专利名称：新的维生素d类似物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的维生素D类似物，其对某些细胞、包括皮肤细胞和癌细胞显示很强的诱导分化和抑制不良增殖的活性并具有免疫调节作用，本发明还涉及含有这些化合物的药物制剂、所述制剂的剂量单位以及所述化合物在治疗和预防以异常的细胞分化和/或细胞增殖为特征的疾病中的用途。
还证实1，25(OH)2D3可以刺激细胞分化和抑制过度的细胞增殖(Abe，E.等，Proc.Natl.Acad.Sci.，U.S.A.，78，4990-4994(1981))，有人提出该化合物有可能用于治疗以异常的细胞增殖和/或细胞分化为特征的疾病例如白血病、骨髓纤维化和牛皮癣。
此外，还有人提出使用1，25(OH)2D3或其前药1α-OH-D3来治疗高血压(Lind，L.等，Acta Med.Scand.，222，423-427(1987))和糖尿病(Inomata，S.等，Bone Mineral.，1，187-192(1986))。根据最近对遗传性维生素D抗性和脱发之间的关系的观察结果，有人提出1，25(OH)2D3的另一种适应症是，用1，25(OH)2D3治疗可以促进头发的生长(Editorial，Lancet，3月4日，478页(1989))。此外，局部涂抹1，25(OH)2D3可以减少雄性叙利亚仓鼠耳中的皮脂腺大小这一事实表明该化合物有可能用于治疗痤疮(Malloy V.L.等，The Tricontinental Meeting forInvestigative Dermatology，Washington，(1989))。
但是，由于众所周知的1，25(OH)2D3对钙代谢的影响(升高的血液浓度会迅速引起高血钙)，这些适应症的治疗可能性受到了严重的限制。因此，该化合物及其一些有效的合成类似物不能令人满意地用作治疗牛皮癣、白血病或免疫疾病这些需要以相对高的剂量连续给药的疾病的药物。
最近公开了一系列维生素D类似物，与在体内对钙代谢的影响(通过增加的血清钙浓度和/或增加的尿钙排泄来衡量，这种影响不利地限制了其可以安全给药的剂量)相比，它们对体外诱导细胞分化/抑制细胞增殖的活性具有一定程度的选择性。在这一选择性的基础上，首先出现的药物是卡泊三醇(INN)或卡泊三烯(calcipotriene)(USAN)，现在它是全世界公认的局部治疗牛皮癣的有效并且安全的药物。
对在这一基础上选择的另一种维生素D类似物Seocalcitol[1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-(5’-乙基-5’-羟基-庚-1’(E)，3’(E)-二烯-1’-基)-9，10-断孕甾(secopregna)-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯]的研究支持了以亚毒性剂量全身性给药维生素D类似物可以在体内抑制乳腺癌细胞增殖这一理论(Colston，K.W.等，Biochem.Pharmacol.44，2273-2280(1992)和Mathiasen，I.S.等，J.Steroid Biochem.Molec.Biol.，46，365-371(1993))。
WO98/47866中公开了具有如下式的相关化合物 其中A是单键或双键，T是CH2或CH2CH2；B是CH2CH2、CH＝CH或C≡C，R1和R3是H或OH，C(R，R)是CH2或C＝CH2，R2是CH3而R4是H，或者R2是H而R4是CH3，L是苯基而R5是OH或C(C1-4-烷基)2OH，或者L-R5是被C(C1-4-烷基)2OH 5-取代的2-呋喃基，条件是当L是苯基、A是单键、B是C≡C、T是CH2、R1和R3均是OH、C(R，R)是C＝CH2、R2是CH3、R4是H并且R5是C(CH3)2OH时，R5必需是在邻位或对位。WO98/47866中记载了这些化合物可用于治疗或预防维生素D依赖型疾病，特别是牛皮癣、基底细胞癌、角质化的病症和角化病、白血病、骨质疏松、伴有肾衰竭的甲状旁腺功能亢进、移植排斥和移植物对抗宿主的疾病。
当B是CH＝CH时，WO98/47866中所描述的化合物没有给出在双键处(22位)的立体化学。但是，从它所公开的例子和合成方法来看，显然仅涉及22-反式的化合物。
尽管有大量的现有技术尝试提供治疗有效的产物，但仍需要同时具有所需的治疗活性和最低的毒性作用的新的维生素D类似物。本发明的化合物提供了一种迄今为止从未公开过的维生素D类似物，它具有细胞增殖抑制活性和细胞分化促进活性而没有增加血清钙水平和皮肤刺激的不利副作用。
发明概述本发明涉及通式I的化合物 其中X表示氢或羟基；R1和R2可以相同或不同，表示氢、可选地被一个羟基或一个或多个氟原子取代的(C1-C4)烷基，或者R1和R2与它们所连接的碳原子合在一起形成(C3-C5)碳环；R3表示氢、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或卤原子，例如氟、氯、溴或碘。
