专利名称：三萜衍生物的制备方法
技术领域：
本发明涉及用作内皮缩血管素受体拮抗剂等，特别是下式的化合物，其药学可接受盐或溶剂合物(下面称作化合物(V))的三萜衍生物的制备方法 技术背景化合物(V)是一种内皮缩血管素受体拮抗剂，并且用来治疗各种循环系统疾病，例如高血压，局部缺血，脑循环失调，肾失调，各种器官循环不足(专利文献1，专利文献2等)。专利文献3中公开了化合物(V)的中间体例如myricerone等石竹素衍生物的制备方法。另外，非专利文献1和非专利文献2等中公开了使用石竹素制备化合物(V)的方法。但是，这些文献中描述的方法需要中间体的分离步骤，在各反应步骤中需要不同的试剂或溶剂，对环境有害的试剂等，对于工业化生产过程必然是不充分的。
专利文献4中描述了通过催化还原将羟基-2-硝基苯甲醛还原为胺基的方法，不过在该方法中，在将醛基保护成乙缩醛之后进行还原过程。
专利文献1 WO92/12991专利文献2 JP7-53484A专利文献3 JP7-316188A专利文献4 JP7-1011956A非专利文献1 Organic Process Research & Development，1999，vol.3，p.347-351非专利文献2 Journal of Organic Chemistry，1997，vol.62，p.960-966本发明的公开期望开发有效制备化合物(V)或其中间体的大规模生产方法。
附图的简要描述
图1说明参考实施例1中获得的化合物(5)的粉末X-射线衍射图案。纵轴表示峰强度，横轴表示衍射角(2θ)。
实施本发明的最佳方式本发明的发明人研究化合物(V)的制备方法的改进，完成本发明。
(1)化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，所述方法包括步骤(步骤1)在锂试剂(A)的存在下在有机溶剂中使化合物(I)与化合物(II)反应，制备含有化合物(III)的溶液，(步骤2)通过向步骤1中获得的溶液加入锂试剂(B)来制备含有化合物(IV)的溶液，(步骤3)向步骤2中获得的溶液加入酸，以下面的反应式表示 其中R1和R2各自独立地是C1-C8烷基。
(2)化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，包括按顺序进行下面的步骤
(步骤1)在有机溶剂中溶解化合物(I)，化合物(II)和锂试剂(A)，(步骤2)加入锂试剂(B)，和(步骤3)加入酸，以下面的反应式表示 其中R1和R2各自独立地是C1-C8烷基。
(3)上面(1)或(2)中描述的方法，包括分离化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物。
(4)上面(1)-(3)任一项中描述的方法，其中锂试剂(A)是氯化锂或氢氧化锂，而锂试剂(B)是氢氧化锂。
(5)上面(1)-(4)任一项中描述的方法，其中所述有机溶剂是N，N-二甲基甲酰胺。
(6)化合物(II)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，所述方法包括步骤(步骤1)通过在Pd-C的存在下还原化合物(VI)制备含有化合物(VII)的溶液，和(步骤2)使步骤1中获得的溶液中的化合物(VII)与化合物(VIII)反应，以下面的反应式表示 其中R2是C1-C8烷基。
(7)上面(6)中描述的方法，其中pH值在1-7范围内实施步骤(2)。
(8)上面(6)中描述的方法，其中在N，N-二甲基苯胺的存在下实施步骤(2)。
