专利名称：作为抗真菌剂的吡咯化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及特定的取代吡咯化合物的衍化物及其们的制备方法。这种化合物和现在使用的此类药剂相比拥有更高的抗真菌活性。本发明也涉及包含本发明的化合物的药物制剂及其们在治疗和/或预防哺乳动物主要是人类的真菌感染中的使用。
背景技术：
在今天威胁生命的系统真菌感染仍是健康护理的一个主要问题。特别是那些由于糖尿病、癌症，过长的类固醇治疗，器官移植抗排斥治疗，获得性免疫缺陷综合症(AIDS)或其他的生理或免疫受损的综合症而导致的“免疫受损”的病人特别容易受到机会性的真菌感染。
自从20世纪50年代和60年代直至最近，临床医生不得不与之作斗争的机会性真菌病原体主要是白色念珠菌、烟曲霉菌和接合菌，它们会引起毛霉菌病，这尤其是糖尿病人的迅速致命的感染。今天，非白色的念珠菌变得更加普遍，就和其他的曲霉菌属一样。念珠菌种属现在是第四位通常引起非医源性血流感染的原因，它们和极高的40％死亡率有关。从1980年至1990年，美国医院中的真菌感染发生率几乎加倍，出院的病人感染率从2.0上升到3.8。真菌感染的发生率最显著的增长不仅仅发生在移植单位或肿瘤中心，，还发生在外科部门中。这些正在改变的形式表明真菌感染不再局限于最严重的免疫抑制的病人中。
在过去的二十年中，由于不同的念珠菌种属的产生，念珠菌血症的流行病学有了实质性的转变。在20世纪60年代和70年代，念珠菌血症病例的85％至90％是由于白色念珠菌引起的。然而在1999年，只有42％的念珠菌血症是由白色念珠菌引起的，剩下的都是非白色念珠菌引起的。
在AIDS病人中，隐球菌病是死亡的主要原因。这些病人中威胁生命的隐球菌感染发生率估计在10％至30％。在初始的治疗中10％至20％的病人死亡了，30％至60％的病人在一年中死亡。在HIV阳性的病人中经常分离出马尔尼菲青霉(Penicillinium marneffei)，尤其在东南亚。
最常见的毛霉病的致病菌是根霉菌，它是生长在任何有机物上的普通的黑根霉。其他的病原体包括毛霉菌、根毛霉菌和犁头霉菌。接合菌包括二十种不同的真菌，它们都表现出相同的的组织学结构。严重的免疫损害的病人可能经过呼吸道吸入而感染接合菌。
镰刀霉菌是世界范围内最普遍的植物真菌，现在认识到它也是人类的致病菌。镰刀霉菌感染会发生在有免疫能力或免疫受到抑制的个体中。镰刀霉菌感染是威胁生命的，并且和差的预后有关。
马尔尼菲青霉是能使免疫抑制的病人发生严重的威胁生命的感染的一种环境真菌。马尔尼菲青霉在AIDS流行中受到了特别的关注，因为它会产生一种和临床上散布的组织胞浆菌病不同的疾病。
侵袭性的曲霉病也成为了病人死亡的主要原因，主要是患急性白血病或同种异体的骨髓移植和用细胞毒素的治疗这些疾病后的病人。它也发生在如AIDS和慢性肉芽肿性疾病的病人中。现在，只有两性霉素B和伊曲康唑用来治疗曲霉病。不管它们在活体外部活性如何，它们活体抗曲霉病的效果还是差的，因此侵袭性的曲霉病的死亡率还是高的。
在过去的30年中，治疗系统性的真菌感染已取得了重要的进展。虽然化疗药剂如氟胞嘧啶和碘化钾对抗选择性的真菌病是有效的，但是用来治疗系统性真菌病的主要药物是两性霉素B和吡咯化合物。虽然两性霉素B有一定的效果，但它和许多的并发症和特殊的毒性相联系而因此限制了它的使用。而且此药物很难经胃肠道吸收而必须经静脉内给药。另外，两性霉素B很难穿透正常和发炎的脑脊膜而进入脑积液(CSF)。
两性霉素B相关的问题推动了对于新药剂的研究。在现有用来治疗真菌感染的药物中，吡咯类似乎是最为有希望的。这类化合物抑制了真菌中的麦角固醇的生物合成，它是真菌细胞膜的主要组成成分。在各种代表性的抗真菌药物中，早期使用的吡咯类化合物是克霉唑、双氯苯咪唑和噻康唑，它们都能对抗广泛的人类真菌病原体。克霉唑是第一个经口服的，对实验和人类霉菌病有效的吡咯类药物。然而，利用克霉唑进行短程的治疗会导致肝脏微粒体酶的减少，这反过来会提高药物的代谢，因此降低了它的抗真菌活性。相比之下，大概和克霉唑同时开始应用的双氯苯咪唑就不会迅速被代谢掉，并且可通过静脉有效治疗许多全身性真菌疾病。不幸的是，双氯苯咪唑因为它的各种毒性效应而限制了它的使用。
克霉唑、双氯苯咪唑和噻康唑在活体外部的活性因为它们很差的口服生物药效率和代谢易损性而在活体模型中没有很好的展现出来。酮康唑是第一个能治疗系统性的真菌感染并且成功地经口服给药的药物。然而，它仍旧容易代谢而失活，也能引起阳痿和男性乳腺发育，这是由于它对抗人类细胞色素P450酶的活性所造成的。
虽然有酮康唑的出现，但是寻找更好的抗真菌的吡咯类药剂仍在继续，一方面是因为注意到了酮康唑相关的潜在毒性和它很差的脑脊液(CSF)穿透性。一些吡咯类已经被发展为局部药剂主要应用在浅表的念珠菌和皮肤真菌的感染中。
氟康唑是目前选择用来治疗由于念珠菌种属和新型C而导致的严重感染的药物。然而，氟康唑对于分离出来的曲霉菌种属仅有微弱的对抗活性，[最小抑菌浓度值(MIC)是400μg/ml]，因为这种药物对于羊毛甾醇14α-去甲基化酶，真菌中的靶酶仅有较低的对抗能力。伊曲康唑，另外一种抗真菌的三唑化合物，一般在治疗曲霉病中比氟康唑更具有活性，但是它的临床活性仍是混合的，正如它表现出的可变的口服可用性，低溶解性和高蛋白结合性，以及还能导致动物发生卵巢癌。
