专利名称：改善生活质量的医药品和食品及其制备方法
技术领域：
本发明涉及在口服具有生理活性的蛋白质时运用了使其有效发挥生理活性的方法的医药品和食品。即，本发明涉及下述医药品和食品口服的生理活性蛋白在不失活的状态下通过胃，不丧失生理活性到达作用部位——从十二指肠到下消化道。另外，本发明还涉及上述医药品或食品能新治疗/预防的疾病。本发明的方法中，生理活性蛋白不分解而达到作用部位，这对发挥其作用极为有效。
背景技术：
负责食物消化吸收的小肠粘膜表面布满了微小突起，这些突起表面又被更微小的突起覆盖，因此其表面积明显扩大。有说法指出，人消化道的表面积有一个半网球场的大小，小肠占该表面积的大半。肠道内腔是生物机体的外界，有150兆个肠内细菌生活在其中。如此大面积与外界接触，但将其与外界相隔的仅仅是一层极薄的粘膜层。一般认为，此薄粘膜层对外界的种种刺激作出反应，但什么刺激物质与粘膜接触，发生怎样的反应，受刺激的粘膜部位在何处等具体问题还是个谜。总之，消化道粘膜在生物机体中负有重要功能。
肠道粘膜对刺激作出反应的一个好的例子是其作为防止肠内细菌入侵的粘膜屏障。即，只要动物健康，肠内细菌就很少越过屏障入侵。但当生物机体处于外科手术、外伤或烧伤等受创时或死亡时，肠内细菌立即越过粘膜层侵入体内。在健康状态下，粘膜层是防止不断想入侵的肠内细菌的防御装置。一般认为，除肠内细菌外，刺激肠道粘膜的还有病毒和食物中包含的有毒物质等。在具有很大表面积的肠道粘膜中，应该存在接受刺激的传感器和以传感器信息为基础作出反应的反应器，但不知道是什么样的传感器在起作用。例如已知肠道粘膜中有乳铁蛋白受体，但完全不知道乳铁蛋白与受体结合时会发生何种反应。
胃分泌盐酸，其内部保持pH为1.0～3.0的强酸性状态。当摄入被病原性细菌污染的食品或饮用水时，胃内保持强酸性对杀灭病原菌非常有效，并且，胃液中含有具有最适pH值的酸性蛋白酶和胃蛋白酶，将蛋白质水解成肽。在强酸性条件下，受胃蛋白酶的作用，污染食物的病原菌几乎全部被杀死。因此，胃是击退病原菌入侵的第一关。身体不好时口服具有生理活性的蛋白质并期望其发挥作用，但在胃中的分解是其最大的障碍，这是由于进入胃中的生理活性蛋白在强酸性条件下其折叠的三级结构被破坏，在胃蛋白酶的作用下肽键水解。在这种状态下，蛋白质完全丧失生理活性。
发明内容
为了帮助食物消化吸收，口服乳糖分解酶、淀粉酶、蛋白酶或脂肪酶等水解酶。但是，这些水解酶在人体内是否真的水解食物、有助于消化吸收尚有疑问。因为将这些消化酶以1％的浓度溶于含有50μg/ml胃蛋白酶pH＝1.2的人工胃液中，在37℃温育1.5小时后酶完全失活，食物在胃中的停留时间估计约为1.5～2.0小时，由此可知，即使内服水解酶也不能期望能改善病症。
目前，具有抗炎作用的沙雷肽酶和据说有血清胆固醇降低作用的弹性蛋白酶等生理活性蛋白也作为药物给患者口服，已知这些生理活性蛋白在胃中溶解时，也和水解酶一样被分解，失活。
另外，蛋白溶菌酶作为有效成分之一加到大部分的大众综合感冒药中，可以说是感冒药中必不可少的最受欢迎的成分。泪液、唾液和消化液等覆盖粘膜的分泌液中含有溶菌酶，其具有水解构成细菌细胞壁的胞壁酰肽的酶活性，因此将其视为杀菌酶。但不可思议的是，感冒患者口服该溶菌酶对咽喉痛等急性炎症有镇痛消炎作用。推测其机理如下与溶菌酶结合的受体存在于粘膜表面，与溶菌酶结合后机体内的麻药——阿片样物质释放，但该推测尚未被实验证明。除有镇痛消炎作用外，该溶菌酶对哺乳动物不显示任何毒性，能放心加入，因此其作为感冒药的有效成分被广泛使用。一般认为溶菌酶发挥镇痛消炎作用的场所在占粘膜面积大部分的小肠，但这点还有待今后进一步研究。既便如此，感冒药片剂在胃中崩解后，溶菌酶也不能逃脱胃蛋白酶的水解作用。推测避开胃蛋白酶的水解作用而进入小肠的溶菌酶极少。
