专利名称：用于降低细胞活性的方法和药物制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及降低细胞活性的方法，所述方法使用包含番茄红素、β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的药物制剂。本发明还涉及使用包含番茄红素、β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物作为抗癌活性剂的组合物来抑制癌的生长。
背景技术：
番茄红素、β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素是天然存在于蔬菜和水果中，主要存在于黄色/红色水果和蔬菜中的类胡萝卜素。类胡萝卜素在健康方面的益处，特别是作为抗癌剂和癌症预防剂的益处很久以前就被认识到了。在1982年，Mathews-Roth(Oncology，39(1)，33-7，1982)报道，八氢番茄红素在治疗二甲基苯并蒽(DMBA)/UV-B引起的小鼠肿瘤方面无效，但是用八氢番茄红素治疗的小鼠生长出的UV-B引起的肿瘤比对照小鼠少。Nishino的报告中暗示了八氢番茄红素的抗癌活性(Mutat.Res.，402(1-2)159-63 1998；J.Cell Biochem.Suppl.，27，86-91，1997)。Nishino使用了生物技术中的新方法，其中产生八氢番茄红素的哺乳动物细胞表现出抗H-ras-诱导的细胞转化的作用，这种作用可解释为抗癌活性。番茄红素的抗癌活性是已知的，并且公开在U.S.5,827,900中。已知番茄红素的抗癌和癌症预防活性取决于番茄红素在血清中的浓度，并且所述体内活性受到最大生理血清浓度的限制，其中最大生理血清浓度可通过高度补充番茄红素来达到。据报道，接受高度补充的个体的血清浓度可达到约1-1.2μM的血清浓度平台，其中体外实验已表明，将浓度增加至在体内不能达到的最高达4μM的水平时，可获得提高的活性。
因此，长期以来一直需要提高番茄红素的抗癌和癌症预防活性的方法。
因此，本发明的一个目的是改善番茄红素的抗癌和癌症预防活性的方法。
本发明的另一个目的是提供包含番茄红素的组合物，其中与仅含有番茄红素作为活性成分的组合物相比，所述组合物具有改善的抗癌和癌症预防活性。
通过下面的描述，本发明的其它目的将变得显而易见。
发明概述现在已非常惊奇地发现，并且这是本发明的一个目的，番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素在体外和体内表现出降低细胞总体活性的协同活性。
还已经发现，并且这是本发明的另一个目的，番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的混合物可用作抑制和预防癌细胞生长的协同活性剂。
还已经发现，并且这是本发明的另一个目的，番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的混合物可有效地用于抑制和预防一些特别的侵袭性癌细胞的生长。
还已经发现，并且这是本发明的另一个目的，番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的混合物可有效地用于减少癌细胞数目的肿瘤大小。
本发明的一个目的是提供降低细胞活性的方法，所述方法包括使用番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的混合物作为活性成分。
本发明的另一个目的是提供抑制癌症生长和癌症预防组合物，所述组合物包含番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素作为活性成分。
本发明的另一个目的是提供可被有此需要的患者较好耐受的抗癌组合物，所述组合物是基于番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的混合物。
本发明还有一个目的是提供可用于治疗多种癌症患者的方法，其中所述方法是基于番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的混合物作为活性物质。
通过下面的描述，本发明的其它目的和优点将变得显而易见。
因此，在一个方面，本发明涉及降低细胞活性的方法，所述方法包括给有此需要的个体的细胞直接或全身施用降低细胞活性有效量的混合物，所述混合物包含番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素。
