专利名称：含有非甾类抗雄激素和egfr酪氨酸激酶抑制剂的联合产品的制作方法
技术领域：
本发明涉及在治疗或预防前列腺癌的新方法中使用的含有抗雄激素和表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的联合治疗产品。本发明也涉及含有该联合治疗产品的药物组合物，和涉及联合治疗产品在制备治疗或预防前列腺癌的药物中的用途。
本发明还涉及该联合治疗产品抑制前列腺的癌性细胞从激素依赖状态向激素非依赖状态转变的用途。另一方面，发明涉及联合治疗产品抑制前列腺细胞向癌性细胞转变的用途，即作为前列腺癌化学性预防剂(chemopreventative agents)的化合物的联合。
早期和晚期的前列腺癌通常是激素依赖性的，因而，至少在最初期对于抑制雄激素驱动的经由雄激素受体的生长信号是敏感的。通过手术阉割或者化学性阉割可以达到去除雄激素的目的，例如使用促黄体激素释放激素(LHRH)激动剂如戈舍瑞林或亮丙瑞林或LHRH拮抗剂。使用抗雄激素治疗也可起到抑制雄激素的作用，例如使用非甾类抗雄激素如比卡鲁胺(或其对映体)、氟他胺和尼鲁米特。抗雄激素剂的特性和有效性已有综述报道，例如下列文献，所有这些文献在此引入作为参考比卡鲁胺，BJA Furr等，Urology，1996，47(Suppl.1A)，13-25，G JC Kolvenbag等人，Urology，1996，47(Suppl.1A)，70-79，和欧洲专利申请号0100172，在所述欧洲专利申请中其是在实施例6中以第8化合物列于表中；氟他胺，R O Neri，J.Drug Develop.，1987，1(Suppl.)，5-9和Urology，1989，34(Suppl.4)，19-21，以及英国联合王国申请号1360001；尼鲁米特，M G Harris等，Drugs and Aging，1993，3，9-25和英国联合王国专利申请号1518444。
然而，由于前列腺癌细胞从激素依赖状态向激素非依赖状态的最终转变和/或雄激素非依赖性前列腺癌细胞的克隆选择，所以抗雄激素治疗的益处通常是短暂的。应当理解，在本专利说明书中，任何提到抑制前列腺癌细胞从激素依赖状态向激素非依赖状态转变之处，均认为与有关抑制雄激素-非依赖性前列腺癌细胞的克隆选择相等同。
近年来，业已发现一些生长因子酪氨酸激酶在介导细胞复制的生物化学信号的传递过程中是重要的。它们是跨越细胞膜的大的蛋白质，拥有生长因子如表皮生长因子(EGF)的胞外结合结构域和起激酶功能的使蛋白中的酪氨酸磷酸化从而影响细胞增殖的胞内部分。
基于结合不同受体酪氨酸激酶的生长因子家族的各种受体酪氨酸激酶是已知的(Wilks，Advances in Cancer Research，1993，60，43-73)。分类包括I类受体酪氨酸激酶，其含有EGF家族的受体酪氨酸激酶，如EGF、TGFα、NEU、erbB、Xmrk、HER和let23受体；II类受体酪氨酸激酶，其包括胰岛素家族的受体酪氨酸激酶，如胰岛素和IGFI受体及胰岛素相关受体(IRR)，和III类受体酪氨酸激酶，其包括血小板-衍生的生长因子(PDGF)家族的受体酪氨酸激酶，如PDGFα、PDGFβ和集落刺激因子1(CSF1)受体。
已知I类激酶如EGF家族的受体酪氨酸激酶频见于一般人上皮癌如前列腺癌(Visakorpi等人，Histochem.J.，1992，24，481)中。因而，已经认识到受体酪氨酸激酶抑制剂对于选择性抑制剂前列腺癌生长应当具有作用。
从欧洲专利申请号0566226和国际专利申请WO 96/33980及WO97/30034得知，一些在4-位有苯胺基取代的喹唑啉衍生物具有EGFR酪氨酸激酶抑制活性并且是癌组织包括前列腺癌增殖的抑制剂。J RWoodburn等在Proc.Amer.Assoc.Cancer Research，1997，38，633和Pharmacol.Ther..1999，82，241-250中，已经公开了化合物N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉丙氧基)喹唑啉-4-胺(此后用代码数字ZD1839表示)是强力的EGFR TKI。
由国际专利申请WO 96/30347进一步得知，一些在4-位有苯胺基取代的结构相关的喹唑啉衍生物也具有EGFR酪氨酸激酶抑制活性。在WO 99/55683中，已经公开了化合物N-(3-乙炔基苯基)-6，7-双(2-甲氧乙氧基)喹唑啉-4-胺或其可药用盐(有关代码CP 358774和OSI-774，此后用代码CP 358774表示)是EGFR TKI。
