专利名称：一种抗白血病药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗白血病药物，特别是采用表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为主要原料的抗白血病药物。
白血病的发病除遗传因素之外，还与环境因素密切相关。我国每年新增白血病人4-5万，白血病复发病人15万以上。在急性早幼粒白血病治疗方面，目前多采用全反式维甲酸(ATRA)作为分化诱导剂，可使大多数患者病情缓解。但维甲酸耐药及维甲酸综合症可导致患者短期复发，再使用ATRA治疗则因耐药产生而达不到治疗效果。骨髓移植是治疗慢性粒细胞白血病较理想的方法之一，但供体困难，加之异基因或自体移植都需经预处理杀灭恶性增殖的克隆后，才能植入新的干/祖细胞，临床上较多应用的干扰素疗法其疗效也不甚满意。1992年以来，我国学者将三氧化二砷(As2O3)用于治疗急、慢性，耐药性白血病临床，获得了很好的疗效，在国际上引起很大反响。进一步的基础研究表明，As2O3抗白血病的机制是，可显著诱导白血病细胞的凋亡。然而As2O3为重金属化合物，有极强细胞毒效应，在体内易蓄积且不易代谢，接受治疗的病人存在强烈的毒性反应。
本发明的目的是提供一种抗白血病的作用、机制一致，但无蓄积、无毒性反应的抗白血病药物。
本发明以茶叶中儿茶素单体-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为原料，按常规制剂工艺，制备成浓度范围为50-500μg/ml的制剂，可以是口服药，也可以是注射剂。更优选范围为250-500μg/ml。
EGCG是茶中儿茶素最主要的一个单体，具有极强的供氢能力，其分子结构式如下 本发明为适合于治疗白血病人的临床药物剂型，特别是注射剂，用以治疗急性早幼粒白血病，慢性粒细胞白血病，维甲酸耐药早幼粒细胞白血病。本发明可以是口服药，也可以是注射剂。
本发明是一种白血病基因调控剂，具有显著抑制急性早幼粒白血病细胞HL-60的生长，并可诱导其凋亡的作用，且无积蓄、无任何毒副作用，具有高效、低毒的抗急性、慢性、耐药性的特点，是一种理想的白血病治疗药物。
实施例1.EGCG对白血病细胞生长影响的实验将人急性早幼粒白血病NK4细胞，人急性早幼粒白血病HL-60细胞，慢性粒细胞白血病K562细胞，维甲酸耐药早幼粒白血病MR-2细胞分别接种于RPMI-1640培养液中，于37℃含5％CO2的培养箱内培养传代，接种于96孔培养板，接种时加不同浓度EGCG，每浓度平行4孔，48小时后MTT还原反应测定肿瘤生长抑制率，结果见表1。
表1 不同浓度EGCG对白血病细胞生长的影响(x±s)
从表1结果看到，EGCG对各种白血病细胞的生长都有较强的抑制作用，而且呈明显的剂量-效应关系，即随EGCG浓度的提高，对白血病细胞生长的抑制作用也逐步增强。
细胞凋亡是当前肿瘤学研究的一个热点，尤其在筛选抗肿瘤的药物时被广泛运用。细胞凋亡有着独特的生化和形态学特征，通过对被EGCG作用后的各种白血病细胞的死亡形式进行了观察，结果如下被250-500μg/ml浓度间EGCG作用后各种白血病细胞均出现细胞凋亡所特有的形态学特征核皱折，染色质凝集，裂解成碎片后形成由膜包绕的凋亡小体。
被250-500μg/ml浓度间EGCG作用后各种白血病细胞，在以核小体间DNA降解为标志的凝胶电泳观察中，均可见典型的DNA条带，证实EGCG的诱导癌细胞凋亡作用。
流式细胞术是一种先进、精确的定量检测凋亡细胞的方法。实验观察表明，EGCG在250-500μg/ml浓度范围内，诱导人急性早幼粒白血病NK4细胞，人急性早幼粒白血病HL-60细胞，慢性粒细胞白血病K562细胞，维甲酸耐药早幼粒白血病MR-2细胞凋亡率分别达到71.85％、75.63％、81.22％、69.12％。结果还表明，EGCG对癌细胞分化阻断作用主要发生在细胞分化早期。
权利要求
1.一种抗白血病药物，其特征在于本发明以茶叶中儿茶素单体-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为原料，按常规制剂工艺，制备成浓度范围为50-500μg/ml的制剂，可以是口服药，也可以是注射剂。
2.根据权利要求1所述的药物，其特征在于更优选的浓度范围为250-500μg/ml。
全文摘要
一种抗白血病药物。本发明采用表没食子儿荼素没食子酸酯(EGCG)为主要原料的抗白血病药物,按常规制剂工艺,制备成浓度范围为50－500μg/ml的制剂。本发明为适合于治疗白血病人的临床药物剂型,特别是注射剂,用以治疗急性早幼粒白血病,慢性粒细胞白血病,维甲酸耐药早幼粒细胞白血病;是一种白血病基因调控剂,具有显著抑制急性早幼粒白血病细胞HL－60的生长,并可诱导其凋亡的作用,且无积蓄、无任何毒副作用,具有高效、低毒的抗急性、慢性、耐药性的特点,是一种理想的白血病治疗药物。
文档编号A61P35/00GK1377644SQ0110698
公开日2002年11月6日 申请日期2001年4月2日 优先权日2001年4月2日
发明者曹进, 赵燕, 刘箭卫 申请人:中南大学