一种用于治疗肝病及爱滋病的新药用植物组合物的制作方法

专利名称：一种用于治疗肝病及爱滋病的新药用植物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的药用植物组合物用于治疗肝病(譬如病毒性肝炎[如A型肝炎、B型肝炎、C型肝炎、D型肝炎及E型肝炎]、酒精性肝炎及脂肪肝、肝硬化及肝癌)以及爱滋病(HIV)。该药用植物组合物的主要药材为白花蛇舌草(diffuse hedyotis)、拳参、虎杖、五味子。另外，还含有北豆根、黄芩、牛黄、郁金(turmeric root-tuber)、山楂、三七、玄参、当归、枸杞子、红参及黄芪。本发明还涉及用于制备药用植物组合物的方法以及应用该药用植物组合物治疗患者的方法。
背景技术：
肝病对人类的健康有非常大的影响。肝炎是一种因感染造成肝脏发炎的肝病。感染原包括病毒、细菌、霉菌或原生动物等。一般而言，肝病可分为急性、慢性及暴发性。
病毒性肝炎是一种透过病毒感染的肝病。其主要传染途径为摄食传染；另外也可能因输血时输入带有病毒的血液或血液制品如血浆而遭感染。肝病遍及全球，举例来说，中国大陆约有三千万肝炎患者，每年增加约九百万，而B型肝炎携带者则有一亿多人。根据统计，孕妇占中国B型肝炎带原者的百分的十；另外，中国大陆每年约有十万人死于原发性肝癌。
依据病毒来源，病毒性肝炎可分为A型、B型、C型、D型及E型。A型肝炎经由A型肝炎病毒(HAV)感染；感染病例可能是单一案例，亦可能演变成广泛的流行病。B型肝炎病毒(HBV)通常会引发严重的B型肝炎；病毒侵入肝脏，造成长期感染，导致肝硬化(肝结疤)、肝癌，更严重时会引起肝脏衰竭而死亡。C型肝炎病毒(HCV)引发C型肝炎。D型肝炎病毒(HDV)则是一种有缺陷的单螺旋核糖核酸(RNA)病毒，其藉助HBV复制、合并含有B型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的被膜蛋白以包裹HDV基因。E型肝炎由E型肝炎病毒(HEV)引发，此病毒为非A、非B型肝炎病毒。HEV是一直径约32～34nm的球体单螺旋RNA病毒。HEV先前归类为Caliciviridae族，但由于HEV的基因组合又不同于Caliciviridae族的其他病毒，因此，HEV极可能将重新归类。
最普遍的肝炎通常为A型、B型、C型及E型肝炎。其基本症状相近，包含食欲减退、恶心、上腹不适及乏力等。急性黄疸亦为其常见症状。慢性肝炎难以治愈，重症肝炎发病快且死亡率很高。
传统中、草药复方对治疗及预防各类型肝病有明显功效。用来治疗肝炎的传统中药有单方、复方及经萃取有效成份的各种中药制剂。
举例来说，强力宁注射液是提取甘草中的甘草酸，经氨化成水溶性铵盐，再与氨基酸配伍制成。此注射液用于治疗慢性病毒性肝炎、肝硬化以及肝肿瘤。根据上海华山医院的临床观察，强力宁注射液总有效率为87.5％，显效率为64.1％。
岩黄连注射液由广西民间草药岩黄连研制，用于治疗各型肝炎、肝硬化及肝癌。临床总有效率为81.47％。急性黄疸性肝炎患者的有效率为93.88％，无黄疸型肝炎患者为87.50％，慢性活性型肝炎87.09％，持续性肝炎69.23％，慢性肝硬化80.95％。HBV表面抗原转阴率则为17.91％。
山豆根(拉丁名Radix Sophorae Tonkinensis)注射液适用于急、慢性病毒性肝炎，尤其对慢性活性肝炎特别有效。中国大陆广西省广西医学院研究显示，此注射液治疗长期活性肝炎的总有效率为91.79％，显效率为54.23％。64.93％的患者在治疗二个月后，其谷氨酸丙酮酸转氨酶(Glutamate-Pyruvate Transaminase，GPT)转为正常，但有些患者在停药后有复发的情形。
猪苓(Polyporns umbellata)注射液具有增强免疫功能、抑制肿瘤、降低转氨酶，以及抑制肝炎病毒复制等作用。应用猪苓注射液治疗慢性病毒性肝炎患者后，35.6％患者的GPT显示正常，降酶总有效率为76.51％，B型肝炎病毒E抗原(HBeAg)转阴率为38.6％，表面抗原(HBsAg)转阴率为13.1％。
齐墩果酸片治疗急性黄疸性肝炎的总有效率为94.4％，治愈率为64.8％。齐墩果酸片治疗慢性活性肝炎的总有效率为69.8％，显效率43.7％，HBsAg的转阴率为16.8％。
肝得治胶囊由五仁醇、黄芩、桑椹子、丹参、甘草组成。具清热解毒、活血化瘀、护肝理脾、降转氨作用。广州中山医学院附属医院报告提出其用于治疗持续性肝炎、慢性肝炎的有效率为80.0％，但无该药对B型肝炎抗原转阴率的相关报告。
当归丸由当归、甘草组成，具活血补血、止疼润燥等功能。中国北京医学院发现用其治疗持续性肝炎疗效为84.4％，慢性肝炎79.1％，肝炎所引起的肝硬化则为73.6％。
护肝片由五味子醇浸膏、保肝浸膏(含茵陈、紫胡、板蓝根)以及胆汁膏粉等组成，具舒肝解郁，清热利湿作用。治疗慢性肝炎的有效率为95.08％，显效率70％，治疗肝硬化的有效率为82.5％，显效率63％。
鸡骨草丸由鸡骨草、胆汁粉、牛黄等组成，具清肝利胆、清热解毒、消炎止痛等功能。根据中国北京儿童医院的研究显示，此药用于治疗急性病毒性肝炎的总有效率为100％，治疗慢性活性肝炎的有效率为73.3％，治疗慢性持续性肝炎的有效率为70.4％，但对脾虚性及肝肾阴虚型等其他持续性肝炎疗效不佳。
五酯胶囊由五味子醇浸膏制成，具有降低GPT的功能，用于慢性持续性肝炎。临床观察总有效率为95.33％，显效率74.21％。
肝复能由黄芪、山楂、葛根、水牛角粉、三七等组成。此方用于治疗慢性肝炎，79.1％的患者其GPT恢复正常，总有效率为88.7％。
碧云砂乙肝灵由白花蛇舌草、茜草、青黛、土茯苓、丹参、佛手、山楂、灵芝、麦冬、蚕砂组成。具清肝解毒、理气活血、益气健脾功能。临床适用于传染性B型肝炎、急性或慢性肝炎、早期肝硬化、肝脾肿大等。中国西安医科大学第二附属医院针对314例B型肝炎患者进行临床研究，此药的总有效率为84.75％，HBsAg转阴率为41.35％。