由国际专利申请WO 97/38983进一步得知，一些在4-位有苯胺基取代的其他结构相关喹唑啉衍生物也具有EGFR酪氨酸激酶抑制活性。在J.Med.Chem.，1999，42，1803-1815和WO 00/31048中，已经公开了化合物6-丙烯酰胺-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-吗啉丙氧基)喹唑啉-4-胺(有关代码PD 183805和CI 1033，此后用代码CI 1033表示)是EGFR TKI。
由国际专利申请WO 97/02266进一步得知，一些其他结构相关的杂环衍生物也具有EGFR酪氨酸激酶抑制活性。例如，化合物4-[(IR)-I-苯乙胺]-6-(4-羟苯基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(有关代码PKI-166、CGP75166和CGP 59326，此后用代码PKI-166表示)是EGFR TKI。
由欧洲专利申请号0787722和国际专利申请WO 98/50038、WO99/09016及WO 99/24037进一步得知，一些在4-位有苯胺基取代的其它结构相关的喹唑啉衍生物也具有EGFR酪氨酸激酶抑制活性。例如，化合物N-[4-(3-溴苯胺基)喹唑啉-6-基]丁基-2-卡因酰胺(有关代码CL-387785和EKB-785，此后用代码CL-387785表示)是EGFRTKI。
由Nature Medicine，2000，6，1024-1028和美国专利6,002,008进一步得知，一些在4-位有苯胺基取代的其它结构相关的喹啉衍生物也具有EGFR酪氨酸激酶抑制活性。例如，化合物4-(3-氯-4-氟苯胺基)-3-氰基-6-(4-二甲基氨基丁-2(E)-烯氨)-7-乙氧喹啉(此后用代码EKB-569表示)是EGFR TKI。
欧洲专利申请号0566226和国际专利申请WO 96/33980进一步指出，其中公开的EGFR TKI化合物可作为单独治疗成分而施用以提供抗增生作用，或者与一种或多种其它抗肿瘤物质如细胞毒素剂或细胞抑制剂一起施用，所述抗肿瘤物质选自例下列物质有丝分裂抑制剂，如长春花碱、长春地辛和长春瑞宾；微管蛋白分解抑制剂如紫杉酚；烷化剂，如顺铂、卡铂和环磷酰胺；抗代谢剂，如5-氟尿嘧啶、替加氟、甲氨蝶呤、阿糖胞苷和羟基脲，或者例如下列物质在欧洲专利申请号239362中公开的一种优选的抗代谢剂，如N-{5-[N-(3，4-二氢-2-甲基-4-氧喹唑啉-6-基甲基)-N-甲氨基]-2-噻吩甲酰}-L-谷氨酸；嵌入抗生素，如阿霉素、丝裂霉素和博莱霉素；酶，如天冬酰胺酶；拓扑异构酶抑制剂，如依托泊苷和喜树碱；生物反应调节剂，如干扰素；抗激素，如抗雌激素如他莫昔芬，例如抗雄激素如4′-氰-3-(4-氟苯砜基)-2-羟基-2-甲基-3′-(三氟甲基)N-丙酰苯胺(比卡鲁胺)或者例如LHRH拮抗剂或LHRH激动剂如戈舍瑞林、亮丙瑞林或布舍瑞林以及激素合成抑制剂，例如欧洲专利申请号0296749中公开的芳香酶抑制剂，譬如2，2′-[5-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)-1，3-亚苯基]双(2-乙基丙腈)，以及例如5α-还原酶的抑制剂如17β-(N-叔-丁基氨基甲酰基)-4-氮杂-5α-雄-1-烯-3-烷酮。
美国专利5,985,877公开了酪氨酸激酶抑制剂和化学性阉割联合治疗前列腺癌。该文献涉及与神经生长因子结合的酪氨酸激酶受体抑制剂，尤其是trkA、trkB或trkC的抑制剂。施用LHRH拮抗剂或LHRH激动剂如戈舍瑞林或亮丙瑞林，可以常规地取得化学性阉割的效果。在一相关的公开中，D J George等于Cancer Research，1999，59，2395-2401中陈述酪氨酸激酶抑制剂可以与手术阉割或者与使用亮丙瑞林得到的化学性阉割联合以取得Dunning R-3327 H大鼠前列腺癌组织回缩的效果。
S Yeh等在Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1999，96，5458-5463中公开了从LNCaP前列腺癌细胞系的研究中得出结论经由HER2/neu蛋白(I类或EGFR家族酪氨酸激酶的成员)的细胞信号可以在相对缺乏雄激素时激活雄激素受体，以及这可能代表前列腺癌细胞由雄激素-依赖性转变为雄激素-非依赖性状态的一种途径。注意到非甾类抗雄激素羟氟他胺能够部分阻断HER2/neu蛋白导致的雄激素受体激活。提出了HER2/neu蛋白抑制剂可用于治疗前列腺癌。