标有星号的碳原子的构型可以是S或R。
显然，式I化合物在22位的双键上具有顺式构型。本发明发现22-顺式的化合物是活性强得多的刺激细胞分化和抑制不良细胞增殖的化合物。
发明详述优选的实施方案在本发明的化合物中，优选X表示羟基；R1和R2相同并且优选表示可选地被一个羟基或一个或多个氟原子取代的(C1-C2)烷基；并且R3表示氢、(C1-C2)烷基、氟或氯。C(R1)(R2)(X)基团的优选位置是间位和对位。更优选其中R1和R2均表示甲基、三氟甲基或乙基并且R3表示氢的式I化合物。
本发明还包括纯净的式I化合物的非对映异构体或式I化合物的非对映异构体混合物。
优选的本发明化合物选自1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[2(Z)-(3-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-乙烯基]-9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，1(S)，3(R)-二羟基-20(S)-[2(Z)-(4-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-乙烯基]-9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[2(Z)-(4-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-乙烯基]-9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，及其与可药用酸形成的可以在体内水解的酯。
本文中所用的术语“烷基”是指通过从任何碳原子上除去一个氢原子从烷烃衍生的任何一价基团，包括具有指定的碳原子数的正烷基和分别是伯、仲和叔烷基的亚类，包括，例如例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基和异丁基。烷烃是指通式为CnH2n+2的无环的支链或直链的烃，因此完全由氢原子和饱和的碳原子组成。
“卤素”旨在指氟、氯、溴或碘；优选氟、氯和溴。合成、反应本发明化合物可以按照反应方案Ia中的简要描述进行制备。
将式1a的炔烃(Calverley，M.J.和Bretting，C.Aa.S.；Bioorg.Med.Chem.Lett.9 1841-1844 1993)在催化量的钯配合物例如Pd(PPh3)4或Pd(PPh3)2Cl2、催化量的碘化亚铜(I)和作为溶剂的有机胺碱的存在下与式II的芳基侧链片断偶联生成式IIIa的中间体。将IIIa中的22-叁键用氢气在催化量的Lindlar催化剂的存在下还原成22-顺-双键。
将中间体IVa转化成Ia涉及光异构化步骤和脱保护步骤，类似于在合成其它维生素D类似物的最后阶段所用的步骤，参见欧洲专利0227826。
式Ib化合物(Ia的20-差向异构体)按照类似方式用20-差向异构体1b(Bretting C，Mφrk Hansen C，Rastrup Andersen N 1994，骨化三醇的22，23-炔类似物的化学和生物学Norman A W，Bouillon R，Thomasset M(编)Vitamin D-A Pluripotent Steroid HormoneStructural Studies，Molecular Endocrinology and ClinicalApplications。Walter de Gruyter，Berlin-New York，73-74页)作为原料按照反应方案Ib中的简要描述进行制备。
式II的侧链结构单元是已知化合物或者可以按照反应方案II中的简要描述进行制备。
或者，本发明化合物还可以按照反应方案III中的简要描述进行制备。
将在22位带有醛羰基的式2b的维生素D类似物(Calverley M.J.，Tetrahedron，43，4609，(1987))与式X的亚烷基正膦反应得到22(Z)和22(E)异构体的混合物，通过色谱法从其中分离出22(Z)异构体IV。
反应方案Ia
反应方案Ib 反应方案Ia和Ib的注解X1是溴或碘Y是氢、羟基或被保护的羟基X、R1，R2和R3如上所定义。a)Heck偶联，使用Pd(PPh3)2Cl2/碘化亚铜(I)作为催化剂。b)在Lindlar催化剂的存在下氢化。c)在三线态敏化剂例如蒽的存在下用hv异构化。d)用TBAF或HF脱保护。
反应方案II 反应方案II的注解E是低级烷基例如甲基、乙基或异丙基X1、R1、R2和R3如上所定义。a)用R1MgBr或R1MgI进行Grignard反应。b)用R2MgBr或R2MgI进行Grignard反应。c)与二氢吡喃反应。d)用Me3SiCl+碱进行硅烷基化。
