专利名称：胍丁胺的新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及胍丁胺的新的医药用途。更具体讲，本发明涉及胍丁胺在制备用于预防或治疗焦虑药物中用途。
背景技术：
胍丁胺是一已知化合物，其化学名称为4-胍基-丁胺并具有下面结构 已知胍丁胺具有镇痛作用，目前尚未见其抗焦虑作用的报道。
发明目的本发明的目的是寻找并开发胍丁胺的新用途。
发明简述本发明人经研究现已出人意料地发现胍丁胺具有良好预防和/或治疗焦虑作用。
因此，本发明第一方面涉及胍丁胺在制备用于预防和/或治疗焦虑的药物中用途。
本发明再一方面涉及用于预防和/或治疗焦虑的药物组合物，其包括预防和/或治疗焦虑有效量的胍丁胺及药用载体或赋形剂。
本发明再一方面涉及预防或治疗焦虑疾病或症状的方法，其包括给焦虑或有潜在焦虑危险的患者预防和/或治疗有效量的胍丁胺。
发明详述根据本发明，本说明书中术语“患者”是指人类。
根据本发明，胍丁胺可单独或以药物组合物形式使用并可通过口服，非肠道或局部途径给予。举例讲，本发明药物组合物的口服剂型可为片剂、胶囊、溶液或悬浮液等；其非肠道给药剂型可是皮下、肌肉、腹膜内给药的注射剂或滴注等；其局部给药剂型可是贴剂，软膏等。
根据本发明，胍丁胺的给药剂量取决于多种因素如性别、年龄、体重、疾病严重程度或给药途径并可由临床医生判断。
进一步讲，胍丁胺作为一种已知化合物可通过本领域已知方法制备或从市场上购得。
下面的试验实施例是对本发明的进一步详细说明但不意味着对本任何限制。
AGMT对小鼠的抗焦虑作用小鼠明暗穿箱试验实验原理 本试验是利用小鼠喜暗恶光和好探究的特点。当小鼠进入暗箱后便极力想去探究明箱，但又害怕明箱中的强光刺激，如此形成的冲突状态被认为是一种焦虑情绪。受试药在不增加运动活性的剂量下，增加明暗穿箱次数，则认为有抗焦虑作用。
实验方法实验装置小鼠明暗穿箱(40×20×20cm)是由明箱和暗箱两部分组成。明箱是用无色透明有机玻璃制成的敞箱，占箱体的3/4；暗箱用不透光的塑料板制成加有顶盖的暗盒，占箱体1/4。在两箱隔板中央下方开一门洞(5×5cm)。在明敞箱的上方用灯泡调节箱内平均照度为7000lx，暗箱为0。
在该模型上，对胍丁胺进行了单次皮下注射给药、以及皮下或灌胃连续(3次，1次/日)给药的三组试验。各组试验均分别使用18-22克、雄性昆明种小鼠。动物随机分组，按10ml/kg的给药容量，间隔10分钟，采用组循环分别给予不同剂量的胍丁胺或溶剂，在给药(或最后1次给药)后60分钟用于试验。阳性对照药安定为试验前30分钟腹腔注射1次性给药。给药后动物置于暗环境中，测试时，将小鼠放入明箱中央背向暗箱，观察记录10分钟内小鼠的明暗穿箱行为。明暗穿箱行为指标有1.潜伏时间小鼠放入明暗箱后直至第一次进入暗箱的时间(秒)；2.穿箱次数在10分钟内进入暗箱后返回明箱的次数。3.明箱滞留时间在10分钟内进入暗箱后返回明箱的滞留时间(秒)。
实验结果小鼠皮下注射胍丁胺对明暗穿箱的影响在小鼠明暗穿箱模型上，一次性皮下注射胍丁胺20～160mg/kg剂量范围内，与溶剂对照组相比较，80mg/kg组对穿箱次数有显著性增加(P＜0.01)；对明箱滞留时间有增加趋势，与潜伏时间均无显著性改变。而阳性对照药安定对小鼠穿箱次数和明箱滞留时间有显著性增加(分别为P＜0.001和P＜0.01)；有减少潜伏时间的趋势，但无显著性(见表1)。
表1.小鼠皮下注射AGMT(1次)对明暗穿箱行为的影响药物与剂量动物数 小鼠在10分钟内的明暗穿箱行为(mg/kg)(n)潜伏时间(秒)穿箱次数明箱滞留时间(秒)蒸馏水 25102.6±121.34.44±3.42 104.6±120.5安定1 1168.6±50.1 15.27±8.37***214.2±112.3**AGMT 20 11146.4±162.23.82±5.47 62.0±62.140 12113.3±113.25.33±5.05 80.0±71.680 15121.3±94.8 8.27±4.32**130.5±62.712012106.0±84.1 4.42±2.78 56.4±45.016012183.9±162.93.42±3.45 64.2±66.33209 189.3±103.23.00±2.12 41.9±39.1注X±S。与蒸馏水对照组比较**P＜0.01；***P＜0.001。