早期的化合物包括SCH39304(Genoconazole)，SCH42427(Saperaconazole)以及BAYR8783(Electrazole)的开发由于安全的原因而停止了。另外一种有希望的三唑类药剂，D0870，氟康唑的衍化物，除了抗霉菌活性较弱外还表现出显著的血浆药物(代谢)动力学的变化。在不同的开发阶段的其他的氟康唑衍化物包括Voriconazole和ER30346(BMS 207147)。Voriconazole除了注意到它有眼毒性外，还表现出非线性药物(代谢)动力学。ER30346的抗曲霉菌的在活体外部活性和活体活性都最多和伊曲康唑是相同的。SCH56592是具有有效活体外部活性和活体活性的伊曲康唑羟基化的类似物，但在脑积液(CSF)中不能被发现，甚至在几天治疗以后血清药物浓度是最具抵抗力的新型C.的最小抑菌浓度(MIC)的25至100倍时。因此，SCH56592对于新型C.的有效活性由于它在中枢神经系统感染部位的低浓度而被部分的否定了。以上的吡咯候选物将在下面的出版物中讨论-SCH56592；抗菌剂和化学治疗，40，1910(1996)；第36届抗菌剂和化学治疗国际科学大会，9月，1996，New Orleans，Abst.至F-87-F-102。
-TAK-187；第36届抗菌剂和化学治疗国际科学大会，9月，1996，New Orleans，Abst.至F74；EP567892。
-TAK-456和TAK-457；第40届抗菌剂和化学治疗国际科学大会，Toronto，Canada，Abs.No.1085和1086；US6,034,248。
-ER-30346未来的药物，21，20(1996)。
授予Takeda的美国专利No.5,371,101中包含了各种各样的吡咯化合物的衍化物。但是由于它们提供了局限的活性范围和较低的效能，因此没有一个能完全满足医学上的需求。
因此，市场使用的抗真菌药有很多缺点，如毒性、狭窄的活性范围以及主要是抑制真菌而不是杀灭真菌。它们中的一些还表现出药物与药物之间的相互作用，结果使得治疗变得复杂。就目前看来免疫损害的病人中真菌感染的发生率较高，这样的病人的数量也有稳步提高的趋势，使得对于新的具有宽活性范围和好的药物(代谢)动力学特性的抗真菌剂需求提高了。对于安全和有效的具有宽活性范围以及好的药物(代谢)动力学特性的抗真菌剂的一贯的需求刺激了具有新的系统活性的抗真菌三唑类药物的设计和发展。
虽然氟康唑和伊曲康唑的治疗已成功，但仍旧十分需要改进的、广谱的、可杀灭真菌而不仅是抑制真菌、有较好耐受性的、毒性低的、在有效剂量时安全的更有效的抗真菌化合物，并且在靶真菌中有最小的发生抗药性的潜在可能。所以，抗真菌剂的开发仍旧是一个大的挑战。
发明概述本发明涉及新的取代的吡咯的化合物，用它们来治疗和/或预防哺乳动物尤其是人类的真菌感染。
此发明的第一方面提供了如式I的化合物，及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体、N-氧化物、药物前体或代谢物。
式I其中X选自CH2、CO、CS和SO2；Ar是取代的苯基，它有1至3个取代基，所述取代基独立选自卤素，如氟、氯、溴、碘，C1-C4烷基，卤化的低级(C1-C4)烷基和卤化的低级(C1-C4)烷氧基如2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、4-三氟甲苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-三氟甲氧苯基、2，4，6-三氟苯基、4-溴苯基；R1和R2各自独立选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；
Y是被或未被1-3个取代基取代的苯基，所述取代基独立选自卤素、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；R3选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；以及X1、X2、Y1、Y2和Z独立选自氢、卤素、硝基、氰基、氨基、磺酰基、芳基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤化的低级(C1-C4)烷基，卤化的低级(C1-C4)烷氧基以及羧基或保护的羧基。
当R1不是氢时，式I有两个不对称的中心因而有四种可能的对映结构体，即RR、RS、SR、SS。本发明涉及这些对映结构体的混合物以及单独的异构体，这种情况下优选的异构体是RR。
根据发明的第二方面，它提供了式II的化合物，及其药学上可接受的盐，对映结构体、非对映异构体、N-氧化物、药物前体或代谢物。
式II其中X，Ar，R1，R2，X1，X2，Y1，Y2及Z与上述定义相同。
当R1不是氢时，式II有两个不对称的中心因而有四种可能的对映结构体，即RR、RS、SR、SS。本发明涉及这些对映结构体的混合物以及单独的异构体，这种情况下优选的异构体是RR。
现在已发现叫做2-{[1R，2R]}-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙苯基)-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮的化合物没想到除了抗菌谱提高外，还有抗临床上重要的丝状真菌种属的有效活性。这种化合物表现出能杀灭一些丝状真菌。
可用此领域熟知的无机或有机酸来制备式I和式II的本发明化合物的药学上可接受的无毒的酸加成盐。
提供合成新的化合物的方法也是本发明的目标。
本发明的进一步目标是提供包含本发明用来治疗真菌感染的新化合物的组合物。
本发明在它的范围内还包括式I和式II的化合物的前体药物。一般地，这样的前体药物将会是这些化合物的功能性衍化物，它们在活体中迅速地转变为所定义的化合物。传统的选择和制备合适的前体药物的步骤已知道了。