反应方案III 反应方案III的注解R3如上所定义A是基团“C(R1)(R2)(Y)”，其中R1、R2和Y如上所定义，或易于转化成“C(R1)(R2)(Y)”的基团例如酯基。a)Wittig反应(亚烷基正膦X通过用碱处理易得的卤化三苯基烷基鏻XII就地制备)在整个公开文本中使用如下常规缩写But＝叔丁基，DMF＝N，N-二甲基甲酰胺，DMAP＝4-二甲基氨基吡啶，Et＝乙基，醚＝乙醚，石油醚＝石油醚，Me＝甲基，PPTS＝对甲苯磺酸吡啶鎓，Py＝吡啶，TBAF＝氟化四正丁基铵，TBS＝叔丁基二甲基硅烷基，THF＝四氢呋喃，THP＝四氢-4H-吡喃-2-基，Ts＝甲苯磺酰基。药理学方法为了证实式I化合物的效力，可以使用评估测试化合物对皮肤细胞的抗增殖活性、例如抗牛皮癣作用的试验，例如使用HaCaT，一种自发的无限增殖化的、非致瘤的人类皮肤角质细胞系(Mφrk Hansen，C.等，J.Invest.Dermatol.1，44-48(1996))测定3H-胸腺嘧啶核苷摄取的体外试验。
通常，1，25(OH)2D3对生物体钙平衡的典型影响、包括钙血和钙尿活性是本发明的维生素D类似物所不想要的，而选择性地例如抑制某些细胞的增殖而没有钙血效应和皮肤刺激性是希望的。因此，可以按照以上描述(Binderup，L.，Bramm，E.，Biochem.Pharmacol.37，889-895(1988))在大鼠中体内测定化合物的钙血活性。
此外，还可以按照先前描述(Binderup，L.，Bramm，E.，Biochem.Pharmacol.37，889-895(1988))在体外测定本发明化合物与现有技术的化合物相比，相对于骨化三醇的结合，与维生素D受体的结合。
本发明的化合物可用于药物组合物中，所述药物组合物可用于局部或全身性地治疗人类或兽类的疾病例如癌症、白血病、骨髓纤维化和牛皮癣、包括甲状旁腺功能亢进、特别是与肾衰竭有关的继发性甲状旁腺功能亢进、糖尿病、高血压、痤疮、脱发、皮肤老化、AIDS、神经变性疾病例如早老性痴呆、宿主对抗移植物的反应、移植物的排斥反应在内的许多疾病状态，用于预防和/或治疗类固醇诱导的皮肤萎缩，以及用于促进骨生成和治疗骨质疏松。
本发明的化合物可与其它药物或治疗方式联合使用。在牛皮癣的治疗中，可将本发明的化合物与其它抗牛皮癣的药物例如甾体或其它治疗方法例如光-或紫外光疗法或合并的PUVA-治疗联合使用。在癌症的治疗中，可将本发明的化合物与其它抗癌药或抗癌疗法例如放疗联合使用。在移植物排斥和移植物对抗宿主的反应的预防或自身免疫疾病的治疗中，有利地将本发化合物与其它免疫抑制/免疫调节药物或其它治疗方法联合使用，例如与环孢菌素A联合使用。
当然，达到治疗效果所需的式I化合物(以下称为活性成分)的量将随着具体的化合物以及给药途径和接受治疗的哺乳动物而变化。本发明化合物可以通过胃肠外、关节内、肠道或局部途径进行给药。当通过肠道给药时它们吸收良好，因此是治疗系统性疾病的优选的给药途径。在治疗皮肤疾病例如牛皮癣或眼的疾病时，更优选局部或肠道给药形式。
虽然活性成分可以以化学品原料的形式单独给药，但优选将其以药物制剂的形式提供。通常在制剂中活性成分占0.1ppm-0.1％(重量)。
因此，无论是兽用还是人用的本发明药物制剂均含有活性成分和可药用载体，并且可选地含有其它治疗成分。就可与制剂中的其它成分配伍并且不会对接受者产生损害而言，载体必需是“可接受的”。
制剂包括那些适于口服、眼部、直肠、胃肠外(包括皮下、肌肉内和静脉内)、经皮、关节内和局部给药的剂型。
术语“剂量单位”是指可以向患者施用的单元、即单个剂量，其易于处理和包装，并且是物理和化学稳定的单位剂量形式，其中包含活性物质或活性物质与固体或液体药物稀释剂或载体的混合物。
制剂可以方便地以剂量单位的形式提供，并可以用制药领域公知的任何方法制备。所有方法均包括将活性成分与由一种或多种辅助成分组成的载体混合的步骤。通常，所述制剂通过将活性成分与液体载体或细分散的固体载体或上述两种物质均匀并且紧密地混合进行制备，然后，如需要，将该产品加工成型为所需的制剂。
适于口服给药的本发明制剂可以制成单一的单位例如胶囊、小药囊、片剂或锭剂的形式，它们分别含有预定量的活性成分；可以是粉剂或颗粒剂的形式；可以是在水性液体或非水液体中的溶液或混悬液的形式；或是水包油乳液或油包水乳液的形式。活性成分还可以以大药丸、干药糖剂或糊剂的形式给药。
用于直肠给药的制剂可以是含有活性成分和载体的栓剂形式或是灌肠剂的形式。
适于胃肠外给药的制剂通常包括活性成分的无菌油性或水性制剂，优选它与接受者的血液是等渗的。经皮制剂可以是硬膏剂或贴剂的形式。
适于关节内或眼部给药的制剂可以是活性成分的无菌含水制剂的形式，所述活性成分可以是微晶形式，例如为含水的微晶混悬液的形式。对于关节内或眼部给药，还可将活性成分用脂质体或可生物降解的聚合物体系进行给药。
适于局部和眼部给药的制剂包括液体或半液体制剂，例如擦剂、洗剂、凝胶、敷剂、水包油或油包水乳剂例如霜剂、软膏剂或糊剂；或溶液或混悬液例如滴剂。
