H，4.36；N，9.32。实测值C，52.37；H，4.62；N，8.38。实施例604-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(337mg，1.18mmol)和4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(300mg，1.18mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(339mg，1.77mmol)、HOBt(cat.)和DMAP(cat.)。将该反应混合物搅拌过夜。使该混合物分配于乙酸乙酯(200ml)和水(200ml)之间，分离有机相。用盐水(200ml)洗涤有机相，经硫酸镁干燥并蒸发。使残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(50∶1)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(613mg，定量)，为黄色粘性的油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.03-2.55(多个m，共5H)，3.47-4.21(多个m，共7H)，4.44-4.60(m，3H)，5.21和5.34(各为m，共1H)，6.87-7.16(m，8H)，7.52-7.55(m，3H)，7.93(d，J＝8.8Hz，2H)，7.99(d，J＝8.8Hz，1H)。
向4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(613mg，1.18mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(9.4ml，2.36mmol)。将该混合物回流1天。冷却至室温后，将该混合物倾入1N HCl(50ml)中，用氯仿-甲醇(5∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。得到的残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到66(378mg，63％)，为无色无定形固体。MW 505.54，1H-NMR(DMSO-d6)δ.08-2.30(m，共5H)，3.47-4.63(多个m，7H)，5.30-5.50(m，1H)，6.94(t，J＝7.3Hz，1H)，7.02-7.17(m，6H)，7.37-7.41(m，2H)，7.82-7.96(m，4H)，9.05(s，1H)；MS(FAB)m/z506(M++1)。C28H28FN3O5·1.75H2O的分析计算值C，62.62；H，5.91；N，7.82。实测值C，62.23；H，5.63；N，7.18。实施例614-[(4S)-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-氟-(2S)-脯氨酸(1.85g，7.93mmol)的THF(15ml)的搅拌溶液中加入BH3·DMS(0.75ml，7.93mmol)。搅拌下回流加热5小时后，使该混合物冷却至室温，真空浓缩。通过加入水(100ml)猝灭得到的残留物，用氯仿(2×200ml)提取。用盐水(100ml)洗涤合并的提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲醇(1.76g，定量)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.64(m，1H)，1.97-2.28(m，2H)，3.53-3.87(多个m，4H)，4.09-4.25(m，1H)，5.09和5.22(各为m，共1H)。
于室温下，向1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲醇(500mg，2.28mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(416mg，2.74mmol)、三苯膦(719mg，2.74mmol)的THF(10ml)的搅拌混合物中加入DIAD(0.54ml，2.74mmol)。搅拌下，将混合物加热至回流5小时。冷却至室温后，真空浓缩该混合物。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(10∶1-4∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(597mg，74％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.49-1.59(m，9H)，2.05-2.21(m，1H)，3.56-4.43(多个m，8H)，5.19和5.32(各为m，共1H)，6.97(m，2H)，7.98(d，J＝8.5Hz，2H)。
将4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(590mg，1.67mmol)和TFA(5ml)在二氯甲烷(5ml)中的混合物搅拌3小时。真空浓缩该混合物后，用饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性。用氯仿(2×200ml)提取。经碳酸钾干燥合并的提取物并蒸发，得到4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(414mg，98％)，为黄色固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.89-2.02(m，1H)，2.16-2.31(m，1H)，2.98(m，1H)，3.35(m，1H)，3.46-3.68(m，1H)，3.86(s，3H)，4.00-4.08(m，2H)，5.16和5.29(各为t，J＝4.7Hz，共1H)，6.91(d，J＝8.8Hz，2H)，7.96(d，J＝8.8Hz，2H)。
将4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(205mg，0.810mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(254mg，0.810mmol)、EDC·HCl(233mg，1.22mmol)、HOBt(cat.)和DMAP(cat.)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(200ml)稀释该混合物，用盐水(2×100ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(445mg，定量)，为浅棕色粘性物。1H-NMR(CDCl3)δ2.05-2.55(m，共6H)，3.55-4.13(m，11H)，4.48-4.60(m，2H)，5.20和5.33(各为m，共1H)，6.29(s，1H)，6.79(m，2H)，6.96(d，J＝8.8Hz，2H)，7.11-7.25(m，3H)，7.48(d，J＝7.6Hz，1H)，7.93-8.09(m，4H)。
于室温下，将4-[(4S)-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(445mg，1.62mmol)和0.25N氢氧化钠(15ml，3.75mmol)在THF(15ml)中的混合物搅拌过夜，然后回流下搅拌2小时。用1H HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(4∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到67(260mg，30％)，为淡黄色无定形固体。MW 535.56，1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25-2.51(m，5H)，3.33-4.41(多个m，10H)，5.30-5.50(m，1H)，6.75-7.17(m，7H)，7.79(d，J＝8.1Hz，1H)，7.87-8.04(m，3H)，8.48(m，1H)，8.58(m，1H)；MS(FAB)m/z536(M++1)。C29H30FN3O6·H2O的分析计算值C，62.92；H，5.83；N，7.59。实测值C，62.40；H，5.82；N，6.93。实施例624-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
将4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(501mg，1.98mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(750mg，1.98mmol)、EDC·HCl(569mg，2.97mmol)、HOBt(cat.)和DMAP(cat.)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水(100ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)至氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.29g，定量)，为棕色粘性的油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.05-2.58(m，2H)，3.49-4.17(多个m，12H)，4.52-4.65(m，2H)，6.82-7.33(多个m，8H)，7.53(dd，J＝8.1，1.5Hz，1H)，7.95-8.02(m，4H)，8.14(dd，J＝8.3，1.7Hz，1H)。
将4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.29g，2.10mmol)和0.25N氢氧化钠(17ml，4.20mmol)在THF(20ml)中的混合物在搅拌下回流5小时。将该混合物倾入冰-冷却的1N HCl(100ml)中，用氯仿-甲醇(4∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到68(860mg，68％)，为无色无定形固体。MW 600.43 1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24-2.31(m，2H)，3.21-4.63(多个m，10H)，5.31-5.51(m，1H)，6.74-7.10(m，5H)，7.32(t，J＝7.8Hz，1H)，7.60(d，J＝7.8Hz，2H)，7.87-7.99(m，4H)，8.74-8.75(m，1H)，8.92-8.94(m，1H)；MS(FAB)m/z 601(M++1)。C28H27BrFN3O6·2H2O的分析计算值C，52.84；H，4.91；N，6.60。实测值C，52.38；H，4.62；N，5.99。对于68的钠盐mp 180-182℃；C28H27BrFN3NaO6·0.75H2O的分析计算值C，52.88；H，4.36；N，6.61。实测值C，52.97；H，4.36；N，6.61。实施例634-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
将4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(205mg，0.810mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(254mg，0.810mmol)、EDC·HCl(233mg，1.22mmol)、HOBt(cat.)和DMAP(cat.)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(200ml)稀释该混合物，用盐水(2×100ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(376mg，81％)，为黄色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.07-2.56(m，2H)，3.57-4.14(多个m，11H)，4.50-4.61(m，2H)，5.22和5.35(多个m，共1H)，6.80-7.33(多个m，9H)，7.93-8.00(m，3H)，8.16(d，J＝8.1Hz，1H)。
于室温下，将4-[1-[4-N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(376mg，0.660mmol)和0.25N氢氧化钠(15ml，3.75mmol)在THF(15ml)中的混合物搅拌过夜，然后回流下搅拌2小时。用1H HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(4∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到69(260mg，30％)，为淡黄色无定形固体。MW 555.98，1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24-2.501(m，2H)，3.48-4.65(多个m，10H)，5.30-5.50(m，1H)，6.75-7.08(m，5H)，7.29(t，J＝7.3Hz，1H)，7.43-7.45(m，1H)，7.89-7.98(m，2H)，7.99(d，J＝8.3Hz，1H)，8.09(d，J＝7.1Hz，1H)，8.90-8.96(m，2H)；MS(FAB)m/z 556(M++1)。C28H27ClFN3O6·1/4H2O的分析计算值C，60.00；H，4.95；N，7.50。实测值C，59.67；H，5.08；N，7.10。实施例644-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-[1-(4-苄氧基羰基氨基苯基乙酰基)-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(300mg，0.576mmol)中加入乙醇-THF(5∶1，30ml)，搅拌下，将该溶液经5％Pd/C(300ml)氢化12小时。过滤该混合物以除去催化剂。减压浓缩滤液。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-(4-氨基苯基乙酰基)-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(200mg，90％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ 2.01-2.56(多个m，2H)，3.50-4.14(多个m，5H)，4.45-4.62(m，2H)，5.21和5.34(各为m，共1H)，6.60-6.65(m，2H)，6.88(d，J＝8.8Hz，0.5H)，6.99-7.05(m，3.5H)，7.95-8.00(m，2H)。
将4-[1-(4-氨基苯基乙酰基)-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(200mg，0.518mmol)溶于THF(10ml)中。将三乙胺(108μl，0.776mmol)和异氰酸2-溴代苯酯(96μl，0.776mmol)加入该溶液中。将混合物搅拌过夜，用乙酸乙酯(200ml)稀释。用盐水(100ml)洗涤该溶液，经硫酸镁干燥并减压除去溶剂。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)至氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(303mg，定量)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ 2.08-2.60(多个m，2H)，3.56-4.69(多个m，10H)，5.28和5.40(各为m，共1H)，6.84-6.92(m，3H)，7.03-7.10(m，3H)，7.14(d，J＝8.1Hz，1H)，7.23(t，J＝8.1Hz，1H)，7.39-7.44(m，2H)，7.89(d，J＝8.1Hz，1H)，7.98-8.03(m，2H)，8.09(d，J＝8.1Hz，1H)。
将4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基-甲氧基]苯甲酸甲酯(300mg，0.513mmol)溶于THF(5ml)中，将0.25N氢氧化钠(4.0ml，1.00mmol)加入该溶液中。搅拌3天后，将该混合物倾入1N HCl(100ml)中，用氯仿-甲醇(5∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物，减压除去溶剂。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到70(209mg，71％)，为无色无定形固体。MW 570.41，1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24-2.51(m，2H)，3.36-4.64(多个m，7H)，5.31-5.50(m，1H)，6.97(t，J＝7.8Hz，1H)，7.04(d，J＝8.5Hz，1H)，7.09(d，J＝8.8Hz，1H)，7.14-7.20(m，2H)，7.34(t，J＝7.8Hz，1H)，7.38-7.43(m，2H)，7.61(d，J＝8.1Hz，1H)，7.87-7.92(m，2H)，8.08(d，J＝8.1Hz，1H)，8.1 5(s，1H)，9.45-9.47(m，1H)，12.66(br s，1H)；MS(FAB)m/z572(M++2)，570(M+)。C27H25BrFN3O5·1.5H2O的分析计算值C，54.28；H，4.72；N，7.03。实测值C，54.67；H，4.51；N，6.61。实施例654-[1-[4-[N’-(2-碘代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(1.94g，8.16mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-碘代苯酯(2.0g，8.16mmol)和三乙胺(114μl，0.816mmol)。搅拌过夜后，将该混合物倾入1N HCl(200ml)。过滤收集产生的沉淀，并使之溶于氯仿(200ml)中。经硫酸镁干燥该溶液并蒸发，得到4-[N’-(2-碘代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(3.93g，定量)，为淡黄色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)，3.49(s，2H)，3.85(s，3H)，6.78-6.88(m，4H)，7.07(s，1H)，7.31-7.35(m，1H)，7.76(dd，J＝7.8，1.5Hz，1H)，7.95(d，J＝8.3Hz，1H)，7.99(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)；MS(ESI)m/z483(M++1)。
将4-[N’-(2-碘代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(3.93g，8.16mmol)和TFA(5ml)在二氯甲烷(5ml)中的搅拌混合物回流3小时。冷却至室温后，真空浓缩该混合物，将水(50ml)加入该残留物中。过滤收集产生的沉淀，经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(9∶1)作为洗脱剂，得到4-[N’-(2-碘代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(2.89g，83％)，为淡黄色结晶粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ3.62(s，2H)，3.88(s，3H)，6.78(d，J＝8.3Hz，1H)，6.83-6.87(m，1H)，6.94(s，1H)，7.32-7.36(m，1H)，7.69(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)，7.84(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)，7.97-8.00(m，1H)，8.55(m，1H)，8.82(m，1H)，12.26(br s，1H)。
将4-[N’-(2-碘代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(505mg，1.18mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(300mg，1.18mmol)、EDC·HCl(339mg，1.77mmol)、DMAP(催化量)和HOBt(催化量)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水(2×200ml)洗涤。经硫酸镁干燥该溶液并蒸发。得到的残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-碘代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(500mg，64％)，为无色粘性的油。1H-NMR(CDCl3)δ07-2.58(m，2H)，3.59-4.20(m，11H)，4.51-4.64(m，2H)，5.24和5.37(各为m，共1H)，6.80-6.91(m，5H)，6.98(d，J＝8.8Hz，2H)，7.34(t，J＝7.8Hz，1H)，7.78(dd，J＝7.8，1.2Hz，1H)，7.95-8.02(m，4H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-碘代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(500mg，0.756mmol)的THF(6ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(6ml)。于室温下继续搅拌过夜，然后回流下搅拌5小时。冷却至室温后，将该溶液倾入1N HCl(100ml)中，用氯仿-甲醇(4∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到71(295mg，60％)，为无色无定形固体。MW 647.431H-NMR(DMSO-d6)δ2.2.09-2.31(m，2H)，3.33-4.41(多个m，10H)，5.30-5.50(m，1H)，6.77-6.92(m，3H)，7.03-7.09(m，2H)，7.34(t，J＝8.1Hz，1H)，7.69(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)，7.83-7.99(m，4H)，8.54(m，1H)，8.82(m，1H)；MS(FAB)m/z 648(M++1)。C28H27FIN3O4的分析计算值C，51.94；H，4.20；N，6.49。实测值C，51.17；H，4.53；N，5.76。实施例664-[(4S)-氟-1-[4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基苯基乙酸乙酯(6.43g，35.9mmol)和三乙胺(5.50ml，39.5mmol)的THF(70ml)的搅拌溶液中加入异氰酸苯酯(3.90ml，35.9mmol)，于室温下搅拌反应混合物4天。减压收集产生的沉淀，用正己烷洗涤滤液，得到4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸乙酯(9.64g，90％)，为白色结晶粉末。mp 153-155℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.26(t，J＝7.1Hz，3H)，3.52(s，2H)，4.15(q，J＝7.1Hz，2H)，6.98-7.04(m，1H)，7.07-7.11(m，4H)，7.18-7.25(m，5H)，7.42(s，1H)；MS(FAB)m/z 299(M++1)。C17H18N2O3的分析计算值C，68.44；H，6.08；N，9.39。实测值C，68.22；H，6.10；N，9.36。
向4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸乙酯(9.64g，32.3mmol)的THF(80ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(80ml)，于回流下将该反应混合物加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中。减压收集产生的沉淀，粗品固体从甲醇-氯仿中重结晶，得到4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(8.14g，93％)，为白色结晶粉末。MS(FAB)m/z 271(M++1)；C15H14N2O3的分析计算值C，66.66；H，5.22；N，10.36。实测值C，66.45；H，5.22；N，10.30。
于室温下，将4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(310mg，1.15mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(287mg，1.13mmol)、EDC·HCl(260mg，1.36mmol)、HOBt(185mg，1.37mmol)和三乙胺(190ml，1.36mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(570mg，99％)，为淡黄色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.07-2.58(m，2H)，3.55-3.56(m，1H)，3.69-3.98(多个s和m，共6H)，4.01-4.08和4.21-4.25(各为m，1H)，4.46-4.65(m，2H)，5.23-5.25和5.38(各为m，1H)，6.88-7.07(m，7H)，7.15-7.20(m，2H)，7.28-7.30(m，2H)，7.34和7.40(各为s，1H)，7.71和7.81(各为s，1H)，7.91-7.95和7.99-8.01(各为m，2H)；MS(ESI)m/z 506(M++1)。
向4-[(4S)-氟-1-[4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(570mg，1.13mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到72(348mg，63％)，为白色结晶粉末。MW491.51，mp 169-171℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24-2.36(m，2H)，3.47-4.08(m，5H)，4.20-4.64(m，2H)，5.31-5.50(m，1H)，6.94-7.46(多个m，共11H)，7.87-7.92(m，2H)，8.64-8.67(m，2H)，12.63(br s，1H)；MS(FAB)m/z 492(M++1)。C27H26FN3O6·1/4H2O的分析计算值C，65.38；H，5.38；N，8.47；F，3.83。实测值C，65.13；H，5.38；N，8.25；F，3.78。实施例674-[(4S)-氟-1-[3-甲基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.20g，5.42mmol)和三乙胺(830ml，5.95mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入异氰酸苯酯(650ml，5.98mmol)，于室温下搅拌反应混合物过夜。将该反应混合物浓缩至小体积，用正己烷稀释。减压收集产生的沉淀，用正己烷洗涤滤液，得到3-甲基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸叔丁酯(1.12g，61％)，为白色结晶粉末。mp 143-145℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，2.09(s，3H)，3.47(s，2H)，6.44(s，1H)，7.01-7.07(m，4H)，7.16-7.27(m，2H)，7.30-7.33(m，2H)，7.45-7.47(m，1H)。
向3-甲基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸叔丁酯(1.12g，3.29mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入TFA(10ml)，于室温下，将该反应混合物搅拌4小时。将该反应混合物浓缩至小体积并倾入冰-水中。减压收集产生的沉淀，粗品固体从甲醇-氯仿中重结晶，得到3-甲基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(680mg，73％)，为白色针状物。1H-NMR(DMSO-d6)δ2.22(s，3H)，3.46(s，2H)，6.93-7.05(m，3H)，7.25-7.29(m，2H)，7.43-7.46(m，2H)，7.72-7.74(m，1H)，7.90(s，1H)，8.98(s，1H)，12.26(brs，1H)。C16H16N2O3的分析计算值C，67.59；H，5.67；N，9.85。实测值C，67.47；H，5.68；N，9.73。
于室温下，将3-甲基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(301mg，1.06mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(268mg，1.06mmol)、EDC·HCl(243mg，1.27mmol)、HOBt(172mg，1.27mmol)和三乙胺(180ml，1.29mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-60∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[3-甲基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(550mg，q.y.)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.79和1.87(各为s，3H)，2.04-2.61(m，2H)，3.52-3.54(m，1H)，3.73-4.27(多个s和m，共7H)，4.47-4.67(m，2H)，5.26-5.27和5.40(各为m，1H)，6.79-6.99(m，6H)，7.14-7.18(m，2H)，7.27-7.31(m，2H)，7.40-7.44(m，1H)，7.89-8.01(m，3H)；MS(ESI)m/z 520(M++1)。
向4-[(4S)-氟-1-[3-甲基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(550mg，1.06mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热2小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到73(226mg，42％)，为白色结晶粉末。MW 505.54，mp 130-135℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.18-2.30(多个s和m，共5H)，3.47-3.92(多个m，共5H)，4.03-4.63(m，2H)，5.31-5.50(m，1H)，6.94-7.10(m，5H)，7.26-7.30(m，2H)，7.45-7.47(m，2H)，7.70-7.75(m，1H)，7.87-7.92(m，3H)，8.96-8.98(m，1H)，12.63(br s，1H)；MS(ESI)m/z506(M++1)。C28H28FN3O5·1/2H2O的分析计算值C，65.36；H，5.68；N，8.17；F，3.69。实测值C，65.61；H，5.71；N，7.84；F，3.60。实施例684-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.09g，4.93mmol)和三乙胺(755ml，5.42mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-氟代苯酯(610μl，5.44mmol)，于室温下搅拌反应混合物过夜。将该反应混合物浓缩至小体积，用正己烷稀释。减压收集产生的沉淀，用正己烷洗涤滤液，得到4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.31g，74％)，为白色结晶粉末。mp 89-91℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，2.06(s，3H)，3.49(s，2H)，6.62(s，1H)，6.92-7.09(m，5H)，7.21(br s，1H)，7.49-7.51(m，1H)，8.10-8.15(m，1H)。C20H23FN2O3的分析计算值C，67.02；H，6.47；N，7.82；F，5.30。实测值C，66.74；H，6.35；N，7.85；F，5.69。
向4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.25g，3.49mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入TFA(10ml)，于室温下，将该反应混合物搅拌过夜。将该反应混合物浓缩至小体积并倾入冰-水中。减压收集产生的沉淀，粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(830mg，79％)，为白色针状物。1H-NMR(DMSO-d6)δ2.23(s，3H)，3.47(s，2H)，6.96-7.30(m，5H)，7.74-7.76(m，1H)，8.17-8.20(m，1H)，8.33(s，1H)，8.94(s，1H)，12.27(brs，1H)。C16H15FN2O3的分析计算值C，63.57；H，5.00；N，9.27，F，6.28。实测值C，63.28；H，5.00；N，9.14，F，6.43。
于室温下，将4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(321mg，1.06mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(269mg，1.06mmol)、EDC·HCl(244mg，1.27mmol)、HOBt(172mg，1.27mmol)和三乙胺(177ml，1.27mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(560mg，98％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.78和1.86(各为s，3H)，2.16-2.65(m，2H)，3.58-3.61(m，1H)，3.74-4.15(多个s和m，共7H)，4.29-4.34和4.46-4.49(各为m，1H)，4.64-4.73(m，1H)，5.29-5.34和5.43-5.47(各为m，1H)，6.84-6.97(m，6H)，7.04-7.07(m，1H)，7.21(br s，1H)，7.55-7.59(m，1H)，7.85-8.02(m，3H)，8.18-8.22(m，1H)；MS(ESI)m/z538(M++1)。
向4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(560mg，1.04mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到74(297mg，42％)，为白色结晶粉末。MW 523.53，mp 137-143℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.20-2.31(多个s和m，共5H)，3.56-3.92(多个m，共5H)，4.03-4.63(m，2H)，5.31-5.50(m，1H)，6.96-7.26(多个m，共7H)，7.72-7.77(m，1H)，7.87-7.92(m，2H)，8.17-8.22(m，1H)，8.32-8.36(m，1H)，8.94-8.95(m，1H)，12.66(br s，1H)；MS(ESI)m/z 524(M++1)。C28H27F2N3O5的分析计算值C，64.24；H，5.20；N，8.03；F，7.26。实测值64.44；H，5.75；N，7.40；F，6.73。实施例694-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基苯基乙酸乙酯(1.13g，6.31mmol)和三乙胺(965ml，6.92mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-三氟甲基苯酯(953ml，6.31mmol)，于室温下搅拌反应混合物2天。减压收集产生的沉淀，用正己烷洗涤滤液，得到4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸乙酯(1.93g，84％)，为白色针状物。mp 137-139℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.25-1.29(m，3H)，3.59(s，2H)，4.15-4.20(m，2H)，7.05(br s，1H)，7.13-7.23(m，6H)，7.47-7.51(m，1H)，7.54-7.56(m，1H)，8.01-8.03(m，1H)。
向4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸乙酯(1.93g，5.27mmol)的THF (10ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(10ml)，将该反应混合物在回流下加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中。减压收集产生的沉淀，粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸(910mg，51％)，为白色结晶粉末。mp 224-225℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ3.50(s，2H)，7.18(d，J＝8.3Hz，2H)，7.25-7.29(m，1H)，7.40(d，J＝8.3Hz，2H)，7.62-7.69(m，2H)，7.95-7.97(m，1H)，8.06(s，1H)，9.37(s，1H)，12.27(br s，1H)。C16H13F3N2O3的分析计算值C，56.81；H，3.87；N，8.28，F，16.85。实测值C，56.68；H，3.87；N，8.16，F，16.89。
于室温下，将4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸(302mg，0.89mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(226mg，0.89mmol)、EDC·HCl(205mg，1.07mmol)、HOBt(145mg，1.07mmol)和三乙胺(150ml，1.08mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌3天。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-60∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(463mg，90％)，为淡黄色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.09-2.60(m，2H)，3.56-4.12(多个s和m，共8H)，4.26-4.65(m，2H)，5.26-5.29和5.39-5.42(各为m，共1H)，6.87-6.93(m，2H)，6.99-7.13(m，5H)，7.30-7.33(m，1H)，7.44-7.53(m，2H)，7.88-7.92(m，1H)，7.99-8.04(m，2H)，8.09-8.15(m，1H)；MS(ESI)m/z574(M++1)。
向4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(460mg，0.80mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到75(169mg，38％)，为白色结晶粉末。MW 559.51 mp 130-135℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24-2.30(m，2H)，3.51-4.24(多个m，共5H)，4.38-4.40和4.61(各为m，共2H)，5.31-5.50(m，1H)，7.03-7.42(多个m，共7H)，7.62-7.69(m，2H)，7.87-8.07(m，4H)，9.36-9.37(m，1H)，12.64(br s，1H)；MS(ESI)m/z560(M++1)。C28H25F4N3O5的分析计算值C，60.11；H，4.50；N，7.51；F，13.58。实测值C，60.10；H，4.85；N，7.01；F，12.90。实施例704-[(4S)-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(1.11g，4.68mmol)和三乙胺(720ml，5.17mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-三氟甲基苯酯(707ml，4.68mmol)，于室温下搅拌反应混合物2天。将该反应混合物浓缩至小体积，用正己烷稀释。减压收集产生的沉淀，用正己烷洗涤，得到3-甲氧基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸叔丁酯(1.11g，56％)，为白色结晶粉末。mp 131-133℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)，3.49(s，2H)，3.85(s，3H)，6.83-6.88(m，3H)，6.98(br s，1H)，7.17-7.21(m，1H)，7.52-7.59(m，2H)，7.89-7.91(m，1H)，8.04-8.06(m，1H)。
向3-甲氧基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸叔丁酯(1.11g，2.62mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入TFA(10ml)，于室温下，将该反应混合物搅拌4小时。将该反应混合物浓缩至小体积并倾入冰-水中。减压收集产生的沉淀，粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到3-甲氧基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸(839mg，87％)，为白色结晶粉末。mp 218-220℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ3.51(s，2H)，3.87(s，3H)，6.76-6.79(m，1H)，6.93-6.94(m，1H)，7.27-7.30(m，1H)，7.61-7.69(m，2H)，7.82-7.84(m，1H)，7.97-7.99(m，1H)，8.71(s，1H)，8.89(s，1H)，12.30(br s，1H)；C17H15F3N2O4的分析计算值C，55.44；H，4.11；N，7.61；F，15.47。实测值C，55.30；H，4.08；N，7.63；F，15.13。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸(353mg，0.96mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(243mg，0.96mmol)、EDC·HCl(221mg，1.15mmol)、HOBt(156mg，1.15mmol)和三乙胺(160ml，1.15mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-60∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(570mg，98％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.05-2.58(m，2H)，3.56-4.21(多个m，共11H)，4.05-4.64(m，2H)，5.23-5.25和5.36-5.37(各为m，共1H)，6.79-6.82(m，2H)，6.89-7.00(m，2H)，7.16-7.20(m，2H)，7.39-7.43(m，1H)，7.51-7.59(m，2H)，7.93-8.02(m，4H)；MS(ESI)m/z640(M++1)。
向4-[(4S)-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(570mg，0.94mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热2小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到76(234mg，42％)，为白色结晶粉末。MW 589.54 mp 129-132℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ2.23-2.29(m，2H)，3.54-4.38(多个s和m，共8H)，4.40-4.61(m，2H)，5.30-5.36和5.43-5.49(各为m，共1H)，6.72-6.91(m，2H)，7.02-7.08(m，2H)，7.25-7.29(m，1H)，7.59-7.67(m，2H)，7.81-7.99(m，4H)，8.69-8.70(m，1H)，8.87-8.90(m，1H)，12.67(br s，1H)；MS(ESI)m/z 589(M++1)。C29H27F4N3O6的分析计算值C，59.08；H，4.62；N，7.13。实测值C，59.22；H，5.10；N，6.58。实施例714-[(4S)-氟-1-[3-甲基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(927mg，4.19mmol)和三乙胺(645μl，4.63mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-三氟甲基苯酯(633μl，4.19mmol)，于室温下搅拌反应混合物2天。将该反应混合物浓缩至小体积，用正己烷稀释。减压收集产生的沉淀，用正己烷洗涤滤液，得到3-甲基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸叔丁酯(1.06g，62％)，为白色结晶粉末。mp 178-180℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)，2.25(s，3H)，3.51(s，2H)，6.38(br s，1H)，7.12-7.18(m，3H)，7.36-7.37(m，1H)，7.49-7.53(m，2H)，8.13-8.16(m，1H)。
向3-甲基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸叔丁酯(1.06g，2.60mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入TFA(10ml)，于室温下，将该反应混合物搅拌4小时。将该反应混合物浓缩至小体积并倾入冰-水中。减压收集产生的沉淀，粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到3-甲基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸(702mg，77％)，为白色结晶粉末。mp 262-263℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，3.48(s，2H)，7.03(d，J＝8.3Hz，1H)，7.08(s，1H)，7.26-7.30(m，1H)，7.61-7.69(m，3H)，7.88(d，J＝8.3Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.55(s，1H)，12.28(br s，1H)。C17H15F3N2O3的分析计算值C，57.96；H，4.29；N，7.95；F，16.18。实测值C，57.73；H，4.23；N，7.92；F，16.05。
于室温下，将3-甲基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酸(359mg，1.02mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(258mg，1.02mmol)、EDC·HCl(234mg，1.22mmol)、HOBt(165mg，1.22mmol)和三乙胺(170μl，1.22mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-60∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[3-甲基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(612mg，q.y.)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.92和2.00(各为s，共3H)，2.09-2.61(m，2H)，3.56-4.29(多个m，共8H)，4.45-4.48和4.59-4.64(各为m，共2H)，5.24-5.30和5.38-5.44(各为m，共1H)，6.90-7.14(m，5H)，7.22-7.53(m，5H)，7.90-7.92(m，1H)，8.00-8.06(m，2H)；MS(ESI)m/z588(M++1)。
向4-[(4S)-氟-1-[3-甲基-4-[N’-(2-三氟甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(610mg，1.04mmol)的THF(5Hl)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热2小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到77(186mg，31％)，为白色结晶粉末。MW 573.54 mp 123-126℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ2.19-2.29(多个s和m，共5H)，3.64-4.21(多个m，共5H)，4.36-4.60(m，2H)，5.30-5.36和5.43-5.49(各为m，共1H)，6.97-7.08(m，4H)，7.24-7.28(m，1H)，7.59-7.68(m，3H)，7.85-7.90(m，3H)，8.37-8.39(m，1H)，8.54-8.55(m，1H)，12.67(br s，1H)；MS(ESI)m/z573(M+)。实施例724-[(4S)-氟-1-[3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，将3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(250mg，0.84mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(400mg，1.06mmol)、EDC·HCl(242mg，1.26mmol)和DMAP(154mg，1.26mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌21小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(50/1)]，然后经TLC[氯仿/丙酮(10/1)]纯化，得到4-[(4S)-氟-1-[3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(342mg，76％)，为无色无定形固体。IR(KBr)3356，2951，1716，1651，1604，1537，1252cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ2.07(d，J＝6.6Hz，2H)，2.12(s，3H)，2.27(m，1H)，2.24(s，3H)，2.30-2.59(m，1H)，3.60(d，J＝5.3Hz，1H)，3.65-4.23(m，3H)，3.87(s，3H)，4.50-4.62(m，1H)，5.31(d，J＝52.4Hz，1H)，6.23(d，J＝11.2Hz，1H)，6.26(d，J＝11.9Hz，1H)，6.87-7.27(m，8H)，7.54-7.65(m，3H)，7.94-8.01(m，2H)；MS(FAB)m/z534(M++1)。C30H32FN3O5·0.7H2O的分析计算值C，65.97；H，6.16；F，3.48；N，7.69。实测值C，66.04；H，6.07；F，3.55；N，7.64。
向4-[(4S)-氟-1-[3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(227mg，0.425mmol)的THF(3.4ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.4ml)。于室温下搅拌4天后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经制备性-TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到78(190mg，86％)，为无色无定形固体。MW 519.56 IR(KBr)3356，2974，1604，1537，1454，1252 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，2.26(s，3H)，3.60(d，J＝3.7Hz，2H)，3.65-4.65(m，8H)，5.31-5.50(m，1H)，6.92-7.18(m，7H)，7.67-7.92(m，4H)，8.22-8.32(m，2H)；MS(FAB)m/z 520(M++1)。C29H30FN3O7·1.1H2O的分析计算值C，64.58；H，6.02；F，3.52；N，7.79。实测值C，64.71；H，5.90；F，3.24；N，7.51。实施例734-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.00g，4.52mmol)、异氰酸2-氯代苯酯(0.55ml，4.52mmol)在THF(10ml)中的搅拌混合物中加入三乙胺(0.13ml，0.90mmol)。搅拌6小时后，真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.57g，93％)，为淡黄色粉末。mp 104-106℃(分解)；1H-NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，2.28(s，3H)，3.51(s，2H)，6.33(br，1H)，6.96(t，J＝7.6Hz，1H)，7.08(br，1H)，7.16-7.30(m，4H)，7.42(m，1H)，8.2(d，J＝8.1Hz，1H)。
于室温下，向4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.57g，4.19mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入TFA(6ml)。搅拌4小时后，真空浓缩混合物。通过加入水研磨残留物，得到4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(1.33g，100％)，为淡黄色粉末。mp243-245℃(分解)；1H-NMR(CDCl3)δ2.24(s，3H)，3.47(s，2H)，6.99-7.08(m，3H)，7.28(t，J＝7.6Hz，1H)，7.44(dt，J＝8.0，2.4Hz，1H)，7.66(dd，J＝8.3，1.9Hz，1H)，8.13(dd，J＝6.1，1.7Hz，1H)，8.61(d，J＝6.3Hz，2H)；MS(ESI)，m/z 319(M++1)，321(M++3)；C16H15ClN2O3·0.7TFA的分析计算值C，59.33；H，4.65；Cl，10.85；N，8.57。实测值C，59.23；H，4.64；Cl，10.90；N，8.40。
将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(252mg，0.79mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，0.79mmol)、EDC·HCl(227mg，1.20mmol)和DMAP(147mg，1.20mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌17小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经TLC[氯仿/丙酮(10/1)]纯化，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(390mg，89％)，为无色无定形固体。IR(KBr)3340，2951，1712，1624，1604，1533，1438 cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.92-2.05(m，3H)，2.07-2.63(m，2H)，3.61(d，2H，J＝8.8Hz)，3.70-4.15(m，5H)，4.25-4.67(m，2H)，5.26-5.44(m，1H)，6.84-8.19(m，13H)；MS(FAB)m/z 554(M++1)，556(M++3)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(268mg，0.484mmol)的THF(3.8ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.8ml)。于室温下搅拌1天后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到79(124mg，47％)，为无色无定形固体。MW 539.98 IR(KBr)3346，2976，1709，1685，1604，1533，1439cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.20(s，3H，异构体之一)，2.24(s，3H，异构体之一)，2.30(m，1H)，3.60(s，2H)，3.71-4.62(m，6H)，5.30-5.50(m，1H)，7.01-7.09(m，5H)，7.28(t，J＝7.8Hz，1H)，7.44(d，J＝8.1Hz，1H)，7.66(t，J＝8.1Hz，1H)，7.87(d，J＝7.1Hz，2H)，8.13(d，J＝7.9Hz，1H)，8.62(d，J＝6.1Hz，2H)；MS(FAB)m/z540(M++1)，542(M++3)。对于钠盐而言，C28H27ClFN3O7·Na·0.5EtOH·1.5H2O的分析计算值C，56.91；H，5.27；Cl，5.79；F，3.10；N，6.87。实测值C，56.60；H，4.98；Cl，5.88；F，3.08；N，6.52。实施例744-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲]-3-甲基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(780mg，3.30mmol)、异氰酸2-溴代苯酯(0.41ml，3.30mmol)在THF(7ml)中的搅拌混合物中加入三乙胺(0.092ml，0.66mmol)。搅拌3小时后，真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.57g，93％)，为淡黄色粉末。mp 138-145℃(分解)；1H-NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)，2.33(s，3H)，3.51(s，2H)，6.90(dt，J＝9.0，1.4Hz，1H)，6.98(br，1H)，7.18-7.31(m，4H)，7.39(dd，J＝8.1，2.9Hz，1H)，7.44(d，J＝8.0Hz，1H)，8.22(d，J＝8.3Hz，2H)；C20H22BrN2O3·0.2H2O的分析计算值C，56.80；H，5.58；N，6.62。实测值C，56.85；H，5.42；N，6.62。
于室温下，向4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.27g，3.03mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入TFA(5ml)。搅拌1小时后，真空浓缩混合物。通过加入水研磨残留物，得到4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(1.05g，95％)，为淡黄色粉末。mp245-248℃(分解)；1H-NMR(CDCl3)δ2.24(s，3H)，3.48(s，2H)，6.96(dt，J＝7.3，1.5Hz，1H)，7.02(d，J＝8.3Hz，1H)，7.07(s，1H)，7.32(t，J＝8.1Hz，1H)，7.59-7.66(m，2H)，8.44(s，1H)，8.62(s，1H)；MS(ESI)，m/z 363(M++1)，365(M++3)；C16H15BrN2O3·0.7H2O的分析计算值C，51.13；H，4.40；Br，21.26；N，7.45。实测值C，50.84；H，4.62；Br，21.72；N，7.18。
将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(287mg，0.79mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，0.79mmol)、EDC·HCl(228mg，1.20mmol)、HOBT(160mg，1.19mmol)和三乙胺(0.55ml，3.95mmol)在DMF(5ml)中的混合物于室温下搅拌4天。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经TLC[氯仿/丙酮(10/1)]纯化，得到4-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(440mg，93％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.90和1.97(各为s，3H，酰胺异构体)，2.05-2.62(m，2H)，3.58(d，J＝8.1Hz，1H)，3.77(m，1H)，3.86和3.89(各为s，3H，酰胺异构体)，3.92-4.64(m，5H)，5.24-5.42(m，1H)，6.83-7.23(m，6H)，7.41-7.62(m，4H)，7.86-8.09(m，3H)；MS(ESI)m/z598(M++1)，600(M++3)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(440mg，0.74mmol)的THF(6.0ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(6.0ml)。于室温下搅拌1天后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到80(229mg，53％)，为无色无定形固体。MW 584.44 IR(KBr)3325，2972，1709，1604，1529，1252cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.31(m，1H)，3.17(s，1H)，3.60(d，J＝4.7Hz，2H)，3.83-4.67(m，5H)，5.31-5.51(m，1H)，6.97(t，J＝7.3Hz，1H)，7.02-7.09(m，5H)，7.33(t，J＝8.0Hz，1H)，7.61(d，J＝7.8Hz，1H)，7.64(d，J＝8.3Hz，1H)，7.87(d，J＝8.3Hz，2H)，7.90(d，J＝8.8Hz，1H)，8.44-8.65(m，2H)；MS(ESI)，m/z 584(M++1)，586(M++3)。C28H27BrFN3O7·0.4H2O的分析计算值C，56.84；H，4.74；Br，13.51；F，3.21；N，7.10。实测值C，56.91；H，4.93；Br，13.23；F，3.15；N，6.88。对于80的钠盐C28H27BrFN3O7·Na·1.8H2O的分析计算值C，52.64；H，4.67；Br，12.51；F，2.97；N，6.58。实测值C，53.04；H，4.67；Br，12.95；F，3.28；N，6.11。实施例754-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(2.0g，5.9mmol)在乙醇(10.0ml)中的搅拌溶液中加入浓盐酸(3.0ml)。于室温下搅拌反应混合物4.0小时。真空浓缩混合物。收集产生的固体，用乙醇-乙醚洗涤，得到4-(2S-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯盐酸盐(1.4g，87％)，为白色结晶固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.90-2.25(m，4H)，3.25-3.45(m，2H)，3.88(s，3H)，3.90-4.00(m，1H)，4.25-4.45(m，2H)，6.96(d，J＝8.5Hz，2H)，7.95(d，J＝8.5Hz，2H)。
于0℃，向4-[(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯盐酸盐(135mg，0.5mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(159mg，0.5mmol)、HOBt(68mg，0.5mmol)和三乙胺(278ml，2.0mmol)在THF(5.0ml)和MeCN(5.0ml)中的搅拌溶液中加入EDC·HCl(144mg，0.75mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶2，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(220mg，82％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.91和1.97(各为s，共3H)，2.00-2.20(m，4H)，3.55-3.65(m，4H)，3.87和3.89(各为s，共3H)，4.10-4.20(m，2H)，4.51(m，1H)，6.86-7.04(m，6H)，7.20-7.53(m，4H)，7.89-8.01(m，2H)，8.22(d，J＝8.3Hz，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-2S-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(220mg，0.41mmol)的THF(8.0ml)和甲醇(4.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.8ml，0.8mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到81(220mg，定量)，为白色结晶固体。MW 521.99，mp 122-124℃；IR (KBr)3340，1710，1685，1604，1533，1511，1438 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.81-2.11(m，4H)，2.18和2.20(各为s，共3H)，3.45-3.80(m，4H)，3.95-4.05(m，1H)，4.12-4.20(m，1H)，4.21-4.31(m，1H)，6.99-7.06(m，5H)，7.26-7.30(m，1H)，7.44(d，J＝7.8Hz，1H)，7.62-7.64(m，1H)，7.85-7.90(m，2H)，8.13(d，J＝6.8Hz，1H)，8.60-8.62(m，2H)；MS(FAB)m/z 522(M++1)；C28H28N3O5Cl·0.2H2O的分析计算值C，63.99；H，5.45；N，7.99。实测值C，63.90；H，5.40；N，7.72。实施例764-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向[(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯盐酸盐(135mg，0.5mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(181mg，0.5mmol)、HOBt(68mg，0.5mmol)和三乙胺(278ml，2.0mmol)在THF(5.0ml)和MeCN(5.0ml)中的搅拌溶液中加入EDC·HCl(144mg，0.75mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1/2，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(290mg，定量)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.95和2.01(各为s，共3H)，2.00-2.20(m，4H)，3.50-3.65(m，4H)，3.87和3.89(各为s，共3H)，4.10-4.20(m，2H)，4.50(m，1H)，6.85-7.06(m，6H)，7.24-7.28(m，1H)，7.40-7.44(m，3H)，7.89-8.16(m，2H)，8.17-8.18(m，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-2S-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(290mg，0.5mmol)的THF(8.0ml)和甲醇(4.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.0ml，1.0mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到82(240mg，85％)，为白色结晶固体。MW 566.44 mp 125-130℃；IR (KBr)3340，1604，1529，1434 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.80-2.10(m，4H)，2.18和2.20(各为s，共3H)，3.45-3.80(m，4H)，3.95-4.05(m，1H)，4.15-4.20(m，1H)，4.25-4.30(m，1H)，6.94-7.06(m，5H)，7.30-7.34(m，1H)，7.59-7.62(m，2H)，7.85-7.90(m，2H)，8.01(d，J＝8.1Hz，1H)，8.44(s，1H)，8.62(s，1H)；MS(FAB)m/z566(M+)；C28H28N3O5Br·0.5H2O的分析计算值C，58.44；H，5.08；N，7.30。实测值C，58.57；H，4.99；N，7.18。实施例774-[1-[3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(438mg，1.47mmol)、4-[(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(420mg，1.79mmol)、EDC·HCl(410mg，2.14mmol)、HOBt(228mg，1.69mmol)和三乙胺(240ml，1.72mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1-25∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(760mg，定量)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.89(s，3H)，1.94-2.14(m，4H)，2.16(s，3H)，3.50-3.69(m，4H)，3.87(s，3H)，4.09-4.17(m，2H)，4.42-4.45(m，1H)，6.85-7.02(m，6H)，7.10-7.16(m，3H)，7.51-7.53(m，1H)，7.62-7.64(m，1H)，7.91-7.94(m，2H)；MS(FAB)m/z 516(M++1)。
向4-[1-[3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(420mg，0.71mmol)的THF(7ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(7ml)，将该反应混合物在回流下加热2小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从氯仿-IPE中重结晶纯化，得到83(526mg，69％)，为白色结晶粉末。MW 501.57mp 191-193℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.87-2.10(m，4H)，2.20(s，3H)，2.26(s，3H)，3.44-3.79(多个m，共4H)，3.99-4.45(多个m，共3H)，6.91-7.17(多个m，共7H)，7.66-7.68(m，1H)，7.80-7.90(m，3H)，8.19-8.21(m，2H)，12.62(br s，1H)；MS(FAB)m/z 502(M++1)。C29H31N3O5·1/4H2O的分析计算值C，68.83；H，6.27；N，8.30。实测值C，68.81；H，6.17；N，8.23。实施例784-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.36g，6.15mmol)和三乙胺(170ml，1.23mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-甲氧基苯酯(820ml，6.15mmol)，将得到的混合物搅拌27小时。将该混合物真空浓缩至小体积，将己烷加入残留物中产生沉淀，过滤收集该沉淀，得到4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.74g，76％)，为白色结晶物质。mp 157-158℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.30(s，3H)，3.50(s，2H)，3.76(s，3H)，6.43(s，1H)，6.83(br d，J＝8.4Hz，1H)，6.95(br d，J＝8.0Hz，1H)，6.98-6.99(m，2H)，7.13(brs，1H)，7.23(brs，1H)，7.48(d，J＝8.8Hz，1H)，8.14(d，J＝8.4Hz，1H)；MS(ESI)m/z371(M++H)。
向4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.32g，3.56mmol)的二氯甲烷(15ml)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(10ml)，将得到的混合物在回流下加热30分钟。真空浓缩混合物并加入水产生沉淀，过滤收集该沉淀。使粗品固体从乙醇/己烷中重结晶，得到4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(932mg，83％)，为白色粉末。mp 260-264℃；1H-NMR(CD3OD)δ2.30(s，3H)，3.55(s，2H)，4.87(s，3H)，6.87-6.92(m，2H)，6.97-6.99(m，2H)，7.10-7.24(m，2H)，7.53-7.58(m，1H)，8.04(d，J＝7.2Hz，1H)；MS(ESI)m/z 314(M+)。
于室温下，向4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(336mg，1.07mmol)、44(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(271mg，1.07mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(130mg，1.07mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(226mg，1.18mmol)，将得到的混合物搅拌20小时。将该混合物倾入1N HCl水溶液中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(583mg，99％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)旋转异构体的混合物，δ2.05和2.12(s，共3H)，2.05-2.61(m，2H)，3.55-4.73(多个m，13H)，4.5 1-4.66(m，2H)，5.26-5.40(m，1H)，6.72-7.01(多个m，8H)，7.38-8.13(多个m，3H)；MS(ESI)m/z550(M++H)。
于室温下，向4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(557mg，1.01mmol)的甲醇-THF(1∶1，10ml)的搅拌溶液中加入1.0N氢氧化钠水溶液(4.05ml，4.05mmol)，将得到的混合物于60℃加热2小时。将该混合物倾入1NHCl水溶液中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到84(492mg，91％)，为无色无定形固体。MW 535.561H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物，δ2.96(s，3H)，2.11-2.45(m，2H)，3.64-4.15(多个m，5H)，3.91(s，3H)，4.41-4.45(m，1H)，4.52-4.61(m，1H)，5.25-5.38(m，1H)，6.84-7.10(多个m，7H)，7.54-7.58(m，1H)，7.93(d，J＝8.8Hz，2H)，8.02(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(ESI)m/z536(M++H)，538(M++Na+)。实施例794-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基-3-甲基苯基乙酸乙酯(1.32g，7.37mmol)和三乙胺(205ml，1.47mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-甲氧基苯酯(980ml，7.37mmol)，将得到的混合物搅拌23小时。将该混合物真空浓缩至小体积，将己烷加入残留物中产生沉淀，收集该沉淀，得到4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基乙酸乙酯(2.44g，定量)，为白色结晶物质。mp107-109℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.26(t，J＝7.1Hz，3H)，3.56(s，3H)，3.79(s，3H)，4.15(q，J＝7.1Hz，2H)，6.82-6.85(m，1H)，6.91-7.00(m，2H)，7.08(s，1H)，7.17(d，J＝8.5Hz，2H)，7.27(d，J＝8.6Hz，2H)，7.33(s，1H)，8.07-8.10(m，1H)；MS(ESI)m/z 329(M++H)。
向4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基乙酸乙酯(2.22g，6.78mmol)的甲醇(30ml)的搅拌溶液中加入1.0M-氢氧化钠水溶液(10.2ml，10.2mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。加入1N HCl(水溶液)，真空浓缩该混合物。将水加入残留物中，得到沉淀，过滤收集该沉淀。使粗品固体从乙醇/己烷中重结晶，得到4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基乙酸，为白色粉末(1.87g，92％)。mp 165-168℃；1H-NMR(CD3OD)δ2.30(s，3H)，3.55(s，2H)，4.87(s，3H)，6.87-6.92(m，2H)，6.97-6.99(m，2H)，7.10-7.24(m，2H)，7.53-7.58(m，1H)，8.04(d，J＝7.2Hz，1H)；MS(ESI)m/z 300(M+)。
于室温下，向4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基乙酸(353mg，1.18mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(298mg，1.18mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(144mg，1.18mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(226mg，1.18mmol)，将得到的混合物搅拌22小时。将该混合物倾入1N HCl水溶液中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(594mg，94％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)旋转异构体的混合物，δ2.05-2.58(多个m，2H)，3.55-4.25(多个m，5H)，3.77(s，3H)，3.87-3.90(m，3H)，4.50-4.63(m，2H)，5.23-5.37(m，1H)，6.81-6.84(m，1H)，6.91-6.99(m，4H)，7.09-7.12(m，2H)，7.18-7.26(m，2H)，7.45-7.53(m，2H)，7.91-8.03(m，2H)，8.10-8.12(m，1H)；MS(ESI)m/z 536(M++H)。
于室温下，向4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(568mg，1.06mmol)的甲醇-THF(1∶1，10ml)的搅拌溶液中加入1.0N氢氧化钠水溶液(4.24ml，4.24mmol)，将得到的混合物于60℃加热1小时。将该混合物倾入1NHCl水溶液中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到85(516mg，93％)，为无色无定形固体。MW 521.54 1H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物，δ2.12-2.46(m，2H)，3.654.19(多个m，5H)，3.88(s，3H)，4.42-4.45(m，1H)，4.52-4.62(m，1H)，5.24-5.39(m，1H)，6.85-6.91(m，1H)，6.94-7.03(多个m，4H)，7.14-7.19(m，2H)，7.35-7.40(m，2H)，7.92-7.96(m，2H)，8.02-8.04(m，1H)；MS(ESI)m/z 521(M++H)，544(M++Na+)。实施例804-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-氨基-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(1.41g，5.94mmol)和三乙胺(165ml，1.19mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入异氰酸2-甲氧基苯酯(790ml，5.94mmol)，将得到的混合物搅拌4天。将该混合物真空浓缩至小体积，将己烷加入残留物中以产生沉淀，收集该沉淀，得到4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(2.06g，90％)，为白色结晶物质。mp 132-134℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，3.50(s，2H)，3.87(s，3H)，3.88(s，3H)，6.84(s，1H)，6.87-6.90(m，2H)，6.98-7.03(m，2H)，7.12(s，1H)，7.16(s，1H)，8.06(d，J＝8.4Hz，1H)，8.13(dd，J＝7.2，2.0Hz，1H)；MS(ESI)m/z 387(M++H)。
向4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(2.01g，5.20mmol)的二氯甲烷(15ml)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(10ml)，将得到的混合物在回流下加热30分钟。真空浓缩混合物并将水加入残留物中以产生沉淀，过滤收集该沉淀。使粗品固体从乙醇/己烷中重结晶，得到4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸，为白色粉末(1.40g，82％)。mp 182-185℃；1H-NMR(CD3OD)δ3.55(s，2H)，3.88(s，3H)，3.89(s，3H)，6.80-6.99(m，5H)，7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，8.00(d，J＝7.2Hz，1H)；MS(ESI)m/z 330(M+)。
于室温下，向4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(353mg，1.07mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(271mg，1.07mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(131mg，1.07mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(224mg，1.18mmol)，将得到的混合物搅拌14小时。将该混合物倾入1N HCl水溶液中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(372mg，61％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)，旋转异构体的混合物，δ2.04-2.57(多个m，2H)，3.58-4.18(多个m，5H)，3.79和3.83(s，共3H)，3.86(s，3H)，3.87(s，3H)，4.51-4.63(m，2H)，5.22-5.36(m，1H)，6.80-6.89(m，3H)，6.94-7.03(m，4H)，7.15-7.25(m，2H)，7.94-8.01(m，2H)，8.04-8.11(m，2H)；MS(ESI)m/z566(M++H)。
于室温下，向4-[(4S)-氟-1-[4-[N’-(2-甲氧基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(356mg，0.63mmol)的甲醇-THF(1∶1，10ml)的搅拌溶液中加入1.0N氢氧化钠水溶液(1.88ml，1.88mmol)，将得到的混合物于60℃加热2小时。将该混合物倾入1NHCl水溶液中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到86(335mg，97％)，为无色无定形固体。MW 551.561H-NMR(CD3OD)旋转异构体的混合物，δ2.14-2.48(m，2H)，3.69-4.20(多个m，5H)，3.88(s，3H)，3.89(s，3H)，4.46-4.57(m，2H)，5.27-5.41(m，1H)，6.79-7.04(m，7H)，7.90-8.02(m，4H)；MS(ESI)m/z 552(M++H)。实施例814-[1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基苯基乙酸乙酯(1.62g，9.04mmol)和异氰酸2，6-二氯苯酯(1.70g，9.04mmol)在THF(40ml)中的混合物中加入三乙胺(0.25ml，1.81mmol)。搅拌2小时后，真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]苯基乙酸乙酯(3.19g，96％)，为无色粉末。mp 168-170℃(分解)；1H-NMR(CDCl3)δ1.25(t，J＝7.1Hz，3H)，3.56(s，2H)，4.14(q，J＝7.1Hz，2H)，6.50(br，1H)，6.67(br，1H)，7.12-7.52(m，7H)。
向4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]苯基乙酸乙酯(3.19g，8.69mmol)的THF(70ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(70ml)。于室温下搅拌17小时后，真空浓缩溶剂。通过加入水研磨残留物，得到4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]苯基乙酸(2.44g，82％)，为无色粉末。mp 262-263℃(分解)；1H-NMR(DMSO-d6)δ3.48(s，2H)，7.14(d，J＝8.3Hz，2H)，7.31(t，J＝8.3Hz，1H)，7.37(d，J＝8.3Hz，2H)，7.52(d，J＝8.0Hz，2H)，8.18(s，1H)，8.90(s，1H)，12.22(br，1H)；MS(ESI)m/z339(M++1)，341(M++3)，343(M++5)。
于室温下，将4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]苯基乙酸(268mg，0.79mmol)、4-[(2S，4S)-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，0.79mmol)、EDC·HCl(227mg，1.19mmol)、HOBT(161mg，1.19mmol)和三乙胺(0.55ml，3.95mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到4-[1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(465mg，100％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.05-2.57(m，2H)，3.60(d，2H，J＝3.4Hz)，3.64-3.84(m，2H)，3.88和3.89(各为s，3H，酰胺异构体)，3.92-4.63(m，3H)，5.22-5.38(m，1H)，6.87和6.89(各为d，各 J＝7.9Hz，2H，酰胺异构体)，7.01-7.17(m，6H)，7.28(m，2H)，7.36(br，1H)，7.92(d，J＝8.8Hz，1H)，7.79(d，J＝8.8Hz，1H)；MS(ESI)m/z 574(M++1)，576(M++3)，578(M++5)。
向4-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(465mg，0.809mmol)的THF(40ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(40ml)。于室温下搅拌11小时后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到87(340mg，75％)，为无色粉末。MW 560.40mp 168-172℃(分解)；IR(KBr)3340，1711，1685，1604，1240，773 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.22-2.30(m，2H)，3.61(d，J＝7.4Hz，2H)，3.70-4.75(m，6H)，5.30-5.49(m，1H)，7.02-7.18(m，5H)，7.28-7.41(m，4H)，7.52(dd，J＝8.0，2.9Hz，2H)，7.86(m，2H)，8.29(br，1H)，9.01(br，1H)，12.66(br，1H)；MS(ESI)m/z560(M++1)，562(M++3)，564(M++5)；C27H24Cl2FN3O5·0.5H2O的分析计算值C，56.95；H，4.43；Cl，12.45；F，3.34；N，7.38。实测值C，57.04；H，4.34；Cl，12.98；F，3.27；N，7.21。实施例824-[1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(2.15g，9.04mmol)和异氰酸2，6-二氯苯酯(1.70g，9.04mmol)在THF(40ml)中的混合物中加入三乙胺(0.25ml，9.04mmol)。搅拌18小时后，真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(2.27g，59％)，为无色粉末。mp 177-181℃(分解)；1H-NMR(CDCl3)δ1.43(s，9H)，3.74(s，2H)，3.83(s，3H)，6.34(s，1H)，6.81(s，1H)，6.84(d，J＝8.3Hz，1H)，7.06(br，1H)，7.27(t，J＝8.1Hz，1H)，7.39(d，J＝8.1Hz，2H)，8.04(d，J＝8.3Hz，1H)。
于室温下，向4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸叔丁酯(2.27g，5.34mmol)的二氯甲烷(50ml)的搅拌溶液中加入TFA(20ml)。搅拌2小时后，真空浓缩该混合物。通过加入水研磨残留物，得到4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(1.50g，76％)，为无色粉末。mp 246-249℃(分解)；1H-NMR(DMSO-d6)δ3.49(s，2H)，3.88(s，3H)，6.75(d，J＝8.3Hz，1H)，6.93(s，1H)，7.30(t，J＝7.8Hz，1H)，7.52(d，J＝8.0Hz，2H)，7.97(d，J＝8.0Hz，1H)，8.40(s，1H)，8.86(s，1H)，12.23(br，1H)；MS(ESI)m/z 369(M++1)，371(M++3)，373(M++5)。
于室温下，将4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(288mg，0.78mmol)、4-[(2S，4S)-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，0.79mmol)、EDC·HCl(227mg，1.19mmol)、HOBT(161mg，1.19mmol)和三乙胺(0.55ml，3.95mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(40/1)]，得到4-[1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(530mg，100％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.03-2.62(m，2H)，3.61(d，2H，J＝4.7Hz)，3.62-3.66(m，2H)，3.73和3.77(各为s，3H，酰胺异构体)，3.78-3.85(m，1H)，3.87和3.88(各为s，3H，酰胺异构体)，3.95-4.63(m，4H)，5.22-5.36(m，1H)，6.82(s，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，1H)，6.95(d，J＝8.8Hz，2H)，7.14-7.25(m，1H)，7.38(d，J＝8.1Hz，2H)，7.94-8.10(m，3H)；MS(ESI)m/z 604(M++1)，606(M++3)，608(M++5)。
向4-[1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(530mg，0.78mmol)的THF(40ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(40ml)。于室温下搅拌11小时后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到88(420mg，75％)，为无色无定形固体。MW 590.43 mp 162-168℃(分解)；IR(KBr)3346，2974，1709，1604，1533，1254 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.98-2.36(m，2H)，3.58(s，2H)，3.78-3.95(m，6H)，4.02-4.68(m，2H)，5.31-5.50(m，1H)，6.71-7.09(m，4H)，7.31(t，J＝7.8Hz，1H)，7.53(d，J＝8.1Hz，2H)，7.87(d，J＝8.1Hz，2H)，7.88-8.00(m，1H)，8.30-840(m，1H)，8.89(s，1H)；MS (ESI) m/z 590 (M++1)，592 (M++3)，594 (M++5)；C28H26Cl2FN3O6·1.5H2O的分析计算值C，54.47；H，4.73；F，3.08；N，6.81。实测值C，54.53；H，4.49；F，2.93；N，6.65。实施例834-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(1.88g，8.51mmol)、异氰酸2，6-二氯苯酯(1.60g，8.51mmol)在THF(40ml)中的混合物中加入三乙胺(0.24ml，1.70mmol)。搅拌3小时后，真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(2.58g，74％)，为无色粉末。mp 243-244℃(分解)；1H-NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，2.30(s，3H)，3.49(s，2H)，6.24(s，2H)，7.12-7.16(m，3H)，7.35(d，J＝8.3Hz，2H)，7.51(d，J＝7.8Hz，1H)。
于室温下，向4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸叔丁酯(2.58g，6.30mmol)的二氯甲烷(50ml)的搅拌溶液中加入TFA(20ml)。搅拌2小时后，真空浓缩该混合物。通过加入水研磨残留物，得到4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(2.12g，95％)，为无色粉末。mp 274-283℃(分解)；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，3.46(s，2H)，7.00(d，J＝8.6Hz，1H)，7.06(s，1H)，7.30(t，J＝7.8Hz，1H)，7.52(d，J＝8.3Hz，2H)，7.65(d，J＝8.2Hz，1H)，8.12(s，1H)，8.50(s，1H)，12.22(br，1H)；MS(ESI)m/z353(M++1)，355(M++3)，357(M++5)。
于室温下，将4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(181mg，0.51mmol)、4-[(2S，4S)-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(130mg，0.51mmol)、EDC·HCl(147mg，0.77mmol)、HOBT(104mg，0.77mmol)和三乙胺(0.35ml，2.55mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经TLC[氯仿/甲醇(20/1)]纯化，得到4-[1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(283mg，94％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.95-2.61(m，3H)，3.55(br，2H)，3.67-3.81(m，2H)，3.87(s，6H)，3.89-4.68(m，2H)，5.23-5.43(m，1H)，6.81-7.10(m，6H)，7.13-7.43(m，3H)，7.56(br，1H，异构体之一)，7.73(br，1H，异构体之一)，7.89-8.00(m，2H)；MS(ESI)m/z 588(M++1)，590(M++3)，592(M++5)。
向4-[1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(283mg，0.48mmol)的THF(20ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(20ml)。于室温下搅拌11小时后，用乙酸乙酯提取该混合物。用1N HCl酸化剩余的含水层并用乙酸乙酯提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(20/1)]，得到89(450mg，67％)，为浅棕色无定形固体。MW 574.43mp 174-180℃(分解)；IR(KBr)3330，3288，1711，1685，1604，1512，1242cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(m，3H)，3.61(d，2H，J＝6.1Hz)，3.72-4.68(m，7H)，5.30-5.50(m，1H)，6.97-7.20(m，4H)，7.29-7.68(m，5H)，7.87(m，2H)，8.10-8.95(m，1H)，12.65(br，1H)；MS(ESI)m/z574(M++1)，576(M++3)，578(M++5)。C28H26Cl2FN3O5·0.5H2O的分析计算值C，57.64；H，4.66；Cl，12.15；F，3.26；N，7.20。实测值C，57.37；H，4.44；Cl，12.64；F，3.23；N，7.25。实施例844-[1-[3-氯-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向3-氯代苯基乙酸(21.76g，127.6mmol)的二氯甲烷(100ml)的搅拌溶液中加入甲醇(15.6ml，383mmol)和硫酸(1ml)。搅拌20分钟后，将该混合物于80℃加热2小时。将反应混合物倾入冰水中，用氯仿提取。用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物，得到3-氯代苯基乙酸甲酯(25.4g，100％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.60(s，2H)，3.70(s，3H)，7.15-7.26(m，4H)。
于0℃，向3-氯代苯基乙酸甲酯(25.4g，128mmol)的硫酸(44ml)的搅拌混合物中加入硝酸(5.5ml.138mmol)。将该反应混合物逐渐升温至室温4小时。将反应混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。经硅胶层析纯化残余物[1kg，正己烷/乙酸乙酯(40/1)]，得到3-氯-4-硝基苯基乙酸甲酯(11.4g，36％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.69(s，2H)，3.74(s，3H)，7.33(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)，7.49(d，J＝1.5Hz，1H)，7.87(d，J＝8.3Hz，1H)。
将3-氯-4-硝基苯基乙酸甲酯(10.9g，47.5mmol)、还原铁粉(8.58g，153.6mmol)、AcONa·3H2O(6.05g，44.5mmol)和乙酸(17.6ml)在甲醇/水(100/400ml)中的混合物于110℃加热1小时。冷却至室温后，通过Celite过滤反应混合物，用甲醇洗涤滤饼。蒸发合并的滤液并用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析[150g，氯仿/乙酸乙酯(10/1)]，得到4-氨基-3-氯代苯基乙酸甲酯(4.58g，48％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.49(s，2H)，3.68(s，3H)，4.01(br，2H)，6.70(d，J＝7.4Hz，1H)，6.96(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.17(d，J＝2.0Hz，1H)。
于室温下，向4-氨基-3-氯代苯基乙酸甲酯(1.00g，5.01mmol)和异氰酸2-甲基苯酯(0.60ml，5.01mmol)在THF(20ml)中的混合物中加入三乙胺(0.14ml，1.00mmol)。搅拌1天后，将异氰酸2-甲基苯酯(0.60ml，5.01mmol)加入该反应混合物中并搅拌17小时。真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到3-氯-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(1.23g，74％)，为无色粉末。1H-NMR(CDCl3)δ2.34(s，3H)，3.54(s，2H)，3.68(s，3H)，6.24(br，1H)，6.99(br，1H)，7.15(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.21-7.31(m，5H)，7.44(d，J＝7.6Hz，1H)，8.20(d，J＝8.5Hz，1H)；MS(ESI)m/z 333(M++1)，335(M++3)。
向3-氯-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(1.23g，3.70mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。于室温下搅拌14小时后，真空浓缩该溶剂。通过加入1N HCl研磨残留物，于60℃减压下干燥2天，得到3-氯-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(1.22g，100％)，为无色粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ.26(s，3H)，3.40(s，2H)，6.95(t，J＝7.3Hz，1H)，7.11(d，J＝7.6Hz，2H)，7.16(d，J＝7.3Hz，1H)，7.32(s，1H)，7.76(d，J＝8.0Hz，1H)，7.94(dd，J＝9.3，1.0Hz，1H)，8.72(s，2H)；MS(ESI)m/z319(M++1)，321(M++3)，341(M++Na)。
于室温下，将3-氯-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(319mg，1.00mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(253mg，1.00mmol)、EDC·HCl(288mg，1.50mmol)、HOBT(203mg，1.50mmol)和三乙胺(0.70ml，5.00mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌15小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经TLC[氯仿/丙酮(5/1)]纯化，得到4-[1-[3-氯-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(480mg，87％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.10-2.60(m，2H)，2.29(s，3H)，3.56(d，J＝6.8Hz，1H)，3.71-3.84(m，1H)，3.87和3.89(各为s，3H，酰胺异构体)，3.91-4.20(m，3H)，4.49-4.60(m，2H)，5.32(dt，J＝53.0，4.2Hz，1H)，6.80(br，1H)，6.89和6.95(各为d，J＝8.8Hz，2H，酰胺异构体)，7.09-7.26(m，6H)，7.50(d，J＝7.3Hz，1H)，7.94和8.00(各为d，J＝8.8Hz，2H，酰胺异构体)，8.10和8.15(各为d，J＝8.3Hz，1H，酰胺异构体)；MS(FAB)m/z554(M++1)，556(M++3)。
向4-[1-[3-氯-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(480mg，0.866mmol)的THF(30ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。于室温下搅拌2天后，减压浓缩该混合物，用1N HCl酸化。收集沉淀，用水洗涤，减压干燥，得到90(374mg，80％)，为无色粉末。MW 539.98 IR(KBr)3354，3060，2976，1709，1604，1244 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.27(s，3H)，2.31(s，2H)，3.66(d，J＝7.2Hz，2H)，3.71-4.67(m，5H)，5.32-5.53(m，1H)，6.97(t，J＝7.3Hz，1H)，7.04-7.22(m，5H)，7.32和7.35(各为d，J＝1.7Hz，1H，酰胺异构体)，7.77(d，J＝7.6Hz，1H)，7.87和7.90(各为d，J＝9.0Hz，2H，酰胺异构体)，8.01和8.03(各为d，J＝8.5Hz，1H，酰胺异构体)，8.57和8.59(各为s，1H，酰胺异构体)，8.63和8.65(各为s，1H，酰胺异构体)，12.63(s，1H)；MS(ESI)m/z 540(M++1)，542(M++3)。实施例854-[1-[3-氯-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基-3-氯代苯基乙酸甲酯(1.00g，5.01mmol)和异氰酸2-氯代苯酯(0.60ml，5.01mmol)在THF(20ml)中的混合物中加入三乙胺(0.14ml，1.00mmol)。搅拌1天后，将异氰酸2-氯代苯酯(0.60ml，5.01mmol)加入反应混合物中并搅拌17小时。真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到3-氯-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(1.35g，76％)，为无色粉末。1H-NMR(CDCl3)δ3.58(s，3H)，3.71(s，2H)，7.04(m，3H)，7.18(dd，J＝8.5，2.0Hz，1H)，7.27-7.39(m，3H)，8.07(m，2H)；MS(ESI)m/z 353(M++1)，355(M++3)，357(M++5)。
向3-氯-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(1.35g，3.82mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。于室温下搅拌14小时后，真空浓缩该溶液。通过加入1N HCl研磨残留物，于60℃减压干燥2天，得到3-氯-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸(1.12g，86％)，为无色粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ3.52(s，2H)，7.05(m，1H)，7.17(d，J＝8.5Hz，1H)，7.30(d，J＝7.6Hz，1H)，7.37(s，1H)，7.46(dd，J＝8.0，1.5Hz，1H)，7.95(dd，J＝8.3，1.2Hz，1H)，8.07(d，J＝8.3Hz，1H)，9.00(d，J＝8.0Hz，2H)；MS(FAB)m/z339(M++1)，34 1(M++3)，343(M++5)。
于室温下，将3-氯-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸(339mg，1.00mmol)、4-[(2S，4S)-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(253mg，1.00mmol)、EDC·HCl(288mg，1.50mmol)、HOBT(203mg，1.50mmol)和三乙胺(0.70ml，5.00mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌15小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/丙酮(10/1)]纯化，得到4-[1-[3-氯-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(550mg，96％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.14-2.64(m，2H)，3.59(d，J＝11.2Hz，2H)，3.78-3.82(m，1H)，3.86和3.89(各为s，3H，酰胺异构体)，3.91-4.28(m，2H)，4.50-4.79(m，2H)，5.34和5.39(各为dt，J＝52.5，4.4Hz，1H，酰胺异构体)，6.89-6.98(m，3H)，7.09-7.13(m，2H)，7.22(dt，J＝7.3，2.2Hz，1H)，7.29(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.79和7.86(各为s，1H，酰胺异构体)，7.86-8.03(m，4H)，8.11(dd，J＝8.3，1.0Hz，1H)；MS(FAB)m/z574(M++1)，576(M++3)，578(M++5)。
向4-[1-[3-氯-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(550mg，0.957mmol)的THF(30ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。于室温下搅拌2天后，减压浓缩该混合物，用1N HCl酸化。收集沉淀，用水洗涤，减压干燥，得到91(437mg，82％)，为无色粉末。MW 560.40 IR(KBr)3348，3072，2954，1703，1604，1529，1439 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25-2.42(m，2H)，3.67(d，J＝8.3Hz，2H)，3.81-4.68(m，5H)，5.39和5.46(各为d，J＝54.4Hz，1H，酰胺异构体)，7.04-7.10(m，3H)，7.18(d，J＝8.3Hz，1H)，7.31(t，J＝8.3Hz，1H)，7.33和7.37(各为s，1H，酰胺异构体)，7.47(d，J＝8.1Hz，1H)，7.88(dd，J＝9.0，3.2Hz，2H)，7.98(dd，J＝8.5，3.0Hz，1H)m，1H)，8.09(d，J＝8.3Hz，1H)，8.99(d，J＝2.9Hz，1H)，9.02(s，1H)，12.64(s，1H)；MS(ESI)m/z560(M++1)，562(M++3)，564(m++5)。C27H24Cl2FN3O5·0.2H2O的分析计算值C，57.50；H，4.36；N，7.45；Cl，12.57；F，3.37。实测值C，57.72；H，4.47；N，7.14；Cl，12.44；F，3.44。实施例864-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-氯代苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基-3-氯代苯基乙酸甲酯(1.00g，5.01mmol)和异氰酸2-溴代苯酯(0.62ml，5.01mmol)在THF(20ml)中的混合物中加入三乙胺(0.14ml，1.00mmol)。搅拌1天后，将异氰酸2-溴代苯酯(0.60ml，5.01mmol)加入反应混合物中并搅拌24小时。真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-氯代苯基乙酸甲酯(1.34g，67％)，为无色粉末。1H-NMR(CDCl3)δ3.58(s，3H)，3.70(s，2H)，6.98(m，3H)，7.19(dd，J＝8.3，1.9Hz，1H)，7.32(m，1H)，7.51(m，2H)，8.05(m，1H)；MS(ESI)m/z 398(M++1)，400(M++3)，402(M++5)。