小鼠皮下注射(3次，1次/日)胍丁胺10～80mg/kg剂量范围内，与溶剂对照组比较，20mg/kg组与阳性对照药安定有相似的作用，对穿箱次数和明箱滞留时间有显著性增加(分别为P＜0.01和P＜0.05)(见表2)。
表2.小鼠皮下注射AGMT(3次，1次/日)对明暗穿箱的行为影响药物与剂量动物数 小鼠在10分钟内的明暗穿箱行为(mg/kg)(n)潜伏时间(秒) 穿箱次数 明箱滞留时间(秒)蒸馏水 13 202.6±106.8 2.46±2.26 35.6±39.5安定 112 66.9±46.5***13.83±8.74***127.6±114.5**AGMT 10 13 245.5±137.2 3.00±2.65 59.3±84.620 13 139.5±107.6 5.69±2.98**89.1±78.4*40 13 223.1±139.6 4.46±3.50 60.9±53.480 13 170.2±106.0 4.00±3.81 46.1±41.4注X±S。与蒸馏水对照组比较*P＜0.05；**P＜0.01；P＜0.001。
小鼠灌胃胍丁胺对明暗穿箱的影响小鼠灌胃(3次，1次/日)胍丁胺20～120mg/kg，其中20mg/kg组与阳性对照药安定有相似的作用，有显著性增加穿箱次数和显著减少潜伏时间(均为P＜0.05)(见表3)。
表3.小鼠灌胃AGMT(3次，1次/日)对明暗穿箱的行为影响药物与剂量 动物数小鼠在10分钟内的明暗穿箱行为(mg/kg) (n)潜伏时间(秒) 穿箱次数 明箱滞留时间(秒)蒸馏水 12 280.6±127.5 2.83±1.85 65.9±57.0安定 1 12 92.4±69.3**8.17±5.84***154.4±106.5**AGMT 20 12 186.7±126.6*5.50±3.87*81.2±51.240 12 245.1±112.0 3.25±3.39 45.8±54.280 12 211.0±106.7 4.33±3.50 63.6±47.512012 245.6±103.5 3.42±3.00 69.3±69.8注X±S。与蒸馏水对照组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。
上述结果表明，在小鼠明暗穿箱模型上，小鼠单次皮下注射胍丁胺80mg/kg、连续给药(1次/日，3次)皮下注射和灌胃胍丁胺20mg/kg，均有与阳性对照药安定相同的作用。说明胍丁胍在该动物模型上显示抗焦虑作用。
AGMT对大鼠的抗焦虑作用大鼠Vogle饮水冲突试验实验原理Vogel冲突试验是根据禁水大鼠饮水动机与电击惩罚形成矛盾冲突状态，抗焦虑剂增加冲突反应，致焦虑剂则相反。
实验方法实验仪器Medel-102型焦虑仪(美国，Lafayette仪器公司)，该仪器由自动计数器、电刺激器和有机玻璃操作箱三部分组成。有机玻璃操作箱(45×24×21)，顶部不锈钢盖一端插入一个带有不锈钢嘴的水瓶，除瓶嘴外套有一层绝缘胶皮，瓶嘴与箱底部不锈钢栅栏间距为12cm高，并分别通过导线与刺激器连接。当实验运行过程中，大鼠舔水时，形成电流回路，自动计数仪自动记录3分钟的舔水计数，每舔水20次，仪器自动给予一次电击。电击强度为0或0.3mA，持续2秒。
实验步骤实验分两个阶段进行第一阶段，非惩罚饮水训练将大鼠禁水24小时后，单个置于Medel-102型焦虑仪的有机玻璃操作箱内，不给电击(0mA)，让其充分探究，直至发现瓶嘴并舔水，自动计数器记录3分钟大鼠的舔水次数少于300次的大鼠被淘汰。