除前述成分外，本发明的制剂还可含有一种或多种其它成分，例如稀释剂、粘合剂、防腐剂等。
组合物可以进一步含有其它常用于治疗上述病理学状态的治疗活性化合物，例如用于治疗免疫学疾病的其它免疫抑制剂或用于治疗皮肤病的甾体化合物。
本发明还涉及对患有上述病理学状态之一的患者进行治疗的方法，所述方法包括向需要治疗的患者施用有效量一种或多种式I化合物，这些化合物或单独使用，或与一种或多种赋形剂或其它常用于治疗所述病理学状态的治疗活性化合物联合使用。采用本发明化合物和/或其它治疗活性化合物的治疗可以同时进行，也可以间隔进行。
在全身性治疗中，每日的给药剂量为0.001-2μg/kg体重，优选0.002-0.3μg/kg哺乳动物体重，例如0.003-0.3μg式I化合物/kg，一般相当于0.2-25μg的成人每日剂量。在皮肤病的局部治疗中，施用含有0.1-1000μg/g、优选1-500μg/g、更优选10-250μg式I化合物/g的软膏、霜剂或洗剂。在眼部的局部应用中，施用含有0.1-1000μg/g、优选1-500μg/g、更优选10-250μg式I化合物/g的软膏、滴剂或凝胶剂。用于口服的组合物优选配制成片剂、胶囊或滴剂，其每剂量单位含有0.05-100μg、优选0.1-50μg式I化合物。
将在以下的一般方法、制备例和实施例中对本发明进行进一步的描述。
对于核磁共振波谱(300MHz)，报道了氘代氯仿溶液中相对于内标物四甲基硅烷(δ＝0)或氯仿(δ＝7.25)的化学位移值(δ)。对于多重峰，无论是确定的(二重峰(d)、三重峰(t)、四重峰(q))还是不确定的(m)，给出的是大约中点的值，除非报道的是一个范围(s＝单峰，b＝宽峰)。偶合常数(J)以赫兹(Hz)给出，有时约为最接近的单位。
醚是乙醚，并且用钠干燥。THF用钠-二苯酮干燥。石油醚是指戊烷馏份。反应通常在氩气氛和室温下进行，除非另有说明。后处理方法涉及用指定的溶剂(或有机反应溶剂)稀释、依次用水和盐水萃取、用无水硫酸镁干燥然后真空浓缩得到残余物。在硅胶上进行色谱分离。表1 式I化合物的例子
*)＝-C(R1)(R2)(X)表2 式VII、VIII和IX的中间体的非限定性的例子
**)＝一般方法表3 式III和IV的中间体的非限定性的例子
***)＝-C(R1)(R2)(Y)一般方法一般方法1甲基碘化镁与式V的酯的反应向搅拌中的、冰冷的甲酯V(27mol)的干燥乙醚(20ml)溶液中于20分钟内滴加经过滤的格氏试剂溶液中，所述格氏试剂溶液用镁(1.47g，60mmol)和甲基碘(4.0ml，64mmol)在干燥的乙醚(40ml)中制得。室温搅拌2小时后，向反应混合物中缓慢地倒入水(40ml)。进行相分离，将水相用乙醚(3×50ml)萃取。将合并的乙醚相依次用1N盐酸(50ml)、水(3×50ml)和饱和氯化钠水溶液(50ml)萃取，用硫酸镁干燥然后真空浓缩得到深色的油。将该粗品油通过硅胶色谱纯化得到式VI的酮(次要产物)和式VII的醇(主要产物)。
如果方便的话，将式VII化合物用己烷或己烷和乙醚的混合物结晶。另一种方法一般方法1a采用一般方法1的方法，所不同的是用溴代乙烷代替甲基碘。一般方法2式VTTT的四氢-4H-吡喃-2-基-醚的制备将式VII的醇(16mmol)溶于二氯甲烷(50ml)，加入3，4-二氢-2H-吡喃(2.4ml，26mmol)和对甲苯磺酸吡啶鎓(0.43g，1.7mmol)，然后将混合物室温搅拌4小时。将反应混合物用乙醚(150ml)稀释然后用水(3×50ml)和饱和氯化钠水溶液(50ml)萃取，干燥然后真空浓缩。将粗产物通过硅胶色谱纯化。一般方法3式IX的三甲基甲硅烷基醚的制备氩气氛下，在搅拌并在冰浴中冷却的条件下向式VII化合物(14mmol)的干燥二氯甲烷(50ml)溶液中加入三乙胺(42mmol)和DMAP(25mg)。在0℃搅拌下于20分钟内滴加氯化三甲基硅烷(40mmol)，然后继续在室温下搅拌2-6小时。加入乙醚(500ml)和水(100ml)。分出有机相，用水(3×50ml)和饱和氯化钠水溶液(50ml)萃取，干燥然后真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化得到黄色油状的所需产物。一般方法4化合物1和式II的侧链片断的Heck偶联将化合物1(100mg，0.17mmol)、式II化合物(0.2mmol)、二氯化二(三苯膦)钯(II)(24mg)和碘化亚铜(I)溶于干燥三乙胺(5ml)和干燥THF(4ml)的混合物并在氩气氛下搅拌过夜。向反应混合物中加入水(15ml)并用乙醚(85ml)稀释。分出有机相，用水(3×15ml)和饱和氯化钠水溶液(15ml)萃取，干燥然后真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化(洗脱剂1-5％乙醚的戊烷溶液)得到无定形树胶状的所需产物。