向4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-氯代苯基乙酸甲酯(1.34g，3.37mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。于室温下搅拌14小时后，真空浓缩溶剂。通过加入1N HCl研磨残留物，于60℃减压干燥2天，得到4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-氯代苯基乙酸(1.03g，80％)，为无色粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ3.56(s，2H)，7.00(m，1H)，7.17(dd，J＝9.0，1.7Hz，1H)，7.32-7.40(m，2H)，7.62(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，7.95(m，2H)，8.83(s，1)，9.01(s，H)，12.41(br，1H)；MS(FAB)m/z385(M++2)，386(M++4)，388(M++6)。
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-氯代苯基乙酸(384mg，1.00mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(253mg，1.00mmol)、EDC·HCl(288mg，1.50mmol)、HOBT(203mg，1.50mmol)和三乙胺(0.70ml，5.00mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌15小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/丙酮(10/1)]纯化，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-氯代苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(530mg，86％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.14-2.63(m，2H)，3.58(d，J＝10.0Hz，1H)，3.73-3.83(m，1H)，3.86和3.89(各为s，3H，酰胺异构体)，3.90-4.29(m，3H)，4.50-4.69(m，2H)，5.33和5.37(各为m，1H，酰胺异构体)，6.88-6.93(m，3H)，7.11-7.14(m，2H)，7.26(m，1H)，7.46(d，J＝8.1Hz，1H)，7.62-7.78(m，2H)，7.89和7.93(各为m，2H，酰胺异构体)，8.01(dd，J＝8.8，1.7Hz，2H)；MS(FAB)m/z 618(M+)，620(M++2)，622(M++4)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-氯代苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(530mg，0.856mmol)的THF(30ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。于室温下搅拌2天后，减压浓缩该混合物，用1N HCl酸化。用氯仿/甲醇(10/1)提取该混合物。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[20g，氯仿/丙酮(10/1)-氯仿/甲醇(10/1)]，得到92(59mg，11％)，为无色无定形固体。MW 604.85 IR(KBr)3329，3060，2976，1712，1526，1435 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.31(m，H)，3.48-4.68(m，7H)，5.32-5.53(m，1H)，6.99-7.19(m，4H)，7.36(s，1H)，7.63(dd，J＝6.7，1.2Hz，1H)，7.86-8.1 8(m，4H)，8.83(s，1H)，9.02(s，1H)，12.67(br，1H)；MS(ESI)m/z604(M++1)，606(M++3)，608(M++5)。C27H24BrClFN3O5·0.5H2O的分析计算值C，52.83；H，4.10；N，6.85；Cl，5.78；F，3.09。实测值C，53.24；H，4.32；N，6.43；Cl，6.01；F，3.07。实施例874-[1-[3-氯-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基-3-氯代苯基乙酸甲酯(1.31g，6.56mmol)和异氰酸苯酯(0.71ml，6.56mmol)在THF(20ml)中的混合物中加入三乙胺(0.19ml，1.33mmol)。搅拌15小时后，真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到3-氯-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸甲酯(1.79g，86％)，为浅棕色固体。1H-NMR(CDCl3)δ3.56(s，2H)，3.70(s，3H)，6.70(m，1H)，7.06(s，1H)，7.14-7.18(m，2H)，7.26(dd，J＝7.8，1.9Hz，1H)，7.33-7.38(m，4H)，8.14(dd，J＝8.3，3.0Hz，1H)；MS(ESI)m/z 319(M++1)，321(M++3)。
向3-氯-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸甲酯(1.79g，5.62mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。于室温下搅拌20小时后，真空浓缩溶剂。通过加入1N HCl研磨残留物，于60℃减压干燥2天，得到3-氯-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(1.58g，92％)，为浅棕色固体。1H-NMR(DMSO-d6)δ3.55(s，2H)，6.99(t，J＝7.3Hz，1H)，7.17(d，J＝8.3Hz，1H)，7.29(t，J＝7.6Hz，2H)，7.36(s，1H)，7.46(d，J＝8.0Hz，2H)，8.07(d，J＝8.3Hz，1H)，8.28(s，1H)，9.37(s，1H)，12.37(br 1H)。
于室温下，将3-氯-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(305mg，1.00mmol)、4-[(2S，4S)-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(253mg，1.00mmol)、EDC·HCl(288mg，1.50mmol)、HOBT(203mg，1.50mmol)和三乙胺(0.70ml，5.00mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌17小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[30g，氯仿/丙酮(20/1)]纯化，得到4-[1-[3-氯-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(720mg，100％)，为无色无定形固体。MS(FAB)m/z 540(M++1)，542(M++3)。
向4-[1-[3-氯-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(720mg，1.00mmol)的THF/甲醇(30/30ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。于室温下搅拌2小时后，将该反应混合物于50℃加热22小时。除去溶剂后，用1N HCl酸化得到的残留物。收集沉淀，用水洗涤，减压干燥，得到93[412mg，78％(两步)]，为无色粉末。MW 525.96 IR(KBr)3346，3302，2976，1712，1604，1240 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25-2.31(m，2H)，3.66(d，J＝7.8Hz，2H)，3.71-4.67(m，5H)，5.31-5.52(m，1H)，6.99(t，J＝7.3Hz，1H)，7.04和7.07(各为d，J＝8.7Hz，2H，酰胺异构体)，7.14-7.18(m，1H)，7.29(t，J＝7.3Hz，2H)，7.35(d，J＝1.7Hz，1H)，7.46(d，J＝7.8Hz，2H)，7.87和7.90(各为d，J＝9.0Hz，2H，酰胺异构体)，8.04和8.06(各为d，J＝8.5Hz，1H，酰胺异构体)，8.26和8.28(各为s，1H，酰胺异构体)，9.36(s，1H)，12.63(s，1H)；MS(ESI)m/z526(M++1)，528(M++3)；C27H25ClFN3O5·0.5H2O的分析计算值C，60.62；H，4.90；N，7.85；Cl，6.63；F，3.55。实测值C，61.00；H，5.19；N，7.40；Cl，6.66；F，3.39。实施例884-[1-[3-溴-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向3-溴代苯基乙酸(10.2g，47.4mmol)的二氯乙烷(50ml)的搅拌溶液中加入甲醇(5.8ml，142mmol)和硫酸(0.5ml)。搅拌20分钟后，将该混合物于80℃加热7小时。将反应混合物倾入冰水中，用氯仿提取。用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物，得到3-溴代苯基乙酸甲酯(10.8g，99％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.60(s，2H)，3.71(d，J＝1.0Hz，3H)，7.18-7.44(m，4H)。
于0℃，向3-氯代苯基乙酸甲酯(10.8g，47.1mmol)在硫酸(15.1ml)中的搅拌混合物中加入硝酸(2.8ml.70.7mmol)。将该反应混合物逐渐升温至室温5.5小时。将反应混合物倾入冰水中，用氯仿提取。用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[500g，正己烷/乙酸乙酯(10/1)]，得到3-溴代-4-硝基苯基乙酸甲酯(3.69g，29％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.68(s，2H)，3.73(s，3H)，7.38(dd，J＝8.3，1.2Hz，1H)，7.67(d，J＝1.3Hz，1H)，7.83(d，J＝8.3Hz，1H)。
将3-溴-4-硝基苯基乙酸甲酯(14.8g，53.8mmol)、还原铁粉(9.62g，172mmol)、AcONa·3H2O(7.32g，53.8mmol)和乙酸(20.0ml)在甲醇/水(150/600ml)中的混合物于90℃加热1小时。冷却至室温后，通过Celite过滤反应混合物，用甲醇洗涤滤饼。蒸发合并的滤液并用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析[400g，氯仿/乙酸乙酯(20/1)]，得到4-氨基-3-溴代苯基乙酸甲酯(9.01g，69％)，为棕色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.48(s，2H)，3.68(s，3H)，4.05(br，2H)，6.69(d，J＝8.3Hz，1H)，7.00(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.32(d，J＝2.0Hz，1H)。
于室温下，向4-氨基-3-溴代苯基乙酸甲酯(587mg，2.40mmol)和异氰酸2-甲基苯酯(0.287ml，2.40mmol)在THF(2ml)中的混合物中加入三乙胺(33ml，0.24mmol)。搅拌21小时后真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到3-溴-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(650mg，72％)，为浅棕色粉末。1H-NMR(CDCl3)δ2.34(s，3H)，3.53(s，2H)，3.68(s，3H)，6.18(br，1H)，6.96(br，1H)，7.18-7.33(m，4H)，7.29(d，J＝4.4Hz，1H)，7.30(d，J＝7.3Hz，1H)，8.19(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z377(M+)，379(M++2)。
向3-溴-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(650mg，1.72mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(10ml)。于室温下搅拌14小时后，真空浓缩该溶剂。通过加入1N HCl研磨残留物，于60℃减压干燥2天，得到3-溴-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(1.22g，100％)，为无色粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ2.26(s，3H)，3.32(s，2H)，6.93(m，2H)，7.10-7.17(m，4H)，7.76(d，J＝8.1Hz，2H)，8.52(s，1H)；MS(ESI)m/z 385(M++Na)，387(M++2+Na)。
于室温下，将3-溴-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(80mg，0.22mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(56mg，0.22mmol)、EDC·HCl(63mg，0.33mmol)、HOBT(45mg，0.33mmol)和三乙胺(0.15ml，1.10mmol)在DMF(1ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经TLC[氯仿/丙酮(5/1)]纯化，得到4-[1-[3-溴-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(140mg，100％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.30(s，3H)，2.55(m，1H)，3.56(d，J＝6.4Hz，2H)，3.70-3.84(m，3H)，3.87(s，3H)，3.99-4.59(m，3H)，5.23-5.38(m，1H)，6.83-6.94(m，2H)，6.95(d，J＝8.8Hz，1H)，7.07-7.26(m，5H)，7.36-7.63(m，2H)，7.94-8.15(m，3H)；MS(ESI)m/z 598(M++1)，600(M++3)。
向4-[1-[3-溴-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(140mg，0.22mmol)的THF(10ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(10ml)。于室温下搅拌14小时后，减压浓缩该混合物，用1N HCl酸化。收集沉淀，用水洗涤，减压干燥，得到94(109mg，85％)，为无色粉末。MW 584.43IR(KBr)3313，3060，2976，1687，1604，1525，1244 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.27(s，3H)，2.29(m，2H)，3.66(d，J＝8.1Hz，2H)，3.72-4.68(m，5H)，5.31-5.53(m，1H)，6.92-6.99(m，1H)，7.04和7.07(各为d，J＝8.3Hz，2H，酰胺异构体)，7.11-7.21(m，3H)，7.48和7.51(s，1H，酰胺异构体)，7.75和7.79(各为d，J＝8.1Hz，1H，酰胺异构体)，7.86-7.92(m，3H)，8.45和8.47(各为s，1H，酰胺异构体)，8.59(s，1H)，12.64(s，1H)；MS(FAB)m/z584(M++1)，586(M++3)；C28H27BrFN3O5的分析计算值C，57.54；H，4.66；N，7.19；Br，13.67；F，3.25。实测值C，57.93；H，4.97；N，7.04；Br，13.35；F，2.89。实施例894-[1-[3-溴-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基-3-溴代苯基乙酸甲酯(587mg，2.40mmol)和异氰酸2-氯代苯酯(0.29ml，2.40mmol)在THF(2m1)中的混合物中加入三乙胺(33ml，0.24mmol)。搅拌21小时后，真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到3-溴-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(710mg，74％)，为浅棕色粉末。1H-NMR(CDCl3)δ3.57(s，2H)，3.70(s，3H)，7.02-7.28(m，2H)，7.36(d，J＝6.8Hz，1H)，7.48(s，1H)，8.00-8.11(m，2H)；MS(ESI)m/z 397(M+)，399(M++2)，401(M++4)。
向3-溴-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(710mg，1.79mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(10ml)。于室温下搅拌14小时后，真空浓缩溶剂。通过加入1N HCl研磨残留物，于60℃减压干燥2天，得到3-溴-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸(643mg，94％)，为无色粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ3.56(s，2H)，7.05(m，1H)，7.21(dd，J＝8.6，1.7Hz，1H)，7.29(t，J＝7.8Hz，1H)，7.46(d，J＝8.1Hz，1H)，7.46(d，J＝8.1Hz，1H)，7.53(d，J＝1.7Hz，1H)，7.83(d，J＝8.3Hz，1H)，8.06(d，J＝7.6Hz，1H)，8.86(s，1H)，8.89(s，1H)，12.40(s，1H)；MS(ESI)m/z382(M++1)，384(M++3)。
于室温下，将3-溴-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸(384mg，1.00mmol)、4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(253mg，1.00mmo1)、EDC·HCl(288mg，1.50mmol)、HOBT(203mg，1.50mmol)和三乙胺(0.70ml，5.00mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[30g，氯仿/丙酮(10/1)]纯化，得到4-[1-[3-溴-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(640mg，100％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.07-2.46(m，2H)，2.59(t，J＝18.4Hz，1H)，3.57(d，J＝10.5Hz，2H)，3.63-4.67(m，7H)，5.26-5.44(m，1H)，6.89-6.96(m，3H)，7.13(d，J＝7.6Hz，1H)，7.1(t，J＝7.3Hz，1H)，7.26-7.29(m，2H)，7.52-7.94(m，4H)，8.01(d，J＝8.5Hz，1H)，8.09(d，J＝8.5Hz，1H)；MS(FAB)m/z618(M+)，620(M++3)，622(M++5)。
向4-[1-[3-溴-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(640mg，1.00mmol)的THF(40ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(40ml)。于室温下搅拌14小时后，减压浓缩该混合物，用1N HCl酸化。收集沉淀，用水洗涤，减压干燥，得到95(522mg，86％)，为淡黄色粉末。MW 604.85IR(KBr)3317，3072，1709，1685，1604，1529，1290 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24-2.50(m，2H)，3.67(d，J＝8.3Hz，2H)，3.73-4.68(m，5H)，5.31-5.52(m，1H)，7.03-7.09(m，3H)，7.22(dt，J＝8.3，1.7Hz，1H)，7.30(d，J＝7.3Hz，1H)，7.46(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，7.49和7.52(各为d，J＝2.0Hz，1H，酰胺异构体)，7.80-7.91(m，3H)，8.07(dd，J＝8.3，1.2Hz，1H)，8.85和8.86(各为s，1H，酰胺异构体)，8.96和8.97(各为s，1H，酰胺异构体)，12.62(s，1H)；MS(FAB)m/z605(M++1)，607(M++3)，609(M++3)，626(M++1+Na)；C27H24BrClFN3O5·0.8H2O的分析计算值C，52.37；H，4.17；N，6.79；F，3.07。实测值C，52.63；H，4.12；N，6.62；F，2.97。实施例904-[1-[3-溴-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-氨基-3-溴代苯基乙酸甲酯(587mg，2.40mmol)和异氰酸2-溴代苯酯(0.30ml，2.40mmol)在THF(2ml)中的混合物中加入三乙胺(33ml，0.24mmol)。搅拌4小时后，真空浓缩反应混合物。通过加入正己烷研磨残留物，得到3-溴-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(770mg，73％)，为浅棕色粉末。1H-NMR(CDCl3)δ3.55(s，2H)，3.70(s，3H)，6.97(dd，J＝7.3，1.5Hz，1H)，7.22(dd，J＝8.5，2.2Hz，1H)，7.29-7.33(m，2H)，7.48(d，J＝1.0，2.2Hz，1H)，7.54(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)，8.01(m，2H)；MS(ESI)m/z 443(M++1)，445(M++3)，447(M++5)。
向3-溴-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酸甲酯(770mg，1.74mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(10ml)。于室温下搅拌14小时后，真空浓缩溶剂。通过加入1N HCl研磨残留物，于60℃减压干燥2天，得到3-溴-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酸(702mg，94％)，为无色粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ3.56(s，2H)，6.99(dt，J＝7.8，1.5Hz，1H)，7.21(dd，J＝8.3，1.7Hz，1H)，7.33(dt，J＝7.1，1.5Hz，1H)，7.53(d，J＝1.7Hz，1H)，7.62(dd，J＝8.1，1.5Hz，1H)，7.82(d，J＝8.3Hz，1H)，7.93(dd，J＝8.1，1.5Hz，1H)，8.82(s，1H)，8.86(s，1H)，12.39(s，1H)；MS(ESI)m/z428(M++1)，430(M++3)。
于室温下，将3-溴-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸(428mg，1.00mmol)、4-[(2S，4S)-4-氟-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(253mg，1.00mmol)、EDC·HCl(288mg，1.50mmol)、HOBT(203mg，1.50mmol)和三乙胺(0.70ml，5.00mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[30g，氯仿/丙酮(10/1)]，得到4-[1-[3-溴-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(720mg，100％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.07-2.45(m，2H)，2.58(m，1H)，3.58(d，J＝9.0Hz，2H)，3.63-4.69(m，9H)，5.26-543(m，1H)，6.88-6.99(m，3H)，7.16(d，J＝8.3Hz，1H)，7.23-7.32(m，2H)，7.46(dd，J＝8.1，1.5Hz，1H)，7.5 1-8.20(m，5H)；MS(FAB)m/z664(M+)，666(M++3)，668(M++5)。
向4-[1-[3-溴-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(720mg，1.00mmol)的THF(40ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(40ml)。于室温下搅拌14小时后，减压浓缩该混合物，用1N HCl酸化。用氯仿/甲醇(10/1)提取该混合物。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[20g，氯仿/丙酮(10/1)-氯仿/甲醇(20/1)]并通过加入乙醚研磨，得到96(489mg，75％)，为无色无定形固体。MW 649.30 IR(KBr)3450，3313，3070，1709，1684，1525，1435 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25-2.50(m，2H)，3.67(d，J＝8.3Hz，2H)，3.73-4.68(m，5H)，5.31-5.53(m，1H)，6.98-7.08(m，3H)，7.21(d，J＝8.2Hz，1H)，7.34(t，J＝8.8Hz，1H)，7.50和7.53(各为s，1H，酰胺异构体)，7.62(d，J＝8.0Hz，1H)，7.80-7.96(m，4H)，8.82(s，1H)，8.85和8.86(各为s，1H，酰胺异构体)，12.63(br，1H)；MS(FAB)m/z 650(M++1)，652(M++3)，654(M++3)，672(M++Na)；C27H24Br2FN3O5·0.9H2O的分析计算值C，48.73；H，3.91；N，6.31；F，2.85。实测值C，48.96；H，3.98；N，5.92；F，2.77。实施例914-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-2，3-二氟苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向叔丁基乙基丙二酸酯(5.35ml，28.2mmol)在DMF(150ml)的搅拌溶液中加入氢化钠(60％在油中，3.38g，84.7mmol)。20分钟后，通过滴液漏斗滴加在DMF(50ml)中的2，3-二氟代硝基苯(5g，28.2mmol)。加入后，于室温下搅拌该混合物3小时。将该混合物倾入冰水和饱和氯化铵(100ml)中。用乙酸乙酯提取该混合物，用1M HCl和盐水洗涤合并的有机层。经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。使残留物溶于二氯甲烷(20ml)中，于室温下加入TFA(20ml)。将该混合物回流1 8小时。真空蒸发该混合物，与甲苯(20ml×2)共蒸发。残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，线性梯度己烷-乙酸乙酯10∶0-1∶1，φ50mm×300mm，15ml/min)，得到2，3-二氟-4-硝基苯基乙酸乙酯(5.85g，85％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.30(m，3H)，3.78(s，2H)，4.22(m，2H)，7.22(m，1H)，7.84(m，1H)；MS(FAB)m/z 246(M++1)。
于室温下，向2，3-二氟-4-硝基苯基乙酸乙酯(5.85g，23.9mol)的乙醇(100ml)的搅拌溶液中加入SnCl2(16.1g，71.6mmol)。在回流下继续搅拌18小时。除去溶剂后，使残留物溶于氯仿(100ml)并倾入到冰水-4M氢氧化钠(40ml的4M氢氧化钠，在300ml冰水中)，用氯仿(100ml×2)提取，经无水硫酸镁干燥并减压浓缩。残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404，己烷-乙酸乙酯9∶1-7∶3的线性梯度液，φ50mm×500mm，15ml/min)，得到4-氨基-2，3-二氟苯基乙酸乙酯(1.94g，38％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(t，J＝7.3Hz，3H)，3.55(d，J＝1.0Hz，2H)，3.78(brs，2H)，4.15(dd，J＝7.2Hz，14.2Hz，2H)，6.49(dt，J＝1.8，8.2Hz，1H)，6.78(m，1H)；MS(FAB)m/z216(M++1)。
于室温下，向4-氨基-2，3-二氟苯基乙酸乙酯(323mg，1.5mmol)在DMF(8ml)中的搅拌溶液中加入三乙胺(0.209ml，1.5mmol)和异氰酸2-甲基苯酯(0.372ml，3.0mmol)。于80℃继续搅拌48小时。真空蒸发反应混合物，将固体悬浮于正己烷中。通过过滤收集固体。使该固体溶于THF-甲醇(1∶1，v/v，20ml)，于室温下加入4M氢氧化钠(10ml)。于室温下继续搅拌18小时。将该反应物倾入1M HCl中，通过过滤收集产生的沉淀。用氯仿-正己烷使该固体重结晶，得到4-[(2-甲基苯基)脲基]-2，3-二氟苯基乙酸(200mg，42％)，为白色固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.30(s，3H)，3.35(s，2H)，6.98(m，1H)，7.04(m，1H)，7.18(d，J＝7.3Hz，2H)，7.69(d，J＝8.1Hz，1H)，7.90(m，1H)；MS(FAB)m/z321(M++1)。
向4-(4-S-4-氟-2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(63mg，0.25mmol)和4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-2，3-二氟苯基乙酸(82mg，0.25mmol)在DMF(5ml)中的搅拌溶液中加入EDC·HCl(72mg，0.38mmol)、HOBt(69mg，0.48mmol)和DMAP(cat.)，于室温下继续搅拌过夜。用乙酸乙酯(50ml)稀释该混合物，用1M氢氧化钠、1M HCl和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并减压浓缩。使残留物溶于THF-甲醇-水(21ml，1∶1∶1，v/v/v)中，于室温下继续搅拌6小时。将该混合物倾入1M HCl中，用氯仿-甲醇(9∶1，v/v)提取。经无水硫酸镁干燥合并的有机相并减压浓缩。残留物经TLC[Whatman，PLK-5F，氯仿/甲醇，20/1，v/v]纯化，得到97(69mg，51％)，为白色粉末。MW 541.52 IR(KBr)3340，1604，1540，1251，1168，754 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.32(m，2H)，3.68-4.40(m，7H)，5.32-5.55(m，1H)，6.98(m，2H)，7.05(d，J＝8.8Hz，2H)，7.83(d，J＝8.8Hz，2H)，7.82-7.92(m，2H)，8.40(s，1H)，9.14(s，1H)；MS(ESI)m/z564(M++Na)；C28H26F3N3O5·2.0H2O的分析计算值C，58.23；H，5.24；N，7.28。实测值C，58.07；H，4.84；N，7.03。实施例924-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-2，5-二氟苯基乙酰基]-(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向乙基丙二酸二叔丁酯(6.32ml，28.2mmol)在DMF(150ml)的搅拌溶液中加入氢化钠(60％在油中，3.38g，84.7mmol)。20分钟后，通过滴液漏斗滴加在DMF(50ml)中的2，5-二氟硝基苯(5g，28.2mmol)。加入后，于室温下搅拌该混合物3小时。将该混合物倾入冰水和饱和氯化铵(100ml)中。用乙酸乙酯提取该混合物，用1M HCl和盐水洗涤合并的有机层。经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。使残留物溶于二氯甲烷(20ml)中，于室温下加入TFA(20ml)。将该混合物回流18小时。真空蒸发该混合物，与甲苯(20ml×2)共蒸发。使残留物溶于甲醇(150ml)中，加入浓硫酸(5ml)。将该混合物回流18小时。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用水、1M HCl和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并减压浓缩。残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，线性梯度己烷-乙酸乙酯10∶0-1∶1，φ50mm×300mm，15ml/min)，得到2，5-二氟-4-硝基苯基乙酸乙酯(6.53g，90％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.75(s，2H)，3.76(s，3H)，7.29(dd，J＝5.8Hz，10.5Hz，1H)，7.81(dd，J＝6.0Hz，8.4Hz，1H)；MS(ESI)m/z232(M++1)。
于室温下，向2，5-二氟-4-硝基苯基乙酸乙酯(5.88g，25.4mol)的乙醇(100ml)的搅拌溶液中加入SnCl2(17.2g，76.3mmol)。在回流下继续搅拌18小时。除去溶剂后，使残留物溶于氯仿(100ml)并倾入到冰水-4M氢氧化钠(40ml的4M氢氧化钠，在300ml冰水中)，用氯仿(100ml×2)提取，经无水硫酸镁干燥并减压浓缩。残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404，己烷-乙酸乙酯9∶1-7∶3的线性梯度液，φ50mm×500mm，15ml/min)，得到4-氨基-2，5-二氟苯基乙酸乙酯(2.85g，52％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.28(t，J＝7.3Hz，3H)，3.51(s，2H)，3.78(brs，2H)，4.15(dd，J＝7.2Hz，14.2Hz，2H)，6.47(dd，J＝7.5，10.4Hz，1H)，6.88(dd，J＝6.7，11.0Hz，1H)；MS(FAB)m/z216(M++1)。
于室温下，向4-氨基-2，5-二氟苯基乙酸乙酯(323mg，1.5mmol)在DMF(8ml)中的搅拌溶液中加入三乙胺(0.209ml，1.5mmol)和异氰酸2-甲基苯酯(0.372ml，3.0mmol)。于80℃继续搅拌48小时。真空蒸发反应混合物，将固体悬浮于正己烷中。通过过滤收集固体。使该固体溶于THF-甲醇(1∶1，v/v，20ml)，于室温下加入4M氢氧化钠(10ml)。于室温下继续搅拌18小时。将该反应物倾入1M HCl中，通过过滤收集产生的沉淀。用氯仿-正己烷使该固体重结晶，得到4-[(2-甲基苯基)脲基]-2，5-二氟苯基乙酸(214mg，46％)，为白色固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.30(s，3H)，3.35(m，2H)，7.02(m，2H)，7.18(d，J＝7.3Hz，2H)，7.69(d，J＝7.8Hz，1H)，8.03(m，1H)；MS(FAB)m/z321(M++1)。
向4-[(4S)-氟-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(63mg，0.25mmol)和2，5-二氟-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(82mg，0.25mmol)在DMF(5ml)中的搅拌溶液中加入EDC·HCl(72mg，0.38mmol)、HOBt(69mg，0.48mmol)和DMAP(cat.)，于室温下继续搅拌过夜。用乙酸乙酯(50ml)稀释该混合物，用1M氢氧化钠、1M HCl和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并减压浓缩。使残留物溶于THF-甲醇-水(21ml，1∶1∶1，v/v/v)中，于室温下继续搅拌6小时。将该混合物倾入1M HCl中，用氯仿-甲醇(9∶1，v/v)提取。经无水硫酸镁干燥合并的有机相并减压浓缩。残留物经TLC[Whatman，PLK-5F，氯仿/甲醇，20/1，v/v]纯化，得到98(69mg，51％)，为白色粉末。MW 541.52 IR-ATR3351，1604，1537，1167，754(cm-1)；1H-NMR(DMSO)δ2.25(s，3H)，2.32(m，2H)，3.68-4.70(m，7H)，5.32-5.55(m，1H)，6.97(t，J＝7.6Hz，1H)，7.06(d，J＝8.5Hz，2H)，7.20(m，3H)，7.87(d，J＝8.8Hz，2H)，7.83-8.04(m，2H)，8.45(s，1H)，9.1 8(s，1H)；MS(ESI)m/z 564(M++Na)；C28H26F3N3O5· 1.75H2O的分析计算值C，58.69；H，5.19；N，7.33。实测值C，58.54；H，4.85；N，6.98。实施例934-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-氟-2-吡咯烷基]甲基氨基苯甲酸
4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-氟-2-吡咯烷基]甲基氨基苯甲酸
于室温下，向1-叔丁氧基羰基-4-氟代吡咯烷-2-甲酸甲酯(1.2g，4.85mmol)的甲醇(5ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(5ml)，于室温下搅拌该混合物1小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。用乙酸乙酯提取该混合物。用水洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥，真空浓缩得到1-叔丁氧基羰基-4-氟代吡咯烷-2-甲酸(1.1g，定量)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(br s，9H)，2.78-2.83(br s，3H)，4.37(s，2H)，6.73-6.76(m，3H)，7.17(m，1H)。
于0℃，向1-叔丁氧基羰基-4-氟代吡咯烷-2-甲酸(1.1g，4.7mmol)的THF (10.0ml)的搅拌溶液中加入BH3·THF(1.0M的THF溶液，10.0ml。10.0mmol)。此后于室温下搅拌1.0小时。冷却后，真空浓缩该混合物。于0℃将水加入其中，用乙酸乙酯提取。用水洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥，真空浓缩得到1-叔丁氧基羰基-4-氟-2-吡咯烷基甲醇(1.0g，定量)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.29-2.39(m，1H)，3.38-3.59(m，2H)，3.74-3.88(m，2H)，4.09-4.14(m，2H)，4.85(m，1H)，5.03(br s，1H)，5.16(br s，1H)。
于-78℃，向草酰氯(0.28ml，2.3mmol)的二氯甲烷(20.0ml)的搅拌溶液中加入DMSO(0.39ml)。5分钟后，向该混合物中加入在二氯甲烷(5.0ml)中的1-叔丁氧基羰基-4-氟-2-吡咯烷基甲醇(500mg，2.28mmol)。于-78℃将该混合物搅拌30分钟，加入三乙胺(l.6ml)。于-78℃，将混合物搅拌30分钟。再于室温下搅拌30分钟。将水加入该混合物中，用二氯甲烷提取。经硫酸钠干燥有机层并真空浓缩。粗产物可无需进一步纯化而用于随后的反应中。于0℃，向粗产物、4-氨基苯甲酸甲酯(302mg，2.0mmol)和乙酸(0.13ml)的DCE(10ml)的搅拌溶液中加入NaBH(OAc)3(656mg，3.09mmol)。于室温下搅拌该反应混合物18小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-正己烷(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到4-(1-叔丁氧基羰基-4-氟-2-吡咯烷基)甲基氨基苯甲酸甲酯(541mg，77％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.55-1.59(m，1H)，2.16-2.27(m，1H)，2.89-3.03(m，2H)，3.19-3.28(m，2H)，3.69-3.73(m，1H)，3.84(s，3H)，5.15和5.29(各为s，共1H)，6.55-6.58(m，2H)，7.84-7.86(m，2H)。
于0℃，向4-(1-叔丁氧基羰基-4-氟-2-吡咯烷基)甲基氨基苯甲酸甲酯(541mg，1.53mmol)的二氯甲烷(8.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(4.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物可无需进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(151mg，0.6mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(201mg，0.6mmol)、HOBt(94mg，0.7mmol)和三乙胺(167μl，1，1.2mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(173mg，0.9mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2-M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶2，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-氟-2-吡咯烷基]甲基氨基苯甲酸甲酯(320mg，94％)，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.80-1.95(m，1H)，2.42-2.58(m，1H)，3.20-3.51(m，3H)，3.51-3.76(m，5H)，3.84(s，3H)，3.85-3.98(m，1H)，4.67-4.70(m，1H)，5.10和5.23(各为s，共1H)，5.50(br s，1H)，6.49-6.52(m，2H)，6.78-6.81(m，2H)，6.97-7.01(m，1H)，7.14-7.18(m，2H)，7.24-7.36(m，2H)，7.80-7.82(m，2H)，7.99-8.01(m，1H)，8.15-8.18(m，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-氟-2-吡咯烷基]甲基氨基苯甲酸甲酯(320mg，0.56mmol)的THF(5.0ml)和甲醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.8ml，0.8mmol)。将该混合物于70℃搅拌24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到99(280mg，90％)，为白色结晶固体。MW 555.00mp 132-136℃；IR(KBr)3332，2937，1602，1531，1174，752 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.00-2.40(m，2H)，3.50-3.90(m，4H)，3.75-3.85(m，5H)，4.27(m，1H)，5.23和5.37(各为s，共1H)，6.51-7.03(m，5H)，7.25-7.29(m，1H)，7.41-7.44(m，1H)，7.64-7.68(m，2H)，7.92-8.10(m，2H)，8.87-8.94(m，2H)；C28H28N4O5FCl·0.6H2O的分析计算值C，59.44；H，5.20；N，9.90。实测值C，59.41；H，5.19；N，9.72。
于0℃，向4-(1-叔丁氧基羰基-4-氟-2-吡咯烷基)甲基氨基苯甲酸甲酯(541mg，1.53mmol)的二氯甲烷(8.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(4.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物可无需进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(151mg，0.6mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(227mg，0.6mmol)、HOBt(94mg，0.7mmol)和三乙胺(167μl，1.2mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(173mg，0.9mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2-M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(2∶3，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-氟-2-吡咯烷基]甲基氨基苯甲酸甲酯(280mg，76％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.80-1.98(m，1H)，1.42-1.58(m，1H)，3.20-3.52(m，3H)，3.67-3.79(m，5H)，3.84(s，3H)，3.94-3.97(m，1H)，4.68-4.71(m，1H)，5.10和5.23(各为s，共1H)，5.5 1(br s，1H)，6.50-6.52(m，2H)，6.79-7.07(m，5H)，7.25-7.33(m，1H)，7.51-7.53(m，1H)，7.80-7.83(m，2H)，7.98-8.00(m，1H)，8.11-8.14(m，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-氟-2-吡咯烷基]甲基氨基苯甲酸甲酯(280mg，0.46mmol)的THF(8.0ml)和甲醇(8.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(2.8ml，2.8mmol)。将该混合物于70℃搅拌18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到100(260mg，95％)，为白色结晶固体。MW 599.45mp 131-135℃；IR(KBr)3332，2935，1602，1529，1174 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.95-2.01(m，1H)，2.20-2.35(m，1H)，3.10-3.20(m，1H)，3.50-3.70(m，3H)，3.80-3.85(m，5H)，4.27(m，1H)，5.24和5.37(各为s，共1H)，6.54-6.99(m，5H)，7.30-7.33(m，1H)，7.58-7.94(m，3H)，7.94-7.98(m，2H)，8.73(m，1H)，8.93(m，1H)；C28H28N4O5BrF·0.7H2O的分析计算值C，54.95；H，4.84；N，9.15。实测值C，54.98；H，4.81；N，8.93。实施例944-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4R)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
将4-[(4R)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(634mg，2.50mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(787mg，2.50mmol)、EDC·HCl(718mg，3.75mmol)、HOBt(cat.)、DMAP(cat.)和DMF(10ml)的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(300m1)稀释该混合物。用盐水(2×100ml)洗涤该溶液，经硫酸镁干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4R)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.37g，定量)，为淡黄色粘性固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.24(s，3H)，2.26-2.47(m，2H)，3.46(s，3H)，3.49-3.64(m，4H)，3.87(s，3H)，4.06(dd，J＝9.5，2.0Hz，1H)，4.51-4.62(m，2H)，5.20和5.33(各为br s，共1H)，6.63(s，1H)，6.72(d，J＝8.3Hz，1H)，6.77(d，J＝9.0Hz，2H)，7.05(t，J＝7.6Hz，1H)，7.16-7.20(m，3H)，7.53(s，1H)，7.63(d，J＝7.8Hz，1H)，7.91(d，J＝9.0Hz，2H)，8.07(d，J＝8.1Hz，1H)。
将4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4R)-氟-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.37g，2.49mmol)、0.25N氢氧化钠(20ml，5.00mmol)和THF(20ml)的混合物搅拌3天。将该混合物倾入1NHCl(100ml)中，用氯仿-甲醇(5∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1-4∶1)洗脱，得到101(930mg，70％)，为淡黄色无定形固体。MW 535.561H-NMR(DMSO-d6)δ2.24-2.41(m，共5H)，3.42-4.66(多个m，10H)，5.31和5.44(各为br s，共1H)，6.71-7.16(多个m，7H)，7.79(d，J＝8.1Hz，1H)，7.85-7.89(m，2H)，7.98-8.00(m，1H)，8.47(s，1H)，8.55(s，1H)；MS(FAB)m/z 536(M++1)。实施例954-[(4S)-氯-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-(反式-1-叔丁氧基羰基-4-羟基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(351mg，1.0mmol)和三苯膦(393mg，1.5mmol)的氯仿(5.0ml)的搅拌溶液中加入四氯化碳(5.0ml)。于50℃将反应混合物搅拌24小时。将该反应混合物真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷至正己烷-乙酸乙酯(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-氯-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(340mg，92％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.38-2.65(m，2H)，3.50-3.90(m，1H)，3.88(s，3H)，3.89-4.05(m，1H)，4.26-4.41(m，4H)，6.95-6.97(m，2H)，7.98(d，J＝8.5Hz，2H)。
于0℃，向4-(1-叔丁氧基羰基-(4S)-氯-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(369mg，1.0mmol)的二氯甲烷(3.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(3.0ml)。将得到的混合物于室温下搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物可无需进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(185mg，0.5mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(167mg，0.5mmol)、HOBt(68mg，0.5mmol)和三乙胺(208ml，1.5mmol)的THF(8.0ml)和MeCN(8.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(144mg，0.75mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2-M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶2，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氯-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(210mg，72％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.35-3.50(m，1H)，3.55-3.65(m，1H)，3.61-3.66(m，3H)，3.75(s，3H)，3.88(s，3H)，3.99-4.04(m，1H)，4.35-4.40(m，3H)，4.48-4.53(m，1H)，6.77-7.10(m，7H)，7.25-7.36(m，2H)，7.93-8.00(m，2H)，8.18(d，J＝8.0Hz，1H)。
向4-[(4S)-氯-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(210mg，0.35mmol)的THF(6.0ml)和甲醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.7ml，0.7mmol)。将该混合物于70℃搅拌18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到102(200mg，98％)，为白色结晶固体。MW 572.44 mp 126-131℃；IR(KBr)3330，1685，1604，1533，1438 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.15-2.25(m，1H)，2.58-2.63(m，1H)，3.58-3.78(m，3H)，3.83(s，3H)，4.13-4.42(m，4H)，4.73(m，1H)，6.75-7.45(m，7H)，7.86-8.10(m，4H)，8.90(s，1H)，8.95(s，1H)；MS(FAB)m/z 572(M++1)；C28H27N3O6Cl的分析计算值C，58.75；H，4.75；N，7.34。实测值C，58.93；H，4.85；N，7.15。实施例964-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氯-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-[1-叔丁氧基羰基-(4S)-氯-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(369mg，1.0mmol)的二氯甲烷(3.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(3.0ml)。于室温下将反应混合物搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物可无需进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(185mg，0.5mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(190mg，0.5mmol)、HOBt(68mg，0.5mmol)和三乙胺(208ml，1.5mmol)的THF(8.0ml)和MeCN(8.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(144mg，0.75mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2-M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶2，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氯-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(260mg，83％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.32-2.50(m，1H)，2.53-2.65(m，1H)，3.61-3.67(m，3H)，3.75(s，3H)，3.88(s，3H)，3.99-4.03(m，1H)，4.35-4.40(m，3H)，4.45-4.55(m，1H)，6.78-7.10(m，7H)，7.28-7.33(m，1H)，7.52(d，J＝8.0Hz，1H)，7.94-7.99(m，3H)，8.14(d，J＝8.3Hz，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-氯-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(260mg，0.4mmol)的THF(6.0ml)和甲醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.8ml，0.8mmol)。将该混合物于70℃搅拌24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到103(210mg，83％)，为白色结晶固体。MW 616.89 mp 127-132℃；IR(KBr)3330，1685，1604，1529，1434 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.18-2.28(m，1H)，2.60-2.70(m，1H)，3.55-3.75(m，3H)，3.83(s，3H)，4.12-4.42(m，4H)，4.60-4.75(m，1H)，6.75-7.06(m，5H)，7.30-7.34(m，1H)，7.60(d，J＝7.3Hz，1H)，7.86-7.94(m，5H)，8.75(s，1H)，8.94(s，1H)；MS(FAB)m/z 616(M+)，618(M++2)；C28H27N3O6ClBr的分析计算值C，54.52；H，4.41；N，6.81。实测值C，54.98；H，4.54；N，6.66。实施例974-[(4R)-氯-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
4-[(4R)-氯-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-羟基-(2S)-吡咯烷基甲酸甲酯(1.81g，7.34mmol)的四氯化碳-二氯甲烷(20ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入三苯膦(3.87mmol，14.75mmol)，于室温下将反应混合物搅拌2小时。向该混合物中加入乙醇(5ml)，于室温下将该反应混合物搅拌过夜。除去溶剂后，残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-氯-(2S)-吡咯烷基甲酸甲酯(1.36g，70％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.42(s，9H)，2.32-2.39(m，1H)，2.49-2.54(m，1H)，3.66-3.92(多个s和m，.共5H)，4.44-4.55(m，2H)；MS(FAB)m/z 264(M++1)。
向1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-氯-(2S)-吡咯烷基甲酸甲酯(1.35g，5.12mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将该反应混合物在回流下加热1.5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，用氯仿-甲醇(9∶1，v/v)提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发得到1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-氯-(2S)-吡咯烷基甲酸(1.28g，定量)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)，2.37-2.54(m，2H)，3.68-3.88(m，2H)，4.42-4.45(m，2H)。
通过注射器向1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-氯-(2S)-吡咯烷基甲酸(1.28g，5.13mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中滴加BH3·DMS(0.60ml，6.33mmol)，于室温下搅拌反应混合物1小时。除去溶剂后，使残留物溶于二氯甲烷中。用水、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-氯代脯氨醇(0.88g，73％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.98(m，1H)，2.26-2.32(m，1H)，3.56-3.65(m，2H)，3.77(m，2H)，4.24(m，1H)，4.41-4.46(m，2H)；MS(FAB)m/z236(M++1)。
向4-羟基苯甲酸甲酯(560mg，3.68mmol)、1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-氯代脯氨醇(870mg，3.69mmol)、三苯膦(1.16g，4.42mmol)的THF(15ml)的冷(0℃)的搅拌溶液中加入DIAD(870ml，4.42mmol)，将该反应混合物回流下加热10小时。冷却至室温后，蒸发该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-氯-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(890mg，65％)，为白色固体。mp 116-120℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，2.39-2.53(m，2H)，3.69-3.70和4.13-4.17(m，共3H)，3.88(s，3H)，4.30-4.41(m，2H)，4.50-4.55(m，1H)，6.90-6.92(m，2H)，7.96-7.98(m，2H)；MS(FAB)m/z370(M++1)；C18H24ClNO5的分析计算值C，58.46；H，6.54；Cl，9.59；N，3.79。实测值C，58.35；H，6.56；Cl，9.75；N，3.77。
向4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-氯-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(840mg，2.27mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入TFA(10ml)。将该反应混合物于室温下搅拌过夜。真空浓缩该混合物，用饱和碳酸氢钠使呈碱性。用氯仿提取该混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发得到4-[(4R)-氯-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(580mg，95％)，为白色固体。mp 61-64℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.85(br s，1H)，2.03-2.10(m，1H)，2.29-2.35(m，1H)，3.19-3.31(m，2H)，3.88(s，3H)，3.92-4.06(m，3H)，4.53-4.56(m，1H)，6.91(d，J＝8.8Hz，2H)，7.98(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(FAB)m/z270(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(385mg，1.22mmol)、4-[(4R)-氯-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(330mg，1.22mmol)、EDC·HCl(281mg，1.47mmol)、HOBt(200mg，1.48mmol)和三乙胺(205ml，1.47mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4R)-氯-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(670mg，97％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.28(s，3H)，2.33-2.57(m，2H)，3.50(s，3H)，3.59-3.60(m，2H)，3.75-3.82(m，2H)，3.88(s，3H)，4.06-4.09(m，1H)，4.51-4.63(m，3H)，6.65-6.80(m，5H)，7.09-7.13(m，1H)，7.20-7.27(m，3H)，7.56-7.58(m，1H)，7.91-7.93(m，2H)，8.05-8.07(m，1H)；MS(FAB)m/z 566(M++1)。
向4-[(4R)-氯-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(480mg，0.85mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)。将该反应混合物回流加热2小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体溶于氯仿-甲醇中并蒸发。用乙醚洗涤残留物，得到104(355mg，76％)，为白色无定形固体。MW 552.02mp 128-132℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.29-2.46(m，2H)，3.57-3.73(m，2H)，3.78(s，3H)，3.81-3.99(m，2H)，4.11-4.31(m，2H)，4.43-4.45和4.64-4.67(各为m，共1H)，4.83-4.85(m，1H)，6.71-7.17(m，7H)，7.78-7.80(m，1H)，7.87-7.91(m，2H)，7.99-8.01(m，1H)，8.47(s，1H)，8.56(s，1H)，12.66(brs，1H)；MS(FAB)m/z552(M++1)；C29H30ClN3O6·3/4H2O的分析计算值；C，61.59；H，5.61；Cl，6.27；N，7.43。实测值C，61.56；H，5.51；Cl，6.68；N，7.26。
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(400mg，1.19mmol)、4-[(4R)-氯-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(320mg，1.19mmol)、EDC·HCl(275mg，1.43mmol)、HOBt(195mg，1.44mmol)和三乙胺(200ml，1.43mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4R)-氯-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(690mg，98％)，为淡黄色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.35-2.41(m，1H)，2.49-2.59(m，1H)，3.55(s，3H)，3.57-3.70(m，2H)，3.73-3.86(m，2H)，3.88(s，3H)，4.06-4.09(m，1H)，4.54-4.66(m，3H)，6.67-6.81(m，4H)，6.95-6.99(m，1H)，7.23-7.25(m，1H)，7.29-7.33(m，1H)，7.47-7.49(m，2H)，7.90-7.99(m，3H)，8.18-8.21(m，1H)；MS(FAB)m/z586(M++1)。
向4-[(4R)-氯-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(410mg，0.70mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)。将该反应混合物回流加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体溶于氯仿-甲醇中并蒸发。用乙醚洗涤残留物，得到105(282mg，70％)，为无定形固体。MW 572.44 mp 131-136℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.29-2.35(m，1H)，2.44-2.47(m，1H)，3.58-3.74(m，2H)，3.78(s，3H)，3.81-3.99(m，2H)，4.10-4.32(m，2H)，4.44-4.46和4.66(各为m，共1H)，4.84(m，1H)，6.74-7.04(m，5H)，7.26-7.30(m，1H)，7.43-7.45(m，1H)，7.87-7.91(m，2H)，7.96(d，J＝8.3Hz，1H)，8.09(d，J＝8.3Hz，1H)，8.90(s，1H)，8.94(s，1H)；C28H27Cl2N3O6·3/4H2O的分析计算值C，57.39；H，4.90；Cl，11.66；N，7.17。实测值C，57.57；H，4.94；Cl，11.66；N，6.89。实施例984-[(4S)-羟基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-[(4S)-乙酰氧基-1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(2.31g，5.87mmol)的二氯甲烷(46ml)的搅拌溶液中加入TFA(10ml)。搅拌3.5小时后，真空浓缩该混合物。通过加入二氯甲烷和1N氢氧化钠稀释残留物，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析[100g，氯仿/甲醇(20/1)]，得到4-[(4S)-乙酰氧基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(1.89mg，100％)，为浅紫色固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.10(s，3H)，2.14(m，1H)，2.65(m，1H)，3.52-3.63(m，H)，3.89(s，3H)，4.18(m，1H)，4.28(d，J＝5.9Hz，2H)，5.38(m，1H)，6.93(d，J＝8.8Hz，2H)，7.99(d，J＝8.8Hz，2H)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(343mg，1.09mmol)、4-[(4S)-乙酰氧基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(320mg，1.09mmol)、EDC·HCl(313mg，1.64mmol)、HOBt(222mg，1.64mmol)和三乙胺(0.76ml，5.45mmol)在DMF(7ml)中的混合物搅拌16小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/丙酮(5/1)]，得到4-[(4S)-乙酰氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(520mg，81％)，为棕色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.00(s，3H，异构体之一)，2.03(s，3H，异构体之一)，2.28(m，5H)，3.54(s，1H)，3.58(s，2H)，3.64(s，1H)，3.67和3.69(各为s，3H，酰胺异构体)，3.85(d，J＝5.4Hz，1H)，3.88(s，3H)，4.04(t，J＝9.3Hz，1H)，5.27-5.34(m，1H)，6.51(m，1H)，6.76-6.89(m，2H)，6.94(d，J＝8.1Hz，1H)，7.14(m，1H)，7.25(m，4H)，7.53(d，J＝8.3Hz，1H)，7.96(d，J＝8.0Hz，1H)，8.00-8.10(m，2H)；MS(ESI)m/z590(M++1)。
向4-[(4S)-乙酰氧基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(520mg，0.882mmol)的THF(30ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。将该反应混合物于室温下搅拌2天后，用乙酸乙酯提取该混合物。用1N HCl酸化水层，用氯仿-甲醇(10/1)提取。用盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。通过加入氯仿、乙醇和乙醚使残留物结晶，得到106(68mg，14％)，为无色粉末。MW 533.57 mp 148-152℃(分解)；IR(KBr)3356，2939，1687，1604，1533，1454，1255 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.95-2.09(m，2H)，2.25(s，3H)，3.59(d，J＝5.9Hz，2H)，3.71(m，1H)，3.81和3.85(各为s，3H，酰胺异构体)，4.13-4.47(m，4H)，5.19(br，1H)，6.70-7.21(m，7H)，7.79(d，J＝7.9Hz，1H)，7.86(d，J＝8.8Hz，2H)，8.01(d，J＝8.3Hz，1H)，8.47(s，1H)，8.57(s，1H)；MS(ESI)m/z 533(M++1)；C29H31N3O7·1H2O的分析计算值C，63.15；H，6.03；N，7.62。实测值C，63.29；H，5.76；N，7.46。实施例994-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-羟基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(342mg，1.02mmol)、4-[(2S，4S)-4-乙酰氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(300mg，1.02mmol)、EDC·HCl(293mg，1.53mmol)、HOBt(207mg，1.53mmol)和三乙胺(0.71ml，5.10mmol)在DMF(6ml)中的混合物搅拌15小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/丙酮(5/1)]，得到4-[(4S)-乙酰氧基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(510mg，82％)，为浅棕色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.01和2.04(各为s，3H，酰胺异构体)，2.17(m，2H)，3.56-3.66(m，3H)，3.61(s，3H)，3.88(s，3H)，3.89(m，1H)，4.07(t，J＝9.6Hz，1H)，4.45(dd，J＝9.2，3.4Hz，1H)，4.56(m，1H)，5.31-5.39(m，1H)，6.80-7.01(m，4H)，7.23(d，J＝8.1Hz，4H)，7.34(d，J＝8.1Hz，1H)，7.95(d，J＝8.5Hz，1H)，8.00(m，1H)，8.18(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z610(M++1)，612(M++3)。
向4-[(4S)-乙酰氧基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(510mg，0.836mmol)的THF(30ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。将该反应混合物于室温下搅拌2天后，用乙酸乙酯提取该混合物。用1N HCl酸化水层，用氯仿-甲醇(10/1)提取。用盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。通过加入乙醇和乙醚使残留物结晶，得到107(22mg，5％)，为无色粉末。MW 553.99 mp 138-142℃(分解)；IR(KBr)3334，2939，1685，1604，1533，1439，1248 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.93-2.14(m，2H)，3.60(d，J＝5.7Hz，2H)，3.71(m，1H)，3.81和3.85(各为s，3H，酰胺异构体)，4.14-4.50(m，4H)，5.19(br，1H)，6.72和6.76(各为m，1H，酰胺异构体)，6.85和6.90(各为s，1H，酰胺异构体)，7.00-7.08(m，3H)，7.28(t，J＝7.3Hz，1H)，7.43(dd，J＝8.1，1.2Hz，1H)，7.86-7.95(m，2H)，7.97(d，J＝8.1Hz，1H)，8.10(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)，8.90(s，1H)，8.94(s，1H)，12.64(br，1H)；MS(ESI)m/z554(M++1)，556(M++3)；C28H28ClN3O7的分析计算值C，60.71；H，5.05；Cl，6.40；N，7.58。实测值C，60.47；H，5.37；Cl，6.31；N，7.19。实施例1004-[(4S)-乙酰氧基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(387mg，1.02mmol)、4-[(4S)-乙酰氧基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(300mg，1.02mmol)、EDC·HCl(293mg，1.53mmol)、HOBt(207mg，1.53mmol)和三乙胺(0.71ml，5.10mmol)在DMF(6ml)中的混合物搅拌15小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/丙酮(5/1)]，得到4-[(4S)-乙酰氧基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(510mg，76％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.01和2.04(各为s，3H，酰胺异构体)，2.31(m，2H)，3.54-3.68(m，3H)，3.76(s，2H)，3.88(s，3H)，3.89-4.58(m，4H)，5.31-5.36(m，1H)，6.81-6.96(m，5H)，7.19-7.32(m，3H)，7.51(d，J＝8.0Hz，1H)，7.93-8.00(m，3H)，8.13(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z654(M++1)，656(M++3)。
向4-[(4S)-乙酰氧基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(510mg，0.779mmol)的THF(30ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。将该反应混合物于室温下搅拌2天后，用乙酸乙酯提取该混合物。用1N HCl酸化水层，用氯仿-甲醇(10/1)提取。用盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。通过加入乙醇和乙醚使残留物结晶，得到108(87mg，19％)，为浅棕色粉末。MW 598.44 mp 143-151℃(分解)；IR (KBr)3332，2937，1685，1604，1529，1529，1435 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.92-2.14(m，2H)，3.60(d，J＝5.9Hz，2H)，3.72(m，1H)，3.81和3.85(各为s，3H，酰胺异构体)，4.14-4.49(m，4H)，5.19(br，1H)，6.72和6.75(各为m，1H，酰胺异构体)，6.85和6.90(各为m，1H，酰胺异构体)，6.97(t，J＝6.1Hz，1H)，7.06(d，J＝8.8Hz，2H)，7.32(t，J＝7.1Hz，1H)，7.60(dd，J＝7.8，1.2Hz，1H)，7.86(d，J＝8.8Hz，2H)，7.87-7.97(m，3H)，8.74(s，1H)，8.93(s，1H)，12.60(br，1H)；MS(ESI)m/z 559(M++1)，561(M++3)；C28H28BrN3O7·0.1H2O的分析计算值C，56.03；H，4.74；Br，13.31；N，7.00。实测值C，55.80；H，4.84；Br，13.64；N，6.66。实施例1014-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-羟基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向4-[(4R)-乙酰氧基-1-(叔丁氧基羰基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(835mg，2.12mmol)的二氯甲烷(5ml)的搅拌溶液中加入TFA(5ml)，将该反应混合物于室温下搅拌1小时。真空浓缩该混合物，用饱和碳酸氢钠使呈碱性。用氯仿提取该混合物。用盐水洗涤，经碳酸钾干燥并蒸发，得到4-[(4R)-乙酰氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(580mg，95％)，为棕色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.86-1.93(m，1H)，2.00-2.12(多个s和m，共5H)，3.03-3.29(m，1H)，3.73-3.80(m，1H)，3.88(s，3H)，3.93-4.01(m，2H)，5.27-5.30(m，1H)，6.91(d，J＝9.0Hz，2H)，7.98(d，J＝9.0Hz，2H)；MS(FAB)m/z 294(M++1)。
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(365mg，1.09mmol)、4-[(4R)-乙酰氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(320mg，1.09mmol)、EDC·HCl(250mg，1.30mmol)、HOBt(180mg，1.33mmol)和三乙胺(182ml，1.31mmol)在THF(5ml)中的混合物搅拌2天。用水稀释该混合物并用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥后并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4R)-乙酰氧基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(500mg，75％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.01(s，3H)，2.03-2.05(m，1H)，2.20-2.26(m，1H)，2.37-2.43(m，1H)，3.59(s，2H)，3.62(s，3H)，3.66-3.87(m，2H)，3.89(s，3H)，4.07-4.09(m，1H)，4.48-4.51(m，1H)，4.59(m，1H)，6.70-6.82(m，4H)，6.97-7.01(m，1H)，7.24-7.35(m，4H)，7.92-7.98(m，3H)，8.12-8.21(m，1H)；MS(FAB)m/z610(M++1)。
向4-[(4R)-乙酰氧基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(500mg，0.82mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热过夜。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体经从氯仿-'E中重结晶纯化得到109(223mg，49％)，为白色结晶粉末。MW 553.99 mp 137-142℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.95-2.09(m，2H)，3.41-3.43(m，1H)，3.57(m，3H)，3.78(s，3H)，4.07-4.40(多个m，共4H)，5.07(m，1H)，6.72-6.74(m，1H)，6.85(m，1H)，6.99-7.03(m，3H)，7.25-7.29(m，1H)，7.42-7.43(m，1H)，7.85-7.87(m，2H)，7.93-7.95(m，1H)，8.07-8.09(m，1H)，8.88(s，1H)，8.92(s，1H)，12.65(br s，1H)；MS(FAB)m/z554(M++1)；C28H28ClN3O7·1/2H2O的分析计算值C，59.73；H，5.19；Cl，6.30；N，7.46。实测值C，59.58；H，5.32；Cl，6.99；N，7.21。实施例1024-[(4R)-羟基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(320mg，1.02mmol)、4-[(4R)-乙酰氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(300mg，1.02Hmol)、EDC·HCl(235mg，1.23mmol)、HOBt(166mg，1.23mmol)和三乙胺(171ml，1.23mmol)在THF(5ml)中的混合物搅拌2天。用水稀释该混合物并用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥后并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4R)-乙酰氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(420mg，70％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.99(s，3H)，2.02-2.05(m，1H)，2.15-2.41(多个s和m，共5H)，3.55(s，3H)，3.57(s，2H)，3.63-3.73(m，2H)，3.89(s，3H)，4.07-4.10(m，1H)，4.45-4.48(m，1H)，4.57(m，1H)，6.56(s，1H)，6.66(m，1H)，6.75-6.82(m，3H)，7.11-7.24(m，4H)，7.54-7.56(m，1H)，7.92-7.94(m，2H)，8.05-8.07(m，1H)；MS(FAB)m/z590(M++1)。
向4-[(4R)-乙酰氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(420mg，0.71mmol)在THF(5ml)中的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热过夜。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体经从氯仿-IPE中重结晶纯化得到110(182mg，48％)，为白色结晶粉末。MW 533.57 mp 178-182℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.92-2.10(m，2H)，2.23(s，3H)，3.40-3.44(m，1H)，3.56-3.67(m，3H)，3.78(s，3H)，4.05-4.39(多个m，共4H)，5.06(m，1H)，6.71-7.01(m，5H)，7.10-7.16(m，2H)，7.77-7.79(m，1H)，7.85-7.89(m，2H)，7.98-8.00(m，1H)，8.45(s，1H)，8.54(s，1H)，12.59(br s，1H)；MS(FAB)m/z534(M++1)；C29H31N3O7·1/2H2O的分析计算值C，64.20；H，5.94；N，7.74。实测值C，64.35；H，5.83；N，7.68。实施例1034-[(4S)-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸
向N-(叔丁氧基羰基)(4S)-氟代脯氨醇(1.26g，5.75mmol)、三乙胺(4ml，28.5mmol)和DMSO(4.1ml，57.5mmol)的二氯甲烷(20ml)的搅拌溶液中加入SO3·吡啶(2.74g，17.2mmol)。搅拌5小时后，蒸发该混合物以除去二氯甲烷，用乙醚(200ml)稀释。用1N HCl(200ml)和盐水(200ml)洗涤该溶液，经硫酸镁干燥并蒸发。得到的残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)洗脱，得到N-(叔丁氧基羰基)(4S)-氟代脯氨醛(628mg，50％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.41-1.47(m，9H)，2.02-2.48(m，2H)，3.47-3.94(m，2H)，4.16和4.29(各为d，J＝9.8Hz，共1H)，5.13和5.26(各为s，共1H)。
向N-(叔丁氧基羰基)(4S)-氟代脯氨醛(1.44g，6.63mmol)、1-哌嗪基乙酸乙酯(1.71g，9.94mmol)和乙酸(759μl，13.3mmol)的甲醇(20ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(880mg，13.3mmol)。将该反应混合物搅拌过夜并蒸发。用饱和碳酸氢钠(100ml)猝灭残留物，与氯仿(2×200ml)一起蒸发。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。油性残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)洗脱，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-氟-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(2.38g，95％)，为黄色油状物。
将4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-氟-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(2.38g，6.37mmol)、TFA(5ml)和二氯甲烷(5ml)的混合物搅拌3小时。蒸发该混合物，用饱和碳酸氢钠(100ml)使残留物呈碱性。用氯仿-甲醇(4∶1，2×150ml)提取该混合物，经碳酸钾干燥合并的提取物并蒸发，得到4-[(4S)-氟-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.44g，83％)，为棕色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(dt，J＝7.1，2.0Hz，3H)，1.66-3.35(多个m，17H)，4.18(dq，J＝7.1，2.0Hz，2H)，5.09和5.22(各为m，共1H)。
将4-[(4S)-氟-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.44g，5.27mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(1.66g，5.27mmol)、EDC·HCl(1.52g，7.91mmol)、HOBt(cat.)和DMAP(cat.)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯-甲醇(10∶1，220ml)稀释该混合物。用盐水(200ml)洗涤该溶液，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(2.47g，82％)，为黄色粘性固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.24-1.29(m，3H)，1.92-4.36(多个m，7H)，5.16和5.29(各为m，共1H)，6.43(s，1H)，6.74-6.81(m，2H)，7.12-7.29(m，4H)，7.50(d，J＝7.8Hz，1H)，8.01-8.07(m，1H)。
将4-[(4S)-氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.0g，1.76mmol)和0.25N氢氧化钠(14ml，3.50mmol)在THF(15ml)中的混合物搅拌过夜。用1N HCl中和该混合物并蒸发。残留物经离子交换树脂(DIAION，HP20)纯化，用水-甲醇作为洗脱剂，得到111 MW 541.61(400mg，40％)，为淡黄色无定形固体。1H-NMR(CD3OD)δ2.00-3.95(多个m，24H)，4.34-4.40(m，1H)，5.23和5.36(各为m，共1H)，6.78-6.82(m，1H)，6.92(m，1H)，7.00-7.04(m，1H)，7.09-7.23(m，4H)，7.59(d，J＝7.1Hz，1H)，7.99-8.02(m，1H)；MS(FAB)m/z542(M++1)。实施例1044-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸
向1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲醇(2.11g，8.89mmol)、三乙胺(6.2ml，44.5mmol)、DMSO(6.3ml，88.9mmol)的二氯甲烷(20ml)的搅拌溶液中加入SO3·吡啶(4.25g，26.7mmol)。搅拌3小时后，真空浓缩该混合物，用乙醚(200ml)稀释。用1N HCl(100ml)和盐水(100ml)洗涤得到的混合物，经硫酸镁干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)洗脱，得到1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟-2-吡咯烷甲醛(1.40g，67％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.45-1.52(m，9H)，2.49(m，2H)，3.75-3.88(m，2H)，4.29-4.42(m，1H)，9.54和9.60(各为s，共1H)。
于0℃，向1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟-2-吡咯烷甲醛(1.40g，5.95mmol)和1-哌嗪基乙酸乙酯(1.02g，5.95mmol)的甲醇-乙酸(12∶1，13ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(787mg，11.9mmol)。搅拌3天后，通过加入饱和碳酸氢钠(100ml)猝灭该混合物，用氯仿(2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(822mg，35％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，1.46(m，9H)，1.64(m，2H)，2.39-2.64(m，10H)，3.19(s，2H)，3.42-4.05(多个m，3H)，4.18(q，J＝7.1Hz，2H)。
将4-[1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(820mg，2.09mmol)和TFA(5ml)的二氯甲烷(5ml)中的溶液搅拌1小时。真空浓缩该混合物，用饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性。用氯仿-甲醇(5∶1，2×200ml)提取得到的混合物。经碳酸钾干燥合并的提取物并真空浓缩，得到4-(4，4-二氟-2-吡咯烷基甲基)-1-哌嗪基乙酸乙酯(493mg，81％)，为棕色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，1.91(m，2H)，2.27-2.60(m，10H)，3.09-3.34(m，4H)，3.46-3.53(m，1H)，4.19(q，J＝7.1Hz，2H)。
将4-(4，4-二氟-2-吡咯烷基甲基)-1-哌嗪基乙酸乙酯(490mg，1.69mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(567mg，1.69mmol)、EDC·HCl(486mg，2.54mmol)、HOBt(cat.)和DMAP(cat.)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(250ml)稀释该混合物，用盐水(2×200ml)洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)至氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(973mg，95％)，为黄色粘性油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(t，J＝7.1Hz，3H)，2.31-2.68(m，12H)，3.17-3.20(m，2H)，3.52-3.91(m，4H)，4.10-4.48(多个m，3H)，6.75-6.84(m，2H)，7.00(dt，J＝7.8，1.5Hz，1H)，7.16-7.29(m，3H)，7.35(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，1H)，8.18(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(292mg，0.480mmol)的THF(4ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.8ml，0.960mmol)。搅拌2天后，用1N HCl中和该混合物并用氯仿-甲醇(4∶1，2×200ml)提取，经硫酸镁干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(5∶1)洗脱，得到112 MW 580.02(81.7mg，29％)，为淡黄色无定形固体。MW 580.02 1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24-2.50(多个m，12H)，3.40-4.47(多个m，10H)，6.76(d，J＝8.1Hz，1H)，6.88(s，1H)，7.02(t，J＝8.1Hz，1H)，7.28(t，J＝8.1Hz，1H)，7.44(d，J＝8.1Hz，1H)，7.97(d，J＝8.1Hz，1H)，8.08(d，J＝8.1Hz，1H)，8.96-8.99(m，2H)；MS(FAB)m/z580(M++1)实施例1054-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸
于室温、氮气氛下，向(2S，4R)-1-叔丁氧基羰基-4-羟基-2-吡咯烷基甲酸甲酯(4.69g，19.1mmol)、苯酚(1.98g，21.0mmol)和三苯膦(5.51g，21.0mmol)在THF(80ml)中的搅拌的混合物中加入DIAD(4.13ml，21.0mmol)。将该混合物搅拌过夜。除去溶剂后，得到的残留物经硅胶层析纯化[700g，氯仿/乙酸乙酯(10/1)]，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-苯氧基-2-吡咯烷基甲酸甲酯(5.31g，86％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.43(br，9H，异构体之一)，1.48(br，9H，异构体之一)，2.48(m，1H)，3.75(br，3H)，4.42-4.96(m，2H)，6.88-7.35(m，5H)。
于室温下，向(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-苯氧基-2-吡咯烷基甲酸甲酯(5.31g，16.5mmol)的THF(132ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(132ml，33.0mmol)。将得到的混合物搅拌过夜。除去溶剂后，通过加入1N HCl酸化该混合物，用氯仿提取。用盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥并蒸发。使残留物在正己烷-氯仿中重结晶，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-苯氧基-2-吡咯烷基甲酸(2.96g，58％)，为白色粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.36(s，9H)，2.16(d，J＝13.2Hz，1H)，2.56(m，1H)，3.46(m，1H)，3.71(dt，J＝12.0，5.4Hz，1H)，4.26(dt，J＝9.5，7.1Hz，1H)，4.99(m，1H)，6.85(m，2H)，6.94(t，J＝7.3Hz，1H)，7.28(t，J＝7.3Hz，1H)。
于0℃，向(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-苯氧基-2-吡咯烷基甲酸(2.39g，7.76mmol)的THF(50ml)的搅拌溶液中加入BH3·DMS(1.55ml，15.5mmol)。10分钟后，于相同温度下搅拌，使该混合物升至室温，然后于50℃加热2小时。冷却至室温后，真空浓缩该混合物，于0℃通过加入水猝灭。用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析纯化[60g，氯仿/甲醇(50/1)]，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-苯氧基-2-吡咯烷基甲醇(2.83g，100％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.95(br，1H)，2.36(m，1H)，3.56-3.74(m，3H)，3.89-4.52(m，3H)，4.85(br，1H)，6.84(dd，J＝8.8，1.2Hz，2H)，6.97(t，J＝7.2Hz，1H)，7.29(t，2H，J＝7.8Hz)。
于0℃，向(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-苯氧基-2-吡咯烷基甲醇(2.75g，9.37mmol)、三乙胺(7.84ml，56.2mmol)、DMSO(6.66ml，9.37mmol)在二氯甲烷(30ml)中的搅拌混合物中加入SO3·吡啶(4.47g，28.1mmol)，然后使得到的混合物升温至室温。搅拌2.5小时后，真空浓缩该混合物。向得到的混合物中加入水，用乙醚提取。用盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析[100g，氯仿/丙酮(5/1)]，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-苯氧基-2-吡咯烷甲醛(2.54g，93％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H，异构体之一)，1.49(s，9H，异构体之一)，2.17(br，2H)，3.65-4.31(m，3H)，4.91(br，1H)，6.79(d，J＝7.8Hz，1H)，6.77(m，1H)，7.28(m，2H)，9.66(m，1H)。
于室温下，向1-叔丁氧基羰基-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷甲醛(1.36g，4.67mmol)、1-哌嗪基乙酸乙酯(1.61g，9.37mmol)的THF(30ml)的搅拌混合物中加入NaBH(OAc)3(1.98g，9.34mmol)。搅拌3小时后，通过加入水猝灭该混合物，用乙酸乙酯提取。用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥有机层并真空浓缩。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(10/1)]，得到4-[1-叔丁氧基羰基-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.05g，50％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，J＝7.3Hz，3H)，1.57(s，9H)，2.1 8(m，1H)，2.33-2.74(m，9H)，3.17(s，2H)，3.52-4.10(m，5H)，4.17(q，J＝7.3Hz，2H)，4.89(br，1H)，6.84(d，J＝6.8Hz，2H)，6.95(m，1H)，7.26(m，3H)。
于室温下，向4-[1-叔丁氧基羰基-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.05g，2.35mmol)的二氯甲烷(20ml)的搅拌溶液中加入TFA(20ml)。搅拌3小时后，真空浓缩该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)稀释该混合物，通过加入1N氢氧化钠使呈碱性。用氯仿-甲醇(10/1)提取合并的反应混合物。用盐水洗涤有机层，经碳酸钠干燥并浓缩，得到44(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.12g，定量)，为棕色油，其可不经进一步纯化而使用。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(tt，J＝7.1，7.1Hz，3H)，1.91(d，J＝12.0Hz，1H)2.42-2.85(m，10H)，3.22(s，2H)，3.50(s，2H)，3.54-3.82(m，2H)，4.15(q，J＝7.1Hz，2H)，4.98(br，1H)，6.84(d，J＝8.1Hz，2H)，6.76(t，J＝7.1Hz，1H)，7.26-7.31(m，3H)，7.40(br，1H)。
于室温下，将4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(337mg，1.07mmol)、4-[(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(373mg，1.07mmol)、EDC·HCl(308mg，1.61mmol)和DMAP(197mg，1.61mmol)在DMF(6ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(50/1)]，得到4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(430mg，62％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(t，J＝7.8Hz，3H)，1.98-2.17(m，2H)，2.26(s，3H)，2.36-2.82(m，11H)，3.13(s，1H)，3.17(s，1H)，3.55(d，J＝2.4Hz，1H)，3.66(d，J＝0.9Hz，3H)，3.67-3.84(m，2H)，3.98-4.35(m，3H)，4.85-4.95(m，1H)，6.27-6.89(m，6H)，7.08(t，J＝7.3Hz，1H)，7.19(d，J＝6.8Hz，1H)，7.28(m，2H)，7.41(d，J＝4.9Hz，1H)，7.55(d，J＝7.8Hz，1H)，8.05(dd，J＝7.3，2.2Hz，1H)。对于盐酸盐为浅棕色无定形固体。IR(KBr)3265，3059，1747，1533，1225 cm-1；MS(FAB)m/z 644(M++1)；C36H45N5O6·HCl·2.1H2O的分析计算值C，60.22；H，7.05；N，9.75。实测值C，59.97；H，6.72；N，9.54。
向4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(240mg，0.373mmol)的THF(3.0ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.0ml)。于室温下搅拌20小时后，用1N HCl中和该混合物并用氯仿-甲醇(10/1)提取，经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。通过加入乙醚研磨残留物，得到113 MW 615.72(143mg，62％)，为白色粉末。IR(KBr)3346，2949，1633，1533，1227 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.76(m，1H)，2.18(br，2H)，2.25(s，3H)，2.42-2.83(m，9H)，3.17(s，1H)，3.20(s，1H)，3.38(m，1H)，3.70(s，2H)，3.72-3.78(m，2H)，3.85(s，3H，异构体之一)，3.87(s，3H，异构体之一)，3.95(m，1H)，4.27(br，1H)，5.08(m，1H)，6.75(d，J＝8.3Hz，1H)，6.93(m，5H)，7.14(m，2H)，7.30(d，J＝7.6Hz，1H)，7.79(d，J＝9.0Hz，1H)，8.02(m，1H)，8.50(s，1H)，8.58(s，1H)；MS(FAB)m/z 616(M++1)。C34H41N5O6·0.1EtOH·2H2O的分析计算值C，62.58；H，7.00；N，10.67。实测值C，62.73；H，6.58；N，10.24。实施例1064-[1-[4-[NN’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(358mg，1.07mmol)、4-[(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基甲基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(373mg，1.07mmol)、EDC·HCl(308mg，1.61mmol)和DMAP(197mg，1.61mmol)在DMF(6ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(50/1)]，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(320mg，45％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(qq，J＝7.3，7.3Hz，3H)，2.05-2.20(m，2H)，2.35-2.80(m，1H)，3.12和3.18(各为s，1H，酰胺异构体)，3.57(d，J＝5.4Hz，1H)，3.66和3.38(各为s，3H，酰胺异构体)，3.70-3.90(m，2H)，4.02-4.43(m，3H)，4.88-4.97(m，1H)，6.83-6.99(m，6H)，7.18-7.32(m，3H)，7.68(d，J＝8.3Hz，1H)，7.74(s，1H)，8.16(dd，J＝8.3，1.4Hz，1H)。对于盐酸盐为浅棕色无定形固体。IR(KBr)3300，2978，1745，1533，1225cm-1；MS(FAB)m/z 664(M++1)，666(M++3)；C35H42ClN5O6·HCl·2.4H2O的分析计算值C，56.51；H，6.48；N，9.41。实测值C，56.51；H，6.18；N，9.28。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(181mg，0.273mmol)的THF(2.2ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(2.2ml)。于室温下搅拌20小时后，用1N HCl中和该混合物并用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。通过加入乙醚研磨残留物，得到114(133mg，77％)，为白色粉末。MW 636.14 IR(KBr)3317，2949，1701，1631，1595，1225 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.13-3.05(m，11H)，3.22和3.36(各为s，2H，酰胺异构体)，3.38(m，1H)，3.60(s，2H)，3.71(m，1H)，3.85(s，3H)，3.95(m，1H)，4.28(br，1H)，5.06(m，1H)，6.76(d，J＝8.3Hz，1H)，6.91-7.03(m，5H)，7.29(m，3H)，7.44(d，J＝7.9Hz，1H)，7.97(dd，J＝8.1，4.1Hz，1H)，8.08(d，J＝7.0Hz，1H)，8.91(s，1H)，8.95(s，1H)；MS(FAB)m/z636(M++1)，638(M++3)。C33H38ClN5O6·0.2EtOH·1.3H2O的分析计算值C，59.98；H，6.30；N，10.47。实测值C，60.25；H，6.12；N，10.11。实施例1074-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(406mg，1.07mmol)、4-[(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(373mg，1.07mmol)、EDC·HCl(308mg，1.61mmol)和DMAP(197mg，1.61mmol)在DMF(6ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(50/1)]，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(560mg，74％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(tt，J＝7.1，7.1Hz，3H)，2.04-2.84(m，13H)，3.12和3.18(各为s，1H，酰胺异构体)，3.57(d，J＝4.4Hz，1H)，3.66和3.68(各为s，3H，酰胺异构体)，3.68-3.87(m，3H)，4.05-4.41(m，2H)，4.87-4.96(m，1H)，6.76-6.98(m，6H)，7.20-7.33(m，3H)，7.46(d，J＝8.1Hz，1H)，7.67和7.71(各为s，1H，酰胺异构体)，7.78和7.81(各为s，1H，酰胺异构体)，7.95(d，J＝8.3Hz，1H)，8.09(d，J＝8.1Hz，1H)。对于盐酸盐为浅棕色无定形固体。IR(KBr)3384，2978，1745，1340，1120 cm-1；MS(FAB)m/z 708(M++1)，710(M++3)；C35H42BrN5O6·HCl·2.5H2O的分析计算值C，53.20；H，6.12；N，8.86。实测值C，52.98；H，5.79；N，8.66。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-苯氧基-(2S)-吡咯烷基]甲基-1-哌嗪基乙酸乙酯(330mg，0.466mmol)的THF(3.7ml)溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.7ml)。于室温下搅拌20小时后，用1N HCl中和该混合物并用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。通过加入乙醚研磨残留物，得到115(217mg，68％)，为白色粉末。MW 680.59 IR(KBr)3315，3095，2941，1631，1529，1435 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75(m，1H)，2.18和2.23(各为s，2H，酰胺异构体)，2.30-2.78(m，9H)，3.15(2，2H)，3.47(m，1H)，3.58(s，2H)，3.60-3.82(m，3H)，3.84(m，3H)，3.93(m，1H)，4.26(br，1H)，5.08(m，1H)，6.75(d，J＝7.8Hz，1H)，6.98(m，5H)，7.30(m，3H)，7.60(dd，J＝8.1，2.2Hz，1H)，7.94(m，2H)，8.75(s，1H)，8.93(s，1H)；MS(FAB)m/z680(M++1)，82(M++3)。C33H38BrN5O6·0.2EtOH·2H2O的分析计算值C，55.27；H，6.00；N，9.65。实测值C，55.32；H，5.56；N，9.25。实施例1084-[(4S)-(4-羧基苯氧基)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-羟基-(2S)-吡咯烷基甲酸甲酯(10.4g，0.04mol)和咪唑(8.66g，0.13mol)的DMF(40m)的搅拌溶液中加入TBS-Cl(7.03g，0.05mol)，于60℃将该反应混合物搅拌3小时。冷却至室温后，用盐水稀释该混合物，用乙醚提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-(2S)-吡咯烷基甲酸甲酯(15.0g，98％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ0.06(s，6H)，0.87(s，9H)，1.41和1.46(各为s，9H)，1.99-2.03(m，1H)，2.16-2.18(m，1H)，3.31-3.42(m，1H)，3.56-3.63(m，1H)，3.73和3.74(各为s，3H)，4.31-4.42(m，2H)；MS(ESI)m/z360(M++1)。