(9)化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，所述方法包括下面的步骤(步骤1)在碱的存在下在有机溶剂和水中通过使化合物(I)与化合物(II’)反应，制备含有化合物(IV)的溶液，和(步骤2)向步骤1获得的溶液加入酸，以下面的反应式表示 其中R1是C1-C8烷基，和R3是氢或C1-C8烷基。
(10)化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，所述方法包括依顺序进行下面的步骤(步骤1)在有机溶剂和水中溶解化合物(I)，化合物(II’)和碱，和(步骤2)加入酸，以下面的反应式表示
其中R1是C1-C8烷基，和R3是氢或C1-C8烷基。
(11)上面(9)或(10)所述方法，包括分离化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物。
(12)上面(9)-(11)任一项中描述的方法，其中所述碱是氢氧化锂，氢氧化钠或氢氧化钾。
(13)下式的化合物(I-1)的晶体 其中R1是乙基。
(14)化合物(V)的制备方法，包括通过将根据上面(1)的化合物(V)溶解于有机溶剂中并且用纯化水洗涤而去除内毒素。
(15)上面(14)描述的方法，其中所述有机溶剂是乙酸乙酯。
解释使用上面的化合物(I)制备化合物(V)的方法作为本发明的实施方案。
(方法A，步骤1)在该步骤中，化合物(I)，化合物(II)和锂试剂(A)溶解于有机溶剂。通过在锂试剂(A)的存在下在有机溶剂中使化合物(I)和化合物(II)反应，获得含有化合物(III)的溶液。
在本说明书中，“溶液”包括其中溶解了化合物(III)的均匀溶液和其中化合物(III)步骤优选地溶解而是悬浮在其中的悬浮液。
下文中，说明书中的“溶液”包括悬浮液和“溶液”，还包括“悬浮液”。
在与上面专利文献3，非专利文献1，非专利文献2等描述的方法相似的方法，或者使用根据上述文献的Horner-Emmons反应的方法，能制备化合物(I)和其3-酮衍生物。通过用亚乙基二氧基团保护3-酮衍生物能容易地制备化合物(I)。
通过上面的文献描述的相似方法也能制备化合物(II)。
R1或R2代表的“C1-C8烷基”包括直链或支链烷基。“C1-C8烷基”的例子包括甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，异戊基，新戊基，己基，异己基，正庚基，异庚基，正辛基和异辛基。对于R1来说，甲基或乙基是优选的，乙基是更优选的。对于R2来说，甲基是优选的。
锂试剂(A)的例子是氯化锂，溴化锂，氢氧化锂和碳酸锂。氯化锂和氢氧化锂是优选的。相对化合物(I)使用大约2.0至10.0摩尔当量的，优选大约2.0至3.0摩尔当量的锂试剂(A)。
有机溶剂的例子N，N-二甲基甲酰胺，二乙醚，四氢呋喃，N，N-二甲基乙酰胺，和乙二醇二甲基醚。N，N-二甲基甲酰胺是优选的。
反应温度一般是大约-20℃至60℃，并且优选大约10℃至20℃。
反应时间一般是大约1小时至50小时并且优选6小时至24小时。
如果需要，可以在碱的存在下进行反应。碱的例子是DBU(1，8-二氮杂双环[5.4.6]十一-7-烯)，三甲胺，三乙胺，胆碱，普鲁卡因和乙醇胺，DBU是优选的。
在该步骤中获得含有化合物(III)的溶液。虽然可以分离化合物(III)，但是优选不用分离就能在下面的步骤中使用。
(步骤2)在该步骤中，向步骤1中获得的反应混合物中加入锂试剂(B)。通过向步骤1获得的含有化合物(III)的溶液加入锂试剂(B)能获得含有化合物(IV)的溶液。
锂试剂(B)的例子是氢氧化锂和碳酸锂，氢氧化锂是优选的。对于该反应，相对化合物(II)使用大约2.0至10.0摩尔当量的，优选大约2.0至4.0摩尔当量的锂试剂(B)。上面锂试剂(B)可以是和锂试剂(A)相同的试剂或者和锂试剂(A)不相同的试剂。