肝脾康胶囊由柴胡、三七、熊胆粉等14味药材组成，具疏肝健脾、活血止痛的功能。此药用于治疗慢性B型活性肝炎的基本治愈率为53.33％，有效率40.0％；用于治疗慢性B型持续性肝炎的基本治愈率为63.33％，有效率26.67％。
软坚护肝片由山豆根、夏枯草、虎杖、黄芩、丹参、黄芪、女贞子、砂仁、山楂组成，具清热散毒，活血祛瘀止痛，益气养阴健脾功能。使用后HBeAg转阴率为78％，HBsAg转阴率则为28～57％。
虽然上述各种中草药制剂均宣称对治疗肝炎有效，但对HBV抗原转阴并没有显著效果。
本发明提供了一种新的药用植物组合物，其用于治疗肝病，特别是病毒性肝炎(如HAV、HBV、HCV及HEV)，酒精肝、脂肪肝及肝癌。
此发明的组合物也显示对HIV病人有显著疗效。本组合物为纯天然中草药，无毒且无副作用。
发明概述本发明的新的药用组合物包括来自白花蛇舌草、虎杖、拳参、北豆根、黄芩、牛黄粉、黄芪、枸杞子、三七、红参、玄参、五味子、郁金、山楂、当归的中药提取物。该组合有效用于治疗肝病患者，包括但不限于病毒性肝炎(如HAV、HBV、HCV及HEV)、酒精肝、脂肪肝、肝硬化以及肝癌。该组合对HIV也同样有效。
在该药用组合物的中药中，白花蛇舌草、虎杖、拳参及五味子为提供药效的必要成份。北豆根、黄芩、牛黄粉、郁金、山楂、三七则为辅佐成份，用于调节及平衡主药材白花蛇舌草、虎杖、拳参及五味子的性味、药效及功效等。此外，可以在组合物中加入玄参、当归、枸杞子、红参及黄芪以在肝脏康复阶段进一步营养肝脏。
主成份四味药材中，白花蛇舌草、拳参、虎杖和五味子的重量比优选为约3∶3∶1∶2。白花蛇舌草、拳参、虎杖、五味子、北豆根、黄芩、牛黄、郁金、山楂和三七的重量比优选为约3∶3∶1∶2∶1∶1∶0.1∶1∶2∶1。白花蛇舌草、拳参、虎杖、五味子、北豆根、黄芩、牛黄、郁金、山楂、三七、枸杞子、红参、玄参、当归和黄芪的重量比优选为约3∶3∶1∶2∶1∶1∶0.1∶1∶2∶1∶3∶1∶2∶1∶3。
本发明还提供了制备药用植物组合物的方法，包括以下步骤(1)将白花蛇舌草的整株、拳参的干燥根茎、虎杖的干燥根茎和五味子的干燥成熟果实粉碎并混合，形成中药组合物；(2)在水中煎煮中药组合物两次(第一次煎煮2小时，待混合液冷却后，煎煮混合液1.5小时)；(3)过滤煎煮的中药组合物，使中药组合物的药渣与含有中药提取物的中药溶液分离；(4)浓缩中药溶液(优选从约1.4倍体积浓缩至约1倍体积)；以及(5)将中药浓缩液喷雾干燥并制粒，制成颗粒，其可以进一步包封到胶囊中。
发明详述传统中医学已有超过二千年的历史，也有不少治疗各种疾病的成功案例。传统中医学中，广泛使用各种药用植物及天然物，而每一味药材都有其特性。将药材组合应用不仅可提高单一药材的药性，同时亦将毒性或副作用减低。
这就是中医药学中阴阳调和的理论。在中医药理论的定义下，「阴」症药用于治寒证；「阳」症药则用来治疗热证。
本发明的药用组合物由15味药材组成。其中4味为核心成份，提供本组合物的主要药效及治疗效果。它们是(1)白花蛇舌草(药用名称HerbaHedyotidis diffusae；植物名Hedyotis diffusa Willd.)；(2)拳参(药用名称Rhizoma Bistortae植物名Polygonum bistorta L.)；(3)虎杖(药用名称Rhizoma Polygoni Cuspidati；植物名Polygonum cuspidatum Sieb.etZucc.)，和(4)五味子(药用名称Fructus Schisandrae Chinensis；植物名Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.，S.sphenanthera Rehd.et Wils.)。这些核心药材主要用于清热解毒，改善免疫系统及血液循环，治疗黄疸并滋补内脏。
另外6味药材是用来增强并平衡4味主药材的药效。此6味药材可调节、增强肝脏的血液循环。6味药材分别是(1)北豆根(药用名称RhizomaMenispermi；植物名Menisermum dauricum DC)；(2)黄芩(药用名称Radix Scutellariae Baicalensis；植物名Scutellaria baicalensis Georgi)；(3)牛黄(动物名Vesica Fellea Bovus)；(4)郁金(药用名称Radix Curcumae；植物名Curcuma wenyujin Y.H.Lee et Cl Ling)；(5)山楂(药用名称FructusCrataegi；植物名Crataegus pinnatifida Bge.)；和(6)三七(药用名称RadixNotoginseng；植物名Panax notoginseng(Burk.))。
最后5味药材主要提供肝脏恢复时所需的营养与精气。该5味药材包括(1)枸杞子(药用名称Fructus Lycii；植物名Lycium barbarum L.)；(2)红参(药用名称Radix Ginseng Rubra；植物名Panax Ginseng C.A.Mey)；(3)玄参(药用名称Radix Scrophulariae；植物名Scrophularia ningpoensis)；(4)当归(药用名称Radix Angelicae sinensis；植物名Angelica sinensis(Oliv.)Diels)；和(5)黄芪(药用名称Radix Astragali；植物名Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.)。在这些成分中，特别是红参(Radix GinsengRubra)与黄芪(Radix Astragali)具有改善人体的免疫功能以对抗病毒的功能。
本发明组合物中各种药材的药用名称、植物名或动物名、科名、一般名称及其主要成分详列于表一中。
表一本发明组合物中各种药材