另外，免疫球蛋白和乳铁蛋白等分子量较大的蛋白质也能增进健康，人们将其作为食品积极摄取。免疫球蛋白是用大量细菌抗原免疫奶牛后作为细菌抗原抗体(IgG1)分泌到牛奶中，脱脂后的脱脂免疫牛奶粉能增进健康。但是，牛奶中的免疫球蛋白IgG1具有胃蛋白酶敏感性，经过胃时其大部分被分解，是否具有健康增进效果尚有疑问。
奶牛在分娩一周内分泌的乳汁为初乳，此时禁止挤奶。因为初乳与奶牛在分娩一周后分泌的普通乳汁性质不同，含有大量免疫球蛋白IgG1，因此在低热灭菌或高温瞬间灭菌时凝固成豆腐状，不能杀菌。将此初乳脱脂，为避免免疫球蛋白失活而用低温喷雾干燥法所得的脱脂初乳奶粉也作为健康增进物质在各国广泛使用。例如，在美国，已经将脱脂初乳奶粉作为保健食品具有改善关节炎和高血压症的效果。此时，脱脂初乳与免疫牛奶一样，它们在胃内大部分免疫球蛋白被分解。
近年来，有报告指出，牛奶中的乳铁蛋白具有预防大肠癌的效力，并作为防癌发生的原料受到人们的瞩目。并且，有报告指出，C型肝炎患者口服大量牛奶乳铁蛋白后，发现血中病毒滴度低的轻症患者症状得到改善。80％的C型肝炎患者由肝硬化变成肝癌而死亡，就从这一点来说，如果这一研究成果也能通过其它的医疗设施确证，对患者无疑是一大福音。另外，乳铁蛋白每天的给药量达3.6g之多，这阻碍了其实用化，将用量减至每天1.8g则没有发现明显的病症改善作用。这时也确定口服的乳铁蛋白大部分在胃中被水解。用在胃中不水解、进入十二指肠后才开始释放乳铁蛋白的制剂进行临床试验，旨在将其改良成在减少剂量的同时，即使对重症C型肝炎患者也能改善其症状的制剂。
消化道总表面积为网球场面积的1.5倍，胃的表面积仅为900cm2，并且，营养物质和药物等在胃内不被吸收，没有报告指出溶菌酶、免疫球蛋白和乳铁蛋白等生理活性蛋白通过与胃壁结合而改善病症。进一步地，胃壁被厚的粘液层覆盖，因此上述生理活性蛋白在被胃蛋白酶水解之前透过粘液层与粘膜结合的希望很小。口服具有生理活性的蛋白质使其发挥药效时，最大的障碍是在胃中的分解和失活，如果不解决此问题，则不能实现作为以增进健康为目的的医药品和食品的生理活性蛋白的实用化。
本发明人对为了改善病症和增进健康而口服酶、蛋白酶抑制剂和生理活性蛋白进行长年研究，因为虽然蛋白有细胞溶素的例外，但总的来说蛋白质安全性高，如果通过口服能发挥药效，则能成为理想的治疗药。研究的主要对象为乳铁蛋白和免疫球蛋白。乳铁蛋白的分子量高达8万左右，与粘膜接触后似乎能引起生物体变化，其一是对病原菌感染的防御能力提高，其二是有阿片样物质的镇痛作用。从这些作用看，认为粘膜上存在叫作乳铁蛋白传感器的构造，但几乎不知道其详细情况。