有机溶剂的例子N，N-二甲基甲酰胺，二乙醚，四氢呋喃，N，N-二甲基乙酰胺，和乙二醇二甲基醚。步骤1中使用的相同的溶剂优选是，更优选是N，N-二甲基甲酰胺。
反应温度一般是大约-40℃至60℃，并且优选大约-10℃至0℃。
反应时间一般是大约0.1小时至10小时，并且优选大约0.5小时至2.0小时。
通过该步骤获得含有化合物(IV)的溶液。虽然可以分离化合物(IV)，但是优选不用分离就能在下面的步骤中使用。
(步骤3)在该步骤中，向步骤2获得的反应混合物加入酸。通过向含有步骤2获得的化合物(IV)的溶液加入酸而获得化合物(V)。通过根据通常的方法萃取，用水洗涤，结晶，能分离化合物(V)，优选作为晶体。
对于酸没有特别限制，可以使用能保护化合物(IV)的亚乙基二氧基团的任何酸。酸的例子是盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸，对甲苯磺酸，甲磺酸，甲酸，三氟乙酸，马来酸和草酸，而盐酸是优选的。相对于化合物(IV)，酸的量是大约4.5至15.0摩尔当量，优选大约7.0至9.0摩尔当量。
反应温度一般是大约0℃至80℃，并且优选大约40℃至50℃。
反应时间一般是大约0.1小时至10小时，并且优选大约1.0小时至2.0小时。
根据上述步骤，通过自化合物(I)的单罐反应，优选不用分离各中间体，能获得化合物(V)。在各步骤中可以使用相同类型的碱或溶剂。因此，本发明方法对于生产方法是非常有用的。
(方法B)通过按顺序实施下面的步骤就能获得化合物(V)将化合物(I)，化合物(II’)和碱溶解于有机溶剂和水中，并且向混合物加入一种酸。通过下面的步骤获得化合物(V)一步是在碱的存在下，在有机溶剂和水中，使化合物(I)和化合物(II’)反应，得到含有化合物(IV)的溶液，和一步是根据上述方法A，步骤3描述的相似的方法，让含有化合物(IV)的溶液反应。
R3代表的“C1-C8”烷基和上文提到的R1和R2相同。
碱的例子是氢氧化锂，氢氧化钠和氢氧化钾，而氢氧化锂是优选的。相对于化合物(I)，碱的量是大约2.0-10.0摩尔当量，优选大约2.0-5.0摩尔当量。
有机酸的例子是N，N-二甲基甲酰胺，二乙醚，四氢呋喃，N，N-二甲基乙酰胺，和乙二醇二甲基醚，而N，N-二甲基甲酰胺是优选的。
水的量没有特别限制。例如，通过加入水，使用0.1％(w/w)至30％(w/w)，优选1％(w/w)至10％(w/w)的碱水溶液。
反应温度一般是大约-40℃至60℃，并且优选大约-10℃至0℃。反应时间一般是大约0.1小时至10小时，并且优选大约0.5小时至4.0小时。
该方法对于大规模生产是有用的方法，因为在十分短的时间能直接从化合物(I)制备化合物(IV)。
让这样获得的化合物(IV)进行上面的步骤3得到化合物(V)。如果需要，通过萃取，用水洗涤，结晶等能分离到化合物(V)，优选作为晶体。
通过成盐的公知的方法能容易地将化合物(V)转化为药学可接受盐。
化合物(V)的药学可接受盐的例子是与无机碱，氨，有机碱，碱性氨基酸等形成的盐或内盐。无机碱的例子是碱金属例如Na，K等，碱土金属例如Ca，Mg等，有机碱的例子是三甲胺，三乙胺，胆碱，普鲁卡因，乙醇胺等。碱性氨基酸的例子是赖氨酸，精氨酸，鸟氨酸，组氨酸。化合物(V)的盐的优选的例子是碱金属盐例如2Na盐和3Na盐。化合物(V)及其盐可以是与水或醇的溶剂合物。
作为本发明的另一个实施方案，下面描述从上面的化合物(VI)制备化合物(II)的方法(步骤1)。
通过在Pd-C的存在下还原化合物(VI)的硝基而获得化合物(VII)。