本发明还包括药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体、N-氧化物、药物前体或代谢物，它们和药学上可接受的载体和可选择的赋形剂相结合。
本发明的其他优点将在下面的描述中给出，并且部分从描述来看将是显而易见的或可通过发明的实践来获得。
发明详述为了实现上面提到的方面并且和这里所包含和描述的发明的目的相一致，这里提供了合成式I和式II的化合物的方法，其中X，Ar，R1，R2，R3，Y，X1，X2，Y1，Y2及Z与上述定义相同。原来的式III和式IV化合物分别来自我们所公布的PCT申请WO01/66551和美国专利No.5,371,101，这里引入作参考。
流程I
如上所述，流程I提供了制备式I的化合物及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体、N-氧化物、药物前体或代谢物的方法，。
其中X选自CH2、CO、CS和SO2；Ar是取代的苯基，它有1至3个取代基，所述取代基独立选自卤素，如氟、氯、溴、碘，C1-C4烷基，卤化的低级(C1-C4)烷基和卤化的低级(C1-C4)烷氧基如2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、4-三氟甲苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-三氟甲氧苯基、2，4，6-三氟苯基、4-溴苯基；R1和R2各自独立选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；Y是被或未被1-3个取代基取代的苯基，所述取代基独立选自卤素、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；R3选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；以及X1、X2、Y1、Y2和Z独立选自氢、卤素、硝基、氰基、氨基、磺酰基、芳基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤化的低级(C1-C4)烷基，卤化的低级(C1-C4)烷氧基以及羧基或保护的羧基。
当R1不是氢时，式I有两个不对称的中心因而有四种可能的对映结构体，即RR、RS、SR、SS。本发明涉及这些对映结构体的混合物以及单独的异构体，这种情况下优选的异构体是RR。
它还包括使式III(流程I)的氧基化合物与式V的经过修饰的Lawesson试剂反应，以提供所需的式I的化合物，其中X，Ar，R1，R2，Y，R3，X1，X2，Y1，Y2及Z与以上定义有相同的含义。式III氧基化合物可以根据我们公布的PCT申请WO 01/66551所揭示的步骤来制备。可根据Masataka Yokohamna等在Synthesis一书第827-829页(1984)所揭示的方法来制备经过修饰的Lawesson试剂。
流程II 如上所述，流程II提供了制备式II的化合物及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体、N-氧化物、药物前体或代谢物的方法，。
其中X选自CH2、CO、CS和SO2；Ar是一个取代的苯基，它有1至3个取代物，各自从卤素中选择(例如氟、氯、溴、碘)，C1-C4是烷基，卤化的低级(C1-C4)烷基和卤化的低级(C1-C4)烷氧基如2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、4-三氟甲苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-三氟甲氧苯基、2，4，6-三氟苯基、4-溴苯基；R1和R2各自独立选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；X1、X2、Y1、Y2和Z独立选自氢、卤素、硝基、氰基、氨基、磺酰基、芳基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤化的低级(C1-C4)烷基，卤化的低级(C1-C4)烷氧基和羧基或保护的羧基。
当R1不是氢时，式II有两个不对称的中心因而有四种可能的对映结构体，即RR、RS、SR、SS。本发明涉及这些对映结构体的混合物以及单独的异构体，这种情况下优选的异构体是RR；它还包括使式IV(流程II)的氧基化合物与式V的经过修饰的Lawesson试剂[根据Masataka Yokohamna等在Synthesis一书第827-829页(1984)所揭示的方法制备]反应，以提供所需的式II的化合物，其中X，Ar，R1，R2，X1，X2，Y1，Y2及Z与以上定义有相同的含义。原始的式IV化合物可以根据下面在美国专利No.5,371,101中揭示的步骤来制备。
上面的流程中提到了特定的溶剂和经过修饰的Lawesson试剂，可以理解其他的溶剂和Lawesson试剂或其修饰物是可以使用的。相似地，反应的温度和持续时间也可根据需要进行调整。发明中能够根据流程I和II来制备的一些化合物包括(如下面说明性列表所示)化合物No.12-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙基}-4-{4-[4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基]苯基}-3(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮化合物No.22-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-1-[4-(4-甲氧苯基)]-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮化合物No.32-{[1R，2R]--2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙氧苯基)-3-(2 H， 4H)-1，2，4-硫代三唑酮下面提到的例子展示了首选化合物的一般的合成步骤和详细的制备方法。给出这些例子是为了阐明发明的细节，而不应该被迫去限制本发明的范围。