第二阶段，惩罚实验合格大鼠继续禁水24小时进行惩罚试验。在试验前24、5、1小时给动物皮下注射或灌胃不同剂量的AGMT，最后一次给药后1小时后，将动物放入有机玻璃操作箱内，给予0.3mA电击强度，仪器开始自动记录3分钟惩罚期的舔水和电击计数，(舔水与电击次数比为20∶1)。阳性对照药安定在试验前30分钟腹腔注射。
实验结果大鼠皮下注射胍丁胺对Vogel饮水冲突行为的影响大鼠皮下注射(3次/24小时)胍丁胺2.5～80mg/kg，与溶剂对照组比较，随剂量的增加，剂量依赖地增加饮水冲突状态下的舔水计数作用，其中20mg/kg和40mg/kg剂量组，与阳性药安定1mg/kg组均有统计学意义(P＜0.05)，80mg/kg剂量组增幅达61％(P＜0.001)(见表4)。
表4.大鼠皮下注射AGMT(3次/24小时)对Vogel冲突行为的影响药物与剂量 动物数 给药非惩罚(0mA/3mine) 惩罚(0.3mA/3mine)增加幅度(mg/kg) (n)途径舔水计数(次) 舔水计数(次) (％)蒸馏水 12 皮下497±94288±1140安定112 腹注530±79383±114*33AGMT 2.5 10 皮下546±63274±122 -55.0 10 ″ 502±93298±118 310.011 ″ 558±61331±175 1520.010 ″ 484±81398±152*3840.011 ″ 527±90392±124*3680.010 ″ 524±90465±104***61与对照组比较*P＜0.05，***P＜0.001大鼠灌胃胍丁胺对Vogel饮水冲突行为的影响大鼠灌胃(3次/24小时)胍丁胺2.5～80mg/kg剂量范围内，与溶剂对照组比较，均不同程度地增加饮水冲突状态的舔水计数，其中10和20mg/kg剂量组，具有显著的统计学意义(P＜0.01)，增幅均在25％以上(见表5)。
表5.大鼠灌胃AGMT(3次/24小时)对Vogel冲突行为的影响药物与剂量动物数 给药 非惩罚(0mA/3mine) 惩罚(0.3mA/3mine) 增加幅度(mg/kg)(n) 途径舔水计数(次) 舔水计数(次) (％)蒸馏水 10 灌胃547±59362±103 0安定1 9 腹注591±63499±44***39AGMT 10 9 灌胃599±101 478±56**3220 10 “ 561±85451±26**2540 10 “ 561±81455±136 2680 10 “ 593±115 399±206 11注与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001上述结果表明，在大鼠Vogel饮水冲突模型上，胍丁胺皮下注射20-80mg/kg，以及灌胃10-20mg/kg均显示出与阳性对照药安定相同的作用。说明该药在此模型上，皮下和灌胃均有抗焦虑作用。
大鼠群居接触试验实验原理配对孤养大鼠彼此渴望接触，但同时对陌生环境和强光刺激产生恐惧，因而形成矛盾冲突状态。抗焦虑药增加强光或不熟悉环境下的主动接触时间；致焦虑剂减少主动接触时间。
试验方法及步骤Wistar雄性大鼠180-220克，试验前孤养一周。
按体重相近(不超过15克)的原则两两配对，配对动物接受同一药物、剂量处理。
实验分两组二组AGMT同等的剂量分组，以及对照组平行比较(1)强光(照度为380lx)不熟悉环境试验→单个大鼠、自然光条件下、敞箱内熟悉10分钟/天，连续二天→强光熟悉环境试验组(2)弱光(照度为35lx)不熟悉环境试验→单个大鼠、自然光条件下、敞箱内熟悉10分钟/天，连续二天→弱光熟悉环境试验组给药方法受试药在强光(或弱光)不熟悉环境试验前24、5、1小时三次给药；停药二天(熟悉环境)后，在强光(或弱光)熟悉环境试验前24、5、1小时三次给药。阳性对照药安定每次给药前24和5小时与溶剂对照组一样，灌胃蒸馏水，最后一次给药在试验前30分钟，为腹腔注射。