相对于化合物(VI)，Pd-C的重量比是大约0.01-0.2当量，优选大约0.05-0.1当量。
溶剂的例子是水，乙酸乙酯，乙腈，四氢呋喃，甲醇和乙醇。乙酸乙酯或乙腈是优选的。
反应温度一般是大约-10℃至60℃，并且优选大约-5℃至25℃。反应时间一般是大约0.5小时至10.0小时，并且优选大约1.0小时至5.0小时。
根据这个步骤，不使用对环境不利的TiCl3等能进行还原反应。此外，使用Pd-C的反应是有效的，因为Pd-C在反应之后能被回收。
化合物(VI)具有与硝基相邻的醛基。虽然具有这样的醛的硝基化合物一般在保护醛基之后被还原(参见专利文献4)，通过该步骤不用保护醛基选择性还原硝基。
通过该步骤获得化合物(VII)的溶液，并且不用分离在下面的步骤中能使用化合物(VII)。
(步骤2)通过使化合物(VIII)与步骤1中获得的化合物(VII)的氨基缩合能获得化合物(II)。因为化合物(II)是非常不稳定的，在该反应中反应溶液的pH值调节是重要的。当用乙酸，乙酸钠等将pH值调节至1-7，优选2-5时，反应有效地进行。当在两相反应中进行反应时，化合物(VIII)的量被减少。
相对于化合物(VI)，化合物(VIII)的量一般是大约0.8-5.0摩尔当量，优选大约1.0-1.5摩尔当量。
溶剂的例子是水，乙酸，乙酸乙酯，乙腈，四氢呋喃，甲醇和乙醇。乙酸乙酯是优选的。反应温度一般是大约0℃至40℃，并且优选大约0℃至15℃。
反应时间一般是大约0.1小时至5.0小时，并且优选大约0.5小时至1.5小时。化合物(VIII)中的R2优选是甲基。
当在有机溶剂系统中连续进行步骤1和2时，与在使用TiCl3的含水体系中的相比，步骤2中化合物(VIII)的量被大大减少。
(步骤2，另一种方法)通过使步骤1获得的化合物(VII)在碱的存在下与化合物(VIII)反应能获得化合物(II)。作为高产率获得目标化合物(II)并且抑制副产物形成的碱，N，N-二甲基苯胺是优选的。
溶剂的例子是水，乙酸，乙酸乙酯，乙腈，四氢呋喃，甲醇和乙醇，并且乙腈是优选的。
反应温度一般是大约-10℃至40℃，并且优选大约-10℃至10℃。
反应时间一般是大约0.1小时至5.0小时，并且优选大约0.5小时至1.5小时。
相对于化合物(VI)，化合物(VIII)的量一般是大约0.8-5.0摩尔当量，优选大约1.0-1.5摩尔当量。
这种可替换的方法具有以高产率获得目标化合物(II)的优点，并且与在使用TiCl3的含水体系中的相比，化合物(VIII)的量能被大大减少。
化合物(II)的盐和溶剂合物的例子与上面提到的化合物(V)的相同。
本发明提供上面化合物(I-1)的晶体。该晶体举例的一个特征是下面的粉末X-射线衍射测定的散射角。
2θ＝5.760，6.480，9.580，10.080，14.720，15.340，15.740，19.480，20.280度。
X-射线衍射条件CuKα射线1.54试管压力40kV试管电流40mA上述晶体具有高的保存稳定性和高纯度。当分离这种晶体并且用作中间体时，在制备化合物(I)或者其盐的方法中可以省略纯化步骤例如柱色谱法。因此，这种晶体对于化合物(I)的制备方法是非常重要的。
本发明提供化合物(V)的纯化方法。更具体地，提供当内毒素与化合物(V)混合时去除内毒素的方法。该方法包括通过上述方法或类似方法获得的化合物(V)溶解于有机溶剂，接着用水洗涤混合物的步骤。
优选的有机溶剂举例来说是乙酸乙酯。
即使在该方法中使用的水包括几十至几百EU/ml内毒素，该方法获得足够纯的效果。水优选是纯化水，而注射用蒸馏水更优选。