这种化合物用NMR，IR来描述特征，通过色谱法来提纯。粗产品使用静止状态的硅凝胶(100-200或60-120网孔)来进行柱色谱法提纯。
实施例1制备式I的化合物的典型步骤合适的氧基化合物(1.15mmol)和经过修饰的Lawesson试剂(6.34mmol)混合在甲苯(140ml)中在120℃(浴温)加热3.5小时。然后将反应混合物冷却至室温，在真空中将溶剂提取。将这样所得的残余物用二氯甲烷洗几次。二氯甲烷可溶解的部分在真空中被重组和浓缩。通过柱色谱法(100-200网孔硅凝胶，10％-15％乙酸乙酯/二氯甲烷)提纯来提供所需的44.5％的产量及约90％的HPLC纯度的硫类似物。利用纯的酒精重结晶提供纯度大概是98％(用HPLC)的纯净化合物。
实施例2制备式II的化合物的典型步骤氧基化合物(1mol)和Lawesson试剂(2mol等价物)在高度真空的环境下脱水10分钟，用氮冲洗并在甲苯中加热回流持续15小时。反应混合物被浓缩干燥了，重新溶解在二氯甲烷中并用柱色谱法(100-200网孔硅凝胶)提纯，使用二氯甲烷-乙酸乙酯混合物(9.5∶0.5到6∶4)提供大概10％产量的理想产物。
实施例32-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙氧苯基)-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮的制备2-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙氧苯基)-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮(1.41g)和Lawesson试剂(2.08g，2.0m当量)的混合物在甲苯中加热回流持续3-15小时。
反应混合物在真空中浓缩产生黄色的半固体物质，将它和二氯甲烷搅拌10分钟。固体经过过滤并用二氯甲烷冲洗。将滤出液和洗涤物混合在真空中浓缩而产生黄色的半固体，使用柱色谱法(开始使用硅凝胶，60-120网孔然后用碱性的活性氧化铝)将它提纯而产生白色绒毛状的固体就是理想的化合物(0.3g)。
RR/SS的分配是根据1HNMR来做的。
通过上面描述的一种或多种方法合成的本发明的一些化合物的说明表在下面将和它们的1HNMR数据一起给出。所有的1HNMR谱在Brucker AMX 300 NMR机器(300MHZ)上给出，这个机器使用CDCL3作为溶剂，TMS作为内部的标准除非特殊指定外。所有的数据用ppm(百万分之)给出。
例子中的符号有如下意义s单谱线；d双谱线；t三谱线；q四谱线；dd双双谱线；m多谱线；br宽部；J联结常数。
化合物No.12-{[1 R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-{4-[4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基]苯基}-3(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮m.p. 129-130℃IR(KBr) 3421，2916，2847，1614，1595cm-1NMR(CDCl3) δ1.33(d，J＝6.7Hz，CH-CH3)，3.33-3.42(m，8H，哌嗪基-H)，4.35(d，J＝14.3Hz，1H，CH2-三唑，5.14(d，J＝14.4Hz，CH2-三唑)，5.19(bs，1H，-OH)，5.93(q，J＝6.7Hz，1H，CH-CH3)，6.81-6.90(m，4H，Ar-H)，7.05(d，J＝8.6Hz，2H，Ar-H)，7.24(d，J＝8.5Hz，2H，Ar-H)，7.43(d，J＝8.5Hz，2H，Ar-H)，7.60(m，1H，2，4-二氟苯基-H)，7.74(s，1H，硫代三唑酮-H)，7.92(s，1H，三唑 -H)，和7.93(s，1H，三唑-H).
质量 m/z623.1(M+1)化合物No.22-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-1-[4-(4-甲氧苯基)]-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮m.p. 166-170℃IR(KBr) 3436，2924，1615，1511，1476，1258，962和835cm-1NMR(CDCl3) δ1.36(d，1 H，J＝9Hz；CH-CH3)，3.873(s，3H；OCH3)，4.351(d，1H，J＝14.4Hz；三唑-CH2)，5.703-5.202(m，2H；三唑-CH2&OH)，5.933(q，1 H，J＝6.9Hz，CH-CH3)，6.81-6.87(m，2H；Ar-H)，7.034-7.07(d，2H；Ar-H)，7.455-7.483(d，2H；Ar-H)，7.59-7.642(m，1H；Ar-H)，7.31(s，1H；Ar-H)，和7.927(s，2H，Ar-H).
