专利名称：降血糖活性的白术糖复合物、生产方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种从中药材中提取得糖复合物、生产方法和用途，特别是涉及白术糖复合物、生产方法和用途。
本发明的制备方法是将生药白术浸泡获得白术水提液，有机溶剂沉淀、沉淀用水溶解，上清液经透析或膜分离和浓缩干燥获得粗多糖，粗多糖经柱层析分离获得白术糖复合物。具体来说，将干燥后的生药白术粉碎或切片，其目的是为提高浸出率。推荐常温、常压浸泡，尤其推荐0～30℃浸泡，浸泡液和水提液的pH值推荐保持在5.0-8.0。
其中生药白术与浸泡水重量比推荐白术∶水＝1∶5-15，尤其推荐用10-12倍重量或更多的水，推荐浸泡12-72小时，尤其推荐24-72小时，所用水推荐为无离子水。
过滤，滤液经或不经浓缩，用有机溶剂沉淀后离心，离心所得沉淀用水溶解，推荐用1-5倍重量的水溶解。
离心，上清液透析或膜分离，透析时间推荐为24-72小时，透析膜、透析袋其孔径推荐截留分子量在1000以下，尤其推荐截留分子量为500～1000。
浓缩干燥获得粗品白术糖复合物，最好采用低温真空浓缩或冷冻干燥，以便保持白术糖复合物的生物活性。其中干燥或减压浓缩温度推荐低于60℃进行。例如在30～60℃干燥或浓缩，压强推荐控制在0.08～0.1MPa。
所得粗品白术糖复合物再经柱层析进一步分离纯化，层析填料推荐为DEAE-纤维素，洗脱液推荐为0.25M NaHCO3溶液，收集糖吸收峰，经膜分离后冷冻干燥获得精品白术糖复合物。
前述的用有机溶剂沉淀，所述有机溶剂推荐与水互溶的有机溶剂，水提液与有机溶剂的体积比推荐为水提液有机溶剂＝1∶2～6。与水互溶的有机溶剂推荐低碳链的醇或酮，例如C1～C6的醇或酮等；尤其推荐乙醇，例如用2～6倍体积的75％～95％的乙醇；沉淀时间推荐为12-72小时，尤其推荐24-72小时。
本发明的白术糖复合物，具有降血糖功能，其可用于制备治疗糖尿病的药品和降血糖的保健品。
本发明首次从白术中提取得到白术糖复合物。本发明的提取分离方法简便，产率高和适于工业化生产。该多糖适用于口服用药，具有显著降低血糖作用。
图1是气相色谱测得的单糖组成的标准图谱，作为对照使用，图中数据如表1所示表1
图2是气相色谱测得的本分明的样品的单糖组成，图中数据如表2所示表2
具体实施方式
实施例1白术根茎粉碎后，称取200g，加入去离子水2000ml，室温浸泡48小时，其间多次搅拌利于有效成分浸出。浸泡液先用四层纱布过滤，然后滤液离心，转速4500r/min，离心时间8min。上清液减压浓缩，温度控制范围50℃-55℃，浓缩体积至600ml。在600ml浓缩液中，加入95％乙醇3600ml进行醇沉，醇沉时间为24小时。醇沉结束后，轻轻倾出上清液，沉淀部分离心分离，转速4500r/min，离心时间8min。取出沉淀物加入500ml去离子水溶解，溶解后同样离心除去不溶物。上清液用截留分子量为1000的膜进行透析分离，可采用流动的自来水，透析时间48小时。透析后减压浓缩，温度控制范围50℃-55℃，浓缩体积至200ml，然后冷冻干燥，即获得白术糖复合物。产率为1.0％左右。元素分析C＝40.57％，H＝6.42％，N＝2.69％；糖含量41.44％；糖醛酸含量28.35％；蛋白质含量21.95％。
实施例2将生药白术1公斤洗净干燥，粉碎，用10升无离子水室温浸泡24小时，过滤。残渣用5升无离子水继续浸泡24小时，过滤，合并滤液，60℃减压浓缩至2-4升。然后用95％的乙醇沉淀，乙醇终浓度为80％，醇沉24小时。离心，沉淀用2.5升水溶解，离心，无离子水透析48-72小时。60℃减压浓缩后冷冻干燥，即获得白术糖复合物12克。元素分析C＝37.99％，H＝6.20％，N＝2.19％；糖含量52.7％；糖醛酸含量15.9％；蛋白质含量16.7％。
实施例3将生药白术500g洗净干燥，粉碎，用5升无离子水室温浸泡24小时，过滤。残渣用3升无离子水继续浸泡24小时，过滤，合并滤液，60℃减压浓缩至2升。然后用95％的乙醇沉淀，乙醇终浓度为85％，醇沉24小时。离心，沉淀用1升水溶解，离心，无离子水透析48-72小时。60℃减压浓缩后冷冻干燥，即获得白术糖复合物6.2克。元素分析C＝45.02％，H＝6.01％，N＝1.05％；糖含量58.0％；糖醛酸含量28.1％；蛋白质含量11.0％。
