专利名称：鲜地黄制剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及以新鲜植物为原料的药品制备方法，特别是中药鲜地黄制剂的制备方法。
地黄为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch的新鲜或干燥块根，是一味常用中药。在中医临床上根据治疗目的的不同，有鲜用、干用和熟用的不同。根据历代本草和医书记载，鲜地黄与干地黄在性味上有寒与凉之分，鲜地黄性味甘、苦，大寒，功效长于清热，凉血，开胃，生津。常用于温病伤阴、大热烦渴、吐血、咳血等多种血症及消渴便秘等。在清热生津和止血功效上，鲜地黄的作用均胜于干地黄。干地黄性味甘、苦，凉，具有凉血、止血之功效。对鲜地黄和干地黄功效主治之不同及对鲜地黄之临床特殊疗效，历代医书均有论述。如，《名医别录》载“主治妇人崩中血不止及产后血上薄心……，皆捣饮之。”，《外台秘要》用鲜地黄汁入药治产后腰痛和产后出血，《子母秘录》中用鲜地黄汁治疗小儿毒痢。
近二、三十年来国内外学者对它的化学成分和药理作用进行了大量的、比较系统的研究工作。
化学成分地黄的化学成分以甙类为主，其中又以环稀醚萜甙类为主。从鲜地黄分得的环稀醚萜甙有益母草甙(leonuride)、桃叶珊瑚甙(aucubin)、梓醇(catalpol)、地黄甙(rehmannioside)A、B、C、D，美利妥双甙(melittoside)等十多种，以梓醇的含量最高。又含糖类D-葡萄糖(D-glucose)、D-半乳糖(galactose)、D-果糖(D-fructose)、蔗糖(sucerse)、棉子糖(raffunose)、水苏糖(stachyose)、甘露三糖(manninotriose)等，以水苏糖含量最高，达64.9％。还含有赖氨酸(lysine)、组氨酸(histidine)、精氨酸(arginine)等20多种氨基酸，以及胡罗卜甙(daucosterol)、D-甘露醇(D-mannitol)等。此外，尚有微量元素、有机酸类及其它成分。日本学者的研究证明鲜地黄中梓醇和水苏糖的含量均比干地黄高数十倍以上。因此传统习惯认为经过脱水干燥，便于保存的地黄不可能保有鲜地黄所特具的药效。
药理作用药理实验证明，地黄对内分泌系统、心血管系统、免疫系统都有某些影响。鲜地黄可明显促进刀豆球蛋白A(ConA)激活的脾淋巴细胞DNA和蛋白质的生物合成，其促进DNA合成的最适浓度为200mg/ml，DNA合成高峰在48小时。鲜地黄能纠正甲亢大鼠肾脏β受体数量的增加，使甲状腺功能恢复到正常。还能加快小鼠多能造血干细胞、骨髓红系造血祖细胞的增殖、分化作用。地黄及其多糖具有较强的免疫增强、抗肿瘤、抗放射作用及拮抗免疫抑制剂的活性。并认为地黄的抗肿瘤作用主要是激活机体的免疫监视系统。但是炮制后的熟地黄免疫增强作用减弱。地黄及其多糖有明显的降血糖作用，特别对糖尿病患者尤为有效；地黄有降血压作用，促进皮肤血液循环；地黄还具有拮抗自由基对机体的损伤作用。因此，地黄对老年性疾病可能有治疗作用。
由此可见，中医临床在历史上用鲜地黄治疗某些疾病，有其科学道理。但是，由于鲜地黄的新鲜药材质地脆嫩，多汁，在室温下保存，几天内即变色、腐烂或干枯，难于贮存和运输，使实际应用遇到困难，近年来中医临床多以干地黄代替鲜地黄使用，影响了对某些疾病的疗效。因此，在保证鲜地黄有效成分不受损失的情况下，运用现代科学技术，制备出可在常温下贮存运输、可工业化生产、质量标准可控和方便医生和病人使用的鲜地黄制剂是非常必要的。