质量 m/z459.0(M+1)化合物No.32-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙氧苯基)-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮
m.p. 76.8-84.3℃IR(KBr) 3447，1618，1515，1423，1135，1110和867.6cm-1NMR(CDCl3) δ1.33(d，3H，J＝9Hz；CH-CH3)，4.41(m，3H；OCH2CF2和三唑-CH2)，5.16(d，1H，J＝14.4Hz；三唑-CH2)，5.92(q，1H，J＝9Hz；CH-CH3)，6.07(tt，1H，J＝53.4 and4.5Hz；CF2CF2H)，6.85(m，2H；Ar-H)，7.11(d，2H；J＝9.0Hz；Ar-H)，7.58(m，3H；Ar-H)，7.77(s，1H)，7.96(s，1H)，和8.26(s，1H).
质量 m/z559(M+1)药理活性这里所示的式I和式II的化合物及其们的盐在治疗和预防动物(包括人类)的真菌感染是有效的。例如，它们能有效的治疗人局部的真菌感染，这些感染在其他有机体中是由念珠菌、发藓菌、小胞霉菌或黏膜感染中表皮藓菌引起的，这种黏膜感染是由白色念珠菌引起的(例如鹅口疮和阴道念珠菌病)。它们也可以用来治疗系统性的真菌感染，如由念珠菌引起的(例如白色念珠菌)，新型隐球菌，烟曲霉菌，镰孢霉菌，根霉菌或马尔尼菲青霉。
本发明中的化合物已经发现具有料想不到的抵抗临床上重要的丝状真菌的有效活性，且抗菌谱变宽了。这种化合物是杀真菌的。
这些化合物抗真菌活性在活体外部的评价可以通过测定最小抑菌浓度(MIC)来实行，正如表1所示的那样，它是受测试的化合物在Rosewell Park Memorialinstitute(RPMI)1640液体媒介中经过3-(吗啉基)丙烷磺酸缓冲至pH7时的浓度，在此时它们就对特定的真菌有显著的抑制性。在实践中，使用国家临床实验室标准协会(NCCLS)为念珠菌和隐球菌提供的M27A材料以及为曲霉菌提供的M38P材料来测定抵抗酵母和丝状真菌的MIC，以及皮真菌至其他丝状真菌的合适变体。在每次MIC测定的时候都包含三种质控滤过并且只有当质控结果进入可接受的范围时才记下记录。当MIC结果被记录下后，将从不显示生长的每一孔中提取100μl涂在萨布罗葡萄糖琼脂上(SDA)来测定正如表2所示的最小杀真菌浓度。
这种化合物的活体评价可以在给老鼠口服或静脉内注射一系列的剂量水平时实行，这些老鼠通过静脉途径接种了最小致死剂量的白色念珠菌，新型隐球菌，烟曲霉菌。活性的依据是在一组没有治疗的老鼠死亡后一组接受治疗的老鼠存活了。对于曲霉菌和新型隐球菌的感染，靶器官在治疗后进行培养来记录治愈感染的老鼠的数量以供进一步的活性评价。对于人类来说，如式的抗真菌化合物及其们的盐可以单独给药，但一般可以通过和一种药理载体相混合来给药，这种载体是根据计划的给药途径以及标准的药理实践来选择的。例如，它们可以通过片剂的形式口服给药，这种片剂含有如淀粉或乳糖这样的赋形剂，或单独以胶囊或卵形药丸的形式或和赋形剂混合给药，或以酏剂、溶液、或包含调味剂或色素的悬浮液的形式给药。它们可以通过消化道外的注射，例如静脉内注射，肌肉内注射或皮下注射。对于消化道外给药，它们最好使用无菌水溶液的形式，这种水溶液可含有其他的物质，例如足够的盐或葡萄糖使得溶液和血液等渗。
式I和式II的化合物的水溶性在制备一种合适的药物组合物时可通过与环式糊精的羟烷基衍化物络合而提高。
对于口服和消化道外给药的病人，式I和式II抗真菌化合物和它们盐的每日剂量水平将是0.01至20mg/kg(单一的或分开的剂量)，它们是通过口服或消化道外给药。这样，此化合物的片剂或胶囊将包含5mg至0.5mg的活性化合物，合适地一次给药一粒、两粒或更多。无论如何，医生将决定实际的剂量，它将是最适合个体病人的剂量并且它会随着年龄、体重和特殊病人的反应的变化而变化。上面的剂量是普通病例的例子，当然会存在个别的例子，需要使用较高或较低的剂量，这也是在本发明范围之内的。
选择性地，式I和式II抗真菌化合物可以通过栓剂或阴道药栓来给药，或它们可以以洗剂、溶剂、乳剂、软膏或撒粉的形式局部运用。例如，它们可以包含到乳剂中，这种乳剂包含聚乙烯乙二醇或液态石蜡的的水乳液，它们还可以以1％至10％的的浓度包含到软膏中，这种软膏包含白蜡或白色软石蜡基质以及必需的稳定剂或防腐剂。