白花蛇舌草(Herba Hedyotidis Diffusae)为茜草(Rubiaceae)科植物，其药用部位涵盖全草。此植物药无毒，在中国大陆多于夏、秋等季节，在台湾则于晚春或早冬采收。Dan Bensky与Andrew Gamble共同编译的中药大辞典(Materia Medica-Chinese Herbal Medicine)中便指出，白花蛇舌草具有清热、利尿解毒的功能，对舒缓热痛型尿道感染以及湿热型黄疸有益。白花蛇舌草也是本发明药用植物组合物中治疗肝病与HIV的主要成份。
拳参(Rhizoma Bistortae)为蓼(Polygonaceae)科植物Polygonumbistorta L.的干燥根。拳参药性属凉，即阳症药物，具有清热、泻火、解毒、消肿与止血等功效。
虎杖(Radix et Rhizoma Polygoni Cuspidati)为蓼(Polygonaceae)科植物Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.的干燥根茎与根，归类为Polygonaceae科。此植物遍布全中国，特别在江苏、浙江、安徽、广东、广西、四川及贵州等省份，春、秋二季采挖。虎杖主要用于祛风利湿、散瘀定痛以及止咳化痰。
五味子(Fructus Schisandrae Chinensis)为木兰(Magnoliaceae)科植物Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.或Schisandra sphenanthera Rehd.etWils.的干燥成熟果实。以前、上等的五味子产于中国北方，惯称“北五味子”；近代的五味子则多产于中国南方，称为“南五味予”，两种五味子均可用于本发明。果实于秋季成熟时采摘，晒干后去梗使用。五味子通常用于收敛固涩、益气生津以及补肾宁心。五味子也可以降低肝炎患者的GPT。
北豆根(Rhizoma Menispermi)为防己(Menispermacea)科植物Menispermum dauricum DC的干燥根茎。性寒，多用于清热解毒、祛风止痛。
黄芩(Radix Scutellariae)为唇形(Labiatae)科植物Scutellaria baicalensisgeorgi的干燥根。性寒，多用于清热解毒、祛风止痛。此药材产于中国大陆河北、山西、内蒙等地，春、秋二季采挖。黄芩主要用于清热燥湿、泻火解毒、止血与安胎。
牛黄是牛科动物牛Vesica Fellea Bovus的干燥胆结石。可清热，舒缓痉挛。
郁金(Radix Curcumae)为Curcuma wenyujin Y.H.Lee et C.Ling.或Curcuma Longa L.或Curcuma aromatica Salisb.或Curcuma zedoaria Rosc.或Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang的干燥块根。此药材主要产于中国四川、浙江、广东与广西等省份。冬天或春天采挖，除去泥沙与细根，蒸煮至透心后晒干备用。郁金为姜(Zingiberaceae)科植物，性寒味苦，用于清热、解郁及祛痰。
山楂(Fructus Crataegi)为Crataegus pinnatifida Bge.或C.pinnatifidaBge.var.major N.E.Br.或C.suneata Sieb.et Zucc.植物的干燥成熟果实。主要产地为中国河南、江苏、山东等省份，秋季成熟时采收、切片并干燥。山楂属蔷薇(Rosaceae)科，一般用于健胃整肠，行气散瘀。
三七(Radix Notoginseng)为五加(Araliaceae)科植物Panax notoginsent(Burk.)F.H.Chen的干燥根。植物三七又称为P.pseudoginseng Wall或P.sanchi Hoo，产于中国云南、广西、四川、贵州与江西等省份。通常在种植后第三或第七年秋冬，花开前或果实成熟后采挖。H.Gao等，Pharmaceutical Research，(1996)13(8)1196-1200公开的体外试验中，三七所含的多糖(polysaccharides)在体外具有改善免疫活性。
枸杞子(Fructus Lycii)是Lycium barbarum L.的干燥成熟果实，属茄(Solanaceae)科，产于中国宁夏、甘肃、青海等省份，于夏、秋二季采收，用于滋补肝肾，益精明目。
玄参(Radix Scrophulariae Ningpoensis)为玄参(Scrophulariaceae)科植物Scrophularia ningpoensis Hemsl.的干燥根。主要产于中国浙江与四川两省，冬季茎叶枯萎时采挖。将玄参晒干、堆放几天并反复数次，直到干燥、内部呈黑色再切片备用。一般用于凉血滋阴、泻火解毒。
红参(Radix Ginseng Rubra)为Panax ginseng C.A.Mey.经人工栽培(通称为称“园参”)、蒸制后变成红色，性味则成温热。此药材属五加(Arliaceae)科植物，药用部位为干燥根，通常作用于中枢神经系统。红参可加强中枢神经系统的刺激与抑制作用，即促进神经反应的调节能力。它还可以降低血糖与胆固醇，并且对治疗与预防胃溃疡有不错的效果。
当归(Radix Angelicae Sinensis)为伞形(Umbelliferae)科植物Angelicasinensis(Oliv.)Diels.的干燥根。此药材主要产于甘肃与陕西省，秋末采挖，除须根、切段、酒炙后用慢火熏干。当归可以补血、活血、通经、止痛、润肠等。
黄芪(Radix Astragali)是Astragalus membrancaceus(Fisch.)Bge.Var.mongholicus.(Bge.)Hsiao或Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。主要产地为中国山西省、甘肃省、黑龙江省以及内蒙古。黄芪需至少四年生才能成药，通常于春、秋两季采挖。主要功能为消炎化脓、促进组织生长。
本发明药用植物组合物既能小规模制造，也可以大量应用于制药产业。
在制备本发明的中药组合物的方法中，按照常规方法对每种中药材进行预处理。先将个别药材切成小块，然后放入容器煎煮两次。第一次先煎煮约两个小时，将煎煮液倒出后，再加入适量的水煎煮一个半小时。从煎煮步骤中收集的煎煮液通过筛/滤器过滤。然后将约1.4倍体积的滤液浓缩成一倍体积。随后将浓缩液经喷雾干燥、造粒，制成颗粒。然后，将药粉包装、保存使用，或通过常规方法进一步分析活性成份，以确保品质。
本发明药用植物组合物可以根据需求加工成适当的剂型供患者口服或静脉注射使用。
下列实施例仅用来举例说明本发明，但本发明并不局限于下列范围。合理的改变，如对本领域普通技术人员做出的合理改变，并不脱离本发明的使用范围。
实施例1药物制备在制备本发明药用植物组合物的方法中用到的中药成分的种类和用量列于表二中。
表二实施例1中所使用的中药成分