一般方法5在Lindlar催化剂存在下的氢化反应将式III化合物(0.57mmol)溶于二氯甲烷(5ml)和乙醇(20ml)的混合物。加入Lindlar催化剂(100mg)并将混合物在氢气氛下搅拌直至停止氢气的消耗。滤除催化剂并将滤液用乙酸乙酯(80ml)稀释。将有机相用水(3×15ml)和饱和氯化钠水溶液(15ml)萃取，干燥然后浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化(洗脱剂1-5％乙醚的戊烷溶液)得到无定形树胶状的所需产物。一般方法6式IV化合物异构化成相应的5(Z)异构体将适宜的式IV化合物(0.3mmol)、蒽(100mg)和三乙胺(0.05ml)的二氯甲烷(20ml)溶液在氩气氛下在Pyrex烧瓶中用TQ760 Z2型高压紫外灯(Hanau)产生的紫外线在搅拌下在约10℃照射20分钟。将反应混合物真空浓缩然后用石油醚(2×5ml)处理。过滤后，将滤液真空浓缩然后通过色谱纯化(用乙醚和石油醚的混合物作为洗脱剂)得到制备例的标题化合物。一般方法7与式2b的羰基化合物的Wittig反应将卤化三苯基烷基鏻(XII)(1.2mmol)溶于二氯甲烷(10ml)。于氩气氛下加入2N甲醇钠(1.2ml)和1(S)，3(R)-二-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-20(R)甲酰基-9，10-断孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(2b)(1mmol)。将反应混合物在氩气氛下搅拌过夜，颜色由深橙色变为黄色。
将反应混合物是用乙醚(25ml)稀释并用水(2×10ml)萃取，干燥然后浓缩得到黄色油状的22-顺和22-反异构体的混合物。通过硅胶色谱(用乙醚和石油醚的混合物作为洗脱剂)分离出22-顺异构体。一般方法8式XII的卤化三苯基烷基鏻的制备将三苯基膦(2.62g，20mmol)和式XI的溴化物(20mol)溶于苯(12ml)并在室温下搅拌过夜。滤除沉淀，用苯(5×2ml)和石油醚(5ml)洗涤然后真空干燥得到式XII的卤化三苯基烷基鏻。一般方法9用HF脱保护向搅拌中的适宜的甲硅烷基保护的式IV(z)化合物(0.25mmol)的乙酸乙酯(1.5ml)溶液中加入乙腈(6ml)，然后加入5％氢氟酸的乙腈-H2O7∶1溶液(2.0ml)。继续搅拌45-60分钟后，加入1M碳酸氢钾(10ml)并将反应混合物进行后处理(乙酸乙酯)。将残余物通过色谱纯化(洗脱剂30％戊烷的乙酸乙酯溶液)得到所需的式I化合物。一般方法10
用TBAF脱保护向适宜的甲硅烷基保护的式IV(z)化合物(0.18mmol)的THF(4.5ml)溶液中加入TBAF三水合物(0.29g，0.9mmol)，然后将该混合物在搅拌下加热回流1小时。加入0.2M碳酸氢钠(5ml)后，将混合物进行后处理(乙酸乙酯)。将残余物通过色谱纯化(洗脱剂30％戊烷的乙酸乙酯溶液)得到所需的式I化合物。一般方法11甲基锂与式XIII的酯的反应氩气氛下，向冷却至-30℃的适宜的式XIII化合物(0.33mmol)的干燥乙醚(10ml)溶液中加入甲基锂(0.45ml，1.6M的乙醚溶液)。将反应混合物在2小时的时间内缓慢升温至室温然后用乙醚(15ml)稀释。将乙醚相用水(3×5ml)和饱和氯化钠水溶液(5ml)萃取，干燥然后真空蒸发得到粗产物。将其通过色谱纯化(用乙醚和石油醚的混合物作为洗脱剂)得到制备例的标题化合物。一般方法12用PPTS对式III化合物脱保护向适宜的化合物III(0.16mmol)的99％乙醇(2ml)溶液中加入PPTS(2mg)，将该混合物在氮气氛下于50℃搅拌1小时。加入乙酸乙酯(15ml)并将混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(3×5ml)和水(5ml)萃取。将有机相干燥然后真空蒸发得到粗产物，将其通过色谱纯化得到所需化合物。制备例制备例1化合物3方法一般方法1原料4-碘苯甲酸甲酯1H NMRδ＝7.66(m，2H)，7.24(m，2H)，1.72(s，1H)，1.55(s，6H)ppm制备例2化合物4方法一般方法1原料3-碘苯甲酸甲酯1H NMRδ＝7.85(t，1H)，7.57(dd，1H)，7.41(dd，1H)，7.07(t，1H)，1.56(s，6H)ppm制备例3化合物5方法一般方法2原料化合物31H NMRδ＝7.65(m，2H)，7.20(m，2H)，4.42(m，1H)，3.95(m，1H)，3.39(m，1H)，1.83(m，1H)，1.70-1.35(m，5H)，1.63(s，3H)，1.49(s，3H)ppm制备例4化合物6方法一般方法2原料化合物41H NMRδ＝7.79(t，1H)，7.58(dd，1H)，7.42(dd，1H)，7.07(t，1H)，4.44(m，1H)，3.95(m，1H)，3.40(m，1H)，1.84(m，1H)，1.72-1.35(m，5H)，1.63(s，3H)，1.49(s，3H)ppm制备例5化合物7方法一般方法3原料化合物31H NMRδ＝7.62(m，2H)，7.18(m，2H)，1.54(s，6H)，0.09(s，9H)ppm制备例6化合物42方法一般方法7原料溴化4-(2-羟基-2-丙基)-苯基甲基-三苯基鏻。