表1本发明中抗各种真菌的标准药物和化合物的最小抑菌浓度(MIC)(μg/ml)氟康唑 两性霉素B 伊曲康唑 化合物1TAK187(本发明)1.克柔氏念珠菌6258 32 025 0.2500622.近平滑念珠菌2201920.250.030.004 0.033.P variotii 22319 ＞128 0.030.016 0.004 0.254.白色念珠菌A-26 0.5 0.250.016 0.016 -5.白色念珠菌Y01.19 80.125 0.250.03 26.C glabrata 90030 40.250.5 0.06 0.57.热带念珠菌7500.5 0.250.016 0.008 0.1258.克柔氏念珠菌766.1128 0.250.5 0.125 29.新型念珠菌M-106 40.030.030.008 0.0610.新型念珠菌I 10.060.030.008 0.0311.H capsulatum 40.125 0.030.06 0.2512.烟曲霉菌I-1011 ＞128 0.250.060.016 413.烟曲霉菌II-1012＞128 0.125 0.060.008 814.烟曲霉菌J-1032 ＞128 0.250.030.008 415.烟曲霉菌K-1033 ＞128 0.125 0.060.008 816.烟曲霉菌L-1034 ＞128 0.250.060.008 417.烟曲霉菌SI-1-1019 ＞128 0.5 0.030.016 218.烟曲霉菌1008 ＞128 0.250.060.016 419.烟曲霉菌PGI-1023 ＞128 0.125 0.030.016 820.黄曲霉菌P2-1045＞128 1 0.060.016 421.黄曲霉菌P3-1041＞128 0.5 0.060.008 822.黄曲霉菌E2-1043＞128 1 0.030.008 423.黄曲霉菌E3-1044＞128 1 0.030.016 124.黄曲霉菌E4-1042＞128 0.125 0.060.008 425.黑曲霉菌E5-1047＞128 0.250.030.03 226.黑曲霉菌P1-1046 128 0.250.125 0.03 0.527.青霉菌H-1048 ＞128 0.2516 0.03 1628.青霉菌I-1049 ＞128 0.2516 0.03 1629.青霉菌1641 64 0.060.250.25 1630.青霉菌2548 128 0.030.250.125 1631.青霉菌3162 ＞128 0.250.250.03 3232.青霉菌19164 0.250.060.06 1633.青霉菌2306 ＞128 0.250.125 0.016 834.根霉菌1052 ＞128 0.0616 0.0005 835.根霉菌(锡兰) ＞128 64 64 0.125 236.链格菌1051 ＞128 1 0.125 0.03 137.镰孢菌1050 ＞128 0.5 64 1 6438.镰孢菌2960C＞128 0.5 16 2 3239.镰孢菌1827C＞128＞128 128 2 3240.毛霉菌(锡兰) ＞128 0.060.125 0.004 8·根据国家临床实验室标准协会的M27A和M38P将最显著的生长抑制作为MIC点·拟青霉菌在48小时内生长良好表2本发明中抗QC株及各种丝状真菌的标准药物和化合物的最小杀菌浓度氟康唑氟康唑 两性霉素B伊曲康唑 化合物1 TAK187(本发明)1.克柔氏念珠菌6258 128 1 640.016642.近平滑念珠菌220194 32 8 0.0160.033.P variotii 22319 ＞128 2 0.06 0.06 324.烟曲霉菌SI-1-1019 ＞128 2 0.25 0.03 325.烟曲霉菌1008 ＞128 1 0.06 0.03 86.黄曲霉菌P2-1045＞128 1 0.25 0.03 327.黄曲霉菌P3-1041＞128 0.5 0.06 0.06 -8.黄曲霉菌E3-1044＞128 0.5 0.03 0.03 89.黄曲霉菌E4-1042＞128 0.125 0.125 0.03 -10. 黑曲霉菌E5 1047＞128 0.250.125 0.06 211. 黑曲霉菌P1-1046＞128 0.250.25 0.06 0.512. 青霉菌H-1048 ＞128 2 ＞128 4 ＞12813. 青霉菌I-1049 ＞128 4 ＞128 112814. 青霉菌1641 ＞128 16 0.06 0.25 3215. 青霉菌2548 ＞128 4 0.06 0.1251616. 青霉菌3162C＞128 0.251 0.1251617. 青霉菌191 ＞128 2 0.06 0.1251618. 青霉菌2306 ＞128 0.5 160.06 1619. 根霉菌1052 ＞128 8 8 0.03 3220. 根霉菌(锡兰) ＞128 64 128 0.5＞12821. 链格菌1051 ＞128 ＞128 320.06 1622. 镰孢菌(锡兰) ＞128 ＞128 ＞128 32 12823. 镰孢菌2960C＞128 ＞128 ＞128 ＞128＞12824. 镰孢菌1827C＞128 ＞128 128 ＞128 3225. 毛霉菌(锡兰) ＞128 1 ＞128 1 ＞128我们发明中的化合物，2-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙氧苯基)-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮(化合物No.3)和2-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙氧苯基)-3-(2H，4H)-1，2，4-三唑酮的活体外部与活体生物活性数据的比较，以及标准的抗真菌药物在下面给出所有真菌病原体MIC(μg/ml)MIC50MIC90G.M.