按照常规方法对每种中药材进行预处理，再根据表二的重量比例称重备用。先将个别药材切成小块，然后放入容器煎煮两次。第一次先煎煮约两个小时，将煎煮液倒出后，再加入适量的水煎煮一个半小时。第一次煎煮后，倒出煎煮液，向容器中加入水，进行第二次煎煮。从两次煎煮步骤中收集的煎煮液通过筛/滤器过滤。以1∶1.4的比例浓缩。随后将浓缩液经喷雾干燥、造粒，制成颗粒。颗粒进一步包装成约1000颗胶囊。该胶囊称为“Yi-Gan Kang胶囊”，简称为YGK胶囊。该液体浓缩液也可制作成静脉注射液，称为YGK中药注射液。本发明药用植物组合物则称为YGK药用植物组合物。
实施例2YGK药用植物组合物对治疗B型肝炎患者的疗效该临床研究在中国人民解放军211医院进行。B型肝炎的致病原因很多，包括免疫反应失调、遗传基因以及B型肝炎病毒(HBV)突变。急性肝炎与慢性肝炎显著不同。一般来说，急性肝炎是肝脏遭病毒感染的活性肝炎，具传染性且有些许症状，然而症状并不明显，病人通常会感到不适、食欲减退，有些人也会有黄疸。慢性肝炎的患者并没特别症状，但血液检查可透露肝脏遭B型肝炎病毒感染。传染途径包括血液、生产、性行为与针头等。肝硬化则是患者因感染慢性肝炎、慢性持续性肝炎(CPH)、慢性活性肝炎(CAH)造成肝病理性损伤，日渐硬化。
本研究共有948位急性B型肝炎、慢性B型肝炎以及肝硬化患者参与，分为两组。试验组有642人，对照组则有306人。患者基本资料详列如表三。
表三患者基本资料

(*根據1990年上海肝炎會議修訂的病毒性肝炎診断分型標準)患者以下列方式进行治疗(1)试验组的患者每天口服8颗含有本发明植物药用组合物的YGK胶囊。
(2)对照组的患者则每天口服四片护肝片。在前面背景技术部分对护肝片进行描述。
两组患者均给药90天。疗效比较结果如表四所示。
表四YGK胶囊疗效

(p＜0.01)*有療效的定羲為在服薬90天後，病患的B型肝炎病毒e抗原(HBeAg)及去氧核糖核酸基因體(HBV-DNA)標記轉陰。
如表四所示，71.3％的病人服用YGK组成药90天后显示有疗效；相较于对照组患者服用中国市场上常见的护肝片仅有约33.98％对肝病有效。
B型肝炎病毒(HBV)含有表面与核心两部分。核心部分含有DNA的聚合酶(polymerase)以及e抗原。DNA为一双链环形结构，HBV则是含有编码4种多糖的4种基因，分别为S(表面)、C(核心)、P(聚合酶)和X(转录活化因子)。
S基因又分为三段pre-S1、pre-S2以及编码表面抗原(HBsAg)的片段。S基因发生突变的机率非常低，但发生时，将会影响HBsAg的产生，致使被感染的患者虽然表面抗原呈阴性反应，但通过测定HBV-DNA仍存在病毒。此外，HBsAg粒子为抗原复合物，抗原决定因子被鉴定为一个被指定为a的共同决定因子(common determinant)和四个被指定为d、y、w、r的主要补充决定因子(major subdeterminant)。因此，四个主要的决定因子为adw，adr，ayw和ayr。
C基因包含两个区段，前核心(pre-core)与核心(core)区段，分别产生核心抗原(HBcAg)以及e抗原(HBeAg)。前核心区段的突变会停止HBeAg的产生，即患者可能HBeAg为阴性，但HBsAg与HBV DNA却为阳性。另外，还有一种称为HBV2的B型肝炎病毒变种亦发生在核心区段。病人感染HBV2变种病毒可能造成HBsAg阳性，但无HBeAg与HBVDNA。
因为不同病毒产生的抗原不同且极复杂，检测HBV是否存在的试验即包括以下几种(1)检测HBsAg，HBV存在的主要指标。
(2)检测HBeAg，HBV感染以及病毒活动的指标。该指标与病毒感染、复制相关，即指数愈高表示血液中病毒数也愈多。
(3)检测HBV DNA，为病毒存在与活动指标。
表五至表七列出患者就诊后肝炎B包膜病毒(HbeAg)、肝炎B表面抗原(HbsAg)、肝肿大、脾肿大的变化情形。
表五药用植物组成物对患者HBeAg的影响