但是，用作实验的动物口服上述蛋白质而发现生理活性后，但再以相同的量给与相同条件下的动物时，有时发挥作用，有时则不发挥作用，缺乏明显的再现性。例如给BALB/c小鼠以50mg/kg的量口服5-氟尿嘧啶(5-FU)，在由细菌移位(bacterial translocation(BT))引起菌血症、很多脏器官功能不全而导致小鼠死亡的实验系统中，在5-FU给药前一天至同时给药口服来自牛奶的乳铁蛋白，有时能抑制BT使小鼠存活下来。并且，仅在乳铁蛋白给与量少(一次2mg/kg)的情况下上述BT抑制作用才有统计学上的显著差异。如果以2mg/kg的量口服小鼠抗癌剂能抑制BT，则能抑制外科手术、癌和紧张等引起的人BT，能抑制从传染病到全身性炎症反应综合征引起的很多脏器官功能不全，这能给医疗界带来很大的影响。
另一方面，在完全相同的条件下口服100mg/kg而没有任何表现，但这种表达仅在书面上是真实的，因为完全相同的条件只是本发明人等的一种想法，而实际上条件不同，因此没有表现相同的现象。乳铁蛋白的BT抑制效果缺乏再现性，究其原因是乳铁蛋白在消化道中分解。总之，生理活性蛋白只有完全保持其结构到达作用部位才能发挥其生理活性，因此可得出这样一种结论在到达作用部位之前其分解则不能发挥作用。
如果口服乳铁蛋白等生理活性蛋白，其大部分在通过胃时部分分解而丧失作用。假定口服这些生理活性蛋白偶尔发挥作用，则是因为通过胃时未被分解的极少量进入十二指肠后发挥作用。因此，本发明人寻求下述方法为了改善病症和增进健康而口服生理活性蛋白，使其在不分解的状态下通过胃，进入十二指肠后才溶解。
一般认为，在现有制剂中，口服的乳铁蛋白仅与口腔和食道粘膜一过性接触，进入胃后被胃蛋白酶分解成多肽而丧失其作用。对酸性蛋白酶的高度敏感性阻止了现有乳铁蛋白的广泛应用。乳铁蛋白是牛奶中的微量成分，价格较高，对胃蛋白酶和番木瓜蛋白酶等酸性蛋白酶的敏感性高，易水解，这是其最大的缺点。但已知其对其它蛋白酶具有明显抵抗性，在粪便中放置一周后几乎不分解(参照本说明书实施例4)。因此推测，如果能使乳铁蛋白在不分解的状态下通过胃进入十二指肠，则口服少量能发挥改善病症和增进健康的作用，由此完成本发明。
本发明提供具有下述控制释放措施的口服组合物含有一种或一种以上的生理活性蛋白作为活性成分，其中一定比例以上的活性成分几乎不分解，保持其活性在下消化道内释放。
本说明书中，“口服组合物”包括口服摄取的所有形态的医药组合物和/或食品。本发明的医药组合物可以制成片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂和散剂等各种医药制剂形态。食品包括功能性食品、保健食品和营养辅助食品。
本发明的组合物必须有释放控制措施，所述释放控制措施是指在组合物的活性成分中，至少10％或以上、优选20％或以上、更优选50％或以上、进一步优选80％或以上保证在胃肠内不发生不可逆失活(例如有效成分在胃肠内不释放或溶解，因此不变性和/或分解，保持其活性到达下消化道(十二指肠、小肠)。
可以用现有药物释放控制的各种方法作为本发明组合物的释放控制措施，其中包括例如将含有活性成分的母核用肠溶性薄膜或适当厚度的疏水性物质包衣和活性成分以基质为载体在规定的环境下释放有效成分。
本发明能适用于在胃肠内变性和/或分解、失活的所有蛋白质性质的活性成分。这些活性成分包括在酸性蛋白酶即胃蛋白酶和番木瓜蛋白酶的作用下失活的具有生理活性的蛋白质。更具体地，包括具有免疫赋活作用和镇痛消炎作用的乳铁蛋白和溶菌酶等碱性蛋白质、抑制病原菌生长的免疫球蛋白、帮助小肠内食物消化吸收的水解酶和抑制这些酶活性的蛋白质性质或肽性质的抑制剂。帮助食物消化吸收的水解酶可以列举各种蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等。特别优选活性成分为乳铁蛋白。乳铁蛋白对目前难治的各种疾病有速效性治疗效果(参照本说明书实施例中的治疗效果项)。