根据优选的本发明实施方案，希望抑制其活性的细胞是癌细胞。因此，在另一个方面，本发明涉及抑制癌细胞生长的方法，所述方法包括给有此需要的个体施用抑制生长有效量的混合物，所述混合物包含番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素。
根据优选的本发明实施方案，本发明提供了预防癌症发展的方法，所述方法通过给个体施用有效量的混合物，所述混合物包含番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的混合物进行。
已经发现，在用均为低浓度的番茄类胡萝卜素八氢番茄红素、六氢番茄红素和番茄红素的配合物处理的乳腺癌细胞样本中，癌细胞增殖显著减弱。
还已经发现，用相同低浓度(0.3μM)的单独的番茄红素处理的乳腺癌细胞没有表现出任何增殖减弱。当仅使用单独的番茄红素，但是其以2-3μM的较高浓度使用时，可获得与使用番茄植物养分组合所达到的相同程度的显著癌细胞抑制作用。然而，因为这样的高番茄红素水平在人体血液中不能达到，所以高补充治疗剂量的单独番茄红素不能给癌症患者提供实际的有益效果。
在所有附图中，八氢番茄红素是指八氢番茄红素与六氢番茄红素的混合物。“AST”是指虾青素，“LYC”是指番茄红素，“Phyto”是指八氢番茄红素，“β”是指β-胡萝卜素。
附图1.番茄红素提高虾青素对乳腺癌细胞增殖的抑制作用。将MCF-7乳腺癌细胞在0.5％血清中预培养24小时，然后用3％血清刺激生长([3H]胸苷掺入)。用图示浓度的单独的或者与0.3μM番茄红素组合的虾青素将刺激的细胞处理3天(附图1A)。图中指示了番茄红素与虾青素的高浓度(附图1B)。所给出的数据是以一式四份进行的2-3个独立实验的平均值±SE。
附图2.番茄红素提高八氢番茄红素和六氢番茄红素对DHT诱导的前列腺癌细胞增殖的抑制作用。将LNCaP前列腺癌细胞在1.5％血清中预培养24小时，然后通过加入10-9M二氢睾酮(DHT)来刺激生长([3H]胸苷掺入)。用图示浓度的单独的或者与0.3μM番茄红素组合(加番茄红素)的八氢番茄红素和六氢番茄红素(八氢番茄红素)的混合物将刺激的细胞处理3天(附图2A)。图中指示了番茄红素与八氢番茄红素加六氢番茄红素的高浓度(附图2B)。所给出的数据是以一式四份进行的2-3个独立实验的平均值±SE。
附图3.番茄红素提高β-胡萝卜素对DHT诱导的前列腺癌细胞增殖的抑制作用。将LNCaP前列腺癌细胞在1.5％血清中预培养24小时，然后通过加入10-9M二氢睾酮(DHT)来刺激生长([3H]胸苷掺入)。用图示浓度的单独的或者与0.3μM番茄红素组合的β-胡萝卜素将刺激的细胞处理3天(附图3A)。图中指示了番茄红素与β-胡萝卜素的高浓度(附图3B)。所给出的数据是以一式四份进行的2-3个独立实验的平均值±SE。
附图4.番茄红素提高八氢番茄红素和六氢番茄红素对乳腺癌细胞增殖的抑制作用。将MCF-7乳腺癌细胞在0.5％血清中预培养24小时，预培养24小时，然后用3％血清刺激生长([3H]胸苷掺入)。用图示浓度的单独的或者与0.3μM番茄红素组合的八氢番茄红素和六氢番茄红素(八氢番茄红素)的混合物将刺激的细胞处理3天(附图4A)。图中指示了番茄红素与八氢番茄红素加六氢番茄红素的高浓度(附图4B)。所给出的数据是以一式四份进行的2-3个独立实验的平均值±SE。
附图5.番茄红素提高β-胡萝卜素对乳腺癌细胞增殖的抑制作用。将MCF-7乳腺癌细胞在0.5％血清中预培养24小时，然后用3％血清刺激生长([3H]胸苷掺入)。用图示浓度的单独的或者与0.3μM番茄红素组合的β-胡萝卜素将刺激的细胞处理3天(附图5 A)。图中指示了番茄红素与β-胡萝卜素的高浓度(附图5B)。所给出的数据是以一式四份进行的2-3个独立实验的平均值±SE。
优选实施方案的详细描述以下描述是本发明实施方案的举例说明。下面的描述不能视为限制性的，应当理解，本发明技术人员可对本发明进行很多显而易见的改变。
在整个说明书中，除非另有不同说明，否则组分的百分比是按重量计的。在本申请中，术语“番茄红素”是指得自天然来源例如蔬菜、水果、其它植物材料和真菌来源的番茄红素，以及合成番茄红素。在本申请上下文中，癌症生长抑制活性还包括癌症预防活性，即本发明既提供治疗活性，也提供预防活性。
依据本发明方法的特定实施方案，本发明提供了抑制癌细胞活性和预防癌症发展的方法，所述方法包括给有此需要的个体施用抑制或预防有效量的组合物，其中所述组合物包含番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素，其中番茄红素与每一种其它类胡萝卜素或其混合物的比例为约10∶0.3-1∶1，优选为6∶1。根据优选的本发明实施方案，在本发明方法中使用的组合物包含比例为约10∶0.67∶0.6的番茄红素、八氢番茄红素和六氢番茄红素。