1H NMRδ＝7.42(m，2H)，7.23(m，2H)，6.41(d，1H)，6.24(d，J＝11.8Hz，1H)，5.76(d，1H)，5.53(m，1H)，4.96(m，1H)，4.91(m，1H)，4.50(m，1H)，4.19(m，1H)，2.83(m，1H)，2.67(m，1H)，2.49(dd，1H)，2.30(d，1H)，2.09-1.01(m，14H)，1.57(s，6H)，1.07(d，3H)，0.88(s，9H)，0.82(s，9H)，0.19(s，3H)，0.05(s，3H)，0.04(s，3H)，0.03(s，3H)，0.01(s，3H)ppm制备例7化合物43方法一般方法6原料化合物421H NMRδ＝7.42(m，2H)，7.23(m，2H)，6.21(m，2H)，5.95(d，1H)，5.53(m，1H)，5.15(m，1H)，4.81(m，1H)，4.35(m，1H)，4.16(m，1H)，2.78(m，1H)，2.66(m，1H)，2.41(dd，1H)，2.19(dd，1H)，2.07-1.00(m，14H)，1.57(s，6H)，1.07(d，3H)，0.86(s，9H)，0.84(s，9H)，0.19(s，3H)，0.04(m，12H)ppm制备例8化合物44方法一般方法4原料化合物51H NMRδ＝7.33(m，4H)，6.45(d，1H)，5.84(d，1H)，4.99(m，1H)，4.94(m，1H)，4.53(m，1H)，4.38(dd，1H)，4.22(m，1H)，3.94(m，1H)，3.36(m，1H)，2.89(m，1H)，2.72(m，1H)，2.55(dd，1H)，2.32(m，1H)，2.15-1.22(m，19H)，1.64(s，3H)，1.48(s，3H)，1.29(d，3H)，0.90(s，9H)，0.86(s，9H)，0.64(s，3H)，0.06(m，12H)ppm制备例9化合物45方法一般方法12原料化合物441H NMRδ＝7.35(m，4H)，6.23(d，1H)，6.02(d，1H)，5.18(m，1H)，4.86(m，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.84(m，1H)，2.70(m，1H)，2.44(dd，1H)，2.21(dd，1H)，2.12-1.14(m，14H)，1.55(s，6H)，1.28(d，3H)，0.87(s，9H)，0.86(s，9H)，0.61(s，3H)，0.05(m，12H)ppm制备例10化合物46方法一般方法5原料化合物451H NMRδ＝7.44(m，2H)，7.26(m，2H)，6.44(d，1H)，6.25(d，J＝11.8Hz，1H)，5.78(d，1H)，5.45(m，1H)，4.98(m，1H)，4.92(m，1H)，4.52(m，1H)，4.19(m，1H)，2.81(m，2H)，2.50(dd，1H)，2.30(m，1H)，2.10-1.02(m，14H)，1.59(s，6H)，1.13(d，3H)，0.89(s，9H)，0.84(s，9H)，0.50(s，3H)，0.06(s，3H)，0.05(s，3H)，0.04(s，3H)，0.03(s，3H)ppm制备例11化合物47方法一般方法6原料化合物461H NMRδ＝7.44(m，2H)，7.25(m，2H)，6.23(d，J＝11.7Hz，1H)，6.21(d，1H)，5.98(d，1H)，5.45(m，1H)，5.16(m，1H)，4.83(m，1H)，4.36(m，1H)，4.18(m，1H)，2.81(m，2H)，2.42(dd，1H)，2.20(dd，1H)，2.07-1.02(m，14H)，1.59(s，6H)，1.13(d，3H)，0.87(s，9H)，0.86(s，9H)，0.50(s，3H)，0.05(m，12H)ppm制备例12化合物48方法一般方法7原料溴化3-乙氧羰基苯基甲基-三苯基鏻。