K Griffiths等在European Urology，1997，32(suppl.3)，24-40中公开了有关LNCaP前列腺癌细胞系研究的类似结果。注意到非甾类抗雄激素比卡鲁胺(注册商标Casodex)能够部分阻断EGF诱导的细胞生长。提出了特异性酪氨酸激酶抑制剂通过遏制前列腺癌进展而能够用于治疗前列腺癌，同时给出了的癌细胞通过激活另外的通路而绕过特异信号通路阻滞的能力的警告。
我们已经意想不到地发现，根据治疗反应的一种或多种程度(extent)、反应速度、疾病进展时间和生存率，在前列腺癌治疗中联合应用特定非甾类抗雄激素和特定EGFR酪氨酸激酶抑制剂具有协同效应。更具体而言，我们已经发现特定非甾类抗雄激素和特定EGFR酪氨酸激酶抑制剂联合应用对于抑制前列腺癌细胞从激素依赖状态向激素非依赖状态转变特别有效，因此联合对于疾病进展时间和生存率具有显著效果。更预期联合应用特定非甾类抗雄激素和特定EGFR酪氨酸激酶抑制剂具有防止遗传上具有前列腺癌患病倾向的男性发生前列腺癌的有益效果。
据信，在前列腺癌治疗中，联合应用特定非甾类抗雄激素和特定EGFR酪氨酸激酶抑制剂的有益效果可能是由于雄激素和EGFR酪氨酸激酶信号通路之间功能性′交互作用′的结果，所述EGFR酪氨酸激酶信号通路导致抑制前列腺癌细胞由雄激素-依赖性向雄激素-非依赖性状态的进展。如L J Denis和K Griffiths在Seminars in SurgicalOncology，2000，18，52-74中所讨论的那样，据信，二氢睾酮雄激素受体复合物与DNA的结合修饰毗邻DNA链的形状以促进驱动细胞生长的生长因子信号激活的相关转录因子的结合。应当领会，经手术或化学性阉割去除雄激素并不象降低睾酮水平并随之减少二氢睾酮雄激素受体复合物的量那样影响′交互作用′现象。相反，正如前面Yeh等和Griffiths等的研究所指出的那样，恰恰带来抗雄激素对生长因子刺激前列腺癌细胞系生长的作用，抗雄激素雄激素受体复合物可以直接或间接参与雄激素和生长因子信号通路之间的′交互作用′并部分抑制生长因子驱动的生长。
另外，可以理解经手术或化学性阉割去除雄激素并不能防止源于肾上腺的雄激素对前列腺癌生长的影响。相反，抗雄激素治疗拮抗不管是源自睾丸还是肾上腺的雄激素。
应当懂得，与包含手术或化学性阉割和EGFR TKI的联合相比较，尚无使用含有抗雄激素和EGFR TKI的联合的等价概念或效果。
本发明的一个方面，是提供在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的含有非甾类抗雄激素和EGFR TKI的联合治疗产品。
本发明产品也能够在协同治疗或预防前列腺的非恶性疾病如良性前列腺肥大(BPH)中同时、顺次或分隔使用。
在合适的本发明治疗产品中，非甾类抗雄激素选自例如比卡鲁胺(或其对映体)、氟他胺和尼鲁米特。优选地，联合治疗产品的非甾类抗雄激素组分是比卡鲁胺。
在合适的本发明治疗产品中，EGFR TKI选自例如ZD1839、CP358774、CI 1033、PKI-166、CL-387785和EKB-569。优选地，联合治疗产品的EGFR TKI组分是ZD1839或CP 358774。更优选地，联合治疗产品的EGFR TKI组分是ZD1839。
应当理解，本发明治疗产品的抗雄激素和EGFR TKI组分并非必须同时给药。顺次或分隔应用这些组分也可提供所需的有益效果，而且这样的应用也落入本发明产品的限定范围之内。每种药剂的吸收速率、代谢和排泄速率等因素将影响其在肿瘤部位的存在量。在临床医师思考需要联合施用两种药剂来治疗临床病症以期获得有益效果时，这些因素是临床医师所常规考虑的，而且也完全在本领域技术人员的技能之内。
也应当懂得，本发明联合治疗产品定义为按照例如反应程度、反应速度、疾病进展时间或存活期作为测量指标，能够提供协调效应的产品，即优于如果按照联合产品中一种或其它组分以其常规剂量施用所取得的治疗效果。举例来说，如果联合产品的治疗效果优于单独施用非甾类抗雄激素或者单独施用EGFR TKI所达到的效果，那么联合产品的效应是协同效应。而且，如果在对单独的非甾类抗雄激素或单独的EGFR TKI不反应(或反应很差)的一群患者中取得有益疗效的话，则联合产品的效果是协同效应。另外，以例如反应程度、反应速率、疾病进展时间或存活期为测量指标，如果一种组分按照其常规剂量给药、其它组分按照减少的剂量给药，而能取得等同于联合产品中的组分按常量给药时的治疗效果的话，则称联合产品提供了协同效应。特别是，如果联合产品中EGFR TKI组分的常规剂量可以减少而不减低一种或多种反应程度、反应速率、疾病进展时间和存活数据，特别是不减少反应持续期间，而很少具有较每种组分按常规剂量使用时出现的那些恼人的副作用的话，则确实存在协同效应。