向1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-(2S)-吡咯烷基甲酸甲酯(15.0g，0.04mol)的THF(60ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(60ml)，于60℃将反应混合物搅拌2小时。冷却至室温后，将该混合物浓缩至小体积，用1N HCl酸化，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发，得到1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-(2S)-吡咯烷基甲酸(12.8g，89％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ0.07和0.08(各为s，6H)，0.87(s，9H)，1.49(s，9H)，2.06-2.11(m，1H)，2.41-244(m，1H)，3.40-3.59(m，2H)，4.36-4.50(m，2H)；MS(ESI)m/z346(M++1)。
向1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-(2S)-吡咯烷基甲酸(12.8g，0.04mol)的THF(150ml)的冷(0℃)的搅拌溶液中滴加入BH3·DMS(5.30ml.0.06mol)，将该反应混合物于室温下搅拌过夜。通过加入饱和氯化铵猝灭反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲苯-丙酮(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-(2S)-脯氨醇(10.5g，85％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ0.06(s，6H)，0.87(s，9H)，1.47(s，9H)，1.58-1.63(m，1H)，1.93-1.98(m，1H)，3.32-344(m，2H)，3.51-3.57(m，1H)，3.67-3.71(m，1H)，4.13-4.15(m，1H)，4.27(m，1H)，4.87-4.89(m，1H)。
向4-羟基苯甲酸甲酯(4.81g，0.03mol)、1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-(2S)-脯氨醇(10.5g，0.03mol)和三苯膦(9.96g，0.04mol)的THF(160ml)的冷(0℃)的搅拌溶液中滴加入DIAD(7.48ml.0.04mol)，将该反应混合物回流加热7小时，冷却至室温后，蒸发该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(6∶1，v/v)洗脱，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(9.58g，65％)，为白色固体。mp 86-88℃；1H-NMR(CDCl3)δ0.08(s，6H)，0.88(s，9H)，1.46(s，9H)，2.04-2.15(m，2H)，3.29-3.48(m，2H)，3.88(s，3H)，4.06-4.30(m，3H)，4.46-4.51(m，1H)，6.91-6.93(m，2H)，7.96-7.98(m，2H)；MS(ESI)m/z466(M++1)。
向4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.49g，3.20mmol)的THF(15ml)的冷(0℃)的搅拌溶液中加入TBAF(6.40ml，6.40mmol，1M THF的溶液)，将该反应混合物于室温下搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲苯-丙酮(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-羟基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.05g，93％)，为白色固体。mp 103-105℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.11-2.28(m，2H)，3.49-3.60(m，2H)，3.88(s，3H)，4.15-4.34(m，3H)，4.53-4.57(m，1H)，6.91(d，J＝8.6Hz，2H)，7.97(d，J＝8.6Hz，2H)；MS(ESI)m/z352(M++1)。
向4-羟基苯甲酸甲酯(0.56g，3.68mmol)、4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-羟基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.30g，3.70mmol)和三苯膦(1.16g，4.42mmol)的THF(20ml)的冷(0℃)的搅拌溶液中滴加DIAD(0.87ml，4.42mmol)，将该反应混合物于室温下搅拌3小时。蒸发该混合物，残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.80g，q.y.)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.49(s，9H)，2.3 1-2.38(m，1H)，2.45-2.49(m，1H)，3.64-3.77(m，2H)，3.88(s，6H)，4.07-4.15(m，1H)，4.33-4.44(m，2H)，4.95-5.01(m，1H)，6.85(d，J＝8.8Hz，2H)，6.94(br s，2H)，7.97(d，J＝8.8Hz，4H)；MS(ESI)m/z486(M++1)。
向4-[1-(叔丁氧基羰基)-(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.80g，3.71mmol)的二氯甲烷(15ml)的搅拌溶液中加入TFA(15ml)，于室温下将该反应混合物搅拌1.5小时。真空浓缩该混合物，通过饱和碳酸氢钠使呈碱性，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经碳酸钾干燥并蒸发，得到4-[(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.50g，q.y.)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.87-1.92(m，1H)，2.41-2.48(m，1H)，3.18-3.23(m，1H)，3.34-3.37(m，1H)，3.60-3.66(m，1H)，3.88(s，3H)，3.89(s，3H)，4.04-4.13(m，2H)，4.94-5.00(m，1H)，6.87-6.93(m，4H)，7.96-8.00(m，4H)；MS(ESI)m/z 386(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(400mg，1.27mmol)、4-[(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(491mg，1.27mmol)、EDC·HCl(293mg，1.53mmol)、HOBt(207mg，1.53mmol)和三乙胺(215μl，1.54mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(60∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(532mg，61％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.26-2.49(多个s和m，共5H)，3.56-3.93(多个s和m，共13H)，4.07-4.59(多个m，共3H)，5.01(m，1H)，6.69-6.94(m，7H)，7.09-7.13(m，1H)，7.20-7.31(m，3H)，7.52-7.57(m，1H)，7.92-8.00(m，4H)，8.06-8.09(m，1H)；MS(ESI)m/z 682(M++1)。
向4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(532mg，0.78mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集生成的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-乙醚中重结晶，得到116(125mg，25％)，为淡黄色结晶粉末。MW 653.68 mp 154-159℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，2.38-2.49(m，2H)，3.63(s，2H)，3.67-3.88(多个s和m，共4H)，4.01-4.06和4.15-4.19(各为m，共2H)，4.27-4.31和4.38-4.42(各为m，共2H)，5.18-5.25(m，1H)，6.72-6.77(m，1H)，6.85-7.16(多个m，共8H)，7.78-7.89(m，5H)，7.99-8.02(m，1H)，8.46(s，1H)，8.57(s，1H)，12.65(br s，2H)；MS(ESI)m/z 654(M++1)；C36H35N3O9·1/2H2O的分析计算值C，65.25；H，5.48；N，6.34。实测值C，C，65.29；H，5.54；N，6.20。实施例1094-[(4S)-(4-羧基苯氧基)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(420mg，1.25mmol)、4-[(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(483mg，1.25mmol)、EDC·HCl(288mg，1.50mmol)、HOBt(203mg，1.50mmol)和三乙胺(210μl，1.51mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(488mg，55％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.28-2.51(m，2H)，3.62-3.94(多个s和m，共13H)，4.07-4.62(多个m，共3H)，4.99-5.03(m，1H)，6.78-6.99(m，7H)，7.23-7.34(m，2H)，7.42-7.52(m，2H)，7.92-8.01(m，5H)，8.17-8.20(m，1H)；MS(ESI)m/z 702(M++1)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(488mg，0.70mmol)的THF(5ml)搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热3小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集生成的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-乙醚中重结晶，得到117(137mg，29％)，为白色结晶粉末。MW674.10 mp 150-153℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ4.17-4.21(各为m，共2H)，4.30-4.34和4.40-4.45(各为m，共2H)，5.20-5.27(m，1H)，6.77-6.81(m，1H)，6.89-6.92(m，1H)，7.01-7.08(m，5H)，7.27-7.3 1(m，1H)，7.43-7.46(m，1H)，7.86-7.92(m，4H)，7.97-8.00(m，1H)，8.10-8.12(m，1H)，8.91(s，1H)，8.96(s，1H)，12.65(br s，2H)；MS(ESI)m/z 674(M++1)。C35H32ClN3O9·1/4H2O的分析计算值C，61.95；H，4.83；N，6.19；Cl，5.22。实测值C，61.77；H，4.86；N，6.13；Cl，5.49。实施例1104-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-(4-羧基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(464mg，1.22mmol)、4-[(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(472mg，1.22mmol)、EDC·HCl(282mg，1.47mmol)、HOBt(200mg，1.48mmol)和三乙胺(205μl，1.47mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(60∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(379mg，41％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.28-2.51(m，2H)，3.59-3.95(多个s和m，共13H)，4.07-4.62(多个m，共3H)，4.99-5.03(m，1H)，6.79-6.95(m，7H)，7.27-7.36(m，3H)，7.49-7.51(m，1H)，7.93-8.01(m，5H)，8.11-8.14(m，1H)；MS(ESI)m/z 747(M++1)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(379mg，0.51mmol)的THF(5ml)搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集生成的沉淀。粗品固体经制备性TLC纯化，得到118(51mg，14％)，为淡黄色无定形固体。MW 718.551H-NMR(DMSO-d6)δ2.20-2.40(m，2H)，3.65-3.89(多个m，共6H)，4.02-4.63(多个m，共4H)，5.19-5.26(m，1H)，6.74-7.06(m，7H)，7.30-7.34(m，1H)，7.59-7.61(m，1H)，7.83-7.96(m，6H)，8.74(s，1H)，8.93(s，1H)；C35H32BrN3O9·2H2O的分析计算值C，55.71；H，4.81；N，5.57。实测值C，55.92；H，4.80；N，5.30。实施例1114-[(4S)-(4-羧基苯氧基)-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(328mg，1.15mmol)、4-[(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(444mg，1.15mmol)、EDC·HCl(265mg，1.38mmol)、HOBt(187mg，1.38mmol)和三乙胺(195μl，1.40mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物。经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(60∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(332mg，44％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.13(s，3H)，2.24-2.48(m，2H)，3.52-3.90(多个s和m，共10H)，4.05-4.58(多个m，共3H)，5.01(m，1H)，6.78-6.90(m，4H)，6.98-7.20(m，8H)，7.51-7.56(m，2H)，7.90-8.00(m，4H)；MS(ESI)m/z652(M++1)。
向4-[(4S)-(4-甲氧基羰基苯氧基)-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(332mg，0.5 1mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物在回流下加热3小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集生成的沉淀。粗品固体经从甲醇-氯仿-乙醚中重结晶，得到119(118mg，37％)，为白色结晶粉末。MW 623.65 mp 157-160℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.20-2.25(多个s和m，共4H)，2.39-2.47(m，1H)，3.64(s，2H)，3.68-3.89(m，1H)，4.02-4.08和4.16-4.20(各为m，共2H)，4.29-4.33和4.39-4.43(各为m，共2H)，5.20-5.26(m，1H)，6.92-6.96(m，1H)，7.02-7.08(m，4H)，7.12-7.18(m，4H)，7.39-7.41(m，2H)，7.84-7.92(m，6H)，9.01(s，1H)，12.65(br s，2H)；MS(ESI)m/z 624(M++1)。C35H33N3O8·1H2O的分析计算值C，65.51；H，5.50；N，6.55。实测值C，65.48；H，5.36；N，6.52。实施例1124-[4-(2，4-二氟苯氧基)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基苯甲酸
向1-(叔丁氧基羰基)-4-羟基脯氨酸甲酯(4.0g，16.3mmol)、三苯膦(5.14g，19.6mmol)和2，4-二氟苯酚(2.55g，19.6mmol)的THF(50ml)的搅拌溶液中加入DIAD(3.9ml，19.6mmol)，将该混合物回流加热3小时。冷却至室温后，真空浓缩该混合物，残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)洗脱，得到1-(叔丁氧基羰基)-4-(2，4-二氟苯氧基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(5.82g，定量)，为黄色油状物。
向1-(叔丁氧基羰基)-4-(2，4-二氟苯氧基)吡咯烷-2-甲酸甲酯(5.82g，16.3mmol)的THF(130ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(130ml，32.6mmol)。将得到的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入1N HCl(100ml)中，用氯仿(2×200ml)提取。经硫酸镁干燥提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)洗脱，得到1-(叔丁氧基羰基)-4-(2，4-二氟苯氧基)吡咯烷-2-甲酸(2.55g，46％)，为无色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.42-1.47(m，9H)，2.29-2.74(多个m，2H)，3.66-3.71(m，2H)，4.46-4.51(m，1H)，4.83(m，1H)，6.73-6.95(m，3H)。
向1-(叔丁氧基羰基)-4-(2，4-二氟苯氧基)吡咯烷-2-甲酸(2.55g，7.43mmol)的THF(50ml)的搅拌溶液中加入BH3·DMS(452μl，7.43mmol)。将该混合物回流加热过夜。冷却至室温后，真空浓缩该混合物，通过加入水(100ml)猝灭。用氯仿(2×200ml)提取该混合物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)-4-(2，4-二氟苯氧基)-2-吡咯烷基甲醇(1.76g，72％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，2.28-2.36(m，2H)，3.58-4.99(多个m，8H)，6.74-6.90(m，3H)。
向1-(叔丁氧基羰基)-4-(2，4-二氟苯氧基)-2-吡咯烷基甲醇(500mg，1.52mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(277mg，1.82mmol)和三苯膦(477mg，1.82mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入DIAD(358μl，1.82mmol)，将该混合物回流加热5小时。冷却至室温后，真空浓缩该混合物。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-4-(2，4-二氟苯氧基)-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(529mg，75％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.20-2.47(m，2H)，3.64(m，2H)，3.86(s，3H)，4.07-4.43(m，3H)，4.86(m，1H)，6.74-6.87(m，3H)，6.94(d，2H，J＝8.5Hz)，7.95(d，2H，J＝8.5Hz)。
向4-[1-(叔丁氧基羰基)-4-(2，4-二氟苯氧基)-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(529mg，1.15mmol)的二氯甲烷(5ml)的搅拌溶液中加入TFA(5ml)。将该混合物搅拌过夜。真空浓缩该混合物，通过加入饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性。用氯仿(2×100ml)提取该混合物。经碳酸钾干燥提取物并蒸发，得到4-[4-(2，4-二氟苯氧基)-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(385mg，92％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.89-1.95(m，1H)，2.28-2.35(m，1H)，3.09(dd，J＝12.5，4.9Hz，1H)，3.33(d，J＝12.5Hz，1H)，3.60(m，1H)，3.86(s，3H)，4.10(d，J＝5.6Hz，2H)，4.84(m，1H)，6.73-6.89(m，3H)，6.91(d，J＝8.5Hz，2H)，7.96(d，J＝8.5Hz，2H)。
将4-[4-(2，4-二氟苯氧基)-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(380mg，1.05mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(329mg，1.05mmol)、EDC·HCl(302mg，1.58mmol)和催化量的HOBt和DMAP在DMF(10ml)中的混合物搅拌3天。用乙酸乙酯(200ml)稀释该混合物，用盐水(2×200ml)洗涤。除去溶剂后，残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)至氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到4-[4-(2，4-二氟苯氧基)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基苯甲酸甲酯(693mg，定量)。1H-NMR(CDCl3)δ2.16-2.53(m，5H)，3.61-4.93(多个m，14H)，6.48-8.12(多个m，16H)。向4-[4-(2，4-二氟苯氧基)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基苯甲酸甲酯(693mg，1.05mmol)的THF(8ml)搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(8.4ml，2.10mmol)，将该混合物搅拌过夜。将该混合物倾入1NHCl(200ml)中，抽滤收集生成的沉淀。固体经硅胶层析，用氯仿-甲醇(50∶1-10∶1)作为洗脱剂，得到120(323mg，48％)，为无色无定形固体。MW 645.651H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.35(m，2H)，3.33-5.18(多个m，11H)，6.75(dd，1H，J＝8.3，1.7Hz)，6.87-7.30(多个m，8H)，7.79(d，1H，J＝8.3Hz)，7.85-7.90(m，3H)，8.01(d，1H，J＝8.3Hz)，8.49(s，1H)，8.57(s，1H)；MS(FAB)m/z646(M++1)。实施例1134-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(6-喹啉基氧基-2S-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向(反式-1-叔丁氧基羰基-4-羟基-2-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(1.0g，3.0mmol)、6-羟基喹啉(435mg，3.0mmol)和三苯膦(943mg，3.6mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入DIAD(727mg，3.6mmol)。将该反应混合物于室温下搅拌18小时。真空浓缩该混合物，残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶2，v/v)洗脱。于0℃，向该产物的二氯甲烷(6.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(6.0ml)。于室温下搅拌反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(1％-10％，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4S)-[(6-喹啉基氧基-2S-吡咯烷基)]甲氧基苯甲酸甲酯(900mg，82％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.92-2.10(m，1H)，2.45-2.55(m，1H)，3.20-3.30(m，1H)，3.38-3.50(m，1H)，3.60-3.70(m，1H)，3.88(s，3H)，4.05-4.18(m，2H)，5.03(m，1H)，6.91(d，J＝8.5Hz，1H)，7.02(d，J＝2.7Hz，1H)，7.35-7.38(m，2H)，7.96(d，J＝8.5Hz，1H)，8.00-8.05(m，2H)，8.76(d，J＝3.2Hz，1H)。
于0℃，向4-(4S-(6-喹啉基氧基-2S-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(300mg，0.79mmo1)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(264mg，0.79mmol)、HOBt(107mg，0.79mmol)和三乙胺(330m1，2.37mmol)的THF (10.0ml)和MeCN(10.0ml)中的搅拌溶液中加入EDC·HCl(228mg，1.2mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯至乙醇-乙酸乙酯(10％，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(6-喹啉基氧基-(2 S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(520mg，95％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.30-2.60(m，3H)，3.64(s，2H)，3.73(s，3H)，3.80-3.95(m，1H)，3.87(s，3H)，4.15-4.30(m，1H)，4.50-4.70(m，2H)，5.11(br s，1H)，6.81-7.01(m，6H)，7.26-7.39(m，6H)，7.93-8.03(m，5H)，8.19(d，J＝8.3Hz，1H)，8.80(s，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(6-喹啉基氧基-2S-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(520mg，0.75mmol)的THF(10.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.5ml，1.5mmol)。将该混合物于60℃搅拌18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到121(450mg，88％)，为白色结晶固体。681.13 mp 129-133℃；IR(KBr)3332，1704，1604，1531，1419，1222，1166 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25-2.55(m，2H)，3.67(s，2H)，3.82(s，3H)，3.81-3.92(m，1H)，4.02-4.15(m，2H)，4.40-4.50(m，2H)，5.25-5.40(m，1H)，5.33-7.07(m，5H)，7.26-7.49(m，5H)，7.83-8.23(m，6H)，8.73-8.74(m，1H)，8.90(s，1H)，8.94(s，1H)；MS(FAB)m/z681(M++1)；C37H33N4O7Cl·0.5H2O的分析计算值C，64.39；H，4.97；N，8.12。实测值C，64.22；H，4.90；N，7.96。实施例144-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-(6-喹啉基氧基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(4S-(6-喹啉基氧基-2S-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(300mg，0.79mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(299mg，0.79mmol)、HOBt(107mg，0.79mmol)和三乙胺(330ml，2.37mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(228mg，1.2mmol)。于室温下搅拌该反应混合物16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯至乙醇-乙酸乙酯(10％，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4S)-(6-喹啉基氧基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(530mg，91％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.30-2.62(m，3H)，3.65(s，2H)，3.75(s，3H)，3.80-3.95(m，1H)，3.93(s，3H)，4.10-4.30(m，1H)，4.50-4.70(m，2H)，5.11(br s，1H)，6.82-6.98(m，6H)，7.15-7.39(m，5H)，7.52(d，J＝8.0Hz，1H)，7.93-8.03(m，5H)，8.14(d，J＝8.3Hz，1H)，8.80(s，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(6-喹啉基氧基-2S-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(530mg，0.72mmol)的THF(10.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.4ml，1.4mmol)。将该混合物于70℃搅拌24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到122(460mg，88％)，为白色结晶固体。MW 725.59 mp 149-153℃；IR (KBr)3332，1704，1604，1527，1222，1164 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.28-2.58(m，2H)，3.67(s，2H)，3.82(s，3H)，3.85-3.90(m，1H)，4.05-4.15(m，2H)，4.40-4.50(m，2H)，5.20-5.32(m，1H)，6.77-7.07(m，5H)，7.31-7.61(m，5H)，7.83-7.97(m，5H)，8.21-8.22(m，1H)，8.73-8.74(m，2H)，8.92(s，1H)；MS(FAB)m/z725(M+)，727(M++2)；C37H33N4O6Br·0.5H2O的分析计算值C，60.50；H，4.67；N，7.63；Br，10.88。实测值C，60.51；H，4.60；N，7.52；Br，11.06。实施例1154-[(2S，4S)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温、氮气氛下，向(2S，4R)-1-叔丁氧基羰基-4-羟基-2-吡咯烷基甲酸甲酯(4.22g，17.2mmol)、2-萘酚(2.73g，18.9mmol)和三苯膦(4.96g，18.9mmol)的THF(80ml)的搅拌混合物中加入DIAD(3.72ml.18.9mmol)。搅拌过夜后，真空浓缩该混合物。残留物经硅胶层析[600g，氯仿/乙酸乙酯(10/1)]，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲酸甲酯(5.37g)，其无需进一步纯化而使用。
于室温下，向(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲酸甲酯(5.37g)的THF(116ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(116ml，29.0mmol)。将得到的混合物搅拌过夜。除去溶剂后，通过加入1N HCl酸化该混合物，用氯仿提取。用盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物从正己烷-氯仿中重结晶，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲酸(4.44g，85％(两步))，为白色粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37和1.41(s，9H，酰胺异构体)，2.26(d，J＝13.9Hz，1H)，2.65(m，1H)，3.47(d，J＝11.5Hz，1H)，3.81(m，1H)，4.30(m，1H)，5.14(m，1H)，7.02-7.86(m，7H)。
于0℃，向(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲酸(1.12g，3.13mmol)的THF(30ml)搅拌溶液中加入BH3·DMS(0.63ml，6.3mmol)。将该混合物立即升温至室温，然后于50加热1.5小时。冷却至室温后，于0℃，通过加入水猝灭该混合物，用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(50/1)]，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲醇(1.10g，100％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.45(m，1H)，3.58-4.80(m，4H)，5.01(br，1H)，7.04-7.99(m，7H)。
于室温、氮气氛下，向(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲醇(640mg，1.86mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(283mg，1.86mmol)和三苯膦(488mg，1.86mmol)的THF(18ml)的搅拌混合物中加入DIAD(0.37ml.1.86mmol)。将该混合物搅拌过夜。除去溶剂后，得到的残留物经硅胶层析[100g，正己烷/乙酸乙酯(2/1)]，得到4-[(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(830mg，93％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.50(d，J＝8.3Hz，9H)，2.34(m，1H)，2.53(d，J＝14.2Hz，1H)，3.72-3.85(m，1H)，3.86和3.87(s，3H，酰胺异构体)，4.17(m，1H)，4.26-4.52(m，2H)，5.06(br，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，1H)，6.94(d，J＝8.8Hz，2H)，7.04(br，2H)，7.33(t，J＝7.3Hz，1H)，7.42(t，J＝7.3Hz，1H)，7.64-8.02(m，5H)。
于室温下，向4-[(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(870mg，1.74mmol)的二氯甲烷(24ml)的搅拌溶液中加入TFA(6ml)。将该混合物搅拌过夜。真空浓缩该混合物，用二氯甲烷稀释残留物，通过加入1N氢氧化钠使呈碱性，将其用二氯甲烷提取。用盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥并浓缩。残留物经硅胶层析[100g，正己烷/乙酸乙酯(2/1)]，得到4-[(2S，4S)-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(750mg，100％)，为黑色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.99(dd，J＝14.2，5.6Hz，1H)，2.48(m，1H)，3.22(dd，J＝12.2，4.6Hz，1H)，3.43(d，J＝12.5Hz，1H)，3.67(m，1H)，3.86和3.87(s，3H，酰胺异构体)，4.11(m，2H)，5.04(m，1H)，6.83(d，J＝8.5Hz，1H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，7.07(d，J＝2.0Hz，1H)，7.12(d，J＝9.0Hz，1H)，7.33(dt，J＝8.1，1.2Hz，1H)，7.44(dt，J＝6.8，1.2Hz，1H)，7.70(d，J＝8.1Hz，1H)，7.75(dd，J＝9.0，5.1Hz，2H)，7.90(d，J＝8.5Hz，1H)，7.96(dd，J＝6.8，2.0Hz，2H)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(333mg，0.106mmol)、4-[(2S，4S)-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(400mg，106mmol)、EDC·HCl(305mg，1.59mmol)和DMAP(194mg，1.59mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌3天。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取，用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[100g，正己烷/乙酸乙酯(1/1)氯仿/甲醇(50/1)]，得到4-[(2S，4S)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(520mg，73％)，为浅棕色无定形物质。1H-NMR(CDCl3)δ2.28(s，3H)，2.29(m，1H)，2.55(d，J＝14.2Hz，1H)，3.60(d，J＝3.4Hz，2H)，3.66(d，J＝3.7Hz，3H)，3.68-4.00(m，5H)，4.05-4.67(m，3H)，5.09(br，1H)，6.61(s，1H)，6.77(m，2H)，6.87(d，J＝8.8Hz，1H)，6.94-7.54(m，8H)，7.68-8.09(m，8H)；MS(ESI)m/z 674(M++1)。
向4-[(2S，4S)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(415mg，0.616mmol)的THF(4.9ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(4.9ml)。于室温下搅拌3天后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到123(180mg，44％)，为无色无定形物质。MW 659.73 IR(KBr)3354，2937，1685，1601，1533，1255 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，2.25-2.43(m，2H)，3.65(s，2H)，3.81(s，3H)，3.83(m，1H)，4.05-4.70(m，4H)，5.21-5.33(br，1H)，6.76(d，J＝7.3Hz，1H)，6.86-7.35(m，9H)，7.44(t，J＝7.3Hz，1H)，7.76-7.89(m，6H)，8.01(d，J＝8.3Hz，1H)，8.48(s，1H)，8.56(s，1H)；MS(FAB)m/z660(M++1)。实施例1164-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(310mg，0.93mmol)、4-[(2S，4S)-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(350mg，0.93mmol)、EDC·HCl(267mg，1.40mmol)和DMAP(171mg，1.40mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌3天。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[100g，正己烷/乙酸乙酯(1/1)氯仿/甲醇(50/1)]，得到4-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(450mg，68％)，为浅棕色无定形物质。1H-NMR(CDCl3)δ2.32(m，1H)，2.58(d，J＝14.5Hz，1H)，3.63(d，J＝2.7Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.86(s，3H)，3.84-3.95(m，2H)，4.15-4.64(m，4H)，5.11(br，1H)，6.79-7.06(m，7H)，7.21-7.46(m，7H)，7.66-7.77(m，3H)，7.92(d，J＝8.8Hz，1H)，7.97(m，1H)，8.17(d，J＝8.4Hz，1H)；MS(ESI)m/z694(M++1)，696(M++3)。
向4-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(381mg，0.535mmol)的THF(4.3ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(4.3ml)。于室温下搅拌3天后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到124(140mg，39％)，为无色无定形物质。MW 680.15 IR(KBr)3323，2935，1704，1601，1529，1529，1508 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.27-2.49(m，2H)，3.65(s，2H)，3.81(s，3H)，3.83(m，1H)，4.05-4.71(m，4H)，5.30(br，1H)，6.77(d，J＝7.8Hz，1H)，6.87-7.16(m，4H)，7.14(dd，J＝8.8，2.2Hz，1H)，7.27(t，J＝7.3Hz，1H)，7.29-7.46(m，4H)，7.76-7.86(m，5H)，7.96(d，J＝8.3Hz，1H)，8.08(dd，J＝8.3，1.2Hz，1H)，8.90(s，1H)，8.93(s，1H)；MS(FAB)m/z 680(M++1)，682(M++3)；C38H34ClN3O7·1H2O的分析计算值C，65.37；H，5.20；N，6.02。实测值C，65.43；H，5.11；N，5.93。实施例1172-[(2S，4S)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基-5-吡啶甲酸
于室温、氮气氛下，向(2S，4R)-1-叔丁氧基羰基-4-羟基-2-吡咯烷基甲酸甲酯(4.22g，17.2mmol)、2-萘酚(2.73g，18.9mmol)和三苯膦(4.96g，18.9mmol)的THF(80ml)的搅拌混合物中加入DIAD(3.72ml.18.9mmol)。搅拌过夜后，真空浓缩该混合物。残留物经硅胶层析[600g，氯仿/乙酸乙酯(10/1)]，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲酸甲酯(5.37g)，其无需进一步纯化而用于下一步反应中。
于室温下，向(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲酸甲酯(5.37g)的THF(116ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(116ml，29.0mmol)。将得到的混合物搅拌过夜。除去溶剂后，通过加入1N HCl酸化该混合物，用氯仿提取。用盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物从正己烷-氯仿中重结晶，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲酸(4.44g，85％(两步))，为白色粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37和1.41(s，9H，酰胺异构体)，2.26(d，J＝13.9Hz，1H)，2.65(m，1H)，3.47(d，J＝11.5Hz，1H)，3.81(m，1H)，4.30(m，1H)，5.14(m，1H)，7.02-7.86(m，7H)。
于0℃，向(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲酸(1.12g，3.13mmol)的THF(30ml)搅拌溶液中加入BH3·DMS(0.63ml，6.3mmol)。将该混合物立即升温至室温，然后于50加热1.5小时。冷却至室温后，于0℃，通过加入水猝灭该混合物。用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(50/1)]，得到(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲醇(1.10g，100％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.45(m，1H)，3.58-4.80(m，4H)，5.01(br，1H)，7.04-7.99(m，7H)。
于室温、氮气氛下，向(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基甲醇(484mg，1.41mmol)、2-羟基-5-吡啶甲酸甲酯(216mg，1.41mmol)和三苯膦(370mg，1.41mmol)的THF(15ml)的搅拌混合物中加入DIAD(0.28ml，1.41mmol)。将该混合物搅拌过夜。除去溶剂后，得到的残留物经硅胶层析[50g，正己烷/乙酸乙酯(2/1)]，得到2-[(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基吡啶-5-甲酸甲酯(170mg，25％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，2.37(m，1H)，2.46(d，J＝14.2Hz，1H)，3.71-4.00(m，2H)，3.89(s，3H)，4.30-4.56(m，2H)，4.74(dd，J＝9.8，4.6Hz，1H)，5.06(br，1H)，6.70(d，J＝8.8Hz，2H)，7.05-7.09(m，2H)，7.33(t，J＝6.9Hz，1H)，7.42(t，J＝6.9Hz，1H)，7.67-7.75(m，3H)，8.09(d，J＝8.8Hz，1H)，8.77(d，J＝2.2Hz，1H)。
于室温下，向5-羧甲基-2-[(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基吡啶(170mg，0.36mmol)的二氯甲烷(5ml)的搅拌溶液中加入TFA(2ml)。搅拌2小时后，真空浓缩该混合物，用二氯甲烷稀释之，通过加入1N氢氧化钠碱化。用二氯甲烷提取合并的反应混合物。用盐水洗涤有机层，经硫酸钠干燥并浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到2-[(2S，4S)-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基吡啶-5-甲酸甲酯(107mg，80％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.95(m，1H)，2.27(br，1H)，2.46(m，1H)，3.19(dd，J＝12.2，4.9Hz，1H)，3.41(d，J＝12.2Hz，1H)，3.65(m，1H)，3.89(s，3H)，4.58(m，2H)，5.00(br，1H)，6.77(d，J＝8.8Hz，1H)，7.06(br，1H)，7.11(dd，J＝8.8，2.7Hz，1H)，7.31-7.45(m，2H)，7.69-7.76(m，3H)，8.13(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，8.78(d，J＝2.2Hz，1H)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(89mg，0.283mmol)、2-[(2S，4S)-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基吡啶-5-甲酸甲酯(107mg，0.78mmol)、EDC·HCl(81mg，0.425mmol)和DMAP(52mg，0.425mmol)在DMF(3ml)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取，用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到2-[(2S，4S)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基-5-吡啶甲酸甲酯(193mg，100％)，为无色无定形物质。1H-NMR(CDCl3)δ2.27(d，J＝3.2Hz，3H)，2.30(m，1H)，2.49(dd，J＝14.2，2.0Hz，1H)，3.60(d，J＝3.9Hz，1H)，3.67(d，J＝5.9Hz，3H)，3.81(s，1H)，3.85(s，1H)，3.88和3.91(s，3H，酰胺异构体)，3.95(m，1H)，4.02-5.09(m，4H)，6.67(d，J＝8.8Hz，1H)，6.73-7.13(m，3H)，7.20-7.45(m，7H)，7.53(t，J＝7.8Hz，1H)，7.67-7.77(m，3H)，8.02-8.84(m，3H)。对于盐酸盐一种浅棕色无定形物质。IR(KBr)3346，2951，1720，1601，1533，1281 cm-1；MS(FAB)m/z 675 (M++1)。
向2-[(2S，4S)-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(2-萘氧基)-2-吡咯烷基]甲氧基-5-吡啶甲酸甲酯(158mg，0.23mmol)的THF(1.8ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(1.8ml)。于室温下搅拌22小时后，用1N HCl中和该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(5/1)]纯化，得到125(51mg，34％)，为无色无定形固体。MW 660.72 IR(KBr)3354，2956，1601，1533，1255，1022 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，3.30-5.32(m，13H)，6.72-8.82(m，19H)；MS(FAB)m/z 661(M++1)；C38H36N4O7·0.5EtOH·1H2O的分析计算值C，66.75；H，5.89；N，7.98。实测值C，66.39；H，5.55；N，7.66。实施例1184-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于-78℃，向苄基-(S)-缩水甘油醚(5.0g，30.5mmol)的THF(100ml)的搅拌溶液中加入氯化烯丙基镁(1.0M在乙醚中，30.5ml.30.5mmol)，搅拌下使得到的混合物逐渐温热至室温。将该混合物倾入水中，真空浓缩，然后用氯仿提取。经无水硫酸钠干燥有机层并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(5∶1)作为洗脱剂，得到1-苄氧基-2-(R)-羟基-5-己烯(2.18g，35％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.52-1.60(m，2H)，2.11-2.25(m，2H)，2.34(d，J＝3.2Hz，1H)，3.35(dd，J＝9.6，8.0Hz，1H)，3.52(dd，J＝9.6，3.2Hz，1H)，3.84-3.86(m，1H)，4.57(s，2H)，4.96-5.07(多个m，2H)，5.78-5.88(m，1H)，7.29-7.38(m，5H)；MS(ESI)m/z224(M++NH4+)。
于室温下，向1-苄氧基-2-(R)-羟基-5-己烯(2.18g，10.5mmol)、三苯膦(3.32g，12.7mmol)和苯邻二甲酰亚胺(1.86g，12.7mmol)的搅拌溶液中加入偶氮二羧酸二异丙酯(2.62ml，12.7mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌过夜。真空浓缩该混合物，用乙酸乙酯提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(5∶1)作为洗脱剂，得到1-苄氧基-2-(S)-苯邻二甲酰亚氨基-5-己烯(2.95g，83％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.76-1.84(m，2H)，2.06(dd，J＝14.4，6.8Hz，2H)，2.12-2.22(m，1H)，3.69(dd，J＝10.0，5.6Hz，1H)，4.00(t，J＝9.6Hz，1H)，4.46(d，J＝12.0Hz，1H)，4.53(d，J＝12.0Hz，1H)，4.51-4.58(m，1H)，4.91-4.99(多个m，2H)，5.72-5.79(m，1H)，7.21-7.26(m，5H)，7.71-7.83(多个m，2H)MS(ESI)m/z 336(M++H)。
于室温下，向1-苄氧基-2-(S)-苯邻二甲酰亚氨基-5-己烯(2.95g，8.80mmol)的乙醇(30ml)的搅拌溶液中加入肼水合物(80％在水中，460ml，11.4mmol)，搅拌下，将得到的混合物在回流下加热7.5小时。过滤该溶液，真空浓缩滤液。将残留物倾入碳酸氢钠水溶液中，用氯仿提取。经无水硫酸钠干燥有机层，然后真空浓缩，得到2-(S)-氨基-1-苄氧基-5-己烯(1.90mg，定量)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.37-1.55(多个m，4H)，2.08-2.19(m，2H)，2.99-3.03(m，1H)，3.25(dd，J＝9.2，7.6Hz，1H)，3.45(dd，J＝9.2，4.0Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.94-5.06(多个m，2H)，5.76-5.85(m，1H)，7.27-7.37(m，5H)；MS(ESI)m/z 206(M++H)，247(M++H+CH3CN)。
于室温下，向2-(S)-氨基-1-苄氧基-5-己烯(1.89g，9.21mmol)和三乙胺(1.28ml，9.21mmol)的二氯甲烷(20ml)的搅拌溶液中加入苯甲酰氯(1.07ml，9.21mmol)，将得到的混合物搅拌23小时。将该混合物倾入水中，用二氯甲烷提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(5∶1)作为洗脱剂，得到N-[2-(S)-(1-苄氧基)-5-己烯基]苯甲酰胺(2.67g，94％)，为无色针状物。mp 78-79℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.76-1.82(m，2H)，2.11-2.17(m，2H)，3.59(brs，2H)，4.29-4.35(m，1H)，4.54(dd，J＝19.2，12.0Hz，2H)，4.96-5.05(多个m，2H)，5.78-5.89(m，1H)，6.39(d，J＝8.0Hz，1H)，7.27-7.51(m，8H)，7.74(d，J＝7.2Hz，2H)；MS(ESI)m/z 310(M++H)。
向N-[2-(S)-(1-苄氧基)-5-己烯基]苯甲酰胺(2.41g，7.79mmol)的CH3CN-H2O(3∶1，40ml)的搅拌溶液中一次性加入碘(2.97g，23.4mmol)，将得到的混合物搅拌20小时。将该混合物倾入硫代硫酸钠水溶液中并真空浓缩。然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。使残留物溶于二氯甲烷(30ml)中，加入二碳酸二叔丁酯(2.55g，11.7mmol)、三乙胺(1.63ml，11.7mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(180mg，1.47mmol)，于室温下将得到的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入水中，用二氯甲烷提取。用水洗涤有机层，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(5∶1)作为洗脱剂，得到N-Boc-2-(S)-苯甲酰氧基甲基-5-(S)-苄氧基甲基吡咯烷(1.27g，38％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.41和1.49(s，共9H)，1.85-2.00(多个m，4H)，3.33-4.59(多个m，8H)，7.26-7.32(m，5H)，7.41-7.46(m，2H)，7.54-7.57(m，1H)，8.02(d，J＝7.6Hz，2H)；MS(ESI)m/z426(M++H)，448(M++Na+)。
于室温下，向N-Boc-2-(S)-苯甲酰氧基甲基-5-(S)-苄氧基甲基吡咯烷(1.23g，2.89mmol)的甲醇(30ml)的搅拌溶液中加入氢氧化钠(1.0M在水中，3.47ml，3.47mmol)，将得到的混合物搅拌4小时。用1N HCl水溶液中和该混合物并真空浓缩。然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(3∶1)作为洗脱剂，得到N-Boc-5-(S)-羟甲基-2-(S)-苄氧基甲基吡咯烷(847mg，91％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)，1.57(brs，1H)，1.95-1.97(m，2H)，2.05-2.18(m，1H)，3.36(t，J＝8.4Hz，1H)，3.56-3.62(m，2H)，3.67-3.72(m，2H)，3.95(brs，1H)，4.03(brs，1H)，4.51(s，1H)，7.28-7.37(m，5H)；MS(FAB)m/z 322(M++H)。
于室温下，向N-Boc-2-(S)-羟基甲基-5-(S)-苄氧基甲基吡咯烷(388mg，1.21mmol)、三苯膦(380mg，1.45mmol)和4-羟基苯甲酸甲酯(220mg，1.45mmol)的搅拌溶液中加入偶氮二羧酸二异丙酯(200ml，1.45mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。真空浓缩该混合物，用乙酸乙酯提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(3∶1)作为洗脱剂，得到4-[2-(S)-(N-Boc-5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(462mg，84％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.40和1.48(s，共9H)，1.98-2.13(m，4H)，3.83和3.85(s，3H)，3.33-4.25(多个m，4H)，4.47-4.59(m，2H)，6.91-6.96(m，2H)，7.26-7.34(m，5H)，7.95-7.98(m，2H)；MS(FAB)m/z 456(M++H)，478(M++Na+)。
于室温下，向4-[2-(S)-(N-Boc-5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(446mg，0.98mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(10ml)，将得到的混合物搅拌1小时。真空浓缩该混合物，将该混合物倾入碳酸氢钠水溶液中，然后用氯仿提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩，得到4-[2-(S)-(5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(363mg，定量)，为黄色油状物。该产物不经进一步纯化而用于随后的反应。1H-NMR(CDCl3)δ1.43-1.65(m，2H)，1.93-2.07(m，3H)，3.36-3.68(多个m，4H)，3.89(s，3H)，3.86-3.93(重叠，2H)，4.55(s，2H)，6.90(d，J＝8.4Hz，2H)，7.26-7.37(m，5H)，7.97(d，J＝8.4Hz，2H)；MS(FAB)m/z 356(M++H)。
于室温下，向4-[2-(S)-(5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(115mg，0.32mmol)、4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(92.0mg，0.32mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(52.0mg，0.42mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(81.0mg，0.42mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20/1)作为洗脱剂，得到4-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(169mg，84％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)旋转异构体的混合物δ1.92-2.18(m，3H)，2.24和2.25(s，共3H)，2.20-2.31(重叠，1H)，3.39-3.70(多个m，4H)，3.87和3.89(s，共3H)，4.17和4.18(s，共2H)，4.30-4.45(多个m，2H)，4.53(s，2H)，6.43-7.13(多个m，9H)，7.20-7.36(多个m，7H)，7.58-7.99(多个m，3H)；MS(FAB)m/z，622(M++H)。
于室温下，向4-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(156mg，0.24mmol)的甲醇-THF(1∶5，12ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(1.2ml，1.20mmol)。搅拌下，将得到的混合物于80℃加热7小时。将该混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(5∶1)作为洗脱剂，得到126(94.0mg，65％)，为无色无定形固体。MW607.701H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.85-2.35(多个m，4H)，2.43-2.92(多个m，5H)，2.28(s，3H)，3.55-4.55(多个m，10H)，6.85-7.95(多个m，17H)；MS(ESI)m/z 630(M++Na)。实施例1194-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向4-[2-(S)-(5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(117mg，0.33mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(110mg，0.33mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(50.0mg，0.40mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(76.0mg，0.40mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(189mg，85％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)，旋转异构体的混合物δ1.91-2.30(多个m，4H)，3.39-3.74(多个m，3H)，3.73(s，2H)，4.15-4.02(m，2H)，4.32-4.44(m，1H)，4.54(s，2H)，6.71-7.02(多个m，5H)，7.06(s，1H)，7.17(s，1H)，7.24-7.40(多个m，7H)，7.89-8.22(多个m，4H)；MS(FAB)m/z 672(M++H)。
于室温下，向4-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(169mg，0.25mmol)的甲醇-THF(2∶5，7ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(750ml，0.75mmol)。搅拌下，将得到的混合物于80℃加热2小时。将该混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(15∶1)作为洗脱剂，得到127(114mg，69％)，为无色无定形固体。MW 658.141H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.88-2.37(多个m，4H)，3.51-4.49(多个m，8H)，3.64和3.73(s，共3H)，4.86(s，2H)，6.85-7.95(多个m，16H)；MS(ESI)m/z658(M++H)，680(M++Na+)；C36H36ClN3O7·H2O的分析计算值C，63.95；H，5.66；N，6.21。实测值C，63.65；H，5.40；N，5.95。实施例1204-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向4-[2-(S)-(5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(119mg，0.34mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(127mg，0.34mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(50.0mg，0.40mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(77.0mg，0.40mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(217mg，90％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)旋转异构体的混合物δ1.92-2.31(多个m，4H)，3.39-3.73(多个m，3H)，3.65(s，2H)，4.15-4.02(m，2H)，4.32-4.44(m，1H)，4.54(s，2H)，6.71-6.99(多个m，5H)，7.04(s，1H)，7.11(s，1H)，7.22-7.39(多个m，7H)，7.51-8.17(多个m，4H)；MS(FAB)m/z 716(M+)，718(M++2)。
于室温下，向4-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(178mg，0.25mmol)的甲醇-THF(2∶5，7ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(750ml，0.75mmol)。搅拌下，将得到的混合物于80℃加热1.5小时。将该反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(15∶1)作为洗脱剂，得到128(159mg，91％)，为无色无定形固体。MW 702.59 1H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.88-2.35(多个m，4H)，3.51-4.49(多个m，8H)，3.64和3.72(s，共3H)，4.87(s，2H)，6.65-8.05(多个m，16H)；MS(ESI)m/z 702(M+)，704(M++2)；C36H36BrN3O7·H2O的分析计算值C，60.00；H，5.32；N，5.83。实测值C，59.66；H，5.04；N，5.65。实施例1213-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向N-Boc-2-(S)-羟甲基-5-(S)-苄氧基甲基吡咯烷(415mg，1.29mmol)、三苯膦(410mg，1.55mmol)和3-羟基苯甲酸甲酯(240mg，1.55mmol)的搅拌溶液中加入偶氮二羧酸二异丙酯(320ml，1.55mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。真空浓缩该混合物，然后残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(3∶1)作为洗脱剂，得到3-[2-(S)-(N-Boc-5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(513mg，87％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.40和1.46(s，共9H)，1.95-2.20(多个m，4H)，3.33-3.72(多个m，2H)，3.82-4.00(m，1H)，3.90和3.91(s，共3H)，4.09-4.21(m，3H)，4.21-4.57(m，2H)，7.11-7.15(m，1H)，7.26-7.37(m，6H)，7.53-7.65(m，2H)；MS(ESI)m/z 456(M++H)。
于室温下，向3-[2-(S)-(N-Boc-5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基-甲氧基]苯甲酸甲酯(501mg，1.10mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(10ml)，将得到的混合物搅拌1小时。真空浓缩该混合物并倾入碳酸氢钠水溶液中，用氯仿提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩，得到3-[2-(S)-(5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基-甲氧基]苯甲酸甲酯(387mg，定量)，为黄色油状物。该产物不经进一步纯化而用于随后的反应。1H-NMR(CDCl3)δ1.26-1.65(m，2H)，1.94-2.04(m，3H)，3.37-3.52(m，2H)，3.63-3.66(m，1H)，3.85-3.93(m，1H)，3.91(s，3H)，4.55(s，2H)，7.09-7.11(m，1H)，7.27-7.54(m，6H)，7.54-7.55(m，1H)，7.61-7.63(m，2H)；MS(ESI)m/z 35(M++H)。
于室温下，向3-[2-(S)-(5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(140mg，0.39mmol)、4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(125mg，0.39mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(58.0mg，0.47mmol)的THF(15ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(90.0mg，0.47mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到3-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(256mg，定量)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)，旋转异构体的混合物δ1.67(s，3H)，1.97-2.40(多个m，4H)，3.42-3.85(多个m，5H)，3.60(s，3H)，3.95和3.97(s，共3H)，4.15-4.26(m，2H)，4.36-4.49(m，1H)，4.59(s，2H)，632和6.36(s，共1H)，6.75-6.87(多个m，2H)，7.20(brs，2H)，7.16-7.72(多个m，10H)，8.03-8.09(m，1H)；MS(ESI)m/z652(M++H)。
于室温下，向3-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(185mg，0.28mmol)的甲醇-THF(2∶5，7ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(860ml，0.86mmol)。搅拌下，将得到的混合物于60℃加热1小时。将反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(5∶1)作为洗脱剂，得到129(171mg，94％)，为无色无定形固体。MW 637.721H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.89-2.37(多个m，4H)，2.29(s，3H)，3.52-4.53(多个m，8H)，3.66和3.74(s，共3H)，4.85(s，2H)，6.66-7.98(多个m，16H)；MS(ESI)m/z 638(M++H)，660(M++Na+)；C37H39N3O7·H2O的分析计算值C，67.77；H，6.30；N，6.41。实测值C，67.40；H，5.95；N，6.14。实施例1223-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向3-[2-(S)-(5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(118mg，0.33mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(112mg，0.33mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(50.0mg，0.40mmol)的THF(15ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(80.0mg，0.40mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到3-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(226mg，定量)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)，旋转异构体的混合物δ1.99-2.40(多个m，4H)，3.43-3.92(多个m，5H)，3.67(s，3H)，3.98和4.02(s，共3H)，4.18-4.29(m，2H)，4.36-4.51(m，1H)，4.60(s，2H)，6.75-6.92(多个m，2H)，7.01-7.22(多个m，4H)，7.29-7.53(多个m，9H)，7.62-8.26(多个m，3H)；MS(ESI)m/z 672(M++H)。
于室温下，向3-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(169mg，0.25mmol)的甲醇-THF(2∶5，7ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(760ml，0.76mmol)。搅拌下，将得到的混合物于60℃加热1.5小时。将反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(5∶1)作为洗脱剂，得到130(155mg，94％)，为无色无定形固体。MW658.141H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.89-2.35(多个m，4H)，3.52-4.53(多个m，8H)，3.68和3.75(s，共3H)，4.85(s，2H)，6.68-8.03(多个m，1 6H)；MS(ESI)m/z 658(M++H)，680(M++Na+)；C36H36ClN3O7·H2O的分析计算值C，63.95；H，5.66；N，6.21。实测值C，64.01；H，5.38；N，5.96。实施例1233-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向3-[2-(S)-(5-(S)-苄氧基甲基)吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(116mg，0.33mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(124mg，0.33mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(48.0mg，0.39mmol)的THF(15ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(75.0mg，0.39mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用氯仿提取，用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到3-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(209mg，89％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)，旋转异构体的混合物δ1.99-2.37(多个m，4H)，3.43-3.91(多个m，5H)，3.70(s，3H)，3.93和3.96(s，共3H)，4.19-4.28(m，2H)，4.37-4.51(m，1H)，4.60(s，2H)，6.77-7.11(多个m，6H)，7.28-7.74(多个m，10H)，7.91-7.95(多个m，1H)，8.20-8.23(多个m，1H)；MS(ESI)m/z 716(M+)，718(M++2)。
于室温下，向3-[5-(R)-苄氧基甲基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(176mg，0.25mmol)的甲醇-THF(2∶5，7ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(760ml，0.76mmol)。搅拌下，将得到的混合物于60℃加热1.5小时。将反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(5∶1)作为洗脱剂，得到131(156mg，88％)，为无色无定形固体。MW702.59 1H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.89-2.37(多个m，4H)，2.29(s，3H)，3.52-4.53(多个m，8H)，3.68和3.75(s，共3H)，4.85(s，2H)，6.67-7.95(多个m，16H)；MS(ESI)m/z702(M++H)，704(M++Na)；C36H36BrN3O7·H2O的分析计算值C，60.00；H，5.32；N，5.83。实测值C，59.65；H，5.02；N，5.65。实施例1244-[(2S，4S)-4-甲氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温、氮气氛下，向(2S，4R)-1-叔丁氧基羰基-2-叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基-4-羟基吡咯烷(21.7g，47.6mmol)、乙酸(3.0ml，52.4mmol)和三苯膦(12.5g，52.4mmol)的THF(330ml)的搅拌混合物中加入DIAD(9.4ml.47.6mmol)。于相同温度下搅拌2小时后，于50℃加热该混合物2小时。冷却至室温后，真空浓缩该反应混合物。得到的残留物经硅胶层析[1Kg，正己烷/乙酸乙酯(5/1)]，得到(2S，4S)-4-乙酰氧基-1-叔丁氧基羰基-2-叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基吡咯烷(23.3g，99％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.06(s，9H)，1.35和1.43(s，9H，酰胺异构体)，1.92(br，3H)，2.20-2.45(m，2H)，3.31-4.07(m，5H)，5.17-5.30(m，1H)，7.36-7.44(m，6H)，7.65-7.71(m，4H)。
于0℃，向(2S，4S)-4-乙酰氧基-1-叔丁氧基羰基-2-叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基吡咯烷(23.3g，46.9mmol)和乙酸(6.0ml，104.8mmol)的THF(470ml)的搅拌混合物中加入TBAF(93.8ml，93.8mmol)。搅拌24小时后，真空浓缩该混合物。用乙酸乙酯和氯化铵水溶液稀释得到的残留物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤合并的提取物，将其用硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析[700g，氯仿/乙酸乙酯(4/1)]，得到(2S，4S)-4-乙酰氧基-1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷甲醇(9.70g，8％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.63(m，1H)，1.81(m，1H)，2.07(s，3H)，2.34(m，1H)，3.42(dd，J＝12.7，0.9Hz，1H)，3.62-3.85(m，3H)，4.48(br，1H)，5.20(br，1H)。
于室温下，向(2S，4S)-4-乙酰氧基-1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷甲醇(9.70g，37.4mmol)、对-羟基苯甲酸甲酯(5.69g，37.4mmol)和三苯膦(10.8g，41.1mmol)的THF(200ml)的搅拌混合物中加入DIAD(8.10ml，41.1mmol)。搅拌1.5小时后，真空浓缩该混合物。得到的残留物经硅胶层析[700g，氯仿/乙酸乙酯(10/1)]，得到4-[(2S，4S)-4-乙酰氧基-1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(11.8g，81％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.03(s，3H)，2.27(m，2H)，3.46(m，1H)，3.72(m，1H)，3.88(s，3H)，3.98(t，J＝9.0Hz，1H)，4.21-4.47(m，2H)，5.31(br，1H)，6.96(br，2H)，7.98(d，J＝8.8Hz，2H)。
于室温下，向4-[(2S，4S)-4-乙酰氧基-1-叔丁氧基羰基-4-羟基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(7.43g，18.9mmol)的甲醇(150ml)的搅拌溶液中加入催化量的碳酸钾。搅拌1天后，真空浓缩该混合物。通过加入氯仿-正己烷使得到的残留物重结晶，得到4-[(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-羟基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(5.76g，87％)，为无色固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.11(m，1H)，2.35(br，1H)，3.27-3.65(m，2H)，3.89(s，3H)，4.07-4.54(m，4H)，6.96(d，J＝6.9Hz，2H)，7.99(d，J＝6.9Hz，2H)。
于0℃，向4-[(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-羟基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(2.10g，5.98mmol)的THF(60ml)的搅拌溶液中加入60％的油中的氢化钠(359mg，8.97mmol)。搅拌15分钟后，于相同温度下，将MeI(1.20ml，8.97mmol)加入该混合物中，用1小时使得到的混合物升至室温。然后，于室温下，将60％的油中的氢化钠(359mg，8.97mmol)和MeI(1.20ml，8.97mmol)加入该反应混合物中并搅拌14小时。将该反应混合物倾入冰水中，用氯仿提取。用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，正己烷/乙酸乙酯(4/1)]，得到4-[(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(1.32g，60％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.05(m，1H)，2.29(d，J＝14.2Hz，1H)，3.30(s，3H)，3.36-4.38(m，4H)，6.76(br，2H)，7.97(d，J＝8.8Hz，2H)。
于室温下，向4-[(2S，4S)-1-叔丁氧基羰基-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(2.38g，3.61mmol)的二氯甲烷(46ml)的搅拌溶液中加入TFA(23ml)。搅拌14小时后，真空浓缩该混合物。通过加入二氯甲烷和1N氢氧化钠稀释残留物并用二氯甲烷提取。用盐水洗涤合并的提取物，经硫酸钠干燥，将其真空浓缩。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(20/1)]，得到4-[(2S，4S)-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(950mg，99％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.16(t，J＝5.3Hz，1H)，2.72(s，1H)，2.95(d，J＝6.8Hz，1H)，3.11(d，J＝11.0Hz，1H)，3.26(t，J＝1.9Hz，3H)，3.52(br，1H)，3.84(d，J＝1.7Hz，3H)，3.92(s，1H)，4.00(d，J＝4.1Hz，2H)，6.88(m，2H)，7.94(m，2H)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(375mg，1.19mmol)、4-[(2S，4S)-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(317mg，1.19mmol)、EDC·HCl(342mg，1.79mmol)、HOBt(242mg，1.79mmol)和三乙胺(0.83ml，5.95mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌13小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/丙酮(10/1)氯仿/甲醇(20/1)]，得到4-[(2S，4S)-4-甲氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(650mg，98％)，为浅棕色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.03(m，1H)，2.31(s，3H)，2.32(m，1H)，3.29(d，J＝1.0Hz，3H)，3.57-3.68(m，5H)，3.88(d，J＝1.0Hz，3H)，3.99-4.06(m，2H)，4.46(m，1H)，6.19(m，1H)，6.80(s，1H)，6.81(d，J＝9.0Hz，1H)，6.96-7.19(m，4H)，7.29(m，2H)，7.50(d，J＝6.7Hz，1H)，7.95-7-8.10(m，3H)；MS(ESI)m/z562(M++1)。
向4-[(2S，4S)-4-甲氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(650mg，1.16mmol)的THF(18.5ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(18.5ml)。于室温下搅拌12小时后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(20/1)]，得到132(540mg，85％)，为无色无定形固体。MW 547.60 IR (KBr)3354，2937，1709，1685，1604，1533，1454 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.11(m，2H)，2.25(s，3H)，3.22(s，3H)，3.49-3.78(m，4H)，3.82和3.86(s，3H，酰胺异构体)，3.87-4.52(m，4H)，6.71-7.17(m，7H)，7.79(d，J＝8.1Hz，1H)，7.86-8.03(m，3H)，8.45-8.57(m，2H)，12.64(br，1H)；MS(ESI)m/z 548(M++1)；C30H33N3O7·1Na·1.5H2O的分析计算值C，60.29；H，6.07；N，7.03。实测值C，59.90；H，5.59；N，6.69。实施例1254-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(398mg，1.19mmol)、4-[(2S，4S)-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(317mg，1.19mmol)、EDC·HCl(342mg，1.79mmol)、HOBt(242mg，1.79mmol)和三乙胺(0.83ml，5.95mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌13小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/丙酮(10/1)氯仿/甲醇(20/1)]，得到4-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(600mg，87％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.99-2.06(m，1H)，2.34(d，J＝13.9Hz，1H)，3.30(s，3H)，3.59(d，J＝7.4Hz，1H)，3.62(d，J＝3.2Hz，2H)，3.83(s，3H)，3.88(s，3H)，4.00-4.18(m，3H)，4.42-4.51(m，2H)，6.82-7.07(m，7H)，7.28(d，J＝8.3Hz，1H)，7.35(dd，J＝7.9，1.5Hz，1H)，7.94-8.00(m，3H)，8.18(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z 582(M++1)，584(M++3)。
向4-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(600mg，1.03mmol)的THF(16ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(16ml)。于室温下搅拌12小时后，用1NHCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到133(495mg，75％)，为无色无定形固体。MW 568.02 IR (KBr)3330，3070，2937，1709，1685，1604，1533 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.11(m，2H)，3.22(s，3H)，3.56-3.78(m，4H)，3.81和3.85(s，3H，酰胺异构体)，3.88-4.56(m，4H)，6.73和6.77(d，J＝8.1Hz，1H，酰胺异构体)，6.85和6.91(s，1H，酰胺异构体)，7.01-7.07(s，3H)，7.28(t，J＝8.1Hz，1H)，7.43(d，J＝8.1Hz，1H)，7.85-7.94(m，2H)，7.97(d，J＝8.6Hz，1H)，8.09(d，J＝8.3Hz，1H)，8.90-8.95(m，2H)；MS(FAB)m/z 570(M++1)，572(M++3)。实施例1264-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(451mg，1.19mmol)、4-[(2S，4S)-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(317mg，1.19mmol)、EDC·HCl(342mg，1.79mmol)、HOBt(242mg，1.79mmol)和三乙胺(0.83ml，5.95mmol)在DMF(5ml)中的混合物搅拌13小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/丙酮(10/1)]，得到4-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(760mg，100％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.99-2.32(m，1H)，2.34(d，J＝13.4Hz，1H)，3.30(s，3H)，3.59(m，1H)，3.63(d，J＝3.2Hz，2H)，3.68(dd，J＝12.2，5.1Hz，1H)，3.81(br，3H)，3.88(s，3H)，3.91-4.16(m，2H)，4.49-4.51(m，2H)，6.82-7.15(m，7H)，7.31(t，J＝8.1Hz，1H)，7.52(d，J＝8.1Hz，1H)，7.93-8.00(m，3H)，8.14(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z626(M++1)，628(M++3)。
向4-[(2S，4S)-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-甲氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(760mg，1.19mmol)的THF(19ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(19ml)。于室温下搅拌12小时后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经硅胶层析[50g，氯仿/甲醇(20/1)]，得到134(580mg，78％)，为无色无定形固体。MW 612.47 IR(KBr)3330，2935，1709，1685，1604，1529，1434 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.11(m，2H)，3.22(s，3H)，3.58-3.78(m，4H)，3.81和3.86(s，3H，酰胺异构体)，3.92-4.52(m，4H)，6.72(d，J＝8.6Hz，1H)，6.77(d，J＝8.3Hz，1H)，6.85和6.91(s，1H，酰胺异构体)，6.97(t，J＝7.1Hz，1H)，7.02和7.06(d，J＝8.6Hz，2H，酰胺异构体)，7.32(t，J＝7.3Hz，1H)，7.59(dd，J＝8.1，1.0Hz，1H)，7.94(dd，J＝8.1，1.2Hz，2H)，7.95-7.98(m，2H)，8.74(s，1H)，8.94(s，1H)，12.63(br，1H)；MS(FAB)m/z 612(M++1)，614(M++3)。实施例1274-[(4R)-甲氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲酸(2.87g，11.7mmol)的THF(25ml)的搅拌溶液中加入BH3·DMS(1.66ml，17.5mmol)，于室温下将该反应混合物搅拌过夜。蒸发该混合物，使残留物溶于二氯甲烷中。用水、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50/1，v/v)洗脱，得到1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-甲氧基-(2S)-脯氨醇(1.79g，66％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.69-1.73(m，1H)，2.12-2.17(m，1H)，3.31(s，3H)，3.37-3.40(m，1H)，3.53-3.62(m，2H)，3.68-3.73(m，1H)，3.83-3.87(m，1H)，4.04-4.07(m，1H)，4.90-4.92(m，1H)；MS(FAB)m/z 232(M++1)。
向4-羟基苯甲酸甲酯(1.18g，7.76mmol)、1-(叔丁氧基羰基)-(4R)-甲氧基-(2S)-脯氨醇(1.79g，7.74mmol)和三苯膦(2.44g，9.30mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入DIAD(1.83ml，9.29mmol)，将该反应混合物回流加热5小时。冷却至室温后，蒸发该混合物。经硅胶过滤残留物，用甲苯-丙酮(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到粗产物。使该粗产物溶于二氯甲烷(20ml)中。向该溶液中加入TFA(20ml)，于室温下将该反应混合物搅拌过夜。真空浓缩该混合物，通过饱和碳酸氢钠使呈碱性。用氯仿提取该混合物，用盐水洗涤，经碳酸钾干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(30∶1-30∶2，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.67g，81％(两步))，为红棕色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.65-1.72(m，1H)，1.89(bs，1H)，2.05-2.22(m，1H)，2.95-3.15(m，2H)，3.31(s，3H)，3.69-3.76(m，1H)，3.88(s，3H)，3.91-4.06(m，3H)，6.89-6.92(m，2H)，7.96-7.98(m，2H)；MS(FAB)m/z266(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(470mg，1.50mmol)、4-[(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(396mg，1.49mmol)、EDC·HCl(343mg，1.79mmol)、HOBt(242mg，1.79mmol)和三乙胺(250ml，1.79mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[(4R)-甲氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(822mg，98％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.14-2.24(m，2H)，2.27(s，3H)，3.25(s，3H)，3.51(s，3H)，3.58-3.73(m，4H)，3.88(s，3H)，3.98-4.09(m，2H)，4.40-4.53(m，2H)，6.67-7.29(多个m，共9H)，7.57-7.59(m，1H)，7.91-7.93(m，2H)，8.04-8.06(m，1H)；MS(FAB)m/z 562(M++1)。
向4-[(4R)-甲氧基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(517mg，0.92mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热3小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶纯化，得到135(144mg，29％)，为白色结晶粉末。MW 547.60 mp 112-115℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.04-2.17(m，2H)，2.25(s，3H)，3.21(s，3H)，3.56-3.75(m，4H)，3.79(s，3H)，4.04-4.35(m，4H)，6.73-7.17(多个m，共7H)，7.79-7.81(m，1H)，7.87-7.89(m，2H)，7.99-8.01(m，1H)，8.47(s，1H)，8.55(s，1H)，12.63(bs，1H)；MS(FAB)m/z 548(M++1)；C30H33N3O7·1/4H2O的分析计算值C，65.26；H，6.12；N，7.61。实测值C，65.36；H，6.45；N，7.24。实施例1284-[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(476mg，1.50mmol)、4-[(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(397mg，1.50mmol)、EDC·HCl(344mg，1.79mmol)、HOBt(243mg，1.80mmol)和三乙胺(250ml，1.79mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(806mg，95％)，为淡黄色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.14-2.37(m，2H)，3.28(s，3H)，3.44(s，3H)，3.48-3.74(m，4H)，3.88(s，3H)，4.02-4.15(m，2H)，4.43-4.58(m，2H)，6.63-7.10(多个m，共7H)，7.68-7.73(m，1H)，7.89-8.02(m，4H)，8.16-8.20(m，1H)；MS(FAB)m/z 566(M++1)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(491mg，0.87mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热3小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶纯化，得到136(173mg，36％)，为白色结晶粉末。MW 551.56 mp 111-116℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.08-2.17(m，2H)，3.21(s，3H)，3.56-3.73(m，4H)，3.78(s，3H)，4.04-4.33(m，4H)，6.74-7.22(多个m，共7H)，7.87-7.89(m，2H)，7.99-8.01(m，1H)，8.16-8.20(m，1H)，8.70(s，1H)，9.18(s，1H)，12.64(brs，1H)；MS(FAB)m/z 552(M++1)；C29H30FN3O7·0.15H2O的分析计算值C，62.84；H，5.51；F，3.43；N，7.58。实测值C，63.08；H，5.83；F，3.30；N，7.15。实施例1294-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(460mg，1.37mmol)、4-[(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(365mg，1.38mmol)、EDC·HCl(316mg，1.65mmol)、HOBt(223mg，1.65mmol)和三乙胺(230ml，1.65mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(801mg，q.y.)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.13-2.36(m，2H)，3.27(s，3H)，3.58(s，3H)，3.61-3.73(m，4H)，3.88(s，3H)，4.06-4.14(m，2H)，4.43-4.56(m，2H)，6.70-6.99(多个m，共5H)，7.23-7.42(m，4H)，7.90-8.00(m，3H)，8.17-8.20(m，1H)；MS(FAB)m/z 582(M++1)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(541mg，0.93mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热3小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶纯化，得到137(281mg，53％)，为白色结晶粉末。MW 568.02 mp 116-119℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.08-2.17(m，2H)，3.21(s，3H)，3.56-3.73(m，4H)，3.79(s，3H)，4.04-4.33(m，4H)，6.75(d，J＝8.3Hz，1H)，6.87(s，1H)，7.02(d，J＝8.3Hz，3H)，7.28(t，J＝7.8Hz，1H)，7.44(d，J＝7.8Hz，1H)，7.87-7.89(m，2H)，7.96(d，J＝8.3Hz，1H)，8.10(d，J＝8.3Hz，1H)，8.89(s，1H)，8.93(s，1H)，12.63(br s，1H)；MS(FAB)m/z 568(M++1)；C29H30ClN3O7·1/4H2O的分析计算值C，60.84；H，5.37；Cl，6.19；N，7.34。实测值C，61.03；H，5.56；Cl，6.27；N，7.03。实施例1304-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(600mg，1.58mmol)、4-[(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(420mg，1.58mmol)、EDC·HCl(3 64mg，1.90mmol)、HOBt(214mg，1.58mmol)和三乙胺(265ml，1.90mmol)在THF(15ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.01g，q.y.)，为淡黄色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.13-2.33(m，2H)，3.27(s，3H)，3.57(s，3H)，3.61-3.72(m，4H)，3.88(s，3H)，4.05-4.14(m，2H)，4.43-4.57(m，2H)，6.70-7.00(多个m，共5H)，7.29-7.52(m，4H)，7.92-8.01(m，3H)，8.12-8.15(m，1H)；MS(FAB)m/z 626(M++1)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(4R)-甲氧基-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(697mg，1.11mmol)的THF(8ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(8ml)，将该反应混合物回流加热2小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。粗品固体从甲醇-氯仿-IPE中重结晶纯化，得到138(252mg，37％)，为白色结晶粉末。MW 612.47 mp 125-130℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.08-2.17(m，2H)，3.21(s，3H)，3.60-3.72(m，4H)，3.79(s，3H)，3.95-4.33(m，4H)，6.75-7.08(多个m，共5H)，7.31-7.34(m，1H)，7.59-7.61(m，1H)，7.87-7.89(m，2H)，7.93-7.96(m，2H)，8.73(s，1H)，8.91(s，1H)，12.63(br s，1H)；MS(FAB)m/z 612(M++1)；C29H30BrN3O7的分析计算值C，56.87；H，4.94；Br，13.05；N，6.86。实测值C，56.67；H，4.97；Br，13.07；N，6.68。实施例1314-[4，4-二氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
向N-Boc脯氨酸甲酯(2.0g，8.15mmol)的二氯甲烷的搅拌溶液中加入3A分子筛(2g)和PDC(4.60g，12.2mmol)。将该混合物搅拌3天。通过Celiete垫过滤该混合物，蒸发滤液。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)-4-氧代吡咯烷-2-甲酸甲酯(1.13g，57％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.46-1.48(m，9H)，2.56-2.61(m，1H)，2.88-3.00(m，1H)，3.77(s，3H)，3.82-3.88(m，2H)，4.71-4.83(m，1H)。
向1-(叔丁氧基羰基)-4-氧代吡咯烷-2-甲酸甲酯(1.13g，4.65mmol)在二氯甲烷(20ml)中的搅拌的冷(-78℃)溶液中加入甲基DAST(1.1ml，11.6mmol)。将该混合物温热至室温。搅拌15小时后，将该混合物倾入水(50ml)中，用乙酸乙酯(200ml)提取。用盐水(2×200ml)洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(20∶1)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟吡咯烷-2-甲酸甲酯(885mg，72％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.42和147(各为s，共9H)，2.46(ddd，J＝26.9，13.7，5.1Hz，1H)，2.62-2.78(m，1H)，3.75-3.95(m，5H)，4.43-4.57(m，1H)。