依据本发明方法的另一个特定实施方案，本发明提供了抑制癌细胞活性和预防癌症发展的方法，所述方法包括给有此需要的个体施用抑制或预防有效量的组合物，其中所述组合物包含5-40mg番茄红素与0.15-6mg一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素。相应地，所述给药可每日给药一次或分多次给药，其中优选分多次给药。
在本发明方法的另一个实施方案中，给个体施用含有5％-15％番茄红素与0.3％-10％一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的80-670mg组合物，用于抑制癌细胞活性或预防癌症。
在本发明方法的另一个实施方案中，施用含有5％-15％番茄红素、0.3％-3％八氢番茄红素和0.3％-4％六氢番茄红素的250mg组合物。更优选地，给个体施用含有6％番茄红素、0.5％八氢番茄红素和0.55％六氢番茄红素的所述组合物，用于抑制癌细胞活性或预防癌症。所述组合物还可以包含其它常用的抗癌剂和添加剂。
优选施用15mg番茄红素、1.2mg八氢番茄红素和1.4mg六氢番茄红素，每天给药2次。
根据本发明方法的给药可通过本领域已知方法进行，例如可口服给药、搅拌给药、直肠给药，通过皮下、静脉内或肌肉注射来给药。
根据另一个本发明实施方案，本发明提供了协同作用组合物，所述组合物包含番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素，其中番茄红素与其它类胡萝卜素或其混合物的比例为约10∶0.3-1∶1，优选为6∶1。所述组合物更优选包含比例为约10∶0.3∶0.2-1∶1∶1的番茄红素、八氢番茄红素和六氢番茄红素。
根据本发明组合物的另一个实施方案，本发明提供了组合物，其包含3％-15％番茄红素与0.3％-15％一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素。优选含有5％-8％番茄红素、0.4％-1％八氢番茄红素和0.4％-1％六氢番茄红素。更优选含有6％番茄红素、0.5％八氢番茄红素和0.5％六氢番茄红素。
也在本发明方法中使用的本发明组合物还可以含有选自常用药物、常用抗癌剂、添加剂、赋形剂、辅料和载体的其它组分。可将本发明组合物配制成多种不同剂型。这样的剂型的示例性非限制性实例是软和硬胶囊、帽状凝胶剂(gel-cap)、丸剂、软凝胶胶囊、片剂、粒剂、细颗粒剂、粉剂、液体制剂例如悬浮液。对于胃肠外给药，其它常用剂型有例如注射剂、滴剂、栓剂等。制剂还可以是缓释形式。
已经发现，本发明组合物能以令人惊奇的活性抑制多种癌细胞生长和预防癌症发展。本发明不限于任何特定类型的癌细胞。其生长可用本发明方法抑制的癌细胞的示例性非限制性实例有乳腺癌、子宫内膜癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌(小细胞和非小细胞型)、黑素瘤、膀胱癌、胰腺癌、胃癌、肝癌、白血病、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤和其它脑肿瘤、头和颈癌和子宫颈癌。
依据本发明的另一个方面，给药是通过将含有番茄红素与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的组合物加到食品、营养添加剂、功能食品或饮料中来进行的。
本发明提供了下列优点1.通过与一种或多种选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素产生协同作用，番茄红素的抗癌和癌症预防活性得到了改善。
2.本发明方法实现了在体内不能达到的高番茄红素浓度的抗癌和癌症预防作用。
3.本发明方法提供了具有很小或没有副作用—使用常用抗癌药物所带来的副作用—的安全方法。
虽然已经举例说明了本发明的实施方案，但是很显然，可在不背离本发明实质或超出权利要求书范围的情况下对本发明进行很多改进、改变和改动。
权利要求
1.降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素与另外的类胡萝卜素的组合物。
2.降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素与选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的组合物。
3.抑制癌细胞生长和预防癌细胞发展的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素与选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的组合物，所述组合物包含抑制生长有效量的番茄红素与选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素。