通过用水洗涤含有化合物(V)的有机溶液将与化合物(V)混合的内毒素转移给含水层。该操作仅一次就给出相当纯的效果，优选重复两次或多次。通过这种重复，与这种操作之前相比，内毒素的含量能被降低至大约1％或更少，优选大约0.5％或更少。因此，当化合物(V)或者其盐被用于注射时，这种纯化方法是优选的。
实施例下面详细说明本发明的实施例，实施例中缩写的意义如下DME乙二醇二甲基醚AcOH乙酸DMFN，N-二甲基甲酰胺THF四氢呋喃参考实施例1 化合物(3)的合成 将化合物(1)(18.2克，36.4毫摩尔)悬浮于DMF(182毫升)和乙酸(18.2克)中，并且向该混合物中倒入三氯化钛的25％水溶液(49.4克，80.1毫摩尔)。混合物加热至50℃并且反应1小时之后，减压浓缩至大约120克。向浓缩的混合物加入乙酸乙酯(91毫升)和水(91毫升)，并且分离有机层。过滤有机层中的沉淀物，并且用10％盐水(91克)洗涤有机层。用乙酸乙酯(91毫升)萃取含水层，合并所有的有机层并且减压浓缩至44.25克。向获得的22.13克浓缩混合物加入DME(68.3毫升)和乙酸(3.3克)。向混合物中倒入21％亚硝酸钠水溶液(17.85克，54.3毫摩尔)，混合物在25(+10，-5)℃反应1小时。反应完全后，向混合物中倒入16％氢氧化钠水溶液(33.74克)，混合物在50℃反应4小时。加入16％氢氧化钠水溶液保持pH值13或更大来进行反应(16％氢氧化钠水溶液总量39.68克)。反应完全后，让混合物冷却至25℃并且向混合物中加入甲醇(54.6毫升)来结晶。用7％盐酸(5.6克)中和混合物之后，过滤混合物，得到6.13克化合物(3)，为白色结晶(产率69.4％)。
参考实施例2 化合物(8)的合成
(Ac乙酰基，Et乙基)(1)化合物(6)的合成向化合物(4)(8.0克，16.5毫摩尔)在甲苯(56毫升)中的悬浮液加入乙二醇(2.0克，33.0毫摩尔)和对甲苯磺酸吡啶翁(0.2克，0.8毫摩尔)。用流动水通过迪安-斯达克塌分水器使混合物在110℃下回流。2小时之后，将反应混合物冷却至90℃，并且加入乙二醇(1.0克，16.5毫摩尔)。混合物在110℃下又回流3小时得到化合物(5)的甲苯溶液。将溶液冷却至70℃，加入吡啶(5.2克，66.0毫摩尔)。加入乙酸酐(5.1克，49.5毫摩尔)和4-二甲基氨基吡啶(0.6克，5.0毫摩尔)，混合物在80℃下反应2小时。反应完全后，让混合物冷却至室温，倒入甲醇。将混合物在5℃下搅拌2小时，用冷甲醇(24毫升)洗涤，获得8.3克化合物(6)(产率88％)。
(2)化合物(8)的合成将金属锂(3.5克，498.6毫摩尔)溶解于预先冷却至-50℃的液氨，并且经1小时向该混合物滴加化合物(6)(47.0克，82.3毫摩尔)溶液。溶液在-50℃下反应1小时，倒入乙醇(236毫升)并且温热混合物去除氨。将是倒入10℃的混合物并且滴加7％盐酸(545克)。将溶液在5-10℃下搅拌1小时，过滤收集出现的晶体并且用50％乙腈水溶液和乙腈洗涤，得到化合物(7)的湿晶体(42.6克)。
将27.21克这样获得的湿晶体和二乙基膦酰基乙酸(22.7克，115.6毫摩尔)溶解于DMF(150毫升)和乙酸乙酯(600毫升)。减压下去除水而将混合物浓缩至大约210毫升，向混合物加入1，1’-羰基双-1H-咪唑(17.0克，105.1毫摩尔)，混合物在70℃下反应1小时。反应完全后，让混合物冷却至室温并且倒入乙酸乙酯(450毫升)。通过滴加3.5％盐酸将混合物的pH值调节至大约5，加入水(23毫升)，并且分离有机层。有机层保持在40℃，并且在有机层和水(240毫升)中分配。用乙酸乙酯(150毫升)萃取水相。合并有机层并且加入乙酸乙酯(300毫升)。将混合物浓缩至大约300毫升，结晶。将混合物冷却至0-5℃，搅拌1小时，过滤获得22.8克化合物(8)，为白色结晶(产率63％)。