向1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟吡咯烷-2-甲酸甲酯(885mg，3.34mmol)的THF(25ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(26.7ml，6.67mmol)并继续搅拌1小时。将该混合物倾入1N HCl(100ml)中，用氯仿(2×200ml)提取。用盐水(100ml)洗涤合并的提取物，经硫酸镁干燥并蒸发，得到1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟吡咯烷-2-甲酸(775mg，92％)，为黄色结晶固体。mp 113-117℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.44和1.49(各为s，共9H)，2.53-2.80(m，2H)，3.71-3.90(m，2H)，4.20-4.61(m，1H)；MS(FAB)m/z 252(M++1)；C10H15F2O4的分析计算值C，47.81；H，6.02；N，5.58。实测值C，48.06；H，6.05；N，5.45。
于室温下，向N-(叔丁氧基羰基)4，4-二氟脯氨酸(3.00g，11.9mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入BH3·DMS(1.1ml.11.9mmol)，将该混合物回流加热2小时。冷却至室温后，真空浓缩该混合物。通过加入水(100ml)猝灭残留物，用氯仿(2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(4∶1)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲醇(2.11g，75％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.04-2.55(m，2H)，3.59-4.17(m，5H)。
于室温下，向1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲醇(600mg，2.53mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(462mg，3.03mmol)、三苯膦(795mg，3.03mmol)的THF(10ml)的搅拌混合物中加入DIAD(597μl， 3.03mmol)。搅拌下，将该混合物回流加热3小时。冷却至室温后，真空浓缩该混合物。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(831mg，88％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.53-2.61(m，2H)，3.63-4.41(多个m，共8H)，6.94(d，J＝8.8Hz，2H)，7.99(d，J＝8.8Hz，2H)。
将4-[1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(830mg，2.23mmol)和TFA(5ml)在二氯甲烷(5ml)中的混合物搅拌3小时并真空浓缩。用饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性，用氯仿(2×200ml)提取。经碳酸钾干燥合并的提取物并真空浓缩，得到4-(4，4-二氟-2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯(550mg，91％)，为淡黄色固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.19(m，1H)，2.43(m，1H)，3.19-3.41(m，2H)，3.77(m，1H)，3.89(s，3H)，4.00-4.09(m，2H)，6.92(d，J＝9.0Hz，2H)，7.99(d，J＝9.0Hz，2H)；MS(FAB)m/z 272(M++1)；C13H15F2N03·的分析计算值C，57.56；H，5.57；N，5.16。实测值C，57.65；H，5.67；N，5.16。
将4-(4，4-二氟-2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯(540mg，1.99mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(626mg，1.99mmol)、EDC·HCl(572mg，2.99mmol)、HOBt(cat.)和DMAP(cat.)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水(2×100ml)洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-(4，4-二氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.00g，89％)，为无色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.31(s，3H)，2.47-2.63(m，2H)，3.52-3.97(多个s和m，共10H)，4.07-4.30(m，2H)，4.67-4.69(m，1H)，6.45(s，1H)，6.65(d，J＝1.7Hz，1H)，6.74-6.76(m，1H)，6.84(d，J＝8.8Hz，2H)，7.14(m，2H)，7.24(m，2H)，7.52-7.54(m，1H)，7.94(d，J＝8.8Hz，2H)，8.09(d，J＝8.1Hz，1H)。
将4-(4，4-二氟-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.00g，1.76mmol)和0.25N氢氧化钠(14ml，3.50mmol)在THF(14ml)中的混合物搅拌过夜。用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1-10∶1)作为洗脱剂，得到139(658mg，68％)，为无色结晶粉末。MW 553.55 mp 135-140℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.23(s，3H)，2.49-2.73(m，2H)，3.36-4.55(多个m，10H)，6.73(d，J＝8.3Hz，1H)，6.84(s，1H)，6.93(t，J＝7.3Hz，1H)，7.00(d，J＝8.3Hz，2H)，7.10-7.16(m，2H)，7.78(d，J＝8.3Hz，1H)，7.86(d，J＝8.3Hz，2H)，8.00(d，J＝8.3Hz，1H)，8.47(s，1H)，8.56(s，1H)；MS(FAB)m/z 554(M++1)；C29H29F2N3O6·3/4H2O的分析计算值C，61.42；H，5.44；N，7.06。实测值C，61.30；H，5.44；N，7.06。实施例1324-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
将4-(4，4-二氟-2-吡咯烷基甲氧基)苯甲酸甲酯(229mg，0.845mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(283mg，0.845mmol)、EDC·HCl(243mg，1.27mmol)、HOBt(cat.)、DMAP(cat.)和DMF(10ml)的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水(2×100ml)洗涤该溶液，经硫酸镁干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(20∶1-4∶1)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(482mg，97％)，为无色粘性固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.50-2.67(m，2H)，3.54-4.71(多个m，13H)，6.69(d，J＝1.5Hz，1H)，6.76(d，J＝8.3Hz，1H)，6.84(d，J＝8.8Hz，2H)，6.98(dt，J＝7.8，1.5Hz，1H)，7.23-7.27(m，1H)，7.33(d，J＝8.3Hz，1H)，7.39(m，2H)，7.94(d，J＝8.8Hz，2H)，8.00(d，J＝8.3Hz，1H)，8.19(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)。
将4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4，4-二氟-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(480mg，0.816mmol)、0.25N氢氧化钠(6.5ml，1.65mmol)和THF(20ml)的混合物搅拌3天。将该混合物倾入1N HCl(100ml)中用氯仿-甲醇(5∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1-5∶1)作为洗脱剂，得到140(270mg，58％)，为淡黄色无定形固体。MW573.97 1H-NMR(DMSO-d6)δ2.45-2.74(m，2H)，3.63-4.83(多个m，10H)，6.76(d，J＝8.3Hz，1H)，6.87(s，1H)，7.00-7.05(m，3H)，7.26-7.30(m，1H)，7.44(dd，J＝8.3，1.2Hz，1H)，7.88-7.93(m，2H)，7.98(d，J＝8.3Hz，1H)，8.10(d，J＝8.3Hz，1H)，8.92(s，1H)，8.96(s，1H)；MS(FAB)m/z 574(M++1)；C28H26ClF2N3O6·H2O的分析计算值C，56.81；H，4.77；N，7.10。实测值C，56.75；H，4.69；N，6.79。实施例1334-[(2R，3R，4S)-3，4-亚异丙基二氧基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
向(2S，3R，4S)-1-苄氧基羰基-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基甲酸甲酯(10.7g，31.9mmol)的THF(250ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(255ml)，于室温下搅拌24小时后，用1N HCl酸化该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤合并的提取物，将其经硫酸钠干燥并真空浓缩，得到(2S，3R，4S)-1-苄氧基羰基-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基甲酸(9.87g，96％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.32(s，3H)，1.46(d，J＝2.7Hz，3H)，3.61(m，1H)，3.82和3.92(d，J＝12.7Hz，1H，酰胺异构体)，4.58和4.64(s，1H，酰胺异构体)，4.77(t，J＝5.1Hz，1H)，4.83和4.89(d，J＝5.9Hz，1H，酰胺异构体)，5.15和5.19(m，2H，酰胺异构体)，7.31-7.37(m，5H)。
于0℃，向(2S，3R，4S)-1-苄氧基羰基-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基甲酸(9.87g，30.7mmol)的THF(200ml)的搅拌溶液中加入BH3·DMS(6.14ml，61.4mmol)。使该混合物回至室温，然后加热回流2小时。冷却至室温后，真空浓缩该混合物，于0℃通过加入水猝灭，用乙酸乙酯提取该混合物。用水和盐水洗涤合并的提取物，将其用硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析[200g，氯仿/甲醇(20∶1)]，得到(2R，3R，4S)-1-苄氧基羰基-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基甲醇(10.1g，100％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.31(s，3H)，1.45(s，3H)，3.56-4.74(m，7H)，5.14(s，2H)，7.34(m，5H)。
于0℃、氮气氛下，向(2R，3R，4S)-1-苄氧基羰基-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基甲醇(312mg，0.64mmol)、对-羟基苯甲酸甲酯(67ml，0.70mmol)、三苯膦(184mg，0.70mmol)的THF(7ml)的搅拌混合物中加入DIAD(138ml，0.70mmol)。使该混合物升至室温并搅拌3小时，除去溶剂后，得到的残留物经硅胶层析[10g，正己烷/乙酸乙酯(4∶1)]，得到4-[(2R，3R，4S)-苄氧基羰基-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(321mg，83％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.01(s，6H)，1.03(s，3H)，2.23(m，1H)，2.63(m，1H)，3.61(d，J＝12.5Hz，1H)，3.80-4.27(m，4H)，4.84(br，1H)，5.01和5.08(ABq，J＝12.2Hz，1H，酰胺异构体)，6.75-6.87(m，3H)，7.19-7.63(m，15H)。
于室温、氢气氛下，搅拌4-[(2R，3R，4S)-1-苄氧基羰基-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(2.37g，5.76mmol)和10％ Pd/C(240mg)在乙醇(170ml)中的悬浮液。搅拌1天后，将该催化剂和溶剂换成10％Pd/C(500mg)和THF(50ml)。于室温、氢气氛下，搅拌该悬浮液5天。过滤除去催化剂后，真空浓缩滤液。残留物经硅胶层析[100g，氯仿/丙酮(20/1)]，得到4-[(2R，3R，4S)-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(930mg，53％)，为棕色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.35(s，3H)，1.50(s，3H)，3.02(dd，J＝13.7，4.1Hz，1H)，3.13(d，J＝13.7Hz，1H)，3.58(t，J＝6.3Hz，1H)，3.88(s，3H)，3.90(dd，J＝9.3，6.6Hz，1H)，4.02(dd J＝9.5，3.9Hz，1H)，4.74(d，J＝5.6Hz，1H)，4.79(m，1H)，6.90(d，J＝9.0Hz，2H)，7.98(d，J＝9.0Hz，2H)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(437mg，1.39mmol)、4-[(2R，3R，4S)-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(428mg，1.39mmol)、EDC·HCl(400mg，2.09mmol)和DMAP(170mg，1.39mmol)在DMF(12ml)中的混合物搅拌20小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[70g，氯仿/丙酮(10/1)]，得到4-[(2R，3R，4S)-3，4-亚异丙基二氧基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(840mg，100％)，为无色无定形固体。IR(KBr)3354，2985，2939，1716，1533，1254 cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.31(s，3H)，1.42(s，3H)，2.05(s，3H)，3.50(s，3H)，3.55-3.88(m，4H)，3.89(s，3H)，4.13(m，1H)，4.67(br，1H)，4.78(d，J＝6.1Hz，1H)，4.88(d，J＝5.6Hz，1H)，6.46(s，1H)，6.62(d，J＝1.5Hz，1H)，6.74(m，3H)，7.05(s，1H)，7.14(d，J＝7.3Hz，1H)，7.23(m，2H)，7.57(d，J＝7.8Hz，1H)，7.91-8.08(m，3H)；MS(ESI)m/z 604(M++1)；C33H37N3O8·0.6H2O的分析计算值C，64.50；H，6.27；N，6.84。实测值C，64.38；H，6.18；N，6.66。
于室温下，将4-[(2R，3R，4S)-3，4-亚异丙基二氧基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(183mg，0.303mmol)和g.HCl-MeOH(6ml)的混合物搅拌17小时。真空浓缩该混合物。残留物经TLC[氯仿/甲醇(10/1)]纯化，得到4-[(2R，3R，4S)-3，4-二羟基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(162mg，95％)，为无色无定形固体。IR(KBr)3342，1716，1604，1535，1255 cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ2.25(br，3H)，3.33-3.75(m，7H)，3.87(s，3H)，4.10(d，J＝8.3Hz，1H)，4.24(s，2H)，4.37(m，2H)，6.62-7.94(m，13H)；MS(ESI)m/z 564(M++1)。
向4-[(2R，3R，4S)-3，4-亚异丙基二氧基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(490mg，0.812mmol)的THF(9.8ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(9.8ml)。于室温下搅拌4天后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩，得到141(445mg，93％)，为无色无定形固体。MW 689.64 IR (KBr)3354，2983，2937，1707，1604，1533 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ.24和1.26(s，3H，酰胺异构体)，1.26和1.32(s，3H，酰胺异构体)，2.24(s，3H)，3.40(dd，J＝14.0，5.1Hz，1H)，3.60(m，2H)，3.71(m，1H)，3.76(s，3H)，3.82(s，3H)，3.92-4.96(m，5H)，6.74和6.78(m，1H，酰胺异构体)，6.83-7.16(m，6H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，7.87(t，J＝9.1Hz，2H)，8.01(m，1H)，8.49(d，J＝3.4Hz，1H)，8.57(s，1H)；MS(FAB) m/z 590(M++1)；C32H35N3O8·2.3H2O的分析计算值C，60.90；H，6.32；N，6.66。实测值C，61.00；H，6.00；N，6.27。实施例1344-[(2R，3R，4S)-3，4-二羟基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
向4-[(2R，3R，4S)-3，4-二羟基-1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(63mg，0.112mmol)的THF(0.89ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(0.89ml)。于室温下搅拌3天后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩，得到142(54mg，88％)，为无色无定形固体。MW 549.57 IR(KBr)3356，2958，2927，1685，1604，1535，1255 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，3.40(m，1H)，3.58(s，2H)，3.66(dd，J＝9.8，6.6Hz，1H)，3.80(s，3H)，3.99-4.30(m，5H)，5.10(br，1H)，6.72(d，J＝8.1Hz，1H)，6.85(s，1H)，6.93(t，J＝7.3Hz，1H)，7.03(d，J＝8.8Hz，2H)，7.14(t，J＝8.8Hz，2H)，7.79(d，J＝8.1Hz，2H)，7.86(d，J＝8.8Hz，2H)，7.99(d，J＝8.3Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.56(s，1H)；MS(ESI)m/z 550(M++1)；C29H31N3O8·0.85H2O的分析计算值C，61.66；H，5.83；N，7.44。实测值C，62.09；H，5.93；N，6.95。实施例1354-[(2R，3R，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(487mg，1.45mmol)、4-[(2R，3R，4S)-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(447mg，1.45mmol)、EDC·HCl(418mg，2.18mmol)和DMAP(177mg，1.45mmol)在DMF(12ml)中的混合物搅拌19小时。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用冰水和盐水洗涤合并的提取物。经硫酸钠干燥后，真空浓缩提取物。残留物经硅胶层析[70g，氯仿/丙酮(10/1)]，得到4-[(2R，3R，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(850mg，94％)，为无色无定形固体。IR(KBr)3329，2939，1716，1627，1531，1254cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.33(s，3H)，1.43(s，3H)，3.56(s，3H)，3.61(s，1H)，3.64(s，1H)，3.70(m，1H)，3.79(d，J＝10.4Hz，1H)，3.88(s，3H)，4.14(dd，J＝9.8，2.2Hz，1H)，4.40(dd，J＝9.8，3.4Hz，1H)，4.67(s，1H)，4.80(d，J＝6.1Hz，1H)，4.90(t，J＝4.6Hz，1H)，6.65(d，J＝1.7Hz，1H)，6.71-6.84(m，3H)，6.98(dt，J＝7.6，1.5Hz，1H)，7.27(m，2H)，7.33(dd，J＝8.0，1.2Hz，2H)，7.90-8.01(m，3H)，8.20(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)；MS(ESI) m/z 624(M++1)，626(M++3)；C32H34N3O8·1.4H2O的分析计算值C，59.19；H，5.71；N，6.47。实测值C，58.85；H，5.35；N，6.21。
于室温下，将4-[(2R，3R，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(177mg，0.284mmol)和g.HCl-MeOH(4ml)的混合物搅拌2天。真空浓缩该混合物。残留物经TLC[氯仿/甲醇(15/1)]纯化，得到4-[(2R，3R，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(140mg，85％)，为无色无定形固体。IR(KBr)3338，2949，1712，1623，1604，1533 cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ2.27(m，1H)，2.79(m，1H)，3.53(dd，J＝10.5，5.9Hz，1H)，3.63(s，3H)，3.88(s，3H)，4.21(d，J＝7.8Hz，1H)，4.31(m，2H)，4.43(dd，J＝9.8，4.4Hz，1H)，4.52(t，J＝4.6Hz，1H)，6.71(s，1H)，6.80(m，3H)，6.99(t，J＝7.3Hz，1H)，7.16(s，1H)，7.21(s，1H)，7.39(d，J＝8.1Hz，1H)，7.91(d，J＝8.6Hz，2H)，8.16(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z 584(M++1)，586(M++3)。
向4-[(2R，3R，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(511mg，0.819mmol)的THF(9.8ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(9.8ml)。于室温下搅拌20小时后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩，得到143(504mg，100％)，为无色无定形固体。MW 610.05 IR(KBr)3330，2983，2937，1711，1689，1604，1533，1252 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.26(s，3H)，1.32(s，3H)，3.40(m，1H)，3.60和3.61(d，J＝2.5Hz，3H，酰胺异构体)，3.62(m，1H)，3.78和3.83(s，3H，酰胺异构体)，4.16(m，2H)，4.42-4.98(m，3H)，6.74-7.15(m，6H)，7.28(t，J＝7.3Hz，1H)，7.43(d，J＝8.1Hz，1H)，7.78-7.97(m，4H)，8.08(d，J＝8.3Hz，1H)，8.89(s，1H)，8.92(s，1H)，12.68(br，1H)；MS(ESI)m/z 610(M++1)，612(M++3)。实施例1364-[(2R，3R，4S)-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-3，4-二羟基-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-3，4-二羟基-2-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(63mg，0.108mmol)的THF(0.80ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(0.80ml)。于室温下搅拌3天后，用1N HCl酸化该混合物，用氯仿-甲醇(10/1)提取。经硫酸钠干燥合并的提取物并真空浓缩，得到144(61mg，100％)，为无色无定形固体。MW 569.99IR (KBr)3338，1687，1604，1533，1255，1169，1036 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ3.59(d，J＝5.5Hz，2H)，3.61(m，1H)，3.66(dd，J＝10.0，7.1Hz，1H)，3.80(s，3H)，4.00-4.33(m，5H)，5.10(br，1H)，6.74(d，J＝8.3Hz，1H)，6.87(s，1H)，7.03(m，3H)，7.28(t，J＝8.3Hz，1H)，7.43(d，J＝6.6Hz，1H)，7.87(d，J＝8.5Hz，2H)，7.95(d，J＝8.3Hz，1H)，8.09(d，J＝8.3Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.89(s，1H)，8.93(s，1H)；MS(ESI)m/z 570(M++1)，572(M++3)；C28H28ClN3O8·1.4H2O的分析计算值C，57.19；H，5.14；N，7.15。实测值C，57.52；H，5.22；N，6.76。实施例1374-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于-78℃，向N-Boc-吡咯戊二酸(pyrroglutarate)苄酯(8.93g，28.0mmol)的THF(100ml)的搅拌溶液中加入苯基锂(1.0M在乙醚-环己烷中，33.5ml，33.5mmol)，使得到的混合物逐渐温热至-40℃，然后搅拌过夜。将氯化铵水溶液加入反应混合物中，真空除去THF，然后用乙酸乙酯提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)作为洗脱剂，然后从己烷-乙酸乙酯中重结晶，得到[2-(S)-(N-Boc-氨基)-5-氧代-6-苯基]戊酸苄酯(5.02g，45％)，为无色针状物。mp 85-87℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.43(s，9H)，2.07-2.19(m，1H)，2.27-2.36(m，1H)，2.97-3.13(m，2H)，4.44(brs，1H)，5.19(dd，J＝25.2，12.0Hz，2H)，5.19(重叠，1H)，7.28-7.98(多个m，10H)；MS(ESI)m/z 322(M++H)。
于室温下，向[2-(S)-(N-Boc-氨基)-5-氧代-6-苯基]戊酸苄酯(2.20g，5.54mmol)的二氯甲烷(50ml)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(15ml)，将得到的混合物搅拌2小时。真空浓缩该混合物并倾入到碳酸氢钠水溶液中，然后用乙酸乙酯提取。经无水硫酸钠干燥有机层并真空浓缩，得到5-苯基-5-吡咯啉-2-(S)-甲酸苄酯(l.60g，定量)，为黄色固体。该产物可无需进一步纯化而用于下一步反应1H-NMR(CDCl3)δ2.20-2.29(m，1H)，2.32-2.42(m，1H)，2.96-3.05(m，1H)，3.12-3.21(m，1H)，4.96-5.00(m，1H)，5.24(s，2H)，7.31-7.49(m，8H)，7.88-7.91(m，2H)；MS(ESI)m/z 280(M++H)。
于室温下，将5-苯基-5-吡咯啉-2-(S)-甲酸苄酯(1.59g，5.69mmol)和Pd/C(10％，128mg)在甲醇(30ml)中的混合物在氢气氛下搅拌28小时。过滤该混合物，真空浓缩滤液。使残留物溶于乙腈-水(3∶2，25ml)中，加入二碳酸二叔丁酯(1.86g，8.54mmol)和1.0M氢氧化钠(8.54ml，8.54mmol)，将得到的混合物搅拌30分钟。真空浓缩该混合物并倾入到碳酸氢钠水溶液中，然后用乙酸乙酯提取。用水、饱和盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(9∶1)洗脱，从己烷-乙酸乙酯中重结晶，得到N-Boc-5-(R)-苯基-(S)-脯氨酸(810mg，49％)，为无色固体。Mp 113-117℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.13(s，9H)，1.43(brs，1H)，1.96(brs，1H)，2.09(brs，1H)，2.31-2.34(m，1H)，2.46(brs，1H)，4.52(brs，1H)，4.69(brs，1H)，7.22-7.37(m，5H)。
于室温下，向N-Boc-5-(R)-苯基-2-(S)-脯氨酸(1.14g，3.91mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入10M-BH3·Me2S(780ml，7.82mmol)，将得到的混合物在回流下加热30分钟。将该混合物倾入1N HCl水溶液中，用乙酸乙酯提取。经无水硫酸钠干燥有机层，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到N-Boc-2-(S)-羟甲基-5-(R)-苯基吡咯烷(1.11g，定量)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.19(brs，9H)，1.65(brs，1H)，1.83-1.90(m，1H)，1.98-2.06(m，1H)，2.22-2.31(m，1H)，3.75-3.86(m，2H)，4.16-4.19(m，1H)，4.83(t，J＝6.8Hz，1H)，4.89(brs，1H)，7.19-7.31(m，5H)；MS(ESI) m/z 278(M++H)。
于室温下，向N-Boc-2-(S)-羟甲基-5-(R)-苯基吡咯烷(1.10g，3.97mmol)、三苯膦(1.25g，4.76mmol)和4-羟基苯甲酸甲酯(724mg，4.76mmol)的搅拌溶液中加入偶氮二羧酸二异丙酯(955ml，4.76mmol)，将得到的混合物于60℃搅拌45分钟。真空浓缩该混合物，残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)作为洗脱剂，得到4-[N-Boc-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.31g，80％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.19和1.47(brs，共9H)，2.09-2.15(m，3H)，2.33-2.37(m，1H)，3.94(s，3H)，4.30(brs，1H)，4.41(brs，2H)，4.77(brs，1H)，7.03(d，J＝8.8Hz，2H)，7.24-7.36(m，5H)，8.03-8.06(m，2H)；MS(ESI)m/z 412(M++H)。
于室温下，向4-[N-Boc-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.28g，3.11mmol)的二氯甲烷(30ml)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(10ml)，将得到的混合物搅拌45分钟。真空浓缩该混合物并倾入碳酸氢钠水溶液中，然后用氯仿提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩，得到4-[5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(363mg，定量)，为黄色油状物。该产物不经进一步纯化而用于随后的反应。1H-NMR(CDCl3)δ1.71-1.83(m，2H)，2.03-2.10(m，1H)，2.15-2.24(m，1H)，3.68-3.74(m，1H)，3.89(s，3H)，4.01-4.09(m，2H)，4.28(t，J＝7.2Hz，1H)，6.95(d，J＝8.8Hz，2H)，7.22-7.27(m，1H)，7.33(t，J＝8.0Hz，2H)，7.42(d，J＝7.6Hz，2H)，8.00(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(ESI)m/z 312(M++H)，353(M++CH3CN)。
于室温下，向4-[5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(135mg，0.43mmol)，4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(136mg，0.43mmol)和N，N-二-甲基氨基吡啶(52.9mg，0.43mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(90.8mg，0.48mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(1∶5)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(271mg，定量)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.00-2.18(m，3H)，2.31-2.41(m，1H)，2.27(s，3H)，3.31(s，2H)，3.67(s，3H)，3.89(s，3H)，4.35-4.48(m，2H)，4.60(brs，1H)，4.92(t，J＝6.8Hz，1H)，6.51(d，J＝8.4Hz，1H)，6.62(s，1H)，6.96(d，J＝8.8Hz，1H)，7.11-7.40(多个m，8H)，7.51(d，J＝8.0Hz，1H)，7.97-8.00(m，2H)；MS(ESI)m/z 608(M++H)。
于室温下，向4-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(243mg，0.40mmol)的甲醇-THF(1∶1，10ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(2.4ml，2.40mmol)，搅拌下，将得到的混合物于60℃加热1.5小时。将该反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)洗脱，得到145(224mg，94％)，为无色无定形固体。MW 593.671H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ 2.00-2.19(m，3H)，2.28和2.30(s，共3H)，2.45-2.49(m，1H)，3.37(dd，J＝39，16Hz，2H)，3.77和3.80(s，共3H)，3.92-5.18(多个m，4H)，6.48-8.03(多个m，16H)；MS(FAB)m/z594(M++H)。实施例1384-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向4-[5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(142mg，0.46mmol)，4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(153mg，0.46mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(55.7mg，0.46mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(95.7mg，0.50mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(1∶5)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(260mg，90％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.00-2.19(m，3H)，2.35-2.44(m，1H)，3.35(s，2H)，3.76(s，3H)，3.89(s，3H)，4.38-4.48(m，2H)，4.63(brs，1H)，4.94(t，J＝7.2Hz，1H)，6.53(d，J＝8.4Hz，1H)，6.66(s，1H)，6.96-7.01(m，3H)，7.12-7.42(多个m，8H)，7.87(d，J＝8.0Hz，1H)，7.98(d，J＝8.8Hz，2H)，8.17-8.19(m，1H)；MS(ESI)m/z 627(M+)，628(M++H)。
于室温下，向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(251mg，0.40mmol)的甲醇-THF(1∶1，10ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(2.4ml，2.40mmol)，搅拌下，将得到的混合物于60℃加热1.5小时。将该反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)洗脱，得到146(181mg，74％)，为无色无定形固体。MW 614.091H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.99-2.19(m，3H)，2.42-2.53(m，1H)，3.38(dd，J＝39，15Hz，2H)，3.79和3.80(s，共3H)，3.94-5.19(多个m，4H)，6.49-8.05(多个m，16H)；MS(FAB)m/z 614(M++H)；C35H34ClN3O6·H2O的分析计算值C，65.06；H，5.62；N，6.50。实测值C，65.03；H，5.75；N，6.45。实施例1394-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基乙氧基]苯甲酸
于室温下，向4-[5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(146mg，0.47mmol)，4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(178mg，0.47mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(57.4mg，0.47mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(99.0mg，0.52mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(1∶5)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(288mg，91％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.00-2.20(m，3H)，2.34-2.43(m，1H)，3.35(s，2H)，3.72(s，3H)，3.89(s，3H)，4.38-4.49(m，2H)，4.62(brs，1H)，4.94(t，J＝7.2Hz，1H)，6.54(d，J＝8.4Hz，1H)，6.67(s，1H)，6.91-7.05(m，4H)，7.28-7.42(多个m，7H)，7.51(d，J＝8.0Hz，2H)，7.87(d，J＝8.4Hz，1H)，7.99(d，J＝8.8Hz，2H)，8.14(d，J＝8.4Hz，2H)；MS(ESI)m/z 672(M+)，674(M++2)。
于室温下，向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(270mg，0.40mmol)的甲醇-THF(1∶1，10ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(2.0ml，2.0mmol)，搅拌下，将得到的混合物于60℃加热1小时。将该反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)洗脱，得到147(212mg，80％)，为无色无定形固体。MW 658.541H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.99-2.19(m，3H)，2.42-2.53(m，1H)，3.38(dd，J＝39，16Hz，2H)，3.79和3.80(s，共3H)，3.94-5.19(多个m，4H)，6.49-8.00(多个m，16H)；MS(FAB)m/z 658(M+)，660(m++2)；实施例1404-[1-[4-[N’-(2，6-二氯苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向4-[5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(109mg，0.35mmol)、4-[N’-(2，4-二氯苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(129mg，0.35mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(42.8mg，0.35mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(73.4mg，0.39mmol)，将得到的混合物搅拌6小时。将反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(1∶4)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2，6-二氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(208mg，90％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.00-2.21(m，3H)，2.33-2.39(m，1H)，3.31(s，2H)，3.69(s，3H)，3.88(s，3H)，4.34-4.45(m，2H)，4.59(brs，1H)，4.93(t，J＝6.8Hz，1H)，6.47(d，J＝8.0Hz，1H)，6.63(s，1H)，6.68(s，1H)，6.92-6.95(m，2H)，7.12-7.41(多个m，9H)，7.96-8.01(m，4H)；MS(FAB) m/z 662(M++H)。
于室温下，向4-[1-[4-[N’-(2，6-二氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(186mg，0.28mmol)的甲醇-THF(1∶1，10ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(1.4ml，1.4mmol)，搅拌下，将得到的混合物于60℃加热2.5小时。将该反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)洗脱，得到148(166mg，91％)，为无色无定形固体。MW 648.531H-NMR(CDCl3)δ2.00-2.18(m，3H)，2.34-2.40(m，1H)，3.33(s，2H)，3.68(s，3H)，4.37-4.47(m，2H)，4.61(brs，1H)，4.94(t，J＝6.8Hz，1H)，6.48(d，J＝8.0Hz，1H)，6.63(s，1H)，6.96(d，J＝8.4Hz，3H)，7.12-7.38(多个m，9H)，7.95(d，J＝8.0Hz，1H)，8.01(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(FAB)m/z 648(M++H)。实施例1414-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于室温下，向4-[5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(125mg，0.40mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酸(146mg，0.40mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(49.0mg，0.40mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(84.1mg，0.44mmol)，将得到的混合物搅拌6小时。将反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(1∶4)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(238mg，90％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.92(s，3H)，2.09-2.27(m，3H)，2.42-2.50(m，1H)，3.22-3.41(m，2H)，3.88(s，3H)，4.39(d，J＝4.4Hz，1H)，4.64(brs，1H)，5.00(t，J＝6.8Hz，1H)，6.72(s，1H)，6.81-6.93(多个m，8H)，7.22-7.42(多个m，6H)，8.01(d，J＝8.4Hz，2H)，8.13(d，J＝8.0Hz，1H)；MS(FAB)m/z 656(M+)，658(M++2)。
于室温下，向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲基苯基乙酰基]-5-(R)-苯基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(216mg，0.33mmol)的甲醇-THF(1∶1，10ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(1.7ml，1.7mmol)，搅拌下，将得到的混合物于60℃加热2.5小时。将该反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)洗脱，得到149(166mg，91％)，为无色无定形固体。MW 642.541H-NMR(CDCl3)δ2.01(s，3H)，2.05-2.25(m，3H)，2.43-2.48(m，1H)，3.34(dd，J＝45，16Hz，2H)，4.38-4.45(m，2H)，4.66(brs，1H)，4.99(t，J＝6.8Hz，1H)，6.77(s，1H)，6.82-6.88(m，2H)，6.94(d，J＝8.8Hz，2H)，7.15-7.55(多个m，10H)，8.00(d，J＝8.8Hz，2H)，8.14(d，J＝7.2Hz，1H)；MS(FAB)m/z 642(M+)，644(M++2)。实施例1424-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-甲基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于-78℃，向N-Boc-吡咯戊二酸苄酯(7.55g，23.6mmol)的THF(100ml)的搅拌溶液中加入甲基锂(1.1M在乙醚中，28.4ml，32.4mmol)，使得到的混合物逐渐温热至室温，然后搅拌过夜。将氯化铵水溶液加入反应混合物中，真空除去THF，然后用乙酸乙酯提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(3∶1)作为洗脱剂，得到[2-(S)-(N-Boc-氨基)-5-氧代-6-甲基]戊酸苄酯(5.02g，45％)，为无色针状物。mp 85-87℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.43(s，9H)，1.61-2.15(多个m，3H)，2.09(s，3H)，2.41-2.55(m，2H)，4.30(brs，1H)，4.70(d，J＝5.6Hz，1H)，5.12-5.21(m，2H)，7.29-7.37(m，5H)；MS(ESI)m/z 336(M++H)。
于室温下，向[2-(S)-(N-Boc-氨基)-5-氧代-6-甲基]戊酸苄酯(4.46g，13.3mmol)的二氯甲烷(50ml)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(20ml)，将得到的混合物搅拌1.5小时。真空浓缩该混合物，使其溶于甲苯中，然后蒸发得到5-甲基-5-吡咯啉-2-(S)-甲酸苄酯三氟乙酸盐(5.74g，定量)，为粗品棕色油。向在甲醇(30ml)中的该化合物(1.97g，5.94mmol)中加入Pd/C(10％，153mg)，在氢气氛下，将得到的混合物搅拌3天。过滤该混合物，真空浓缩滤液，得到5-甲基-5-吡咯烷-2-(S)-甲酸三氟乙酸盐(956mg，66％)，为白色粗品固体。于室温下，向该化合物(939mg，3.86mmol)和二碳酸二叔丁酯的甲醇-水(15∶1，16ml)溶液中加入1.0M氢氧化钠(8.49ml，8.49mmol)，将得到的混合物搅拌1小时。蒸发得到的混合物并倾入到1N HCl水溶液中，然后用氯仿/甲醇(5∶1)提取。经无水硫酸钠干燥有机层，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(7∶1)洗脱，得到N-Boc-5-(R)-甲基-(S)-脯氨酸(711mg，80％)，为无色油状物。1H-NMR(CD3OD)δ1.27(d，J＝6.0Hz，3H)，1.41-1.46(m，9H)，1.62-1.64(m，1H)，1.96-2.01(m，2H)，2.22(brs，1H)，3.94(brs，1H)，4.17(brs，1H)；MS(ESI)m/z 230(M++H)。
于室温下，向N-Boc-5-(R)-甲基-2-(S)-脯氨酸(1.03g，4.49mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入10M-BH3·Me2S(1.57ml，15.7mmol)，将得到的混合物在回流下加热5小时。将该混合物倾入1N HCl水溶液中，用乙酸乙酯提取。经无水硫酸钠干燥有机层，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(1∶3)作为洗脱剂，得到N-Boc-2-(S)-羟甲基-5-(R)-甲基吡咯烷(838mg，87％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.17(d，J＝6.0Hz，3H)，1.48(s，9H)，1.48-1.64(m，2H)，1.90-2.11(m，2H)，3.52-3.57(m，1H)，3.68-3.70(m，1H)，3.94-4.13(m，1H)。
于室温下，向N-Boc-2-(S)-羟甲基-5-(R)-甲基吡咯烷(820mg，3.81mmol)、三苯膦(1.10g，4.19mmol)和4-羟基苯甲酸甲酯(580mg，3.81mmol)的搅拌溶液中加入偶氮二羧酸二异丙酯(841ml，4.19mmol)，将得到的混合物于60℃搅拌1小时。真空浓缩该混合物，残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(5∶1)作为洗脱剂，得到4-[N-Boc-5-(R)-甲基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.32g，80％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.24(brs，3H)，1.49(s，9H)，1.55-1.70(m，2H)，1.94-2.11(m，2H)，3.88(s，3H)，3.88(重叠，1H)，4.06-4.20(m，2H)，6.93-6.96(m，2H)，7.97(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(ESI)m/z 350(M++H)。
于室温下，向4-[N-Boc-5-(R)-甲基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.29g，3.70mmol)的二氯甲烷(30ml)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(10ml)，将得到的混合物搅拌35分钟。真空浓缩该混合物并倾入碳酸氢钠水溶液中，然后用氯仿提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩，得到4-[5-(R)-甲基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(871mg，95％)，为无色油状物。该产物不经进一步纯化而用于随后的反应。1H-NMR(CDCl3)δ1.18(d，J＝6.4Hz，3H)，1.30-1.40(m，1H)，1.59-1.67(m，1H)，1.87-1.97(m，2H)，3.19-3.27(m，1H)，3.49-3.55(m，1H)，3.87(s，3H)，3.89-4.05(m，2H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，7.96(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(ESI)m/z 250(M++H)。
于室温下，向4-[5-(R)-甲基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(141mg，0.57mmol)、4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(178mg，0.57mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(69.0mg，0.57mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(120mg，0.62mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用乙酸乙酯作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-甲基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(297mg，96％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.24-1.34(m，3H)，1.93-2.18(多个m，4H)，2.28(s，3H)，3.65(s，3H)，3.88(s，3H)，3.62-3.87(m，3H)，4.11-4.38(多个m，3H)，6.42-8.06(多个m，13H)；MS(ESI)m/z546(M++H)。
于室温下，向4-[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-5-(R)-甲基-2-(S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸甲酯(279mg，0.51mmol)的甲醇-THF(1∶1，10ml)的搅拌溶液中加入1.0M氢氧化钠(2.56ml，2.56mmol)，搅拌下，将得到的混合物于60℃加热2小时。将该反应混合物倾入1N HCl中，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(15∶1)洗脱，得到150(269mg，99％)，为无色无定形固体。MW 531.601H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.28-1.35(m，3H)，1.74-2.21(多个m，4H)，2.28(s，3H)，3.71-4.37(多个m，6H)，6.76-7.99(多个m，11H)；MS(ESI)m/z 532(M++H)。实施例1434-[反式-4-氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基甲氧基]苯甲酸
于0℃，向4-(反式-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(1.0g，2.86mmol)和TEA(1.2ml，8.6mmol)的二氯甲烷(20.0ml)溶液中加入三氟乙酸酐(720mg，3.43mmol)。于室温下搅拌2.5小时后，将水加入该溶液中，用二氯甲烷提取。用水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-正己烷(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到4-(反式-1-叔丁氧基羰基-4-三氟乙酰氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(940mg，74％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.02-2.18(m，1H)，2.41-2.52(m，1H)，3.30-3.45(m，1H)，3.80-3.90(m，1H)，3.88(s，3H)，4.00-4.30(m，3H)，4.65-4.75(m，1H)，6.50(brs，1H)，6.91-6.94(m，2H)，7.96-7.99(m，2H)。
于0℃，向4-(反式-1-叔丁氧基羰基-4-三氟乙酰氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(470mg，1.05mmol)的二氯甲烷(10.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下，将该反应混合物搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(314mg，1.0mmol)、HOBt(162mg，1.2mmol)和三乙胺(417ml，3.0mmol)在THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(288mg，1.5mmol)。于室温下，将该反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤有机层，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-正己烷(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[反式-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-三氟乙酰氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(350mg，52％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.01-2.10(m，1H)，2.31(s，3H)，2.42-2.48(m，1H)，3.45-3.50(m，1H)，3.56-3.59(m，5H)，3.89(s，3H)，4.07-4.14(m，2H)，4.38-4.42(m，1H)，4.50-4.60(m，1H)，4.72-4.80(m，1H)，6.33(s，1H)，6.60-6.85(m，3H)，7.06-7.26(m，3H)，7.45-7.52(m，1H)，7.93-8.05(m，3H)。
向4-[反式-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-三氟乙酰氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(150mg，0.23mmol)的THF(3.0ml)和甲醇(2.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.70ml，0.70mmol)。于60℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到151(100mg，81％)，为白色结晶固体。MW 532.59 mp 170-171℃；IR (KBr)3264，2937，1604，1535，1415，1376，1255，1224，1033 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.80-1.90(m，1H)，2.10-2.20(m，1H)，2.24(s，3H)，3.55-3.80(m，3H)，3.57(s，2H)，4.08-4.18(m，2H)，4.36-4.60(m，1H)，6.72-7.16(m，7H)，7.77-8.01(m，4H)，8.46(s，1H)，8.54(s，1H)；MS(FAB)m/z 532(M++1)；C29H32N406·2.0H20的分析计算值C，61.26；H，6.38；N，9.85。实测值C，61.07；H，6.32；N，9.58。实施例1444-[反式-4-氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯盐酸盐
于室温下，向4-[反式-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-三氟乙酰氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，0.31mmol)的甲醇(4.0mml)的搅拌溶液中加入水(2.0ml)和碳酸钾(138mg，1.0mmol)。于室温下搅拌18小时后，将水加入该混合物中，用二氯甲烷提取。用水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(5∶95-15∶85，v/v)作为洗脱剂。使该产物溶于乙醇(5.0ml)中，向其中加入1N HCl(在乙醇中)(1.0ml，1.0mmol)。真空浓缩该混合物得到152(120mg，63％)，为无定形固体。MW 546.61IR (KBr)3382，2948，2879，1604，1533，1286，1255，771 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.10-2.30(m，2H)，3.59-3.70(m，3H)，3.77-3.80(m，8H)，4.00-4.24(m，2H)，4.47-4.67(m，1H)，6.70-7.16(m，7H)，7.77-8.00(m，4H)，8.49(s，1H)，8.55(s，1H)；MS(FAB)m/z 547(M++1)；C30H34N4O6·HCl·1.4H2O的分析计算值C，59.24；H，6.26；N，9.21；Cl，5.83。实测值C，59.42；H，6.42；N，9.04；Cl，6.11。实施例1454-[反式-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-甲基氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于室温下，向4-(反式-1-叔丁氧基羰基-4-三氟乙酰氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(520mg，1.17mmol)的DMF(10.0ml)的搅拌溶液中加入碳酸钾(321mg，2.33mmol)和甲基碘(330mg，2.33mmol)。于50℃将该反应混合物搅拌18小时。将水加入该混合物中，用乙酸乙酯提取。用水洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-正己烷(1∶2，v/v)作为洗脱剂，得到4-[反式-1-叔丁氧基羰基-4-(N-甲基-三氟乙酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(390mg，73％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.12-2.40(m，2H)，2.96和3.05(各为s，共3H)，3.28-3.70(m，2H)，3.88(s，3H)，3.95-4.42(m，3H)，5.10-5.40(m，1H)，6.89-6.91(m，2H)，7.96-8.00(m，2H)。
于0℃，向4-[反式-1-叔丁氧基羰基-4-(N-甲基-三氟乙酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(390mg，0.85mmol)的二氯甲烷(8.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(279mg，0.89mmol)、HOBt(143mg，1.1mmol)和三乙胺(246ml，1.77mmol)在THF(8.0ml)和MeCN(8.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(255mg，1.3mmol)。于室温下，将得到的混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-正己烷(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[反式-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(N-甲基-三氟乙酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(480mg，82％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.18-2.35(m，2H)，2.31(s，3H)，2.87和2.97(各为s，共3H)，3.45-3.46(m，3H)，3.47(s，3H)，3.49(s，2H)，3.88(s，3H)，4.30-4.70(m，2H)，5.20-5.40(m，1H)，6.38-6.43(m，1H)，6.67-6.86(m，4H)，7.09-7.24(m，4H)，7.51-7.54(m，1H)，7.93-8.08(m，3H)。
向4-[反式-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(N-甲基-N-三氟乙酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(240mg，0.37mmol)的THF(5.0ml)和甲醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.27ml，1.27mmol)。于60℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到153(140mg，70％)，为白色结晶固体。MW 546.61 mp162-164℃ IR(KBr)3338，1604，1535，1255，1033，755 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.85-1.95(m，1H)，2.10-2.20(m，1H)，2.24(s，3H)，2.34和2.39(各为s，共3H)，3.41-3.71(m，3H)，3.58(s，2H)，3.80(s，3H)，4.05-4.20(m，2H)，4.36-4.60(m，1H)，6.73-7.16(m，7H)，7.77-8.01(m，4H)，8.45(s，1H)，8.53(s，1H)；MS(FAB)m/z 547(M++1)；C30H34N4O6·2.5H2O的分析计算值C，60.90；H，6.64；N，9.47。实测值C，61.01；H，6.50；N，9.31。实施例1464-[反式-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-甲基氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯
于室温下，向4-[反式-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(N-甲基三氟乙酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(240mg，0.36mmol)的THF(5.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入水(2.0ml)和碳酸钾(138mg，1.0mmol)。于室温下搅拌18小时后，将水加入该混合物中，用二氯甲烷提取。用水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(5/95-20/80，v/v)作为洗脱剂。使该产物溶于乙醇(5.0ml)中，向其中加入1N HCl(在乙醇中)(0.71ml，0.71mmol)。真空浓缩该混合物得到154(180mg，85％)，为无定形固体。MW 560.64 IR(KBr)3311，2692，2453，1712，1604，1533 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，2.15-2.30(m，2H)，2.60(br s，3H)，3.60-4.20(m，5H)，3.78-3.81(m，8H)，4.47-4.70(m，1H)，6.71-7.16(m，7H)，7.77-8.00(m，4H)，8.48(s，1H)，8.55(s，1H)，9.21(br s，2H)；MS(FAB)m/z 561(M++1)；C31H36N4O6·HCl·1.4H2O的分析计算值C，59.83；H，6.45；N，9.00；Cl，5.70。实测值C，60.08；H，6.51；N，8.68；Cl，5.99。实施例1474-[反式-4-二甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向反式-1-叔丁氧基羰基-(2S)-羟基甲基-4-羟基吡咯烷(2.17g，10.0mmol)和咪唑(2.04g，30.0mmol)的DMF(50ml)的搅拌溶液中加入TBDPS-Cl(3.03g，11.0mmol)。于室温下搅拌该反应混合物18小时后，将水加入其中，用乙酸乙酯提取。用水洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(3∶2，v/v)作为洗脱剂，得到反式-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基-4-羟基吡咯烷(1.5g，33％)，为白色结晶固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.03(s，9H)，1.25和1.32(各为s，9H)，1.90-2.10(m，1H)，2.30-2.40(m，1H)，3.40-3.80(m，3H)，3.95-4.15(m，2H)，4.45-4.55(m，1H)，，7.37-7.39(m，6H)，7.63-7.64(m，4H)。
于室温下，向反式-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基-4-羟基吡咯烷(910mg，2.0mmol)和三苯膦(628mg，2.4mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入四溴化碳(993mg，3.0mmol)。于室温下，将该混合物搅拌0.5小时。将正己烷(40ml)加入其中。过滤除去产生的固体，真空干燥。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷至正己烷-乙酸乙酯(3∶2，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-4-溴-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基吡咯烷(1.0g，定量)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.06(s，9H)，1.31和1.45(各为s，9H)，2.63(m，2H)，3.49(m，1H)，3.89-4.14(m，5H)，7.35-7.42(m，6H)，7.64-7.66(m，4H)。
于室温下，向顺式-4-溴-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基吡咯烷(480mg，0.93mmol)的DMF(5ml)的搅拌溶液中加入NaN3(241mg，3.70mmol)。于70℃将该反应混合物搅拌3天。将水加入其中，用乙酸乙酯提取。用水洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物可不经进一步纯化而用于随后的反应。于室温及一个大气压下，将粗产物的乙醇(10ml)溶液经10％Pd-C氢化4小时。过滤除去催化剂，真空浓缩滤液，得到反式-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基吡咯烷(400mg，95％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.06(s，9H)，1.32和1.45(各为s，共9H)，2.20-2.35(m，1H)，3.05-3.18(m，1H)，3.55-4.05(m，6H)，7.35-7.41(m，6H)，7.61-7.69(m，4H)。
于0℃，向反式-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基吡咯烷(400mg，0.88mmol)、乙酸(120ml，2.0mmol)和37％HCHO水溶液(500ml)的甲醇(10ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(111mg，1.76mmol)。于室温下，搅拌反应混合物18小时。真空浓缩后，加入水，用二氯甲烷提取。经硫酸钠干燥提取物并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(3∶97，v/v)作为洗脱剂，得到反式-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基-4-二甲基氨基吡咯烷(330mg，78％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.06(s，9H)，1.33和1.45(各为s，共9H)，1.80-2.25(m，2H)，2.23(br s，6H)，2.95-4.05(m，6H)，7.36-7.39(m，6H)，7.63-7.65(m，4H)。
于0℃，向反式-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基-4-二甲基氨基吡咯烷(330mg，0.68mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入TBAF(1.0M在THF中溶液，1.0ml，1.0mmol)。于室温下搅拌该反应混合物2小时。真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(3∶97-20∶80，v/v)作为洗脱剂，得到反式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-羟甲基吡咯烷(180mg，定量)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，2.23(s，6H)，1.65-1.75(m，2H)，2.75-4.10(m，4H)，3.61(d，J＝5.6Hz，2H)。
于0℃，向反式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-羟甲基吡咯烷(180mg，0.73mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(114mg，0.75mmol)和三苯膦(296mg，1.13mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入DIAD(227mg，1.13mmol)。将该反应混合物于70℃搅拌18小时，真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶2，v/v)至甲醇-二氯甲烷(5∶95，v/v)作为洗脱剂，得到4-[反式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(180mg，68％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，1.80-1.95(m，1H)，2.20-2.23(m，1H)，2.24(s，6H)，2.90-2.95(m，1H)，3.10-3.30(m，1H)，3.50-3.65(m，1H)，3.88(s，3H)，3.95-4.35(m，3H)，6.93-6.95(m，2H)，7.96-7.98(m，2H)。
于0℃，向4-(反式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，0.53mmol)的二氯甲烷(6ml)的搅拌溶液中加入TFA(3ml)，将该反应混合物于室温下搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(166mg，0.53mmol)、HOBt(71mg，0.53mmol)和三乙胺(140ml，1.10mmol)在THF(5ml)和MeCN(5ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(152mg，0.79mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯至二氯甲烷-甲醇(8∶92，v/v)作为洗脱剂，得到4-[反式-4-二甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(260mg，86％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.95-2.15(m，3H)，2.23(s，6H)，2.31(s，3H)，3.30-3.34(m，1H)，3.57(s，2H)，3.61(s，3H)，3.70-3.75(m，1H)，4.11-4.15(m，2H)，4.45-4.50(m，1H)，6.34(s，1H)，6.72-6.88(m，4H)，7.08-7.24(m，4H)，7.51-7.53(m，1H)，7.92-8.07(m，3H)。
向4-[反式-4-二甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(260mg，0.45mmol)的THF(4.0ml)和甲醇(2.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.90ml，0.90mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到155(200mg，79％)，为白色结晶固体。MW 560.64 mp 145-150℃；IR (KBr)3355，2948，1698，1604，1533 1454，1417，1255，1226，1166，1035，755 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.82-1.98(m，1H)，2.08-2.11(m，1H)，2.20(s，6H)，2.25(s，3H)，3.40-3.60(m，3H)，3.64(s，2H)，3.82(s，3H)，4.01-4.16(m，2H)，4.36(m，1H)，6.74-7.15(m，7H)，7.77-8.02(m，4H)，8.44(s，1H)，8.54(s，1H)；MS(FAB)m/z 561(M++1)；C31H36N4O6·1.2H2O的分析计算值C，63.95；H，6.65；N，9.62。实测值C，63.82；H，6.72；N，9.44。实施例1484-[反式-4-二甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯盐酸盐
于0℃，向反式-4-[4-二甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸(80mg，0.14mmol)的甲苯(4.0ml)和甲醇(1.0ml)的搅拌溶液中加入TMSCHN2(2.0M在己烷中，100ml，0.20mmol)。于室温下搅拌该反应混合物1.5小时。真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(5∶95，v/v)作为洗脱剂。使产物溶于乙醇(5.0ml)中，将1N HCl(在乙醇中，244μl，0.244mmol)加入其中。真空浓缩该混合物，得到156(72mg，88％)，为无定形固体。MW 574.67 IR(KBr)3345，2950，2586，1712，1604，1511，1454，1284，1255，1170，1114，1029，850，771 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.35-2.37(m，2H)，2.77-2.81(m，6H)，3.62-3.71(m，2H)，3.79-3.81(m，8H)，3.99-4.16(m，3H)，4.50-4.70(m，1H)，6.74-7.16(m，7H)，7.77-8.01(m，4H)，8.48(s，1H)，8.55(s，1H)；C32H38N4O6·1.0HCl·1.2H2O的分析计算值C，60.74；H，6.59；N，8.85。实测值C，61.03；H，6.78；N，8.33。实施例1494-[顺式-4-二甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向顺式-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基-4-羟基吡咯烷(1.82mg，4.0mmol)、苯邻二甲酰亚胺(647mg，4.4mmol)和三苯膦(1.26g，4.8mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入DIAD(889mg，4.4mmol)。将该反应混合物于室温下搅拌18小时，真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(5/1，v/v)作为洗脱剂，得到N-[顺式-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基-4-吡咯烷基]苯邻二甲酰亚胺(1.6g，69％)，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.07(s，9H)，1.30和1.44(各为s，共9H)，2.27-2.37(m，1H)，2.94-2.96(m，1H)，3.81-4.09(m，5H)，4.72(m，1H)，7.37-7.38(m，6H)，7.67-7.74(m，6H)，7.84-7.86(m，2H)。
于室温下，向N-[顺式-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基-4-吡咯烷基]苯邻二甲酰亚胺(1.60g，2.74mmol)的乙醇(8ml)的搅拌溶液中加入NH2NH2·H2O(206mg，4.11mmol)。于70℃，将该反应混合物搅拌1小时。真空浓缩该混合物。过滤除去产生的固体，用氯仿洗涤。真空浓缩滤液。过滤除去产生的固体，用氯仿洗涤。真空浓缩滤液。滤出产生的固体，用氯仿洗涤。真空浓缩滤液，得到顺式-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基吡咯烷(1.3g，定量)，为淡黄色油状物。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。1H-NMR(CDCl3)δ1.06(s，9H)，1.30和1.45(各为s，共9H)，1.59(m，1H)，1.85(m，1H)，2.94(m，1H)，3.44(m，1H)，3.78-4.07(m，4H)，7.36-7.41(m，6H)，7.51-7.65(m，4H)。
于0℃，向顺式-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基吡咯烷(1.24g，2.74mmol)、乙酸(374μl，5.48mmol)和37％HCHO水溶液(1.0ml)的甲醇(20ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(345mg，5.48mmol)。于室温下搅拌反应混合物18小时。真空浓缩后，加入水，用二氯甲烷提取。经硫酸钠干燥提取物并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(3/97，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-1-叔丁氧基羰基-(2S)-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基-4-二甲基氨基吡咯烷(1.1g，83％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.05(s，9H)，1.29和1.45(各为s，共9H)，1.95-2.04(m，1H)，2.20-2.26(m，1H)，2.27(s，6H)，2.54(m，1H)，3.00-3.02(m，1H)，3.62-4.03(m，4H)，7.34-7.41(m，6H)，7.63-7.65(m，4H)。
于0℃，向顺式-1-叔丁氧基羰基-2-(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基-4-二甲基氨基吡咯烷(1.1g，2.27mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入TBAF(1.0M在THF中的溶液，4.5ml，4.5mmol)。于室温下搅拌该反应混合物2小时。真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(3/97-20∶80，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-羟甲基吡咯烷(580mg，定量)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.47(s，9H)，1.25-1.96(m，2H)，2.25(S，6H)，2.53-2.58(m，1H)，3.17-4.02(m，5H)。
于0℃，向顺式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-羟甲基吡咯烷(555mg，2.27mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(380mg，2.5mmol)和三苯膦(1.07g，4.09mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入DIAD(826mg，4.09mmol)。将该反应混合物于70℃搅拌18小时，真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1/2，v/v)甲醇-二氯甲烷(5/95，v/v)作为洗脱剂，得到4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(260mg，30％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，1.70-1.90(m，1H)，2.26(s，6H)，2.33(m，1H)，2.57(m，1H)，3.06(m，1H)，3.85-4.23(m，4H)，3.88(s，3H)，6.93(m，2H)，7.95(m，2H)。
于0℃，向4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(208mg，0.55mmol)的二氯甲烷(6ml)的搅拌溶液中加入TFA(3ml)，将该反应混合物于室温下搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(173mg，0.55mmol)、HOBt(74mg，0.55mmol)和三乙胺(153μl，1.1mmol)在THF(6ml)和MeCN(6ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(160mg，0.83mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯至二氯甲烷-甲醇(5/95，v/v)作为洗脱剂，得到4-[顺式-4-二甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(270mg，47％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.95-2.04(m，1H)，2.25(s，6H)，2.32(s，3H)，2.61(m，1H)，3.21(m，1H)，3.56-3.58(m，5H)，3.80-3.83(m，1H)，3.88(s，3H)，4.18-4.20(m，1H)，4.41-4.45(m，2H)，6.36(s，1H)，6.68-6.85(m，4H)，7.08-7.25(m，4H)，7.52-7.55(m，1H)，7.91-8.07(m，3H)。
向4-[顺式-4-一甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(270mg，0.47mmol)的THF(4.0ml)和甲醇(2.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.0ml，1.0mmol)。于70℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到157(170mg，65％)，为白色结晶固体。MW 560.64 mp 147-150℃；IR (KBr)3353，2952，1700，1604，1533 1454，1415，1255，1166，1035，755cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.83-1.84(m，1H)，2.08-2.10(m，1H)，2.21(br s，6H)，2.24(s，3H)，3.00(m，2H)，3.60(s，2H)，3.78(s，3H)，3.85-4.29(m，4H)，6.71-7.16(m，7H)，7.77-8.01(m，4H)，8.46(s，1H)，8.54(s，1H)；MS(FAB)m/z 561(M+H)+；C31H36N4O6·2H2O的分析计算值C，62.40；H，6.76；N，9.39。实测值C，62.51；H，6.60；N，9.36。实施例1504-[顺式-4-二甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯盐酸盐
于0℃，向4-[顺式-4-二甲基氨基-1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸(80mg，0.14mmol)的甲苯(4.0ml)和甲醇(1.0ml)的搅拌溶液中加入TMSCHN2(2.0M在己烷中)(100μl，0.20mmol)。于室温下搅拌该反应混合物1.5小时。真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(5/95，v/v)作为洗脱剂。使产物溶于乙醇(5.0ml)中，将1N HCl(在乙醇中)(244μl，0.244mmol)加入其中。真空浓缩该混合物，得到158(75mg，79％)，为无定形固体。MW 574.67 IR(KBr)3345，2950，2456，1712，1646，1604，1511，1454，1434，1415，1284，1257，1168，1114，1031，771cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.10-2.20(m，2H)，2.25(s，3H)，2.83(m，6H)，3.60-3.62(m，2H)，3.76-3.81(m，8H)，4.20-4.33(m，4H)，6.71-7.17(m，6H)，7.77-7.98(m，5H)，8.47(s，1H)，8.55(s，1H)；MS(FAB)m/z 574(M+H)+；C32H38N4O6·1.0HCl·1.3H2O的分析计算值C，60.57；H，6.61；N，8.83。实测值C，60.80；H，6.82；N，8.44。实施例1514-[反式-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(反式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(430mg，1.1mmol)的二氯甲烷(10.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。将该反应混合物于室温下搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(368mg，1.1mmol)、HOBt(162mg，1.2mmol)和三乙胺(417ml，3.0mmol)在THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(288mg，1.1mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[反式-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸酯(530mg，78％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCL3)δ1.94-1.99(m，1H)，2.48(s，9H)，3.06-3.12(m，1H)，3.33-3.38(m，1H)，3.60(s，2H)，3.68(s，3H)，3.69-3.80(m，1H)，3.88(s，3H)，4.13-4.20(m，2H)，4.56(m，1H)，6.76-7.00(m，5H)，7.22-7.34(m，3H)，7.92-8.00(m，3H)，8.17-8.19(m，1H)。对于HCl盐IR (KBr)3324，2950，2454，1710，1604，1511，1284 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.30-2.40(m，2H)，2.77-2.80(m，6H)，3.60-3.75(m，2H)，3.75-3.85(m，8H)，4.00-4.22(m，3H)，4.50-4.75(m，1H)，6.75-7.43(m，7H)，7.89-8.09(m，4H)，8.87(s，1H)，8.91(s，1H)；MS(FAB)m/z 595(M+H)+；C31H36N4O6Cl·1.0HCl·1.0H2O的分析计算值C，57.23；H，6.04；N，8.61；Cl，10.90。实测值C，57.43；H，6.08；N，8.38；Cl，10.73。
向4-[反式-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(190mg，0.32mmol)的THF(3.0ml)和甲醇(2.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.64ml，0.64mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到159(150mg，83％)，为白色结晶固体。MW 581.06 mp 159-161℃；IR (KBr)3318，2938，1604，1531，1438，1340 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.10-2.40(m，8H)，2.50-2.70(m，2H)，3.85-3.90(m，5H)，4.02-4.18(m，3H)，4.30-4.60(m，1H)，6.75-7.43(m，7H)，7.86-8.09(m，4H)，8.86(s，1H)，8.91(s，1H)；MS(FAB)m/z 581(M+1)+；C30H22N4O6Cl·2H2O的分析计算值C，59.79；H，5.92；N，9.30。实测值C，59.69；H，5.93；N，9.09。实施例1524-[顺式-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(1.2g，3.2mmol)的二氯甲烷(10.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。将该反应混合物于室温下搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(278mg，1.0mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(335mg，1.0mmol)、HOBt(135mg，1.0mmol)和三乙胺(417ml，3.0mmol)在THF(4.0ml)和MeCN(4.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(288mg，1.5mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[顺式-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(500mg，84％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.98-2.50(m，1H)，2.26(s，3H)，2.25-2.40(m，1H)，2.58-2.65(m，1H)，3.20-3.30(m，1H)，3.60(s，2H)，3.64(s，3H)，3.80-3.90(m，1H)，3.88(s，3H)，4.18-4.20(m，1H)，4.42-4.46(m，2H)，6.72-7.00(m，4H)，7.20-7.35(m，5H)，7.91-7.94(m，3H)，8.18-8.21(m，1H)。
向4-[顺式-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-二甲基氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(250mg，0.42mmol)的THF(5.0ml)和甲醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.0ml，1.0mmol)。于70℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到160(170mg，70％)，为白色结晶固体。MW 581.06 mp 165-167℃；IR (KBr)3328，1604，1531，1164，1033 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.80-1.90(m，1H)，2.20-2.50(m，7H)，3.60-3.70(m，2H)，3.77-3.81(m，5H)，4.00-4.30(m，4H)，6.72-7.44(m，7H)，7.86-8.10(m，4H)，8.88-8.92(m，2H)；MS(FAB)m/z 581(M++1)；C30H33N4O6Cl·1.1H2O的分析计算值C，59.87；H，6.06；N，9.31。实测值C，59.65；H，5.76；N，9.09。实施例1534-[顺式-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(2-萘亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，0.57mmol)和TEA(317ml，2.3mmol)的氯仿(10.0ml)的搅拌溶液中加入(2-萘基)磺酰氯(155mg，0.68mmol)。将该反应混合物于室温下搅拌18小时。真空浓缩该反应混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(2∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘基亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(240mg，78％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.25-1.45(br s，9H)，1.70-1.80(m，1H)，2.20-2.40(m，1H)，3.20-3.50(m，2H)，3.90(s，3H)，3.85-4.15(m，3H)，4.55-4.65(m，1H)，6.90-7.10(m，2H)，7.58-8.04(m，8H)，8.43(s，1H)。
向4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-(2-萘基亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(240mg，0.44mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(147mg，0.44mmol)、HOBt(59mg，0.44mmol)和三乙胺(275ml，1.9mmol)在THF(6.0ml)和MeCN(6.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(127mg，0.66mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到4-[顺式-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(2-萘亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，65％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.75-1.80(m，1H)，2.25-2.40(m，1H)，3.43(s，2H)，3.40-3.50(m，1H)，3.60(s，3H)，3.65-3.75(m，1H)，3.90(s，3H)，3.85-3.92(m，1H)，3.95-4.00(m，1H)，4.30-4.40(m，1H)，4.65-4.75(m，1H)，6.26(d，J＝9.3Hz，1H)，6.50(d，J＝8.3Hz，1H)，6.23(s，1H)，6.86(d，J＝8.8Hz，2H)，6.75-7.01(m，1H)，7.23-7.36(m，3H)，7.61-7.96(m，9H)，8.20(d，3＝8.1Hz，1H)，8.43(s，1H)。
向4-[顺式-1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(2-萘亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，0.26mmol)的THF(6.0ml)和甲醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.5ml，0.5mmol)。于70℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到161(210mg，定量)，为白色结晶固体。MW 743.22 mp 135-142℃；IR(KBr)3332，1685，1604，1531，1421，1159 cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.75-1.85(m，1H)，2.05-2.15(m，1H)，3.05-3.15(m，1H)，3.47(s，2H)，3.60-3.80(m，2H)，3.73(s，3H)，4.05-4.20(m，3H)，6.51(d，J＝8.5Hz，1H)，6.74-7.04(m，5H)，7.27-7.31(m，1H)，7.43-7.45(m，2H)，7.66-8.17(m，9H)，8.46(s，1H)，8.91(d，J＝9.5Hz，1H)；MS(FAB)m/z 743(M++1)；C38H35N4O8ClS·0.5H2O的分析计算值C，60.67；H，4.82；N，7.45；Cl，4.26。实测值C，60.77；H，4.84；N，7.21；Cl，4.90。实施例1544-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(2-亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(180mg，0.51mmol)和TEA(283ml，2.0mmol)的氯仿(10.0ml)的搅拌溶液中加入(2-)磺酰氯(122mg，0.56mmol)。将该反应混合物于室温下搅拌18小时。真空浓缩该反应混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-(2-亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(170mg，62％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.40(s，9H)，1.85-1.95(m，1H)，2.29(s，3H)，2.35-2.45(m，1H)，2.62(s，6H)，3.80-4.15(m，3H)，3.89(s，3H)，3.50-3.65(m，1H)，6.94(s，2H)，6.94-7.00(m，2H)，7.99(d，J＝8.8Hz，2H)。
于0℃下，向(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-(2-亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(170mg，0.32mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(121mg，0.32mmol)、HOBt(43mg，0.32mmol)和三乙胺(139ml，1.0mmol)在THF(5.0ml)和MeCN(5.0ml)中的搅拌溶液中加入EDC·HCl(91mg，0.48mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶4，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-(2-亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(210mg，83％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.85-1.90(m，1H)，1.95-2.05(m，1H)，2.32(s，3H)，2.60(s，6H)，3.40-3.50(m，3H)，3.60-3.70(m，2H)，3.68(s，3H)，3.89(s，3H)，3.96-3.99(m，1H)，3.35-3.45(m，1H)，3.70-3.75(m，1H)，6.00(d，J＝9.5Hz，1H)，6.57-7.08(m，9H)，7.29-7.34(m，1H)，7.51-7.53(m，1H)，7.92-7.96(m，3H)，8.15(d，J＝6.8Hz，1H)。
向4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-4-(2-亚磺酰氨基)-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(210mg，0.26mmol)的THF(5.0ml)和甲醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.47ml，0.47mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到162(180mg，87％)，为白色结晶固体。MW 779.70 mp 130-132℃；IR(KBr)3332，1689，1604，1529，1155cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.70-1.85(m，1H)，2.02-2.12(m，1H)，2.25(s，3H)，2.52(s，6H)，3.05-3.12(m，1H)，3.48(s，2H)，3.60-3.70(m，2H)，3.77(s，3H)，3.90-4.20(m，3H)，6.59(d，J＝8.3Hz，1H)，6.77-7.80(m，1H)，6.95-7.01(m，4H)，7.31-7.35(m，1H)，7.60(d，J＝8.1Hz，1H)，7.86-7.97(m，5H)，8.72-8.76(m，1H)，8.89-8.93(m，1H)；MS(FAB)m/z 779(M+)，781(M++2)；C37H39N4O8SBr·0.5H2O的分析计算值C，56.35；H，5.11；N，7.10；Br，10.13。实测值C，56.39；H，5.07；N，6.89；Br，10.25。实施例1554-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-丹酰氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(180mg，0.51mmol)和TEA(283ml，2.0mmol)的氯仿(10.0ml)的搅拌溶液中加入丹磺酰氯(155mg，0.68mmol)。将该反应混合物于室温下搅拌18小时。真空浓缩该反应混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(2∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-丹酰氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，73％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.34(s，9H)，1.50-1.60(m，1H)，2.15-2.25(m，1H)，2.87(s，6H)，3.15-3.22(m，1H)，3.35-3.45(m，1H)，3.48-3.52(m，1H)，3.80-4.10(m，3H)，3.91(s，3H)，7.01-7.25(m，4H)，7.50-7.53(m，1H)，8.03(d，J＝8.7Hz，2H)，8.16(d，J＝8.5Hz，1H)，8.28(d，J＝7.1Hz，1H)，8.53(d，J＝8.5Hz，1H)。
于0℃，向4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-丹酰氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(200mg，0.34mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(129mg，0.34mmol)、HOBt(46mg，0.34mmol)和三乙胺(142ml，1.0mmol)在THF(5.0ml)和MeCN(5.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(98mg，0.51mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶4，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-丹酰氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(250mg，88％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.55-1.65(m，1H)，2.15-2.25(m，1H)，2.87(s，6H)，3.20-3.35(m，3H)，3.50-3.55(m，1H)，3.67(s，3H)，3.78-3.81(m，1H)，3.88-3.93(m，1H)，3.91(s，3H)，4.28-4.31(m，1H)，4.65-4.70(m，1H)，6.35(d，J＝9.5Hz，1H)，6.54(d，J＝8.5Hz，1H)，6.63(s，1H)，6.90-7.13(m，6H)，7.22-7.31(m，2H)，7.50-7.56(m，2H)，7.88(d，J＝8.0Hz，1H)，7.99(d，J＝9.0Hz，1H)，8.13-8.16(m，2H)，8.27(d，J＝7.6Hz，1H)，8.56(d，J＝8.3Hz，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-丹酰氨基-2S-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(250mg，0.29mmol)的THF(5.0ml)和甲醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.52ml，0.52mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到163(230mg，94％)，为绿色结晶固体。MW 830.74mp 138-141℃；IR(KBr)3340，2940，1604，1527，1421，1162，1145cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.70-1.80(m，1H)，1.98-2.06(m，1H)，2.81(s，6H)，3.00-3.10(m，1H)，3.39-3.40(m，2H)，3.50-3.80(m，3H)，3.76(s，3H)，3.90-4.15(m，2H)，6.52(d，J＝9.0Hz，1H)，6.73-7.00(m，4H)，7.22-7.35(m，2H)，7.55-7.64(m，3H)，7.83-8.48(m，8H)，8.71-8.76(m，1H)，8.88-8.92(m，1H)；MS(FAB)m/z 830(M+)，832(M++2)；C40H40N5O8BrS·0.7H2O的分析计算值C，56.97；H，.95；N，8.30；Br，9.47。实测值C，57.06；H，4.86；N，7.98；Br，9.66。实施例1564-[4-甲亚磺酰氨基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(顺式-4-氨基-1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(180mg，0.51mmol)和TEA(283ml，2.0mmol)的氯仿(10.0ml)的搅拌溶液中加入甲磺酰氯(88mg，0.77mmol)。将该反应混合物于室温下搅拌18小时。真空浓缩该反应混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-甲亚磺酰氨基-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(150mg，69％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，1.98-2.08(m，1H)，2.52-2.65(m，1H)，2.99(s，3H)，3.40-3.50(m，1H)，3.55-3.80(m，1H)，3.89(s，1H)，4.00-4.70(m，4H)，6.98-7.00(m，2H)，8.00(d，J＝8.8Hz，2H)。