本发明的一优选方面，提供在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的含有非甾类抗雄激素比卡鲁胺和EGFR TKI ZD1839的联合治疗产品。
本发明的治疗产品可以药物组合物形式施用。根据本发明，提供在协同治疗或预防前列腺癌中使用的药物组合物，其含有与可药用稀释剂或载体结合或混合的非甾类抗雄激素和EGFR TKI。
应当懂得，本发明药物组合物包括含有非甾类抗雄激素、EGFRTKI和可药用稀释剂或载体的组合物。该组合物方便地提供在协同治疗或预防前列腺癌中同时使用的本发明治疗产品。
本发明药物组合物也包括分隔的包括第一组合物和第二组合物的组合物，其中，第一组合物含有非甾类抗雄激素和可药用稀释剂或载体，而第二组合物含有EGFR TKI和可药用稀释剂或载体。该组合物方便地提供在协同治疗或预防前列腺癌中顺次或分隔使用的本发明的治疗产品，但是分隔组合物也可同时施用。通常，该本发明药物组合物包括第一容器和第二容器的试剂盒，其中，第一容器盛有含非甾类抗-雄激素的适宜组合物，而第二容器盛有含EGFR TKI的适宜组合物。
本发明组合物可以采用适于口服使用的剂型(例如片剂、胶囊、含水或油性混悬剂、乳液、可分散粉末或颗粒剂)，适于局部使用的剂型(例如霜剂、软膏、凝胶、含水或油性溶液或者混悬剂；例如适于在透皮贴剂内使用的剂型)，适于非胃肠道给药的剂型(例如静脉内、皮下、肌内给药的无菌水或油溶液或混悬液)或者适于直肠给药的栓剂。优选地，本发明组合物采用适于口服使用的剂型，譬如片剂或者胶囊。
使用本领域技术人员熟知的常规方法和常规可药用稀释剂或载体，可以制得本发明组合物。
适合用于制备片剂剂型的可药用稀释剂或载体，包括例如惰性稀释剂，如乳糖、碳酸钠、磷酸钙或碳酸钙；造粒剂或崩解剂，如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，如明胶或淀粉；润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石；防腐剂，如对羟基苯甲酸乙酯或丙酯；和抗氧剂，如抗坏血酸。片剂剂型可以包衣也可以不包衣，包衣的目的是为了改变其在胃肠道中的崩解作用以及活性组分的后继吸收，或者是为了改进稳定性和/或外观，在这两种情况下，均可采用本领域技术人员熟知的常规包衣剂和方法进行包衣。
口服给药组合物可以是硬明胶胶囊形式，其中活性组分与惰性固体稀释剂(例如，碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合，或者呈软明胶胶囊形式，其中活性组分与水或油(例如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。
根据本发明一优选的方面，本发明提供前述定义的药物组合物，其中非甾类抗雄激素是比卡鲁胺，而EGFR TKI是ZD1839。
本联合治疗产品的药物组合物中每一活性组分的量，将必要地依受治宿主和具体给药途径的不同而异。对于非甾类抗雄激素组分来说，用于口服给药的片剂或胶囊一般含有例如约20mg～1g活性组分。当非甾类抗雄激素组分是比卡鲁胺时，口服给药用的常规片剂制剂含有50～300mg的活性组分，方便地为50mg、80mg、150mg或300mg的活性组分，优选含有150mg活性组分。对于EGFR TKI组分，口服给药的片剂或胶囊制剂也一般含有例如，约20mg～1g的活性组分。当EGFR TKI是ZD1839时，口服给药用的常规片剂制剂可含有50mg、100mg、250mg或500mg的活性组分。
通常，ZD1839的日口服剂量大于150mg，例如，范围为150～750mg，优选范围为200～500mg。对于单个剂型，活性组分可与适宜和常量的赋形剂结合，赋形剂的用量可占组合物重量的约5至约98％。单位剂型一般含有约20mg～约500mg的每种活性组分。或者，每种活性组分分别与一种或多种赋形剂结合而产生两-部分的剂型(two-partdosage form)。在后一种情况下，本发明药物组合物包括第一容器和第二容器的试剂盒，其中，第一容器盛有含非甾类抗-雄激素的适宜组合物，而第二容器盛有含EGFR TKI的适宜组合物。此类试剂盒可以是例如，使得打算治疗患者前列腺癌的医师可以选择每种活性组分合适的量和每种活性组分的给药次序及给药时间。治疗前列腺癌患者领域的技术人员，可以很方便地选择每种活性组分的合适的常用剂量及合适的给药程序。