13C NMRδ＝166.9，153.3，142.8，140.2，138.1，135.2，132.7，129.9，129.6，128.0，127.2，124.9，121.5，116.3，106.6，70.1，67.0，56.8，56.2，51.9，45.6，43.7，40.3，36.4，34.6，28.7，27.0，25.6，25.6，23.3，22.0，20.3，18.0，17.9，12.1，-4.9，-5.0，-5.1ppm制备例13化合物49方法一般方法6原料化合物481H NMRδ＝7.93(t，1H)，7.88(m，1H)，7.44(m，1H)，7.38(t，1H)，6.28(d，1H，J＝11.4Hz)，6.19(d，1H)，5.97(d，1H)，5.52(t，1H，J＝11.4Hz)，5.16(m，1H)，4.82(m，1H)，4.35(m，1H)，4.17(m，1H)，3.90(s，3H)，2.76(m，2H)，2.41(dd，1H)，2.2(dd，1H)，2.03-0.71(m，13H)，1.13(d，3H)，0.87(s，9H)，0.85(s，9H)，0.47(s，3H)，0.03(m，12H)ppm制备例14化合物50方法一般方法11原料化合物491H NMRδ＝7.38(t，1H)，7.31(m，2H)，7.15(m，1H)，6.28(d，1H，J＝11.5Hz)，6.20(d，1H)，5.97(d，1H)，5.47(t，1H，J＝11.5Hz)，5.15(m，1H)，4.82(m，1H)，4.35(m，1H)，4.17(m，1H)，2.80(m，2H)，2.42(dd，1H)，2.20(dd，1H)，2.08-0.70(m，14H)，1.58(s，3H)，1.57(s，3H)，1.12(d，3H)，0.86(s，9H)，0.85(s，9H)，0.47(s，3H)，0.04(m，12H)ppm制备例15溴化3-乙氧羰基苯基甲基-三苯基鏻方法一般方法8原料3-溴甲基苯甲酸乙酯1H NMRδ＝7.90(m，17H)，7.60(t，1H)，7.25(t，1H)，5.55(d，2H)，4.24(q，2H)，1.29(t，3H)ppm制备例16溴化4-(2-羟基-2-丙基)-苯基甲基-三苯基鏻方法一般方法8原料2-(4-溴甲基苯基)-2-丙醇1H NMRδ＝7.88(m，3H)，7.72-7.60(m，12H)，7.32(d，2H)，6.95(dd，2H)，4.90(d，2H)，1.48(s，6H)ppm实施例11(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[2(Z)-(3-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-乙烯基]-9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯方法一般方法10原料化合物5013C NMRδ＝148.9，147.6，142.8，139.3，137.9，133.1，128.1，126.8，126.2，124.9，124.8，122.4，117.1，111.7，72.5，70.766.8，56.9，56.3，45.9，45.2，42.8，40.4，34.9，31.8，31.7，29.0，27.3，23.6，22.3，20.5，12.4ppm实施例21(S)，3(R)-二羟基-20(S)-[2(Z)-(4-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-乙烯基]-9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯方法一般方法10原料化合物431H NMRδ＝7.42(m，2H)，7.23(m，2H)，6.33(d，1H)，6.24(d，J＝11.4Hz，1H)，5.95(d，1H)，5.53(m，1H)，5.28(m，1H)，4.94(m，1H)，4.40(m，1H)，4.19(m，1H)，2.88-2.50(m，3H)，2.28(dd，1H)，2.08-1.04(m，16H)，1.58(s，6H)，1.07(d，3H)，0.21(s，3H)ppm实施例31(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[2(Z)-(4-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-乙烯基]9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯方法一般方法9原料化合物471H NMRδ＝7.43(m，2H)，7.23(m，2H)，6.36(d，1H)，6.24(d，J＝11.4Hz，1H)，5.98(d，1H)，5.53(m，1H)，5.28(m，1H)，4.96(m，1H)，4.40(m，1H)，4.19(m，1H)，2.88-2.50(m，3H)，2.28(dd，1H)，2.08-1.04(m，16H)，1.59(s，6H)，1.12(d，3H)，0.51(s，3H)ppm实施例4含有化合物101的胶囊将化合物101溶于花生油达到1μg化合物101/ml油的浓度。将10重量份明胶、5重量份甘油、0.08重量份山梨酸钾和14重量份蒸馏水在加热下混合形成软明胶胶囊。然后将各胶囊用100μl化合物101的油溶液填充，从而使每粒胶囊含有0.1μg化合物101。实施例5含有化合物101的皮肤病霜剂将0.05mg化合物101溶于1g杏仁油。向该溶液中加入40g矿物油和20g自乳化蜂蜡。将该混合物加热至液化。加入40ml热水后，将混合物充分混合。形成的霜剂含有约0.5μg化合物101/g霜剂。实施例6含有化合物101的可注射溶液注射用溶液含有10μg本发明的化合物10115.4mg 二水合磷酸二钠2mg 二水合磷酸二氢钠0.8mg氯化钠5mg 抗坏血酸钠5mg Solutol_HS 15加至1ml注射液用水。