本发明的目的是提供一种中药鲜地黄制剂的制备方法，该方法利用现代科技手段，对鲜地黄进行加工处理，适宜大规模工业化生产，产品能保持鲜地黄原有的药效作用，又便于储存、运输和使用，可为中医临床使用鲜地黄提供药品，从而提高临床疗效；也可为含有鲜地黄的其他中成药提供半成品。
本发明是一种将鲜地黄制成成品或半成品制剂的制备方法，其具体方法是取采挖后48小时内的新鲜地黄药材，洗净泥土，在低温下(5-10℃)用榨汁机榨汁，取鲜地黄汁过滤，然后用喷雾干燥设备进行喷雾干燥(进口温度120-150℃，出口温度50-80℃，压力1-2kg)，制得鲜地黄干粉。以此干粉为原料，可进一步加工成胶囊剂、颗粒剂等剂型，密封包装即可。
本发明为新鲜植物药材的保存提供了新的途径与方法，也为中医临床使用鲜药提供了制剂成品。本发明使鲜地黄制剂在常温下可保存两年以上，并保持原有药效和有效成分；制备方法适合大规模工业化生产；成品的储存、运输和使用不受温度和地域的限制。
以下是关于应用本发明方法制备的鲜地黄制剂作为样品，与鲜地黄水煎液和干地黄水煎液的药效学比较实验和化学成分含量测定结果。1.药效学比较实验1.1鲜、干地黄对阿司匹林造模小鼠凝血时间的影响灌胃给予阿司匹林500mg/kg，可使小鼠凝血时间明显延长(与正常小鼠比较P＜0.01)。给小鼠灌服鲜地黄制剂2.5，5.0和10g/kg，均可明显拮抗由阿司匹林诱导的小鼠凝血时间延长(P＜0.01)；用鲜地黄水煎液灌胃，也可使阿司匹林处理小鼠凝血时间缩短(P＜0.05，或P＜0.01)；干地黄水煎液除5g/kg组能明显缩短凝血时间外(P＜0.05)，其余剂量组均呈现一定的缩短趋势，但统计学上无明显差异；鲜地黄制剂的作用明显强于干地黄(P＜0.05)，结果见表1。
表1鲜、干地黄对阿司匹林造模小鼠凝血时间的影响(n＝10)组别剂量(g/kg) 凝血时间s正常对照- 41.6±10.6阿司匹林模型0.5 107.2±34.3鲜地黄制剂 2.5 51.3±38.02)，3)5.0 62.9 ±29.32)10.063.3±15.12)，3)鲜地黄水煎液2.5 64.4±38.51)5.0 65.3±24.82)10.098.8±65.5干地黄水煎液2.5 99.3±47.25.0 78.6±23.41)10.083.5±22.1注与阿司匹林模型组比较1)P＜0.05，2)P＜0.01同剂量干地黄煎液组与鲜地黄汁组比较3)P＜0.052.2.鲜、干地黄对醋酸强的松龙诱导的免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响醋酸强的松龙5mg/kg/d×2d im，可造成小鼠非特异性免疫功能显著低下，巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数均明显低于正常小鼠(P＜0.01)；鲜地黄制剂和鲜地黄水煎液0.25，0.5，和1.0g/kg灌胃给药10天，均可不同程度地提高免疫低下小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能，吞噬百分率和吞噬指数均显著高于模型组(P＜0.05或P＜0.01)；干地黄水煎液也可明显提高免疫受抑小鼠的巨噬细胞吞噬功能。在三种药剂中，鲜地黄制剂的作用最强，其次为鲜地黄水煎液，结果见表2。