向4-(顺式-1-叔丁氧基羰基-4-甲亚磺酰氨基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(150mg，0.43mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(163mg，0.42mmol)、HOBt(58mg，0.43mmol)和三乙胺(179ml，1.3mmol)在THF(5.0ml)和MeCN(5.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(144mg，0.75mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶4，v/v)至乙醇-乙酸乙酯(10％，v/v)作为洗脱剂，得到4-[4-甲亚磺酰氨基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(210mg，73％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.95-2.00(m，1H)，2.55-2.65(m，1H)，2.17(s，3H)，3.55-3.70(m，1H)，3.60(S，2H)，3.67(S，3H)，3.85-3.90(m，1H)，3.89(s，3H)，3.95-4.18(m，2H)，4.45-4.55(m，1H)，4.70-4.80(m，1H)，5.87(d，J＝9.3Hz，1H)，6.73-6.95(m，5H)，7.09(s，2H)，7.28-7.33(m，1H)，7.51(d，J＝8.0Hz，1H)，7.93-7.97(m，3H)，8.13(d，J＝8.3Hz，1H)。
向4-[4-甲亚磺酰氨基-1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(210mg，0.3mmol)的THF(5.0ml)和甲醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.8ml，0.8mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到164(170mg，83％)，为白色结晶固体。MW 675.55 mp 125-128℃ IR(KBr)3353，1689，1604，1529，1419，1155cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.88-2.00(m，1H)，2.35-245(m，1H)，2.96(m，3H)，3.15-3.23(m，1H)，3.60(s，2H)，3.50-3.70(m，1H)，3.78(s，3H)，3.80-3.90(m，1H)，3.95-4.05(m，1H)，4.10-4.30(m，2H)，6.71-7.03(m，4H)，7.32(m，1H)，7.45(d，J＝6.8Hz，1H)，7.60(d，J＝7.8Hz，1H)，7.87-7.95(m，4H)，8.74(s，1H)，8.92(s，1H)；MS(FAB)m/z 675(M+)，677(M++2)；C29H31N4O8BrS·0.6H2O的分析计算值C，50.75；H，4.73；N，8.16。实测值C，51.04；H，4.62；N，7.79。实施例1574-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸
于0℃，向八氢吲哚-(2S)-甲酸(3.00g，17.7mmol)的二氧六环(20ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(45ml)，于0℃搅拌该溶液。于0℃，向该混合物中加入在二氧六环(25ml)中的(Boc)2O(4.26g，19.5mmol)，将该反应混合物于室温下搅拌1天。用1N HCl酸化该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发，得到1-(叔丁氧基羰基)八氢吲哚-(2S)-甲酸(4.78g，q.y.)，为无色固体。mp 130-132℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.10-1.46(多个s和m，共14H)，1.65-1.76(m，3H)，1.90-2.18(m，2H)，2.26-2.35(m，1H)，3.77-3.86(m，1H)，4.22-4.34(m，1H)；MS(ESI)m/z 270(M++1)。
向1-(叔丁氧基羰基)八氢吲哚-(2S)-甲酸(1.00g，3.71mmol)的THF(10ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入BH3·DMS(530ml.5.59mmol)，将该反应混合物于室温下搅拌过夜。通过加入水猝灭混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1-(叔丁氧基羰基)八氢吲哚-(2S)-甲醇(940mg，99％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.05-1.30(m，4H)，1.47(s，9H)，1.49-1.74(m，4H)，1.82-1.93(m，3H)，2.19-2.26(m，1H)，3.56-3.61(m，1H)，3.70-3.75(m，2H)，3.94-3.96(m，1H)；MS(FAB)m/z 256(M++1)。
向4-羟基苯甲酸甲酯(560mg，3.68mmol)、1-(叔丁氧基羰基)八氢吲哚-(2S)-甲醇(940mg，3.68mmol)和三苯膦(1.16g，4.42mmol)的THF(20ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入DIAD(870ml，4.42mmol)，将该反应混合物回流加热8小时。冷却至室温后，蒸发该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-(叔丁氧基羰基)-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.16g，81％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.14-1.47(多个s和m，共13H)，1.60-2.13(多个m，共6H)，2.22-2.28(m，1H)，3.75-3.91(多个s和m，共4H)，4.06-4.18(m，2H)，4.37(m，1H)，6.94-6.96(m，2H)，7.96-7.98(m，2H)；MS(FAB)m/z 390(M++1)。
向4-[1-(叔丁氧基羰基)-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(1.16g，2.98mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入TFA(10ml)，于室温下，将反应混合物搅拌2小时。真空浓缩该混合物，通过加入饱和碳酸氢钠使其呈碱性，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经碳酸钾干燥并蒸发，得到4-[(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(860mg，q.y.)，为棕色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.23-1.78(多个m，共10H)，2.00-2.09(m，2H)，3.14-3.18(m，1H)，3.55-3.62(m，1H)，3.88(s，3H)，3.96-4.06(m，2H)，6.92(d，J＝9.1Hz，2H)，7.97(d，J＝9.1Hz，2H)；MS(FAB)m/z 290(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(298mg，0.95mmol)、4-[(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(274mg，0.95mmol)、EDC·HCl(218mg，1.14mmol)、HOBt(154mg，1.14mmol)、三乙胺(160ml，1.15mmol)在THF(7ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(532mg，96％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.13-2.05(多个m，共9H)，2.14-2.24(m，2H)，2.26(s，3H)，3.60(s，2H)，3.62(s，3H)，3.80-3.85(m，1H)，3.88(s，3H)，4.27-4.37(m，3H)，6.62(s，1H)，6.74-6.76(m，2H)，6.91(d，J＝8.8Hz，2H)，7.09-7.13(m，1H)，7.20-7.24(m，3H)，7.55(d，J＝7.8Hz，1H)，7.94(d，J＝8.8Hz，2H)，8.04(d，J＝7.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z 586(M++1)。
向4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(532mg，0.91mmol)在THF(5ml)中的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热3小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集产生的沉淀。使粗品固体自甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到165(278mg，54％)，为白色结晶粉末。MW 571.66 mp 130-134℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.16-2.10(多个m，共9H)，2.15-2.30(多个s和m，共4H)，3.55-3.79(m，3H)，3.81(s，3H)，3.90-3.95(m，1H)，4.17-4.23(m，2H)，4.34-4.36(m，1H)，6.72-6.74(m，1H)，6.87-6.88(m，1H)，6.91-6.95(m，1H)，7.03(d，J＝8.8Hz，2H)，7.10-7.16(m，2H)，7.78-7.80(m，1H)，7.87(d，J＝8.8Hz，2H)，7.98-8.00(m，1H)，8.45(s，1H)，8.54(s，1H)，12.61(br s，1H)；MS(FAB)m/z 572(M++1)；C33H37N3O6·1/4H2O的分析计算值∶C，68.79；H，6.56；N，7.29。实测值C，68.70；H，6.82；N，6.97。实施例1584-[1-[4-N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(307mg，0.92mmol)、4-[(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(265mg，0.92mmol)、EDC·HCl(211mg，1.10mmol)、HOBt(148mg，1.10mmol)和三乙胺(153ml，1.10mmol)在THF(7ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(550mg，99％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.15-2.02(多个m，共9H)，2.17-2.33(m，2H)，3.58(s，3H)，3.62(s，2H)，3.84-3.90(多个s和m，共4H)，4.06-4.40(m，3H)，6.71-6.74(m，2H)，6.88-7.00(m，3H)，7.21-7.30(m，2H)，7.62(s，2H)，7.91-7.95(m，3H)，8.17-8.20(m，1H)；MS(FAB)m/z 606(M++1)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(550mg，0.91mmol)在THF(5ml)中的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集产生的沉淀。使粗品固体自甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到166(286mg，53％)，为白色结晶粉末。MW 388.29 mp 133-136℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.16-2.10(多个m，共10H)，2.24-2.27(m，1H)，3.55-3.75(m，2H)，3.80(s，3H)，3.90-3.96(m，1H)，4.17-4.23(m，2H)，4.34-4.36(m，1H)，6.73-6.75(m，1H)，6.88(d，J＝1.5Hz，1H)，6.99-7.05(m，3H)，7.25-7.30(m，1H)，7.43(dd，J＝1.5，8.1Hz，1H)，7.87-7.89(m，2H)，7.95(d，J＝8.1Hz，1H)，8.08(dd，J＝1.5，8.3Hz，1H)，8.88(s，1H)，8.92(s，1H)，12.61(br s，1H)；MS(FAB)m/z 592(M++1)；C32H34ClN3O6·1/4H2O的分析计算值C，64.42；H，5.83；N，7.04；Cl，5.94。实测值C，64.55；H，6.09；N，6.64；Cl，5.93。实施例1594-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(457mg，1.21mmol)、4-[(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(320mg，1.21mmol)、EDC·HCl(277mg，1.44mmol)、HOBt(196mg，1.45mmol)和三乙胺(200ml，1.43mmol)在THF(7ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(423mg，54％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.15-1.89(多个m，共8H)，1.96-2.02(m，1H)，2.16-2.32(m，2H)，3.63(s，2H)，3.65(s，3H)，3.82-3.86(m，1H)，3.88(s，3H)，4.30-4.39(m，3H)，6.75-6.77(m，2H)，6.88-6.93(m，3H)，7.24-7.31(m，1H)，7.37-7.50(s，3H)，7.91-7.99(m，3H)，8.12-8.15(m，1H)；MS(FAB)m/z 650(M++1)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(420mg，0.65mmol)在THF(5ml)中的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集产生的沉淀。使粗品固体自甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到167(197mg，48％)，为白色结晶粉末。MW 636.53 mp 118-123℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.16-2.27(多个m，共10H)，3.56-3.75(m，3H)，3.81(s，3H)，3.90-3.96(m，1H)，4.17-4.23(m，2H)，4.34-4.36(m，1H)，6.73-6.75(m，1H)，6.88-7.05(m，4H)，7.30-7.34(m，1H)，7.59-7.61(m，1H)，7.87-7.96(m，4H)，8.73(s，1H)，8.91(s，1H)，12.64(br s，1H)；MS(FAB)m/z 636(M++1)；C32H34BrN3O6·1/4H2O的分析计算值C，59.96；H，5.42；N，6.55；Br，12.46。实测值C，60.12；H，5.86；N，6.09；Br，12.47。实施例1604-[3-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰基-4-噻唑烷基]甲氧基苯甲酸
向噻唑烷-4-甲酸(5.0g，37.6mmol)的DMF(50.0ml)的搅拌溶液中加入(Boc)2O(9.8g，45.1mmol)和TEA(8.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物18小时。将水加入该混合物中，用乙酸乙酯提取。用水洗涤有机层，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-正己烷(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到3-叔丁氧基羰基噻唑烷-4-甲酸(6.5g，74％)，为白色结晶固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.49(br s，9H)，3.20-3.30(m，2H)，4.09-4.87(m，3H)。
于0℃，向3-叔丁氧基羰基噻唑烷-4-甲酸(2.3g，10.0mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入BH3·THF(1.0M在THF中的溶液，20.0ml，20.0mmol)。于室温下搅拌1.0小时后，将该反应混合物回流加热1.0小时。冷却后，真空浓缩该混合物。于0℃将水加入其中，用乙酸乙酯提取。用水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩，得到3-叔丁氧基羰基-5-羟甲基噻唑烷(2.0g，定量)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，2.80-2.85(m，1H)，3.13-3.17(m，1H)，3.20-3.30(m，1H)，3.64-3.70(m，2H)，4.34(br s，1H)，4.60(br s，1H)。
于0℃，向3-叔丁氧基羰基-5-羟甲基噻唑烷(1.9g，8.7mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(1.3g，8.7mmol)和三苯膦(3.2g，12.2mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入DIAD(2.2g.10.4mmol)。于室温下，将该反应混合物搅拌18小时。真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-正己烷(1∶9，v/v)作为洗脱剂，得到4-(3-叔丁氧基羰基-4-噻唑烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(1.6g，52％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.49(s，9H)，3.11-3.19(m，2H)，3.88(s，3H)，4.04-4.31(m，3H)，4.61(m，2H)，6.96(d，J＝8.8Hz，2H)，7.98(d，J＝8.8Hz，2H)。
于0℃，向4-(3-叔丁氧基羰基-4-噻唑烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(440mg，1.25mmol)的二氯甲烷(6ml)的搅拌溶液中加入TFA(3ml)。于室温下，将反应混合物搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(0.6mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(188mg，0.6mmol)、HOBt(81mg，0.6mmol)和三乙胺(280ml，2.0mmol)的THF(5ml)和MeCN(5ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(173mg，0.9mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到4-[3-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰基-4-噻唑烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(340mg，定量)，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ2.31(s，3H)，3.15-3.16(m，2H)，3.67-3.69(m，5H)，3.88(s，3H)，4.09-4.14(m，2H)，4.22-4.90(m，3H)，6.30(m，1H)，6.74-6.96(m，4H)，7.11-7.25(m，4H)，7.49-7.51(m，1H)，7.95-8.12(m，3H)。
向4-[3-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰基-4-噻唑烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(340mg，0.62mmol)的THF(5.0ml)和乙醇(3.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.62ml，0.62mmol)。于70℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到168(290mg，88％)，为白色结晶固体。MW 535.62 mp 125-128℃；IR(KBr)3357，2937，1604，1533，1419，1253，1166，1033，773cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，3.05-3.20(m，2H)，3.71，3.83和3.85(各为s，共5H)，4.03-4.15(m，3H)，4.52-4.76(m，2H)，6.15-6.17(m，7H)，7.78-8.30(m，4H)，8.30(m，1H)，8.56(m，1H)；MS(FAB)m/z 536(M++1)；C28H29N3O6S·0.5H2O的分析计算值C，61.75；H，5.55；N，7.72。实测值C，61.72；H，5.55；N，7.49。实施例1614-[3-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-噻唑烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(3-叔丁氧基羰基-4-噻唑烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(600mg，1.7mmol)的二氯甲烷(6.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(6.0ml)。于室温下，将反应混合物搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(570mg，1.7mmol)、HOBt(230mg，1.7mmol)和三乙胺(709ml，5.1mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(490mg，2.55mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[3-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-噻唑烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(900mg，93％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.15-3.18(m，2H)，3.70(s，2H)，3.78(s，3H)，3.86(s，3H)，4.09-4.93(m，5H)，6.80-7.01(m，5H)，7.19-7.35(m，4H)，7.94-8.18(m，4H)。
向4-[3-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-噻唑烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(900mg，1.6mmol)的THF(8.0ml)和甲醇(4.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(3.1ml，3.1mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到169(780mg，89％)，为白色结晶固体。MW 556.03 mp 126-129℃；IR(KBr)3343，2937，1604，1531，1421，1245，1166，1035，752cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ3.06-3.24(m，2H)，3.72-3.85(m，5H)，4.02-4.27(m，3H)，4.53-4.76(m，2H)，6.74-7.44(m，7H)，7.87-8.30(m，4H)，8.89-8.95(m，2H)；MS(FAB)m/z 556(M++1)；C27H27N3O6ClS·0.7H2O的分析计算值C，56.93；H，5.03；N，7.38；Cl，6.22。实测值C，56.89；H，4.84；N，7.42；Cl，6.35。实施例1624-[3-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-噻唑烷基]甲氧基苯甲酸
于0℃，向4-(3-叔丁氧基羰基-4-噻唑烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(560mg，1.6mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下，将反应混合物搅拌0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(599mg，1.6mmol)、HOBt(213mg，1.6mmol)和三乙胺(659ml，4.7mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(455mg，2.4mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(2∶3，v/v)作为洗脱剂，得到4-[3-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-噻唑烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(870mg，89％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.00-3.20(m，3H)，3.70(s，2H)，3.81(s，3H)，3.88(s，3H)，4.09-4.23(m，1H)，4.42(d，J＝8.5Hz，1H)，4.59(d，J＝8.5Hz，1H)，4.70-4.92(m，1H)，6.81-7.53(m，9H)，7.95-8.15(m，4H)。
向4-[3-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-4-噻唑烷基]甲氧基苯甲酸甲酯(870mg，1.4mmol)的THF(8.0ml)和甲醇(8.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(2.8ml，2.8mmol)。于70℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到170(740mg，87％)，为白色结晶固体。MW 600.48 mp 125-133℃；IR(KBr)3332，2935，1604，1527，1421，1245，1166，1027，750cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ3.01-3.25(m，2H)，3.72-3.85(m，5H)，4.02-4.30(m，2H)，4.54(d，J＝8.8Hz，1H)，4.74-4.87(m，2H)，6.76-7.07(m，5H)，7.30-7.34(m，1H)，7.59(d，J＝8.1Hz，1H)，7.86-7.98(m，4H)，8.74(s，1H)，8.92-8.94(s，1H)；MS(FAB)m/z 600(M++1)；C27H26N3O6BrS·0.3H2O的分析计算值C，53.52；H，4.43；N，6.94。实测值C，53.54；H，4.45；N，6.80。实施例163顺式-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]环己烷甲酸
于0℃，向2S-吡咯烷甲醇(2.0g，20.0mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(6.28g，20.0mmol)、HOBt(71mg，0.53mmol)和三乙胺(5.5ml，40.0mmol)的THF(50.0ml)和MeCN(40.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(5.7g，30.0mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯至甲醇-二氯甲烷(1∶9，v/v)作为洗脱剂，得到1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2S-吡咯烷甲醇(7.0g，89％)，为白色结晶固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.54-1.58(m，1H)，1.80-2.04(m，3H)，2.27(s，3H)，3.42-3.46(m，1H)，3.54-3.65(m，2H)，3.62(s，2H)，3.69(s，3H)，4.21-4.23(m，1H)，5.04(m，1H)，6.68-6.79(m，3H)，7.09-7.31(m，4H)，7.52(d，J＝7.8Hz，1H)，8.07(d，J＝8.0Hz，1H)。
于-78℃，向草酰氯(0.3ml，3.3mmol)的二氯甲烷(30.0ml)的搅拌溶液中加入DMSO(6.6ml，0.51mmol)。5分钟后，向该混合物中加入在二氯甲烷(5.0ml)中的1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷甲醇(1.2g，3.0mmol)。于-78℃，将混合物搅拌30分钟，加入三乙胺(2.1ml，15.0mmol)。于-78℃将该混合物搅拌30分钟，于室温下搅拌30分钟。将水加入混合物中，用二氯甲烷提取。用水洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、顺式-4-氨基环己烷甲酸苄酯(769mg，3.3mmol)和乙酸(0.32ml)的DCE(10ml)的搅拌溶液中加入NaBH(OAc)3(1.1g，5.4mmol)。于室温下搅拌反应混合物18小时。真空浓缩该混合物。将饱和碳酸氢钠加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(1∶9，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]环己烷甲酸苄酯(1.5g，83％)，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.40-1.65(m，6H)，1.80-1.98(m，6H)，2.26(s，3H)，2.45-2.65(m，3H)，2.81-2.86(m，1H)，3.44-3.46(m，2H)，3.56(s，2H)，3.67(s，3H)，3.90-4.15(m，1H)，5.09和5.11(各为s，共2H)，6.74-6.83(m，3H)，7.07-7.20(m，4H)，7.31-7.35(m，5H)，7.53-7.55(m，1H)，8.02-8.06(m，1H)。
向顺式-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]环己烷甲酸苄酯(1.5g，2.45mmol)的THF(10.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(3.68ml，3.68mmol)。于70℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(1∶5，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]环己烷甲酸171(940mg，73％)，为无定形固体。MW 522.64 IR(KBr)3283，2945，2860，1534，1453，1415cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38-2.00(m，12H)，2.45(s，3H)，2.30-3.95(m，4H)，3.22-3.75(m，2H)，3.58(s，2H)，3.86(s，3H)，4.12(m，1H)，6.73-7.16(m，5H)，7.77-7.79(m，1H)，7.98-8.02(m，1H)，8.51-8.52(m，1H)，8.57-8.59(m，1H)；MS(FAB)m/z 523(M++1)；C29H38N4O5·0.5NaCl·2.2H2O的分析计算值C，58.89；H，7.23；N，9.47。实测值C，59.21；H，7.11；N，9.11。实施例164顺式-4-[[1-[3-甲氧基4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]环己烷甲酸甲酯盐酸盐
于0℃，将SOCl2加入甲醇中。搅拌5分钟后，加入顺式-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]环己烷甲酸(200mg，0.38mmol)。于室温下，将混合物搅拌5小时。真空浓缩该混合物。将碳酸氢钠水溶液加入残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用甲醇-二氯甲烷(5∶95-18∶92，v/v)作为洗脱剂。使产物溶于乙醇(5.0ml)中，将1N HCl(在乙醇中)(1.0ml，1.0mmol)加入其中。真空浓缩该混合物，得到172(160mg，74％)，为无定形固体。MW 536.66 IR(KBr)3247，2950，2875，1731，1671，1612，1533，1454，1205cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.45-2.10(m，12H)，2.25(s，3H)，2.60-2.70(m，1H)，2.90-3.20(m，3H)，2.50-2.55(m，2H)，3.63(m，5H)，3.86(s，3H)，4.15-4.30(m，1H)，6.74-7.16(m，5H)，7.76-7.78(m，1H)，8.00-8.09(m，1H)，8.54-8.70(m，2H)；MS(FAB)m/z 537(M++1)；C30H40N4O5·1.0HCl·1.0H2O的分析计算值C，60.95；H，7.33；N，9.48；Cl，6.00。实测值C，60.87；H，7.47；N，8.97；Cl，5.90。实施例1654-[N-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基]-N-甲基氨基]环己烷甲酸
于0℃，向顺式-4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]甲基氨基]环己烷甲酸甲酯(300mg，0.55mmol)、HCHO(300ml)和乙酸(66mg，1.1mmol)的甲醇(10.0ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(70mg，1.1mmol)。于室温下搅拌反应混合物18小时。真空浓缩后，加入水，用二氯甲烷提取。用水洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经TLC纯化，用甲醇-二氯甲烷(3∶97，v/v)作为洗脱剂，得到4-[N-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]环己烷甲酸甲酯(160mg，52％)，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.30-2.20(m，12H)，2.27-2.37(m，6H)，2.50-2.60(m，1H)，3.30-3.80(m，5H)，3.55(s，2H)，3.66-3.73(m，6H)，4.10-4.20(m，1H)，6.60-7.55(m，7H)，8.03(m，1H)，8.15(m，1H)。
向4-[N-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基甲基]-N-甲基氨基]环己烷甲酸甲酯(100mg，0.1 8mmol)的THF(5.0ml)和甲醇(2.5ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.36ml，0.36mmol)。于60℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。真空浓缩该混合物。残留物经TLC纯化，用甲醇-二氯甲烷(1/4，v/v)作为洗脱剂，得到173(10mg，10％)，为无定形固体。MW 536.66 IR(KBr)3440，2954，1697，1533，1454cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.20-2.30(m，13H)，2.24(s，3H)，2.35-4.00(m，13H)，6.50-8.10(m，8H)，8.50(m，1H)；MS(FAB)m/z 537(M++1)；C30H40N4O5·2.0NaCl·0.8H2O的分析计算值C，53.94；H，6.28；N，8.39。实测值C，54.08；H，6.52；N，8.04。实施例1664-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸
于室温下，将4-(1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基苯甲酸甲酯(1.0g，2.9mmol)和5％负载于氧化铝上的Rh(500mg)的乙醇(10.0ml)和乙酸(1.0ml)中的混合物在5个大气压下氢化36小时。过滤除去催化剂，真空浓缩滤液。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-4-[(1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基]环己烷甲酸甲酯(900mg，89％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，1.46-2.00(m，12H)，2.34(m，1H)，3.20-3.55(m，5H)，3.67(s，3H)，3.84-3.92(m，1H)。
于0℃，向顺式-4-[(1-叔丁氧基羰基-(2S)-吡咯烷基)甲氧基]环己烷甲酸甲酯(900mg，2.6mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA (5.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。向粗产物(200mg，0.83mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(260mg，0.83mmol)、HOBt(135mg，1.0mmol)和三乙胺(344μl，1.35-2.10(m，12H)，2.15-2.38(m，1H)，2.29(m，3H)，3.20-3.55(m，5H)，3.58(s，2H)，3.66(s，3H)，3.73(s，3H)，4.20-4.25(m，1H)，6.26-6.30(m，1H)，6.78-6.81(m，2H)，7.06-7.23(m，3H)，7.51-7.52(m，1H)，8.01-8.03(m，1H)。
向4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸甲酯(460mg，0.86mmol)的THF(10.0ml)和乙醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.4ml，1.4 mmol)。于60℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到174(370mg，83％)，为白色结晶固体。MW 523.63 mp 110-113℃；IR(KBr)3345，2937，1612，1533，1454cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.00-2.00(m，12H)，2.24(s，3H)，2.20-2.30(m，1H)，3.20-3.80(m，5H)，3.55(s，2H)，3.85(s，3H)，4.00-4.18(m，1H)，6.71-7.16(m，5H)，7.78(d，J＝8.0Hz，1H)，7.90(d，J＝8.3Hz，1H)，8.45(s，1H)，8.54(s，1H)；MS(FAB)m/z 524(M++1)；C29H37N3O6·0.2H2O的分析计算值C，66.07；H，7.15；N，7.97。实测值C，66.02；H，7.14；N，7.87。实施例1674-[[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸
于0℃，向4-[(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基]环己烷甲酸甲酯(900mg，2.6mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(200mg，0.83mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(277mg，0.83mmol)、HOBt(135mg，1.0mmol)和三乙胺(344ml，2.48mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(238mg，1.24mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶6，v/v)作为洗脱剂，得到4-[[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸甲酯(450mg，97％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.35-2.15(m，12H)，2.25-2.40(m，1H)，3.40-3.70(m，5H)，3.61(s，2H)，3.66(s，3H)，3.81(s，3H)，4.20-4.30(m，1H)，6.81-6.99(m，3H)，7.17-7.34(m，3H)，7.92-7.94(m，2H)，8.17-8.19(m，2H)。
向4-[[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸甲酯(450mg，0.86mmol)的THF(10.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.4ml，1.4mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到175(370mg，84％)，为白色结晶固体。MW 544.04 mp 111-115℃；IR(KBr)3330，2938，1704，1594，1533，1438，1199cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.00-2.00(m，12H)，2.20-2.30(m，1H)，3.20-3.80(m，5H)，3.55(s，2H)，3.85(s，3H)，4.00-4.20(m，1H)，6.73-6.75(m，1H)，6.87(s，1H)，6.99-7.03(m，1H)，7.25-7.29(m，1H)，7.42(d，J＝7.1Hz，1H)，7.95(d，J＝8.3Hz，1H)，8.08(d，J＝8.0Hz，1H)，8.78(s，1H)，8.92(s，1H)；MS(FAB)m/z 544(M++1)；C28H34N3O6Cl·0.2H2O的分析计算值C，61.41；H，6.33；N，7.67；Cl，6.47。实测值C，61.37；H，6.32；N，7.56；Cl，6.55。实施例1684-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸
于0℃，向4-[(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基]环己烷甲酸甲酯(900mg，2.6mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(200mg，0.83mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(314mg，0.83mmol)、HOBt(135mg，1.0mmol)和三乙胺(344ml，2.48mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(238mg，1.24mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶6，v/v)作为洗脱剂，得到[4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸甲酯(450mg，90％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.30-2.10(m，12H)，2.35-2.40(m，1H)，3.25-3.70(m，5H)，3.84(s，3H)，4.10-4.25(m，1H)，6.81-7.06(m，4H)，7.25-7.32(m，2H)，7.50-7.52(m，1H)，7.90-7.92(m，1H)，8.13-8.15(m，1H)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸甲酯(450mg，0.74mmol)的THF(10.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.2ml，1.2mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到176(340mg，77％)，为白色结晶固体。MW 588.49 mp 108-111℃；IR(KBr)3328，2938，1702，1594，1529，1434cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.00-2.00(m，12H)，2.15-2.25(m，1H)，3.40-3.75(m，5H)，3.48(s，2H)，3.85(s，3H)，4.04-4.15(m，1H)，6.70-6.72(m，1H)，6.87(s，1H)，6.94-6.98(m，1H)，7.29-7.33(m，1H)，7.59(d，J＝8.1Hz，1H)，7.93-7.95(m，2H)，8.73-8.74(m，1H)，8.91-8.92(m，1H)；MS(FAB)m/z 589(M++1)；C28H34N3O6Br·0.2H2O的分析计算值C，56.80；H，5.86；N，7.10；Br，13.49。实测值C，56.66；H，5.83；N，6.97；Br，13.66。实施例1694-[[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸
于0℃，向4-[(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)甲氧基]环己烷甲酸甲酯(450mg，1.3mmol)的二氯甲烷(5.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(5.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物、4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(375mg，1.3mmol)、HOBt(178mg，1.3mmol)和三乙胺(550ml，3.9mmol)的THF(6.0ml)和MeCN(6.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(380mg，1.9mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶6，v/v)作为洗脱剂，得到4-[[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸甲酯(520mg，78％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.30-2.40(m，13H)，2.21(s，3H)，3.30-3.80(m，7H)，3.65(s，3H)，4.10-4.30(m，1H)，6.90-7.20(m，8H)，7.40-7.70(m，2H)。
向4-[[1-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S)-吡咯烷基]甲氧基]环己烷甲酸甲酯(520mg，1.0mmol)的THF(10.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.5ml，1.5mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到177(450mg，91％)，为白色结晶固体。MW 493.60 mp 107-111℃；IR(KBr)3353，2938，1704，1540，1454，1240cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.20-2.00(m，12H)，2.23(s，3H)，2.22-2.24(m，1H)，3.20-3.80(m，7H)，4.00-4.18(m，1H)，6.90-6.94(m，1H)，7.10-7.16(m，5H)，7.36-7.38(m，2H)，7.82-7.87(m，2H)，8.89(s，1H)，12.0(br s，1H)；MS(FAB)m/z 494(M++1)；C28H35N3O5·0.2H2O的分析计算值C，67.64；H，7.18；N，8.45。实测值C，67.66；H，7.19；N，8.24。实施例170顺式-4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]环己烷甲酸
于0℃，向[(1-叔丁氧基羰基-(2S)-八氢吲哚基]甲酸(1.0g，3.7mmol)的THF(10.0ml)的搅拌溶液中加入BH3·THF(1.0M在THF中，8.0ml)。于室温下搅拌1.0小时后，将该反应混合物回流加热1.5小时。冷却后，真空浓缩该混合物。于0℃将水加入其中，用乙酸乙酯提取。用水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩，得到[1-叔丁氧基羰基-(2S)-八氢吲哚基]甲醇(947mg，定量)，为无色油状物。
于0℃，向[1-叔丁氧基羰基-(2S)-八氢吲哚基]甲醇(947mg，3.7mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(565mg，3.7mmol)和三苯膦(1.2g，4.5mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入DIAD(984mg.4.5mmol)。于室温下，将该反应混合物搅拌18小时。真空浓缩该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(9/1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-叔丁氧基羰基-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(700mg，50％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.10-2.25(m，11H)，1.45(s，9H)，3.88(s，3H)，3.70-4.20(m，3H)，4.36(br s，1H)，6.94(d，J＝8.8Hz，2H)，7.96(d，J＝8.5Hz，2H)。
于室温下，将4-[1-叔丁氧基羰基-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]苯甲酸甲酯(700mg，1.8mmol)和5％负载于氧化铝上的Rh(400mg)的乙醇(10.0ml)和乙酸(1.0ml)的混合物在5个大气压下氢化48小时。过滤除去催化剂，真空浓缩滤液。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(7∶1，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-4-[1-叔丁氧基羰基-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]环己烷甲酸甲酯(600mg，85％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.10-2.35(m，20H)，1.44(s，9H)，3.45-3.90(m，5H)，3.80(s，3H)。
于0℃，向顺式-4-[1-叔丁氧基羰基-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]环己烷甲酸甲酯(600mg，1.5mmol)的二氯甲烷(6.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(6.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(221mg，0.75mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(250mg，0.75mmol)、HOBt(101mg，0.75mmol)和三乙胺(3 12ml，2.3mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(216mg，1.1mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]环己烷甲酸甲酯(430mg，94％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.10-2.40(m，20H)，3.45(br s，1H)，3.62(s，2H)，3.66(s，3H)，3.73(s，3H)，3.60-3.85(m，2H)，4.09-4.14(m，2H)，6.75-6.98(m，3H)，7.22-2.46(m，4H)，7.92(d，J＝8.0Hz，1H)，8.18(d，J＝8.3Hz，1H)。
向顺式-4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]环己烷甲酸甲酯(430mg，0.7mmol)的THF(10.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.4ml，1.4mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到178(360mg，86％)，为白色结晶固体。MW 598.13 mp 120-121℃ IR(KBr)3338，2933，2859，1614，1533，1438cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.05-2.40(m，20H)，3.38-3.50(m，2H)，3.63和3.65(各为s，共2H)，3.71和3.75(各为s，共3H)，3.70-3.80(m，1H)，3.93-3.97(m，1H)，4.15(br s，1H)，6.75-6.77(m，2H)，6.93-6.97(m，1H)，7.20-7.32(m，3H)，7.60-7.63(m，1H)，7.85(d，J＝8.3Hz，1H)，8.16(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(FAB)m/z 598(M++1)；C32H40N3O6C1·0.5H2O的分析计算值C，63.30；H，6.81；N，6.92；Cl，5.84。实测值C，63.68；H，6.81；N，6.81；Cl，5.98。实施例171顺式-4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]环己烷甲酸
于0℃，向顺式-4-[1-叔丁氧基羰基-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]环己烷甲酸甲酯(600mg，1.5mmol)的二氯甲烷(6.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(6.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(221mg，0.75mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(284mg，0.75mmol)、HOBt(101mg，0.75mmol)和三乙胺(312ml，2.3mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(216mg，1.1mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(1∶3，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]环己烷甲酸甲酯(480mg，96％)，为无色油状物。1H-MR(CDCl3)δ1.10-2.40(m，20H)，3.45(br s，1H)，3.61(s，2H)，3.66(s，3H)，3.76(s，3H)，3.60-3.80(m，2H)，4.11-4.14(m，2H)，6.76-6.92(m，3H)，7.25-7.32(m，3H)，7.49(d，J＝7.1Hz，1H)，7.90(d，J＝8.0Hz，1H)，8.13(d，J＝8.0Hz，1H)。
向顺式-4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(2S)-八氢吲哚基甲氧基]环己烷甲酸甲酯(480mg，0.73mmol)的THF(10.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(1.5ml，1.5 mmol)。于70℃搅拌该混合物24小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥，得到179(400mg，85％)，为白色结晶固体。MW 642.58 mp 115-120℃；IR(KBr)3332，2933，2859，1704，1592，1529，1434cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.10-2.40(m，20H)，3.40-3.50(m，2H)，3.61和3.63(各为s，共2H)，3.75和3.78(各为s，共3H)，3.70-3.80(m，1H)，3.90-3.93(m，1H)，4.15(br s，m)，6.76-6.92(m，3H)，7.26-7.30(m，1H)，7.43-7.52(m，3H)，7.84-7.86(m，1H)，8.10-8.12(m，1H)；MS(FAB)m/z 643(M++1)；C32H40N3O6Br·0.4H2O的分析计算值C，59.15；H，6.33；N，6.49；Br，12.30。实测值C，59.26；H，6.33；N，6.36；Br，12.37。实施例1724-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]羰基氨基]环己烷甲酸
于0℃，向4-氨基环己烷甲酸苄酯(900mg，3.9mmol)、boc-脯氨酸(830mg，3.9mmol)、HOBt(521mg，3.9mmol)和三乙胺(1.6ml，11.6mmol)的二氯甲烷(30.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(1.1g，5.8mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到顺式-4-[(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)羰基氨基]环己烷甲酸苄酯(600mg，36％)，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.44(s，9H)，1.50-1.90(m，12H)，2.20-2.26(m，1H)，3.25-3.50(m，2H)，3.80-3.90(m，1H)，4.10-4.25(m，1H)，5.12(s，2H)，7.35-7.36(m，5H)。
于0℃，向顺式-4-[(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)羰基氨基]环己烷甲酸苄酯(600mg，1.4mmol)的二氯甲烷(6.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(3.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(300mg，0.7mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(220mg，0.7mmol)、HOBt(94mg，0.7mmol)和三乙胺(291ml，2.1mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(201mg，1.1mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。收集产生的固体，用乙酸乙酯洗涤，得到4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]羰基氨基]环己烷甲酸苄酯(380mg，87％)，为白色结晶固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.40-2.15(m，12H)，2.28(m，3H)，2.30-2.50(m，2H)，3.40-3.55(m，2H)，3.61(s，2H)，3.71(s，3H)，3.82(m，1H)，4.53(d，J＝6.3Hz，1H)，5.10(s，2H)，6.42(s，1H)，6.77-6.79(m，2H)，7.04-7.34(m，9H)，7.50-7.52(m，1H)，8.05-8.07(m，1H)。
向4-[[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]羰基氨基]环己烷甲酸苄酯(380mg，0.6mmol)的THF(10.0ml)和乙醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.9ml，0.9mmol)。于50℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到180(230mg，71％)，为白色结晶固体。MW 636.62 mp 136-142℃；IR(KBr)3345，2940，1650，1625，1535，1454cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40-2.00(m，12H)，2.24(s，3H)，2.30-2.40(m，1H)，3.45-3.80(m，5H)，3.86-3.87(m，3H)，4.30-4.43(m，1H)，6.65-7.30(m，5H)，7.70-7.80(m，1H)，7.98-8.09(m，1H)，8.46-8.57(m，1H)；MS(FAB)m/z 537(M++1)；C29H36N4O6·0.5H2O的分析计算值C，63.84；H，6.83；N，10.27。实测值C，64.18；H，6.91；N，9.85。实施例1734-[[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]羰基氨基]环己烷甲酸
于0℃，向顺式-4-[(1-叔丁氧基羰基-2-吡咯烷基)羰基氨基]环己烷甲酸苄酯(600mg，1.4mmol)的二氯甲烷(6.0ml)的搅拌溶液中加入TFA(3.0ml)。于室温下搅拌该反应混合物0.5小时。真空浓缩该混合物，将饱和碳酸氢钠加入该残留物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物不经进一步纯化而用于随后的反应。于0℃，向粗产物(300mg，0.7mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(237mg，0.7mmol)、HOBt(94mg，0.7mmol)和三乙胺(291ml，2.1mmol)的THF(10.0ml)和MeCN(10.0ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(201mg，1.1mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌16小时，真空浓缩。将水加入残留物中，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、2M柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤提取物，然后经硫酸钠干燥并真空浓缩。收集产生的固体，用乙酸乙酯洗涤，得到4-[[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]羰基氨基]环己烷甲酸苄酯(310mg，68％)，为白色结晶固体。1H-NMR(CDCL3)δ1.40-2.15(m，12H)，2.30-2.60(m，2H)，3.42-3.55(m，2H)，3.64(s，2H)，3.84(s，3H)，4.55(d，J＝6.1Hz，1H)，5.12(s，2H)，6.81-7.35(m，12H)，7.96-7.98(m，1H)，8.17-8.19(m，1H)。
向4-[[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-吡咯烷基]羰基氨基]环己烷甲酸苄酯(310mg，0.86mmol)的THF(10.0ml)和甲醇(5.0ml)的搅拌溶液中加入1N氢氧化钠(0.7ml，0.7mmol)。于50℃搅拌该混合物18小时。真空浓缩该混合物，将水加入其中，用1N HCl中和。收集产生的固体，用水洗涤，真空干燥得到181(260mg，98％)，为白色结晶固体。MW 557.03 mp 135-140℃；IR(KBr)3328，2938，1594，1533，1438，1203cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.40-2.20(m，12H)，2.30-2.40(m，1H)，3.40-3.80(m，5H)，3.65-3.85(m，3H)，4.30-4.43(m，1H)，6.66-7.31(m，5H)，7.42-8.10(m，2H)，8.89-8.94(m，2H)；MS(FAB)m/z 557(M++1)；C28H33N4O6Cl·0.3H2O的分析计算值C，59.79；H，6.02；N，9.96；Cl，6.30。实测值C，59.86；H，6.10；N，9.60；Cl，6.34。实施例1744-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸
向4-羟基苯甲酸甲酯(1.84g，12.1mmol)、(R)-1-苄基-3-吡咯烷醇(2.00ml，12.1mmol)和三苯膦(3.81g，14.5mmol)的THF(25ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入DIAD(2.86ml，14.5mmol)，将该反应混合物回流加热10小时。冷却至室温后，蒸发该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-苄基-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(3.66g，97％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.95-2.02(m，1H)，2.28-2.37(m，1H)，2.57-2.63(m，1H)，2.72-2.81(m，2H)，2.96-3.01(m，1H)，3.63-3.71(m，2H)，3.87(s，3H)，4.84-4.89(m，1H)，6.84(d，J＝8.8Hz，2H)，7.23-7.34(m，5H)，7.95(d，J＝8.8Hz，2H)。
将4-[1-苄基-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(3.66g，11.8mmol)的甲醇(25ml)的溶液经Pd(OH)2/C(0.73g，20wt％)氢化过夜。过滤该反应混合物以除去催化剂，蒸发该溶液，得到4-[(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(2.60g，q.y.)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.94-2.01(m，2H)，2.09-2.18(m，1H)，2.91-2.97(m，1H)，3.04-3.09(m，1H)，3.16-3.23(m，2H)，3.88(s，3H)，4.88-4.91(m，1H)，6.86(m，2H)，7.96-7.98(m，2H)；MS(ESI)m/z 222(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(449mg，1.43mmol)、4-[(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(316mg，1.43mmol)、EDC·HCl(330mg，1.72mmol)、HOBt(193mg，1.43mmol)和三乙胺(240ml，1.72mmol)在THF(5ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(735mg，99％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.03-2.31(多个s和m，共5H)，3.57-3.78(多个m，共9H)，3.88(s，3H)，4.95-4.99(m，1H)，6.73-7.00(m，5H)，7.06-7.10(m，1H)，7.18-7.22(m，2H)，7.42-7.46(m，1H)，7.57-7.62(m，1H)，7.95-8.08(m，3H)；MS(ESI)m/z 518(M++1)。
向4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(627mg，1.21mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热3小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体自甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到182(235mg，39％)，为白色结晶粉末。MW 503.55 mp 131-135℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.06-2.27(多个m，共5H)，3.57-3.64(m，4H)，3.71-3.88(多个s和m，共5H)，5.11和5.20(各为m，共1H)，6.73-6.77(m，1H)，6.88-6.95(m，2H)，7.02-7.05(m，2H)，7.11-7.17(m，2H)，7.79-7.81(m，1H)，7.88-7.90(m，2H)，7.98-8.03(m，1H)，8.45-8.47(m，1H)，8.55-8.57(m，1H)，12.66(br s，1H)；MS(ESI)m/z504(M++1)；C28H29N3O6·3/4H2O的分析计算值C，65.04；H，5.95；N，8.13。实测值C，65.11；H，5.99；N，7.66。实施例1754-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(410mg，1.22mmol)、4-[(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(270mg，1.22mmol)、EDC·HCl(280mg，1.46mmol)、HOBt(200mg，1.48mmol)和三乙胺(205ml，1.47mmol)在THF(8ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-60∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(652mg，99％)，为白色固体。mp 200-203℃；1H-NMR(CDCl3)δ2.06-2.32(m，2H)，3.60-3.82(多个m，共9H)，3.88(s，3H)，4.97-5.01(m，1H)，6.76-6.86(m，4H)，6.95-6.99(m，1H)，7.23-7.47(m，4H)，7.91-7.99(m，3H)，8.19-8.21(m，1H)；MS(ESI)m/z 537(M+)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(650mg，1.21mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体自甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到183(443mg，70％)，为淡黄色结晶粉末。MW 523.97 mp 190-193℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.06-2.27(m，2H)，3.56-3.62(m，4H)，3.71-3.88(多个s和m，共5H)，5.11和5.20(各为m，共1H)，6.74-6.78(m，1H)，6.89-6.91(m，1H)，7.00-7.05(m，3H)，7.26-7.30(m，1H)，7.43-7.45(m，1H)，7.88-7.98(m，3H)，8.08-8.10(m，1H)，8.89-8.95(m，2H)，12.67(br s，1H)；MS(ESI)m/z 524(M++1)；C27H26ClN3O6·1/4H2O的分析计算值C，61.36；H，5.05；N，7.95；Cl，6.71。实测值C，61.69；H，5.45；N，7.29；Cl，6.91。实施例1764-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(540mg，1.42mmol)、4-[(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(315mg，1.42mmol)、EDC·HCl(328mg，1.71mmol)、HOBt(230mg，1.70mmol)和三乙胺(240ml，1.72mmol)在THF(8ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(1 00∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(620mg，74％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.06-2.33(m，2H)，3.60-3.82(多个m，共9H)，3.89(s，3H)，4.97-5.01(m，1H)，6.77-7.00(m，5H)，7.27-7.40(m，3H)，7.49-7.51(m，1H)，7.91-7.99(m，3H)，8.13-8.17(m，1H)；MS(ESI)m/z 583(M++1)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3S)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(620mg，1.06mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热2.5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体自甲醇-氯仿-IPE中重结晶，得到184(421mg，70％)，为白色结晶粉末。MW 568.42 mp 173-175℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.06-2.28(m，2H)，3.56-3.65(m，4H)，3.71-3.88(多个s和m，共5H)，5.12和5.20(各为m，共1H)，6.74-6.78(m，1H)，6.89-7.05(m，4H)，7.31-7.34(m，1H)，7.59-7.61(m，1H)，7.88-7.98(m，4H)，8.73-8.74(m，1H)，8.91-8.93(m，1H)，12.67(br s，1H)；MS(ESI)m/z 569(M++1)；C27H26BrN3O6的分析计算值C，57.05；H，4.61；N，7.39；Br，14.06。实测值C，57.57；H，5.12；N，6.81；Br，13.96。实施例1774-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸
向4-羟基苯甲酸甲酯(1.78g，11.7mmol)、1-苄基-(3S)-吡咯烷醇(2.07g，11.7mmol)和三苯膦(3.68g，14.0mmol)的THF(25ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入DIAD(2.76ml.14.0mmol)，将该反应混合物回流加热10小时。冷却至室温后，蒸发该混合物。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-苄基-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(3.56g，98％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.95-2.03(m，1H)，2.28-2.37(m，1H)，2.57-2.63(m，1H)，2.73-2.81(m，2H)，2.97-3.01(m，1H)，3.63-3.72(m，2H)，3.87(s，3H)，4.85-4.90(m，1H)，6.83-6.85(m，2H)，7.27-7.34(m，5H)，7.94-7.97(m，2H)；MS(ESI)m/z312(M++1)。
将4-[1-苄基-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(3.56g，11.4mmol)的甲醇(25ml)的溶液经Pd(OH)2/C(0.72g，20wt％)氢化过夜。过滤该反应混合物以除去催化剂，蒸发该溶液，得到4-[(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(2.53g，q.y.)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.94-2.18(m，3H)，2.91-2.97(m，1H)，3.04-3.09(m，1H)，3.16-3.22(m，2H)，3.88(s，3H)，4.88-4.91(m，1H)，6.86-6.89(m，2H)，7.97-7.99(m，2H)；MS(ESI)m/z263[M++1+41，(+MeCN)]。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(460mg，1.46mmol)、4-[(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(324mg，1.46mmol)、EDC·HCl(337mg，1.76mmol)、HOBt(237mg，1.75mmol)和三乙胺(245ml，1.76mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(583mg，77％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.06-2.23(m，2H)，2.30(s，3H)，3.58-3.89(多个s和m，共12H)，4.95-4.99(m，1H)，6.75-7.00(m，4H)，7.13-7.30(m，5H)，7.52-7.57(m，1H)，7.96-8.03(m，3H)；MS(ESI)m/z 518(M++1)。
向4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(583mg，1.13mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热3小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体自甲醇-氯仿-乙醚中重结晶，得到185(297mg，52％)，为白色结晶粉末。MW 503.55 mp 158-162℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.08-2.31(多个s和m，共5H)，3.54-3.89(多个m，共9H)，5.11和5.20(各为m，共1H)，6.72-7.17(多个m，共6H)，7.78-7.80(m，1H)，7.87-7.90(m，2H)，7.98-8.02(m，2H)，8.46-8.47(m，1H)，8.55-8.57(m，1H)，12.66(br s，1H)；MS(ESI)m/z 504(M++1)；C28H29N3O6·1/4H2O的分析计算值C，66.19；H，5.85；N，8.27。实测值C，66.12；H，5.77；N，8.21。实施例1784-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(498mg，1.49mmol)、4-[(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(329mg，1.49mmol)、EDC·HCl(342mg，1.78mmol)、HOBt(241mg，1.78mmol)和三乙胺(250ml，1.79mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(561mg，70％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.05-2.34(m，2H)，3.59-4.07(多个s和m，共12H)，4.97-5.02(m，1H)，6.75-6.86(m，4H)，6.94-7.00(m，1H)，7.22-7.33(m，2H)，7.59-7.66(m，2H)，7.92-7.99(m，3H)，8.19-8.22(m，1H)；MS(ESI)m/z 538(M++1)。
向4-[1-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(561mg，1.04mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体自甲醇-氯仿-乙醚中重结晶，得到186(361mg，66％)，为白色结晶粉末。MW 523.97 mp 193-194℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.06-2.28(m，2H)，3.58-3.62(m，4H)，3.71-3.76(m，1H)，3.83-3.89(多个s和m，共4H)，5.12和5.20(各为m，共1H)，6.74-6.78(m，1H)，6.90-6.91(m，1H)，7.01-7.05(m，3H)，7.27-7.30(m，1H)，7.43-7.45(m，1H)，7.88-7.98(m，3H)，8.08-8.10(m，1H)，8.89-8.96(m，2H)，12.67(br s，1H)；MS(ESI)m/z524(M++1)；C27H26ClN3O6·1/4H2O的分析计算值C，61.36；H，5.05；N，7.95；Cl，6.71。实测值C，61.49；H，5.11；N，7.72；Cl，7.08。实施例1794-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(460mg，1.21mmol)、4-[(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(269mg，1.21mmol)、EDC·HCl(280mg，1.46mmol)、HOBt(197mg，1.46mmol)和三乙胺(205ml，1.47mmol)在THF(10ml)中的混合物搅拌过夜。用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1-60∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(555mg，78％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCL3)δ2.05-2.33(m，2H)，3.60-4.07(多个s和m，共12H)，4.96-5.01(m，1H)，6.76-6.93(m，5H)，7.28-7.30(m，1H)，7.48-7.58(m，3H)，7.92-7.99(m，3H)，8.12-8.16(m，1H)；MS(ESI)m/z 582(M+)。
向4-[1-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-(3R)-吡咯烷基氧基]苯甲酸甲酯(555mg，0.95mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将该反应混合物回流加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体自甲醇-氯仿-乙醚中重结晶，得到187(330mg，61％)，为白色结晶粉末。MW 568.42 mp 175-177℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.99-2.27(m，2H)，3.56-3.63(m，4H)，3.71-3.76(m，1H)，3.83-3.89(多个s和m，4H)，5.12和5.20(各为m，共1H)，6.74-6.78(m，1H)，6.89-7.05(m，4H)，7.30-7.35(m，1H)，7.59-7.61(m，1H)，7.88-7.98(m，4H)，8.74-8.76(m，1H)，8.92-8.95(m，1H)，12.68(br s，1H)；MS(ESI)m/z 569(M++1)；C27H26BrN3O6的分析计算值C，57.05；H，4.61；N，7.39；Br，14.06。实测值C，56.91；H，4.66；N，7.20；Br，14.59。实施例180
将1g Tentagel PHB树脂(载荷0.29mmol/g)溶于25ml DMF中，加入Fmoc-(4-羧甲基)-哌啶(318mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入DIC(220mg，0.27ml，1.74mmol)和DMAP(106mg，0.87mmol)并振摇该树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮(bromophenylblue)试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入Fmoc-L-吗啉-2-甲酸(307mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入4-邻-甲苯基脲基苯基乙酸(247mg，0.87mmol)并振摇该树脂5分钟。加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于90％TFA的二氯甲烷溶液中并振摇4小时。排出该树脂，收集洗脱液。使树脂溶于新鲜的二氯甲烷中并振摇30分钟。排出该树脂，收集洗脱液，并与第一部分合并。真空除去溶剂，使残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到85mg 188。实施例181
将1g Tentagel PHB树脂(载荷0.29mmol/g)溶于25ml DMF中，加入Fmoc-(4-羧甲基)-哌啶(318mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入DIC(220mg，0.27ml，1.74mmol)和DMAP(106mg，0.87mmol)并振摇该树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入Fmoc-L-4-苯基脯氨酸(307mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入4-邻-甲苯基脲基苯基乙酸(247mg，0.87mmol)并振摇该树脂5分钟。加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于90％TFA的二氯甲烷溶液中并振摇4小时。排出该树脂，收集洗脱液。使树脂溶于新鲜的二氯甲烷中并振摇30分钟。排出该树脂，收集洗脱液，并与第一部分合并。真空除去溶剂，使残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到82mg 189。实施例182
将1g Tentagel PHB树脂(载荷0.29mmol/g)溶于25ml DMF中，加入Fmoc-4-羧甲基-哌嗪(318mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入DIC(220mg，0.27ml，1.74mmol)和DMAP(106mg，0.87mmol)并振摇该树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入Fmoc-L-脯氨酸(294mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入4-邻-甲苯基脲基苯基乙酸(247mg，0.87mmol)并振摇该树脂5分钟。加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于90％TFA的二氯甲烷溶液中并振摇4小时。排出该树脂，收集洗脱液。使树脂溶于新鲜的二氯甲烷中并振摇30分钟。排出该树脂，收集洗脱液，并与第一部分合并。真空除去溶剂，使残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到78mg 190。实施例183
将1g Tentagel PHB树脂(载荷0.29mmol/g)溶于25ml DMF中，加入Fmoc-异哌啶甲酸(isonipecotic acid)(306mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入DIC(220mg，0.27ml，1.74mmol)和DMAP(106mg，0.87mmol)并振摇该树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入Fmoc-L-脯氨酸(294mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入4-邻-甲苯基脲基苯基乙酸(247mg，0.87mmol)并振摇该树脂5分钟。加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于90％TFA的二氯甲烷溶液中并振摇4小时。排出该树脂，收集洗脱液。使树脂溶于新鲜的二氯甲烷中并振摇30分钟。排出该树脂，收集洗脱液，并与第一部分合并。真空除去溶剂，使残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到73mg 191。实施例184
将1g Tentagel PHB树脂(载荷0.29mmol/g)溶于25ml DMF中，加入Fmoc-(4-羧甲基)-哌啶(318mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入DIC(220mg，0.27ml，1.74mmol)和DMAP(106mg，0.87mmol)并振摇该树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入Fmoc-L-脯氨酸(294mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于25ml DMF中，加入Fmoc-3-氨基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸酯(331mg，0.87mmol)并振摇该树脂5分钟。加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。使该树脂溶于二氯甲烷中，加入异氰酸邻-甲苯酯(193mg，1.45mmol，0.18ml)。振摇该树脂24小时。
排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于90％TFA的二氯甲烷溶液中并振摇4小时。排出该树脂，收集洗脱液。使树脂溶于新鲜的二氯甲烷中并振摇30分钟。排出该树脂，收集洗脱液，并与第一部分合并。真空除去溶剂，使残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到69mg 192。实施例185
将在150ml二氯甲烷中的异硫氰酸邻-甲苯酯(10.0g，67.1mmol)装入一250ml的园底烧瓶中。将该溶液冷却至-78℃，鼓泡通入氨气(过量)10分钟。立即形成沉淀并被发现是所需的产物邻-甲苯基硫脲。过滤该反应混合物，用冷的二氯甲烷充分洗涤收集的固体。真空干燥白色固体，得到10.12g(收率92％)所需的邻-甲苯基硫脲。
然后通过加入甲基碘(9.1g，62mmol)的无水甲醇(100ml)溶液使邻-甲苯基硫脲(10.12g，61mmol)甲基化。于室温下搅拌该反应物6小时，然后真空浓缩。将残留物倾入氯化铵水溶液中并用乙酸乙酯提取3次。干燥合并的有机物并真空浓缩，得到8.7g(收率84％)2-甲基-2-硫代-邻-甲苯基假脲。于室温下使假脲(8.7g，5.1mmol)溶于甲醇(100ml)和哌啶(8.7g，102mmol)中。将该混合物搅拌过夜，然后真空浓缩，得到9.2g的产物酯，为淡黄色固体。用氢氧化锂使该固体皂化，得到所需的9.0g终产物羧酸193。实施例186
使4-氨基苯基乙酸甲酯(4.0g，25mmol)溶于二氯甲烷(100ml)中，向该溶液中加入异硫氰酸邻-甲苯酯(3.7g，25mmol)。将该反应混合物回流加热4小时，然后冷却至室温。将该溶液倾入1N HCl中，然后用乙酸乙酯提取3次，经硫酸镁干燥并真空浓缩，得到5.2g(收率67％)硫脲甲酯。用氢氧化锂使该酯皂化，得到5.0g所需的4-(邻-甲苯基硫脲基)苯基乙酸194。实施例187
于室温下，将4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S，3R，4R)-3，4-亚异丙基二氧基-2-吡咯烷基羰基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.27g，1.99mmol)在饱和HCl(气体)-甲醇(20ml)中的溶液搅拌2小时，蒸发掉甲醇。使残留物溶于饱和碳酸氢钠溶液中，用氯仿-甲醇(4∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并浓缩至干。残留物经层析，用氯仿-甲醇(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S，3R，4R)-3，4-二羟基-2-吡咯烷基羰基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(990mg，83％)，为黄色无定形固体。IR(KBr)3338，2937，2830，1743，1625，1600，1532，1454cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.25(t，J＝7.1Hz，3H)，2.20(s，3H)，2.46-2.56(m，4H)，3.15(s，2H)，3.40-3.72(m，9H)，3.62(s，3H)，4.01-4.08(m，2H)，4.16(q，J＝7.1Hz，2H)，4.22(m，1H)，4.72(d，J＝2.9Hz，1H)，6.68(d，J＝7.6Hz，1H)，6.72(s，1H)，7.06(d，J＝7.6Hz，1H)，7.15-7.18(m，3H)，7.52-7.56(m，2H)，7.90(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(FAB)m/z 598(M++1)。
向4-[1-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2S，3R，4R)-3，4-二羟基-2-吡咯烷基羰基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(870mg，1.46mmol)的THF(15ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(7.00ml，1.75mmol)。于室温下搅拌3.5小时后，浓缩该反应混合物。用水稀释残留物，于0℃用1N HCl中和。浓缩该混合物，用离子交换树脂(HP-20，Mitsubishi Chemical)纯化，得到195(645mg，78％)，为无色无定形固体。IR(KBr)3330，2937，1627，1535，1454cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.38(m，1H)，2.42-2.58(m，2H)，2.64(m，1H)，3.01(s，2H)，3.13-3.71(m，8H)，3.88(s，3H)，3.89(m，1H)，4.05(m，1H)，4.58(d，J＝3.2Hz，1H)，6.76(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)，6.91-6.95(m，2H)，7.10-7.16(m，2H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，1H)，8.49(s，1H)，8.57(s，1H)；MS(FAB)m/z 570(M++1)；C28H35N5O8·2.75H2O的分析计算值C，54.32；H，6.59；N，11.31。实测值C，54.07；H，6.11；N，11.00。实施例188
向2-氨基-4-噻唑乙酸(4g，25mmol)的1∶1的二氯甲烷∶丙酮(100ml)的悬浮液中加入异氰酸邻-甲苯酯(3.5g，26mmol)。将该混合物加热至回流8小时，此时形成黄色沉淀。过滤该沉淀物，用大量的1∶1的二氯甲烷∶丙酮洗涤该固体。用热甲醇使该固体重结晶，真空干燥得到4.8g(收率66％)所需的2-(邻-甲苯基脲基)-4-噻唑乙酸196。实施例189
在一园底烧瓶中，使3-溴代苄胺(3.00g，16.13mmol)溶于二氧六环-水(1∶1)中，加入固体碳酸钠直至pH为8-9。加入Boc2O(3.87g，17.74mmol)，于室温下搅拌该反应物12小时。将该反应混合物倾入1NHCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经无水硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(4∶1己烷-乙酸乙酯)纯化。得到4.39g 197。
在氩气氛下，使Boc-保护的苄胺(2.00g，6.99mmol)溶于无水THF中。使反应物冷却至-78℃。用10分钟加入双(三甲基甲硅烷基)氨化锂(13.98ml，13.98mmol)。于-78℃搅拌该反应物1小时，然后快速加入碘代甲烷(1.98g，13.98mmol，0.87ml)。使该反应物缓慢温热至室温并搅拌过夜。将该反应物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(7∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到1.68g 198。
在一加压试管中，装入Boc-保护的3-溴代苄基甲胺(1.68g，5.60mmol)。然后将DMF、乙酸钠(0.51g，6.16mmol)、P(邻-甲苯基)3(0.51g，6.16mmol)和Pd(OAc)2(0.25g，1.12mmol)加入该试管中。用氩气吹洗试管10分钟，然后加入丙烯酸甲酯(0.53g，0.53mmol，0.55ml)。密封该试管，于135℃加热24小时。使反应物冷却至0℃。缓慢打开试管。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(6∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到1.60g 199。
在一加压试管中，装入Boc-保护的3-溴代苄基甲胺(1.00g，3.33mmol)。然后将DMF、乙酸钠(0.30g，3.36mmol)、P(邻-甲苯基)3(0.20，0.66mmol)和Pd(OAc)2(0.15g，0.66mmol)加入该试管中。用氩气吹洗试管10分钟，然后加入异丁烯酸甲酯(.37g，3.66mmol，0.39ml)。密封该试管，于135℃加热24小时。使反应物冷却至0℃。缓慢打开试管。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(6∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到1.01g 200。
将α，β-不饱和的酯(1.60g，5.49mmol)置于Paar容器中并溶于乙酸乙酯。加入Pd/C(0.3g)，用H2将该容器加压至50psi。搅拌该容器12小时。用氩气吹洗Paar容器，通过硅藻土过滤除去催化剂。减压除去溶剂。得到1.60g 201。
将α-甲基，β-不饱和的酯(1.01g，3.16mmol)置于Paar容器中并溶于乙酸乙酯。加入Pd/C，用H2将该容器加压至50psi。搅拌该容器12小时。用氩气吹洗Paar容器，通过硅藻土过滤除去催化剂。减压除去溶剂。得到996.41mg 202。
使Boc酯(304mg，1.04mmol)溶于二氯甲烷中，加入过量的三氟乙酸。然后搅拌该反应物2小时。除去溶剂，使残留物溶于乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用水、盐水洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。使残留物溶于二氯甲烷-DMF和HOBt(154.30mg，1.14mmol)中，加入4-[N’-(邻-甲苯基脲)-苯基乙酸(324.11mg，1.14mmol)和EDCI(218.53mg，1.14mmol)。搅拌该反应物24小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(乙酸乙酯)分离。得到380.32mg 203。
使所述酯(380.32mg，0.80mmol)溶于乙醇-水(4∶1)中，加入氢氧化钠。将该反应物加热至50℃2小时。TLC(乙酸乙酯)显示没有原料存在。使反应物冷却至室温。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶。得到319.40mg 204。实施例190
使Boc酯(209.60，0.65mmol)溶于二氯甲烷中，加入过量的三氟乙酸。然后搅拌该反应物2小时。除去溶剂，使残留物溶于乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用水、盐水洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。使残留物溶于二氯甲烷-DMF和HOBt(97.45mg，0.72mmol)中，加入4-[N’-(邻-甲苯基脲)-苯基乙酸(204.70mg，0.72mmol)和EDCI(138.03mg，0.72mmol)。搅拌该反应物24小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(乙酸乙酯)分离。得到237.8mg 205。
使所述酯(237.8mg，0.49mmol)溶于乙醇-水(4∶1)中，加入氢氧化钠。将该反应物加热至50℃2小时。TLC(乙酸乙酯)显示没有原料存在。使反应物冷却至室温。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶。得到207.8mg 206。实施例191
使1，2，3，4-四氢异喹啉(12.20g，91.60mmol)溶于硫酸(40ml)中，冷却至-10℃。将浓硝酸(9.0ml)缓慢加入该溶液中，同时维持内温于-10℃。加入完毕后，使该反应物静置并用12小时缓慢温热至室温。将该反应混合物缓慢加入到冰中，用氯化铵碱化水溶液。用氯仿提取水层4次。用水洗涤合并的有机层，其后经硫酸钠干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。使得到的棕色油状物溶于乙醇中，加入浓盐酸。过滤收集得到的白色固体并真空干燥。得到8.0g 207。
使6-硝基-1，2，3，4-四氢异喹啉(1.00g，5.61mmol)溶于乙醇中。然后加入溴代乙酸甲酯(0.86g，5.61mmol，0.53ml)和三乙胺(1.17g，11.59mmol，1.62ml)，将该混合物加热至回流5小时。使该溶液冷却至室温，真空浓缩该溶液。将该溶液加入水中，用乙酸乙酯提取水层3次。经硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压除去溶剂。产物经快速层析(3∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到702mg 208。
将上面的酯(702mg，2.81mmol)置于Paar容器中并溶于乙醇中。加入Pd/C(100mg)，用H2将该容器加压至50psi。搅拌该容器24小时。用氩气吹洗Paar容器，通过硅藻土过滤除去催化剂。减压除去溶剂。1H-NMR显示仅有所需产物。得到587mg 209。
在氩气氛下，使苯胺(587.0mg，2.66mmol)溶于无水二氯甲烷和吡啶中。使该反应物冷却至0℃。用5分钟加入3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰氯(837.70mg，2.66mmol)的二氯甲烷溶液。然后使该反应物温热至室温并搅拌过夜。再将该反应混合物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用饱和碳酸氢钠、水、盐水洗涤合并的有机层，再经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(乙酸乙酯)分离。得到618.36mg 210。
将上面的甲酯(618.36mg，1.20mmol)溶于THF-水，加入氢氧化锂(558.07mg，13.30mmol)。于室温下搅拌该反应混合物24小时。将该反应物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，再经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经重结晶(己烷-乙酸乙酯)纯化。得到600mg 211。实施例192
在氩气氛下，使3-硝基-苯基丙酸(1.00g，5.12mmol)溶于无水THF中。将该反应物冷却至0℃，用10分钟加入BH3-THF(1.0M，15.37mmol，15.37ml)。于0℃搅拌该反应物1小时，然后用水缓慢猝灭。使该溶液缓慢温热至室温，然后倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用饱和碳酸氢钠、水、盐水洗涤合并的有机层，再经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(1∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到909.0mg 212。
使3-硝基-苯基丙醇(909.0mg，5.02mmol)溶于无水二氯甲烷中。在第二个园底烧瓶中，在氩气氛下，将(COCl)2(700.65mg，5.52mmol，0.48ml)加入无水二氯甲烷中。然后将(COCl)2--二氯甲烷溶液冷却至-60℃，缓慢加入DMSO(862.56mg，11.4mmol，0.78ml)。于-60℃搅拌该反应物5分钟，然后用5分钟通过导管加入所述醇溶液。于-60℃搅拌该反应混合物1小时，然后加入三乙胺(2.54g，25.10mmol，3.50ml)，使该反应物缓慢温热至室温。将该反应物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用饱和碳酸氢钠、水、盐水洗涤合并的有机层，再经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。1H-NMR显示无原料存在。该醛213无需进一步纯化而原样使用。
在一园底烧瓶中，在氩气氛下，使氢化钠(132.48mg，5.52mmol)于无水THF中形成淤浆。通过注射器缓慢加入溶于无水THF中的2-膦酰基丙酸三乙酯(1.31g，5.52mmol，1.18ml)。于室温下搅拌该反应混合物30分钟。用10分钟，将在氩气氛下溶于无水THF中的上面的醛通过注射器加入到上述膦酸酯溶液中。将该反应混合物搅拌12小时。将该反应物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用饱和碳酸氢钠、水、盐水洗涤合并的有机层，再经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(1∶1乙酸乙酯-己烷)分离。得到992.0mg214。
将以上α，β-不饱和的酯(992.0mg，3.77mmol)置于Paar容器中并溶于乙醇中。用氩气吹洗该容器，加入Pd/C(200.0mg)。于50psi下，用H2替换氩气。然后振摇Paar容器12小时。用氩气将氢气从该容器中吹去，通过硅藻土过滤除去催化剂。减压除去溶剂。1H-NMR显示仅有所需产物。得到851.2mg 215。
在氩气氛下，使上面的苯胺(850.0mg，3.61mmol)溶于无水二氯甲烷和吡啶中。使该反应物冷却至0℃。用5分钟加入3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酰氯(1.14g，3.61mmol)的二氯甲烷溶液。然后使该反应物温热至室温并搅拌过夜。再将该反应混合物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用饱和碳酸氢钠、水、盐水洗涤合并的有机层，再经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(乙酸乙酯)分离。得到576.0mg 216。
将上面的乙酯(576.0mg，mmol)溶于乙醇-水中，加入氢氧化钠。将该反应混合物加热至50℃2小时。使该反应物冷却至室温，再倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，再经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经Sep-Pak柱纯化。得到534mg 217。实施例193
将1g Wang树脂(tentagel S-PHB，0.3mmol载荷)悬浮于3-(Fmoc-氨基)苯基丙酸(361.31mg，0.90mmol)、DMAP(109.95mg，0.90mmol)、HOBt(243.63mg，0.90mmol)和DIC(227.16mg，1.80mmol，0.28ml)在DMF和二氯甲烷的混合物中的溶液中。振摇该混合物20小时并排出。用DMF、甲醇、二氯甲烷洗涤树脂218并减压干燥。
向上面的树脂(500mg，0.15mmol)中加入哌啶-DMF(50％v/v，4ml)，振摇该混合物4小时。用DMF、甲醇、二氯甲烷洗涤树脂。向该树脂中加入TMOF和异丁醛(isobutrylaldehyde)(108.17mg，1.50mmol，0.14ml)。振摇该混合物4小时。排出树脂，加入新配制的TMOF和异丁醛。然后振摇该混合物12小时。排出树脂并使之溶于甲醇-1％乙酸中，加入NaCNBH3(150.0mg，2.39mmol)。振摇该树脂6小时。排出树脂，用甲醇、甲醇-三乙胺、甲醇、DMF、二氯甲烷洗涤。使该树脂溶于DMF中，加入3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(141.45mg，0.45mmol)、PyBrop(209.78mg，0.45mmol)和DIEA(58.16mg，0.45mmol，0.08ml)。然后振摇树脂24小时，再排出。用DMF、甲醇、二氯甲烷洗涤该树脂。向该树脂中加入TFA的二氯甲烷溶液(30％v/v，3ml)，振摇该混合物5小时。过滤该混合物，真空浓缩滤液。经Sep-Pak柱纯化残留物。除去溶剂后，将乙醚加入到该残留物中，收集固体，得到15mg 219，为结晶固体。实施例194
使Tentagel PHB树脂(1.0g，载荷0.29mmol/g)溶于25ml DMF中，加入6-溴代己酸(169mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入DIC(220mg，0.27ml，1.74mmol)和DMAP(35mg，0.29mmol)并振摇该树脂14小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。
向该树脂中加入在15ml DMF中的2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-甲胺(227mg，1.74mmol)和碘化锂(232mg，1.74mmol)。于室温下振摇树脂14小时。排出树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。
使该树脂溶于25ml DMF中，加入4-邻-甲苯基脲基-3-甲氧基苯基乙酸(247mg，0.87mmol)并振摇该树脂5分钟。加入PyBroP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂14小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。
使树脂溶于90％TFA的二氯甲烷溶液中并振摇4小时。排出该树脂，收集洗脱液。使树脂溶于新鲜的二氯甲烷中并振摇30分钟。排出该树脂，收集洗脱液，并与第一部分合并。真空除去溶剂，使残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到56mg 220。实施例195
将1g Tentagel PHB树脂(载荷0.29mmol/g)溶于25ml DMF中，加入Fmoc-7-氨基庚酸(319mg，0.87mmol)。振摇该树脂5分钟，然后加入DIC(220mg，0.27ml，1.74mmol)和DMAP(106mg，0.87mmol)并振摇该树脂24小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。使树脂溶于20％哌啶的DMF溶液中并振摇4小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阳性溴苯篮试验。
使该树脂溶于25ml DMF中，加入4-邻-甲苯基脲基-3-甲氧基苯基乙酸(247mg，0.87mmol)并振摇该树脂5分钟。加入PyBrOP(406mg，0.87mmol)和DIEA(123mg，0.15ml，0.87mmol)并振摇树脂14小时。排出该树脂，用DMF(3x)、甲醇(3x)和二氯甲烷(3x)洗涤，然后在真空下干燥。树脂给出阴性溴苯篮试验。
使树脂溶于90％TFA的二氯甲烷溶液中并振摇4小时。排出该树脂，收集洗脱液。使树脂溶于新鲜的二氯甲烷中并振摇30分钟。排出该树脂，收集洗脱液，并与第一部分合并。真空除去溶剂，使残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶，得到66mg 221。实施例196
于-78℃，用30分钟向草酰氯(3.8g，30mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液中滴加DMSO(2.4g，31mmol)。用15分钟向该溶液中滴加N-Boc-脯氨醇(5.0g，25mmol)中。于-78℃，将该反应物搅拌3小时，然后通过加入冷的1N HCl猝灭，用乙酸乙酯提取3次，干燥并真空浓缩，得到粗品脯氨醛，将其经层析(25％乙酸乙酯/己烷)，得到3.8g所需产物。