如表五显示，所有三种不同类型的肝病患者(急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化)中，试验组患者的HBeAg转阴比例比对照组的患者高2.7至3.3倍。此数字可说明YGK药用植物组成物对HBeAg转阴，即抑制HBV的感染与活性，有显著效果。
表六药用植物组成物对患者HBsAg的影响

如表六显示，在三种不同类型的肝病患者(急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化)中，试验组患者的HBsAg转阴比例比对照组的患者高3.1至4.4倍。此数字可说明YGK药用植物组成物对HBsAg转阴和抑制HBV有显著效果。
除了使HBeAg以及HBsAg两个指标转阴外，YGK药用植物组合物在增进患者食欲以及改善各种肝病症状方面，也显示出比服用“护肝片”的对照组患者更好的效果。
表七对肝、脾肿大的影响

肝、脾肿大与病毒感染有关，因此患者的肝、脾回缩是肝炎病毒感染改善的指标的一。
总之，YGK药用植物组成物对包括急性、慢性肝炎以及肝硬化等B型病毒性肝炎的治疗有效。
实施例3YGK药用植物组合物用于慢性B型肝炎(HBV)患者的疗效该临床研究由中国人民解放军302医院9科进行，主要评估本发明的药用植物组合物用于慢性B型肝炎患者的疗效。
慢性肝炎是指肝脏持续发炎造成细胞损伤超过六个月以上。引发肝炎的原因包括病毒感染、代谢或免疫异常以及药物。长期发炎损伤导致肝脏呈结节状则为肝硬化。慢性肝炎可以由急性B型或C型肝炎演变而成，演变过程可能无急性症状产生。透过肝脏穿刺可以正确找出病变因子、了解肝硬化程度、确立诊断，但对治疗效果的判定则较差。大约25％的慢性B型肝炎患者会有严重、永久性的肝损伤，即为肝硬化。B型肝炎的携带者患肝癌的机率比一般人更高。
长期感染肝炎病毒被认为是T细胞太弱，无法对抗病毒的结果。人体的T细胞主要是负责清理体内被感染的细胞，即B型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。当清洁不足时，受感染的细胞便会长期留在患者体内，演变成慢性感染。当HBsAg数量增高时，便会引发急性症状；反之，当抗体抗-HBsAg增加时，症状则减轻。
根据组织学分类，慢性肝炎可分为慢性活性肝炎(CAH)以及慢性持续性肝炎(CPH)两种。CPH的肝脏组织切片显示，细胞发炎的范围仅局限在portal triad，并未渗透到介膜板(limiting plate)；然而，CAH的炎症则不仅穿透介膜板，还包围个别肝细胞使其一片片坏死。随著病程发展，坏死细胞(bridging坏死)的位置将会被结缔组织(bridging纤维化)所取代，而使肝脏结构改变，这种情况即为肝硬化。
60位慢性肝炎患者分成两组，其中一组患者服用药用植物组合物YGK，另一组则服用护肝片，为期三个月。两组患者的基本资料详列如表八。
表八临床研究中的患者组成

(*根據1990年上海肝炎會議修訂的病毒性肝炎診断分型標準)表九描述两组患者分别服用YGK(试验组)和护肝片(对照组)后，HBsAg、HBeAg以及HBV-DNA的变化。
如上所述，HBsAg可以用来检测患者是否受到B型肝炎病毒急性感染或是否为慢性B型肝炎的携带者。在血清试验中，HBsAg的滴度下降则表示患者的HBV症状减轻，接近免疫状态。
表九两组患者的HBsAg，HBeAg，和HBV-DNA变化

p＜0.05.
如表九所示，YGK对慢性肝炎患者有显著疗效。服用YGK的患者中，73.33％的人血清谷氨酸丙酮酸转氨酶/血清丙氨酸转氨酶(SGPT/ALT)恢复正常，46.15％的人HBeAg转阴，60.00％的人HBV-DNA转阴。此数据表示药用植物组合物YGK不仅对HBV的复制有抑制效果，也会使转氨酶凋亡。另外，此临床观察中并未发生任何药物不良反应。
实施例4YGK药用植物组合物用于治疗B型肝炎患者效果的病例讨论此临床研究由中国人民解放军113医院传染科进行，主要目的是评估本发明的药用植物组合物YGK对B型肝炎的疗效。
丙氨酸转氨酶(ALT)是一种存于肝细胞的酵素，同时在肾脏、心脏以及骨骼肌肉也有少量存在。当一旦遭病毒伤害，在黄疸发生前，肝细胞会释放ALT到血液中，引发血液中ALT指数异常的高，通常会延续数天或数周。因此，ALT是急性肝细胞损害很重要的指标。另外，胆红素(BIL)也是检测肝病的常用指标。
1号病例是一位24岁慢性B型肝炎的男性患者，主诉为感到虚弱已超过一年。表十列出此位患者服用YGK前后的检测指数比较。
表十#1患者治疗前后的诊断比较

表十显示，随血清内对抗病毒蛋白的抗体的量的增加，患者的病毒DNA、病毒蛋白、HBsAg、HBeAg、HbcAg显著降低，表示该患者感染的程度已减轻，处于HBV免疫状态。
2号病例是一位66岁的男性患者，反复腹胀、体虚伴随肝硬化与脾肿胀已十年。下列为此位患者服用YGK前后的检测指数比较(表十一)。表十一#2患者服用YGK中药组合物前后诊断比较

表十一揭露患者的病毒DNA以及病毒蛋白大量减少，即受HBV感染的程度已减缓。数据中同时显示患者的免疫力提升，HBsAg、HBeAg、HBcAg降低，以及血清中的抗体增加。
3号病例是一位31岁的男性患者，感到体虚月余，先在邻近中医诊所接受治疗无效，再因急性黄疸型B型肝炎入院。下为此患者服用YGK前后的检测指数比较(表十二)。
表十二#3患者服用YGK中药组合物前后诊断比较