本发明适用于治疗全身性炎症反应综合征，炎症性肠疾病，包括肥胖、糖尿病或高血压症的生活习惯疾病，恶性淋巴瘤，由包括C型肝炎病毒、轮状病毒、疱疹病毒或巨细胞病毒的病原病毒引起的传染病，病原微生物引起的传染病和自身免疫疾病，和/或适用于治疗或改善伴随上述疾病或状态的症状、降低病人生活质量的各种症状。
全身性炎症反应综合征是各种疾病患者中广泛发生的炎症，包括传染病、胰腺炎、缺血、多重外伤、出血性休克、免疫介导性脏器损伤、败血症和全身性炎症反应综合征的常见并发症(急性肺损伤、休克、肾机能不全、各种脏器机能不全综合征和器官系统机能异常)。炎症性肠疾病包括克罗恩病和溃疡性大肠炎。
具体实施例方式
本发明的一个实施形态是用使乳铁蛋白颗粒或片剂的表面在胃中不溶解而进入肠内溶解的肠溶性薄膜包衣的组合物，更详细地说是以下物质。
来自牛奶的乳铁蛋白冻干粉末体积比重非常小，难于直接打成片剂。另外，水分和高温使其不稳定，因此优选在干燥状态下制剂。因此，将乳铁蛋白和赋形剂、粘合剂、崩解剂混合，用打碎机(slug machine)强压成薄大平坦的圆盘，然后将其粉碎过筛，制成一定大小的均匀颗粒。将所得的颗粒用肠溶性薄膜包衣，定量装入硬胶囊中即可制成产品。当制成片剂时，往颗粒中加入润滑剂后打片，将所得片剂用肠溶性薄膜包衣即可制成产品。
将按上述方法制备的乳铁蛋白肠溶片和肠溶性颗粒用下述溶液进行崩解试验(参照《日本药典》(第九版)，一般试验法41；或《日本药典》(第十三版)，一般试验法47，崩解试验法，(6)肠溶性制剂)往2.0g氯化钠中加入稀盐酸(24ml)和水溶解，再加水至1000ml作为第一溶液(pH＝1.2)；往250ml 0.2M的磷酸二氢钾溶液中加入118ml 0.2N的氢氧化钠溶液，再加水至1000ml作为第二溶液(pH＝6.8)。按本发明方法制备的片剂和颗粒在第一溶液中浸泡120分钟不崩解，在第二溶液中浸泡60分钟即崩解。因此，能制备在胃中不崩解、进入十二指肠后才开始崩解溶出乳铁蛋白的制剂。
制备本发明肠溶性制剂时所用的赋形剂包括乳糖、蔗糖和葡萄糖等单糖或二糖类，玉米淀粉和土豆淀粉等淀粉类，结晶纤维素和轻质硅胶、合成硅酸铝、偏硅酸铝酸镁、磷酸氢钙等无机物等。粘合剂包括淀粉类、羧甲基纤维素(CMC)、羟丙基纤维素(HPC)、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷酮等。另外，为使其在下消化道中也只崩解成初级粒子，所用的崩解剂包括淀粉、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠和羧甲基淀粉钠等。给片剂和颗粒进行肠溶性包衣的包膜剂包括在pH为5～6的环境中溶解的羟丙甲基纤维素酞酸酯、羧甲基乙基纤维素、乙酸酞酸纤维素、甲基丙烯酸共聚物或在碱性范围内溶解的虫胶等。
必须用本发明组合物治疗或改善症状的患者可以服用本发明的组合物，一般来说，活性成分的日剂量约为0.1～100,000mg，优选1～50,000mg，更优选10～10,000mg，可以一次或分开服用。给药量可以根据患者的年龄、体重和用药目的个别确定。