表2、鲜、干地黄对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(n＝10)组别剂量(g/kg) 吞噬百分率(％) 吞噬指数正常对照-39.78±11.69 0.888±0.364强的松龙模型5mg/kg 4.10±1.99 0.049±0.020鲜地黄制剂 0.25 24.30±19.042)，3)0.484±0.4882)，3)
0.515.60±4.242)，3)0.240±0.0712)，3)1.032.81±9.572)，3)0.608±0.3162)，3)鲜地黄水煎液0.25 14.56±12.521)0.243±0.2521)0.516.25±12.112)，3)0.312±0.3611)1.015.85±5.812)，3)0.221±0.0982)，3)干地黄水煎液0.25 8.05±4.981)0.112±0.0741)0.58.39±5.791)0.134±0.0971)1.06.15±4.93 0.093±0.083注与强的松龙模型组比较1)P＜0.05，2)P＜0.01，与同剂量干地黄煎液组比较3)P＜0.053.3.鲜、干地黄对甲状腺素造模小鼠脾脏淋巴细胞转化的影响按文献[3]甲状腺素致类阴虚小鼠造模方法，给小鼠皮下注射甲状腺素20mg/kg连续7天后，体外制备脾细胞悬液，用MTT法测定ConA诱导的脾脏淋巴细胞转化能力，结果显示类阴虚小鼠的脾脏淋巴细胞转化能力明显低下；灌胃给予鲜地黄制剂和鲜地黄水煎液在一定程度上增强脾脏淋巴细胞转化能力，但统计学上无显著意义。干地黄水煎液对ConA诱导的淋巴细胞转化无明显的增强作用(结果见表3)。
4.4鲜、干地黄对甲状腺素造模小鼠脾脏淋巴细胞碱性磷酸酶表达的影响在脾脏淋巴细胞中，碱性磷酸酶只在分化的B淋巴细胞上表达，而在T淋巴细胞上不表达。当B淋巴细胞未受到分裂原刺激分化时，这种酶的活力很低，当B淋巴细胞用LPS刺激而增殖、分化时，相应地表达碱性磷酸酶的活性增高。结果表明，甲状腺素诱导的类阴虚小鼠的脾脏淋巴细胞，在LPS刺激下，碱性磷酸酶的表达比正常小鼠明显降低；灌胃给予鲜地黄制剂和鲜地黄水煎液连续10天，能明显提高类阴虚小鼠脾脏淋巴细胞碱性磷酸酶表达活性(与模型组比较P＜0.05；或P＜0.01)。干地黄水煎液也可明显提高碱性磷酸酶活性(与模型组比较P＜0.05)，但其作用比鲜地黄制剂弱(同剂量干地黄煎液与鲜地黄制剂相比，P＜0.05)(结果见表3)。表3、鲜、干地黄对类阴虚小鼠脾脏淋巴细胞转化和碱性磷酸酶表达的影响(n＝8)组别剂量 淋巴细胞转化碱性磷酸酶(g/kg) OD值OD正常对照- 0.240±0.0960.574±0.1642)甲状腺素模型0.02 0.192±0.0520.311±0.069鲜地黄制剂0.50.260±0.107 0.434±0.1171)1.00.245±0.062 0.459±0.0912)鲜地黄水煎液 0.50.233±0.065 0.482±0.0872)1.00.221±0.051 0.494±0.2001)干地黄水煎液 0.50.164±0.049 0.383±0.0891)1.00.164±0.047 0.380±0.0881)注与甲状腺素模型组比较1)P＜0.05，2)P＜0.01；与同剂量干地黄煎液比较4)P＜0.05上述药效学实验证实，鲜地黄与干地黄的药理作用在止血和免疫作用方面均有明显不同。鲜地黄制剂、鲜地黄水煎液和干地黄水煎液均在一定程度上拮抗阿司匹林诱导的小鼠凝血时间延长，但鲜地黄制剂的作用明显强于干地黄；鲜地黄制剂、鲜地黄水煎液能使类阴虚小鼠的脾脏淋巴细胞碱性磷酸酶的表达能力明显增强。鲜地黄制剂还可增强ConA诱导的脾脏淋巴细胞转化功能。干地黄煎液对类阴虚小鼠的脾脏B淋巴细胞也有明显的增强作用，但其作用弱于鲜地黄制剂。