表十二记录患者的病毒DNA以及病毒蛋白大量减少，即受HBV感染的程度已减缓。数据中同时显示患者的免疫力提升，HBsAg、HBeAg、HBcAg降低，以及血清中的抗体增加。
4号病例是一位45岁的男性急性黄疸型B型肝炎患者，感到腹胀、腹痛与体虚约一周。以下为此患者服用YGK前后的检测指数比较(表十三)。
表十三#4患者服用YGK中药组合物前后诊断比较

表十三记录患者的病毒DNA以及病毒蛋白大量减少，即受HBV感染的程度已减缓。数据中同时显示患者的免疫力提升，HBsAg、HBeAg、HBcAg降低，以及血清中的抗体增加。
5号病例是一位31岁的男性急性黄疸型B型肝炎患者，感到腹胀、体虚约五天后入院接受治疗。以下为此患者服用YGK前后的检测指数比较(表十四)。
表十四#5患者服用YGK中药组合物前后诊断比较

表十四显示患者的病毒DNA以及病毒蛋白大量减少，即受HBV感染的程度已减缓。数据中同时证实患者的免疫力提升，HBsAg、HBeAg、HBcAg降低，以及血清中的抗体增加。
表十五列举患者在不同指标的疗效的百分比。
表十五患者接受YGK治疗后的疗效治療效果 病患人數百分比*明顯療效 80.g％有幚助 19.10％肝腫大 75％胰腫大 62.5％肝功能正常ALT 93.7％Bilirubin91.1％轉陰率HBsAg(+)to HbsAg (-) 33.3％HBsAb(-)to HbsAb(+) 23.8％HbeAg(+)to HbeAg(-) 68.6％HbeAb(-)to HBeAb(+) 23.9％HBcAb(+)to HbsAb(-) 43％HBV-DNA(+)to HBV-DNA(-) 39.5％*此研究中有42名病患(31名男性、11名女性)，年齡層介於16歲與63歲之間(平均年齡42歲)。其中，26名病患診断為急性B型肝炎，8名為慢性B型肝炎，餘8名為慢性活動性B型肝炎。38位病患的ALT不正常；34名病患的BIL異常；42名HBV檢驗呈陽性；38名之HBV-DNA呈陽性反應；35名病患的HBeAg呈陽性，32名具有HAV、HCV、HEV抗體。
结果患者在接受YGK治疗后，如肝区疼痛等主观症状改善，肝功能检测也趋正常。一般来说，ALT指数在服药约16天后便会逐渐下降。患者中显示的抗病毒活性接受YGK中药组合物治疗的患者HBeAg转阴率68.6％。病人治疗期间无明显副作用。
实施例5YGK药用植物组合物用于肝病动物的实验以下试验于韩国中央研究中心(Korean Central Research Center)进行。
试验5.1对酒精肝或脂肪肝大鼠的疗效分析目的本试验的目的是要探讨此药用植物组合物对白老鼠酒精代谢的影响，特别是将酒精(alcohol)分解成三酸甘油酯(triglyceride)及胆固醇(cholesterol)的过程。本试验所使用的试验剂量为1g/kg。
方法本试验使用的动物为200公克SD白色雄性大鼠。从动物的眼框静脉丛抽取血液样本。
将试验动物分成实验组与对照组两组。给予对照组动物酒精，一日三次共七天；对实验组动物则同时给予酒精以及1g/kg的YGK，同样一日三次共七天。检测大鼠肝的甘油三酯、胆固醇、脂质过度氧化(lipidhyperoxidation)以及谷胱甘肽(glutathione peptide)。
结果使用酒精一周后，对照组动物肝脏的甘油三酯与胆固醇含量均提高；也观察到脂质过度氧化以及谷胱甘肽下降。相反，实验组动物肝脏的脂肪变形被抑制。而且，实验组动物的脂质过度氧化过程以及谷胱甘肽下降则被抑制。
结论药用植物组合物YGK可以防止饮酒后肝脏中甘油三酯堆积，以及胆固醇含量提高，有助于肝脏正常运作。
试验5.2对白色肝硬化大鼠的疗效分析目的本试验的目的是要探讨此药用植物组合物YGK对白色、肝硬化大鼠的蛋白质合成的影响。
方法本试验使用的动物为重200公克的SD白色雄性大鼠。从动物的眼眶静脉丛抽取血液样本备用。给予实验动物本发明所述的药用植物组合物，一日三次共七天。
1.刺激大鼠产生肝硬化在大鼠背部皮下注射以橄榄油稀释的50％的氯仿(cholorform，CCl4)，剂量为1ml/200g，一周三次，共七周，剂量应随大鼠体重变化调整。通常大鼠在六周后会产生肝硬化，由中线剖腹进行肝脏穿刺。
大鼠的血清丙氨酸转氨酶(ALT)和血清天冬氨酸转氨酶(AST)会因肝硬化以及肝脏部分切除而大量增加。
2.给予大鼠服用YGK将实验组的大鼠再度分为三组，分别给予500mg/kg、1000mg/kg、2000mg/kg不同剂量的YGK药用植物组合物。
结果1.ALT与AST指数使用YGK后，三组不同剂量治疗组的ALT、AST指数均降低，表示肝脏硬化过程趋缓。
2.肝细胞再生在肝硬化的大鼠中，给予不同剂量YGK的三组大鼠的细胞再生率分别为19％、30％、以及47％，明显高于未使用YGK的大鼠。另外，在肝脏部分切除但肝功能正常的大鼠中，给予不同剂量YGK的三组大鼠的细胞再生率则分别为51％、70％、以及92％，明显高于同情况但未使用YGK的大鼠。
结论药用植物组合物YGK既可有效增进肝细胞再生，也能抑制肝持续硬化。
实施例6YGK药用植物组合物在动物中的毒性试验目的该试验于中国黑龙江省劳动卫生职业病研究所进行，主要目的为检验将YGK药用植物组合物以静脉注射至动物体中所产生的急性毒理反应。
方法受试动物为哈尔滨医大动物室提供的日本大耳白种属家兔，此种属家兔的特点为耳部血管清楚，实验容易操作。
挑选10只上述种属家兔，雄六只、雌四只，体重在1900克与3000克之间。
将兔子随机分为两组，其中每组有三只雄兔、两只雌兔。两组动物分别用10g/kg以及15g/kg剂量的YGK药用植物组合物，透过静脉点滴经家兔的耳静脉注射。
注射液的浓度为1g/ml，因此高剂量组15g/kg的浓度为15ml/kg，换算成60公斤成人的建议使用剂量为900ml。
给药后连续观察动物行为两周；给药当天每小时观察一次，之后每天观察四到六次。
实验结束后将动物解剖，检查眼睛、肝脏、肺脏和胰脏是否有异常。
结论试验期间家兔行为正常，体重也与日俱增。解剖后观察，眼睛、肝脏、肺脏和胰脏均无异常。此结果相较于一般急性毒理分级标准，属正常无急毒。
实施例7以细胞试验评估YGK药用植物组合物对HIV的影响目的下列试验由中国人民解放军军事医学科学院进行，主要目的为检验YGK静脉注射液对抗爱滋病HIV的作用。
方法将MT4细胞放在96孔板，加入100 TCID50的HIV-1悬浮液，在37℃、5％CO2的条件下培养七天。
将不同浓度的YGK中药组合物加入孔板，观察MT4细胞的型态。
结果加入适当浓度的YGK中药组合物观察，MT4细胞并无产生病理变化。此现象说明YGK中药组合物对HIV引起的细胞病变有抑制效果。
YGK中药组合物在大于或等于12.5mg/ml的浓度下，能抑制HIV-1对MT4细胞的致病变作用；对MT4细胞50％毒性作用的浓度则为25mg/ml。
结论在体外试验中，YGK中药组合物在体外对HIV-1病变有一定的抑制作用。
实施例8YGK药用植物组合物用于治疗HIV的病例报告目的此临床试验由中国上海市传染病医院进行，主要目的为评估YGK药用植物组合物用于治疗HIV的疗效。
方法患者为一50岁男性中国人，感染HIV合并带状泡疹。住院期间同时接受西医抗病毒治疗，以及本发明的药用植物组合物。
结果1996年8月首次用快速凝集素法(Rapid Agglutinin Assay)确定患者感染HIV时并无任何症状；1997年6月1日患者后颈背部、左前胸部及左上臂出现大片泡疹，并于同年6月24日入院接受诊疗。
入院后体检除皮肤外，无其他异常；肾功能正常；肝功能则有γ-谷氨酸转肽酶(γ-glutamy transpeptidase)和乙酰基葡糖醛酸糖苷酶(acetylglucuronidase)轻度增高；肝炎检查中HBV、HCV均为阴性，但HGV-RNA则为阳性；免疫检验显示β2-微球蛋白(β2-microglobulin)降至2.4-2.5mg/L。
住院中血红素、红血球数小幅下降，白血球与血小板数则正常。周边血液淋巴数显示T4细胞降至2.76×10/L(32.9％)，T4/T8比为1.16。因此，确认诊断为HIV感染合并带状泡疹。
住院期间患者一度出现腹泻与干咳，经治疗后痊愈。1997年9月4日ELISA检验显示HIV抗体阳性，T4细胞降至25.4％，T4/T8比为0.94。经给予YGK治疗，1997年11月复检时，T4细胞提升至40.7％，T4/T8比为1.45。同时患者的皮肤泡疹也逐渐好转，于同年11月底痊愈出院。
结论通过结合西医治疗，YGK药用植物组合物有效缓解HIV患者的症状。
实施例9YGK药用植物组合物用于治疗HIV的临床观察目的此临床试验由中国北京地坛医院(国家爱滋病治疗中心)进行，主要目的为评估本发明药用植物组合物对HIV患者的疗效。
方法五位患者均经蛋白质印迹法(westem blotting)确认诊断受HIV感染。患者基本资料如下表。