实施例实施例1(幽门结扎大鼠实验，其1)用6只禁食隔夜、体重约为300g的雄性Wistar大鼠，在乙醚麻醉下将相当于幽门上部的腹部切开小口，在保证胃内容物不流入十二指肠的条件下用手术线将幽门和十二指肠的接合部位轻轻结扎，然后迅速缝合切开部位。大鼠麻醉苏醒1小时后，分别口服5ml溶有从牛奶中提取的乳铁蛋白和免疫球蛋白(Tatua Milk Biologics公司产品，纯度分别为90％和75％)各50mg的蒸馏水。在给与乳铁蛋白后15分钟、30分钟和1小时分别处死两只大鼠，将胃内容物洗至300ml的烧杯中，再用生理盐水将胃壁充分洗净。合并胃内容物和洗涤液，精确配成200ml作为受检液，用高效液相色谱法测定受检液中溶解的乳铁蛋白和免疫球蛋白IgG1的含量。
结果如下表所示，残留乳铁蛋白含量分别为给药15分钟后，4.6％；30分钟后，痕迹量；60分钟后，0。
表1生理活性蛋白在胃中的水解时间(分钟)乳铁蛋白(mg/每只胃) IgG1(胃)152.1(4.6％)3.1(8.3％)30痕迹量痕迹量600 0()中数据表示残留量与给药量的比率实施例2(幽门结扎大鼠实验，其2)用6只禁食隔夜、体重约为250g的雄性Wistar大鼠，在乙醚麻醉下将相当于幽门上部的腹部切开小口，用手术线将幽门和十二指肠的接合部位轻轻结扎，然后迅速缝合切开部位。大鼠麻醉苏醒1小时后，分别口服5ml溶有从牛奶中提取的乳铁蛋白和免疫球蛋白IgG1(Tatua Milk Biologics公司)各100mg和5mg胃蛋白酶抑制剂的生理盐水。在给与乳铁蛋白后15分钟、30分钟和1小时分别处死两只大鼠，按实施例1的方法洗出胃内容物，精确配成200ml，用高效液相色谱法测定受检液中溶解的乳铁蛋白含量。
结果如下表所示，残留乳铁蛋白含量分别为给药15分钟后，53％；30分钟后，23％；60分钟后，10％。与实施例1相比，乳铁蛋白的残留量明显较多，由此可知与其胃内分解密切相关的是胃蛋白酶。
表2胃蛋白酶抑制剂存在时生理活性蛋白在胃中的水解时间(分钟) 乳铁蛋白(mg/每只胃) IgG1(胃)15 47.7(53％)15.7(20.9％)30 20.7(23％)8.3(11.1％)60 0.9(10％) 11.0(14.7％)()中数据表示残留量与给药量的比率实施例3用6只自由摄食饮水、体重约为300g的雄性Wistar大鼠，在乙醚麻醉下将腹部切开小口，结扎幽门部和盲肠上部的回肠部，作成小肠环，然后分别用注射筒将5ml溶有从牛奶中提取的乳铁蛋白和免疫球蛋白IgG1(TatuaMilk Biologics公司，纯度约为90％)各100mg的生理盐水注入小肠环中，迅速缝合腹部的切开部位，将大鼠放回笼中。分别在30分钟、60分钟和120分钟后摘除小肠环，将内容物转移到烧杯中，用生理盐水洗净肠管壁，合并内容物和洗涤液作为受检液。用高效液相色谱法测定受检液中乳铁蛋白的含量，结果如下表所示。
表3生理活性蛋白在小肠中的水解时间(分钟) 乳铁蛋白(mg/每只胃) IgG1(胃)15 83(92％) 47(63％)30 89(99％) 22(29％)60 80(89％) 7(9％)()中数据表示残留量与给药量的比率由表3可知，乳铁蛋白在小肠中几乎不分解，但免疫球蛋白IgG1在半衰期(30分钟)缓慢分解。