4.抑制癌细胞生长和预防癌细胞发展的方法，其中欲抑制其生长的癌细胞选自乳腺癌、子宫内膜癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌(小细胞和非小细胞型)、黑素瘤、膀胱癌、胰腺癌、胃癌、肝癌、白血病、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤和其它脑肿瘤、头癌、颈癌和子宫颈癌，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素与选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的组合物，所述组合物包含抑制生长有效量的番茄红素与选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素。
5.权利要求4的方法，其中所述组合物是通过注射或口服来给药。
6.治疗患有以下癌症的癌症患者的方法乳腺癌、子宫内膜癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌(小细胞和非小细胞型)、黑素瘤、膀胱癌、胰腺癌、胃癌、肝癌、白血病、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤和其它脑肿瘤和子宫颈癌，包括给所述患者施用药物有效量的组合物，所述组合物包含抑制癌细胞生长有效量的作为活性成分的番茄红素与选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素，以抑制癌细胞生长。
7.预防癌症发展的方法，包括给个体施用癌症预防有效量的包含番茄红素与选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素的组合物。
8.抑制癌细胞活性的组合物，其中包含番茄红素与另外的类胡萝卜素。
9.抑制癌细胞活性的组合物，其中包含番茄红素与选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素。
10.抑制癌细胞活性的组合物，其中包含番茄红素与β-胡萝卜素。
11.抑制癌细胞活性的组合物，其中包含番茄红素与虾青素。
12.抑制癌细胞活性的组合物，其中包含番茄红素与cataxanthin。
13.抑制癌细胞活性的组合物，其中包含番茄红素与玉米黄质。
14.抑制癌细胞活性的组合物，其中包含番茄红素与黄体素。
15.抑制癌细胞活性的组合物，其中包含番茄红素与八氢番茄红素。
16.抑制癌细胞活性的组合物，其中包含番茄红素与六氢番茄红素。
17.权利要求8-16任一项的组合物，其中所述组合物还包含药物添加剂、赋形剂、辅料或载体。
18.用于有效预防癌症发展的组合物，其中包含番茄红素与选自β-胡萝卜素、虾青素、cataxanthin、玉米黄质、黄体素、八氢番茄红素和六氢番茄红素或其混合物的类胡萝卜素。
19.权利要求8-18任一项的组合物，其中所述组合物是口服剂型、局部给药剂型、直肠给药剂型或液体剂型。
20.降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素和β-胡萝卜素的组合物。
21.降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素和虾青素的组合物。
22.降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素和cataxanthin的组合物。
23.降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素和玉米黄质的组合物。
24.降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素和黄体素的组合物。
25.降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素和八氢番茄红素的组合物。
26.降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素和六氢番茄红素的组合物。
全文摘要
降低癌细胞活性的方法，包括给有此需要的个体施用包含番茄红素与另外的类胡萝卜素的组合物。
文档编号A61K31/122GK1612728SQ02827021
公开日2005年5月4日 申请日期2002年11月5日 优先权日2001年11月12日
发明者Y·沙罗尼, J·利维 申请人:利库德天然产品工业有限公司