两性霉素B0.25 0.5 0.21氟康唑 256 256 105伊曲康唑 0.19 256 0.437TAK 187 8 324.16化合物No.3 0.25 2 0.285
所有假丝酵母属分离菌MIC(μg/ml)MIC50 MIC90 G.M.
两性霉素B0.25 0.25 0.22氟康唑 8 128 5.3伊曲康唑 0.25 0.5 0.1TAK 187 0.52 0.45化合物No.3 0.51 0.1所有丝状菌分离菌MIC(μg/ml)MIC50 MIC90 G.M.
两性霉素B0.25 0.5 0.22氟康唑 256256 199伊曲康唑 0.25 256 0.6TAK 187 8 327.246化合物No.3 0.25 8 0.328烟曲霉菌分离菌MIC(μg/ml)MIC50 MIC90 G.M.
两性霉素B0.25 0.5 0.27氟康唑 256256 256伊曲康唑 0.25 0.5 0.181TAK 187 8 8 7.4化合物No.3 0.125 0.25 0.112根霉属分离菌MIC(μg/ml)MIC50 MIC90 G.M.
两性霉素B0.125 0.25 0.177氟康唑 256256 256伊曲康唑 16 6432TAK 187 4 4 4化合物No.3 0.125 0.125 0.125
镰刀霉属分离菌MIC(μg/ml)MIC50 MIC90 G.M.
两性霉素B 0.52 0.841氟康唑256256256伊曲康唑 64 25690.51TAK 187 32 64 45.255化合物No.38 8 8青霉属分离菌MIC(μg/ml)MIC50 MIC90 G.M.
两性霉素B 0.25 0.25 0.144氟康唑256256174.181伊曲康唑 0.52560.922TAK 187 16 64 18.664化合物No.32 8 1.516抵抗皮肤真菌的活性生物体氟康唑 伊曲康唑 Terbina化合物No.3T.须疮菌(IT.mentagrophyte)＞1280.125 0.002 0.016T.悬钩子菌(T.rubrum) ＞1280.03 0.016 0.004化合物No.3的活体抗真菌活性；50％有效剂量的测定(ED50)方法简单地，重20±2G的瑞士白鼠静脉内(尾部静脉)注射足量的真菌细胞来100％的杀死使用了烟曲霉菌株而未经治疗的动物。在所有的情形下，每一组都包括6只老鼠。在每次测定的时候使用双倍的稀释范围的5个剂量水平，从25至1.56mg/kg BW。在感染30分钟后，开始给予一次剂量持续5天。观察到在所有未治疗的老鼠组中，死亡率是100％。治疗过的动物感染过后每天被监测两次持续14天，这时实验结束，计算ED50。
结果
mg/kg体重的ED50
虽然本发明已经用其特定的实施方案描述过了，但特定的变体和等价物对于那些文中熟练的技术员们来说是显而易见的，并且目的是将它们包括在本发明的范围之内。
权利要求
1.式I的化合物， 及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体、N-氧化物药物前体或代谢物。其中X选自CH2、CO、CS和SO2；Ar是取代的苯基，它有1至3个取代基，所述取代基独立选自卤素，如氟、氯、溴、碘，C1-C4烷基，卤化的低级(C1-C4)烷基和卤化的低级(C1-C4)烷氧基如2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、4-三氟甲苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-三氟甲氧苯基、2，4，6-三氟苯基、4-溴苯基；R1和R2各自独立选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；Y是被或未被1-3个取代基取代的苯基，所述取代基独立选自卤素、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；R3选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；以及X1、X2、Y1、Y2和Z独立选自氢、卤素、硝基、氰基、氨基、磺酰基、芳基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤化的低级(C1-C4)烷基，卤化的低级(C1-C4)烷氧基以及羧基或保护的羧基。
2.式II的化合物 及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体、N-氧化物、药物前体或代谢物。其中X选自CH2、CO、CS和SO2；Ar是取代的苯基，它有1至3个取代基，所述取代基独立选自卤素，如氟、氯、溴、碘，C1-C4烷基，卤化的低级(C1-C4)烷基和卤化的低级(C1-C4)烷氧基如2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、4-三氟甲苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-三氟甲氧苯基、2，4，6-三氟苯基、4-溴苯基；R1和R2各自独立选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；以及X1、X2、Y1、Y2和Z独立选自氢、卤素、硝基、氰基、氨基、磺酰基、芳基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤化的低级(C1-C4)烷基，卤化的低级(C1-C4)烷氧基以及羧基或保护的羧基。
3.一种化合物，其特征在于，所述化合物选自-2-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙基}-4-{4-[4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基]苯基}-3(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮(化合物No.1)-2-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-1-[4-(4-甲氧苯基)]-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮(化合物No.2)-2-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙氧苯基)-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮(化合物No.3)
4.一种药物组合物，其特征在于，所述组合物含有如权利要求1-3中任一项所述的化合物和药学上可接受的载体。
5.一种药物组合物，其特征在于，所述组合物含有药物有效量的如权利要求1-3中任一项所述的化合物或其生理上可接受的酸加成盐以及药学上可接受的载体。