实施例4将10g雄性Wistar大鼠的新鲜粪便加到50ml蒸馏水中，用组织捣碎匀浆机(Polytron Homogenizer)均浆。往10ml匀浆中加入从牛奶中提取的乳铁蛋白和免疫球蛋白IgG1各100mg溶解，37℃在氮取代厌氧瓶中温育24、72和168小时后，用高效液相色谱法测定溶解的乳铁蛋白和免疫球蛋白的含量。
结果如表4所示，乳铁蛋白和粪便一起温育一周后几乎不分解，但免疫蛋白温育72小时后完全消失。由此可知，免疫球蛋白IgG1在肠内细菌的作用下被水解，乳铁蛋白对肠内细菌产生的蛋白酶具有明显抵抗性。
表4在肠内细菌作用下生理活性蛋白的分解时间(分钟) 乳铁蛋白(mg/每只胃) IgG1(胃)15 72(80％) 13(17％)30 70(78％) 0(0％)60 76(84％) 0(0％)()中数据表示残留量与给药量的比率实施例5往日本药典1号的肠溶性硬胶囊中装入含有10份乳铁蛋白和5份羟甲基纤维素钙的微粒状物(不加水，将两者在干燥状态下混合，然后在干燥状态下用打碎机强压成型，制成薄大平坦的圆盘，将其粉碎，过16目筛制成粒径约为0.1mm的颗粒)150mg，嵌合部用肠溶性基质密封，制成肠溶性乳铁蛋白硬胶囊制剂。所述肠溶性硬胶囊是将在pH＝3.0以下的酸性环境中不溶解，在中性至弱碱性环境中溶解的羟烷基纤维素(信越化学工业，商品名HP-55)成型加工而成的。
实施例6将10份含有8％免疫球蛋白的脱脂牛初乳和10份微晶纤维素混合，按照实施例5的相同方法制成微粒状物，将150mg装入实施例5所述的硬胶囊中，嵌合部用肠溶性基质密封，制成肠溶性脱脂初乳制剂。
实施例7用下述方法制备含有50mg乳铁蛋白、直径为8mm的片剂将乳铁蛋白粉末和乳糖、纤维素、羧甲基纤维素钙在干燥状态下混合，不加水，所得混合物在干燥状态下用打碎机强压成型，制成薄大平坦的圆盘，将其粉碎，过16目筛制成一定粒径的颗粒，往颗粒中加入脂肪酸蔗糖酯，打片。往10份明胶和20份核糖核酸钠中加水，加热溶解制成0.7mm厚的膜，用平板法形成外衣后干燥，制备肠溶性制剂。
实施例8往包衣机(Freund产业有限公司产品，Hi-coater HCT-48N)中装入实施例7所述的外衣形成前的含有50mg乳铁蛋白、直径为8mm、重量为180mg的片剂，喷雾由羧甲基乙基纤维素9％、脂肪酸甘油酯1％、乙醇45％和二氯甲烷45％组成的肠溶性包衣液，按与片剂重量比为12％的量进行肠溶性包衣。
实施例9往包衣机(Freund产业有限公司产品，HC-MINI)中装入实施例7所述的外衣形成前的含有50mg乳铁蛋白、直径为8mm、重量为180mg的片剂，仅按计算量喷雾将来自玉米粒中得到的蛋白质、8份吐温和2份甘油溶于150份70％乙醇所得的溶液，按与片剂重量比为10％的量制成包衣片。
实施例10往包衣机(Freund产业有限公司产品，HC-MINI)中装入实施例7所述的外衣形成前的含有50mg乳铁蛋白、直径为8mm、重量为180mg的片剂，仅按计算量喷雾将30份虫胶和7份蓖麻子油溶于63份异丙醇所得的溶液，按与片剂重量比为10％的量制成包衣片。
治疗效果用上述方法制得的肠溶性组合物有令人惊奇的效果。例如，乳铁蛋白肠溶性制剂对目前难治的多种疾病有速效性治疗效果。