制备(三苯亚正膦基(triphenylphosphoranylidene))丁酸甲酯(6.9g，19mmol)的THF(100ml)溶液。于-78℃加入LiHMDS(10ml的2.0M溶液，20mmol)，然后搅拌1小时。-次性加入上面的脯氨醛(3.8g，19mmol)，用4小时使该混合物温热至室温。通过加入1N HCl猝灭该反应物，用乙酸乙酯提取3次，干燥并真空浓缩，得到粗品烯烃，将其经层析(25％乙酸乙酯/己烷)，得到2.9g所需产物。
通过将该烯烃(2.9g，10mmol)置于乙醇(20ml)中并加入催化量的10％Pd/C，接着于40psi下，在Parr氢化器中使烯烃氢化4小时，得到的烷烃可无需纯化而使用。于室温下，通过加入1∶1的TFA/二氯甲烷除去Boc基团。搅拌该反应物2小时，真空除去溶剂。粗品胺1.9g可无需进一步纯化而使用。
制备上面的游离胺(1.9g，10mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液。于室温下，向该溶液中加入EDCI(2.95g，10mmol)、DMAP(1.2g，10mmol)和4-邻-甲苯基脲基-3-甲氧基苯基乙酸(3.15g，10mmol)。搅拌该反应混合物4小时，然后通过加入1N HCl猝灭，用乙酸乙酯提取3次，干燥并真空浓缩。粗品酰胺经层析(5％甲醇/二氯甲烷)，得到1.95g所需产物。
使该酯(1.95g，4.2mmol)溶于1∶1的THF-水中，于室温下加入氢氧化锂。然后搅拌反应混合物3小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经无水硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。然后用冷的乙醚研磨该固体，得到1.65g所需的羧酸222。实施例197
向8-氨基辛酸甲酯(2.0g，12mmol)的1∶1的二氧六环∶水(100ml)的溶液中加入Boc酸酐(2.8g，13mmol)和碳酸钾(10g)。于室温下搅拌该溶液14小时。然后将该反应物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取3次，干燥并真空浓缩。粗品氨基甲酸酯经层析(50％乙酸乙酯/己烷)，得到2.7g所需产物。
通过将Boc保护的胺置于THF(75ml)中，接着于-78℃加入LiHMDS (25ml的2.0M溶液，50mmol)，然后搅拌该溶液30分钟，一次性加入甲基碘(7.2g，50mmol)，使该反应混合物温热至室温过夜将Boc保护的胺甲基化。通过加入1N HCl猝灭该反应物，用乙酸乙酯提取3次并真空浓缩。粗品甲基化的氨基甲酸酯经层析(50％乙酸乙酯/己烷)，得到1.9g所需的二甲基产物。
于室温下，通过加入1∶1的TFA/二氯甲烷除去Boc基团。搅拌该反应物2小时，真空除去溶剂。粗品胺900mg可无需进一步纯化而使用。
制备上面的游离胺(900mg，4.5mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液。于室温下，向该溶液中加入EDCI(1.33g，4.5mmol)、DMAP(567mg，4.5mmol)和4-邻-甲苯基脲基-3-甲氧基苯基乙酸(1.45g，4.6mmol)。搅拌该反应混合物4小时，然后通过加入1N HCl猝灭，用乙酸乙酯提取3次，干燥并真空浓缩。粗品酰胺经层析(5％甲醇/二氯甲烷)，得到1.2g所需产物。
使该酯(1.2g，2.4mmol)溶于1∶1的THF-水中，于室温下加入氢氧化锂。然后搅拌反应混合物3小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经无水硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。然后用冷的乙醚研磨该固体，得到1.01g所需的羧酸223。实施例198
向4-氨基苯基乙酸(10g，66mmol)的1∶1的二氯甲烷∶丙酮(100ml)的悬浮液中加入异氰酸邻-甲苯酯(8.8g，66mmol)。将该混合物加热至回流4小时，此时形成白色沉淀。过滤沉淀，用大量的1∶1的二氯甲烷∶丙酮洗涤该固体。用热甲醇使该固体重结晶，真空干燥得到14.1g(收率75％)所需的4-(邻-甲苯基脲基)苯基乙酸224。实施例199
向2-氨基-4-噻唑乙酸(4g，25mmol)的1∶1的二氯甲烷∶丙酮(100ml)的悬浮液中加入异氰酸邻-甲苯酯(3.5g，26mmol)。将该混合物加热至回流8小时，此时形成黄色沉淀。过滤沉淀，用大量的1∶1的二氯甲烷∶丙酮洗涤该固体。用热甲醇使该固体重结晶，真空干燥得到4.8g(收率66％)所需的2-(邻-甲苯基脲基)-4-噻唑乙酸225。实施例200
使3-溴-4-羟基苄腈(5.00g，25.25mmol)溶于DMF中。加入苄基溴(4.75g，27.78mmol，3.30ml)和碳酸铯(16.45g，50.50mmol)，将该反应物加热至50℃2小时。使该溶液冷却至室温并倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(己烷至8∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到8.90g 226。
在氩气氛下，使3-溴-4-苄氧基苄腈(1.50g，5.21mmol)溶于无水THF中，将该溶液冷却至0℃，用5分钟通过注射器加入BH3-THF(10.41ml，10.41mm)。将该反应混合物温热至室温，然后加热至回流12小时。使该溶液冷却至0℃，缓慢加入甲醇。当没有观察到更多的气体放出时，将该溶液温热至室温，加入过量的1N氢氧化钠溶液。加入Boc2O(1.25g，5.73mmol)，于室温下搅拌该反应混合物12小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(7∶1乙酸乙酯-己烷)分离。得到1.80g 227。
在氩气氛下，使Boc-保护的苄胺(1.80g，4.59mmol)溶于无水THF中。使反应物冷却至-78℃。用10分钟加入双(三甲基甲硅烷基)氨化锂(13.77ml，13.77mmol)。于-78℃搅拌该反应物1小时，然后快速加入碘代甲烷(1.95ml，13.77mmol，0.86ml)。使该反应物缓慢温热至室温并搅拌过夜。将该反应物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(7∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到1.70g 228。
将4-(N-甲基-Boc-氨基甲基)-2-溴代苄氧基苯酚(1.70g，4.18mmol)置于一加压试管中。然后将DMF、乙酸钠(0.38g，4.60mmol)、dppp(0.35g，0.84mmol)和Pd(OAc)2(0.19g，0.84mmol)加入该试管中。用氩气吹洗试管10分钟，然后加入丙烯酸甲酯(0.40g，4.60mmol，0.41ml)。密封该试管，于135℃加热24小时。使反应物冷却至0℃，缓慢打开试管。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(6∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到1.12g 229。
将不饱和的酯(307.40mg，0.75mmol)溶于二氯甲烷中，加入过量的TFA。于室温下，搅拌该反应物4小时。减压除去溶剂，使残留物在高真空下干燥。除去溶剂，使残留物溶于乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用水、盐水洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。使残留物溶于二氯甲烷-DMF和HOBt(110.99mg，0.82mmol)中，加入3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(258.31mg，0.82mmol)和EDCI(157.20mg，0.82mmol)。搅拌该反应物24小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(乙酸乙酯)分离。得到296.30mg 230。
使不饱和酯(296.30mg，0.49mmol)溶于乙酸乙酯中，在氩气氛下加入Pd/C(75mg)，用1个大气压氢气替换氩气并搅拌24小时。除去氢气，代之以氩气。通过硅藻土过滤除去催化剂，用乙酸乙酯洗涤硅藻土垫3次。减压除去溶剂。H1-NMR显示仅有所需产物。不需要进一步纯化。得到233.00mg 231。
使该酯(233.00mg，0.45mmol)溶于THF-水(4∶1)中，加入氢氧化锂(94.41mg，2.25mmol)。于室温下，搅拌反应混合物24小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。用乙醚-己烷(1∶1)洗涤该产物，在高真空下干燥。得到211.58mg 232。实施例201
使羧酸(65.00mg，0.13mmol)溶于苯中，加入对-甲苯磺酸(10.00mg，0.06mmol)。加上迪安-斯达克榻分水器，将该溶液加热至回流24小时。使反应物冷却至室温并倾入饱和碳酸氢钠中。分离有机层，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(4∶1己烷-乙酸乙酯至乙酸乙酯)分离。得到29.00mg 233。实施例202
使5-溴代烟酸(5.15g，25.49mmol)溶于乙醇中，加入硫酸(1ml)，将该溶液加热至回流24小时。使该溶液冷却至室温并浓缩。然后将该溶液加入饱和碳酸氢钠中，用乙醚提取水层3次。经硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压除去溶剂。产物有足够的纯度用于下一步骤。得到5.42g 234。
使5-溴代烟酸乙酯(5.40g，23.47mmol)溶于95％乙醇中，于室温下，缓慢加入硼氢化钠(8.31g，225.69mmol)。加入后，于室温下搅拌该溶液24小时。将水缓慢加入到该溶液中，然后搅拌该混合物4小时。减压除去乙醇，用二氯甲烷提取水层3次。经硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压除去溶剂。产物经快速层析(2∶1乙酸乙酯-己烷)分离。得到2.12g 235。
使苄基醇(2.12g，11.28mmol)溶于乙醚中，将HCl气体鼓泡通入该溶液10分钟。于室温下搅拌该溶液1小时，然后过滤收集固体。用乙醚洗涤该固体，然后干燥。将盐酸盐加入SOCl2中，将该混合物加热至回流1.5小时。使该溶液冷却至室温，加入乙醚以沉淀出产物。过滤收集该固体，用乙醚洗涤并在真空下干燥。得到2.42g 236。
于室温下，用1小时将苄基氯(2.42g，9.96mmol)加入CH3NH2(75.9ml，2.5M在乙醇中)中。于室温下搅拌该反应物48小时。浓缩该溶液并加入到饱和碳酸氢钠中。用乙酸乙酯提取水层3次。经硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压除去溶剂。得到1.19g 237。
使3-溴-5-(N-甲基-氨基甲基)-吡啶(1.19g，5.01mmol)溶于DMF中，加入三乙胺(0.90g，1.24ml，8.89mmol)。加入Boc2O(1.55g，7.10mmol)。于室温下搅拌该反应混合物48小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(2％甲醇-二氯甲烷)分离。得到1.6g 238。
使a-甲基丙烯酸钠(5.00g，46.27mmol)溶于DMF中，于室温下，加入苄基溴(8.70g，50.89mmol)。然后加入碳酸钾(7.03g，50.89mmol)，将该溶液加热至50℃24小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙醚提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压下小心除去溶剂。产物经快速层析(2％乙醚-戊烷)分离。得到6.93g 239。
将3-溴-5-(N-甲基-Boc-氨基甲基)-吡啶(700.00mg，2.33mmol)置于一加压试管中。将DMF、三乙胺(260.05mg，2.57mmol，0.36ml)、dPpp(193.85mg，0.47mmol)和Pd(OAc)2(105.52mg，0.47mmol)加入该试管中。用氩气吹洗试管10分钟，然后加入甲基丙烯酸苄酯(452.86mg，2.57ml)。密封该试管，加热至135℃24小时。使反应物冷却至0℃，缓慢打开试管。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(6∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到785.23mg 240。
将不饱和的酯(392.61mg，0.99mmol)溶于二氯甲烷中，加入过量的TFA。于室温下，搅拌该反应物4小时。减压除去溶剂，使残留物在高真空下干燥。除去溶剂，使残留物溶于乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用水、盐水洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。使残留物溶于二氯甲烷-DMF和HOBt(147.53mg，1.09mmol)中，加入3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(342.64mg，1.09mmol)和EDCI(208.96mg，1.09mmol)。搅拌该反应物24小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(乙酸乙酯)分离。得到363.79mg 241。
使不饱和酯(363.00mg，0.61mmol)溶于甲醇中，在氩气氛下加入Pd/C(100.00mg)。用1个大气压氢气替换氩气并搅拌24小时。除去氢气，代之以氩气。通过硅藻土过滤除去催化剂，用乙酸乙酯洗涤硅藻土垫3次。减压除去溶剂。H1-NMR显示仅有所需产物。用乙醚洗涤该固体，然后在高真空下干燥。得到254.79mg 242。实施例203
使3-氰基苯甲醛(9.41g，71.76mmol)溶于乙醇中并冷却至0℃。少量多次加入硼氢化钠(2.71g，71.76mmol)。于0℃搅拌该溶液30分钟，然后温热至室温并搅拌1小时。将该反应物缓慢倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。使残留物溶于DMF中，加入咪唑(2.08g，30.50mmol)。然后加入TBDPSCl(4.61g，16.78mmol，4.36ml)，于室温下搅拌该反应物12小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(7∶1己烷-乙酸乙酯至4∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到16.23g 243。
将甲硅烷基保护的3-氰基苄基醇(8.50g，34.36mmol)溶于乙酸乙酯中，加入Boc2O(8.25g，37.79mmol)。加入Pd/C(1.0g)，以50psi氢气加压Parr容器。振摇该容器24小时，再用氩气吹洗氢气，通过硅藻土垫过滤除去催化剂，用乙酸乙酯洗涤硅藻土3次。减压除去溶剂，产物经快速层析(10∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到11.10g 244。
在氩气氛下，使O-甲硅烷基-N-Boc-保护的苄基醇(5.00g，14.22mmol)溶于无水THF中。使反应物冷却至-78℃。用10分钟加入双(三甲基甲硅烷基)氨化锂(42.67ml，42.67mmol)。于-78℃搅拌该反应物1小时，然后快速加入碘代甲烷(6.06g，42.67mmol，2.66ml)。使该反应物缓慢温热至室温并搅拌过夜。将该反应物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(2％乙酸乙酯-己烷)分离。得到4.7g 245。
于室温下，使O-甲硅烷基-Boc-N-甲基保护的苄基醇(4.7g，9.60mmol)溶于THF和TBAF(14.39ml，1.0M在THF中)中。搅拌该溶液4小时。TLC显示没有原料存在。将该反应物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(4∶1己烷-乙酸乙酯至1∶1己烷-乙酸乙酯)分离。得到2.39g 246。
在氩气氛下，使N-甲基Boc保护的苄基醇(1.00g，3.98mmol)溶于无水二氯甲烷中。加入三苯膦(1.46g，5.57mmol)，将该溶液冷却至0℃。用10分钟加入溶于无水二氯甲烷中的四溴化碳(1.85g，5.57mmol)。于0℃搅拌该溶液1小时，然后减压除去溶剂。使残留物溶于乙醚中，过滤除去产生的固体，收集滤液，减压除去溶剂。产物经快速层析(2％乙醚-戊烷)分离。得到1.15g 247。
于-78℃、氩气下，将LHMDS(3.23ml，3.23mmol)加入无水DME中。用15分钟将溶于无水DME中的丁酸甲酯(300mg，2.94mmol，0.33ml)加入LHMDS中，于-78℃搅拌该溶液1小时。用15分钟将溶于无水DME中的3-N-甲基-N-Boc保护的苄基溴(1.02g，3.23mmol)加入该烯醇化物溶液中，再使该溶液缓慢温热至-20℃并搅拌4小时。将该反应物倾入lN HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。过滤该溶液，减压除去溶剂。经快速层析(3％乙酸乙酯-己烷)分离产物。得到414mg 248。
使Boc酯(121.60mg，0.36mmol)溶于二氯甲烷中，加入过量的三氟乙酸。然后搅拌该反应物2小时。除去溶剂，使残留物溶于乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用水、盐水洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。使残留物溶于二氯甲烷-DMF和HOBt(54.10mg，0.40mmol)中，加入3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(125.74mg，0.40mmol)和EDCI(77.0mg，0.40mmol)。搅拌该反应物24小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(乙酸乙酯)分离。得到165.20mg 249。
使所述酯(165.20，0.31mmol)溶于乙醇-水(4∶1)中，加入氢氧化钠。将该反应物加热至50℃2小时。TLC(乙酸乙酯)显示没有原料存在。使反应物冷却至室温。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。然后用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。残留物从乙酸乙酯-己烷中重结晶。得到120.00mg 250。实施例204
于-78℃、氩气下，用10分钟将丁内酯(250mg，2.90mmol，223.20ml)加入在THF中的LHMDS(2.90ml，1.0M在己烷中)中。于-78℃搅拌该溶液1小时。用15分钟将溶于无水DME中的3-N-甲基-N-Boc保护的苄基溴(991.24mg，2.90mmol)加入烯醇化物溶液中，再使该溶液缓慢温热至室温并搅拌12小时。将该反应物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。过滤该溶液，减压除去溶剂。经快速层析(4∶1己烷-乙酸乙酯至1∶1乙酸乙酯-己烷)分离产物。得到501.18mg 251。
使Boc酯(250.00mg，0.78mmol)溶于二氯甲烷中，加入过量的三氟乙酸。然后搅拌该反应物2小时。除去溶剂，使残留物溶于乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用水、盐水洗涤有机层，然后经硫酸钠干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。使残留物溶于二氯甲烷-DMF和HOBt(116.40mg，0.86mmol)中，加入3-甲氧基-4-(N’-苯基脲基)苯基乙酸(270.33mg，0.86mmol)和EDCI(165.06mg，0.86mmol)。搅拌该反应物24小时。将该溶液倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取水层3次。用水、盐水洗涤合并的有机层，其后经硫酸镁干燥。过滤该溶液，减压除去溶剂。产物经快速层析(乙酸乙酯)分离。得到119.00mg 252。实施例2053-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基乙氧基]苯甲酸
用15分钟向搅拌的、冷(0℃)的N-甲基乙醇胺(3.10g，41.27mmol)、三乙胺(11.80ml，84.66mmol)的DMF-水(3∶1，v/v，40ml)溶液中滴加30％氯代甲酸苄酯(25.40g，49.13mmol)的甲苯溶液。于室温下搅拌得到的混合物1天。用乙酸乙酯提取该混合物。用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(3∶1，v/v)，然后用氯仿作为洗脱剂，得到4.67g(54％)N-甲基-N-(苄氧基羰基)乙醇胺，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)d1.82(bs，1H)，3.00(s，3H)，3.46(bs，2H)，3.77(bs，2H)，5.13(s，2H)，7.29-7.36(m，5H)。
向4-羟基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(2.01g，10.25mmol)、N-甲基-N-(苄氧基羰基)乙醇胺(2.11g，10.08mmol)、三苯膦(3.26g，12.43mmol)的THF的搅拌溶液中加入DIAD(2.65ml.13.46mmol)，将该反应混合物在回流下加热过夜。蒸发该混合物，残留物经硅胶短柱层析，用正己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到3-甲氧基-4-[2-甲基-2-(苄氧基羰基)氨基乙氧基]苯甲酸乙酯，为粗产物。
向粗产物(5.20g，13.42mmol)的乙醇(50ml)溶液中加入乙酸(5ml)，使该溶液经5％Pd/C氢化4小时。过滤该混合物以除去催化剂，蒸发滤液。用氯仿稀释残留物，用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到510mg(2步，20％)3-甲氧基-4-(2-甲基氨基乙氧基)苯甲酸乙酯，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)d 1.39(t，3H，J＝7.3Hz)，1.82(bs，1H)，2.52(s，3H)，3.04(t，2H，J＝5.3Hz)，3.91(s，3H)，4.18(t，2H，J＝5.3Hz)，4.36(q，2H，J＝7.3Hz)，6.90(d，1H，J＝8.3Hz)，7.55(d，1H，J＝2.0Hz)，7.65(dd，1H，J＝2.0，8.3Hz)。
向3-甲氧基-4-(2-甲基氨基乙氧基)苯甲酸乙酯(510mg，2.01mmol)的DMF(13ml)的搅拌溶液中加入3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(900mg，1.87mmol)和三乙胺(0.420ml，3.01mmol)，将得到的混合物搅拌2天。用乙酸乙酯稀释该混合物，用1N HCl、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤并经硫酸钠干燥。蒸发后，残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)洗脱，得到880mg(85％)3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基乙氧基]苯甲酸乙酯，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)d 1.37-1.41(m，3H)，2.28(s，3H)，3.03和3.18(s，3H)，3.56(s，2H)，3.65(s，2H)，3.75-3.87(m，6H)，4.06-4.24(2H，m)，4.33-4.39(m，2H)，6.68-8.08(多个m，12H)。
向3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基乙氧基]苯甲酸乙酯(880mg，1.601mmol)的THF(15ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(15ml)，将该反应混合物回流加热过夜。将该混合物倾入1N HCl(100ml)中，收集固体。使粗品固体从甲醇-氯仿中重结晶，得到253，为白色粉末。IR(KBr)1700cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.50(s，2H)，2.91和3.12(s，3H)，3.53-3.76(m，2H)，3.80(s，3H)，3.84(s，3H)，4.16-4.21(m，2H)，6.72-8.56(多个m，12H)，12.68(bs，1H)；MS(FAB)m/z 522(M++1)；C28H31N3O7·1H2O的分析计算值C，62.33；H，6.16；N，6.63。实测值C，62.17；H，6.05；N，7.57。实施例2064-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]间苯二酸
于室温下，向N-甲基-N-苄氧基羰基乙醇胺(1.05g，5.02mmol)、4-羟基间苯二酸二甲酯(1.05g，5.00mmol)、三苯膦(1.59g，6.06mmol)的THF(20ml)的搅拌溶液中加入DIAD(1.28ml，6.50mmol)。将得到的混合物在回流下加热过夜。冷却至室温后，蒸发该混合物。使残留物溶于乙醇中，加入5％Pd/C(200mg)。将得到的搅拌混合物于1个大气压下氢化2小时。过滤该混合物以除去催化剂，蒸发滤液。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(30∶1，v/v)作为洗脱剂，得到480mg(36％，两步)4-(2-甲基氨基乙氧基)间苯二酸二甲酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3)d 1.68(s，1H)，2.53(s，3H)，3.01-3.04(m，2H)，3.89(s，3H)，3.90(s，3H)，4.21-4.23(m，2H)，7.00(d，1H，J＝8.8Hz)，8.14(dd，1H，J＝2.4，8.8Hz)，8.50(d，1H，J＝2.4Hz)；MS(FAB)m/z 268(M++1)。
向4-(2-甲基氨基乙氧基)间苯二酸二甲酯(410mg，1.53mmol)的DMF(13ml)的搅拌溶液中加入3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(700mg，1.46mmol)和三乙胺(340μl，2.44mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用1N HCl、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。经硫酸钠干燥该溶液，蒸发得到780mg(95％)4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基乙氧基]间苯二酸二甲酯，为结晶粉末。1H-NMR(CDCl3)d 2.29(s，3H)，3.24(s，3H)，3.59(s，3H)，3.67-3.68(m，2H)，3.84(s，3H)，3.91(s，3H)，3.81-3.86(m，2H)，4.25-4.28(m，2H)，651-8.48(多个m，12H)；MS(FAB)m/z 564(M++1)。
向4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基乙氧基)间苯二酸二甲酯(780mg，1.384mmol)的THF(30ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(30ml)。然后将得到的混合物回流加热过夜。将该混合物倾入冰-1N HCl(200ml)中，收集固体。使粗品固体从甲醇-氯仿中重结晶，得到420mg(57％)4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]间苯二酸254，为白色结晶粉末。mp139-141℃；IR(KBr)1700cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.94(s，3H)，3.18(s，3H)，3.62-3.86(m，共8H)，4.24-4.28(m，2H)，6.74-8.58(多个m，共12H)，12.91(bs，1H)；MS(FAB)m/z 536(M++1)；C28H29N3O8·2.5HCl的分析计算值C，53.66；H，5.07；N，6.70。实测值C，53.80；H，4.64；N，6.70。实施例2073-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基乙氧基]苯甲酸
于室温下，向2-乙醇胺(5.16g，84.48mmol)、三乙胺(23.50ml，168.60ml)的二氧六环-水(1/1，160ml)溶液中滴加(Boc)2O(23.40ml，101.86mmol)。于室温下搅拌反应混合物2天。用氯仿稀释得到的混合物。用0.5N HCl、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。经硫酸钠干燥分离的有机层，蒸发得到11.86g(87％)N-Boc-2-乙醇胺，为油状物。1H-NMR(CDCl3)d 1.45(s，9H)，3.29-3.31(m，2H)，3.71-3.72(m，2H)。
向4-羟基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(1.46g，7.44mmol)、N-Boc乙醇胺(1.19g，7.38mmol)、三苯膦(2.53g，9.65mmol)的THF(30ml)的搅拌溶液中加入DIAD(1.90ml.9.65mmol)，然后将得到的混合物在回流下加热过夜。蒸发该混合物得到粗品胶状物。使粗产物溶于二氯甲烷(20ml)和TFA(20ml)中。于室温下搅拌得到的混合物2.5小时。真空浓缩该混合物，用饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发，得到1.61g(90％，两步)3-甲氧基-4-(2-氨基乙氧基)苯甲酸乙酯，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)d 1.39(t，3H，J＝7.3Hz)，3.14-3.17(m，2H)，3.92(s，3H)，4.09-4.11(m，2H)，4.36(q，2H，J＝7.3Hz)，6.89(d，1H，J＝8.3Hz)，7.56(d，1H，J＝2.0Hz)，7.66(dd，1H，J＝2.0，8.3Hz)。
向3-甲氧基-4-(2-氨基乙氧基)苯甲酸乙酯(250mg，1.04mmol)和3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(500mg，1.04mmol)的搅拌溶液中加入三乙胺(210μl，3.01mmol)，将得到的混合物搅拌2天。将0.25N氢氧化钠(20ml)和THF(20ml)加入该混合物中，于回流下将得到的混合物加热过夜。冷却后，蒸发该混合物，通过加入1N HCl使残留物酸化。用二氯甲烷提取该混合物，用盐水洗涤提取物。经硫酸钠干燥并蒸发，得到的粗品固体从氯仿中重结晶，得到110mg(20％，两步)3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基乙氧基]苯甲酸255，为白色结晶粉末。mp 180-181℃；IR(KBr)1687cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)d 2.24(s，3H)，3.37(s，2H)，3.38(s，2H)，3.41-3.50(m，2H)，3.81(s，3H)，3.83(s，3H)，4.06-4.08(m，2H)，6.76-8.55(多个m，共12H)；MS(FAB)m/z 508(M++10)；C27H29N3O7·1/2H2O的分析计算值C，62.78；H，5.85；N，8.13。实测值C，62.46；H，5.69；N，8.03。实施例2083-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]乙基氨基乙氧基]苯甲酸
向3-甲氧基-4-(2-氨基乙氧基)苯甲酸乙酯(1.93g，8.07mmol)和三乙胺(2.00ml，14.35mmol)的冷(0℃)的溶液中加入TFAA(1.35ml.9.56mmol)，于室温下将得到的混合物搅拌过夜。用乙醚稀释得到的混合物，用饱和碳酸氢钠、1N HCl、水和盐水顺序洗涤。经硫酸钠干燥提取物并蒸发，得到1.22g(45％)3-甲氧基-4-(2-N-三氟乙酰氨基乙氧基)苯甲酸乙酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3)d 1.39(t，3H，J＝7.3Hz)，3.77-3.81(m，2H)，3.92(s，3H)，4.18-4.20(m，2H)，4.37(q，2H，J＝7.3Hz)，6.92(d，1H，J＝8.7Hz)，7.59(d，1H，J＝2.0Hz)，7.67(dd，1H，J＝2.0，8.7Hz)；MS(FAB)m/z 335(M+)，290(M+-OEt)。
于室温下，向3-甲氧基-4-(2-N-三氟乙酰氨基乙氧基)苯甲酸乙酯(1.20g，3.58mmol)的DMF(15ml)的搅拌溶液中加入碳酸钾(0.98g，7.09mmol)和EtI(0.43ml，5.38mmol)。于60℃将得到的混合物搅拌2天。用乙酸乙酯稀释该混合物，用1N HCl、盐水依次洗涤，经硫酸钠干燥。蒸发溶剂，残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷-乙酸乙酯(2∶1，v/v)作为洗脱剂，得到990mg(76％)3-甲氧基-4-[2-(N-乙基-N-三氟乙酰氨基)乙氧基苯甲酸乙酯，为黄色结晶固体。1H-NMR(CDCl3)d 1.28-1.31(m，3H)，1.37-1.40(m，3H)，3.64-3.69(m，2H)，3.81-3.84(m，2H)，3.92(s，3H)，4.27-4.30(m，2H)，4.34-4.39(m，2H)，6.89(d，1H，J＝8.3Hz)，7.55(d，1H，J＝2.0Hz)，7.66(dd，1H，J＝2.0，8.3Hz)；MS(FAB)m/z 364(M++1)。
向3-甲氧基-4-[2-(N-乙基-N-三氟乙酰氨基)乙氧基苯甲酸乙酯(990mg，2.73mmol)的THF-甲醇-水(2∶1∶1，v/v，20ml)的搅拌溶液中加入碳酸钾(560mg，4.05mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。用水稀释得到的混合物，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠、盐水顺序洗涤提取物。经硫酸钠干燥并蒸发，得到800mg(q.y.)3-甲氧基-4-(2-乙基氨基乙氧基)苯甲酸乙酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3)d 1.15(t，3H，J＝7.3Hz)，1.39(t，3H，J＝7.3Hz)，1.76(bs，1H)，2.74(q，2H，J＝7.3Hz)，3.08(t，2H，J＝5.4Hz)，3.91(s，3H)，4.18(t，2H，J＝5.4Hz)，4.36(q，2H，J＝7.3Hz)，6.90(d，1H，J＝8.3Hz)，7.55(d，1H，J＝2.0Hz)，7.66(dd，1H，J＝2.0，8.3Hz)；MS(FAB)m/z 268(M++1)。
向3-甲氧基-4-(2-乙基氨基乙氧基)苯甲酸乙酯(290mg，1.08mmol)和3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(502mg，1.05mmol)的DMF(7ml)的搅拌溶液中加入三乙胺(250μl，1.79mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤。经硫酸钠干燥。蒸发溶剂，残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(40∶1，v/v)作为洗脱剂，得到550mg(93％)3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]乙基氨基乙氧基]苯甲酸乙酯，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)d 1.11-1.18(m，3H)，1.37-1.41(m，3H，)，2.30(s，3H)，3.47-3.53(m，2H)，3.61-3.75(m，7H)，3.84(s，3H)，4.03-4.27(m，2H)，4.33-4.39(m，2H)，6.34-8.07(多个m，共12H)。
向3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]乙基氨基乙氧基]苯甲酸乙酯(550mg，0.98mmol)的THF(15ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(15ml)。然后将得到的混合物回流加热2天。将该混合物倾入1N HCl中，收集固体。使粗品固体从乙醇-氯仿中重结晶，得到182mg(35％)3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]乙基氨基乙氧基]苯甲酸256，为白色结晶粉末。mp 115-118℃；IR(KBr)1707cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.02-1.12(m，3H)，2.25(s，3H)，2.50(s，2H)，3.35-3.89(m，10H)，4.11-4.16(m，2H)，6.71-8.56(多个m，共12H)，12.56(br s，1H)；MS(FAB)m/z 536(M++1)；C29H33N3O7·3/4H2O的分析计算值C，63.43；H，6.33；N，7.65。实测值C，63.34；H，6.28；N，7.28。实施例2093-硝基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基乙氧基]苯甲酸
于室温下，向4-羟基-3-硝基苯甲酸(5.18g，28.29mmol)的苯-甲醇(4∶1，v/v，140ml)的搅拌溶液中加入TMSCHN2(14.10ml，28.20mmol，2M的己烷溶液)，搅拌得到的混合物过夜。蒸发该混合物，残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿作为洗脱剂，得到4.18g(75％)3-硝基-4-羟基苯甲酸甲酯，为黄色结晶固体。1H-NMR(CDCl3)d 3.95(s，3H)，7.22(d，1H，J＝8.8Hz)，8.24(dd，1H，J＝2.0，8.8Hz)，8.83(d，1H，J＝2.0Hz)，10.89(s，1H)。
向3-硝基-4-羟基苯甲酸甲酯(1.98g，10.04mmol)、N-Boc乙醇胺(1.63g，10.11mmol)和三苯膦(3.43g，13.08mmol)的THF(40ml)的搅拌溶液中加入DIAD(2.57ml，13.05mmol)，然后将反应混合物在回流下加热过夜。蒸发得到的混合物得到一胶状物。使残留的粗品胶状物溶于二氯甲烷(30ml)和TFA(30ml)中，于室温下搅拌混合物1小时。真空浓缩该混合物，用饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性。用氯仿提取该混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。真空蒸发溶剂，得到油状残留物，将其经硅胶柱层析纯化，用氯仿，然后用氯仿-甲醇(20∶1，v/v)作为洗脱剂，得到930mg(27％，两步)3-硝基-4-(2-氨基乙氧基)苯甲酸甲酯，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)d 3.16-3.19(m，1H)，3.53-3.57(m，1H)，3.90和3.94(s，3H)，3.95-3.98(m，1H)，4.21-4.24(m，1H)，6.89-6.91和7.11-7.13(m，1H)，8.03-8.19和8.21(m，1H)，8.52和8.86(m，1H)。
向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(1.86g，3.87mmol)和3-硝基-4-(2-氨基乙氧基)苯甲酸甲酯(0.93g，3.87mmol)的DMF(27ml)的搅拌溶液中加入三乙胺(0.90ml，6.46mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将该混合物倾入0.5N HCl中，收集产生的固体。使粗品固体溶于THF-0.25N氢氧化钠(1∶1，20ml)中，将得到的混合物加热至回流过夜。用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤。经硫酸钠干燥并蒸发。使粗品固体从氯仿-乙醇中重结晶，得到60mg(3％，两步)3-硝基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基乙氧基]苯甲酸257，为黄色结晶固体。mp 112-115℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，3.37-3.66(m，7H)，3.84(s，3H)，4.27-4.30(m，1H)，6.74-8.56(多个m，共12H)；MS(FAB)m/z 523(M++1)；C26H26N4O8·3/2H2O的分析计算值C，56.83；H，5.32；N，10.20。实测值C56.66；H，4.90；N，9.33。实施例2103-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]乙基氨基乙氧基]苯甲酸
向3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(135mg，0.28mmol)和3-甲氧基-4-(2-乙基氨基乙氧基)苯甲酸乙酯(78mg，0.29mmol)的搅拌溶液中加入三乙胺(0.1ml，0.72mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水顺序洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到160mg(q.y.)3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]乙基氨基乙氧基]苯甲酸乙酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3)d 1.13-1.23(m，3H)，1.37-1.40(m，3H，)，2.90-3.89(m，12H)，4.09-4.28(m，2H)，4.33-4.39(m，2H)，6.70-8.21(多个m，共12H)。
向3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]乙基氨基乙氧基]苯甲酸乙酯(160mg，0.28mmol)的THF(5m1)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(5ml)，将得到的混合物回流加热过夜。将该混合物倾入1N HCl中，收集固体。使粗品固体从乙醇-氯仿-正己烷中重结晶，得到70mg(46％)3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]乙基氨基乙氧基]苯甲酸258，为黄色结晶粉末。mp105-110℃；IR(KBr)1687cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.00-1.10(m，3H)，2.48(s，2H)，3.35-3.81(m，10H)，4.13-4.14(m，2H)，6.70-9.15(多个m，12H)；MS(FAB)m/z 540(M++1)；C28H30FN3O7·1/2H2O的分析计算值C，61.31；H，5.82；N，7.47。实测值C，61.05；H，5.82；N，7.47。实施例2114-[4-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰基]-1-哌嗪基苯甲酸
将1-哌嗪甲酸叔丁酯(1.00g，5.37mmol)、4-氟代苯甲酸乙酯(903mg，5.37mmol)和碳酸钾(1.11g，8.06mmol)的DMF(10ml)的搅拌混合物于120℃加热过夜。冷却后，用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，接着用盐水(2×200ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(20∶1至4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到257mg(14％)4-[4-(叔丁氧基羰基)-1-哌嗪基]苯甲酸乙酯，为淡黄色无定形固体。IR(KBr)1701，1612cm-1；1H-NMR(CDCl3)d 1.37(3H，t，J＝7.3Hz)，1.49(9H，s)，3.30(4H，t，J＝5.4Hz)，3.58(4H，t，J＝5.4Hz)，4.33(2H，q，J＝7.3Hz)，6.87(2H，d，J＝8.8Hz)，7.94(2H，dt，J＝8.8，2.4Hz)；MS(FAB)m/z 335(M++1)；C18H26N2O4的分析计算值C，64.54；H，7.84；N，8.38。实测值C，64.39；H，7.89；N，8.38。
向4-[4-(叔丁氧基羰基)-1-哌嗪基]苯甲酸乙酯(240mg，0.718mmol)的二氯甲烷(5ml)的搅拌溶液中加入TFA(5ml)，搅拌得到的混合物3小时。真空浓缩该混合物，通过加入饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性，接着用氯仿(2×100ml)提取。经碳酸钠干燥合并的提取物并蒸发，得到168mg 4-(1-哌嗪基)苯甲酸乙酯(100％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)d 1.37(3H，t，J＝7.3Hz)，3.03(4H，t，J＝4.9Hz)，3.29(4H，t，J＝4.9Hz)，4.33(2H，q，J＝7.3Hz)，6.87(2H，dt，J＝8.8，2.4Hz)，7.91-7.94(2H，m)。
向4-(1-哌嗪基)苯甲酸乙酯(170mg，0.730mmol)和3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(229mg，0.730mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(210mg，1.10mmol)、DMAP(催化量)和HOBt(催化量)，将混合物搅拌过夜。将该混合物倾入水(100ml)中，抽吸收集固体。残留物从氯仿-正己烷中重结晶，得到290mg(75％)4-[4-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰基]-1-哌嗪基苯甲酸乙酯，为无色结晶粉末。mp 208-210℃；IR(KBr)1711，1695cm-1；1H-NMR(CDCl3)d 1.37(3H，t，J＝7.3Hz)，2.29(3H，s)，3.14(2H，t，J＝4.9Hz)，3.28(2H，t，J＝4.9Hz)，3.62(2H，t，J＝4.9Hz)，3.71(3H，s)，3.72(2H，s)，3.79(2H，t，J＝4.9Hz)，4.33(2H，q，J＝7.3Hz)，6.38(1H，s)，6.78-6.99(4H，m)，7.13-7.24(4H，m)，7.50(1H，d，J＝7.8Hz)，7.92(2H，d，J＝8.8Hz)，8.12(1H，d，J＝7.8Hz)；MS(FAB)m/z 531(M++1)；C30H34N4O5·0.5H2O的分析计算值C，66.77；H，6.54；N，10.38。实测值C，66.89；H，6.39；N，10.45。
向4-[4-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰基]-1-哌嗪基苯甲酸乙酯(290mg，0.547mmol)的甲醇-THF(2∶1，v/v，15ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(5ml，1.25mmol)，将该混合物回流加热3小时。将该混合物倾入冰-1N HCl(100ml)中，抽吸收集固体。残留物从氯仿-甲醇中重结晶，得到190mg(69％)4-[4-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰基]-1-哌嗪基苯甲酸259，为黄色结晶粉末。mp 240-245℃；1H-NMR(DMSO)d 2.24(3H，s)，3.17-3.50(8H，m)，3.72(2H，s)，3.86(3H，s)，6.77(1H，d，J＝8.3Hz)，6.90(1H，s)，6.91-6.96(3H，m)，7.11-7.17(2H，m)，7.76-7.80(3H，m)，8.03(1H，d，J＝8.3Hz)，8.47(1H，s)，8.58(1H，s)，12.30(1H，s)；C28H30N4O5·H2O的分析计算值C，64.60；H，6.20；N，10.76。实测值C，64.64；H，5.85；N，10.51。实施例212(R)-3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(R)-2-氨基-1-丙醇(3.01g，0.04mmol)和三乙胺(6.70ml，0.05 mmol)的DMF-水(1∶1，v/v)(40ml)的冷(0℃)溶液中加入(Boc)2O(10.0ml，0.04mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌2天。用乙酸乙酯稀释该混合物，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发，得到6.91g(98％)(R)-2-N-叔丁氧基羰基氨基-1-丙醇，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.15(d，3H，J＝6.8Hz)，1.45(s，9H)，3.48-3.53(m，1H)，3.62-3.66(m，1H)，3.76-3.77(m，1H)；MS(FAB)m/z 176(M++1)，120(M+-tBu)。
向4-羟基-3-甲氧基苯甲酸乙酯(7.74g，0.04mmol)、(R)-2-N-叔丁氧基羰基氨基-1-丙醇(6.91g，0.04mmol)和三苯膦(13.44g，0.05mmol)的THF(70ml)的搅拌溶液中加入偶氮二羧酸二异丙基酯(DIAD)(10.0ml，0.05mmol)，将得到的混合物回流加热过夜。冷却至室温后，蒸发溶剂。使该混合物溶于二氯甲烷(50ml)和TFA(30ml)中，于室温下搅拌该溶液1小时。真空浓缩后，将残留物倾入饱和碳酸氢钠中，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用5％甲醇的氯仿液作为洗脱剂，得到7.93g(两步79％)(R)-3-甲氧基-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸乙酯，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.90(d，3H，J＝6.8Hz)，1.39(t，3H，J＝7.3Hz)，1.72(bs，2H)，3.42-3.47(m，1H)，3.74-3.89(m，1H)，3.91(s，3H)，3.96-4.00(m，1H)，4.35(q，2H，J＝7.3Hz)，6.88(d，1H，J＝8.3Hz)，7.55(d，1H，J＝2.0Hz)，7.65(dd，1H，J＝2.0，8.3Hz)；MS(FAB)m/z 254(M++1)。
向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(459mg，0.96mmol)和(R)-3-甲氧基-4-(2-氨基丙氧基)苯甲酸乙酯(242mg，0.96mmol)的DMF(5ml)的搅拌溶液中加入三乙胺(200μl，1.43mmol)，将得到的混合物搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到360mg(69％)(R)-3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸乙酯，为无色结晶固体。1H-NMR(CDCl3)d 1.23-1.28(m，3H)，1.38-1.41(t，3H，J＝7.3Hz)，2.32(s，3H)，3.50-4.13(m，共11H)，4.36(q，2H，J＝7.3Hz)，6.65-8.13(多个m，共12H)。
向(R)-3-甲氧基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸乙酯(360mg，0.66mmol)在THF-甲醇(20ml，9∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(10ml)，将得到的混合物回流加热过夜。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集沉淀物。使粗品固体从氯仿-正己烷中重结晶，得到172mg(50％)260，为白色结晶粉末。mp168-169℃；IR(KBr)1687cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.18(d，3H，J＝6.8Hz)，2.24(s，3H)，2.50-2.51(m，2H)，3.80(s，3H)，3.84(s，3H)，3.87-4.06(m，2H)，4.07-4.14(m，1H)，6.76-8.57(多个m，共12H)，12.66(bs，1H)；MS(FAB)m/z 522(M++1)；C28H31N307·3/4H2O的分析计算值C，62.85；H，6.12；N，7.85。实测值C，62.77；H，5.95；N，7.79。实施例2134-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]烯丙基氨基]乙氧基]苯甲酸
向4-(2-N-三氟乙酰基氨基乙氧基)-3-甲氧基苯甲酸乙酯(3.5g，10.4mmol)和碳酸钾(2.3g，16.4mmol)的DMF(20ml)的搅拌混合物中加入烯丙基溴(14.2ml，16.5mmol)，将得到的混合物于65℃搅拌45分钟。冷却后，将水加入该混合物，用乙酸乙酯提取，用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发，使残留物溶于THF-甲醇-水(1∶1∶1，v/v/v)(30ml)中，加入碳酸钾(2.3g，16.4mmol)。于室温下搅拌得到的混合物16小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(95∶5至95∶5，v/v)作为洗脱剂，得到2.9g(100％)4-(2-烯丙基氨基乙氧基)-3-甲氧基苯甲酸乙酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.39(t，3H，J＝7.3Hz)，3.07(t，2H，J＝5.3Hz)，3.34(d，2H，J＝5.9Hz)，3.91(s，3H)，4.18(t，2H，J＝5.4Hz)，4.35(dd，2H，J＝7.3Hz，14.1Hz)，5.12(d，1H，J＝10.3Hz)，5.22(dd，1H，J＝1.5Hz，17.1Hz)，5.92(m，2H)，6.90(d，1H，J＝8.3Hz)，7.55(d，1H，J＝1.5Hz)，7.65(dd，1H，J＝2.0Hz，8.3Hz)；MS(FAB)m/z 278，280(M+H)+。
于室温下，向4-(2-烯丙基氨基乙氧基)-3-甲氧基苯甲酸乙酯(578mg，2.1mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(650mg，2.1mmol)、 HOBt(420mg，3.11mmol)和DMAP(催化量)的DMF(4ml)的搅拌混合物中加入EDC(596mg，3.11mmol)。将得到的混合物于室温下再搅拌18小时。将该混合物倾入1N HCl中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并真空蒸发，残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(95∶5至1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1g(84％)3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]烯丙基氨基]乙氧基]苯甲酸，为淡黄色胶状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.39(t，3H，J＝7.3Hz)，2.29(s，3H)，3.58和3.63(s，共3H)，3.70-3.77(m，2H)，3.83和3.87(s，3H)，4.05-4.13(m，2H)，4.25(m，1H)，4.36(q，1H，J＝7.0Hz)，5.04-5.22(m，2H)，5.73(m，1H)，6.32和6.47(s，1H)，6.69-6.85(m，2H)，7.12(m，2H)，7.23(m，2H)，7.50-7.65(m，2H)，8.05(d，1H，J＝7.8Hz)；MS(FAB)m/z 576(M+H)+。
将3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]烯丙基氨基]乙氧基]苯甲酸(50mg，0.09mmol)的THF-MeOH(1∶1，v/v)(2ml)溶液和1N氢氧化钠(0.135ml，0.135mmol)的混合物于室温下搅拌15小时，于50℃搅拌3小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中。收集固体，用水洗涤并风干。使粗品固体从氯仿-正己烷中重结晶，得到38mg(77％)261，为白色结晶物质。mp 125-130℃；IR(KBr)3319，2939，1687，1647，1601，1535，1456，1417，1269，1223，1034，760cm-1；1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.29(s，3H)，3.68(s，2H)，3.75-3.85(m，8H)，4.05(br，1H)，4.19(m，3H)，5.10-5.25(m，2H)，5.65-5.90(m，1H)，6.75(m，1H)，6.85(s，1H)，6.92(m，1H)，7.02-7.20(m，3H)，7.48(d，1H，J＝10.2Hz)，7.56(m，1H)，7.79(d，1H，J＝6.8Hz)，8.01(m，1H)，8.46(s，1H)，8.56(d，1H，J＝4.4Hz)，12.7(br，1H)；MS(FAB)m/z 548(M+H)+。C30H33N3O7·0.5H2O的分析计算值C，64.74；H，6.16；N，7.55。实测值C，64.72；H，6.07；N，7.55。实施例2143-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2-吗啉基)乙基氨基]乙氧基]苯甲酸
向3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]烯丙基氨基]乙氧基]苯甲酸(950mg，1.65mmol)的THF∶水(7ml)的搅拌溶液中加入N-甲基吗啉-N-氧化物(579mg，4.95mmol)和四氧化锇(0.2M的水溶液)(0413ml，0.08mmol)。将得到的混合物于室温下搅拌3小时。将饱和亚硫酸氢钠加入该混合物中，通过硅藻土过滤该混合物。用乙酸乙酯提取滤液。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发。使残留物溶于甲醇-THF-水(1∶1∶1，v/v)(12ml)中，加入高碘酸钠(318mg，1.5mmol)。于室温下搅拌得到的混合物1小时。用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空蒸发溶剂，得到862mg(90％)3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲酰基甲基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯，为淡黄色胶状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.39(t，3H，J＝7.3Hz)，2.29(s，3H)，3.31-3.95(m，11H)，4.10-4.42(m，5H)，6.51-6.82(m，3H)，7.10-7.25(m，3H)，7.50(m，2H)，7.60(m，1H)，8.10(m，1H)，9.50(m，1H)；MS(FAB)m/z 578(M+H)+。
于室温下，向3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲酰基甲基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯(265mg，0.46mmol)、吗啉(0.40ml，4.59mmol)和乙酸(0.263ml，4.6mmol)的乙醇(3ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(288mg，4.6mmol)。将得到的混合物于室温下搅拌1 5小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，于0℃加入饱和碳酸氢钠。于0℃搅拌得到的混合物0.5小时。用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发，残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(95∶5，v/v)作为洗脱剂，得到213mg(71％)3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2-吗啉基)乙基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.28(t，3H，J＝7.0Hz)，2.31(s，3H)，2.48(brs，4H)，2.52(m，2H)，3.60-3.91(m，16H)，4.11和4.28(m，共2H)，4.39(q，2H，J＝7.0Hz)，6.70-6.85(m，4H)，7.15(m，2H)，7.50-7.63(m，3H)，8.08(d，1H，J＝8.0Hz)；MS(FAB)m/z 649(M+H)+。
将3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2-吗啉基)乙基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯(265mg，0.46mmol)在THF(4ml)和1N氢氧化钠(0.984ml)中的混合物于50℃搅拌15小时。通过加入1N HCl将该混合物的pH调节至7.4，用氯仿∶甲醇(9∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物从乙醚中结晶，得到160mg(78％)262，为白色结晶物质。mp 125-130℃；IR(KBr)，3346，2956，2937，1705，1622，1599，1537，1456，1417，1299，1114，1032，752cm-1；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.29(s，3H)，2.49-2.64(m，6H)，3.65-3.85(m，16H)，4.13(m，1H)，4.26(m，1H)，6.78-7.04(m，4H)，7.18(m，2H)，7.55-7.64(m，3H)，7.99(m，2H)；MS(FAB)m/z 621(M+H)+。C33H40N4O8·2.5H2O的分析计算值C，59.54；H，6.81；N，8.42。实测值C，59.71；H，6.35；N，7.98。实施例2153-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-[2-[4-甲基-1-哌嗪基)乙基氨基]乙氧基]苯甲酸
于室温下，向3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲酰基甲基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯(242mg，0.42mmol)、N-甲基哌嗪(0.465ml，4.2mmol)和乙酸(0.240ml，4.2mmol)的乙醇(3ml)的搅拌混合物中加入NaBH3CN(263mg，4.2mmol)。将得到的混合物于室温下搅拌15小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，于0℃加入饱和碳酸氢钠。于0℃搅拌得到的混合物0.5小时。用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发，残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(95∶5，v/v)作为洗脱剂，得到195mg(70％)3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.23(t，3H，J＝7.0Hz)，2.25(s，3H)，2.29(s，3H)，2.50(br m，12H)，3.44-3.85(m，12H)，4.10(br，1H)，4.22(br，1H)，4.35(m，2H)，6.70-6.85(m，3H)，6.98(s，1H)，7.10(m，1H)，7.20(m，2H)，7.40(m，1H)，7.60-7.70(m，3H)，8.05(d，1H，J＝7.8Hz)；MS(FAB)m/z 662(M+H)+。
将3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-[2-(4-甲基-1-哌嗪基)乙基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯(195mg，0.30mmol)在THF∶甲醇(4∶1，v/v)(5ml)和1N氢氧化钠(0.885ml)中的混合物于50℃搅拌15小时。通过加入1N HCl将该混合物的pH调节至7.4，用氯仿∶甲醇(9∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物从乙醚中结晶，得到141mg(75％)263，为白色结晶物质。mp 155-160℃；IR(KBr)2937，1537，783cm-1；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.29(s，3H)，2.49-2.80(m，15H)，3.60-3.85(m，9H)，3.92(s，1H)，4.12(m，1H)，4.25(m，1H)，6.78-7.20(m，6H)，7.61(m，3H)，8.00(m，1H)；MS(FAB)m/z 632(M)+。C34H43N5O7·2.5H2O的分析计算值C，60.16；H，7.13；N，10.32。实测值C，59.72；H，6.86；N，9.97。实施例2163-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-[2-环丙基氨基]乙基氨基]乙氧基]苯甲酸
于室温下，向3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲酰基甲基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯(267mg，0.46mmol)、环丙基胺(0.32ml，4.6mmol)和乙酸(0.264ml，4.6mmol)的乙醇(3ml)的搅拌混合物中加入NaBH3CN(290mg，4.6mmol)。将得到的混合物于室温下搅拌15小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，于0℃加入饱和碳酸氢钠。于0℃搅拌得到的混合物0.5小时。用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(95∶5，v/v)作为洗脱剂，得到1 56mg(55％)3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-[2-环丙基氨基]乙基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ0.35(m，4H)，1.22(br s，3H)，2.10(m，1H)，2.20(s，3H)，2.42(br，2H)，2.90(br s，2H)，3.60-3.80(m，10H)，4.10(br，1H)，4.22(br，1H)，4.33(br，2H)，6.72(m，3H)，7.05-7.30(m，4H)，7.55(m，4H)，8.06(br s，1H)；MS(FAB)m/z 619(M+H)+。
将3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-[2-环丙基氨基]乙基氨基]乙氧基]苯甲酸乙酯(195mg，0.30mmol)在THF∶甲醇(4∶1，v/v)(5ml)和1N氢氧化钠(0.756ml)中的混合物于50℃搅拌15小时。通过加入1N HCl将该混合物的pH调节至7.4，用氯仿∶甲醇(9∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物从乙醚中结晶，得到57mg(38％)3-甲氧基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-[2-环丙基氨基]乙基氨基]乙氧基]苯甲酸264，为白色结晶物质。mp 135-140℃；IR(KBr)3324，2937，1535，1032，754cm-1；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ0.50-0.73(m，4H)，2.29(s，3H)，2.53(m，1H)，2.98(m，1H)，3.21(m，1H)，3.58-3.88(m，11H)，3.91(s，1H)，4.09(m，1H)，4.25(m，1H)，6.76-6.92(m，3H)，7.01(m，1H)，7.18(m，2H)，7.60(m，3H)，8.00(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(FAB)m/z 591(M+H)+。C32H38N4O7·3.0H2O的分析计算值C，59.62；H，6.88；N，8.69。实测值C，59.25；H，6.29；N，8.29。实施例2174-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
3-氯代-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基乙氧基]苯甲酸
向2-(N-苄氧基羰基-N-甲基)乙醇胺(3.01g，14.4mmol)、3-氯代-4-羟基苯甲酸甲酯(2.68g，14.4mmol)、三苯膦(5.65g，21.5mmol)的THF(30ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入偶氮二羧酸二异丙基酯(DIAD)(4.25ml，21.6mmol)，将得到的混合物回流加热过夜。蒸发溶剂，残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿作为洗脱剂，得到3.90g(72％)3-氯代-4-[2-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)乙氧基]苯甲酸甲酯，为淡黄色固体。1H-NMR(CDCl3)δ3.15(s，3H)，3.74-3.76(m，2H)，3.89(s，3H)，4.17-4.27(m，2H)，5.14(s，2H)，6.81-6.94(m，1H)，7.33-7.36(m，5H)，7.85-7.92(m，1H)，8.05(bs，1H)。
将3-氯代-4-[2-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)乙氧基]苯甲酸甲酯(3.90g，10.3mmol)的乙酸乙酯-乙酸(40ml，1∶1，v/v)溶液经5％Pd-C(1.95g，50wt％)于3个大气压下氢化2小时。过滤该混合物，用饱和碳酸氢钠洗涤滤液，用氯仿提取碱性水层，用盐水洗涤并蒸发，得到3-氯代-4-(N-甲基氨基乙氧基)苯甲酸甲酯和4-[2-(N-甲基氨基)乙氧基]苯甲酸甲酯目的化合物的未分离的混合物(1.61g)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.52-2.52和2.53-2.54(各为m，3H)，2.98-3.00和3.03-3.05(各为m，各2H)，3.88和3.99(各为s，各3H)，4.11-4.14和4.18-4.20(各为m，各2H)，6.91-6.96和7.90-8.05(多个m，共7H)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酸(392mg)、3-氯代-4-[2-(N-甲基氨基)乙氧基]苯甲酸甲酯和4-[2-(N-甲基氨基)乙氧基]苯甲酸甲酯的混合物(305mg)、EDC(盐酸盐)(354mg)、HOBt(250mg)和DMAP(250mg)在DMF(8ml)中的混合物搅拌6小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。使残留物经硅胶柱层析纯化，用1％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到3-氯代-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基乙氧基]苯甲酸甲酯和4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基乙氧基]苯甲酸甲酯的混合物(505mg)，为棕色无定形固体。
向3-氯代-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基乙氧基]苯甲酸甲酯和4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基乙氧基]苯甲酸甲酯的混合物(550mg)的THF∶甲醇(20ml，1∶1，v/v)中的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将得到的混合物在回流下加热6小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集固体。粗品固体经制备性TLC纯化，用10％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂得到265(56mg，为白色无定形固体)和266(88mg，为棕色无定形固体)。实施例2184-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
3-氯代-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
于室温下，向4-[2-(N-甲基-2-氨基)乙氧基]-3-氯代苯甲酸甲酯(292mg，1.2mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(377mg，1.2mmol)、EDC(345mg，1.8mmol)、HOBt(243mg，1.8mmol)和DMAP(29mg，0.24mmol)在DMF(2.7ml)中的混合物搅拌6小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(95∶5至0∶100，v/v)作为洗脱剂，得到3-氯代-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯和4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯的未分离的混合物(489mg)，为淡黄色油状物。
将3-氯代-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯和4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯的混合物(480mg，为混合物)在THF∶甲醇(4ml，1∶1，v/v)中，于50℃搅拌15小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体经制备性TLC纯化，用氯仿∶甲醇(93∶7，v/v)作为洗脱剂，得到267(180mg，两步31％，为结晶物质)和268(280mg，两步44％，为结晶物质)。267mp 145-150℃；1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.31(s，3H)，3.05和3.19(s，3H)，3.35和3.38(s，3H)，3.72-3.85(m，7H)，4.09和4.23(m，共2H)，6.79-7.20(m，7H)，7.60(m，1H)，7.86-8.09(m，3H)；MS(FAB)m/z 493(M+H)+。C27H29N3O6·1.75H2O的分析计算值C，62.00；H，6.26；N，8.03。实测值C，62.16；H，5.88；N，7.82。268mp 145-150℃；1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.29(s，3H)，3.06和3.26(s，3H)，3.31和3.35(s，3H)，3.85-3.94(m，4H)，4.18和4.32(m，共2H)，6.75-6.85(m，2H)，6.99-7.20(m，4H)，7.59(m，1H)，7.90-8.02(m，3H)；MS(FAB)m/z 526(M+H)+。C27H28ClN3O6·2.0H2O的分析计算值C，52.70；H，5.74；N，7.48。实测值C，57.99；H，5.53；N，7.07。实施例2194-[3-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基]-1-丙基]苯甲酸
向搅拌的冷(-78℃)的4-膦酰基甲基苯甲酸三乙酯(1.22g，4.05mmol)的THF(10ml)溶液中加入NaHMDS(1.0M在THF中)(4.0ml，4.0mmol)，于相同温度下将得到的混合物搅拌1小时。于该温度下，将2-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)乙醛(700mg，3.38mmol)的THF(5ml)溶液缓慢加入该溶液中，搅拌下，用2小时使该混合物温热至室温。通过加入饱和氯化铵(100ml)猝灭该溶液，用乙酸乙酯提取。用盐水(200ml)洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙酸乙酯(20∶1，v/v)作为洗脱剂，得到810mg(68％)的(E)-4-[3-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)-1-丙烯基苯甲酸乙酯，为黄色油。1H-NMR(CDCl3)δ1.40(t，J＝7.3Hz，3H)，2.95(m，2H)，4.09(m，2H)，4.35-4.40(m，2H)，5.17(s，2H)，6.26-6.64(多个m，2H)，7.36(m，7H)，7.99(d，J＝8.3Hz，2H)。
将(E)-4-[3-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)-1-丙烯基苯甲酸乙酯(810mg，2.29mmol)的乙醇-乙酸(10∶1，v/v，22ml)的搅拌溶液经5％Pd-C(1g)氢化3天。过滤该混合物，蒸发滤液。用饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性，用氯仿提取。经碳酸钠干燥提取物并蒸发，得到438mg(86％)4-(3-甲基氨基-1-丙基)苯甲酸乙酯，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.39(t，J＝7.3Hz，3H)，1.82(m，2H)，2.43(s，3H)，2.61(t，J＝7.3Hz，2H)，2.72(t，J＝7.3Hz，2H)，3.33(br s，1H)，4.36(q，J＝7.3Hz，2H)，7.25(d，J＝8.3Hz，2H)，7.96(d，J＝8.3Hz，2H)。
向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(456mg，1.45mmol)和4-(3-甲基氨基-1-丙基)苯甲酸乙酯(220mg，1.45mmol)的搅拌溶液中加入在DMF(10ml)中的EDC·HCl(417mg，2.16mmol)、HOBt(催化量)和DMAP(催化量)，将得到的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙醇(10∶1)洗脱，得到503mg(71％)的4-[3-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基]-1-丙基]苯甲酸乙酯，为黄色油状物。MS(FAB)m/z 518(M+H)+。
向4-[3-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基]-1-丙基]苯甲酸乙酯(500mg，0.966mmol)的THF(8ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(8ml)，将该混合物回流加热过夜。将所得的溶液倾入冰-1N HCl(100ml)中，抽吸收集固体。使固体溶于氯仿(100ml)中，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1至5∶1，v/v)洗脱，得到131mg(28％)的4-[3-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基]-1-丙基]苯甲酸269，为淡黄色无定形固体。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.68-1.80(m，2H)，2.24(s，3H)，2.57(m，2H)，2.81和2.97(各为s，共3H)，3.33(m，2H)，3.57-3.61(m，2H)，3.84(s，3H)，6.71(dd，J＝29.8，8.3Hz，1H)，6.87(d，J＝11.2Hz，1H)，6.93(t，J＝7.3Hz，1H)，7.15(m，2H)，7.28(m，2H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，7.84-7.87(m，2H)，8.02(d，J＝8.3Hz，1H)，8.49(d，J＝7.3Hz，1H)，8.58(d，J＝4.9Hz，1H)；MS(FAB)m/z 490(M++1)；C28H31N3O5·1/2H2O的分析计算值C，67.45；H，6.47；N，8.43。实测值C，67.27；H，6.51；N，8.02。实施例2204-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
3-氯代-4-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
于室温下，将4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(562mg，1.29mmol)、3-氯代-4-[2-(N-甲基氨基)乙氧基]苯甲酸甲酯和4-[2-(N-甲基氨基)乙氧基]苯甲酸甲酯的混合物(304mg)和三乙胺(260ml)在DMF(8ml)中的溶液搅拌4小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。使残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到3-氯代-4-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯和4-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-N-甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯的混合物(670mg)，为油状物。
向该混合物(670mg)的THF∶甲醇(20ml，1∶1，v/v)的搅拌悬浮液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将得到的混合物在回流下加热6小时。将该溶液倾入冰-1N HCl中，收集固体。粗品固体经制备性薄层层析(TLC)纯化，用10％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂得到73mg为无定形固体的270和110mg为白色无定形固体的271。270 MS(FAB)m/z 462(M++1)。271 MS(FAB)m/z 496(M++1)。实施例221(S)-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(S)-2-氨基-1-丙醇(2.08g，27.7mmol)和三乙胺(4.63ml，33.2mmol)的DMF-水(40ml，1∶1，v/v)的冷(0℃)溶液中加入(Boc)2O(6.36ml.27.7mmol)，将得到的溶液于室温下搅拌2天。将水加入该混合物中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥。蒸发溶剂得到4.24g(87％)(S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1-丙醇，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.14(d，3H，J＝6.8Hz)，1.45(s，9H)，3.51-3.52(m，1H)，3.63-3.66(m，1H)，3.77(m，1H)，4.62(m，1H)。
向(S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1-丙醇(1.02g，5.82mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(0.89g，5.85mmol)和三苯膦(1.98g，7.55mmol)的THF(20ml)的冷(0℃)溶液中加入偶氮二羧酸二异丙基酯(DIAD)(1.49ml.7.57mmol)，将得到的混合物回流加热过夜。蒸发该溶液并将残留物溶于二氯甲烷(20ml)和TFA(10ml)中。于室温下搅拌该混合物1.5小时。真空浓缩该溶液，用饱和碳酸氢钠处理残留物。用氯仿提取该混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到480mg(两步39％)(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.19(d，3H，J＝6.4Hz)，3.35-3.39(m，1H)，3.72-3.76(m，1H)，3.89(s，3H)，3.90-3.94(m，1H)，6.92(d，2H，J＝8.8Hz)，7.99(d，2H，J＝8.8Hz)。
将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(505mg，1.05mmol)、(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(220mg，1.05mmol)和三乙胺(0.220ml，1.58mmol)在DMF(8ml)中的混合物于室温下搅拌3小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。除去溶剂后，使残留物从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶，得到290mg(55％)(S)-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯，为白色结晶粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.18(d，3H，J＝6.8Hz)，2.24(s，3H)，3.36(s，2H)，3.80(s，3H)，3.82(s，3H)，3.93-4.03(m，2H)，4.09-4.14(m，1H)，6.75-8.57(多个m，共13H)。
向(S)-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(290mg，0.57mmol)在THF-甲醇(20ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(20ml)，将该溶液回流加热2小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶，得到158mg(56％)272，为白色结晶粉末。mp 198-201℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.18(d，3H，J＝6.3Hz)，2.24(s，3H)，3.36(s，2H)，3.82(s，3H)，3.87-4.10(m，2H)，4.10-4.16(m，1H)，6.75-8.78(m，1H)，6.92-7.02(m，4H)，7.11-7.18(m，2H)，7.78-7.80(m，1H)，7.86-7.89(m，2H)，7.98-8.00(m，1H)，8.12-8.14(m，1H)，8.46(s，1H)，8.55(s，1H)，12.62(bs，1H)；MS(FAB)m/z 492(M++1)；C27H29N3O6·1/2H2O的分析计算值C，64.79；H，6.04；N，8.21。实测值C，64.36；H，5.85；N，8.21。实施例222(S)-4-[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
将4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(560mg，1.24mmol)、(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(260mg，1.24mmol)、三乙胺(0.260ml，1.87mmol)在DMF(8ml)中的混合物于室温下搅拌3小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥。除去溶剂后，使残留物从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶纯化，得到210mg(36％)(S)-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸，为白色结晶粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17(d，3H，J＝6.8Hz)，2.24(s，3H)，3.32(s，2H)，3.81(s，3H)，3.92-4.03(m，2H)，4.08-4.15(m，1H)，6.92-6.95(m，1H)，7.04-7.06(m，2H)，7.12-7.18(m，4H)，7.35-7.39(m，2H)，7.83-7.85(m，1H)，7.89-7.92(m，3H)，8.12-8.14(m，1H)，8.97(s，1H)。
向(S)-4-[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(200mg，0.42mmol)在THF-甲醇(10ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将该混合物回流加热2小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集固体。粗品固体经从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶，得到68mg(34％)273，为白色结晶粉末。mp 262-265℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.17(d，3H，J＝6.8Hz)，2.24(s，3H)，3.32(s，2H)，3.91-4.02(m，2H)，4.09-4.15(m，1H)，6.92-6.96(m，1H)，7.01-7.03(m，2H)，7.12-7.20(m，4H)，7.36-7.40(m，2H)，7.83-7.95(m，4H)，8.12-8.14(m，1H)，8.99(s，1H)，12.63(bs，1H)；MS(FAB)m/z 462(M++1)；C26H27N3O5·1/4H2O的分析计算值C，67.01；H，5.95；N，9.02。实测值C，67.13；H，5.90；N，9.02。实施例223(S)-3-氯代-4-[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1-丙醇(1.05g，5.99mmol)、3-氯代-4-羟基苯甲酸甲酯(1.12g，6.00mmol)和三苯膦(2.36g，9.00mmol)的THF(20ml)的冷(0℃)溶液中加入偶氮二羧酸二异丙基酯(DIAD)(1.77ml，8.99mmol)，将得到的混合物回流加热2天。蒸发掉溶剂，使残留物溶于二氯甲烷(20ml)和TFA(10ml)中。于室温下搅拌得到的混合物1.5小时。真空浓缩该溶液，使残留物溶于氯仿中。用水提取该混合物，通过加入饱和碳酸氢钠使水层呈碱性。用氯仿提取该碱性水层。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发，得到660mg(两步，32％)(S)-3-氯代-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.21(d，3H，J＝6.4Hz)，3.41-3.48(m，1H)，3.77-3.81(m，1H)，3.89(s，3H)，3.98-4.01(m，1H)，6.91-6.94(m，1H)，7.90-7.93(m，1H)，8.05-8.06(m，1H)。
将4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(508mg，1.13mmol)、(S)-3-氯代-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(275mg，1.13mmol)和三乙胺(0.240ml，1.72mmol)在DMF(10ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥并蒸发。使残留物从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶，得到240mg(42％)(S)-3-氯代-4-[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯，为白色结晶粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.21(d，3H，J＝6.4Hz)，2.25(s，3H)，3.33(s，2H)，3.82(s，3H)，4.04-4.14(m，3H)，6.90-6.94(m，1H)，7.11-7.16(m，4H)，7.29-7.38(m，3H)，7.83-7.94(m，3H)，8.13-8.17(m，2H)，9.34(s，1H)；MS(FAB)m/z 510(M+)。
向(S)-3-氯代-4-[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(240mg，0.47mmol)在THF-甲醇(10ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将得到的混合物回流加热过夜。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集固体。粗品固体经从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶，得到98mg(42％)274，为白色结晶粉末。mp 228-231℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.20(d，3H，J＝6.3Hz)，2.24(s，3H)，3.34(s，2H)，4.02-4.18(m，3H)，6.92-6.95(m，1H)，7.12-7.42(多个m，共7H)，7.82-8.18(多个m，共5H)，9.12(s，1H)；MS(FAB)m/z 496(M+)，497(M++1)；C26H26ClN3O5·1/2H2O的分析计算值C，61.84；H，5.39；Cl，7.02；N，8.32。实测值C，61.76；H，5.25；Cl，7.09；N，8.25。实施例224(S)-3-氯代-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(513mg，1.07mmol)、(S)-3-氯代-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(260mg，1.07mmol)和三乙胺(220μl，1.58mmol)在DMF(10ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用饱和碳酸氢钠洗涤该溶液，经硫酸钠干燥并蒸发。使残留物从甲醇-氯仿-乙酸乙酯-正己烷中重结晶，得到400mg(69％)(S)-3-氯代-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯，为浅棕色结晶粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ1.21(d，3H，J＝6.4Hz)，2.24(s，3H)，3.37(s，2H)，3.82(s，3H)，3.83(s，3H)，4.04-4.12(m，3H)，6.75-6.77(m，1H)，6.91-6.95(m，2H)，7.11-7.17(m，2H)，7.29-7.31(m，1H)，7.78-7.99(m，4H)，8.12-8.13(m，1H)，8.46(s，1H)，8.55(s，1H)。
向(S)-3-氯代-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(400mg，0.74mmol)在THF-甲醇(20ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(20ml)，将得到的混合物回流加热过夜。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集固体。粗品固体经从甲醇-氯仿-乙醚中重结晶，得到200mg(51％)275，为浅棕色结晶粉末。mp 198-201℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.21(d，3H，J＝6.8Hz)，2.24(s，3H)，3.37(s，2H)，3.84(s，3H)，4.00-4.15(m，3H)，6.76-7.28(多个m，共6H)，7.77-8.14(多个m，共5H)，8.46(s，1H)，8.56(s，1H)；MS(FAB)m/z 526(M+)，528(M++2)；C27H28ClN3O6·1/4H2O的分析计算值C，61.13；H，5.42；Cl，6.68；N，7.92。实测值C，60.97；H，5.48；Cl，6.86；N，7.89。实施例2253-二甲基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
向2-(N-Boc-N-甲基氨基)乙醇(3g，17mmol)、4-羟基-3-硝基苯甲酸甲酯(3.38g，17mmol)和三苯膦(5.4g，21mmol)的THF(20ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入偶氮二羧酸二异丙基酯(DIAD)(4ml.21mmol)，将得到的混合物回流加热15小时。蒸发掉溶剂。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶0至4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到2.5g(39％)的4-[2-(N-甲基-2-氨基)乙氧基]-3-硝基苯甲酸甲酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.82(s，3H)，3.50(t，2H，J＝4.5Hz)，3.95(s，3H)，4.54(t，2H，J＝4.5Hz)，7.26(d，1H，J＝8.8Hz)，8.25(d，1H，J＝8.8Hz)，8.56(s，1H)；MS(FAB)m/z 255(M++1)。
将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(992mg，3.11mmol)、4-(N-甲基-2-氨基乙氧基)-3-硝基苯甲酸甲酯(800mg，3.11mmol)和4-DMAP(77mg，0.63mmol)、HOBt(640mg，4.7mmol)和EDC(904mg，4.7mmol)在DMF(20ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析纯化，用氯仿-乙酸乙酯(95∶5至0∶100，v/v)作为洗脱剂，得到587mg(34％)3-硝基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.31(s，3H)，3.05(s，1H)，3.23(s，2H)，3.71(s，2H)，3.83(s，3H)，3.85(m，3H)，3.94(s，3H)，4.19和4.39(m，共2H)，6.80(m，2H)，7.05(m，1H)，7.22(m，3H)，7.62(d，1H，J＝8.2Hz)，8.02(d，1H，J＝8.2Hz)，8.21(dd，1H，J＝2.1Hz，8.8Hz)，8.55(d，1H，J＝2.1Hz)；MS(FAB)m/z 551(M++1)。
将3-硝基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(587mg，1.1mmol)和5％Pd-C(600mg)在THF-甲醇-乙酸(1∶1∶1，v/v，150ml)中的混合物于45psi下氢化18小时。抽吸除去不溶性催化剂，真空蒸发滤液，得到555mg(100％)3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为淡黄色胶状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.29(s，3H)，3.08(m，1H)，3.19(s，2H)，3.65(s，1H)，3.73-3.80(m，3H)，3.84(s，3H)，3.87(s，3H)，4.19和4.40(m，共2H)，6.70-6.82(m，2H)，7.02-7.29(m，6H)，7.60(d，1H，J＝7.8Hz)，7.92-7.99(m，3H)；MS(FAB)m/z 521(M++1)。
于室温下，向3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(555mg，1.1mmol)、甲醛(10ml)和乙酸(0.58ml，10mmol)的MeCN(10ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(0.67g，10mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌15小时。将饱和碳酸氢钠加入该混合物中，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物经硅胶层析，用甲苯-丙酮(7∶3至1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到123mg(21％)3-二甲基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.30(s，3H)，2.70(s，3H)，2.75(s，3H)，3.05(s，1H)，3.18(s，2H)，3.61(s，3H)，3.70(s，1H)，3.80(m，3H)，3.86(s，3H)，4.07和4.22(m，共2H)，6.28(m，1H)，6.70-6.80(m，3H)，7.03(m，1H)，7.15-7.25(m，4H)，7.46-7.65(m，2H)，8.02(m，1H)；MS(FAB)m/z 548(M++1)。
将3-二甲基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(123mg，0.22mmol)在THF(15ml)和1N氢氧化钠(0.885ml，0.885mmol)中的搅拌混合物在回流下加热15小时。通过加入1N HCl将该混合物的pH调节至5.0，用氯仿∶甲醇(9∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发，残留物从乙醚-正己烷中结晶，得到118mg(100％)276，为白色结晶物质。mp 125-130℃；IR(KBr)3346，2940，1620，1597，1535，1456，1417，1227，1039，754cm-1；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.29(s，3H)，2.70(s，3H)，2.79(s，2H)，3.05(s，1H)，3.22(s，2H)，3.75(s，3H)，3.85(m，4H)，4.15和4.28(m，2H)，6.78-7.05(m，4H)，7.18(m，2H)，7.55-7.70(m，3H)，7.98(m，1H)；MS(FAB)m/z 535(M++1)；C29H34N4O6·2.0H2O的分析计算值C，61.04；H，6.71；N，9.82。实测值C，61.15；H，6.43；N，8.94。实施例2263-二甲基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
将3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酸(1g，3.11mmol)、4-[2-(N-甲基-2-氨基)乙氧基]-3-硝基苯甲酸甲酯(800mg，3.11mmol)和4-DMAP(77mg，0.63mmol)、HOBt(640mg，4.7mmol)和EDC(904mg，4.7mmol)在DMF(20ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤该溶液，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析纯化，用氯仿-乙酸乙酯(95∶5至0∶100，v/v)作为洗脱剂，得到420mg(19％)3-硝基-4-[[2-[3-氟代-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ3.04(s，1H)，3.24(s，2H)，3.72(s，1H)，3.85(s，3H)，3.90(m，3H)，3.93(s，3H)，4.16和4.39(2m，3H)，6.80(m，2H)，6.99(m，1H)，7.05(m，2H)，7.22(d，1H，J＝8.8Hz)，7.51(s，2H)，8.00(m，1H)，8.08(m，1H)，8.21(d，1H，J＝8.6Hz)，8.51(s，1H)；MS(FAB)m/z555(M++1)。
将3-硝基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(420mg，0.76mmo1)和5％Pd-C(1g)在THF-甲醇-乙酸(1∶1∶1，v/v，150ml)中的混合物于45psi下氢化18小时。抽吸除去不溶性催化剂，真空蒸发滤液，得到397mg(100％)3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为淡黄色胶状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ3.05和3.13(s，共3H)，3.66(s，3H)，3.70(s，2H)，3.65-3.90(m，4H)，3.86(s，3H)，4.10和4.23(m，2H)，6.70-6.83(m，3H)，6.98-7.15(m，6H)，7.25-7.43(m，2H)，7.99(m，1H)，8.13(m，1H)；MS(FAB)m/z 525(M++1)。
于室温下，向3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(397mg，0.76mmol)、甲醛(10ml)和乙酸(0.43ml，7.6mmol)的MeCN(10ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(0.48g，7.6mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌15小时。将饱和碳酸氢钠加入该混合物中，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发，残留物经硅胶层析，用甲苯-丙酮(7∶3至1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到123mg(21％)3-二甲基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.74(s，3H)，2.77(s，3H)，3.08(s，1H)，3.22(s，2H)，3.52(s，3H)，3.61(s，1H)，3.83(m，3H)，3.88(s，3H)，4.12和4.23(m，共2H)，6.68(s，1H)，6.78(m，2H)，6.98(m，2H)，7.10(m，1H)，7.55-7.68(m，4H)，7.99(m，1H)，8.16(t，1H，J＝8.3Hz)；MS(FAB)m/z 553(M++1)。
将3-二甲基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(61mg，0.11mmol)在THF(15ml)和1N氢氧化钠(0.22ml，0.22mmol)中的搅拌混合物在回流下加热15小时。通过加入1N HCl将该混合物的pH调节至5.0，用氯仿∶甲醇(9∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，用甲醇-丙酮(93∶7，v/v)作为洗脱剂，得到37mg(63％)277，为白色结晶物质。mp 120-125℃；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.60(s，4H)，2.78(s，2H)，3.06(s，1H)，3.22(s，2H)，3.75(s，3H)，3.85-3.92(m，4H)，4.17和4.29(m，共2H)，6.80-7.12(m，6H)，7.61-7.70(m，2H)，8.00(m，1H)，8.08(m，1H)；MS(FAB)539(M++1)；C28H31FN4O6·2.75H2O的分析计算值C，57.18；H，6.26；N，9.53。实测值C，57.20；H，5.62；N，9.06。实施例2273-二甲基氨基-4-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
将[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酸五氟苯酯(1.42g，3.15mmol)、4-[2-(N-甲基-2-氨基)乙氧基]-3-硝基苯甲酸甲酯(800mg，3.15mmol)和三乙胺(0.66ml，4.73mmol)在DMF(8ml)中的混合物于50℃搅拌15小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析纯化，用氯仿-乙酸乙酯(95∶5至0∶100，v/v)作为洗脱剂，得到1.04g(63％)3-硝基-4-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.30(s，3H)，2.90，3.02和3.05(s，共1H)，3.22(s，2H)，3.71(s，1H)，3.85(3H)，3.93(s，3H)，4.19和4.39(m，2H)，7.02(m，1H)，7.19(m，4H)，7.35(d，1H，J＝8.3Hz)，7.40(d，1H，J＝8.0Hz)，7.55(s，2H)，7.70(m，1H)，8.22(d，1H，J＝6.7Hz)，8.51(s，1H)；MS(FAB)m/z 521(M++1)。
将3-硝基-4-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(1.04g，2mmol)和5％Pd-C(1.2g)在THF-甲醇-乙酸(1∶1∶1，v/v，150ml)中的混合物于45psi下氢化18小时。抽吸除去不溶性催化剂，真空蒸发滤液，得到3-氨基-4-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为淡黄色胶状物。
于室温下，向3-氨基-4-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸酯、甲醛(5ml)和乙酸(1.14ml，20mmol)的MeCN(5ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(1.26g，20mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌15小时。将饱和碳酸氢钠加入该混合物中，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发。残留物经硅胶层析，用甲苯-丙酮(7∶3至1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到85mg(两步，8％)3-二甲基氨基-4-[[2-[4-N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.12(s，3H)，2.73(s，3H)，2.75(s，3H)，3.05(s，1H)，3.20(s，2H)，3.60(s，1H)，3.80(m，3H)，3.88(s，3H)，4.17(m，2H)，6.95-7.28(m，8H)，7.55-7.75(m，3H)；MS(FAB)m/z 518(M++1)。
将3-二甲基氨基-4-[[2-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(ap315201)(85mg，0.16mmol)在THF(15ml)和1N氢氧化钠(0.32ml，0.32mmol)中的搅拌混合物在回流下加热15小时。通过加入1N HCl将该混合物的pH调节至5.0，用氯仿∶甲醇(9∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并真空蒸发，残留物从乙醚中结晶，得到53mg(65％)278，为白色结晶物质。mp 110-115℃；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.29(s，3H)，2.75(s，3H)，2.76(s，3H)，3.02(s，1H)，3.20(s，2H)，3.72(s，1H)，3.85(m，3H)，4.18和4.28(m，共2H)，6.95-7.03(m，2H)，7.18(m，4H)，7.34(d，1H，J＝8.3Hz)，7.38(d，1H，J＝8.8Hz)，7.62(d，1H，J＝8.3Hz)，7.66(s，1H)，7.80(m，1H)；MS(FAB)m/z 505(M++1)。实施例2283-异丙基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
向3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(100mg，0.19mmol)的丙酮/乙酸/DMF(13ml，6∶6∶1，v/v/v)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入NaBH3CN(300mg)，于室温下将得到的混合物搅拌60小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，抽吸收集固体。使沉淀溶于氯仿(20ml)中，用盐水洗涤该溶液，经硫酸镁干燥并减压蒸发。残留物经硅胶板层析，用甲苯-丙酮(2∶1，v/v)作为洗脱剂，得到108mg(100％)3-异丙基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.20(m，1H)，2.88(s，6H)，3.02和3.12(s，共3H)，3.53(s，2H)，3.60-3.80(m，7H)，3.85(s，3H)，4.10和4.20(m，2H)，6.65-6.75(m，2H)，6.90-7.08(m，2H)，7.22-7.35(m，2H)，8.02(s，2H)，8.10(m，2H)，8.21(br，1H)，8.33(br，1H)；MS(FAB)m/z 566(M++1)。