本发明的另一方面，我们已经意想不到地发现，可以减少联合治疗产品中EGFR TKI组分的常规剂量而不减低一种或多种反应程度、反应速率、疾病进展时间和存活数据，特别是不减少反应持续时间，而具有很少恼人的副作用，这是本发明协同效应的一个方面。更具体而言，我们已经发现，非甾类抗雄激素比卡鲁胺与EGFR TKI ZD1839联合应用，ZD1839的200～500mg优选日口服剂量可以降至约150mg或更少，优选降至30～100mg，而不减少反应持续时间并且具有更少副作用。打算治疗患者前列腺癌的医师知道如何选择EGFR TKI(如ZD1839)的合适剂量以及其给药次序与给药时间。例如，对进展性前列腺癌，医师将会使用非甾类抗雄激素如比卡鲁胺的常规剂量，优选150mg的日口服剂量，同时降低EGFR TKI的滴定剂量，将会监测个体患者前列腺特异抗原(PSA)水平，PSA水平下降是已良好建立的治疗进展性前列腺癌患者取得有益效果的标志。该有益效果可以是继续抑制前列腺癌细胞从激素依赖状态向激素非依赖状态转变的结果。因此，此种联合对疾病进展时间和存活数据保持显著疗效，同时减少了EGFR TKI治疗所引起的副作用。
本发明的一个方面，提供含有剂量为50～300mg、优选150mg非甾类抗雄激素比卡鲁胺和剂量约150mg或更少、优选30～100mg EGFRTKI ZD1839及可药用稀释剂或载体的药物组合物。
本发明另一方面，提供包括第一组合物和第二组合物的药物组合物，其中，第一组合物含有剂量为50～300mg、优选150mg的非甾类抗雄激素比卡鲁胺和可药用稀释剂或载体，而第二组合物含有剂量为约150mg或更少、优选30mg～100mg的EGFR TKI ZD1839和可药用稀释剂或载体。
根据本发明的这两个方面，非甾类抗雄激素比卡鲁胺是按照50～300mg、优选150mg的日口服剂量给药，而EGFR TKI ZD1839按照约150mg或更少、优选30～100mg的日口服剂量给药的。
本发明再一方面，提供前述定义的联合治疗产品在制备同时、顺次或分隔施用于温血动物如人类男性从而治疗或预防前列腺癌的药物中的用途。
本发明的另一方面，提供治疗或预防前列腺癌的方法，其包括向温血动物如人类男性同时、顺次或分隔施用有效量的前述定义的联合治疗产品。
本发明联合治疗产品，可进一步含有其它步骤或者组分，它们与已经存在的抗雄激素组分一起提供总的或最大的雄激素阻断效应。根据本发明的这一方面，提供在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的含有非甾类抗雄激素、化学性阉割剂和EGFR TKI的联合治疗产品。
在一适宜的本发明的治疗产品中，化学性阉割剂是LHRH、LHRH激动剂如戈舍瑞林或亮丙瑞林或者LHRH拮抗剂，所述阉割剂按照常规给药程序以其常规剂量给药。
本发明优选的方面，提供在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的含有非甾类抗雄激素比卡鲁胺、选自戈舍瑞林和亮丙瑞林的化学性阉割剂和EGFR TKI ZD1839的联合治疗产品。
根据本发明的这一方面，提供在协同治疗或预防前列腺癌中使用的药物组合物，其含有与可药用稀释剂或载体结合或混合的非甾类抗雄激素、化学性阉割剂和EGFR TKI。
本发明另一方面，提供前述刚刚定义的联合治疗产品在制备向温血动物如人类男性同时、顺次或分隔施用以治疗或预防前列腺癌的药物中的用途。
本发明还一方面，提供治疗或预防前列腺癌的方法，其包括向温血动物如人类男性同时、顺次或分隔施用有效量的前述刚刚定义的联合治疗产品。
本发明再一方面，提供手术阉割与含有非甾类抗雄激素和EGFR TKI的联合治疗产品在制备向温血动物如人类男性同时、顺次或分隔施用以治疗或预防前列腺癌的药物中的用途的联合。
本发明还一方面，提供治疗或预防前列腺癌的方法，其包括手术阉割与向温血动物如人类男性同时、顺次或分隔施用有效量含有非甾类抗雄激素和EGFR TKI的联合治疗产品的联合。
在本发明第二部分，我们意外地发现，含有特定非甾类抗雄激素和特定EGFR酪氨酸激酶抑制剂的联合治疗产品不仅对已转变的前列腺癌细胞有效，而且对正常和异常的固有生长(constitutive growth)也有效，对前列腺的非恶变细胞、上皮细胞或者基质细胞也有效。已经确立了这样的观点在前列腺组织的上皮或基质中，雄激素如睾酮尤其是二氢睾酮刺激正常生长。前列腺细胞的固有生长包括细胞的非-雄激素依赖性基线更新(baseline turnover)。因此，特定非甾类抗雄激素和特定EGFR酪氨酸激酶抑制剂的联合可用于减少、优选是抑制前列腺细胞特别是前列腺基质细胞向恶性状态转变。