权利要求
1.式I化合物及其与可药用酸形成的可在体内水解的酯 其中X表示氢或羟基；R1和R2可以相同或不同，表示氢、可选地被一个羟基或一个或多个氟原子取代的(C1-C4)烷基，或者R1和R2与它们所连接的碳原子合在一起形成(C3-C5)碳环；R3表示(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或卤原子，例如氟、氯、溴或碘。
2.权利要求1的化合物，其中X表示羟基。
3.权利要求1或2的化合物，其中带有星号的碳原子是非手性的。
4.权利要求3的化合物，其中R1和R2相同并且表示可选地被一个羟基或一个或多个氟原子取代的甲基或乙基。
5.权利要求4的化合物，其中R1和R2均表示三氟甲基或被一个羟基取代的乙基。
6.前述权利要求任意一项的化合物，为式I化合物的纯净的非对映异构体形式或非对映异构体混合物形式。
7.权利要求1、2或6中任意一项的化合物，其中假定的手性碳原子(在式I中用星号标记的碳原子)的构型可以是R或S。
8.权利要求1至5中任意一项的化合物，其中20号碳原子的构型是R或S。
9.前述权利要求任意一项的化合物，所述化合物选自1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[2(Z)-(3-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-乙烯基]-9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，1(S)，3(R)-二羟基-20(S)-[2(Z)-(4-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-乙烯基]-9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，1(S)，3(R)-二羟基-20(R)-[2(Z)-(4-(2-羟基-2-丙基)-苯基)-乙烯基]-9，10-断孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯，及其与可药用酸形成的可在体内水解的酯。
10.药物组合物，其含有有效量的权利要求1至9中任意一项的化合物和可药用载体和/或赋形剂。
11.剂量单位形式的权利要求10所述的药物组合物。
12.权利要求11所述的药物组合物，其中所述的剂量单位含有0.05-100mg、优选0.1-50mg权利要求1至10中任意一项的化合物。
13.权利要求1至10中任意一项的化合物用作药物。
14.权利要求1至10中任意一项的化合物在制备用于治疗或预防以异常的细胞分化和/或细胞增殖为特征的疾病的药物中的用途。
15.权利要求14的用途，其中所述的疾病选自癌症、白血病、骨髓纤维化和牛皮癣、包括甲状旁腺功能亢进、特别是与肾衰竭有关的继发性甲状旁腺功能亢进、糖尿病、高血压、痤疮、脱发、皮肤老化、AIDS、神经变性疾病例如早老性痴呆、宿主对抗移植物的反应、移植物的排斥反应在内的许多疾病状态，用于预防和/或治疗由类固醇引起的皮肤萎缩以及用于促进骨生成和治疗骨质疏松。
16.用于治疗和/或预防以异常的细胞分化和/或细胞增殖为特征的疾病例如癌症、白血病、骨髓纤维化和牛皮癣、包括甲状旁腺功能亢进、特别是与肾衰竭有关的继发性甲状旁腺功能亢进、糖尿病、高血压、痤疮、脱发、皮肤老化、AIDS、神经变性疾病例如早老性痴呆、宿主对抗移植物的反应、移植物的排斥反应在内的许多疾病状态、用于预防和/或治疗由类固醇引起的皮肤萎缩以及用于促进骨生成和治疗骨质疏松的方法，该方法包括向有此需要的患者施用有效量的权利要求1至9中任意一项的化合物或权利要求10的药物组合物。
17.权利要求16的方法，包括向需要全身治疗的哺乳动物每天一次或多次施用剂量为0.001-2mg/公斤体重、优选0.002-0.3mg/kg哺乳动物体重的式I化合物。
18.权利要求16或17的方法，用于治疗或预防选自癌症、牛皮癣、皮肤老化和甲状旁腺功能亢进的疾病。
全文摘要
本发明涉及式I化合物及其与可药用酸形成的可在体内水解的酯，其中X表示氢或羟基；R
文档编号A61P25/28GK1394206SQ01803566
公开日2003年1月29日 申请日期2001年1月10日 优先权日2000年1月10日
发明者K·H·汉森 申请人:里奥制药有限公司