图1给出粉末X-射线衍射图，主峰如下。
(X-射线衍射条件CuKα射线1.54，试管压力40kV，试管电流40mA)衍射角(2θ，度) 间距(d，)5.760 15.330716.480 13.628829.580 9.2244910.0808.7680214.7206.0129715.3405.7713115.7405.6255319.4804.5530920.2804.37525实施例1 化合物(9)的合成
向化合物(13)(1.7克，10毫摩尔)的乙酸乙酯(17毫升)溶液加入10％Pd-C(50％湿度)(0.25克)并且在大气压下在15-20℃下氢化5.5小时。滤掉催化剂并且用乙酸乙酯(8毫升)洗涤。冰冷却下向这样获得的化合物(14)的乙酸乙酯溶液加入乙酸钠水溶液(33毫升)和乙酸(3.3毫升)(pH3.90)。冰冷却下向该混合物滴加3-甲氧基羰基丙烯酸氯(1.5克)并且将混合物搅拌50分钟。过滤收集出现的结晶，用水(20毫升)和乙酸乙酯(5毫升)洗涤，并且干燥，获得1.8克化合物(9)(产率72％)。
实施例2 化合物(9)的合成 化合物(13)(10.0克，59.8毫摩尔)和10％Pd-C(2.08克，52.1％湿度，10％(w/w))悬浮于乙腈(200毫升)并且将混合物冷却至低于0℃。保持低于5℃并且以4kgf/cm2或更小提供氢气，将混合物搅拌1小时或更长时间。滤出Pd-C并且用乙腈洗涤，获得化合物(14)的乙腈溶液。向这样获得的溶液加入N，N-二甲基苯胺(6.53克，53.9毫摩尔)，并且将混合物滴加给预先冷却至5℃的3-甲氧基羰基丙烯酸氯(10.7克，72.0毫摩尔)的乙腈(50毫升)溶液。加入完成后出现黄色固体(化合物(9))。将反应混合物搅拌30分钟并且加入水(100毫升)。将混合物温热至室温并且静置一天。减压浓缩之后，冰冷却下将混合物搅拌1小时。过滤收集沉淀出的黄色固体并且用1摩尔/升的盐酸和水洗涤，得到化合物(7)，为湿润的粗产物结晶产物。将这样获得的产物悬浮于DMF(100毫升)和乙腈(50毫升)中并且在40℃溶解。向溶液中滴加0.66％碳酸氢钠(302克)水溶液之后沉淀出化合物(9)黄色固体，将混合物冷却至室温并且搅拌1小时。过滤收集沉淀出的固体并且用水洗涤，得到12.3克化合物(9)纯产物(产率82.5％)。
实施例3 碱对丙烯酸化反应的影响作为用于丙烯酸化作用的碱，研究了N，N-二甲基苯胺，咪唑，吡啶，2，6-二甲基吡啶，三乙胺和Li2CO3。在使用N，N-二甲基苯胺的反应中，与使用其他碱的反应相比，以高产率获得靶化合物(9)，并且副产物的生成被抑制到最小程度。
实施例4 化合物(12)的合成
(方法1)化合物(8)(12.6克，18.2毫摩尔)，化合物(9)(5.0克，20.0毫摩尔)，和氯化锂(1.9克，45.5毫摩尔)悬浮于DMF(47.8克)并且将混合物冷却至低于10℃。加入DBU1，8-二氮杂双环[5.4.6]十一-7-烯)(6.9克，45.5毫摩尔)之后，混合物温热至室温并且反应20小时，获得化合物(10)的DMF溶液。将溶液冷却至-5℃，并且向混合物中滴加4％氢氧化锂水溶液(37.7克)。混合物在-5℃搅拌1小时，获得化合物(11)的DMF溶液。将混合物温热至35℃，加入35％盐酸(16.1克)，。混合物在45℃搅拌1小时。反应完全后，向混合物加入乙酸乙酯(136毫升)和水(120克)并且分离有机层。用乙酸乙酯萃取含水层之后，合并所有的有机层并且用水洗涤。用5％碳酸氢钠水溶液萃取有机层，分离含水层之后，加入乙酸乙酯(160毫升)。用7％盐酸将混合物的pH值调节至大约5。用乙酸乙酯萃取水相，用水洗涤之后合并所有的有机层。减压下浓缩合并的有机层，70℃下加入化合物(12)的晶种，并且将混合物搅拌1小时。结晶之后加入乙腈(52克)，让混合物逐渐冷却至室温并且搅拌2小时。过滤收集沉淀出的黄色固体并且用乙腈洗涤，获得9.3克化合物(12)(产率70％)。