患者采用下列方式进行治疗首先将5ml的YGK中药组合物的注射液加入250ml 5％葡萄糖中进行静脉点滴注射，每日一次。三天后患者若无不良反应，增加YGK注射液至15ml，同样加至250ml 5％葡萄糖中继续点滴注射，疗程为三个月，无不适反应。
1号患者在接受YGK治疗10天前曾使用AZT与DDI治疗三个月；5号患者则在YGK疗程中同时组合使用α-干扰素。
治疗前、治疗中、治疗后均个别采集3ml患者的血液进行HIV病毒量检测。
结果个别患者的HIV病毒数如下

备注HIV病毒控制量为3,000。
如上表所示，除了5号患者同时使用YGK与干扰素外，治疗期间所有使用YGK患者的HIV病毒数下降，CD4细胞数则上升。2号患者HIV数量的下降特别显著，其CD4也从285/mm3上升到510/mm3。
结论本发明的药用植物组合物有效降低HIV病毒数。
实施例10俄罗斯临床试验使用YGK药用植物组合物治疗HIV患者目的此临床试验由位于俄罗斯西伯利亚的医院进行，主要目的为评估本发明药用植物组合物YGK对HIV患者的疗效。
方法选择五位遭HIV感染的患者接受YGK治疗。患者基本资料如下表。