观察指标所有配对动物在50×50×32cm的有机玻璃敞箱内，分时段(2分钟)记录，观察10分钟的主动接触(行为)时间(秒)，即嗅、理毛、追逐、踢咬、骑跨、格斗等累计时间。
实验结果在群居焦虑模型上，大鼠灌胃(3次/24小时)胍丁胺5～40mg/kg，与对照组相比，均剂量依赖性地增加大鼠在强光不熟悉环境、强光熟悉环境下的主动接触时间。动物主动接触增加的效果，在强光不熟悉环境下，10mg/kg以上剂量有显著性；在强光熟悉环境下，20mg/kg以上剂量才具有显著性(见表6)。
表6.大鼠灌胃AGMT(3次/24小时)对强光环境主动接触行为的影响药物与剂量动物数 在强光环境下的主动接触时间(秒)(mg/kg) (配对) HU HF蒸馏水 10 286.7±33.2 396.8±46.7安定 110 321.4±29.5*436.4±24.8*AGMT 510 296.3±29.0 401.9±27.510 10 328.7±40.4*423.1±39.620 10 350.1±27.0***453.1±24.2**40 10 356.1±45.8***442.3±26.2**
注强光不熟悉环境(380lx high light and unfamiliar condition，HU)；强光熟悉环境(380lx high light and familiar condition，HF)。与同条件对照组比较*P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。
大鼠同样灌胃胍丁胺5～40mg/kg。与对照组相比，在弱光不熟悉环境下，动物的主动接触时间，在10～40mg/kg均有显著增加；而在弱光熟悉环境下，各剂量组均未见有显著性改变(见表7)。
表7.大鼠灌胃AGMT(3次/24小时)对弱光环境主动接触行为的影响药物与剂量动物数 在弱光环境下的主动接触时间(秒)(mg/kg) (配对) LU LF蒸馏水 10 325.3±29.6 467.8±28.3安定 110 363.9±26.3**458.0±47.4AGMT 510 317.6±13.9 453.3±27.610 10 365.1±46.2*476.7±20.020 10 355.0±27.9*464.9±26.240 10 350.4±17.8*462.4±25.4注弱光不熟悉环境(35lx low light and unfamiliar condition，LU)；弱光熟悉环境(35lx low light and familiar condition，LF)。
与同条件对照组比较*P＜0.05；**P＜0.01。
上述结果表明，在不同强度应激条件下，即强光不熟悉环境、强光熟悉环境和弱光不熟悉环境中，灌胃胍丁胺10～40mg/kg后，都可不同程度增加大鼠主动接触时间。不影响非应激条件(弱光熟悉环境)下的主动接触时间。其作用与阳性对照药安定是相同的。说明胍丁胺10～40mg/kg，在该焦虑模型上显示出抗焦虑作用。
权利要求
1.下式胍丁胺在制备用于预防和/或治疗焦虑疾病或症状的药物中用途。
2.用于预防和/或治疗焦虑疾病或症状的药物组合物，其包括预防和/或治疗有效量的胍丁胺及药用载体或赋形剂。
全文摘要
本发明涉及胍丁胺的新的医药用途。更具体讲，本发明涉及胍丁胺在制备用于预防或治疗焦虑药物中用途。
文档编号A61K31/155GK1520806SQ0310254
公开日2004年8月18日 申请日期2003年2月12日 优先权日2003年2月12日
发明者李锦 , 龚正华, 赵楠, 罗质璞, 秦伯益, 锦 李 申请人:中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所, 中国人民解放军军事医学科学院毒物药