将3-异丙基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(116mg，0.2mmol)、0.25N氢氧化钠(6ml)和THF(6ml)的搅拌混合物在回流下加热8小时。将该混合物倾入水(200ml)中，经1N HCl酸化，抽吸收集固体。使固体从氯仿-正己烷-二异丙基醚中重结晶，得到56mg(50％)279，为无色结晶粉末。mp195-200℃；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ1.15-1.20(m，6H)，3.01(s，1H)，3.12(s，2H)，3.48-3.60(m，1H)，3.68(s，3H)，3.75(s，2H)，3.82(s，1H)，3.86(m，3H)，4.15-4.23(m，2H)，6.80(m，3H)，4.15-4.23(m，2H)，6.80(m，3H)，6.98(m，1H)，7.10(m，2H)，7.20和7.25(s，共1H)，7.32(m，1H)，7.98(m，1H)，8.05(m，1H)；MS(FAB)m/z 552(M+H)+；C29H33FN4O6·1.0H2O的分析计算值C，61.04；H，6.18；N，9.82。实测值C，61.36；H，6.25；N，9.45。实施例2294-[[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]-2-甲基氨基]-2-甲基-2-丙氧基]苯甲酸
于5-10℃，向2-氨基-2-甲基-1-丙醇(8.4g，93.89mmol)和三乙胺(11.4g，0.113mol)的DMF-水(1∶1，v/v，100ml)的搅拌溶液中加入二碳酸二叔丁酯(25g，0.115mol)。将得到的溶液于室温下搅拌2小时。用水(100ml)稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到12g(68％)2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-1-丙醇，为糖浆状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(s，6H)，1.43(s，9H)，3.59(d，J＝8.3Hz，2H)，4.68(br，1H)。
于室温下，向2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-1-丙醇(5.7g，30.11mmol)和粉末状氢氧化钠(6.7g，0.151mol)的乙醚(200ml)搅拌溶液中加入对-甲苯磺酰氯(6.9g，36.14mmol)。将搅拌的所产生的混合物在回流下加热8小时。冷却后，将冰-水(100ml)加入该溶液中。用盐水洗涤分离的乙醚层，经硫酸钠干燥并蒸发。将正己烷加入残留物中并研磨。收集固体得到8.5g(82.2％)对-甲苯磺酸2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-1-丙酯，为结晶物质。1H-NMR(CDCl3)δ1.26(s，6H)，1.38(s，9H)，2.37(s，3H)，4.05(s，2H)，4.49(br，1H)，7.34(d，J＝7.8Hz，2H)，7.78(d，J＝7.8Hz，2H)。
将对-甲苯磺酸2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-1-丙酯(8.2g，23.88mmol)和粉末氢氧化钠(6.7g，0.151mol)的乙醚(200ml)的搅拌溶液在回流下加热10小时。冷却后，过滤该混合物。用水、盐水洗涤滤液，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用正己烷∶乙酸乙酯(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到2.7g(66.2％)1-叔丁氧基羰基-2-甲基丙烯亚胺，为油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.29(s，6H)，1.47(s，9H)，2.05(s，2H)。
于室温下，向1-叔丁氧基羰基-2-甲基丙烯亚胺(1.03g，6.01mmol)和4-羟基苯甲酸甲酯(800mg，6.26mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入三氟化硼乙醚(0.127ml，1mmol)。于室温下将得到的溶液再搅拌3小时。用水、盐水洗涤该混合物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用正己烷∶乙酸乙酯(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到550mg (33％)4-(1-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-2-丙氧基)苯甲酸甲酯，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.33(s，6H)，1.47(s，9H)，3.36(d，J＝6.3Hz，2H)，3.90(s，3H)，5.05(br，1H)，6.99(d，J＝8.8Hz，2H)，7.97(d，J＝8.8Hz，2H)。
将4-(1-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-2-丙氧基)苯甲酸甲酯(460mg，1.42mmol)和苯甲醚(0.155ml，1.42mmol)在二氯甲烷(15ml)和TFA(3ml)中的混合物于室温下搅拌3小时。蒸发该混合物。使残留物溶于二氯甲烷(30ml)，通过加入0.5N氢氧化钠使呈碱性。分离二氯甲烷层，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到370mg(100％)4-(1-氨基-2-甲基-2-丙氧基)苯甲酸甲酯，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.34(s，6H)，2.87(s，2H)，3.90(s，3H)，7.10(d，J＝8.8Hz，2H)，7.97(d，J＝8.8Hz，2H)。
于0℃，向4-(1-氨基-2-甲基-2-丙氧基)苯甲酸甲酯(370mg，1.66mmol)和三乙胺(0.35ml，2.49mmol)的二氯甲烷(15ml)的搅拌溶液中加入三氟乙酸酐(0.316ml，2.24mmol)。于相同的温度下搅拌1小时后，将水加入该溶液中。分离二氯甲烷层，用水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶(20ml)层析，用二氯甲烷作为洗脱剂，得到530mg(100％)4-(1-三氟乙酰氨基-2-甲基-2-丙氧基)苯甲酸甲酯，为胶状物。该化合物可无需进一步纯化而用于随后的反应。
于室温下，向4-(1-三氟乙酰氨基-2-甲基-2-丙氧基)苯甲酸甲酯(530mg，1.66mmol)和碳酸钾(345mg，2.49mmol)的DMF(10ml)的搅拌混合物中加入甲基碘(0.14ml，2.37mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌18小时。将该混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留的胶状物可无需进一步纯化而用于随后的反应。
使上面的粗品残留物溶于甲醇(10ml)中。将水(5ml)和碳酸钠(352mg，3.32mmol)加入该搅拌的溶液中，于室温下搅拌得到的混合物5小时。将该混合物倾入水中，用氯仿提取。用水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿作为洗脱剂，得到390mg(100％)4-(1-甲基氨基-2-甲基-2-丙氧基)苯甲酸甲酯，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.37(s，6H)，2.51(s，3H)，3.89(s，3H)，6.92(d，J＝8.8Hz，2H)，7.97(d，J＝8.8Hz，2H)。
于室温下，向4-(1-甲基氨基-2-甲基-2-丙氧基)苯甲酸甲酯(20mg，0.84mmol)，4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(268mg，0.84mmol)、4-DMAP(125mg，1.0mmol)的DMF(5ml)的搅拌混合物中加入EDC(220mg，1.14mmol)。将得到的混合物于室温下再搅拌10小时。将该混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发，残留的胶状物用二氯甲烷和乙醚研磨，得到200mg(44.1％)4-[[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]甲基氨基]-2-甲基-2-丙氧基]苯甲酸甲酯，为结晶物质。1H-NMR(CDCl3)δ1.36和1.31(各为s，6H)，3.24-3.88(多个s，13H)，6.65-8.20(多个m，14H)。
将4-[[1-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰基]甲基氨基]-2-甲基-2-丙氧基]苯甲酸甲酯(180mg，0.335mmol)在THF(3ml)和0.25N氢氧化钠(4ml)中的混合物于室温下搅拌5小时。将该混合物倾入冰-1N HCl(5ml)中。收集固体。用水洗涤并风干。使粗品固体从乙醇-氯仿-正己烷中重结晶，得到70mg(40％)280，为细针状物质。mp200-207℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.26和1.33(各为s，6H)，3.70-3.81(多个s，7H)，3.83(s，3H)，6.75-8.20(多个m，10H)，8.71(s，1H)，9.17(br s，1H)，12.72(s，1H)。实施例230(S)-3-氯代-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酸(327mg，1.03mmol)、(S)-3-氯代-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(250mg，1.03mmol)，EDC(盐酸盐)(295mg，1.54mmol)、HOBt(208mg，1.54mmol)和DMAP(25mg，0.20mmol)在DMF(8ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。使残留物从氯仿-乙酸乙酯中重结晶，得到308mg(55％)，为白色结晶粉末。1H-NMR(CDCl3)δ1.29(d，3H，J＝6.8Hz)，3.51(s，2H)，3.84(s，3H)，3.88(s，3H)，4.01-4.08(m，2H)，4.38-4.39(m，1H)，6.25(d，1H，J＝8.3Hz)，6.78-6.83(m，2H)，6.90-6.95(m，2H)，7.02-7.11(m，2H)，7.89(dd，1H，J＝2.0，8.8Hz)，8.02(d，1H，J＝2.4Hz)，8.20(d，1H，J＝8.3Hz)，8.27-8.31(m，1H)，8.53(s，1H)，8.84(s，1H)。
向(S)-3-氯代-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(308mg，0.57mmol)在THF-甲醇(10ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将反应混合物在回流下加热1小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集固体。使粗品固体从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶纯化，得到196mg(65％)281，为白色结晶粉末。mp 188-191℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.21(d，3H，J＝6.4Hz)，3.38(s，2H)，3.83(s，3H)，4.02-4.18(m，3H)，6.78-7.29(多个m，共6H)，7.85-8.00(m，3H)，8.12-8.19(m，2H)，8.70(s，1H)，9.17(s，1H)，12.98(bs，1H)；MS(FAB)m/z 530(M+)，531(M++1)，532(M++2)；C26H25ClFN3O6·1/4H2O的分析计算值C，58.43；H，4.81；Cl，6.63；F，3.55；N，7.86。实测值C，58.45；H，4.83；Cl，6.68；F，3.38；N，7.79。实施例2314-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙基氨基]苯甲酸
向N-苄氧基羰基-N-甲基氨基乙醛(1.77g，1.1mmol)的甲苯(3ml)的搅拌溶液中加入4-氨基苯甲酸甲酯(1.29g，8.5mmol)，于室温下搅拌混合物1小时。减压蒸发反应混合物，使残留物溶于MeCN(15ml)中。向该溶液中加入乙酸(2.44ml，43mmol)和NaBH3CN(2.67g，43mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌15小时。通过加入饱和碳酸氢钠猝灭该反应物。用乙酸乙酯提取该混合物，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用正己烷-乙酸乙酯(7∶3，v/v)作为洗脱剂，得到1.26g(43％)4-[2-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)-乙基氨基]苯甲酸甲酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.96(s，3H)，3.32(br m，2H)，3.50-3.60(m，2H)，3.82(s，3H)，5.15(各为d，2H，J＝14.6Hz)，6.35和6.58(m，共2H)，7.36(s，5H)，7.76和7.84(m，共2H)；MS(FAB)m/z 342(M++1)。
向4-[2-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)乙基氨基]苯甲酸甲酯(1.26g，3.68mmol)的甲醇(20ml)的搅拌溶液中加入5wt Pd-C(700mg)，于室温下氢化(3 atm)该混合物4小时。过滤该混合物，减压蒸发滤液，得到600mg(78％)4-[2-(N-甲基氨基)乙基氨基]苯甲酸甲酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.46(s，3H)，2.88(t，2H，J＝5.5Hz)，3.27(br s，2H)，3.85(s，3H)，6.57(d，2H，J＝8.8Hz)，7.85(d，2H，J＝8.8Hz)；MS(FAB)m/z 209(M++1)。
向4-[2-(N-甲基氨基)乙基氨基]苯甲酸甲酯(590mg，2.83mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(891mg，2.83mmol)的DMF(14ml)的搅拌溶液中加入EDC(815mg，4.25mmol)、HOBt(574mg，4.25mmol)和4-DMAP(519mg，4.25mmol)，将得到的混合物于室温下搅拌过夜。将该混合物倾入1N HCl中，抽吸收集固体。使粗品固体经硅胶层析(中压)纯化，用氯仿-乙酸乙酯(10∶0至7∶3，v/v)作为洗脱剂，得到1.25g(87％)的4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙基氨基]苯甲酸甲酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ3.18(s，2H)，3.05和3.32(s，共2H)，3.72-3.85(m，9H)，4.12和4.23(m，共2H)，6.78(m，3H)，7.05(t，1H，J＝7.5Hz)，7.20(m，2H)，7.43-7.50(m，3H)，7.62(d，1H，J＝8.8Hz)，8.05(d，1H，J＝8.8Hz)；MS(FAB)m/z 505(M++1)。
将4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙基氨基]苯甲酸甲酯(300mg，0.6mmol)在0.25N氢氧化钠(6ml)和THF(6ml)中的搅拌混合物回流加热8小时。将该混合物倾入水中，用1N HCl酸化。抽吸收集固体。使粗品固体从正己烷-二异丙基醚中重结晶，得到202mg(69％)的282，为淡黄色结晶粉末。mp 115-120℃；IR(KBr)3346，2935，1603，1531，1454，1417，1257，1174，1036，754cm-1；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.28(s，3H)，2.98(s，1H)，3.10(s，2H)，3.35-3.42(m，2H)，3.53-3.65(m，3H)，3.70(s，1H)，3.80和3.82(s，3H)，6.60-6.85(m，4H)，7.02(m，1H)，7.18(m，2H)，7.58(m，1H)，7.82(m，2H)，7.96(m，1H)；MS(FAB)m/z 491(M++1)。实施例232(S)-3-氯代-4-[2-[N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
于室温下，向(S)-3-氯代-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(1.74g，7.14mmol)的二氯甲烷(20ml)的冷(0℃)溶液中加入三乙胺(1.19ml，8.54mmol)和三氟乙酸酐(TFAA)(1.11ml，7.86mmol)，将反应混合物于室温下搅拌过夜。用氯仿稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。使残留物从氯仿-正己烷中重结晶，得到1.59g(66％)(S)-3-氯代-4-(2-三氟乙酰氨基-1-丙氧基]苯甲酸酯，为白色结晶物质。mp 122-125℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.48(d，3H，J＝6.8Hz)，3.91(s，3H)，4.10-4.19(m，2H)，4.47-4.52(m，1H)，6.68(bs，1H)，6.92-6.94(m，1H)，7.93-7.95(m，1H)，8.07-8.08(m，1H)；MS(FAB)m/z 340(M++1)；C13H13ClF3NO4的分析计算值C，45.96；H，3.86；Cl，10.44；F，16.78；N，4.12。实测值C，45.88；H，3.97；Cl，10.24；F，16.72；N，4.18。
向(S)-3-氯代-4-(2-三氟乙酰氨基-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(800mg，2.36mmol)在DMF(5ml)的搅拌溶液中加入碳酸钾(651mmol，4.71mmol)和甲基碘(0.22ml，3.53mmol)，将反应混合物于60℃搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用5％乙酸乙酯的氯仿溶液作为洗脱剂，得到850mg(100％)(S)-3-氯代-4-[2-(N-甲基-N-三氟乙酰氨基)-1-丙氧基]苯甲酸甲酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.43-1.46(m，3H)，3.03和3.21(s，3H)，3.90(s，3H)，4.04-4.22(m，2H)，4.81-4.87(m，1H)，6.91(d，1H，J＝8.3Hz)，7.93(dd，1H，J＝2.0，8.3Hz)，8.06(d，1H，J＝2.0Hz)。
于室温下，向(S)-3-氯代-4-[2-(N-甲基-N-三氟乙酰氨基)-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(880mg，2.49mmol)的甲醇-水(10ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入碳酸钾(516mg，3.73mmol)。将得到的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发，得到460mg(72％)(S)-3-氯代-4-(2-甲基氨基-1-丙氧基)苯甲酸酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.20(d，3H，J＝6.4Hz)，2.51(s，3H)，3.07-3.12(m，1H)，3.89(s，3H)，3.92-4.04(m，2H)，6.93-6.95(m，1H)，7.90-7.93(m，1H)，8.05-8.06(m，1H)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酸(296mg，0.93mmol)、(S)-3-氯代-4-(2-甲基氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(240mg，0.93mmol)、EDC(盐酸盐)(268mg，1.40mmol)、HOBt(189mg，1.40mmol)和DMAP(23mg，0.19mmol)在DMF(8ml)中的混合物于室温下搅拌1.5小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到520mg(100％)(S)-3-氯代-4-[2-[N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯，为红-棕色无定形固体。
向该产物(520mg，0.93mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将得到的混合物在回流下加热3小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集固体。使粗品固体从氯仿-乙醚中重结晶，得到170mg(两步，37％)283，为白色结晶粉末。mp 142-147℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.13-1.20(m，3H)，2.74和2.94(s，3H)，3.65(s，2H)，3.82和3.84(s，3H)，4.13-4.22(m，2H)，4.53和4.91-4.92(m，1H)，6.71-7.29(多个m，共6H)，7.86-8.02(m，3H)，8.15-8.19(m，1H)，8.71(s，1H)，9.17(s，1H)，13.00(bs，1H)；MS(FAB)m/z 544(M+)，545(M++1)；C27H27ClFN3O6·1/4H2O的分析计算值C，59.13；H，5.05；Cl，6.46；F，3.46；N，7.66。实测值C，59.19；H，4.99；Cl，6.64；F，3.23；N，7.55。实施例233(S)-3-氯代-4-[2-[N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基-1-丙氧基]苯甲酸
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(261mg，0.83mmol)、(S)-3-氯代-4-(2-甲基氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(214mg，0.83mmol)、EDC(盐酸盐)(239mg，1.25mmol)、HOBt(168mg，1.24mmol)和DMAP(20mg，0.16mmol)在DMF(8ml)中的混合物于室温下搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到470mg(100％)(S)-3-氯代-4-[2-[N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯，为淡黄色无定形固体。
向上面的产物(470mg，0.95mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将反应混合物在回流下加热3小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集固体。使粗品固体从氯仿-乙醚中重结晶，得到168mg(两步，33％)284，为淡黄色结晶粉末。mp 125-130℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.13-1.19(m，3H)，2.24(s，3H)，2.74和2.94(s，3H)，3.65(s，2H)，3.83和3.85(s，3H)，4.14-4.22(m，2H)，4.91-4.93(m，1H)，6.70-6.74(m，1H)，6.84(m，1H)，6.92-6.95(m，1H)，7.11-7.17(m，2H)，7.25-7.29(m，1H)，7.78-7.80(m，1H)，7.85-7.93(m，2H)，7.99-8.02(m，1H)，8.46(s，1H)，8.56(s，1H)，12.99(bs，1H)；MS(FAB)m/z 540(M+)，541(M++1)；C28H30ClN3O6·1/2H2O的分析计算值C，61.26；H，5.69；N，7.65。实测值C，61.15；H，5.58；N，7.51。实施例2343-异丙基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
向3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(300mg，0.58mmol)的丙酮-乙酸-DMF(13ml，6∶6∶1，v/v/v)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入NaBH3CN(300mg)，于室温下搅拌得到的混合物60小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发，得到280mg(86％)3-异丙基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.21(m，6H)，2.30(s，3H)，3.05和3.10(s，共2H)，3.59(s，3H)，3.62-3.81(m，6H)，3.89(s，3H)，4.10和4.21(m，2H)，6.65-6.80(m，4H)，7.10(m，1H)，7.20(s，3H)，7.32(m，2H)，7.54(d，1H，J＝8.3Hz)，8.00(s，1H)，8.07(d，1H，J＝8.3Hz)；MS(FAB)m/z 563(M++1)。
将3-异丙基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(280mg，0.5mmol)、0.25N氢氧化钠(6ml)和THF(6ml)的搅拌混合物在回流下加热8小时。将该混合物倾入水(200ml)中，经1N HCl酸化，抽吸收集固体。使固体从氯仿-正己烷-二异丙基醚中重结晶，得到202mg(74％)285，为淡黄色结晶粉末。mp 130-135℃；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ1.18和1.22(d，共6H，J＝6.3Hz)，2.29和2.32(s，共3H)，3.04和3.14(s，共2H)，3.60-3.90(m，9H)，4.16和4.25(m，共2H)，6.80(m，3H)，7.02(m，1H)，7.12-7.24(m，3H)，7.29-7.38(m，1H)，7.59(m，1H)，8.02(m，1H)；MS(FAB)m/z 548(M+1)+；C30H36N4O6的分析计算值C，65.68；H，6.61。实测值C，65.80；H，6.83。实施例2354-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙基]甲基氨基苯甲酸
向4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙基]氨基苯甲酸甲酯(300mg，0.6mmol)的MeCN-甲醛-乙酸(11ml，8∶2∶1，v/v/v)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入NaBH3CN(187mg，2.40mmol)，于室温下搅拌得到的混合物18小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并蒸发，得到309mg(100％)4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-N’-甲基氨基]乙基]N-甲基氨基苯甲酸甲酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.30(m，3H)，2.98(m，7H)，3.46-3.72(m，9H)，3.82(m，3H)，6.32(m，1H)，6.55-6.75(m，4H)，7.05-7.50(m，2H)，7.82-8.02(m，4H)；MS(FAB)m/z 518(M++1)。
将4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-2-N’-甲基氨基]乙基]甲基氨基苯甲酸甲酯(309mg，0.6mmol)的1N氢氧化钠(2.4ml)和THF(10ml)的搅拌混合物在回流下加热8小时。将该混合物倾入水(200ml)中，通过加入1N HCl酸化。抽吸收集固体。使粗品固体从氯仿-正己烷-二异丙基醚中重结晶，得到211mg(70％)286，为淡黄色结晶粉末。mp 125-130℃；IR(KBr)3338，2933，1601，1529，1182，1036，752cm-1；1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.28和2.29(s，3H)，2.95-3.02(m，6H)，3.60(br，6H)，3.80(s，1H)，3.86(s，2H)，6.60-6.82(m，4H)，7.01-7.18(m，3H)，7.58(m，1H)，7.82-7.99(m，3H)；MS(FAB)m/z504(M++1)。实施例236(S)-3-氯代-4-[2-[N-苄基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向NaBH3CN(985mg，15.68mmol)的甲醇(5ml)的搅拌溶液中加入(S)-3-氯代-4-(2-氨基-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(382mg，1.57mmol)和苯甲醛(0.19ml)的甲醇(5ml)溶液，于室温下搅拌得到的混合物过夜。通过加入水猝灭该混合物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发，残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(30∶1，v/v)作为洗脱剂，得到336mg(64％)(S)-3-氯代-4-(2-N-苄基氨基-1-丙氧基)苯甲酸酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.22(d，3H，J＝6.4Hz)，3.21-3.25(m，1H)，3.84-4.03(m，共7H)，6.89-6.91(m，1H)，7.23-7.37(m，5H)，7.89-7.91(m，1H)，8.05(m，1H)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酸(320mg，1.01mmol)、(S)-3-氯代-4-(2-N-苄基氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(336mg，1.01mmol)、EDC(盐酸盐)(289mg，1.51mmol)、HOBt(204mg，1.51mmol)和DMAP(25mg，0.20mmol)在DMF(7ml)中的混合物于室温下搅拌2天。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(50∶1，v/v)作为洗脱剂，得到607mg(95％)(S)-3-氯代-4-[2-[N-苄基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯，为淡黄色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.20-1.27(m，3H)，3.62(s，2H)，3.73-4.16(多个m，共9H)，4.71(bs，2H)，6.67-7.38(多个m，共12H)，7.77-8.17(多个m，共5H)。
向(S)-3-氯代-4-[2-[N-苄基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(607mg，0.96mmol)的THE(6ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(6ml)，将得到的混合物在回流下加热过夜。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集固体。使粗品固体重结晶，得到192mg(32％)287，为白色结晶粉末。mp 125-130℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.07-1.23(m，3H)，3.76(s，2H)，3.85(s，3H)，3.90-4.26(m，3H)，4.56(s，2H)，6.66-7.38(多个m，共10H)，7.82-8.20(多个m，共5H)，8.70-8.74(m，1H)，9.18-9.20(m，1H)，13.02(bs，1H)；MS(FAB)m/z 621(M++1)；C33H31ClFN3O6·1/4H2O的分析计算值C，63.46；H，5.08；Cl，5.68；F，3.04；N，6.73。实测值C，63.67；H，5.16；Cl，5.75；F，2.95；N，6.55。实施例2373-(N-异丙基-N-甲基氨基)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
向3-异丙基氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(324mg，0.58mmol)的乙腈-甲醛-乙酸(11ml，8∶2∶1，v/v/v)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入NaBH3CN(145mg，2.30mmol)，于室温下搅拌得到的混合物18小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，抽吸收集固体。使粗品固体溶于氯仿(20ml)中，用盐水洗涤该溶液，经硫酸镁干燥并蒸发，得到317mg(95％)3-(N-异丙基-N-甲基氨基)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.02(m，6H)，2.29(s，3H)，2.63(m，3H)，3.02-3.20(m，3H)，3.49-3.80(m，8H)，3.88(s，3H)，4.06和4.21(m，共2H)，6.59(m，1H)，6.76(m，2H)，7.11-7.23(m，3H)，7.50-7.62(m，3H)，8.05(d，1H，J＝8.3Hz)；MS(FAB)m/z576(M++1)。
将3-(N-异丙基-N-甲基氨基)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(317mg，0.55mmol)在0.25N氢氧化钠(8.2ml)和THF(8ml)的搅拌混合物在回流下加热8小时。将该混合物倾入水(200ml)中，通过加入1N HCl酸化，抽吸收集固体。使粗品固体从氯仿-正己烷-二异丙基醚中重结晶，得到288，为淡黄色结晶粉末。mp 130-135℃；IR(KBr)2970，1537，1038，754cm-1；1H-NMR(CD3OD)δ1.12(m，6H)，2.29(s，3H)，2.76(m，1H)，2.89(s，2H)，3.02(s，1H)，3.21(s，2H)，3.72(s，2H)，3.80(s，3H)，3.84(m，3H)，4.13和4.40(m，共2H)，6.76(d，1H，J＝7.8Hz)，6.86(s，1H)，7.00(m，2H)，7.18(m，3H)，7.57(d，1H，J＝7.8Hz)，7.95(m，2H)；MS(FAB)m/z 562(M++1)；C31H38N4O6·2.0H2O的分析计算值C，62.19；H，7.07；N，9.36。实测值C，62.54；H，6.85；N，8.90。实施例2383-(1-哌啶基)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
于0℃，向3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(300mg，0.57mmol)的THF(2ml)的搅拌的溶液中加入戊二醛(50％的水溶液)(0.13ml，0.69mmol)的甲醇(1.4ml)、THF(0.993ml)和3N硫酸(0.952ml)中的溶液。于室温下，向该溶液中加入NaBH3CN(150mg)、DMF(5ml)和甲醇(2ml)，将得到的混合物搅拌15小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸镁干燥并减压蒸发。残留物经硅胶层析，用甲苯∶丙酮(7∶3，v/v)作为洗脱剂，得到145mg(43％)3-(1-哌啶基)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.58-1.72(m，6H)，2.80-2.92(m，4H)，3.26(s，2H)，3.58(s，2H)，3.69(s，2H)，3.80-3.89(m，7H)，4.22(m，2H)，6.72(s，1H)，6.78(m，2H)，6.95-7.18(m，2H)，7.32(s，1H)，7.60(s，1H)，7.63(d，1H，J＝7.8Hz)，7.98(d，1H，J＝7.8Hz)，8.18(m，1H)；MS(FAB)m/z 593(M++1)。
将3-(1-哌啶基)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(290mg，0.49mmol)、1N氢氧化钠(1.95ml)在甲醇(5ml)和THF(10ml)中的搅拌混合物在回流下加热4小时。将该混合物倾入水(200ml)中，用1N HCl酸化(pH＝4.0)，用氯仿-甲醇(9∶1，v/v)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。使残留物从二异丙基醚-己烷中结晶，得到201mg(71％)289，为淡黄色结晶粉末。mp 125-130℃；IR(KBr)3338，2935，1599，1537，1041，752cm-1；1H-NMR(CD3OD)δ1.52-1.73(m，6H)，2.88(s，3H)，2.98(br，1H)，3.09(s，1H)，3.23(s，2H)，3.66(s，2H)，3.75(s，1H)，3.82(s，4H)，4.13和4.29(m，共2H)，6.78(m，2H)，6.99(m，2H)，7.1 0(m，2H)，7.60-7.70(m，2H)，7.96-8.07(m，2H)；MS(FAB)m/z 578(M++1)；C31H35FN4O6·0.5H2O的分析计算值C，63.36；H，6.17；N，9.53。实测值C，63.22；H，6.15；N，9.16。实施例2393-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
向3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(300mg，0.58mmol)的甲醇-THF(2∶1，v/v，12ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(9ml)，将得到的混合物在回流下加热16小时。将该混合物倾入水(100ml)中，通过加入1N HCl酸化。抽吸收集固体。使残留物从二异丙基醚中重结晶，得到243mg(83％)290，为黄色结晶粉末。mp 125-130℃；IR(KBr)3346，2935，1533，1211，1034，756，637cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.29(s，3H)，3.05(s，1H)，3.72-3.85(m，7H)，4.12和4.25(m，共2H)，6.76-6.89(m，3H)，7.00(m，1H)，7.18(m，2H)，7.39(m，2H)，7.60(d，1H，J＝7.8Hz)，7.96(m，1H)；C27H30N4O6·0.5H2O的分析计算值C，62.90；H，6.06；N，10.87。实测值C，63.03；H，6.14；N，10.56。实施例2403-(1-哌啶基)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
向3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(573mg，1.1mmol)的THF-甲醇(2∶1，v/v，6ml)的冷却的搅拌溶液中加入戊二醛(0.423ml，2.2mmol)、3N硫酸(1.83ml，5.5mmol)和NaBH3CN(276mg，4.4mmol)。于室温下，将得到的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠(100ml)中，抽吸收集固体。粗品固体经硅胶柱层析纯化，用甲苯∶丙酮(10∶0-4∶1，v/v)洗脱，得到240mg(37％)3-(1-哌啶基)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯，为胶状物。1H-NMR(CD3OD)δ1.52-1.72(m，6H)，2.30(s，3H)，2.36(s，2H)，2.89(br s，3H)，2.98(m，1H)，3.05(s，1H)，3.20(s，2H)，3.68(s，2H)，3.69(m，2H)，3.79(m，2H)，3.88(s，2H)，4.08和4.21(m，2H)，6.35和6.42(s，共1H)，6.70(s，1H)，6.70(s，1H)，6.79(m，2H)，7.09-7.24(m，4H)，7.50-7.65(m，3H)，8.05(d，1H，J＝8.3Hz)；MS(FAB)m/z 588(M++1)。
将3-(1-哌啶基)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(240mg，0.41mmol)、1N氢氧化钠(1.63ml)在甲醇(6.5ml)、水(5ml)和THF(6.5ml)中的搅拌混合物在回流下加热11小时。将该混合物倾入水(200ml)中，通过加入1N HCl酸化至pH＝4.0，抽吸收集固体。用氯仿-甲醇(9∶1，v/v，30ml×3)提取水层。使沉淀物溶于合并的有机提取物中。经硫酸镁干燥有机层并蒸发。使残留物从二异丙基醚中结晶，得到151mg(65％)291，为淡黄色结晶粉末。mp 120-125℃；IR(KBr)3354，2935，1535，1252，1217，1034，754，638cm-1；1H-NMR(CD3OD)δ1.55-1.72(m，6H)，2.30(s，3H)，2.89(br，2H)，2.98(br，1H)，3.09(s，1H)，3.22(s，2H)，3.69(s，3H)，3.74(s，1H)，3.83(m，4H)，4.12和4.28(m，共2H)，6.75(m，2H)，6.88-7.02(m，1H)，7.17(m，2H)，7.58-7.73(m，4H)，7.99(d，1H，J＝8.3Hz)；MS(FAB)m/z574(M++1)；C32H38N4O6·0.5H2O的分析计算值C，65.85；H，6.73；N，9.60。实测值C，65.94；H，6.88；N，9.03。实施例2413-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸
将3-氨基-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]苯基乙酰基]甲基氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(250mg，0.48mmol)在1N氢氧化钠(1.19ml)、甲醇(8ml)、水(6ml)和THF(8ml)中的搅拌混合物在回流下加热10小时。将该混合物倾入水(200ml)中，通过加入1N HCl酸化(pH＝4.8)，抽吸收集固体。使粗品固体从二异丙基醚中重结晶，得到209mg(86％)292，为淡黄色结晶粉末。mp 125-130℃；IR(KBr)3325，2935，1537，1209，1032，752，449cm-1；1H-NMR(CD3OD)δ3.05(s，1H)，3.31(s，2H)，3.77(m，3H)，3.80(s，1H)，3.84(m，3H)，4.14-4.26(m，2H)，6.80-6.87(m，3H)，7.01(m，1H)，7.10(m，2H)，7.39(m，2H)，7.80(m，1H)，8.07(m，1H)；MS(FAB)m/z 510(M++1)；C26H27FN4O6·0.5H2O的分析计算值C，60.11；H，5.43；F，3.66；N，10.78。实测值C，60.29；H，5.40；F，3.60；N，10.59。实施例242(S)-3-氨基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
于室温下，向(S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1-丙醇(0.90g，5.13mmol)、4-羟基-3-硝基苯甲酸甲酯(1.01g，5.12mmol)和三苯膦(1.75g，6.67mmol)的THF(15ml)的搅拌溶液中加入偶氮二羧酸二异丙基酯(DIAD)(1.31ml，6.65mmol)，将得到的混合物回流加热过夜。蒸发该溶液，使残留物溶于二氯甲烷(20ml)和TFA(10ml)中。于室温下搅拌该混合物3小时。真空浓缩该混合物，使残留物溶于氯仿中。用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到313mg(24％)(S)-3-硝基-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.22(d，3H，J＝6.8Hz)，3.43-3.48(m，1H)，3.69-3.87(m，2H)，3.89(s，3H)，6.93-6.95(m，1H)，7.99-8.02(m，1H)，8.18-8.21(m，1H)。
将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸的五氟苯酯(591mg，1.23mmol)、(S)-3-硝基-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(313mg，1.23mmol)和三乙胺(257ml，1.84mmol)在DMF(5ml)中的混合物于室温下搅拌2天。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到310mg(46％)(S)-3-硝基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.28(d，3H，J＝6.8Hz)，2.31(s，3H)，3.49(s，2H)，3.71(s，3H)，3.92(s，3H)，4.14-4.16(m，2H)，4.38-4.41(m，1H)，5.88-5.90(m，1H)，6.49(s，1H)，6.70-6.71(m，1H)，6.77-6.79(m，1H)，7.05-7.30(m，4H)，7.55-7.57(m，1H)，8.02-8.06(m，2H)，8.16-8.19(m，1H)，8.51-8.52(m，1H)；MS(FAB)m/z 551(M++1)。
将(S)-3-硝基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(310mg，0.56mmol)的甲醇-THF(10ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液经5％Pd-C(50mg，16wt％)氢化过夜。过滤该混合物，以除去催化剂，蒸发滤液，得到(S)-3-氨基-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(240mg)，为胶状物。
向上面的粗产物(220mg)的THF-甲醇(10ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将得到的混合物回流加热2小时。将该混合物倾入冰-水中，通过加入1N HCl使水层呈酸性(pH＝4.8)。收集固体，使粗品固体从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶，得到116mg(两步，44％)293，为淡黄色结晶粉末。mp 200-204℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.21(d，3H，J＝6.8Hz)，2.24(s，3H)，3.37(s，2H)，3.80(s，3H)，3.83-3.99(m，2H)，4.10-4.19(m，1H)，4.99(bs，2H)，6.75-7.23(多个m，共8H)，7.79(d，1H，J＝7.8Hz)，7.98(d，1H，J＝7.8Hz)，8.17(d，1H，J＝8.3Hz)，8.46(s，1H)，8.55(s，1H)；MS(FAB)m/z 507(M++1)；C27H30N4O6·1/2H2O的分析计算值C，62.90；H，6.06；N，10.87。实测值C，62.85；H，6.10；N，10.51。实施例243(S)-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1-丙醇(6.74g，0.04mol)、4-羟基苯甲酸苄酯(8.78g，0.04mol)和三苯膦(15.13g，0.06mol)的THF(100ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入偶氮二羧酸二异丙基酯(DIAD)(11.4ml，0.06mol)，将得到的混合物回流加热过夜。蒸发该溶液，使残留物溶于二氯甲烷(30ml)和TFA(30ml)中。于室温下搅拌所得到的溶液30分钟。真空蒸发该溶液。使残留物溶于氯仿中，用饱和碳酸氢钠洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至氯仿∶甲醇(9∶1，v/v)作为洗脱剂，得到6.63g(两步，60％)(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸苄酯，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.18(d，J＝6.3Hz，3H)，3.35-3.39(m，1H)，3.71-3.75(m，1H)，3.90-3.93(m，1H)，5.34(s，2H)，6.90-6.93(m，2H)，7.32-7.46(m，5H)，8.01-8.04(m，2H)。
将3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酸(480mg，1.27mmol)、(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸苄酯(361mg，1.27mmol)、EDC(盐酸盐)(364mg，1.90mmol)、HOBt(256mg，1.89mmol)和4-DMAP(31mg，0.25mmol)在DMF(8ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到476mg(58％)(S)-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸苄酯，为棕色固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.25-1.28(m，3H)，3.51(s，2H)，3.74(s，3H)，3.95-3.97(m，2H)，4.36-4.39(m，1H)，5.33(s，2H)，6.75-6.94(m，5H)，7.26-7.70(m，8H)，7.99-8.26(m，5H)。
向(S)-4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基氨基]-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(476mg，1.39mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将得到的混合物在回流下加热2小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集固体。使粗品固体从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶，得到240mg(59％)294，为白色结晶粉末。mp 202-205℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.18(d，J＝6.8Hz，3H)，3.37(s，2H)，3.82(s，3H)，3.92-4.00(m，2H)，4.03-4.15(m，1H)，6.77-6.79(m，1H)，6.93-7.03(m，4H)，7.30-7.34(m，1H)，7.59-7.61(m，1H)，7.87-7.97(m，4H)，8.13-8.15(m，1H)，8.73(s，1H)，8.91(s，1H)，12.63(bs，1H)；MS(FAB)m/z 557(M++1)；C26H26BrN3O6的分析计算值C，56.12；H，4.71；Br，14.36；N，7.55。实测值C，56.11；H，4.74；Br，14.56；N，7.49。实施例244(S)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2-氨基苄基)氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸苄酯(1.50g，5.26mmol)和2-硝基苯甲醛(0.87g，5.76mmol)的甲醇-乙酸(16ml，15∶1，v/v)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入NaBH3CN(1.65g，26.3mmol)，于室温下将得到的混合物搅拌过夜。通过加入饱和碳酸氢钠猝灭该混合物。用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到931mg(42％)(S)-4-[2-(2-硝基苄基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸苄酯，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.21(d，J＝6.4Hz，3H)，3.13-3.18(m，1H)，3.88-3.97(m，2H)，4.06-4.20(m，2H)，5.34(s，2H)，6.89-6.94(m，2H)，7.29-7.65(m，8H)，7.94-8.03(m，3H)；MS(FAB)m/z 421(M++1)。
将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(460mg，0.96mmol)、(S)-4-[2-(2-硝基苄基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(403mg，0.96mmol)和三乙胺(200ml，1.43mmol)在DMF(8ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用1％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到504mg(73％)(S)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2-硝基苄基)氨基]-1-丙氧基]苯甲酸苄酯，为棕色无定形固体；MS(FAB)m/z 717(M++1)。
向(S)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2-硝基苄基)氨基]-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(504mg，0.70mmol)的甲醇-THF(11ml，10∶1，v/v)的搅拌溶液经5％Pd-C(100mg，20wt％)于3个大气压下氢化过夜。过滤该混合物，以除去催化剂，蒸发滤液。残留物经制备性TLC纯化，用5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到115mg(27％)295，为白色粉末。MS(FAB)m/z 597(M++1)。实施例245(S)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2-硝基苄基)氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸苄酯(1.50g，5.26mmol)和2-硝基苯甲醛(0.87g，5.76mmol)的甲醇-乙酸(16ml，15∶1，v/v)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入NaBH3CN(1.65g，26.3mmol)，于室温下将得到的混合物搅拌过夜。通过加入饱和碳酸氢钠猝灭该混合物。用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到931mg(42％)(S)-4-[2-(2-硝基苄基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸苄酯，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.21(d，3H，J＝6.4Hz)，3.13-3.18(m，1H)，3.88-3.97(m，2H)，4.06-4.20(m，2H)，5.34(s，2H)，6.89-6.94(m，2H)，7.29-7.65(m，8H)，7.94-8.03(m，3H)；MS(FAB)m/z 421(M++1)。
将3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酸(476mg，1.26mmol)、(S)-4-[2-(2-硝基苄基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(528mg，1.26mmol)、EDC(盐酸盐)(361mg，1.88mmol)、HOBt(255mg，1.89mmol)和DMAP(30mg，0.25mmol)在DMF(10ml)中的混合物于室温下搅拌过夜并于60℃搅拌1天。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至2％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到(S)-4-[[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰基]-(2-硝基苄基)氨基]-1-丙氧基]苯甲酸苄酯，为油状物。其可无需进一步纯化而用于随后的反应。
向上面粗产物的THF-甲醇(10ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将得到的混合物在回流下加热3小时。将该混合物倾入冰-水中，用1N HCl使碱性水层呈酸性(pH4.3)。收集固体，使粗品固体经制备性TLC纯化，用5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到162mg(两步，19％)296，为白色无定形固体。MS(FAB)m/z 692(M++1)；C33H31BrN4O8·7/4H2O的分析计算值C，54.82；H，4.81；N，7.75。实测值C，54.80；H，4.61；N，7.24。实施例2464-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸
用5分钟，向2-(N-叔丁氧基羰基氨基)乙醇(3.20g，19.9mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(3.02g，19.9mmol)和三苯膦(6.25g，23.8mmol)的THF(50ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中滴加DIAD(4.69ml.23.8mmol)。将反应混合物回流加热3小时。蒸发该混合物，使残留物溶于二氯甲烷(30ml)和TFA(30ml)中。于室温下搅拌该反应混合物过夜。真空蒸发该混合物，使残留物溶于氯仿和水中。用饱和碳酸氢钠使该溶液呈碱性，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿∶甲醇(30∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-(2-氨基乙氧基)苯甲酸甲酯(1.03g，两步34％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.10-3.13(m，2H)，3.89(s，3H)，4.03-4.06(m，2H)，6.92-6.94(m，2H)，7.98-8.00(m，2H)。
将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(557mg，1.77mmol)、4-(2-氨基乙氧基)苯甲酸甲酯(346mg，1.77mmol)、EDC·HCl(408mg，2.13mmol)、HOBt(287mg，2.12mmol)和DMAP(52mg，0.43mmol)在DMF(10ml)中的混合物于室温下搅拌2天。用乙酸乙酯和水稀释该混合物。收集产生的沉淀，得到4-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(598mg，69％)，为白色结晶粉末。1H-NMR(DMSO-d6)δ2.23(s，3H)，3.36(s，2H)，3.42-3.45(m，2H)，3.79(s，3H)，3.81(s，3H)，4.02-4.09(m，2H)，6.73-6.75(m，1H)，6.90-6.94(m，2H)，7.02-7.04(m，2H)，7.09-7.15(m，2H)，7.77-7.79(m，1H)，7.88-7.90(m，2H)，7.95-7.98(m，1H)，8.23-8.24(m，1H)，8.44(s，1H)，8.53(s，1H)；MS(FAB)m/z 492(M++1)；C27H29N3O6·1/4H2O的分析计算值C，65.38；H，5.99；N，8.47。实测值C，65.26；H，5.99；N，8.49。
向4-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(280mg，0.57mmol)的THF-甲醇(10ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将反应混合物在回流下加热5小时。将该混合物冷却至室温并倾入冰-1N HCl中。收集产生的沉淀并从乙醚-氯仿-甲醇中重结晶，得到297(135mg，50％)，为白色结晶粉末。MW 477.51 1H-NMR(DMSO-d6)δ2.24(s，3H)，3.38(s，2H)，3.43-3.47(m，2H)，3.82(s，3H)，4.06-4.09(m，2H)，6.76-6.78(m，1H)，6.92-7.17(m，6H)，7.79(d，J＝8.1Hz，1H)，7.88-7.89(m，2H)，7.98(d，J＝8.1Hz，1H)，8.24-8.27(m，1H)，8.45(s，1H)，8.55(s，1H)；MS(FAB)m/z 478(M++1)；C26H27N3O6·1/4H2O的分析计算值C，64.79；H，5.75；N，8.72。实测值C，64.67；H，5.63；N，8.60。实施例247(S)-4-[2-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1-丙醇(6.74g，0.04mol)、4-羟基苯甲酸苄酯(8.78g，0.04mol)和三苯膦(15.13g，0.06mol)的THF(100ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中加入DIAD(11.4ml，0.06mol)。将反应混合物回流加热过夜。蒸发该溶液，使残留物溶于二氯甲烷(30ml)和TFA(30ml)中。于室温下搅拌该溶液30分钟并真空浓缩该溶液。使残留物溶于氯仿中，用饱和碳酸氢钠洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至氯仿∶甲醇(9∶1，v/v)作为洗脱剂，得到(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸苄酯(6.63g，两步，60％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.18(d，J＝6.3Hz，3H)，3.35-3.39(m，1H)，3.71-3.75(m，1H)，3.90-3.93(m，1 H)，5.34(s，2H)，6.90-6.93(m，2H)，7.32-7.46(m，5H)，8.01-8.04(m，2H)。
将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(480mg，1.27mmol)、(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸苄酯(361mg，1.27mmol)、EDC·HCl(364mg，1.90mmol)、 HOBt(256mg，1.89mmol)和DMAP(31mg，0.25mmol)在DMF(8ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到(S)-4-[2-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(476mg，58％)，为棕色固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.25-1.28(m，3H)，3.51(s，2H)，3.74(s，3H)，3.95-3.97(m，2H)，4.36-4.39(m，1H)，5.33(s，2H)，6.75-6.94(m，5H)，7.26-7.70(m，8H)，7.99-8.26(m，5H)。
向(S)-4-[2-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(476mg，1.39mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将反应混合物在回流下加热2小时。将该混合物倾入冰-1N HCl中，收集产生的沉淀。粗品固体经从甲醇-氯仿-正己烷中重结晶纯化，得到298(240mg，59％)，为白色结晶粉末。MW556.41 1H-NMR(DMSO-d6)δ1.18(d，J＝6.8Hz，3H)，3.37(s，2H)，3.82(s，3H)，3.92-4.00(m，2H)，4.03-4.15(m，1H)，6.77-6.79(m，1H)，6.93-7.03(m，4H)，7.30-7.34(m，1H)，7.59-7.61(m，1H)，7.87-7.97(m，4H)，8.13-8.15(m，1H)，8.73(s，1H)，8.91(s，1H)，12.63(bs，1H)；MS(FAB)m/z 557(M++1)；C26H26BrN3O6的分析计算值C，56.12；H，4.71；Br，14.36；N，7.55。实测值C，56.11；H，4.74；Br，14.56；N，7.49。实施例248(S)-4-[2-N-[[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(S)-2-[(N-叔丁氧基羰基)氨基]-1-丙醇(3.08g，17.6mmol)、4-羟基苯甲酸甲酯(2.67g，17.6mmol)和三苯膦(5.53g，21.1mmol)的THF(35ml)的搅拌的冷(0℃)溶液中滴加入DIAD(4.15ml，21.1mmol)。将反应混合物回流加热过夜。蒸发该混合物，残留物经硅胶柱层析纯化，用正己烷∶乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到(S)-4-[2-[(N-叔丁氧基羰基)氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(1.24g，23％)，为白色固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.30(d，J＝6.8Hz，3H)，1.45(s，9H)，3.89(s，3H)，3.98-3.99(m，2H)，4.07(m，1H)，4.76(m，1H)，6.91-6.93(m，2H)，7.98-8.00(m，2H)；MS(FAB)m/z 310(M++1)。
向(S)-4-[2-[(N-叔丁氧基羰基)氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(1.24g，4.01mmol)的二氯甲烷(10ml)的搅拌溶液中加入TFA(10ml)，将反应混合物于室温下搅拌过夜。真空浓缩该混合物，用饱和碳酸氢钠使呈碱性。用氯仿提取该混合物，用盐水洗涤，经碳酸钾干燥并蒸发，得到(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(790mg，94％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.19(d，J＝6.7Hz，3H)，3.34-3.42(m，1H)，3.70-3.77(m，1H)，3.86-3.94(多个s和m，共4H)，6.92(d，J＝9.0Hz，2H)，7.98(d，J＝9.0Hz，2H)。
向(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸甲酯(790mg，3.78mmol)和三乙胺(630ml，4.52mmol)的THF(10ml)的冷(0℃)溶液中加入TFAA(640ml，4.53mmol)，于室温下将反应混合物搅拌4天。用0.5N HCl稀释该混合物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经碳酸钾干燥并蒸发。残留物从正己烷-氯仿中重结晶纯化，得到(S)-4-[2-(三氟乙酰氨基)-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(790mg，69％)，为白色结晶物质。1H-NMR(CDCl3)δ1.42(d，J＝6.8Hz，3H)，3.89(s，3H)，4.01-4.13(m，2H)，4.44-4.50(m，1H)，6.57-6.61(m，1H)，6.92(d，J＝9.0Hz，2H)，8.00(d，J＝9.0Hz，2H)；MS(FAB)m/z 306(M++1)；C13H14F3NO4的分析计算值C，51.15；H，4.62；F，18.67；N，4.59。实测值C，51.14；H，4.60；F，18.50；N，4.54。
向(S)-4-[2-(三氟乙酰氨基)-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(695mg，2.28mmol)和碳酸钾(630mg，4.56mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入MeI(210ml，3.37mmol)，于室温下将反应混合物搅拌2天。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用乙酸乙酯-氯仿(1∶19，v/v)作为洗脱剂，得到(S)-4-[2-[(N-甲基)三氟乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(720mg，99％)，为白色固体。mp 73-75℃；1H-NMR(CDCl3)δ1.36-1.39(m，3H)，2.96和3.10(各为s，共3H)，3.89(s，3H)，3.99-4.14(m，2H)，4.84-4.92(m，1H)，6.88-6.92(m，2H)，7.98-8.00(m，2H)；MS(FAB)m/z 320(M++1)；C14H16F3NO4的分析计算值C，52.67；H，5.05；F，17.85；N，4.39。实测值C，52.76；H，5.09；F，17.53；N，4.32。
向(S)-4-[2-[(N-甲基)三氟乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(710mg，2.22mmol)的甲醇-水(1 0ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入碳酸钾(460mg，3.33mmol)，于室温下，将反应混合物搅拌过夜。用水稀释混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发，得到(S)-4-[2-(N-甲基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(430mg，87％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.17(d，J＝6.6Hz，3H)，2.48(s，3H)，2.98-3.06(m，1H)，3.86-3.96(多个s和m，共5H)，6.92(d，J＝9.0Hz，2H)，7.98(d，J＝9.0Hz，2H)。
向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(605mg，1.93mmol)、(S)-4-[2-(N-甲基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(430mg，1.93mmol)、EDC·HCl(444mg，2.32mmol)、HOBt(313mg，2.32mmol)、三乙胺(320ml，2.30mmol)在THF(13ml)中的混合物于室温下搅拌过夜。用水稀释该混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿-甲醇(100∶1至75∶1，v/v)作为洗脱剂，得到(S)-4-[2-N-[[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(953mg，95％)，为白色泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.12-1.13和1.25-1.27(各为m，共3H)，2.27(s，3H)，2.84和2.92(各为s，共3H)，3.63(s，3H)，3.67(s，2H)，3.71-4.05(多个s和m，共5H)，4.39-4.44和4.96-5.01(各为m，共1H)，6.66-6.85(m，5H)，7.09-7.27(m，4H)，7.53-7.55(m，1H)，7.92-7.98(m，2H)，8.04-8.08(m，1H)；MS(FAB)m/z 520(M++1)；C29H33N3O6·11/4H2O的分析计算值C，61.20；H，6.82；N，7.38。实测值C，61.14；H，5.86；N，7.16。
向(S)-4-[2-N-[[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(663mg，1.28mmol)的THF(5ml)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(5ml)，将反应混合物回流加热5小时。冷却至室温后，将该混合物倾入冰-1N HCl中，减压收集产生的沉淀。使粗品固体溶于氯仿中并蒸发。用乙醚洗涤残留物，得到299(465mg，72％)，为白色无定形固体。MW 505.56 1H-NMR(DMSO-d6)δ1.11-1.15(m，3H)，2.25(s，3H)，2.73和2.88(各为s，共3H)，3.60-3.76(m，2H)，3.83(s，3H)，4.03-4.12(m，2H)，441-4.50和4.48-4.94(各为m，共1H)，6.71-6.76(m，1H)，6.84-6.86(m，1H)，6.91-7.01(m，3H)，7.11-7.12(m，2H)，7.78-7.80(m，1H)，7.86-7.90(m，2H)，8.01-8.03(m，1H)，8.45(s，1H)，8.54(s，1H)；MS(FAB)m/z 520(M++1)；C28H31N3O6·3/2H2O的分析计算值C，63.15；H，6.43；N，7.89。实测值C，63.09；H，5.99；N，7.64。实施例2494-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]-2-甲基-1-丙氧基]苯甲酸
在氮气流下，将4-羟基苯甲酸甲酯(3g，19.72mmol)、碳酸钾(6.8g，49.3mmol)、3-氯代新戊酸(2.9g，21.69mmol)和催化量的KI(200mg)在DMF(70ml)中的搅拌混合物于100℃加热14天。将该混合物倾入冰水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶(50ml)层析，用氯仿∶乙醇(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到标题化合物(1g，23％)，为无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.37(s，6H)，3.89(s，3H)，4.03(s，2H)，6.92(d，J＝9Hz，2H)，7.98(d，J＝9Hz，2H)。
于室温下，向2，2-二甲基-3-(4-甲氧基羰基)苯氧基丙酸(720mg，2.85mmol)和三乙胺(0.46ml，3.28mmol)的叔丁醇(10ml)和苯(10ml)的搅拌混合物中加入二苯基磷酰基叠氮化物(870mg，3.14mmol)的苯(3ml)溶液。将得到的混合物回流加热20小时。冷却后，将冰和1N HCl(5ml)加入该混合物中并用甲苯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶(50ml)层析，用甲苯∶乙酸乙酯(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-(2-氨基-2-甲基)丙氧基]苯甲酸甲酯，为胶状物(520mg)，其可无需进一步纯化而用于随后的反应。1H-NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)，3.89(s，3H)，4.04(s，2H)，4.69(br s，1H)，6.94(dd，J＝2和7Hz，2H)，7.98(dd，J＝2和7Hz)。
于室温下，将4-[1-(2-甲基-2-叔丁氧基羰基氨基-)丙氧基]苯甲酸甲酯(520mg)和苯甲醚(0.175ml，1.61mmol)的二氯甲烷(5ml)和TFA(3ml)的溶液搅拌18小时。蒸发该混合物。使残留物溶于二氯甲烷中，通过加入饱和碳酸氢钠使该混合物呈碱性。经硫酸钠和碳酸钠干燥分离的二氯甲烷层并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙醇(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[1-(2-氨基-2-甲基)丙氧基]苯甲酸甲酯(250mg，两步39％)，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.75(s，2H)，3.89(s，3H)，6.93(d，J＝8.8Hz，2H)，7.98(d，J＝8.8Hz，2H)。
于室温下，向4-[1-(2-氨基-2-甲基)丙氧基]苯甲酸甲酯(250mg，1.12mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(352mg，1.12mmol)、4-DMAP(165mg，1.34mmol)的DMF(10ml)的搅拌混合物中加入EDC·HCl(290mg，1.51mmol)。将得到的混合物于室温下搅拌18小时。将该混合物倾入冰-水中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体经硅胶柱层析纯化，用氯仿∶乙醇(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]-2-甲基-1-丙氧基]苯甲酸甲酯(580mg，q.y.)，为结晶物质。IR(KBr)3350，3286，1712，1687，1637，1606cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.39(s，6H)，2.33(s，3H)，3.41(s，2H)，3.63(s，3H)，3.88(s，3H)，4.05(s，2H)，5.44(br s，1H)，6.33(br s，1H)，6.79(d，J＝8.3Hz，2H)，7.12(s，1H)，7.1 8(t，J＝7.5Hz，1H)，7.53(d，J＝7.8Hz，1H)，7.94(d，J＝7.8Hz，2H)，8.14(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(FAB)m/z 520(M++1)；C29H33N3O6的分析计算值C，67.04；H，6.40；N，8.09。实测值C，66.86；H，6.36；N，8.22。
于室温下，向4-[2-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]-2-甲基-2-丙氧基]苯甲酸甲酯(510mg，0.98mmol)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(8ml，2mmol)。将得到的混合物于环境温度下搅拌18小时。将该混合物倾入冰-1N HCl(5ml)中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体从氯仿-乙醇-乙醚中重结晶，得到300(480mg，97％)，为细的针状物。MW 505.56 IR(KBr)n 3346，3294，1687，1637，1604cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ1.35(s，6H)，2.24(s，3H)，3.33(s，2H)，3.80(s，3H)，4.15(s，2H)，6.75(d，J＝8.3Hz，1H)，6.88(s，1H)，6.95-6.99(m，3H)，7.11-7.17(m，3H)，7.80(d，J＝8.3Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.87(d，J＝8.8Hz，2H)，7.98(d，J＝7.8Hz，1H)，8.45(s，1H)，8.54(s，1H)，12.62(br s，1H)；MS(FAB)m/z 506(M++1)；C28H31N3O6的分析计算值C，66.52；H，6.18；N，8.31。实测值C，66.22；H，6.28；N，8.11。实施例2503-氨基-4-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-2-甲基-1-丙氧基]苯甲酸
于0-5℃，向4-氨基-2-硝基苯酚(10g，64.88mmol)的乙酸(70ml)和DMSO(20ml)的搅拌溶液中加入浓硫酸。在低于20℃的温度下，用10分钟向该搅拌的溶液中滴加亚硝酸钠(5.4g，77.9mmol)的水(5ml)溶液。于5℃再搅拌得到的混合物0.5小时。用10分钟将该混合物倾入KI(30g，0.182mol)和催化量的Cu粉(200mg)的冰-水(200ml)的搅拌溶液中。于室温下再搅拌得到的混合物1小时。用二氯甲烷提取该混合物。用饱和硫代硫酸钠和盐水顺序洗涤提取物。经硫酸钠干燥有机层并蒸发。残留物经硅胶(50ml)层析，用氯仿∶乙酸乙酯(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-碘代-2-硝基苯酚(2.5g，15％)，为黄色结晶物质。1H-NMR(CDCl3)δ6.94(d，J＝8.8Hz，1H)，7.82(dd，J＝2和8.8Hz，1H)，8.42(d，J＝2Hz，1H)，10.49(s，1H)。
在冰水浴冷却下，向4-碘代-2-硝基苯酚(2g，7.75mmol)、羟基新戊酸甲酯(1.05g，7.92mmol)和三苯膦(2.3g，8.68mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中滴加DIAD(1.77g，8.30mmol)的THF(2ml)溶液。然后将得到的混合物回流加热18小时。冷却后，蒸发该混合物。残留物经硅胶(100ml)层析，用甲苯∶乙酸乙酯(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到3-(4-碘代-2-硝基)苯氧基-2，2-二甲基丙酸甲酯(2.9g，q.y.)，为结晶物质。1H-NMR(CDCl3)δ1.34(s，6H)，3.71(s，3H)，4.08(s，2H)，6.86(d，J＝8.8Hz，1H)，7.78(dd，J＝2和8.8Hz，1H)，8.12(d，J＝2Hz，1H)。
于室温下，将3-(4-碘代-2-硝基)苯氧基-2，2-二甲基丙酸甲酯(2.8g，7.38mmol)在THF(15ml)和0.25N氢氧化钠(60ml，15mol)中的混合物搅拌18小时。将该混合物倾入冰-1N HCl(20ml)中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体经从氯仿-乙醇-IPE中重结晶，得到3-(4-碘代-2-硝基)苯氧基-2，2-二甲基丙酸(2.0g，74％)，为结晶物质。Mp 165-182℃；IR(KBr)n 1716，1525，1344cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1.38(s，6H)，4.10(s，2H)，6.86(d，J＝8.8Hz，1H)，7.79(dd，J＝2.2和8.8Hz，1H)，8.12(d，J＝2Hz，1H)；MS(FAB)m/z 366(M++1)；C29H33N3O6的分析计算值C，36.18；H，3.18；N，3.84。实测值C，36.85；H，3.35；N，3.79。
于室温下，向3-(4-碘代-2-硝基)苯氧基-2，2-二甲基丙酸(1.93g，5.29mmol)和三乙胺(590mg，5.81mmol)在叔丁醇(15ml)和甲苯(15ml)中的搅拌混合物中加入二苯基磷酰基叠氮化物(1.53g，5.55mmol)的甲苯(3ml)溶液。然后将得到的混合物回流加热20小时。冷却后，将冰和1N HCl(5ml)加入该混合物中并用甲苯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶(50ml)层析，用甲苯∶乙酸乙酯(10∶1，v/v)作为洗脱剂，得到3-硝基-4-(2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-1-丙氧基)碘代苯(1.91g，83％)，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.38(s，9H)，1.39(s，6H)，4.19(s，2H)，4.67(br s，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，1H)，7.77(dd，J＝2.0和8.8Hz，1H)，8.12(d，J＝2.0Hz，1H)。
于70℃，CO(气体)流下，将3-硝基-4-(2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-1-丙氧基)碘代苯(1.9g，4.36mmol)、Pd(OAc)2和1，3-双(二苯基膦基)丙烷(dppp)(90mg，0.22mmol)在三乙胺-甲醇-DMSO(1∶2∶5，v/v，48ml)中的混合物搅拌6小时。冷却后，将该混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶(50ml)层析，用甲苯∶乙酸乙酯(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-(2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-1-丙氧基)-3-硝基苯甲酸甲酯(820mg，51％)，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.38(s，9H)，1.42(s，6H)，3.93(s，3H)，4.29(s，2H)，4.67(br s，1H)，7.15(d，J＝8.8Hz，1H)，8.18(dd，J＝1.7和8.8Hz，1H)，8.52(d，J＝1.7Hz，1H)。
于室温下，将4-(2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基-1-丙氧基)-3-硝基苯甲酸甲酯(350mg，0.95mmol)和5％Pd-C(70mg)在乙醇(30ml)中的搅拌混合物于常压氢气下氢化20小时。抽吸除去不溶性Pd-催化剂，用乙醇洗涤。蒸发滤液得到4-(2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基)-1-丙氧基-3-氨基苯甲酸甲酯，为胶状物，无需进一步纯化而用于随后的反应。1H-NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)，1.43(s，6H)，3.86(s，3H)，4.07(s，2H)，4.67(br s，1H)，6.80(d，J＝8.5Hz，1H)，7.39(dd，J＝2.2Hz，1H)，7.44(dd，J＝2.2和8.5Hz，1H)。
于0-5℃，向以上4-(2-叔丁氧基羰基氨基-2-甲基)-1-丙氧基-3-氨基苯甲酸甲酯和三乙胺(0.20ml，1.43mmol)在二氯甲烷(10ml)中的搅拌混合物中加入三氟乙酸酐(0.182ml，1.28mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液。于室温下将得到的混合物搅拌1小时。将冰-饱和碳酸氢钠加入到该混合物中，用二氯甲烷提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。使残留物溶于二氯甲烷(5ml)中，加入苯甲醚(0.105ml，0.95mmol)和TFA(2ml)。将得到的混合物于室温下搅拌18小时。真空蒸发该混合物。用二氯甲烷稀释残留物，通过加入饱和碳酸氢钠使呈碱性。经硫酸钠干燥分离的二氯甲烷层并蒸发。残留物经硅胶(50ml)层析，用氯仿-乙醇(99∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-(2-氨基-2-甲基-1-丙氧基)-3-三氟乙酰氨基苯甲酸甲酯(631mg，三步63％)，为胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.29(s，9H，t-Bu)，3.86(s，2H，CH2)，3.91(s，3H)，6.99(d，J＝8.5Hz，1H)，7.91(dd，J＝2.0和8.5Hz，1H)，8.83(d，J＝8.5Hz，1H)。
于室温下，向4-(2-氨基-2-甲基)-1-丙氧基-3-三氟乙酰氨基苯甲酸甲酯(200mg，0.598mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(210mg，0.598mmol)、4-DMAP(90mg，0.72mmol)在DMF(7ml)中的搅拌混合物中加入EDC·HCl(160mg，0.81mmol)。将得到的混合物于室温下搅拌20小时。将该混合物倾入冰-水中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体经硅胶柱层析纯化，用氯仿∶乙醇(98∶2，v/v)作为洗脱剂，得到4-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-2-甲基-1-丙氧基]-3-三氟乙酰氨基苯甲酸甲酯(580mg，q.y.)，为结晶物质。1H-NMR(CDCl3)δ1.42(s，6H)，3.42(s，2H)，3.69(s，3H)，3.89(s，3H)，4.23(s，2H)，5.33(br s，1H)，6.66(s，1H)，6.71(m，1H)，6.92(d，J＝8.5Hz，1H)，7.02(m，1H)，7.09(m，2H)，7.29(m，1H)，7.37(d，J＝8.0Hz，1H)，7.87(dd，J＝2和8.5Hz，1H)，7.97(d，J＝8.0Hz，1H)，8.19(d，J＝8.2Hz，1H)，8.59(br s，1H)，8.74(d，J＝2.0Hz，1H)。
于室温下，向4-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]-2-甲基-1-丙氧基]-3-三氟乙酰氨基苯甲酸甲酯(320mg，0.492mmol)的THF(2ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(6ml，1.5mmol)。将得到的混合物搅拌20小时。将该混合物倾入冰-1N HCl(2ml)中。收集固体，用水洗涤并风干。粗品固体从氯仿-乙醇-乙醚中重结晶，得到301(240mg，89％)，为细的针状物。MW 541.00 IR(KBr)n 3338，3296，1691，1641cm-1；1H-NMR(CDCl3)δ1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(s，6H)，3.35(s，2H)，3.77(s，3H)，4.05(s，2H)，4.96(br s，1H)，6.75(br d，J＝8.3Hz，1H)，6.78(d，J＝8.3Hz，1H)，6.87(d，J＝1.7Hz，1H)，7.01(m，1H)，7.15(dd，J＝2和8.5Hz，1H)，7.24(d，J＝2Hz，1H)，7.27(dt，J＝2.0和8.5Hz，1H)，7.43(dd，J＝2和8.0Hz，1H)，7.78(br s，1H)，7.90(d，J＝8.0Hz，1H)，8.08(dd，J＝2和8.3Hz，1H)，8.85(s，1H)，8.89(s，1H)，12.23(br s，1H)；MS(FAB)m/z 541(M++1)；C27H29ClN4O6的分析计算值C，58.00；H，5.59；N，10.02。实测值C，57.97；H，5.39；N，10.01。实施例2512-乙酰氨基-4-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基氨基苯甲酸
于0℃，向2-乙酰氨基-4-硝基苯甲酸(1.28g，5.71mmol)的苯-甲醇(4∶1，v/v，25ml)的搅拌溶液中加入三甲基甲硅烷基重氮甲烷(2.0M的正己烷溶液，4.28ml，8.56mmol)。于室温下继续搅拌18小时。将反应物倾入己烷中，过滤收集产生的沉淀，得到2-乙酰氨基-4-硝基苯甲酸甲酯(1.32g，97％)，为白色固体；mp无数据；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ2.30(s，3H)，4.00(s，3H)，7.88(m，1H)，8.18(dd，J＝2.0Hz，8.8Hz，1H)，9.60(t，J＝2.2Hz，1H)，11.10(s，1H)；MS(ESI)m/z 238(M+)。
于室温下，向2-乙酰氨基-4-硝基苯甲酸甲酯(1.31g，5.50mmol)的甲醇(30ml)溶液中加入负载于碳上的5％Pd(195mg)，于室温、氢气(3atm)下继续搅拌18小时。滤除催化剂，蒸发该混合物。使所得粗品固体从氯仿-甲醇-己烷中重结晶，得到2-乙酰氨基-4-氨基苯甲酸甲酯(1.03g，90％)，为白色固体。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ2.23(s，3H)，3.82(s，3H)，4.20(s，2H)，6.30(dd，J＝2.5Hz，8.8Hz，1H)，7.80(d，J＝8.8Hz，1H)，8.06(s，1H)，11.26(s，1H)；MS(FAB)m/z 208(M+)。
于0℃，向2-乙酰氨基-4-氨基苯甲酸甲酯(300mg，1.44mmol)和N-叔丁氧基羰基-N-甲基甘氨醛(499mg，2.88mmol)的1，2-二氯乙烷(30ml)的冷却溶液中加入NaBH(OAc)3(964mg，4.32mmol)，于0℃继续搅拌64小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用氯仿(50ml×3)提取，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，己烷-乙酸乙酯从9∶1至2∶1的线性梯度液)，得到2-乙酰氨基-4-[2-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基)乙基氨基]苯甲酸甲酯(451mg，86％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.48(s，9H)，2.22(s，3H)，2.90(s，3H)，3.32(m，2H)，3.50(m，2H)，3.80(s，3H)，6.20(dd，J＝2.2Hz，8.8Hz，1H)，7.80(m，1H)，7.95(m，1H)，11.30(brs，1H)；MS(FAB)m/z 366(M++1)。
向2-乙酰氨基-4-[2-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基)乙基氨基]苯甲酸甲酯(450mg，1.23mmol)的二氯甲烷(5ml)的搅拌溶液中加入TFA(5ml)，于室温下继续搅拌18小时。真空除去溶剂后，使残留物溶于氯仿(200ml)中，用盐水、饱和碳酸氢钠洗涤，经硫酸镁干燥。除去溶剂，得到2-乙酰氨基-4-[2-(N-甲基氨基)乙基氨基]苯甲酸甲酯(298mg，88％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.21(s，3H)，2.46(s，3H)，2.88(m，2H)，3.31(m，2H)，3.83(s，3H)，4.85(br，1H)，6.24(dd，J＝2.5Hz，8.8Hz，1H)，7.80(d，J＝8.8Hz，1H)，7.99(d，J＝2.5Hz，1H)；MS(FAB)，m/z 266(M++1)。
将2-乙酰基氨基-4-[2-(N-甲基氨基)乙基氨基]苯甲酸甲酯(145mg，0.55mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(172mg，0.55mmol)、EDC·HCl(158mg，0.83mmol)、HOBt(141mg，1.05mmol)和DMAP(13mg，0.11mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，氯仿-甲醇从100∶0至70∶30的线性梯度液)，得到2-乙酰基氨基-4-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基氨基苯甲酸甲酯(309mg，100％)，为无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.22(s，3H)，2.30(s，3H)，3.02(s，3H)，3.35(m，2H)，3.58(s，3H)，3.50-3.74(m，4H)，3.85(s，3H)，6.20(m，1H)，6.58(s，1H)，6.65-6.75(m，3H)，7.13(m，2H)，7.40-7.50(m，2H)，7.75(m，2H)，7.90(m，1H)，8.00(m，1H)，11.32(s，1H)；MS(FAB)m/z 562(M++1)。
于室温下，向2-乙酰基氨基-4-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基氨基苯甲酸甲酯(309mg，0.55mmol)的THF-甲醇(1∶1，v/v，9ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(4.4ml，1.1mmol)并加热至回流。在回流下继续搅拌18小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化至pH 5.0。得到的沉淀用己烷-乙醚重结晶，得到302(175mg，58％)，为浅红色粉末。MW 547.60 1H-NMR(CD3OD)δ2.16(d，J＝4.8Hz，3H)，2.28(d，J＝4.2Hz，3H)，2.98和3.10(2s，共3H)，3.35(m，2H)，3.68(m，4H)，3.81和3.84(2s，共3H)，6.30(m，1H)，6.60-6.82(m，2H)，7.00(m，1H)，7.15(m，2H)，7.53(m，1H)，7.77-7.96(m，3H)；MS(FAB)m/z 548(M++1)；C29H33N5O6·0.5H2O的分析计算值C，62.58；H，6.61；N，12.58。实测值C，62.55；H，6.31；N，12.15。实施例2522-乙酰基氨基-4-[2-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基氨基苯甲酸
将2-乙酰基氨基-4-(2-N-甲基氨基-1-乙基氨基)苯甲酸甲酯(145mg，0.55mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酸(209mg，0.55mmol)、EDC·HCl(158mg，0.83mmol)、HOBt(141mg，1.05mmol)和DMAP(13mg，0.11mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，氯仿-甲醇从100∶0至70∶30的线性梯度液)，得到2-乙酰基氨基-4-[2-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基氨基苯甲酸甲酯(294mg，85％)，为无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.21(s，3H)，3.05(s，3H)，3.40(m，2H)，3.65-3.70(m，4H)，3.78(s，3H)，3.86(s，3H)，6.21(m，1H)，6.79(m，2H)，6.93(m，1H)，7.10(d，J＝10.3Hz，1H)，7.30(m，1H)，7.42(m，1H)，7.61(m，1H)，7.78-7.85(m，2H)，7.93(m，2H)，8.13(m，1H)；MS(FAB)m/z 627(M+)。
于室温下，向2-乙酰基氨基-4-[3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基乙酰氨基]-2-N-甲基氨基-1-乙基氨基苯甲酸甲酯(294mg，0.47mmol)的THF-甲醇(1∶1，v/v，8ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.8ml，0.94mmol)，并加热至回流。在回流下继续搅拌18小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化至pH 5.0。得到的沉淀用己烷-乙醚重结晶，得到303，为白色粉末(210mg，73％)。MW 612.47 mp155-160℃；1H-NMR(CD3OD)δ22.18(d，J＝5.5Hz，3H)，3.00和3.12(2s，共3H)，3.39(m，1H)，3.60(m.，4H)，3.70(s，1H)，3.85和3.86(2s，共3H)，6.31(m，1H)，6.68(m，1H)，6.78(m，1H)，6.78和6.85(2m，共1H)，6.97(m，1H)，7.30(m，1H)，7.56(m，1H)，7.80-7.95(m，4H)；MS(ESI)m/z613(M+)；C28H31Br1N5O6·0.75H2O的分析计算值C，53.64；H，5.22；N，11.17。实测值C，53.89；H，5.23；N，10.69。实施例2534-[2-N-[[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸
于室温下，向4-[2-(甲磺酰氧基)乙氧基]苯甲酸甲酯(2.74g，10mmol)的MeCN(50ml)的溶液中加入苯胺(9.1ml，100mmol)。回流下，将反应物搅拌64小时。将该混合物倾入水(200ml)中，用乙酸乙酯(100ml×2)提取，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后，通过于80℃与甲苯(10ml×3)共蒸发，真空除去未反应的苯胺。残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，f50mm×150mm，氯仿)，得到4-[2-(N-苯基氨基)乙氧基]苯甲酸甲酯(2.23g，82％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.56(t，J＝5.1Hz，2H)，3.90(s，3H)，4.21(t，J＝5.1Hz，2H)，6.68(dd，J＝1.0Hz，8.6Hz，2H)，6.75(t，J＝7.3Hz，1H)，7.20(AB型d，J＝7.3Hz，2H)，8.00(d，J＝9.1Hz，2H)；MS(ESI)m/z 272(M++1)。
将4-[2-(N-苯基氨基)乙氧基]苯甲酸甲酯(136mg，0.5mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸(167mg，0.5mmol)和PyBOP(781mg，0.75mmol)、i-PrNEt2(261ml，0.96mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯(100ml)稀释该混合物，用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥。使残留物与甲苯(10ml×3)共蒸发以除去DMF。残留物经TLC层析(MERCK，硅胶60，2mm，2块板，氯仿-甲醇，20∶1)，得到4-[2-N-[[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(129mg，44％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ3.42(s，1H)，3.69(d，J＝8.3Hz，1H)，3.74(s，3H)，3.87(s，3H)，4.10(m，2H)，4.23(m，2H)，6.48-7.44(m，13H)，7.93(d，J＝9.3Hz，2H)，8.18(dd，J＝1.5Hz，8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z 588(M+)。
于室温下，向4-[2-N-[[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(124mg，0.19mmol)的THF-甲醇(6∶1，v/v，3ml)的溶液中加入0.5N氢氧化钠(2ml，1mmol)，并在一密封瓶中加热至回流。在回流下继续搅拌15小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化，用氯仿-甲醇(2∶1，20ml×3)提取，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，使残留物从氯仿-己烷-乙醚中结晶，得到304(77mg，64％)，为白色粉末。MW 574.02 1H-NMR(CD3OD)δ3.45(s，2H)，3.79(s，3H)，4.12(m，2H)，4.22(m，2H)，6.48(dd，J＝2.0Hz，8.3Hz，1H)，6.61(d，J＝2.0Hz，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，7.00(m，1H)，7.22(m，3H)，7.36(m，1H)，7.43(m，3H)，7.90(d，J＝8.3Hz，1H)，7.95(d，J＝8.8Hz，2H)，8.02(dd，J＝1.5Hz，8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z 574(M+)；C31H28ClN3O6·0.5H2O的分析计算值C，63.86；H，5.01；N，7.21。实测值C，63.67；H，4.91；N，6.99。实施例254(S)-4-[2-N-[[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-(2-氨基苄基)乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸苄酯(1.50g，5.26mmol)和2-硝基苯甲醛(0.87g，5.76mmol)的MeOH-AcOH(16ml，15∶1，v/v)的冷却(0℃)溶液中加入NaBH3CN(1.65g，26.3mmol)并于室温下将反应混合物搅拌过夜。经饱和碳酸氢钠猝灭该混合物。用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到(S)-4-[2-(2-硝基苄基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(931mg，42％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.21(d，J＝6.4Hz，3H)，3.13-3.18(m，1H)，3.88-3.97(m，2H)，4.06-4.20(m，2H)，5.34(s，2H)，6.89-6.94(m，2H)，7.29-7.65(m，8H)，7.94-8.03(m，3H)；MS(FAB)m/z 421(M++1)。
于室温下，将3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸五氟苯酯(460mg，0.96mmol)、(S)-4-[2-(2-硝基苄基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(403mg，0.96mmol)和三乙胺(200ml，1.43mmol)在DMF(8ml)中的混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用1％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到(S)-4-[2-N-[[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-(2-硝基苄基)乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(504mg，73％)，为棕色无定形固体；MS(FAB)m/z 717(M++1)。
将(S)-4-[2-N-[[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-(2-硝基苄基)乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(504mg，0.70mmol)的MeOH-THF(11ml，10∶1，v/v)的搅拌溶液用5％Pd-C(100mg，20wt％)于3个大气压下氢化过夜。过滤该混合物以除去催化剂，蒸发滤液。残留物经制备性薄层层析纯化，用5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到305(115mg，27％)，为白色粉末。MW 596.67 MS(FAB)，m/z 597(M++1)。实施例255(S)-4-[2-N-[[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-(2-硝基苄基)乙酰氨基]-1-丙氧基]苯甲酸
向(S)-4-(2-氨基-1-丙氧基)苯甲酸苄酯(1.50g，5.26mmol)和2-硝基苯甲醛(0.87g，5.76mmol)的MeOH-AcOH(16ml，15∶1，v/v)的冷却(0℃)溶液中加入NaBH3CN(1.65g，26.3mmol)，于室温下将反应混合物搅拌过夜。经饱和碳酸氢钠猝灭该混合物。用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到(S)-4-[2-(2-硝基苄基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(931mg，42％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.21(d，J＝6.4Hz，3H)，3.13-3.18(m，1H)，3.88-3.97(m，2H)，4.06-4.20(m，2H)，5.34(s，2H)，6.89-6.94(m，2H)，7.29-7.65(m，8H)，7.94-8.03(m，3H)；FAB-MS m/z 421(M++1)。
于室温下，将4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(476mg，1.26mmol)、(S)-4-[2-(2-硝基苄基氨基)-1-丙氧基]苯甲酸苄酯(528mg，1.26mmol)、EDC·HCl(361mg，1.88mmol)、HOBt(255mg，1.89mmol)和DMAP(30mg，0.25mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。该反应不完全，所以于60℃搅拌该反应混合物1天。用乙酸乙酯稀释该混合物，用0.5N HCl、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析纯化，用氯仿至2％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物，为粗品油。向该粗产物的THF-MeOH(10ml，1∶1，v/v)的搅拌溶液中加入0.5N氢氧化钠(10ml)，将该反应混合物在回流下加热3小时。将混合物倾入冰-水中，用1N HCl将碱性水层酸化(pH4.3)。收集产生的沉淀，粗品固体经制备性薄层层析纯化，用5％甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到306(162mg，两步，19％)，为白色无定形固体。MW 691.53MS(FAB)m/z 692(M++1)；C33H31BrN4O8·7/4H2O的分析计算值C，54.82；H，4.81；N，7.75。实测值C，54.80；H，4.61；N，7.24。实施例2564-[2-N-环丙基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
将4-(2-环丙基氨基乙氧基)苯甲酸甲酯(290mg，1.23mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(412mg，1.23mmol)、EDC·HCl(354mg，1.85mmol)、HOBt(催化量)和DMAP(催化量)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。使该混合物分配于乙酸乙酯(300ml)和水(100ml)之间。分离有机相，用盐水(2×100ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[2-N-环丙基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(506mg，75％)，为黄色粘性的油。1H-NMR(CDCl3)δ0.90-0.97(m，4H)，2.75(m，1H)，3.61(s，3H)，3.79(t，J＝5.4Hz，2H)，3.87(s，3H)，3.88(s，2H)，4.16(t，J＝5.4Hz，2H)，6.76-6.80(m，4H)，6.95(dt，J＝7.8，1.5Hz，1H)，7.21-7.31(m，2H)，7.53(s，1H)，7.56(s，1H)，7.93(d，J＝8.3Hz，3H)，8.19(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)。
向4-[2-N-环丙基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(506mg，0.917mmol)的THF(7ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(7.3ml，1.83mmol)。搅拌过夜后，将混合物倾入1NHCl(50ml)中，用氯仿-甲醇(4∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1至10∶1)作为洗脱剂，得到307(403mg，82％)，为无色无定形固体。MW 537.991H-NMR(DMSO)δ0.86-0.91(m，4H)，2.75(m，1H)，3.69(t，J＝5.5Hz，2H)，3.81(s，3H)，3.84(s，2H)，4.16(t，J＝5.5Hz，2H)，6.76(d，J＝8.3Hz，1H)，6.88(s，1H)，6.97-7.04(m，3H)，7.28(t，J＝7.8Hz，1H)，7.44(d，J＝7.8Hz，1H)，7.88(d，J＝8.8Hz，2H)，7.96(d，J＝8.1Hz，1H)，8.10(d，J＝8.3Hz，1H)，8.89(s，1H)，8.93(s，1H)，12.65(s，br s)；MS(FAB)m/z 538(M++1)；C28H28ClN3O6的分析计算值C，62.51；H，5.25；N，7.81。实测值C，61.85；H，5.42；N，7.41。实施例2574-[2-N-环己基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