6.一种治疗或预防哺乳动物真菌感染的方法，其特征在于，所述方法包括给予所述哺乳动物式I的化合物 及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体，N-氧化物、药物前体或代谢物。其中X选自CH2、CO、CS和SO2；Ar是取代的苯基，它有1至3个取代基，所述取代基独立选自卤素，如氟、氯、溴、碘，C1-C4烷基，卤化的低级(C1-C4)烷基和卤化的低级(C1-C4)烷氧基如2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、4-三氟甲苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-三氟甲氧苯基、2，4，6-三氟苯基、4-溴苯基；R1和R2各自独立选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；Y是被或未被1-3个取代基取代的苯基，所述取代基独立选自卤素、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；R3选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；以及X1、X2、Y1、Y2和Z独立选自氢、卤素、硝基、氰基、氨基、磺酰基、芳基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤化的低级(C1-C4)烷基，卤化的低级(C1-C4)烷氧基以及羧基或保护的羧基。
7.一种治疗或预防哺乳动物真菌感染的方法，其特征在于，所述方法包括给予所述哺乳动物式II的化合物 及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体，N-氧化物、药物前体或代谢物。其中X选自CH2、CO、CS和SO2；Ar是取代的苯基，它有1至3个取代基，所述取代基独立选自卤素，如氟、氯、溴、碘，C1-C4烷基，卤化的低级(C1-C4)烷基和卤化的低级(C1-C4)烷氧基如2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、4-三氟甲苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-三氟甲氧苯基、2，4，6-三氟苯基、4-溴苯基；R1和R2各自独立选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；以及X1、X2、Y1、Y2和Z独立选自氢、卤素、硝基、氰基、氨基、磺酰基、芳基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤化的低级(C1-C4)烷基，卤化的低级(C1-C4)烷氧基以及羧基或保护的羧基。
8.一种制备式I的化合物 及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体，N-氧化物、药物前体或代谢物的方法，其中X选自CH2、CO、CS和SO2；Ar是取代的苯基，它有1至3个取代基，所述取代基独立选自卤素，如氟、氯、溴、碘，C1-C4烷基，卤化的低级(C1-C4)烷基和卤化的低级(C1-C4)烷氧基如2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、4-三氟甲苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-三氟甲氧苯基、2，4，6-三氟苯基、4-溴苯基；R1和R2各自独立选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；Y是被或未被1-3个取代基取代的苯基，所述取代基独立选自卤素、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；R3选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、硝基、氨基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；以及X1、X2、Y1、Y2和Z独立选自氢、卤素、硝基、氰基、氨基、磺酰基、芳基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤化的低级(C1-C4)烷基，卤化的低级(C1-C4)烷氧基以及羧基或保护的羧基。其特征在于，所述方法包括使式III(流程I)的氧基化合物与式V的经过修饰的Lawesson试剂(流程I)反应以提供所需的式I的化合物，其中X，Ar，R1，R2，Y，R3，X1，X2，Y1，Y2及Z与以上定义有相同的含义。
9.一种制备式I的化合物 及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体，N-氧化物、药物前体或代谢物的方法，其中X选自CH2、CO、CS和SO2；Ar是取代的苯基，它有1至3个取代基，所述取代基独立选自卤素，如氟、氯、溴、碘，C1-C4烷基，卤化的低级(C1-C4)烷基和卤化的低级(C1-C4)烷氧基如2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、4-三氟甲苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基、4-三氟甲氧苯基、2，4，6-三氟苯基、4-溴苯基；R1和R2各自独立选自氢、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基、硝基、氰基、羧基、保护的羧基和SO2R’，其中R’是氢、烷基或芳基；以及X1、X2、Y1、Y2和Z独立选自氢、卤素、硝基、氰基、氨基、磺酰基、芳基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤化的低级(C1-C4)烷基，卤化的低级(C1-C4)烷氧基以及羧基或保护的羧基。其特征在于，所述方法包括使式IV(流程II)的氧基化合物与式V的经过修饰的Lawesson试剂(流程II)反应以提供所需的式II的化合物，其中X，Ar，R1，R2，X1，X2，Y1，Y2及Z与以上定义有相同的含义。
10.一种制备名为2-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙氧苯基)-3-(2H，4H)-1，2，4-硫代三唑酮的化合物及其药学上可接受的盐、对映结构体、非对映异构体，N-氧化物、药物前体或代谢物的方法，其特征在于，所述方法包括使名为2-{[1R，2R]-2-(2，4-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1H-1，2，4三唑-1-基)丙基}-4-(2’，2’，3’，3’-四氟丙氧苯基)-3(2H，4H)-1，2，4-三唑酮的氧基化合物与Lawesson试剂反应。
全文摘要
本发明涉及特定的取代的吡咯化合物的衍化物及其们的制备方法，所述化合物和现在使用的此类药剂相比拥有更高的抗真菌活性。本发明还涉及包含本发明化合物的药物制剂和它们在治疗和/或预防哺乳动物主要是人类的真菌感染中的应用。
文档编号A61P31/04GK1489465SQ01822572
公开日2004年4月14日 申请日期2001年12月21日 优先权日2000年12月26日
发明者M·萨勒曼, R·卡托奇, A·K·维尔马, J·萨蒂吉里, A·拉坦, M 萨勒曼, 偌 , 维尔马, 衅 申请人:兰贝克赛实验室有限公司