患者接受本发明的YGK药用植物组合物治疗；治疗前、治疗中、治疗后分别采集患者的血液进行CD4细胞数量检测。
结果个别患者的CD4细胞数量如下

備註CD4細胞的正常量為500。
治疗过程中除了少许轻微不良反应外，所有患者对药物的反应都很好。治疗一个月后病人的症状即有明显改善，如虚弱、不舒服与沮丧感均降低，腹部疼痛与不舒服感也消失了。在治疗三个月后，4号与5号患者体重增加五公斤；2号与4号患者也戒毒了；所有患者的肝炎生化指标也趋正常。
根据上表，除2号患者外，所有病人的CD4细胞数均增加。
结论本发明的药用植物组合物可以有效舒缓HIV患者的症状。
权利要求
1.一种用于治疗肝病和/或爱滋病的药用植物组合物，包括白花蛇舌草(Herba Hedyotidis diffusae)的全草；拳参(Rhizoma Bistortae)的干燥根茎；虎杖(Rhizoma Polygoni Cuspidati)的干燥根茎；以及五味子(Fructus Schisandrae)的干燥成熟果实。
2.根据权利要求1的药用植物组合物，进一步包括北豆根(Rhizoma Menispermi)的干燥根茎；黄芩(Radix Scutellariae)的干燥根；牛黄粉；郁金(Radix Curcumae)的干燥块根；山楂(Fructus Crataegi)的干燥成熟果实；以及三七(Radix Notoginseng)的干燥根。
3.根据权利要求2的药用植物组合物，进一步包括枸杞子(Fructus Lycii)的干燥成熟果实；红参(Radix Ginseng Rubra)的蒸煮后的干燥根；玄参(Radix Scrophulariae Ningpoensis)的干燥根；当归(Radix Angelicae Sinensis)的干燥根；以及黄芪(Radix Astragali)的干燥根。
4.根据权利要求1的药用植物组合物，其中所述白花蛇舌草、拳参、虎杖和五味子的重量比约为3∶3∶1∶2。
5.根据权利要求2的药用植物组合物，其中所述白花蛇舌草、拳参、虎杖、五味子、北豆根、黄芩、牛黄、郁金、山楂和三七的重量比约为3∶3∶1∶2∶1∶1∶0.1∶1∶2∶1。
6.根据权利要求3的药用植物组合物，其中所述白花蛇舌草、拳参、虎杖、五味子、北豆根、黄芩、牛黄、郁金、山楂、三七、枸杞子、红参、玄参、当归和黄芪的重量比约为3∶3∶1∶2∶1∶1∶0.1∶1∶2∶1∶3∶1∶2∶1∶3。
7.根据权利要求1的药用植物组合物，其中所述肝病包括病毒性肝炎、酒精肝或脂肪肝、肝硬化以及肝癌。
8.根据权利要求7的药用植物组合物，其中所述病毒性肝炎选自A型肝炎(HAV)、B型肝炎(HBV)、C型肝炎(HCV)和E型肝炎(HEV)。
9.一种用于治疗肝病患者的方法，包括对肝病患者给药所述根据权利要求1的药用植物组合物。
10.一种用于治疗肝病患者的方法，包括对肝病患者给药所述根据权利要求2的药用植物组合物。
11.一种用于治疗肝病患者的方法，包括对肝病患者给药所述根据权利要求3的药用植物组合物。
12.一种用于治疗HIV患者的方法，包括对HIV患者给药所述根据权利要求1的药用植物组合物。
13.一种用于治疗HIV患者的方法，包括对HIV患者给药所述根据权利要求2的药用植物组合物。
14.一种用于治疗HIV患者的方法，包括对HIV患者给药所述根据权利要求3的药用植物组合物。
15.一种用于制备根据权利要求1的药用植物组合物的方法，包括将白花蛇舌草的整株、拳参的干燥根茎、虎杖的干燥根茎和五味子的干燥成熟果实粉碎并混合，形成中药组合物；在水中煎煮所述中药组合物；过滤所述煎煮的中药组合物，使所述中药组合物的药渣与含有中药提取物的中药溶液分离；以及浓缩所述含有中药提取物的过滤的中药溶液。
16.根据权利要求15的方法，进一步包括将所述中药浓缩液喷雾干燥并制粒，形成中药颗粒。
17.根据权利要求15的方法，其中所述中药组合物先在水中煎煮2小时，冷却后，再煎煮1.5小时。
18.根据权利要求15的方法，其中所述过滤的中药煎煮液的浓缩率约为体积比的1.4比1。
19.根据权利要求16的方法，其中将所述中药颗粒装入胶囊。
20.一种用于制备根据权利要求2的药用植物组合物的方法，包括将白花蛇舌草的整株、拳参的干燥根茎、虎杖的干燥根茎、五味子的干燥成熟果实、北豆根、黄芩、牛黄粉、郁金、山楂和三七粉碎并混合，形成中药组合物；在水中煎煮所述中药组合物；过滤所述煎煮的中药组合物，使所述中药组合物的药渣与含有中药提取物的中药溶液分离；以及浓缩所述含有中药提取物的过滤的中药溶液。
21.根据权利要求20的方法，进一步包括将所述中药浓缩液喷雾干燥并制粒，形成中药颗粒。
22.根据权利要求20的方法，其中所述过滤的中药煎煮液的浓缩率约为体积比的1.4比1。
23.根据权利要求21的方法，其中将所述中药颗粒装入胶囊。
24.一种用于制备根据权利要求3的药用植物组合物的方法，包括将白花蛇舌草的整株、拳参的干燥根茎、虎杖的干燥根茎、五味子的干燥成熟果实、北豆根、黄芩、牛黄粉、郁金、山楂、三七、枸杞子、红参、玄参、当归和黄芪粉碎并混合，形成中药组合物；在水中煎煮所述中药组合物；过滤所述煎煮的中药组合物，使所述中药组合物的药渣与含有中药提取物的中药溶液分离；以及浓缩所述含有中药提取物的过滤的中药溶液。
25.根据权利要求24的方法，进一步包括将所述中药浓缩液喷雾干燥并制粒，形成中药颗粒。
26.根据权利要求24的方法，其中所述过滤的中药煎煮液的浓缩率约为体积比的1.4比1。
27.根据权利要求25的方法，其中将所述中药颗粒装入胶囊。
全文摘要
本发明提供了用于治疗肝病及爱滋病(HIV)的新药用植物组合物。此组合物有15味药材，包括白花蛇舌草、拳参、虎杖、北豆根、黄芩、牛黄粉、黄芪、枸杞子、三七、红参、玄参、五味子、郁金、山楂、当归。在15味药材中，白花蛇舌草、拳参、虎杖、五味子为药物组合物中提供药效的主要成分。
文档编号A61K36/808GK1561221SQ01817493
公开日2005年1月5日 申请日期2001年10月18日 优先权日2000年10月18日
发明者邬之盛 申请人:邬之盛, 邬之元·贝尔托洛蒂