实施例4白术粗多糖500mg溶于10ml蒸馏水中，离心(4500r/min，8min)。取上清液上玻璃柱(3.0cm*30cm)，先用蒸馏水洗脱，流速为0.6ml/min，洗脱10小时后改为0.25M NaHCO3溶液洗脱，同样速度洗脱12小时，收集糖峰，膜分离后冷冻干燥获得白术糖复合物。得率20～25％。元素分析C＝37.62％，H＝6.59％，N＝1.36％；糖含量42.6％；糖醛酸含量32.3％；蛋白质含量11.4％。
实施例5白术多糖降血糖药效学实验结果第0天第5天 第10天体重 血糖 体重血糖 体重 血糖对照组200.6±3.14.18±0.45 233.6±6.7 4.54±0.60 262.0±7.83.91±0.54模型组191.4±7.222.53±2.49216.8±13.3 21.39±2.86 229.2±21.4 19.62±2.33低剂量192.4±6.621.89±2.71222.5±14.1 18.03±8.46*238.5±20.7 14.51±5.54***中剂量193.8±7.720.01±3.48227.3±10.4 16.12±6.70*235.3±18.2 13.18±5.83***高剂量190.9±9.920.36±2.45220.9±17.1 17.60±4.98 228.0±32.1 13.53±6.02**注与给药前比较，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001.
给药第4天，低剂量组2只大鼠血糖恢复正常，中剂量组2只大鼠血糖恢复正常，高剂量组1只大鼠血糖恢复正常。给药第10天，中剂量组3只大鼠血糖恢复正常，高剂量组3只大鼠血糖恢复正常。
权利要求
1.一种具有降血糖活性的白术糖复合物，其特征如下元素分析C＝35％～45％，H＝5.5％～7.0％，N＝1.0％～3.0％；多糖含量40％～60％；糖醛酸含量15％～45％；蛋白质含量10％～25％。
2.如权利要求1所述的白术糖复合物，其特征是其单糖组成中性糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和鼠李糖，另外含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。
3.如权利要求1所述的白术糖复合物的生产方法，其特征是包括将中药材用水浸泡、有机溶剂沉淀、沉淀用水溶解，经透析或膜分离和浓缩干燥获得粗品白术糖复合物，粗品经柱层析分离获得精品白术糖复合物。
4.如权利要求3所述生产白术糖复合物方法，其特征是生药白术切片或粉碎。
5.如权利要求3所述生产白术糖复合物方法，其特征是所用水为无离子水。
6.如权利要求3所述生产白术糖复合物方法，其特征是有机溶剂是与水互溶的有机溶剂，水提液与有机溶剂的体积比为水提液∶有机溶剂＝1∶2～6。
7.如权利要求3所述生产白术糖复合物方法，其特征是所述的有机溶剂是与水互溶的有机溶剂。
8.如权利要求3所述生产白术糖复合物方法，其特征是透析用透析膜、透析袋及超滤膜，其孔径控制在分子量1000以下。
9.如权利要求3所述生产白术糖复合物方法，其特征是透析后的上清液干燥或浓缩温度等于或低于60℃进行。
10.如权利要求1所述生产白术糖复合物的用途，其特征是用于制备治疗糖尿病的药品和降血糖的保健品。
全文摘要
本发明涉及一种从中药材白术中提取的糖复合物、其生产方法和用途。本发明采用浸泡获得白术水提液，有机溶剂沉淀、沉淀用水溶解，上清液经透析或膜分离和浓缩干燥获得粗品，粗品经柱层析分离获得精品白术糖复合物。本发明方法工艺简单、产率高，适宜工业化生产。该白术糖元素分析C＝35％～45％，H＝5.5％～7.0％，N＝1.0％～3.0％；多糖含量40％～60％；糖醛酸含量15％～45％；蛋白质含量10％～25％；单糖组成中性糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和鼠李糖，另外含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。该多糖无毒副作用，具有明显的降血糖功能作用。
文档编号A61K31/7004GK1398630SQ02136740
公开日2003年2月26日 申请日期2002年8月30日 优先权日2002年8月30日
发明者田庚元, 单俊杰 申请人:中国科学院上海有机化学研究所, 浙江京新药业股份有限公司