(1)如果通过输血感染C型肝炎，变成急性肝炎后，由慢性肝炎变成肝硬化，最终变成肝癌而死亡。C型肝炎患者的肝癌发病率高，达到80％左右。给由C型肝炎发展成肝癌而腹水潴留的住院患者内服乳铁蛋白肠溶剂(实施例8或9中制备的制剂)，其疗效显著，简直让人难以置信。每天仅内服0.9g乳铁蛋白，3天后腹水被完全吸收、消失，黄疸改善，C型肝炎病毒血中标记大幅降低。被医生断言只能存活数月的患者内服一周后就能走路出院。
(2)恶性淋巴瘤发病的某医生用化疗法控制癌症的发展，苦于其副作用多发而生活苦恼。为了摆脱这种状态，尝试了多种药物都无效，甚至还采用了数个民间疗法，但症状仍未见改善。但是，内服上述实施例8或9所制的乳铁蛋白肠溶片(乳铁蛋白的日剂量为0.45g)两天后开始有食欲，三天后临床试验检查值的改善程度让主管医生都感到惊讶。此前该患者一直苦于疲劳、呕吐、传染病多发和食欲减退等，生活质量低下。由此可知，内服乳铁蛋白肠溶片改善了生活质量。
(3)给胃癌手术后复发而引起癌性腹水潴留的患者内服乳铁蛋白肠溶片，其痛苦减轻，因此几次抽出其腹水。但是，内服实施例8或9所制备的乳铁蛋白肠溶片(乳铁蛋白的日剂量为0.45g)一周后腹水才被完全吸收、消失。该患者微热持续，脉搏为95次/分钟，呼吸频率为23次/分钟，呈典型的全身性炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndromeSIRS)症状，但内服乳铁蛋白一周后上述症状消失，食欲恢复。
(4)13年前开始患有特应性皮炎、全身搔痒导致晚上不能熟睡的女性患者服用上述实施例8或9所制备的乳铁蛋白肠溶片(乳铁蛋白的日剂量为0.45g)，内服两天后特应性皮疹引起的皮肤发疹开始减轻，同时搔痒感消失，能熟睡，因此发现乳铁蛋白有解除自身免疫性疾病患者压力的效果。另外，由于斯耶格伦综合征(Soegren′s syndrome)导致唾液分泌减少的患者口服乳铁蛋白综合征后，唾液pH值立即上升并且分泌量增加，口腔干燥大幅度改善。因此，乳铁蛋白有明显改善自身免疫性疾病伴随的生活质量低下的效果。
(5)如上述说明，具有生理活性的某种蛋白质其作用发挥场所多在从十二指肠开始的下消化道。本说明书重点说明了乳铁蛋白，但在不发生变化的状态下通过胃，进入小肠后才溶解，能发挥至今未有的作用或能大幅减少给药量的生理活性蛋白不仅仅是乳铁蛋白。免疫球蛋白和溶菌酶制成肠溶性制剂后也能发挥乳铁蛋白的类似效果。另外，为帮助食物消化吸收而口服淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶，其作用发挥场所在小肠，因此必须制成肠溶性制剂。并且，值得注意的是，现代人的肥胖多能通过在饭后给与生物机体分泌的消化酶，减少营养成分的吸收来抑制。已知来源于植物的某种蛋白质能抑制生物机体分泌的消化酶，因此在饭后口服淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶的抑制剂的肠溶性制剂能抑制肥胖，明显改善II型糖尿病、高血压和动脉硬化等生活习惯疾病。因此，本发明不单单局限于乳铁蛋白，还能适用于广范围的具有生理活性的蛋白质。
权利要求
1.一种口服组合物，其含有一种或一种以上选自酶、乳铁蛋白、免疫球蛋白、溶菌酶、淀粉酶抑制剂、脂肪酶抑制剂和蛋白酶抑制剂的具有生理活性的蛋白质作为活性成分，其特征在于，该组合物具有释放控制措施，其至少10％或以上的活性成分保持其活性并在下消化道内释放。