(方法2)化合物(8)(25.20克，36.4毫摩尔)和化合物(9)(10.88克，43.7毫摩尔)悬浮于DMF(176克)。向混合物加入氢氧化锂(3.82克，91.0毫摩尔)并且让混合物反应20小时得到化合物(10)的DMF溶液。将溶液冷却至低于-5℃后，向混合物滴加3％氢氧化锂水溶液(75.34克)，并且将混合物在-5℃下搅拌1小时，得到化合物(11)的DMF溶液。混合物温热至35℃，加入35％盐酸(28.4克)，混合物在45℃搅拌1小时。反应完全后，混合物在乙酸乙酯(89毫升)和水(240克)中分配。用乙酸乙酯萃取含水层之后，用水洗涤各有机层。用5％碳酸氢钠水溶液萃取有机层，分离含水层之后，加入乙酸乙酯(320毫升)。用7％盐酸将混合物的pH值调节至大约5并且萃取。用乙酸乙酯萃取水相，用水洗涤之后合并所有的有机层。浓缩合并的溶液的四分之一(相当于化合物(8)6.30克，9.1毫摩尔)，70℃下加入化合物(12)的晶种，并且将混合物搅拌1小时。结晶之后加入乙腈(26克)，让混合物逐渐冷却至室温并且搅拌2小时。过滤收集沉淀出的黄色固体并且用乙腈洗涤，获得4.8克化合物(12)(产率73％)。
实施例5 化合物(12)的合成 化合物(8)(3.46克，5毫摩尔)和化合物(9)(1.50克，6毫摩尔)悬浮于DMF(24.2克)并且将混合物冷却至低于-5℃。向混合物滴加5.6％氢氧化锂(10.7克，25毫摩尔)水溶液并且将混合物反应3.5小时，得到化合物(11)的DMF溶液。混合物温热至5℃，加入35％盐酸(3.39克，32.5毫摩尔)，混合物在45℃搅拌2小时。反应完全后，混合物冷却至室温并且加入乙酸乙酯(44.6毫升)和水(33.5克)。用10％氢氧化钠水溶液将混合物的pH值调节至大约5.5之后分离有机层。用乙酸乙酯萃取水相，用水洗涤之后合并所有的有机层。减压浓缩合并的溶液并且在70℃下加入化合物(12)结晶。向混合物加入乙腈(14.9克)，让混合物逐渐冷却至室温，并进一步冷却至0℃，接着搅拌1小时。过滤收集沉淀出的黄色固体并且用乙腈洗涤，获得2.97克化合物(12)(产率81.4％)。
实施例6通过实施例5的相似方法获得化合物(12)(3.11克，产率85.3％)，除了使用其中R3是氢的化合物(II’)代替化合物(9)，使用8.8％氢氧化钠(11.4克，25毫摩尔)水溶液作为碱，并且反应时间是2小时。
实施例7去除内毒素的方法注EU/毫升指内毒素浓度。
向其中内毒素浓度预先调节至120EU/毫升的乙酸乙酯(40毫升，＜1.2EU/毫升)和蒸馏水(蒸馏水原先没有内毒素(17毫升))的混合物中加入实施例4获得的化合物(12)(18.0克)(＜0.3EU/毫升)，并且分离(120EU/毫升，在含水层中)。用注射用蒸馏水(17毫升，没有内毒素)(6EU/毫升，在含水层中)萃取有机层。用注射用蒸馏水(17毫升，没有内毒素)(0.6EU/毫升，在含水层中)另外萃取有机层。浓缩有机层，加入乙酸乙酯(25.5毫升，＜1.2EU/毫升)并且浓缩混合物。70℃下向混合物加入乙腈(8.6毫升，＜0.3EU/毫升)之后搅拌混合物，逐渐冷却至室温。过滤收集沉淀出的黄色固体并且用乙腈(31毫升，＜0.3EU/毫升)洗涤，获得化合物(12)(1.5克，＜0.3EU/毫升)。