业已知道，当恶性变发展时，正常前列腺上皮外观有一系列的变化。在正常前列腺上皮中，细胞具有标准大小的核和标准的染色质水平，而早期的侵袭性前列腺癌细胞则具有显著增大的细胞核或核仁，并且染色质水平也显著增高。在疾病进展中期，以前列腺上皮内瘤(PIN)作为该期的识别标志，一般而言，核的大小已经开始增大且染色质水平已经开始增加。本发明特定非甾类抗雄激素和特定EGFR酪氨酸激酶抑制剂的联合，可以抑制正常前列腺细胞尤其是前列腺上皮细胞从正常状态向PIN状态转变。所述联合也可抑制PIN细胞向恶性状态转变。
根据本发明的这一方面，提供在减少、优选是抑制需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的同时、顺次或分隔使用的含有抗雄激素和EGFR TKI的联合治疗产品。
根据本发明的这一第二部分，本发明对于防止遗传上易于患前列腺癌的男性发生前列腺癌是非常有益的。按照发生前列腺癌的风险，可用常规方法将患者进行分类，所述方法譬如，通过家族史调查和在一定期间内跟踪测定血液中特定蛋白质如PSA以及评估PIN的含量。
根据本发明的这一优选方面，提供在减少、尤其是抑制需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的同时、顺次或分隔使用的含有非甾类抗雄激素比卡鲁胺和EGFR TKI ZD1839的联合治疗产品。
根据本发明的这一方面，也提供用于减少、尤其是抑制需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的药物组合物，其含有与可药用稀释剂或载体结合或混合的非甾类抗雄激素和EGFR TKI。
根据本发明的这一方面，也提供用于减少、尤其是抑制需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的药物组合物，其含有剂量为50～300mg、优选150mg的非甾类抗雄激素比卡鲁胺，和剂量约150mg或更少、优选30～100mg的EGFR TKI ZD1839，以及可药用稀释剂或载体。
本发明的另一方面，提供用于减少、尤其是抑制需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的包括第一和第二组合物的药物组合物，其中，第一组合物含有非甾类抗雄激素和可药用稀释剂或载体，而第二组合物含有EGFR TKI和可药用稀释剂或载体。优选地，非甾类抗雄激素是比卡鲁胺而EGFR TKI是ZD1839。
本发明还一方面，提供用于减少尤其是抑制需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的包括第一和第二组合物的药物组合物，其中，第一组合物含有剂量为50～300mg、优选150mg的非甾类抗雄激素比卡鲁胺和可药用稀释剂或载体，而第二组合物含有剂量约150mg或更少、优选为30mg～100mg的EGFR TKI ZD1839和可药用稀释剂或载体。
根据本发明的这三个方面，非甾类抗雄激素比卡鲁胺日口服给药剂量为50～300mg，优选150mg，而EGFR TKI ZD1839的日口服剂量为200～500mg，优选150mg或更少，更优选为30～100mg。
根据本发明的这一方面，将进一步提供前述定义的联合治疗产品在制备用于减少、尤其是抑制需要治疗的温血动物如人类男性的前列腺细胞向恶性状态转变的同时、顺次或分隔施用的药物中的用途。
根据本发明，进一步提供用于减少、尤其是抑制需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的方法，其包括向温血动物如人类男性同时、顺次或分隔施用有效量的前述定义的联合治疗产品。
前述定义的细胞转变的抑制，涉及联合治疗。采用如下的顺次治疗可能是有益的，例如，约1～6个月的第一治疗期，此期间施用常规剂量的EGFR TKI如ZD1839，接着进行约1～6个月的第二治疗期，此期间施用常规剂量的抗雄激素如比卡鲁胺。因此，使得有一个期间，在此期间一些前列腺组织固有生长，从而使组织萎缩程度减至最小。