2.权利要求1记载的口服组合物，其中所述活性成分为乳铁蛋白。
3.权利要求1或2记载的口服组合物，其用于治疗或改善全身性炎症反应综合征，炎症性肠疾病，肥胖、糖尿病或高血压症等生活习惯疾病，恶性肿瘤，由C型肝炎病毒、轮状病毒、疱疹病毒或巨细胞病毒等病原病毒引起的传染病，病原微生物引起的传染病和自身免疫疾病，和/或伴随上述疾病或状态的症状。
4.一种口服组合物，其含有一种或一种以上选自酶、乳铁蛋白、免疫球蛋白、溶菌酶、淀粉酶抑制剂、脂肪酶抑制剂和蛋白酶抑制剂的具有生理活性的蛋白质作为活性成分，其特征在于，该组合物具有释放控制措施，该释放控制措施包括肠溶性包衣。
5.权利要求4记载的口服组合物，其中所述活性成分为乳铁蛋白。
6.权利要求4或5记载的口服组合物，其用于治疗或改善全身性炎症反应综合征，炎症性肠疾病，肥胖、糖尿病或高血压症等生活习惯疾病，恶性肿瘤，由C型肝炎病毒、轮状病毒、疱疹病毒或巨细胞病毒等病原病毒引起的传染病，病原微生物引起的传染病和自身免疫疾病，和/或伴随上述疾病或状态的症状。
7.权利要求4～6任意一项记载的口服组合物，其中，肠溶性包衣含有选自虫胶、吐温、羟丙甲基纤维素酞酸酯、羧甲基乙基纤维素、乙酸酞酸纤维素、甲基丙烯酸共聚物、不溶于水的乙基纤维素和甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物的基质。
8.权利要求4记载的口服组合物，其中所述活性成分为乳铁蛋白，其为散剂、颗粒剂、定量填充散剂或颗粒的胶囊剂或片剂形式，可以通过包括以下的步骤方法制备将乳铁蛋白粉末和可药用添加剂在干燥状态下混合；根据需要，将混合物在干燥状态下强压成型，将成型物制成一定大小的微粒状物或颗粒；然后将微粒状物或颗粒进行肠溶性包衣，或者将混合物、微粒状物或颗粒打片，再将打片物进行肠溶性包衣。
9.一种肠溶性口服组合物的制备方法，该组合物为散剂、颗粒剂、定量填充散剂或颗粒的胶囊剂或片剂形式，其制备方法包括以下步骤将乳铁蛋白粉末和可药用添加剂在干燥状态下混合；根据需要，将混合物在干燥状态下强压成型，将成型物制成一定大小的微粒状物或颗粒；然后将微粒状物或颗粒进行肠溶性包衣，或者将混合物、微粒状物或颗粒打片，再将打片物进行肠溶性包衣。
10.权利要求4记载的口服组合物，其中所述活性成分为乳铁蛋白，其适合日本药典一般试验方法中肠溶性制剂的崩解试验。
全文摘要
本发明涉及在口服具有生理活性的蛋白质时运用了使其有效发挥生理活性方法的医药品和食品。本发明的口服组合物含有一种或一种以上生理活性蛋白质，它具有释放控制措施。本发明组合物至少10％或以上的活性成分保持其活性到达下消化道。通过使具有生理活性的蛋白质在胃中不被分解而到达小肠，使其发挥至今未有的作用或确切地发挥作用。本发明组合物所含的生理活性蛋白优选乳铁蛋白、免疫球蛋白、溶菌酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶或消化酶抑制剂。
文档编号A61P43/00GK1481253SQ01820597
公开日2004年3月10日 申请日期2001年11月22日 优先权日2000年11月24日
发明者安藤邦雄, 吉, 铃木清吉, 男, 福田昭男, 川合树里, 里, 利近, 小笠原利近, 井草一夫, 夫 申请人:株式会社核内受容体研究所