在止血和免疫药理实验中，鲜地黄制剂的作用最强，鲜地黄水煎液次之，干地黄水煎液的作用最弱，说明加热对鲜地黄的止血和免疫药理作用有关的活性成份有一定的影响。2.化学成分含量测定采用高效液相色谱法测定地黄中梓醇的含量和苯酚-硫酸法测定地黄中的还原糖和多糖的含量，经过对干地黄、鲜地黄和鲜地黄制剂进行比较实验研究，结果鲜地黄制剂中上述三种成分的含量均高于干地黄。详见表4。表4干地黄、鲜地黄、鲜地黄制剂中的梓醇、还原糖和多糖的含量测定结果批号 梓醇(％) 还原糖(％) 多糖(％)1 2 3 1 2 312 3980327 4.219.489.5014.03 27.23 27.183.1299.029.10971120 4.467.817.7928.73 46.79 46.515.0459.869.62注1干地黄；2鲜地黄；3鲜地黄制剂以上关于鲜地黄制剂的药效学实验和化学成分含量测定结果都说明鲜地黄制剂保持了鲜地黄的药理作用和化学成分，而且可在常温下贮存，使用方便。由于避免了煎煮过程中的有效成分的损失，药效高于鲜地黄水煎液。
实施实例取采挖后48小时内的新鲜地黄药材10kg，洗净泥土，在低温下(5-10℃)用榨汁机榨汁，取鲜地黄汁过滤，然后用喷雾干燥设备进行喷雾干燥进口温度145℃，出口温度75℃，压力1.5kg，得淡黄色或黄色鲜地黄干粉。
散剂[处方] 鲜地黄干粉 1份乳糖0.4-0.6份[制法]将上述原料混匀，密封包装。每服1袋，每日2次。每袋2g。(相当鲜地黄15g)[用法]每服1袋，每日2次。
胶囊剂[处方] 鲜地黄干粉 1份乳糖0.4-0.6份硬脂酸镁0.03份[制法]将上述原料混匀，干法制粒，装入空胶囊，密封包装。每粒0.5g。每服4粒，每日2次。
颗粒剂[处方] 鲜地黄干粉 1份乳糖0.4-0.6份硬脂酸镁0.03份[制法]将上述原料混匀，干法制粒，整粒，密封包装。每袋2g。(相当鲜地黄15g)[用法]每服1袋，每日2次。
权利要求
1.一种中药鲜地黄制剂的制备方法，其特征在于该制备方法由下述步骤构成(一)选料选取距采挖离土时间48小时之内的新鲜地黄药材，洗净泥土；(二)将选取原料在低温5-10℃条件下用榨汁机榨汁；(三)用喷雾干燥设备喷雾干燥，制得鲜地黄粉末；(四)密封包装。
2.根据权利要求1所述的中药鲜地黄制剂的制备方法，其特征在于，将鲜地黄粉剂制成散剂或胶囊剂或颗粒剂。
全文摘要
一种中药鲜地黄制剂的制备方法,将新鲜地黄药材,洗净泥土,在低温下(5－10℃)用榨汁机榨汁,取鲜地黄汁过滤,喷雾干燥,制得鲜地黄干粉,密封包装即可。以此干粉为原料,可进一步加工成胶囊剂、颗粒剂等剂型,本发明使鲜地黄制剂在常温下可保存两年以上,并保持原有药效和有效成分;制备方法适合大规模工业化生产;成品的储存、运输和使用不受温度和地域的限制。可为中医临床使用鲜地黄提供药品,从而提高临床疗效;也可为含有鲜地黄的其他中成药提供半成品。
文档编号A61P37/02GK1364469SQ01100238
公开日2002年8月21日 申请日期2001年1月12日 优先权日2001年1月12日
发明者杨桦, 易红, 梁爱华, 李计萍, 郝近大 申请人:中国中医研究院中药研究所