或者，联合治疗可包括连续施用抗雄激素组分如比卡鲁胺和间断施用EGFR TKI如ZD1839。EGFR TKI的间断治疗可包括例如，包括涉及施用约一个月EGFR TKI的第一阶段，接着进行涉及施用约1个月不含EGFR TKI药物的第二阶段的两个月的周期治疗。此后可进一步实施此类2个月的周期治疗。试验方法在动物的体外和体内实验方法和/或在人类男性的合适的临床试验均可用于评价本发明联合治疗产品的活性。体外试验方法雄激素-依赖性或雄激素-非依赖性人前列腺癌细胞系暴露于体外不同浓度的本发明联合产品中的抗雄激素或EGF TKI组分之中，或者暴露于不同浓度的两种组分的联合产品中。于是，可以测定联合处理在反应程度和反应持续时间方面的效果。例如，可以使用人前列腺DU145细胞、TSU-PR1细胞、CWR22细胞，PC-3细胞或LNCaP细胞。使用例如标准软琼脂集落形成分析法或者例如标准MTT分析法，可以评价生长抑制。使用例如标准ELISA分析法(例如购自德国Boehringer，Mannheim的Cell Death Detection ELISA Plus Kit)，可以评定细胞凋亡。因而，可以证明例如，用抗雄激素和EGFR TIC联合治疗与每一组分以不出现明显毒性的浓度单独使用时所能取得的最大效果相比，取得了细胞生长抑制增加的效果，而且例如，每一组分的剂量效应曲线可以位移以显示出联合使用时的更强效力。体内试验方法衍生自前列腺癌组织或细胞系的肿瘤，可在动物如大鼠或小鼠中生长，特别是在无胸腺裸鼠或大鼠中生长。接种或植入后，肿瘤细胞或组织生长，用本发明联合产品治疗受试动物，评价每个治疗程序之前、期间和之后的肿瘤大小，以提供治疗疗效的指征。
例如，可使用涉及按照J T Isaacs等人，Cancer Research，1981，41，5070-5075和Cancer Research，1989，49，6290-6294以及D J George等人，Cancer Research，1999，59，2395-2401公开的一般方法，在成年雄性同系繁殖的Copenhagen大鼠中植入Dunning R-3327 H前列腺癌组织并使之生长的异种移植模型。通过球磨机将受试化合物悬浮在例如吐温80(注册商标)中，例如约16个小时，并且经管饲法口服给药。可以证明口服施用抗雄激素比卡鲁胺和EGFR TKI ZD1839的联合产品，引起组织增生的实质性减少(例如，对切除的异种移植组织作常规的Ki67免疫染色进行检测到的结果)及肿瘤生长速度实质性和持续性降低。
例如，使用涉及T G Pretlow等人，Cancer Research，1994，54，6049-6052和Cancer Research，1996，56，3042-3046公开的一般方法，在植入雄性裸鼠中人CWR22雄激素-依赖性前列腺癌并使之生长的异种移植物模型，可以证明口服施用抗雄激素比卡鲁胺和EGFR TKI ZD1839的联合产品，引起组织增生的实质性减少(例如，通过对切除的异种移植组织作常规Ki67免疫染色所测得的结果)及肿瘤生长速度实质性和持续性下降。
例如，使用涉及在雄性裸鼠中植入人PC-3或TSU-PR1前列腺癌并使之生长的异种移植物模型，可以证明口服施用抗雄激素比卡鲁胺和EGFR TKI ZD1839的联合产品，引起肿瘤生长速度的实质性和持续性下降。人临床试验对出现前列腺癌的患者进行疾病分期评定，并以PSA水平用作为适合肿瘤的标志。具有适宜入选标准的患者被分配到该临床试验中。对一组患口服施用抗雄激素比卡鲁胺，第二组患者口服施用抗雄激素比卡鲁胺和EGFR TKI ZD1839的联合制品。定期采集血液样本，并分析PSA水平。使用直肠指诊(DRE)、计算机辅助的X线断层(CAT)扫描和前列腺组织活组织检查采样，评定一种或多种局限性前列腺肿瘤生长。使用常规标准定义临床反应。例如，完全反应定义为肿块完全退缩，部分反应定义为最初肿瘤体积缩小50％或更多，而疾病稳定定义为肿瘤体积缩小小于50％或者肿瘤体积没有增加。
在患有BPH的患者也可进行相应的临床试验。
权利要求
1.一联合治疗产品，含有在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的非甾类抗雄激素和表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)。
2.按照权利要求1的联合治疗产品，含有在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的非甾类抗雄激素比卡鲁胺和EGFR TKIZD1839。