于室温下，向4-[(2-甲磺酰氧基)-1-乙氧基]苯甲酸甲酯(2.74g，10mmol)的MeCN(50ml)的溶液中加入环己胺(5.72ml，50mmol)。回流下，将反应物搅拌18小时。将该混合物倾入水(200ml)中，用乙酸乙酯(100ml×2)提取，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，f50mm×150mm，氯仿-乙酸乙酯从10∶0至1∶1的线性梯度液)，得到4-(2-N-环己基氨基)乙氧基苯甲酸甲酯(2.43g，88％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.10(m，2H)，1.25(m，2H)，1.60(br，2H)，1.73(m，2H)，1.90(br，2H)，2.49(m，1H)，3.02(t，J＝5.2Hz，2H)，3.88(s，3H)，4.12(t，J＝5.2Hz，2H)，6.90(d，J＝6.90Hz，2H)，7.99(d，J＝7.99Hz，2H)；MS(ESI)m/z 278(M++1)。
将4-(2-N-环己基氨基)乙氧基苯甲酸甲酯(139mg，0.5mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(157mg，0.5mmol)、EDC·HCl(144mg，0.75mmol)、HOBt(128mg，0.95mmol)和DMAP(12mg，0.1mmol)在DMF(2.5ml)中的混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯(200ml)稀释该混合物，用1N HCl和盐水洗涤，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，氯仿-乙酸乙酯从10∶0至1∶4的线性梯度液)，得到4-[2-N-环己基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(247mg，86％)，为无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.08-1.80(m，10H)，2.30(s，3H)，3.60-3.79(m，8H)，3.88(s，3H)，4.16(m，2H)，6.30(s，1H)，6.70-6.83(m，2H)，6.88(d，2H，J＝9.0Hz)，7.12(m，2H)，7.23(m，1H)，7.60(d，1H，J＝8.3Hz)，7.92(d，2H，J＝9.0Hz)，8.10(d，1H，J＝8.0Hz)；MS(ESI)m/z 574(M++1)。
于室温下，向4-[2-N-环己基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(247mg，0.43mmol)的THF-甲醇(6∶1，v/v，7ml)的溶液中加入0.5N氢氧化钠(3.4ml，0.84mmol)，并在一密封瓶中加热至回流。在回流下继续搅拌18小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化，用氯仿-甲醇(2∶1，20ml×3)提取，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，使残留物从氯仿-己烷-乙醚中结晶，得到308(196mg，81％)，为白色粉末。MW 559.621H-NMR(CD3OD)δ0.90-1.82(m，10H)，2.29(s，3H)，3.62(m，2H)，3.78(s，3H)，3.80(m，3H)，4.12(m，2H)，6.82(m，2H)，6.96(m，3H)，7.16(m，2H)，7.58(d，J＝7.7Hz，1H)，7.92(m，3H)；MS(ESI)m/z 560(M++1)；C32H37N3O6·0.5H2O的分析计算值C，67.59；H，6.74；N，7.39。实测值C，67.83；H，6.80；N，7.13。实施例2584-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-炔丙基乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
于室温下，向44(2-甲磺酰氧基)-1-乙氧基]苯甲酸甲酯(2.74g，10mmol)的MeCN(50ml)的溶液中加入炔丙基胺(3.43ml，50mmol)。回流下，将反应物搅拌18小时。将该混合物倾入水(200ml)中，用乙酸乙酯(100ml×2)提取，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，f50mm×150mm，氯仿-乙酸乙酯从10∶0至9∶1的线性梯度液)，得到4-(2-N-炔丙基氨基)乙氧基苯甲酸甲酯(2.33g，100％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.28(d，J＝2.4Hz，1H)，3.11(t，J＝5.1Hz，2H)，3.52(d，J＝2.4Hz，2H)，3.88(s，3H)，4.15(t，J＝5.1Hz，2H)，6.90(d，J＝8.8Hz，2H)，7.98(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(ESI)m/z 234(M++1)。
将4-(2-N-炔丙基氨基)乙氧基苯甲酸甲酯(117mg，0.5mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸(1 67mg，0.5mmol)、EDC·HCl(144mg，0.75mmol)、HOBt(128mg，0.96mmol)和DMAP(12mg，0.1mmol)在DMF(10ml)中的混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯(100ml)稀释该混合物，用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥。使残留物与甲苯(10ml×3)共蒸发以除去DMF。残留物经TLC层析(MERCK，硅胶60，2mm，2块板，氯仿-甲醇，20∶1)，得到4-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-炔丙基乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(244mg，89％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.20和2.32(2m，共1H)，3.72(s，2H)，3.83(m，5H)，3.88(s，3H)，4.09-4.35(m，4H)，6.77-6.86(m，4H)，6.99(m，1H)，7.11(m，2H)，7.24(m，1H)，7.34(d，J＝7.9Hz，1H)，7.96(m，3H)，8.18(dd，J＝1.5Hz，8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z 550(M+)。
于室温下，向4-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-炔丙基乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(240mg，0.44mmol)的THF-甲醇-水(2∶2∶1，v/v，10ml)的溶液中加入氢氧化钠(500mg，12.5mmol)。于室温下继续搅拌2小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化，用氯仿-甲醇(2∶1，20ml×3)提取，经硫酸镁干燥。残留物经TLC层析(Whatman，1mm，3块板，氯仿-甲醇，92∶8)，得到309(202mg，86％)，为白色固体。MW 535.98 1H-MR(CD3OD)δ2.60和2.81(2d，J＝2.5Hz，共1H)，3.79-3.94(m，4H)，3.85(s，3H)，4.15(m，1H)，4.24(m，1H)，4.32(m，2H)，6.80(d，J＝8.3Hz，1H)，6.85(d，J＝4.3Hz，1H)，6.94(m，2H)，7.02(m，1H)，7.25(m，1H)，7.38(m，1H)，7.87-8.02(m，4H)；MS(ESI)m/z 536(M++1)；C28H26ClN3O6·2.25H2O的分析计算值C，58.33；H，5.33；N，7.29。实测值C，58.23；H，4.77；N，6.91。实施例259和2604-[2-N-烯丙基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
将4-(2-N-烯丙基氨基)乙氧基苯甲酸甲酯(118mg，0.5mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]苯基乙酸(167mg，0.5mmol)、EDC·HCl(144g，0.75mmol)、HOBt(128mg，0.95mmol)和DMAP(12mg，0.1mmol)在DMF(2.5ml)中的混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，氯仿-乙酸乙酯从100∶0至85∶15的线性梯度液)，得到4-[2-N-烯丙基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(253mg，92％)，为无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ3.65-3.85(m，4H)，3.73(s，3H)，3.88(s，3H)，5.08(m，2H)，4.22(m，2H)，5.10-5.24(m，2H)，5.76(m，1H)，6.77(m，2H)，6.85(m，2H)，6.99(m，1H)，7.06(m，2H)，7.26(m，1H)，7.34(d，1H，J＝8.1Hz)，7.94(d，2H，J＝8.8Hz)，7.98(m，1H)，8.18(d，1H，J＝6.9Hz)；MS(FAB)m/z 552(M+)。
于室温下，向4-[2-N-烯丙基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(250mg，0.45mmol)的THF-甲醇(1∶1，v/v，8ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.6ml，0.91mmol)并加热至回流。在回流下继续搅拌18小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化。过滤收集得到的沉淀。用己烷-乙醚使沉淀物重结晶，得到310，为白色粉末(195mg，80％)。MW 537.991H-NMR(CD3OD)δ3.61(s，1H)，3.76(s，3H)，3.82(m，1H)，3.85(s，1H)，3.88(m，1H)，4.11-4.25(m，4H)，5.12-5.25(m，2H)，5.81(m，1H)，6.78(d，1H，J＝8.3Hz)，6.82(m，1H)，6.92(m，2H)，7.01(m，1H)，7.26(m，1H)，7.37(m，1H)，7.96(m，3H)，8.02(m，1H)；MS(FAB)m/z 537(M+)；C28H28ClN3O6·1/4H2O的分析计算值C，61.99；H，5.30；N，7.75。实测值C，62.00；H，5.56；N，7.76。实施例2614-[2-N-烯丙基-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
将4-(2-N-烯丙基氨基)乙氧基苯甲酸甲酯(118mg，0.5mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(1 90mg，0.5mmol)、EDC·HCl(144mg，0.75mmol)、HOBt(128mg，0.95mmol)和DMAP(12mg，0.1mmol)在DMF(2.5ml)中的混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，氯仿-乙酸乙酯从100∶0至70∶30的线性梯度液)，得到4-[2-N-烯丙基-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(251mg，84％)，为无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ3.65-3.85(m，4H)，3.73(s，3H)，3.88(s，3H)，4.08(m，2H)，4.22(m，2H)，5.10-5.25(m，2H)，5.78(m，1H)，6.79(m，1H)，6.85(m，3H)，6.93(m，1H)，7.02(m，2H)，7.30(m，1H)，7.51(m，1H)，7.94(d，2H，J＝8.8Hz)，7.97(m，1H)，8.14(m，1H)；MS(FAB)m/z 596 M+)。
于室温下，向4-[2-N-烯丙基-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(251mg，0.42mmol)的THF-甲醇(1∶1，v/v，8ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.4ml，0.84mmol)并加热至回流。在回流下继续搅拌18小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化。过滤收集得到的沉淀。用己烷-乙醚使沉淀物重结晶，得到311(192mg，78％)，为白色粉末。MW 582.441H-NMR(CD3OD)δ3.61(s，3H)，3.77(s，3H)，3.80(m，1H)，3.85(s，1H)，3.88(s，1H)，4.12-4.25(m，4H)，5.12-5.23(m，2H)，5.81(m，1H)，6.76(m，1H)，6.82(m，1H)，6.93(m，3H)，7.29(m，1H)，7.56(m，1H)，7.94(m，4H)；MS(FAB)m/z 582(M+)；C28H28BrN3O6的分析计算值C，57.74；H，4.85；N，7.21。实测值C，57.40；H，5.07；N，7.04。对于311的盐酸盐C28H27BrN3O6·0.25H2O的分析计算值C，55.23；H，4.55；N，6.90。实测值C，54.98；H，4.71；N，6.53。实施例2624-[2-N-烯丙基-N-[3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
将4-(2-N-烯丙基氨基-1-乙基)乙氧基苯甲酸甲酯(87mg，0.37mmol)、3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(100mg，0.37mmol)、EDC·HCl(105mg，0.56mmol)、HOBt(95mg，0.70mmol)和DMAP(9mg，0.07mmol)在DMF(7.4ml)中的混合物搅拌18小时。用乙酸乙酯(100ml)稀释该混合物，用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥。使残留物与甲苯(10ml×3)共蒸发以除去DMF。残留物经TLC层析(Whatman，PLK-5F，2块板，氯仿-甲醇，97∶3)，得到4-[2-N-烯丙基-N-[3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(190mg，100％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.05和2.09(2s，共3H)，2.20和2.21(s，共3H)，3.62(s，2H)，3.76(m，2H)，3.90(s，3H)，3.88(m，1H)，4.08(m，2H)，4.11(m，1H)，6.28(m，2H)，5.78(m，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，7.05(m，1H)，7.12(m，1H)，7.21(m，1H)，7.58(m，2H)，7.95(d，J＝8.8Hz，2H)，8.02(m，1H)；MS(FAB)m/z 516(M++1)。
于室温下，向4-[2-N-烯丙基-N-[3-甲基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(217mg，0.43mmol)的THF-甲醇(6∶1，v/v，7ml)的溶液中加入0.5N氢氧化钠(1.9ml，0.86mmol)并加热至回流。在一密封瓶中，在回流下继续搅拌2小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化，用氯仿-甲醇(2∶1，20ml×3)提取，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，使残留物从氯仿-己烷-乙醚中结晶，得到312(84mg，38％)，为白色粉末。MW 501.571H-NMR(CD3OD)δ2.18和2.24(s，共3H)，2.30(d，J＝4.9Hz，3H)，3.70(s，1H)，3.78(m，2H)，3.88(s，1H)，4.12(m，4H)，5.20(m，2H)，5.81(m，1H)，6.92-7.20(m，7H)，7.58(m，2H)，7.96(m，2H)；MS(ESI)m/z 502(M+)；C29H31N3O5的分析计算值C，69.44；H，6.23；N，8.38。实测值C，68.99；H，6.39；N，8.03。实施例2634-[2-N-烯丙基-N-[3-氯代-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
向4-(2-N-烯丙基氨基乙氧基)苯甲酸甲酯(141mg，0.60mmol)和3-氯代-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(191mg，0.60mmol)的DMF(5ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(172.5mg，0.90mmol)、HOBt(154mg，1.14mmol)和DMAP(15mg，0.12mmol)，并于室温下继续搅拌过夜。用乙酸乙酯(50ml)稀释该混合物，用1M HCl(×3)、1M氢氧化钠(×1)和盐水洗涤。经无水硫酸镁干燥该混合物，减压浓缩得到4-[2-N-烯丙基-N-[3-氯代-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(350mg，109％)，为白色粉末。1H-NMR(CDCl3)δ2.35(s，3H)，3.60(s，1H)，3.75(m，2H)，3.90(s，3H)，4.10(m，4H)，4.21(m，1H)，5.20(m，2H)，5.80(m，1H)，6.50(s，1H)，6.85(m，2H)，7.08(m，2H)，7.20(m，4H)，7.50(d，J＝8.1Hz，1H)，7.95(d，J＝8.1Hz，2H)，8.12(d，J＝8.1Hz，1H)；MS(ESI)m/z 536(M++H)。
于室温下，向4-[2-N-烯丙基-N-[3-氯代-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(321mg，0.6mmol)的THF-甲醇-水(2∶2∶1，v/v，30ml)的搅拌溶液中加入氢氧化钠(500mg，12.5mmol)。于室温下继续搅拌18小时。将反应混合物倾入水中，用乙醚洗涤，用1M HCl酸化，用氯仿-甲醇(2∶1，20ml×3)提取，经无水硫酸镁干燥并减压浓缩。用氯仿/正己烷使残留物固化，得到313(283mg，83％)，为白色固体。IR(KBr)3345，1581，1529，1243，1167cm-1；1H-NMR(CD3OD)δ2.30(s，3H)，3.71(s，1H)，3.78(m，1H)，3.82(m，1H)，3.89(s，1H)，4.10(m，1H)，4.19(m，2H)，4.21(t，J＝5.4Hz，1H)，5.20(m，2H)，5.82(m，1H)，6.95(m，2H)，7.03(m，1H)，7.18(m，3H)，7.28(s，1H)，7.60(d，J＝8.1Hz，1H)，7.99(m，3H)；MS(ESI)m/z 522(M++1)；C28H28ClN3O5·1.75H2O的分析计算值C，60.76；H，5.74；N，7.59。实测值C，60.43；H，5.34；N，7.17。实施例2644-[2-N-[2-(4-吗啉基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯
向4-[2-N-(2，3-二羟基-1-丙基)-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(1.83g，3.24mmol)的THF-甲醇-水(1∶1∶1，v/v/v，15ml)的搅拌溶液中加入高碘酸钠(2.08g，9.71mmol)，于室温下搅拌18小时。将饱和硫代硫酸钠(50ml)加入该反应混合物中，搅拌该混合物1小时。用乙酸乙酯(100ml×3)提取该混合物，用盐水洗涤。经硫酸镁干燥。除去溶剂得到标题化合物(1.73g，100％)，为无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ2.32(t，3H，J＝2.8Hz)，3.33-4.30(m，8H)，3.72(s，3H)，3.86(s，3H)，6.20(m，1H)，6.70(m，1H)，6.80(m，4H)，7.06(m，1H)，7.18(m，1H)，7.26(m，1H)，7.49(d，1H，J＝7.4Hz)，7.96(m，2H)，8.10(m，1H)，9.57和9.63(2s，共1H)；MS(FAB)m/z 534(M++1)。
于室温下，向4-[2-N-甲酰基甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(400mg，0.75mmol)的乙醇(7.5ml)的搅拌溶液中加入吗啉(654ml，7.5mmol)和乙酸(429ml，7.5mmol)。于室温下搅拌反应物5分钟，然后冷却至0℃。向该冷却的溶液中加入NaBH3CN(471mg，7.5mmol)，于室温继续搅拌1小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用乙酸乙酯(50ml×3)提取，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，甲苯-丙酮从100∶0至1∶1的线性梯度液)，得到314(346mg，76％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.31(s，3H)，2.46(m，4H)，3.52-3.79(m，12H)，3.70(d，3H，J＝2.7Hz)，4.05和4.22(m，共2H)，6.24和6.29(s，共1H)，6.73(m，2H)，6.85(m，2H)，7.07(s，1H)，7.17(m，1H)，7.25(m，2H)，7.50(t，1H，J＝7.3Hz)，7.96(m，2H)，8.08(m，1H)；MS(FAB)m/z 605(M++1)；C33H40N4O71/2H2O的分析计算值C，64.58；H，6.73；N，9.13。实测值C，64.95；H，6.88；N，8.82。314的盐酸盐C33H41ClN4O7·2.5H2O的分析计算值C，57.76；H，6.76；N，8.16；Cl，5.17。实测值C，58.29；H，6.81；N，7.42；Cl，5.05。实施例2654-[2-N-[2-(4-吗啉基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
于室温下，向4-[2-N-[2-(4-吗啉基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(146mg，0.24mmol)的THF-甲醇(1∶1，v/v，6ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(1.9ml，0.48mmol)并加热至回流。在回流下继续搅拌18小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化。用氯仿-甲醇(3∶1，v/v，30ml×5)提取该混合物。经硫酸镁干燥合并的提取物。除去溶剂后，用乙醚使残留物结晶，得到315(102mg，71％)，为白色粉末。1H-NMR(CD3OD)δ2.28(d，J＝3.0Hz，3H)，2.46(m，1H)，2.40(m，1H)，2.56(m，1H)，2.63(m，1H)，3.62-3.80(m，12H)，3.85(s，3H)，4.12(m，1H)，4.26(m，1H)，6.82(m，2H)，6.96(m，2H)，7.01(m，1H)，7.17(m，2H)，7.58(d，J＝7.8Hz，1H)，7.93(m，3H)；MS(FAB)m/z 591(M+)；C32H38N4O7·1.0H2O的分析计算值C，63.14；H，6.62；N，9.20。实测值C，63.48；H，6.66；N，8.79。实施例2664-[2-N-环丙基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
向4-(2-羟基乙氧基)苯甲酸甲酯(5.00g，25.5mmol)、DMSO(18.1ml，255mmol)、三乙胺(17.7ml，127.5mmol)的二氯甲烷(200ml)的搅拌溶液中加入SO3·Py(12.2g，76.5mmol)。搅拌5小时后，真空浓缩该混合物，用水(100ml)稀释残留物。用乙酸乙酯(2×200ml)提取该混合物。用盐水(100ml)洗涤合并的提取物，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用己烷-乙酸乙酯(4∶1)洗脱，得到4-甲酰基甲氧基苯甲酸甲酯和4-羟基苯甲酸甲酯(2.00g)的4∶1的混合物(2.0g)，为白色固体。1H-NMR(CDCl3)δ3.90(s，3H)，4.64(d，J＝1.0Hz，2H)，6.92(d，J＝9.0Hz，2H)，8.02(d，J＝9.0Hz，2H)，9.86(d，J＝1.0Hz，1H)。
向4-甲酰基甲氧基苯甲酸甲酯和4-羟基苯甲酸甲酯的4∶1的混合物(1.00g)和环丙胺(425ml，6.18mmol)在MeOH-AcOH(10∶1，11ml)中的搅拌溶液中加入NaBH3CN(681mg，10.3mmol)。搅拌过夜后，通过加入饱和碳酸氢钠(50ml)猝灭该混合物。用氯仿(2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)洗脱，得到4-(2-环丙基氨基乙氧基)苯甲酸甲酯(595mg，49％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ0.37-0.49(m，4H)，1.91(m，1H)，2.18-2.23(m，1H)，3.11(t，J＝5.2Hz，2H)，3.88(s，3H)，4.12(t，J＝5.2Hz，2H)，6.92(d，J＝8.8Hz，2H)，7.98(d，J＝8.8Hz，2H)。
将4-(2-环丙基氨基乙氧基)苯甲酸甲酯(290mg，1.23mmol)、3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(387mg，1.23mmol)、EDC·HCl(354mg，1.85mmol)、HOBt(催化量)和DMAP(催化量)在DMF(10ml)中的混合物搅拌过夜。使该混合物分配于乙酸乙酯(300ml)和水(100ml)之间。分离有机相，用盐水(2×100ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(50∶1)作为洗脱剂，得到标题化合物(426mg，65％)，为黄色粘性的油。1H-NMR(CDCl3)δ0.90-0.97(m，4H)，2.28(s，3H)，3.60(s，3H)，3.77(t，J＝5.4Hz，2H)，3.85(s，2H)，3.87(s，3H)，4.15(t，J＝5.4Hz，2H)，6.60-6.81(m，5H)，7.09-7.23(m，4H)，7.57(d，J＝8.3Hz，1H)，7.92-7.95(m，2H)，8.04(d，J＝8.3Hz，1H)。
向4-[2-[N-环丙基-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(426mg，0.801mmol)的THF(7ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠(6.4ml，1.60mmol)。搅拌过夜后，将混合物倾入1NHCl(50ml)中，用氯仿-甲醇(4∶1，2×200ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1至10∶1)作为洗脱剂，得到316(333mg，80％)，为无色无定形固体。1H-NMR(DMSO)δ0.86-0.91(m，4H)，2.25(s，3H)，2.74(m，1H)，3.69(t，J＝5.5Hz，2H)，3.81(s，3H)，3.83(s，2H)，4.15(t，J＝5.5Hz，2H)，6.75(d，J＝8.3Hz，1H)，6.87(s，1H)，6.92-6.99(m，3H)，7.11-7.17(m，2H)，7.81(d，J＝8.1Hz，1H)，7.88(d，J＝8.5Hz，2H)，8.01(d，J＝8.1Hz，1H)，8.47(s，1H)，8.55(s，1H)，12.96(s，br s)；MS(FAB)m/z 518(M++1)；C29H31N3O6的分析计算值C，67.30；H，6.04；N，8.12。实测值C，66.71；H，6.26；N，7.82。实施例2674-[2-N-[2-(N’，N’-二甲基氨基)-1-乙基)-N-[-4-[N”-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸
于室温下，向4-[2-N-[2-(N’，N’-二甲基氨基)-1-乙基)-N-[-4-[N”-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(100mg，0.17mmol)的THF-甲醇(1∶1，v/v，3ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(2.0ml，0.5mmol)并加热至回流。在回流下继续搅拌3小时。将反应混合物倾入水中，用1.0N HCl酸化至pH5.0。真空除去有机溶剂后，得到的混合物经HP-20层析(水-甲醇100∶0至0∶100)，得到317(63mg，64％)，为白色粉末。1H-NMR(CD3OD)δ2.41(s，2H)，2.65(s，3H)，2.69(s，3H)，3.02(m，2H)，3.62-3.85(m，4H)，3.84(s，3H)，4.05和4.22(m，共2H)，6.82-6.88(m，4H)，7.02(m，1H)，7.25(m，1H)，7.38(m，1H)，7.92(m，2H)，8.01(m，2H)；MS(FAB)，m/z 569(M+)；C29H33ClN4O6·3.0H2O的分析计算值C，55.90；H，6.31；N，8.99。实测值C，56.40；H，6.50；N，8.08。实施例2684-[2-N-[2-(4-吗啉基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸异丙酯
于室温下，向4-[2-N-[2-(4-吗啉基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸(250mg，0.42mmol)的DMF(2ml)的搅拌溶液中加入异丙基碘(264ml，2.53mmol)和碳酸钾(88mg，0.64mmol)。于50℃搅拌反应物2小时。将该混合物倾入盐水中，用氯仿(50ml×3)提取，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，甲苯-丙酮从100∶0至40∶60的线性梯度液)，得到318(261mg，97％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.35(s，3H)，1.36(s，3H)，2.31(s，3H)，2.45(m，4H)，2.50(m，2H)，3.55-3.78(m，10H)，3.70(s，3H)，4.05和4.20(t，J＝5.2Hz，共2H)，5.22(m，1H)，6.24和6.33(2s，共1H)，6.70-6.83(m，4H)，7.08(s，1H)，7.15(m，1H)，7.22(m，1H)，7.40(t，J＝9.0Hz，1H)，7.93(d，J＝8.8Hz，1H)，7.97(d，J＝8.8Hz，1H)，8.07(t，J＝7.8Hz，1H)；MS(FAB)m/z 633(M++1)；C35H44N4O7·0.75H2O的分析计算值C，65.05；H，7.10；N，8.67。实测值C，65.19；H，7.09；N，8.50。实施例2694-[2-N-[2-(3，3-二氟-1-吡咯烷基)乙基]-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸钠盐
于室温下，向4-[2-N-甲酰基甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(300mg，0.5mmol)的1，2-二氯乙烷(3.6ml)的搅拌溶液中加入3，3-二氟吡咯烷乙酸盐(420mg，2.5mmol)。于室温下搅拌该反应物5分钟，然后冷却至0℃。向该冷却的溶液中加入NaBH(OAc)3(530mg，2.5mmol)，于室温继续搅拌4小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用氯仿(50ml×3)提取，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，氯仿-甲醇从10∶0至97∶3的线性梯度液)，得到4-[2-N-[2-(3，3-二氟-1-吡咯烷基)乙基]-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(345mg，100％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.20-2.80(m，6H)，3.48(m，2H)，3.70-3.80(m，9H)，3.89(s，3H)，4.09(m，1H)，4.21(m，1H)，6.79-6.85(m，4H)，6.93(m，1H)，7.08(m，2H)，7.30(m，1H)，7.50(m，1H)，7.96(m，3H)，8.13(dd，J＝1.5Hz，8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z 689(M+)。
于室温下，向4-[2-N-[2-(3，3-二氟-1-吡咯烷基)乙基]-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(345mg，0.5mmol)的THF-MeOH(1∶1，v/v，8ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(4ml，1.0mmol)并加热至回流。在回流下继续搅拌6小时。除去溶剂，残留物经HP-20层析(水-甲醇，0∶100至100∶0)，得到319(306mg，91％)，为淡红色粉末。1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.20-2.90(m，6H)，3.60(m，2H)，3.70-3.92(m，9H)，4.10(m，1H)，4.22(m，1H)，6.84(m，4H)，6.96(m，1H)，7.30(m，1H)，7.55(m，1H)，7.93(m，3H)，7.97(m，1H)；MS(ESI)m/z 676(M++1)；C31H32BrF2N4O6·2.5H2O的分析计算值C，52.85；H，5.29；N，7.95。实测值C，52.67；H，5.20；N，8.11。实施例2704-[2-N-(N’-甲氧基-N’-甲基氨基)乙基-N-[3-甲氧基-4-[N”-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸钠盐
于室温下，向4-[2-N-甲酰基甲基-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(350mg，0.66mmol)的乙醇(13ml)的搅拌溶液中加入N-甲氧基-N-甲胺盐酸盐(637mg，6.6mmol)。于室温下声处理该反应物5分钟，然后冷却至0℃。向该冷却的溶液中加入NaBH3CN(105mg，1.65mmol)，于室温继续搅拌18小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用氯仿(50ml×3)提取，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZENYFLC-5404-FC，甲苯-丙酮从9∶1至2∶3的线性梯度液)，得到标题化合物(344mg，91％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.29(s，3H)，2.52和2.58(s，共3H)，2.79(m，2H)，3.49-3.76(m，9H)，3.88(s，3H)，4.05和4.20(m，共2H)，6.69-6.86(m，5H)，7.10(m，1H)，7.20(m，2H)，7.29(m，1H)，7.44(m，1H)，7.94和7.99(d，J＝8.6Hz，共2H)，8.06(m，1H)；MS(FAB)m/z 579(M++1)。C31H38N4O7·2.5H2O的分析计算值C，59.70；H，6.95；N，8.98。实测值C，59.58；H，6.65；N，8.90。
于室温下，向4-[2-N-(N’-甲氧基-N’-甲基氨基)乙基-N-[3-甲氧基-4-[N”-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(138mg，0.24mmol)的THF-MeOH(1∶1，v/v，4ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(1.9ml，0.48mmol)并加热至回流。在回流下继续搅拌18小时。除去溶剂，残留物经HP-20层析(水-甲醇，100∶0至0∶100)，得到320(140mg，100％)，为白色粉末。1H-NMR(CD3OD)δ2.29(s，3H)，2.54和2.56(2s，共3H)，2.82(m，2H)，3.48(m，2H)，3.65-5.80(m，9H)，4.09和4.21(2m，共2H)，6.80(m，4H)，7.00(t，J＝7.5Hz，1H)，7.18(m，2H)，7.57(d，J＝7.8Hz，1H)，7.88(m，2H)，7.99(m，1H)；MS(FAB)m/z 565(M++1)。C30H35N4O7Na·1.0H2O的分析计算值C，59.59；H，6.17；N，9.27。实测值C，59.10；H，6.28；N，8.86。实施例2714-[2-N-(N’-甲氧基-N’-甲基氨基)乙基-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸
于室温下，向4-[2-N-甲酰基甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(209mg，0.35mmol)的乙醇(7ml)的搅拌溶液中加入N-甲氧基-N-甲胺盐酸盐(341mg，3.5mmol)。于室温下声处理该反应物5分钟，然后冷却至0℃。向该冷却的溶液中加入NaBH(OAc)3(370mg，1.75mmol)，于室温继续搅拌18小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用氯仿(50ml×3)提取，经硫酸镁干燥。除去溶剂后，残留物经TLC层析(Whatman，PLK-5F，2块板，氯仿-甲醇，98∶2)，得到4-[2-N-(N’-甲氧基-N’-甲基氨基)乙基-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(89mg，40％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.52和2.60(2s，3H)，2.80(m，2H)，3.48和3.50(2s，共3H)，3.65(m，2H)，3.72(s，3H)，3.77(m，4H)，3.90(s，3H)，4.08(m，1H)，4.22(m，1H)，6.82(m，5H)，7.12(s，2H)，7.30(m，1H)，7.52(d，J＝8.1Hz，1H)，7.94(m，3H)，8.15(d，J＝8.3Hz，1H)；MS(ESI)m/z 643(M+)。
于室温下，向4-[2-N-(N’-甲氧基-N’-甲基氨基)乙基-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(89mg，0.14mmol)的THF-MeOH(5∶1，v/v，6ml)的溶液中加入0.5N氢氧化钠(1.4ml，0.7mmol)并在一密封瓶中加热至回流。在回流下继续搅拌3小时。将反应物倾入水中，用1N HCl酸化至pH 5，用氯仿-甲醇(2∶1，v/v，30ml×3)提取，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后得到321(53mg，60％)，为白色粉末。1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.62和2.64(2s，共3H)，2.80(m，2H)，3.50(d，J＝7.3Hz，3H)，3.63-3.88(m，6H)，4.12(m，1H)，4.25(m，1H)，6.82-7.00(m，5H)，7.30(m，1H)，7.58(m，1H)，7.95(m，4H)；MS(FAB)，m/z 629(M+)。C29H33BrN4O7·0.25H2O的分析计算值C，54.94；H，5.33；N，8.84。实测值C，55.39；H，5.53；N，8.23。实施例2724-[2-N-(N’，N’-二烯丙基)乙基-N-[3-甲氧基-4-[N”-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸钠盐
于室温下，向4-[2-N-甲酰基甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(400mg，0.75mmol)的乙醇(15ml)的搅拌溶液中加入二烯丙基胺(926ml，7.5mmol)和乙酸(429ml，7.5mmol)。于室温下搅拌该反应物5分钟，然后冷却至0℃。向该冷却的溶液中加入NaBH3CN(118mg，1.9mmol)，于室温继续搅拌1小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用乙酸乙酯(50ml×3)提取，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，甲苯-丙酮从9∶1至1∶1的线性梯度液)，得到4-[2-N-(N’，N’-二烯丙基)乙基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(385mg，84％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.30(s，3H)，2.60(m，2H)，3.09(m，4H)，3.49(m，2H)，3.60(s，2H)，3.70(m，5H)，3.89(s，3H)，4.02和4.19(2m，共2H)，5.01-5.20(m，4H)，4.79(m，2H)，6.30和6.32(2s，共1H)，6.70-6.84(m，5H)，7.08(m，1H)，7.14(m，1H)，7.25(m，1H)，7.60(m，1H)，7.93和7.98(2d，J＝8.8Hz，2H)，8.03和8.06(2d，J＝8.3Hz，1H)；MS(FAB)m/z 615(M++1)。
于室温下，向4-[2-N-(N’，N’-二烯丙基)乙基-N-[3-甲氧基-4-[N”-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯(385mg，0.63mmol)的MeOH(3ml)的搅拌溶液中加入1N HCl(756ml，0.76mmol)。于室温下搅拌该反应物5分钟，然后蒸发得到4-[2-N-(N’，N’-二烯丙基)乙基-N-[3-甲氧基-4-[N”-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸甲酯盐酸盐(385mg，99％)，为无定形泡沫物。C35H43ClN4O6·0.5H2O的分析计算值C，63.67；H，6.72；N，8.49。实测值C，63.67；H，6.69；N，8.43。
于室温下，向4-[2-N-(N’，N’-二烯丙基)乙基-N-[3-甲氧基-4-[N”-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙氧基苯甲酸酯(175mg，0.29mmol)的THF-MeOH(1∶1，v/v，20ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(2.5ml，0.63mmol)并加热至回流。在回流下继续搅拌1小时。除去溶剂，残留物经经HP-20层析(水-甲醇，100∶0至0∶100)，得到322(160mg，94％)，为白色粉末。1H-NMR(CD3OD)δ2.29(s，3H)，2.60(t，J＝6.9Hz，1H)，2.67(t，J＝7.0Hz，1H)，3.10(d，J＝6.6Hz，2H)，3.14(d，J＝6.6Hz，2H)，3.59(m，2H)，3.69-3.80(m，4H)，3.80(s，3H)，4.06(t，J＝5.2Hz，4.21(t，J＝5.1Hz，1H)，5.15(m，4H)，5.80(m，2H)，6.79(m，2H)，6.84(d，J＝8.8Hz，2H)，7.00(t，J＝7.5Hz，1H)，7.14(m，2H)，7.48(m，1H)，7.91(dd，J＝6.1Hz，8.8Hz，2H)，8.00(m，1H)；MS(FAB)，m/z 601(M+)。C34H39N4O6Na·0.5H2O的分析计算值C，64.65；H，6.38；N，8.87。实测值C，64.53；H，6.58；N，8.78。实施例2734-[2-N-(N’，N’-二烯丙基)乙基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸钠盐
于室温下，向4-[2-N-甲酰基甲基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(100mg，0.18mmol)的乙醇(3.6ml)的搅拌溶液中加入二烯丙基胺(223ml，1.81mmol)。于室温下搅拌该反应物5分钟，然后冷却至0℃。向该冷却的溶液中加入AcOH(104ml，1.81mmol)和NaBH3CN(28mg，0.45mmol)，于室温继续搅拌18小时。将该混合物倾入饱和碳酸氢钠中，用氯仿(30ml×3)提取，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。真空除去溶剂后，残留物经硅胶层析(中压层析系统YAMAZEN YFLC-5404-FC，氯仿-甲醇从10∶0至20∶1的线性梯度液)，得到4-[2-N-(N’，N’-二烯丙基)乙基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(96mg，83％)，为白色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ2.60(m，2H)，3.09(d，J＝6.4Hz，1H)，3.11(d，J＝6.4Hz，3H)，3.52(m，2H)，3.61(s，2H)，3.70-3.80(m，5H)，3.86(s，3H)，4.05和4.20(2m，共2H)，5.06-5.21(m，4H)，5.80(m，2H)，6.71-6.85(m，4H)，6.98(m，1H)，7.22(m，1H)，7.32(m，3H)，7.93(d，J＝7.8Hz，2H)，7.98(m，1H)，8.18(dd，J＝1.5Hz，8.2Hz，1H)；MS(ESI)m/z635(M+)。
于室温下，向4-[2-N-(N’，N’-二烯丙基)乙基-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酰氨基]乙氧基]苯甲酸甲酯(96mg，0.15mmol)的THF-MeOH(1∶1，v/v，8ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(3.91ml，0.98mmol)并加热至50℃。在回流下继续搅拌6小时。除去溶剂，残留物经HP-20层析(水-甲醇，0∶100至100∶0)，得到323(88mg，94％)，为白色粉末。1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ2.61(m，2H)，3.10(s，2H)，3.12(s，2H)，3.59(m，2H)，3.70(s，2H)，3.78(m，2H)，3.82(s，3H)，4.10(m，1H)，4.21(m，1H)，5.18(m，4H)，5.81(m，2H)，6.82(m，4H)，7.01(t，J＝7.8Hz，1H)，7.25(m，1H)，7.39(d，J＝7.8Hz，1H)，7.90(m，2H)，8.02(m，2H)；MS(ESI)m/z 621(M+)。C33H36ClN4O6Na·1.25H2O的分析计算值C，59.55；H，5.83；N，8.42。实测值C，59.90；H，5.74；N，7.96。实施例2744-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基-1-哌嗪基乙酸
于0℃，向1-(2-羟乙基)哌嗪(5.21g，40.0mmol)和碳酸钾(8.76g，63.4mmol)的乙腈(100ml)的搅拌悬浮液中加入溴代乙酸乙酯(5.60ml，50.5mmol)。将该反应混合物在回流下加热5小时，用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤。经硫酸钠干燥提取物，浓缩至干，得到4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙酸乙酯(9.65g，100％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.23(t，3H，J＝7.3Hz)，2.51-2.61(m，11H)，3.22(s，2H)，3.61(t，2H，J＝5.4Hz)，4.19(q，2H，J＝7.3Hz)。
于0℃，向2，4-二硝基苯磺酰氯(1.0g，3.75mmol)和吡啶(0.34ml，4.20mmol)的THF(19ml)溶液中滴加甲胺(2.0M THF溶液，2.3ml，4.60mmol)。搅拌该反应混合物1小时，通过加入1N HCl溶液猝灭，用乙酸乙酯提取。用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并浓缩至干。残留物经从乙酸乙酯-乙醚中重结晶，得到甲基2，4-二硝基苯磺酰胺(546mg，56％)，为无色固体。1H-NMR(DMSO)δ2.60(d，3H，J＝4.9Hz)，8.22(d，1H，J＝8.8Hz)，8.31(q，1H，J＝4.9Hz)，8.66(dd，1H，J＝8.8，2.0Hz)，8.90(d，1H，J＝2.0Hz)。
于0℃，向4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙酸乙酯(452mg，2.09mmol)、甲基2，4-二硝基苯磺酰胺(546mg，2.09mmol)和三苯膦(658mg，2.51mmol)的THF溶液中加入DIAD(0.50ml，251mmol)。于室温下搅拌17小时后，将该反应混合物浓缩至干。残留物用乙酸乙酯∶甲醇(10∶1)层析，得到4-[2-[N-(2，4-二硝基苯磺酰基)-N-甲基氨基]乙基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(864mg，90％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，3H，J＝6.8Hz)，2.35-2.63(m，10H)，2.98(s，3H)，3.20(s，2H)，3.41(t，2H，J＝6.8Hz)，4.17(q，2H，J＝6.8Hz)，8.33(d，1H，J＝8.3Hz)，8.46(d，1H，J＝2.0Hz)，8.50(dd，1H，J＝8.3，2.0Hz)。
于室温下，将4-[2-[N-(2，4-二硝基苯磺酰基)-N-甲基氨基]乙基]-1-哌嗪基乙酸乙酯(864mg，1.88mmol)、巯基乙酸(0.17ml，2.44mmol)和三乙胺(0.53ml，3.76mmol)在二氯甲烷(25ml)中的溶液搅拌3小时。得到反应混合物4-(2-甲基氨基乙基)-1-哌嗪基乙酸乙酯(388mg，90％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，3H，J＝6.8Hz)，2.50(s，3H)，2.53-2.60(m，8H)，2.75(t，2H，J＝5.9Hz)，3.20(s，2H)，4.18(q，2H，J＝6.8Hz)。
于室温下，将4-(2-甲基氨基乙基)-1-哌嗪基乙酸乙酯(388mg，1.69mmol)、三乙胺(0.32ml，2.25mmol)和DMAP(46mg，0.38mmol)的DMF(15ml)溶液搅拌15分钟。然后将(532mg，1.69mmol)、HOBt(103mg，0.76mmol)和EDC·HCl(486mg，2.53mmol)加入反应混合物中，将其于室温下搅拌15小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发至干。残留物用氯仿∶甲醇(10∶1，v/v)层析，得到4-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基-1-哌嗪基乙酸乙酯(889mg，DMF的混合物)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.25-1.29(m，3H)，2.29(s，3H)，2.42-2.63(m，10H)，3.20，3.18(各为s，共3H)，3.55，3.40(各为t，共2H，J＝6.8Hz)，3.65，3.69(各为s，共2H)，3.72(s，3H)，4.15-4.21(m，2H)，6.50(m，1H)，6.77-6.81(m，8H)，7.11-7.24(m，3H)，7.53(d，1H，J＝8.3Hz)，8.02(s，1H)，8.06(d，1H，J＝7.8Hz)。
向4-[2-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基-1-哌嗪基乙酸乙酯(889mg，1.69mmol)的THF-EtOH(5∶1，v/v，18ml)的搅拌溶液中加入4N氢氧化钠(0.84ml，3.38mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌4小时，用1N HCl调至pH7.5，用氯仿-甲醇(4∶1.v/v)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物，浓缩得到324(218mg，两步26％)，为棕色无定形泡沫物。IR(KBr)n 3299，3004，1700，1627，1598，1536cm-1；1H-NMR(DMSO)δ2.25(s，3H)，2.36-2.62(m，10H)，2.84，2.99(各为s，共3H)，3.13，3.14(各为s，共2H)，3.38-3.45(m，2H)，3.61，3.65(各为s，共2H)，3.86(s，3H)，6.74(t，1H，J＝7.8Hz)，6.87(s，1H)，6.93(t，1H，J＝7.8Hz)，7.11-7.17(m，2H)，7.79(d，1H，J＝7.8Hz)，8.01(d，1H，J＝7.8Hz)，8.47(s，1H)，8.57(s，1H)；MS(FAB)m/z 498(M++1)；C26H35N5O5·2HCl·H2O的分析计算值C，53.06；H，6.67；N，11.89。实测值C，53.04；H，6.15；N，11.09。实施例2751-[2-[N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基]-4-哌啶基乙酸
向2-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)乙醛(2.07g，10.0mmol)和4-亚哌啶基乙酸乙酯(1.69g，10.0mmol)的MeOH-AcOH(10∶1，v/v，22ml)的搅拌溶液中加入NaBH3CN(1.32g，20mmol)并继续搅拌过夜。通过加入饱和碳酸氢钠(200ml)猝灭该混合物，用氯仿(3×150ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙醇(40∶1，v/v)洗脱，得到1-[2-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)乙基]-4-亚哌啶基乙酸乙酯(1.71g，47％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(t，J＝7.3Hz，3H)，2.16(m，2H)，2.57(m，4H)，2.95(m，7H)，3.44(m，2H)，4.13(q，J＝7.3Hz，2H)，5.12(s，2H)，5.49-5.53(m，1H)，7.35(m，5H)。
搅拌下，将1-[2-(N-苄氧基羰基-N-甲基氨基)乙基]-4-亚哌啶基乙酸乙酯(1.70g，4.72mmol)的EtOH-AcOH(20∶1，v/v，21ml)的溶液经5％Pd/C(2g)氢化3天。过滤该混合物，真空浓缩滤液。用饱和碳酸氢钠使残留物呈碱性，用氯仿(300ml)提取。经碳酸钠干燥提取物并蒸发，得到1-(2-甲基氨基乙基)-4-哌啶基乙酸乙酯(813mg，75％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(t，J＝7.3Hz，3H)，1.68-1.81(m，5H)，1.97(t，J＝11.2Hz，2H)，2.22(t，J＝7.3Hz，2H)，2.43-2.47(m，5H)，2.66(t，J＝6.4Hz，2H)，2.85-2.90(m，2H)，4.13(q，J＝7.3Hz，2H)。
向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(550mg，1.75mmol)和1-(2-甲基氨基乙基)-4-哌啶基乙酸乙酯(400mg，1.75mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(503mg，2.63mmol)、HOBt(催化量)和DMAP(催化量)并继续搅拌过夜。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水(200ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙醇(10∶1，v/v)洗脱，得到1-[2-[N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基]-4-哌啶基乙酸乙酯(697mg，76％)，为黄色胶状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.19-2.06(多个m，12H)，2.21(t，J＝7.8Hz，2H)，2.28(s，3H)，2.41(t，J＝7.3Hz，1H)，2.46(t，J＝7.3Hz，1H)，2.80-2.89(m，2H)，2.95和3.01(各为s，共3H)，3.40和3.50(各为t，J＝6.8Hz，共2H)，3.64-3.75(m，5H)，4.09-4.16(m，2H)，6.59(s，1H)，6.77-6.79(m，2H)，7.12(t，J＝7.3Hz，1H)，7.21-7.27(m，3H)，7.54(d，J＝8.3Hz，1H)，8.06(dd，J＝8.3，2.4Hz，1H)。
向1-[2-[N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基]-4-哌啶基乙酸乙酯(690mg，1.32mmol)的THF(11ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠水溶液(11ml，2.75mmol)并继续搅拌过夜。用水(50ml)稀释混合物，用1N HCl中和，用氯仿-甲醇(2∶1，v/v，3×100ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。使残留物溶于甲醇(50ml)中，将活性炭(2g)加入该溶液中。搅拌下，使悬浮液回流30分钟并通过硅藻土过滤。蒸发滤液，通过吸收到氯仿中研磨残留物，加入己烷直至形成沉淀。收集沉淀并真空干燥，得到325(75mg，11％)，为白色无定形固体。1H-NMR(DMSO)δ1.19-2.99(多个m，共17H)，3.32-3.43(m，4H)，3.62-3.65(m，2H)，3.86(s，3H)，6.73(t，J＝8.3Hz，1H)，6.87(s，1H)，6.93(t，J＝7.8Hz，1H)，7.11-7.17(m，2H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，8.01(d，J＝8.3Hz，1H)，8.47(s，1H)，8.57(s，1H)；MS-FAB m/z 497(M++1)；C27H36N4O5·HCl的分析计算值C，60.84；H，7.00；N，10.51。实测值C，60.97；H，7.14；N，10.17。实施例2761-[2-[N-甲基-N-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基]-4-哌啶基乙酸
向1-(2-甲基氨基乙基)-4-哌啶基乙酸乙酯(400mg，1.75mmol)和三乙胺(366μl，2.63mmol)的DMF(10ml)的搅拌溶液中加入4-(N’-(2-甲基苯基)脲基)苯基乙酸五氟苯酯(788mg，1.75mmol)并继续搅拌过夜。用乙酸乙酯(300ml)稀释该混合物，用盐水(200ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。残留物经硅胶层析，用氯仿-乙醇(10∶1，v/v)洗脱，得到1-[2-[N-甲基-N-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基]-4-哌啶基乙酸乙酯(630mg，73％)，为无色油状物。
向1-[2-[N-甲基-N-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基]-4-哌啶基乙酸乙酯(630mg，1.27mmol)的THF(10ml)的搅拌溶液中加入0.25N氢氧化钠水溶液(10ml)并继续搅拌过夜。用水(100ml)稀释反应混合物，用1N HCl中和，用氯仿-甲醇(2∶1，v/v，3×100ml)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物并蒸发。溶于氯仿中研磨残留物，加入己烷直至形成沉淀。收集沉淀并真空干燥，得到326(20mg，3％)，为白色无定形固体。1H-NMR(DMSO)δ1.69(m，5H)，2.15(m，4H)，2.24(s，2H)，2.50(m，2H)，2.83和2.99(各为s，共3H)，3.32-3.49(m，4H)，3.63(d，J＝6.8Hz，2H)，6.91-6.95(m，1H)，7.13(m，4H)，7.39(d，J＝8.3Hz，2H)，7.83(d，J＝7.3Hz，1H)，7.97(m，1H)，9.12(m，1H)；MS(FAB)m/z 467(M++1)。实施例2774-[2-N-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基-1-哌嗪基乙酸
于室温下，将4-(2-甲基氨基乙基)-1-哌嗪基乙酸乙酯(700mg，3.05mmol)、三乙胺(0.64ml，4.58mmol)和DMAP(75mg，0.61mmol)的THF(15ml)溶液搅拌30分钟。然后，将4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(917mg，3.05mmol)、HOBt(82mg，0.61mmol)和EDC·HCl(879mg，4.58mmol)加入到该反应混合物中，于室温下搅拌12小时。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩至干。残留物用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)层析，得到4-[2-N-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基-1-哌嗪基乙酸乙酯(996mg，66％)，为黄色无定形泡沫物。1H-NMR(CDCl3)δ1.25-1.29(m，3H)，2.20(s，3H)，2.47-2.58(m，10H)，2.97，3.05(各为s，共3H)，3.17，3.20(各为s，共2H)，3.45和3.52(各为d，共2H，J＝6.8Hz)，3.64，3.68(各为s，2H)，4.15-4.21(m，2H)，7.01-7.19(m，8H)，7.48(m，1H)，7.64(m，1H)；MS(FAB)m/z 496(M++1)。
向4-[2-N-[4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基-1-哌嗪基乙酸乙酯(996mg，2.01mmol)的THF-EtOH(5∶1，12ml)的搅拌溶液中加入4N氢氧化钠(1.0ml，4.00mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌4小时，用1N HCl调至pH 7.5，用氯仿-甲醇(4∶1.v/v)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物，浓缩得到327(73mg，8％)，为黄色无定形泡沫物。IR(KBr)n 3338，2925，2850，2821，1704，1627，1540cm-1；1H-NMR(DMSO)δ2.24(s，3H)，2.33-2.61(m，10H)，2.82，2.95(各为s，共3H)，3.00，3.02(各为s，共2H)，3.39(t，2H，J＝6.8Hz)，3.60，3.62(各为s，共2H)，6.92(t，1H，J＝7.8Hz)，7.09-7.16(m，4H)，7.41-7.44(m，2H)，7.76，7.77(各为d，2H，J＝7.8Hz)，8.46，8.53(各为s，1H)，9.54，9.59(各为s，1H)；MS(FAB)m/z 468(M++1)；C25H33N5O5·2HCl的分析计算值C，55.56；H，6.53；N，12.96。实测值C，54.99；H，6.45；N，11.58。实施例2784-[2-N-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基-1-哌嗪基乙酸
于室温下，将4-(2-甲基氨基乙基)-1-哌嗪基乙酸乙酯(695mg，3.03mmol)、三乙胺(0.64ml，4.58mmol)和DMAP(75mg，0.61mmol)的DMF(15ml)溶液搅拌15分钟。然后，将4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(965mg，3.03mmol)、HOBt(82mg，0.61mmol)和EDC·HCl(872mg，4.54mmol)加入到该反应混合物中，于室温下搅拌12小时。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩至干。残留物用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)层析，得到4-[2-N-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.21g，DMF的混合物)，为黑色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.24-1.29(m，3H)，2.45-2.59(m，10H)，2.98，3.05(各为s，共3H)，3.17，3.20(各为s，共2H)，3.44，3.52(各为t，共2H，J＝6.8Hz)，3.66(s，2H)，4.15-4.21(m，2H)，6.77-6.78(m，2H)，6.79-7.11(m，3H)，7.68-7.95(m，2H)，7.64(宽s，1H)，8.20(t，1H，J＝7.8Hz)；MS(FAB)m/z 530(M++1)。
向4-[2-N-[4-[N’-(2-氟代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-甲基乙酰氨基]乙基-1-哌嗪基乙酸乙酯(1.21g，DMF的混合物)的THF-EtOH(5∶1，v/v，12ml)的搅拌溶液中加入4N氢氧化钠(1.0ml，4.00mmol)。于室温下，将反应混合物搅拌4小时，用1N HCl调至pH7.5，用氯仿-甲醇(4∶1.v/v)提取。经硫酸镁干燥合并的提取物，浓缩得到328(78mg，两步5％)，为棕色无定形泡沫物。IR(KBr)n 3299，2940，2830，1704，1627，1598，1536cm-1；1H-NMR(DMSO)δ2.36-2.61(m，10H)，2.83，2.98(各为s，共3H)，3.11(s，2H)，，3.37-3.43(m，2H)，3.62，3.65(各为s，共2H)，3.85(s，3H)，6.75(m，1H)，6.87(s，1H)，6.98(s，1H)，7.12(t，1H，J＝7.8Hz)，7.20，7.23(各为d，2H，J＝7.8Hz)，8.01(d，1H，J＝7.8Hz)，8.17(t，1H，J＝7.8Hz)，8.72(s，1H)，9.19(s，1H)；MS(FAB)m/z 502(M++1)；C25H32FN5O5·2HCl·0.5H2O的分析计算值C，51.46；H，6.05；N，12.00。实测值C，51.08；H，5.69；N，11.27。实施例2793-氟-1-[2-N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基-4-哌啶基乙酸
于室温下，向1-叔丁氧基羰基-4-哌啶酮(14.9g，74.8mmol)的DMF(35ml)的搅拌溶液中加入TMSCI(11.4ml，89.7mmol)，然后于室温下滴加三乙胺(25.0ml，179mmol)，于80℃将该反应混合物加热18小时。将己烷加入到该反应混合物中，然后用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤产生的混合物，经硫酸钠干燥并浓缩至干。残留物经层析，用己烷-乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1-叔丁氧基羰基-1，2，3，6-四氢-4-(三甲基甲硅烷氧基)吡啶(20.4g，99％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ0.19(s，9H)，1.46(s，9H)，2.05-2.15(m，2H)，3.48-3.56(m，2H)，3.83-3.91(m，2H)，4.79(宽s，1H)。
于室温下，向1-叔丁氧基羰基-1，2，3，6-四氢-4-(三甲基甲硅烷氧基)吡啶(20.4g，75.0mmol)的乙腈(500ml)溶液中加入SelectfluorTM(29.2g，82.5mmol)，将反应混合物搅拌2小时。将乙酸乙酯加入到反应混合物中，用盐水洗涤混合物，经硫酸钠干燥并浓缩至干。残留物经层析，用氯仿-甲醇(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1-叔丁氧基羰基-3-氟-4-哌啶酮(14.5g，89％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.50(s，9H)，2.44(t，J＝6.9Hz，1H)，2.48-2.63(m，2H)，3.26(ddd，J＝13.5，10.5，3.9Hz，1H)，3.72(t，J＝6.9Hz，1H)，4.16(m，1H)，4.42(m，1H)，4.83(dt，49.2，6.9Hz，1H)。
于-78℃，向膦酰基乙酸三乙酯(3.72g，16.6mmol)的THF(70ml)溶液中加入双(三甲基甲硅烷基)氨化锂(1.0M THF溶液，15.5ml，15.5mmol)。于相同温度下搅拌1小时后，将1-叔丁氧基羰基-3-氟-4-哌啶酮(3.02g，13.9mmol)加入到反应混合物中。于相同温度下搅拌该混合物30分钟，通过加入饱和氯化铵溶液猝灭，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并浓缩至干。残留物经层析，用己烷-乙酸乙酯(8∶1，v/v)作为洗脱剂，得到(1-丁氧基羰基-3-氟哌啶-4-亚基)乙酸乙酯(3.23g，81％)，为无色固体。1H-NMRδ1.30(t，J＝7.1Hz，3H)，1.48(s，9H)，2.10(m，1H)，2.56(m，1H)，2.77(m，1H)，3.13-3.54(m，2H)，3.70(m，1H)，4.17，4.18(各为q，J＝7.1Hz，共2H)，5.82，5.98(各为s，共1H)，6.41(各为d，J＝46.9Hz，共1H)；MS(FAB)m/z 288(M++1)。
于室温下，将(1-丁氧基羰基-3-氟哌啶-4-亚基)乙酸乙酯(1.32g，4.59mmol)的THF(30ml)溶液经Pd-C(TMEDA复合物，66.0mg)在氢气氛下氢化2小时。过滤除去催化剂，将滤液浓缩至干。层析残留物，用己烷-乙酸乙酯(9∶1，v/v)作为洗脱剂，得到1-叔丁氧基羰基-3-氟-4-哌啶基乙酸乙酯(653mg，73％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.26(t，J＝7.1Hz，3H)，1.45(s，9H)，1.53-1.79(m，2H)，1.92-2.09(m，2H)，2.31(dd，J＝16.4，6.9Hz，1H)，2.52(dd，J＝16.4，7.3Hz，1H)，2.61-3.06(m，2H)，4.14(q，J＝7.1Hz，2H)，4.28-4.77(m，2H)；13C NMR(CDCL3)δ14.29，25.80，28.42，35.99，36.20，60.55，79.78，86.72，88.48，154.94，171.93；FAB-MS m/z 290(M++1)。
于0℃，向1-叔丁氧基羰基-3-氟-4-哌啶基乙酸乙酯(653mg，2.26mmol)的二氯甲烷(10ml)的溶液中加入TFA(5ml)。于室温下搅拌4小时后，浓缩该反应混合物。用饱和碳酸氢钠溶液处理残留物，用THF-EtOAc(1∶1，v/v)提取。经硫酸镁干燥提取物，浓缩得到3-氟-4-哌啶基乙酸乙酯(420mg，98％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.26(t，J＝7.4Hz，3H)，1.68-1.80(m，2H)，2.18(m，1H)，2.32(dd，J＝16.6，6.8Hz，1H)，2.54(dd，J＝16.6，7.5Hz，1H)，2.82(m，1H)，2.90，3.00(各为d，J＝14.4Hz，共1H)，3.31(m，1H)，3.51(m，1H)，4.15(q，J＝7.4Hz，2H)，4.82，4.71(各为宽s，共1H)。
于室温下，向3-氟-4-哌啶基乙酸乙酯(230mg，1.22mmol)和2-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基)乙醛(211mg，1.22mmol)的THF(5ml)的溶液中加入NaBH(OAc)3(386mg，1.82mmol)和乙酸(70.0ml，1.22mmol)。搅拌24小时后，通过加入饱和碳酸氢钠猝灭该反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经碳酸钠干燥并浓缩至干。残留物经层析，用氯仿-甲醇(6∶1，v/v)作为洗脱剂，得到3-氟-1-[2-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基)乙基]-4-哌啶基乙酸乙酯(236mg，56％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.25(t，J＝7.1Hz，3H)，1.45(s，9H)，1.53，1.79(m，2H)，1.90-2.09(m，2H)，2.15(dd，J＝16.4，7.1Hz，1H)，2.45-2.58(m，2H)，2.87(s，3H)，2.90-2.99(m，2H)，3.20(m，1H)，3.24-3.45(m，2H)，4.14(q，J＝7.1Hz，2H)，4.61，4.73(各为宽s，1H)；ESI-MS m/z 347。
于0℃，向3-氟-1-[2-(N-叔丁氧基羰基-N-甲基氨基)乙基]-4-哌啶基乙酸乙酯(236mg，0.68mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入TFA(5ml)。于室温下搅拌4小时后，浓缩该反应混合物。用饱和碳酸氢钠溶液处理残留物，用氯仿提取。经硫酸镁干燥提取物，浓缩得到3-氟-1-[2-(N-甲基氨基)乙基]-4-哌啶基乙酸乙酯(117mg，70％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.26(t，J＝7.1Hz，3H)，1.58(m，1H)，1.70(m，1H)，1.99(m，1H)，2.14(m，1H)，2.27-2.33(m，1H)，2.47(s，3H)，2.48-2.56(m，4H)，2.72(t，J＝6.3Hz，2H)，2.90(m，1H)，3.16(m，1H)，4.14(q，J＝7.1Hz，2H)，4.67(d，J＝48.3Hz，1H)；ESI-MSm/z 247(M++1)。
向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(164mg，0.52mmol)、3-氟-1-[2-(N-甲基氨基)乙基]-4-哌啶基乙酸乙酯(117mg，0.47mmol)、三乙胺(0.10ml，0.71mmol)和HOBt(13.0mg，0.09mmol)的THF(5ml)的溶液中加入EDC·HCl(137mg，0.71mmol)。于室温下搅拌8小时后，用水稀释该反应混合物，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发至干。残留物经层析，用甲苯-丙酮(1∶2，v/v)作为洗脱剂，得到3-氟-1-[2-N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基-4-哌啶基乙酸乙酯(160mg，62％)，为黄色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.24-1.28(m，3H)，1.51-2.23(m，7H)，2.26(s，3H)，2.35(s，2H)，2.39-2.56(m，3H)，2.88(m，1H)，2.95，3.03(各为s，共3H)，3.11(m，1H)，3.44(m，1H)，3.56(m，1H)，3.64(s，2H)，3.68(s，3H)，4.11-4.17(m，2H)，4.57，4.69(各为s，共1H)，6.72-6.82(m，2H)，7.10-7.33(m，5H)，7.54(d，J＝8.1Hz，1H)，8.06(d，J＝8.1Hz，1H)；ESI-MS m/z543(M++1)。
向3-氟-1-[2-N-甲基-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基-4-哌啶基乙酸乙酯(160mg，0.29mmol)的THF(3ml)的溶液中加入0.25N氢氧化钠(1.30ml，0.32mmol)。于室温下搅拌1小时后，浓缩该反应混合物。用水稀释残留物，于0℃用1N HCl中和。浓缩该混合物，通过离子交换树脂(HP-20，Mitsubishi Chemical)纯化，得到329(110mg，74％)，为黄色无定形固体。IR(KBr)3343，2937，1700，1617，1589，1535，1486，1455，1417cm-1；1H-NMR(CD3OD)δ1.57-1.72(m，2H)，1.98(m，1H)，2.26(m，1H)，2.28(s，3H)，2.37-2.59(m，3H)，2.66-2.89(m，2H)，2.95，3.09(各为s，共3H)，3.14(m，1H)，3.40(m，1H)，3.51(m，1H)，3.59(m，1H)，3.71(s，2H)，3.78(m，1H)，3.89(s，3H)，4.69，4.81(各为s，共1H)，6.79(dd，J＝8.1，1.5Hz，1H)，6.90(宽s，1H)，7.01(t，J＝7.8Hz，1H)，7.13-7.19(m，2H)，7.58(d，J＝7.8Hz，1H)，8.00(d，J＝8.1Hz，1H)；ESI-MS m/z 515(M++1)；C27H35FN4O5·H2O的分析计算值C，60.89；H，7.00；N，10.52。实测值C，61.09；H，6.80；N，9.87。实施例2804-[2-N-[2-(4-氟代苯氧基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸
于室温下，向2-(N-苄基-N-叔丁氧基羰基氨基)乙醇(6.85g，27.3mmol)、4-氟代苯酚(3.07g，27.3mmol)和三苯膦(7.83g，30.0mmol)的THF(100ml)溶液中加入DIAD(6.00ml，30.0mmol)。搅拌3小时后，浓缩该反应混合物。残留物经层析，用己烷∶乙酸乙酯(8∶1，v/v)洗脱，得到1-[2-(N-苄基-N-叔丁氧基羰基氨基)乙氧基]-4-氟代苯(8.19g，64％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.42-1.50(m，9H)，3.41-3.67(m，2H)，3.92-4.11(m，2H)，4.51-4.63(m，2H)，6.73-6.85(m，2H)，6.89-6.98(m，2H)，7.24(m，5H)；FAB-MSm/z 346(M++1)。
于0℃，向1-[2-(N-苄基-N-叔丁氧基羰基氨基)乙氧基]-4-氟代苯(8.19g，23.7mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入TFA(40ml)。于室温下搅拌1小时后，浓缩该反应混合物。用饱和碳酸氢钠溶液处理残留物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-(2-N-苄基氨基乙氧基)-4-氟代苯(4.38g，75％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ3.00(t，J＝5.2Hz，2H)，3.87(s，2H)，4.04(t，J＝5.2Hz，2H)，6.80-6.85(m 2H)，6.92-6.98(m，2H)，7.23-7.36(m，5H)；FAB-MSm/z 246(M++1)。
将1-(2-N-苄基氨基乙氧基)-4-氟代苯(1.08g，4.40mmol)、4-(2-溴代乙基)哌嗪基-1-乙酸乙酯(1.23g，4.40mmol)和碳酸钾(0.61g，17.9mmol)在乙腈(50ml)中的混合物在回流下加热8小时。过滤得到的混合物并将滤液浓缩至干。残留物经层析，用甲苯-丙酮(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[2-N-苄基-N-[2-(4-氟代苯氧基)乙基]氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(1.51g，77％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，2.31-2.66(m，10H)，2.75(t，J＝6.6Hz，2H)，2.90(t，J＝6.1Hz，2H)，3.18(s，2H)，3.72(s，2H)，3.97(t，J＝6.1Hz，2H)，4.17(q，J＝7.1Hz，2H)，6.75-6.79(m，2H)，6.91-6.96(m，2H)，7.21-7.35(m，5H)；FAB-MSm/z 444(M++1)。
将4-[2-N-苄基-N-[2-(4-氟代苯氧基)乙基]氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(1.50g，3.38mmol)的乙醇(30ml)溶液经5％Pd-C(53.1％湿重，0.73g)在氢气氛下氢化4小时。过滤除去催化剂，浓缩滤液。用饱和碳酸氢钠溶液处理残留物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并浓缩，得到4-[2-N-[2-(4-氟代苯氧基)乙基]氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(1.12g，94％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，1.81(宽s，1H)，2.47-2.66(m，12H)，3.00(t，J＝5.4Hz，2H)，3.20(s，2H)，4.03(t，J＝5.4Hz，2H)，4.18(q，J＝7.1Hz，2H)，6.81-6.85(m，2H)，6.90-6.99(m，2H)；FAB-MS m/z 354(M++1)。
于室温下，向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(485mg，1.54mmol)、4-[2-N-[2-(4-氟代苯氧基)乙基]氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(545mg，1.54mmol)、三乙胺(0.32ml，2.32mmol)和HOBt(41.5mg，0.31mmol)的THF(15ml)的溶液中加入EDC·HCl(883mg，2.32mmol)。搅拌24小时后，用水稀释反应混合物，用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发至干。残留物经层析，用氯仿-甲醇(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[2-N-[2-(4-氟代苯氧基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(532mg，53％)，为黄色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.26，1.27(各为t，J＝7.1Hz，共3H)，2.27(s，3H)，2.51-2.63(m，10H)，3.16，3.19(各为s，共2H)，3.51-3.56(m，2H)，3.63，3.67(各为s，共2H)，3.69-3.81(m，5H)，3.95，4.10(各为t，J＝5.2Hz，共2H)，4.16，4.18(各为q，J＝7.1Hz，共2H)，6.56(d，J＝8.1Hz，1H)，6.72-6.78(m，4H)，6.89-6.98(m，2H)，7.12(t，J＝7.6Hz，1H)，7.20-7.23(m，3H)，7.51(d，J＝7.6Hz，1H)，8.04(d，J＝8.1Hz，1H)；FAB-MS m/z 650(M++1)。
于室温下，向4-[2-N-[2-(4-氟代苯氧基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(532mg，0.82mmol)的二氧六环(8ml)的溶液中滴加0.25N氢氧化钠(5.00ml，1.25mmol)，搅拌反应混合物1小时。浓缩得到的混合物，用水稀释，于0℃用1N HCl中和。用氯仿-甲醇(4∶1，v/v)提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发至干。残留物经层析，用氯仿-甲醇(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到330(168mg，33％)，为淡黄色无定形固体。IR(KBr)3338，2938，2829，1635，1533，1506，1454，1415cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.37-2.48(m，6H)，2.53-2.67(m，6H)，3.09(m，2H)，3.44-3.49(m，2H)，3.64-3.69(m，2H)，3.72(s，2H)，3.80，3.84(各为s，共3H)，4.06-4.09(m，2H)，6.73(m，1H)，6.85(s，1H)，6.91-6.97(m，3H)，7.07-7.18(m，4H)，7.78(d，J＝8.1Hz，1H)，8.00(dd，J＝8.1，2.7Hz，1H)，8.53(m，1H)，8.59(m，1H)；FAB-MSm/z 622(M++1)；C33H40FN5O6·2HCl的分析计算值C，57.06；H，6.09；N，10.08。实测值C，56.83；H，6.05；N，9.90。实施例2814-[2-N-[2-(4-乙酰基苯氧基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸
于室温下，向2-(N-苄基-N-叔丁氧基羰基氨基)乙醇(5.90g，23.5mmol)、4-羟基苯乙酮(3.18g，23.5mmol)和三苯膦(6.74g，25.8mmol)的THF(100ml)溶液中加入DIAD(5.20ml，25.8mmol)。将该反应混合物在回流下加热4小时并浓缩。残留物经层析，用己烷∶乙酸乙酯(5∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[2-(N-苄基-N-叔丁氧基羰基氨基)乙氧基]苯乙酮(3.64g，42％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.43-1.65(m，9H)，2.55(s，3H)，3.41-3.69(m，2H)，4.02-4.24(m，2H)，4.49-4.66(m，2H)，6.81-6.93(m，2H)，7.19-7.37(m，5H)，7.91(d，J＝8.8Hz，2H)；FAB-MS m/z370(M++1)。
于0℃，向4-[2-(N-苄基-N-叔丁氧基羰基氨基)乙氧基]苯乙酮(3.05g，8.26mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入TFA(20ml)。于室温下搅拌2小时后，浓缩该反应混合物。用饱和碳酸氢钠溶液处理残留物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并浓缩，得到4-(2-N-苄基氨基乙氧基)苯乙酮(2.21g，99％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ2.04(宽s，1H)，2.55(s，3H)，3.05(t，J＝5.4Hz，2H)，3.88(s，2H)，4.15(t，J＝5.4Hz，2H)，6.92(d，J＝8.9Hz，2H)，7.24-7.36(m，5H)，7.91(d，J＝8.9Hz，2H)；FAB-MSm/z 270(M++1)。
于0℃，向4-(2-羟乙基)哌嗪基-1-乙酸乙酯(11.3g，52.1mmol)和四溴化碳(20.7g，62.5mmol)的二氯甲烷(200ml)溶液中分批加入三苯膦(19.2g，73.0mmol)，搅拌该反应混合物30分钟，将己烷加入到该反应混合物中，过滤出沉淀，浓缩滤液，得到4-(2-溴代乙基)哌嗪基-1-乙酸乙酯(13.7g，94％)，为黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，2.61-2.78(m，8H)，2.81(t，J＝7.6Hz，2H)，3.20(s，2H)，3.42(t，J＝7.6Hz，3H)，4.18(q，J＝7.1Hz，2H)。
将4-(2-N-苄基氨基乙氧基)苯乙酮(681mg，2.52mmol)、4-(2-溴代乙基)哌嗪基-1-乙酸乙酯(705mg，2.52mmol)和碳酸钾(349g，2.52mmol)在乙腈(10ml)中的混合物在回流下加热22小时。过滤得到的混合物并将滤液浓缩至干。残留物经层析，用甲苯-丙酮(1∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[2-[N-苄基-N-[2-(4-乙酰基苯氧基)乙基]氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(920mg，78％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，2.45-2.53(m，10H)，2.55(s，3H)，2.76(t，J＝6.8Hz，2H)，2.94(t，J＝6.1Hz，2H)，3.18(s，2H)，3.73(s，2H)，4.06(t，J＝6.1Hz，2H)，4.17(q，J＝7.1Hz，2H)，6.85(d，J＝7.1Hz，2H)，7.22-7.35(m，5H)，7.90(d，J＝7.1Hz，2H)；FAB-MS m/z 468(M++1)。
将4-[2-[N-苄基-N-[2-(4-乙酰基苯氧基)乙基]氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(920mg，1.97mmol)的乙醇(30ml)溶液经5％Pd-C(53.1％，湿重，510mg)在氢气氛下氢化4小时。过滤除去催化剂，浓缩滤液。用饱和碳酸氢钠溶液处理残留物，用氯仿提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并浓缩，得到4-[2-N-[2-(4-乙酰基苯氧基)乙基]氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(690mg，93％)，为红色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，2.55(s，3H)，2.46-2.54(m，10H)，2.78(t，J＝6.2Hz，2H)，3.04(t，J＝5.2Hz，2H)，3.20(s，2H)，4.13(t，J＝5.2Hz，2H)，4.18(q，J＝7.1Hz，2H)，6.92(d，J＝8.8Hz，2H)，7.92(d，J＝8.8Hz，2H)；FAB-MS m/z378(M++1)。
于室温下，向3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基乙酸(558mg，1.77mmol)、4-[2-N-[2-(4-乙酰基苯氧基)乙基]氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(670mg，1.77mmol)、三乙胺(0.38ml，2.66mmol)和HOBt(50.0mg，0.35mmol)的THF(10ml)的溶液中加入EDC·HCl(883mg，2.32mmol)。搅拌15小时后，用水稀释反应混合物，用氯仿-甲醇(10∶1，v/v)提取。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并浓缩至干。残留物经层析，用氯仿-甲醇(4∶1，v/v)作为洗脱剂，得到4-[2-N-[2-(4-乙酰基苯氧基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(724mg，61％)，为黄色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)δ1.25，1.27(各为t，J＝7.1Hz，共3H)，2.29(s，3H)，2.45-2.51(m，8H)，2.54(s，3H)，2.55-2.63(m，2H)，3.17，3.19(各为s，共2H)，3.51-3.55(m，2H)，3.60(s，2H)，3.69(s，3H)，3.71-3.78(m，2H)，4.04-4.23(m，4H)，6.47(m，1H，J＝8.1Hz)，6.72-6.76(m，2H)，6.85(d，J＝8.8Hz，2H)，7.12-7.19(m，2H)，7.20-7.24(m，2H)，7.51(d，8.1Hz，1H)，7.88(d，J＝8.8Hz，2H)，8.04(d，J＝8.1Hz，1H)；FAB-MS m/z 674(M++1)。
于室温下，向4-[2-N-[2-(4-乙酰基苯氧基)乙基]-N-[3-甲氧基-4-[N’-(2-甲基苯基)脲基]苯基]乙酰氨基]乙基哌嗪基-1-乙酸乙酯(724mg，1.07mmol)的THF(10ml)的溶液中滴加0.25N氢氧化钠(6.50ml，1.61mmol)，搅拌反应混合物1小时。浓缩得到的混合物，用水稀释，于0℃用1N HCl中和。用氯仿-甲醇(4∶1，v/v)提取该混合物。用盐水洗涤提取物，经硫酸钠干燥并蒸发至干。残留物经层析，用氯仿-甲醇(3∶1，v/v)作为洗脱剂，得到331(450mg，65％)，为淡黄色无定形固体。IR(KBr)3345，2938，2821，1673，1631，1598，1533，1455，1417cm-1；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.35-2.47(m，8H)，2.51(s，3H)，2.53-2.58(m，2H)，2.96(s，2H)，3.46-3.50(m，2H)，3.69(s，2H)，3.73-3.77(m，2H)，3.80，3.83(各为s，共3H)，4.19-4.22(m，2H)，6.73(m，1H)，6.85(s，1H)，6.92(t，J＝7.3Hz，1H)，7.30(d，J＝7.3Hz，2H)，7.10-7.16(m，2H)，7.79(d，J＝8.3Hz，1H)，7.90-7.95(m，2H)，8.00(t，J＝8.3Hz，1H)，8.55(m，1H)，8.61(m，1H)；FAB-MS m/z 646(M++1)；C35H43N5O7·2HCl·1H2O的分析计算值C，57.06；H，6.43；N，9.51。实测值C，59.17；H，6.32；N，9.61。实施例2824-[2-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-苄基乙酰氨基]乙基-1-哌啶基乙酸
4-[2-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-苄基乙酰氨基]乙基-1-哌啶基乙酸甲酯
搅拌下，将哌啶乙醇(10.0g，77.4mmol)、2-溴代乙酸苄酯(17.8g，77.6 mmol)和碳酸钾(21.4g，155mmol)，在乙腈(200ml)中的混合物在回流下加热2小时。过滤除去不溶性固体，真空浓缩滤液。将残留物倾入冰冷却的1N HCl中并用氯仿提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用乙酸乙酯作为洗脱剂，得到4-(2-羟乙基)-1-哌啶基乙酸苄酯(16.3g，76％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.31-1.40(m，3H)，1.52(dd，J＝12.8，6.3Hz，2H)，1.68(brd，J＝10.0Hz，3H)，2.16(t，J＝11.6Hz，2H)，2.92(brd，J＝11.6Hz，2H)，3.24(s，2H)，3.69(t，J＝6.8Hz，2H)，5.16(s，2H)，7.35(m，5H)。
向4-(2-羟乙基)-1-哌啶基乙酸苄酯(14.9g，53.8mmol)的二氯甲烷(150ml)的搅拌溶液中加入三乙胺(37.5ml，269mmol)和DMSO(41.6ml，538mmol)。将该反应混合物冷却至0℃，分次加入SO3·Py(25.7g，161mmol)，于室温下将得到的混合物搅拌过夜。真空浓缩该混合物，用水稀释残留物接着用乙醚提取。用水洗涤有机层，经无水碳酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用乙酸乙酯-己烷(2∶1)作为洗脱剂，得到(4-N-苄酯基甲基哌啶基)乙醛(4.63g，31％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.36-1.46(m，2H)，1.69(br s，2H)，1.72(brs，1H)，1.90(m，1H)，2.21(dt，J＝11.6，2.4Hz，2H)，2.37(dd，J＝6.8，1.6Hz，2H)，2.92(d，J＝11.6Hz，2H)，3.25(s，2H)，5.16(s，2H)，7.35(m，5H)，9.77(t，J＝2.0Hz，1H)。
向N-苄胺(1.06l，9.75mmol)的甲醇(20ml)的搅拌溶液中加入AcOH(560ml，9.75mmol)和(4-N-苄酯基甲基哌啶基)乙醛(1.79g，6.50mmol)的甲醇(5ml)溶液并冷却至0℃。一次性加入NaBH3CN(645mg，9.75 mmol)，于室温下搅拌得到的混合物过夜。真空浓缩该混合物，将残留物倾入碳酸氢钠水溶液中，然后用氯仿提取。用水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇-乙酸乙酯(10∶1∶1)作为洗脱剂，得到N-苄基-2-[4-(N-苄酯基甲基哌啶基)乙胺(872mg，37％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)δ1.36-1.46(m，2H)，1.69(br s，2H)，1.72(br s，1H)，1.90(m，1H)，2.21(dt，J＝11.6，2.4Hz，2H)，2.37(dd，J＝6.8，1.6Hz，2H)，2.92(d，J＝11.6Hz，2H)，3.25(s，2H)，5.16(s，2H)，7.35(m，5H)，9.77(t，J＝2.0Hz，1H)。
于室温下，向N-苄基-2-[4-(N-苄酯基甲基哌啶基)乙胺(356mg，0.972mmol)、4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基乙酸(369mg，0.972mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(119mg，0.972mmol)的DMF(15ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(372mg，1.94mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到4-[2-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-苄基乙酰氨基]乙基-1-哌啶基乙酸苄酯(611mg，86％)，为无色油状物。1H-NMR(CDCl3)旋转异构体的混合物δ1.15-2.09(多个m，7H)，2.06-2.14(m，2H)，2.84-2.96(m，2H)，3.17-3.23(s，共2H)，3.21和3.23(s，共2H)，3.38-3.42(m，1H)，3.65和3.73(s，共2H)，3.83和3.84(s，共3H)，4.49(s，1H)，4.60(s，1H)，5.15(d，J＝2.8Hz，2H)，6.74-7.83(多个m，16H)，7.51-7.53(m，1H)，7.94-8.02(m，1H)，8.18(d，J＝8.4Hz，2H)；MS(FAB)m/z 727(M+)，729(M++2)。
于室温下，向4-[2-N-[4-[N’-(2-溴代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]-N-苄基乙酰氨基]乙基-1-哌啶基乙酸苄酯(347mg，0.477mmol)的甲醇-水(5∶1，6ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(13.6mg，0.57mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将该反应混合物倾入水中，用1N HCl水溶液中和，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，分别得到为无色无定形固体的332(97.3mg，32％)和无色无定形固体的333(168mg，54％)。3321H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.29-1.90(多个m，7H)，2.75-2.86(m，2H)，3.28-3.51(多个m，6H)，3.74和3.78(s，共2H)，3.87和3.89(s，共3H)，4.66(s，1H)，4.85(s，1H)，6.79-7.00(多个m，3H)，7.16(d，J＝7.2Hz，1H)，7.23-7.37(m，5H)，7.57(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.88-8.00(多个m，2H)；MS(FAB)m/z 637(M+)，639(M++2)。333 1H-NMR(CDCl3)，旋转异构体的混合物δ1.15-2.11(多个m，7H)，2.89-2.97(m，2H)，3.17-3.49(多个m，6H)，3.17和3.18(s，共3H)，3.70和3.71(s，共3H)，3.83和3.84(s，共2H)，4.49，4.60和4.71(s，共2H)，6.75-8.16(多个m，14H)；MS(FAB)m/z 651(M+)，653(M++2)。实施例2834-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)-3-甲氧基脲基]苯基]-N-苄基乙酰氨基]乙基-1-哌啶基乙酸
于室温下，向N-苄基-2-[4-(N-苄酯基甲基哌啶基)乙胺(372mg，1.11mmol)、4-[N’-(2-氯代苯基)脲基]-3-甲氧基苯基]乙酸(758mg，1.11mmol)和N，N-二甲基氨基吡啶(136mg，1.11mmol)的DMF(15ml)的搅拌溶液中加入EDC·HCl(426mg，2.22mmol)，将得到的混合物搅拌12小时。将该反应混合物倾入水中，用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(10∶1)作为洗脱剂，得到4-[2-N-[4-N’-(2-氯代苯基)-3-甲氧基脲基]苯基]-N-苄基乙酰氨基]乙基-1-哌啶基乙酸苄酯(668mg，88％)，为淡黄色油状物。1H-NMR(CDCl3)旋转异构体的混合物δ1.15-1.83(多个m，7H)，2.04-2.13(m，2H)，2.83-2.95(m，2H)，2.88和2.99(s，共2H)，3.20和3.23(s，共2H)，3.20-3.23(重叠，1H)，3.38-3.42(m，1H)，3.65-3.74(m，3H)，4.50(s，1H)，4.61(s，1H)，5.14(d，J＝4.4Hz，2H)，6.72-6.82(多个m，2H)，6.94-6.99(m，1H)，7.13-7.50(多个m，14H)，7.94-8.02(m，1H)，8.18(d，J＝8.0Hz，2H)；MS(FAB)m/z 683(M++H)。
于室温下，向4-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)-3-甲氧基脲基]苯基]-N-苄基乙酰氨基]乙基-1-哌啶基乙酸苄酯(633mg，0.93mmol)的甲醇-水(10∶1，10ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(24.4mg，1.02mmol)，将得到的混合物搅拌过夜。将该反应混合物倾入水中，用1N HCl水溶液中和，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残留物经硅胶层析，用氯仿-甲醇(20∶1)作为洗脱剂，得到4-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)-3-甲氧基脲基]苯基]-N-苄基乙酰氨基]乙基-1-哌啶基乙酸甲酯(504mg，89％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CDCl3)，旋转异构体的混合物δ1.26-1.64(多个m，7H)，2.02-2.10(m，2H)，2.86(t，J＝10.4Hz，2H)，3.17(d，J＝8.0Hz，2H)，3.16-3.22(m，重叠，1H)，3.40(t，J＝7.6Hz，1H)，3.48(s，1H)，3.65和3.73(s，共2H)，3.70和3.71(s，共3H)，3.79和3.80(s，共3H)，4.50，4.60和4.70(s，共2H)，6.73-6.85(多个m，2H)，6.98(t，J＝7.6Hz，1H)，7.13-7.37(多个m，9H)，7.96(m，1H)，8.18(d，J＝8.0Hz，2H)；MS(FAB)m/z 607(M++H)。
向4-[2-N-[4-[N’-(2-氯代苯基)-3-甲氧基脲基]苯基]-N-苄基乙酰氨基]乙基-1-哌啶基乙酸甲酯(177mg，0.292mmol)的甲醇-水(5∶1，6ml)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(21.6mg，0.90mmol)，于室温下，将得到的混合物搅拌4小时。将该混合物倾入水中，用1N HCl水溶液中和该溶液，然后用氯仿提取。用盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥，然后浓缩得到334(155mg，92％)，为无色无定形固体。1H-NMR(CD3OD)，旋转异构体的混合物δ1.28-1.90(多个m，7H)，2.84(brs，2H)，3.30-3.52(多个m，6H)，3.74和3.82(s，共2H)，3.87和3.88(s，共3H)，4.63(s，1H)，4.66(s，1H)，6.79-7.05(多个m，3H)，7.16(d，J＝7.2Hz，1H)，7.24-7.40(m，5H)，7.88(s，1H)，7.98-8.04(多个m，2H)；MS(ESI)m/z 593，615(M++Na+)。
应该理解，当本文根据详尽阐述的特定实施方案来描述本发明时，这些实施方案是通过阐明一般原理而提出的，本发明并不必对此作出限制。在不背离以下权利要求书的精髓和范围的情况下，对本领域技术人员来说，任何给定的材料或工艺步骤的修饰和改变都是显而易见的，而所有这些修改均包括在本发明的范围内。
19.权利要求2的化合物或其盐，其中R5为低级烷氧基。
20.一种在哺乳动物中抑制细胞粘附的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效量的权利要求1-19中任一项的化合物。
21.一种在哺乳动物中治疗与VLA-4介导的细胞粘附有关的疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效量的权利要求1-19中任一项的化合物。
22.权利要求21的方法，其中所述与VLA-4介导的细胞粘附有关的疾病选自炎性反应、自身免疫性反应和肿瘤转移。
23.权利要求21的方法，其中所述与VLA-4介导的细胞粘附有关的疾病选自哮喘、糖尿病、关节炎、牛皮癣、多发性硬化症、炎性肠道疾病和移植排斥反应。
24.权利要求1-19中任一项的化合物在治疗中的用途。
25.权利要求1-19中任一项的化合物在制备用于治疗与VLA-4介导的细胞粘附有关的疾病的药物中的用途。
26.一种药用组合物，它包含作为治疗剂的权利要求1-19中任一项的化合物和药学上可接受的载体或赋形剂。
27.权利要求26的药用组合物，它还包括一种或多种其它的治疗剂。
28.权利要求27的药用组合物，其中所述一种或多种其它的治疗剂选自抗炎药、抗风湿药、皮质类固醇、免疫抑制剂、抗牛皮癣药、支气管扩张药、抗哮喘药和抗糖尿病药。
29.权利要求28的药用组合物，其中所述一种或多种其它的治疗剂中的一种为抗炎药。
30.权利要求29的药用组合物，其中所述抗炎药选自甾族化合物和NSAID。
权利要求
1.一种由式I代表的化合物或其盐，
其中W选自芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基；W1选自亚芳基、取代的亚芳基、亚杂芳基和取代的亚杂芳基；A选自＝O、＝S和＝NH；R选自一个直接键、亚链烯基和-(CH2)n-；
其中
n选自1和2；X选自-C(O)-、-CH2-和S(O)2；M选自
其中
为二价的4-、5-、6-或7-元杂环部分，
其中氮原子为与X的连接点；R1、R2和R3独立选自-H、-OH、-NH2、卤原子、烷基、取代的
烷基、芳基、取代的芳基、烷氧基、取代的烷氧基、一烷基
氨基、取代的一烷基氨基、二烷基氨基、取代的二烷基氨基、
环烷基氨基、取代的环烷基氨基、烷基磺酰基氨基、取代的
烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、取代的芳基磺酰基氨
基、芳氧基、取代的芳氧基、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、
苄氧基和取代的苄氧基，或R1、R2和R3中的两个结合在一起可形成由独立选自下列的1-3
个取代基任选取代的3-、4-、5-、6-或7-元碳环或杂环残
基-OH、卤原子、-NH2、烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、
烷基氨基、苄氧基和杂芳基；R4选自-H和低级烷基；Y为一个直接键或选自-C(O)-、-C(O)NH-、亚链烯基、亚链炔基
和-(CH2)kY2的二价基团，
其中
k选自1、2和3；和
Y2为一个直接键或选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-和-NY3-的
二价基团，
其中
Y3选自-H和低级烷基；
Z选自亚芳基、取代的亚芳基、亚杂环基、取代的亚杂
环基、亚环烷基和取代的亚环烷基；A1为一个直接键或选自亚链烯基、亚链炔基、-(CH2)t-和-O(CH2)v
的二价基团，
其中
t选自1、2和3；和
v选自0、1、2和3；和R5选自-OH、低级烷氧基、-N(H)OH、
其中
为二价的4-、5-、6-或7-元杂环部分，
其中氮原子为与X的连接点；R6和R7独立选自-H、-OH、卤原子、烷基和烷氧基；Y1为选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-和-NY4-的二价基团，
其中
Y4选自-H和低级烷基；Z1为选自亚芳基、取代的亚芳基、亚杂环基、取代的亚杂
环基、亚环烷基和取代的亚环烷基的二价基团；A2为一个直接键或选自亚链烯基、亚链炔基和-(CH2)e-的二
价基团，
其中
e选自1、2和3；和R8选自-OH、低级烷氧基、-N(H)OH、
其中
其中
为二价的4-、5-、6-或7-元杂环部分，任选由独立选自下列的1-3个取代基取代烷基、烷氧基、羟烷基、-OH、苄氧基、-NH2、卤原子、芳基和杂芳基，所述部分可以与1或2个另外的碳环或杂环残基稠合，所述碳环或杂环残基由独立选自下列的1-3个取代基任选取代烷基、芳氧基、烷氧基、羟烷基、-OH、苄氧基、-NH2、卤原子、芳基和杂芳基；m和q独立选自0、1、2和3；X1选自-CH＝和-N＝；R9选自-H和低级烷基；R10选自-COOH、低级烷氧基羰基、
和
和Z2选自-H、COOH和低级烷氧基羰基；和
其中R11选自-O-、
和-NR12-
其中
R12选自-H、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷
基、芳基、取代的芳基、苄基、取代的苄基、低级
链烯基、取代的低级链烯基和低级链炔基；
左手键为与-X-的连接点而右手键为与-Z3的连接点；Z3选自一个直接键、具有1-12个碳原子的二价脂族烃部分，
其中
一个或多个碳原子可以被-O-或-NR13-置换，
其中
R13选自-H和低级烷基，和
连接于脂族碳原子的一个或多个氢原子可被低级烷
基置换；和
其中
x选自0和1；y选自1、2和3；和R14选自-H、-OH和卤原子，
和，当R11为-NR12，
其中Z4选自
其中
R14a选自-H、-OH、低级烷基和卤原子；
和
其中
左手键为与R11的连接点而右手键为与Q2的
连接点；Q2为选自亚芳基、取代的亚芳基、亚杂环基、取代的亚杂
环基、亚环烷基、取代的亚环烷基的二价基团，
其中R15和R16独立选自-H、卤原子
和低级烷基；和
其中R17和R18独立选自-H、低级烷基、
取代的低级烷基和低级链烯基；和L1选自-COOH和-COOR19
其中
R19为低级烷基。
2.权利要求1的化合物或其盐，其中M为
3.权利要求1的化合物或其盐，其中M为
4.权利要求1的化合物或其盐，其中M为
5.权利要求1的化合物或其盐，其中M为
6.权利要求2的化合物或其盐，其中R1、R2和R3中的至少一个基团为-OH或卤原子。
7.权利要求6的化合物或其盐，其中A为＝O，R为-(CH2)n-和X为-C(O)-。
8.权利要求7的化合物或其盐，其中Y选自亚链烯基、亚链炔基和-(CH2)kY2；Y2选自一个直接键、-O-、-S(O)和-NY3-，而Y3为-H。
9.权利要求8的化合物或其盐，其中Y选自-O-和-NY3-。
10.权利要求2的化合物或其盐，其中W为未取代的苯基或在其邻位具有1或2个选自低级烷基和卤原子的取代基的苯基。
11.权利要求10的化合物或其盐，其中W1为未取代的亚苯基或在其相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的一个取代基的亚苯基。
12.权利要求2的化合物或其盐，其中W1为在其相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的一个取代基且具有1-3个选自低级烷基和卤原子的取代基的亚苯基。
13.权利要求2的化合物或其盐，其中A1为一个直接键或-(CH2)t-。
14.权利要求13的化合物或其盐，其中A1为一个直接键。
15.权利要求14的化合物或其盐，其中R5为-OH。
16.权利要求2的化合物或其盐，其中W为未取代的苯基或在其邻位具有1或2个选自低级烷基和卤原子的取代基的苯基；W1为未取代的亚苯基或在其相对于-NH-的邻位具有选自甲氧基、低级烷基和卤原子的一个取代基的亚苯基；R为-CH2-；X为-C(O)-和R5为-OH。
17.权利要求16的化合物或其盐，其选自
18.权利要求17的化合物或其盐，其选自
19.权利要求2的化合物或其盐，其中R5为低级烷氧基。
全文摘要
公开了选择性抑制配体与α4β1整联蛋白(VLA－4)结合的化合物和它们的制备方法。在一个实施方案中，本发明的化合物由式(I)表示。本发明的化合物作为VLA－4介导的细胞粘附的选择性抑制剂，用于治疗与这种粘附有关的病变，包括，但不限于诸如炎性和自身免疫性反应、糖尿病、哮喘、牛皮癣、炎性肠道疾病、移植排斥反应和肿瘤转移。还公开了抑制VLA－4介导的细胞粘附的方法和治疗与VLA－4介导的细胞粘附有关的疾病的方法。
文档编号A61K31/5375GK1391473SQ00809510
公开日2003年1月15日 申请日期2000年6月30日 优先权日1999年6月30日
发明者J·J·巴德温, E·麦当娜德, K·J·莫里尔蒂, C·R·撒尔科, 町永信雄, 中山敦, 千叶淳, 饭村信, 米田贺行 申请人:第一制药株式会社, 法马科皮亚公司