工业实用性能通过本发明的方法有效生产用作内皮缩血管素受体拮抗剂或类似物的三萜衍生物。另外，本发明提供用于合成三萜衍生物的中间体结晶。
权利要求
1.化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，所述方法包括步骤(步骤1)在锂试剂(A)的存在下在有机溶剂中使化合物(I)与化合物(II)反应，制备含有化合物(III)的溶液，(步骤2)通过向步骤1中获得的溶液加入锂试剂(B)来制备含有化合物(IV)的溶液，(步骤3)向步骤2中获得的溶液加入酸，以下面的反应式表示 其中R1和R2各自独立地是C1-C8烷基。
2.化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，包括按顺序进行下面的步骤(步骤1)在有机溶剂中溶解化合物(I)，化合物(II)和锂试剂(A)，(步骤2)加入锂试剂(B)，和(步骤3)加入酸，以下面的反应式表示 其中R1和R2各自独立地是C1-C8烷基。
3.权利要求1或2中要求的方法，包括分离化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物。
4.权利要求1-3任一项中要求的方法，其中锂试剂(A)是氯化锂或氢氧化锂，而锂试剂(B)是氢氧化锂。
5.权利要求1-4任一项中要求的方法，其中所述有机溶剂是N，N-二甲基甲酰胺。
6.化合物(II)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，所述方法包括步骤(步骤1)通过在Pd-C的存在下还原化合物(VI)制备含有化合物(VII)的溶液，和(步骤2)使步骤1中获得的溶液中的化合物(VII)与化合物(VIII)反应，以下面的反应式表示 其中R2是C1-C8烷基。
7.权利要求6中要求的方法，其中pH值在1-7范围内下实施步骤2。
8.权利要求6中要求的方法，其中在N，N-二甲基苯胺的存在下实施步骤2。
9.化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，所述方法包括下面的步骤(步骤1)在碱的存在下在有机溶剂和水中通过使化合物(I)与化合物(II’)反应，制备含有化合物(IV)的溶液，和(步骤2)向步骤1获得的溶液加入酸，以下面的反应式表示 其中R1是C1-C8烷基，和R3是氢或C1-C8烷基。
10.化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，所述方法包括依顺序进行下面的步骤(步骤1)在有机溶剂和水中溶解化合物(I)，化合物(II’)和碱，和(步骤2)加入酸，以下面的反应式表示 其中R1是C1-C8烷基，和R3是氢或C1-C8烷基。
11.权利要求9或10中要求的方法，包括分离化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物。
12.权利要求9-11任一项中要求的方法，其中所述碱是氢氧化锂，氢氧化钠或氢氧化钾。
13.下式的化合物(I-1)的晶体 其中R1是乙基。
14.化合物(V)的制备方法，包括通过将根据权利要求1的化合物(V)溶解于有机溶剂中并且用纯化水洗涤而去除内毒素。
15.权利要求14中要求的方法，其中所述有机溶剂是乙酸乙酯。
全文摘要
化合物(V)，其药学可接受盐或溶剂合物的制备方法，所述方法包括下面的反应式表示的步骤，其中R
文档编号A61K31/56GK1642970SQ03806750
公开日2005年7月20日 申请日期2003年3月18日 优先权日2002年3月22日
发明者小池晴夫, 尾田胜男, 西野丰, 柿沼诚 申请人:盐野义制药株式会社