3.在协同治疗或预防前列腺癌中使用的药物组合物，其包括与可药用稀释剂或载体结合或混合的非甾类抗雄激素和EGFR TKI。
4.按照权利要求3的在协同治疗或预防前列腺癌中同时使用的药物组合物，含有非甾类抗雄激素、EGFR TKI和可药用稀释剂或载体。
5.按照权利要求3的在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的药物组合物，包括第一组合物和第二组合物的试剂盒，其中第一组合物含有非甾类抗雄激素盒可药用稀释剂或载体，而第二组合物含有EGFR TKI和可药用稀释剂或载体。
6.按照权利要求3～5中任一项的药物组合物，其中非甾类抗雄激素是比卡鲁胺而EGFR TKI是ZD1839。
7.按照权利要求3～5中任一项的药物组合物，其中非甾类抗雄激素是日口服剂量为50～300mg的比卡鲁胺。
8.按照权利要求3～5中任一项的药物组合物，其中EGFR TKI是日口服剂量为200～500mg的ZD1839。
9.按照权利要求3～5中任一项的药物组合物，其中EGFR TKI是日口服剂量约150mg或更少的ZD1839。
10.按照权利要求3的药物组合物，含有剂量范围为50～300mg的非甾类抗雄激素比卡鲁胺、剂量约150mg或更少的EGFR TKIZD1839，和可药用稀释剂或载体。
11.按照权利要求3的药物组合物，包括含有剂量范围为50～300mg非甾类抗雄激素比卡鲁胺和可药用稀释剂或载体的第一组合物，和含有剂量约150mg或更少EGFR TKI ZD1839和可药用稀释剂或载体的第二组合物。
12.权利要求1或2的联合治疗产品在制备同时、顺次或分隔施用于温血动物如人类男性以治疗治疗或预防肿瘤的药物中的用途。
13.治疗或预防前列腺癌的方法，其包括向温血动物如人类男性同时、顺次或分隔施用有效量的权利要求1或2的联合治疗产品或者有效量的权利要求3～11的药物组合物。
14.在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的含有非甾类抗雄激素、化学性阉割剂和EGFR TKI的联合治疗产品。
15.按照权利要求14的联合治疗产品，包括在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的非甾类抗雄激素比卡鲁胺、选自戈舍瑞林和亮丙瑞林的化学性阉割剂和EGFR TKI ZD1839。
16.在减少需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的同时、顺次或分隔使用的含有抗雄激素和EGFR TKI的联合治疗产品。
17.按照权利要求16的联合治疗产品，含有在减少需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的同时、顺次或分隔使用的抗雄激素比卡鲁胺和EGFR TKI ZD1839。
18.用于减少需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的药物组合物，其含有与可药用稀释剂或载体结合或混合的非甾类抗雄激素和EGFR TKI。
19.按照权利要求18的用于减少需要治疗的人的前列腺细胞向恶性状态转变的药物组合物，包括第一组合物和第二组合物的试剂盒，其中第一组合物含有非甾类抗雄激素和可药用稀释剂或载体，而第二组合物含有EGFR TKI和可药用稀释剂或载体。
20.按照权利要求18或19的药物组合物，其中非甾类抗雄激素是比卡鲁胺而EGFR TKI是ZD1839。
21.按照权利要求18或19的药物组合物，其中非甾类抗雄激素是日口服剂量为50～300mg的比卡鲁胺。
22.按照权利要求18或19的药物组合物，其中EGFR TKI是日口服剂量为200～500mg ZD1839。
23.按照权利要求18或19的药物组合物，其中EGFR TKI是日口服剂量约150mg或更少的ZD1839。
全文摘要
本发明涉及在协同治疗或预防前列腺癌中同时、顺次或分隔使用的含有非甾类抗雄激素和表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的联合治疗产品。更具体而言，本发明产品有效抑制前列腺癌细胞从激素依赖状态向激素非依赖状态转变。更进一步期望本发明产品具有防止遗传上易患前列腺癌的男性发生前列腺癌的有益效果。
文档编号A61K31/167GK1420768SQ0180745
公开日2003年5月28日 申请日期2001年4月3日 优先权日2000年4月6日
发明者B·J·A·福尔 申请人:阿斯特拉曾尼卡有限公司