专利名称：用于改善皮肤质量的口服施用组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及在人或动物中改善皮肤质量、特别是通过预防或逆转皮肤的老化迹象来改善皮肤质量的方法。本发明还涉及刺激皮肤中胞外基质生成的物质和/或组合物。
背景技术：
在生命体的整个生命过程中，皮肤会出现不同的老化迹象、特征，其主要的临床表现是出现随年龄而增加或加深的细纹和深皱纹。而且，肤色通常会改变，并且在某些部位可能出现弥漫性刺激(diffuse irritation)，有时出现毛细血管扩张。这些老化迹象甚至因皮肤受外界影响如UV-照射、污染物、自由基或化学物质的影响而加速。
皮肤老化反映在主要结构改变和组成变化上。与年轻皮肤相比，最明显老化的皮肤含有较少的胶原和糖胺聚糖(Fenske NA，Lober CWJ AmAcad Dermatol 15571-85 1986)。
在分子水平上，结缔组织主要由胶原、蛋白多糖和透明质酸组成。当胶原形成篮状三维网时，蛋白多糖嵌入其中。蛋白多糖由在其上共价连接有多个糖胺聚糖侧链这种重复的非支链二糖的核心蛋白质组成。该二糖单位的一种成分是下文称为GAG的氨基糖。在蛋白多糖中碳水化合物的量可高达其重量的95％。伴随其出现的是蛋白多糖的极强的水结合力。在皮肤中，这些分子将真皮中的组织液水划分开。它们在胶原网状结构内溶胀的特性形成内压力，该内压力使皮肤表面变得平滑并使皮肤充盈饱满。
已经做出了多种尝试来抑制老化过程或者甚至是逆转已出现的改变。迄今为止，局部应用药理学物质或美容成分已经产生了最佳结果。在此方面，FR 2808682提供了一种尤其用于护肤的新的美容产品，该产品含有作为活性成分的含多酚的新鲜蔓藤细胞和适于局部应用的载体。
另外，DE 10108097提供了一种尤其用于老化和/或应激皮肤(stressedskin)的美容制剂，该制剂含有水和与水形成层状结构的物质，还含有具有式(IA)的三甲基铵甲基的化合物(I)、(I)的代谢产物和/或S-腺苷甲硫氨酸。
US 2002/0041890公开了美容护肤方法和含有支链醇的磷酸酯和/或硫酸酯和/或其乙氧基化物的组合物。这些组合物可控制皮脂细胞(sebocyte)的皮脂分泌、增强控油和改善肤感、防止发亮和发粘，同时还具有抗老化益处，其可减少皱纹和老化皮肤的出现、改善肤色、治疗光老化皮肤、改善皮肤的光泽、透明度和光洁度以及使皮肤整体呈现出健康和年轻的状态。
可分别防止皮肤变差或老化的另一方法是提供可清除自由基的化合物。在此方面，EP 0761214公开了包含苯胺衍生物和二糠基胺衍生物的单线态氧猝灭剂，据报导该猝灭剂可减少皮肤的氧化应激。
在此方面也已经开发了一些药物。例如，EP 1230952提供了一种制备包含雌激素和孕激素、用于延缓皮肤老化的开始和治疗皮肤老化的药物的方法。
另一方面，还已经描述了一些食品组合物。在US 6365175中，将含有岩芹酸的可食用组合物用于制备食品组合物或食品补充剂，所述的食品组合物或食品补充剂可用作抑制花生四烯酸的代谢产物生成和/或减少细胞内粘附分子形成的抗炎组合物，或者可用作对起皱纹、皮肤松垂、光损伤皮肤、干性皮肤、易剥落皮肤及老年斑有积极作用的抗老化组合物。
在本领域，仍然需要提供一种可改善皮肤质量和预防或逆转因老化过程而导致的变化的有效的营养途径。
因此，本发明的目的是提供一种这样的改善皮肤质量的方法。
已经通过提供口服施用组合物解决了该问题，所述的口服施用组合物能刺激胞外基质生成、特别是与组织液结合并从而改善皮肤的饱满度的成分如糖胺聚糖的合成。
发明概述因此，第一方面，本发明的目的是提供一种用于改善人或动物皮肤质量的口服施用组合物，该组合物含有在可口服用载体中的作为活性成分的有效量的刺激细胞能量代谢的分子、抗氧化剂或其组合混合物。
该组合物还可预防或修复人或动物皮肤的老化性变化。
确实，已经令人惊奇地发现营养素如一些刺激能量代谢的分子如肉碱以及抗氧化剂如银杏提取物可刺激糖胺聚糖在皮肤中的生成和沉积，从而可改善皮肤的饱满度。
该组合物可以是用于人或动物的全营养平衡食品。其还可以是例如食品补充剂、药物组合物或兽用组合物。
本发明的组合物可预防或延缓在皮肤老化过程中出现的变化。其还可通过改善皮肤水合作用、皮肤弹性、皮肤外观和减少或逆转皮肤干燥、起皱纹、毛孔大小及皮肤粗糙而提供多种益处。
另一方面，本发明涉及有效量的刺激细胞能量代谢的分子、抗氧化剂或其组合混合物在制备用于在人或动物中改善皮肤质量和预防或修复皮肤的老化性变化的组合物中的用途。
另一方面，本发明提供了一种在人或动物中改善皮肤质量和预防或修复皮肤的老化性变化的方法，该方法包括对个体施用以上所述的口服施用组合物。
发明详述根据第一方面，本发明涉及用于改善皮肤质量的口服施用组合物，该组合物含有在可口服用载体中的作为活性成分的有效量的刺激细胞能量代谢的分子、抗氧化剂或其组合混合物。
刺激细胞能量代谢的分子可以是例如L-肉碱、肌酸、脂肪酸(单不饱和或多不饱和脂肪酸、特别是ω-3脂肪酸)、心磷脂、烟酰胺、碳水化合物以及它们的天然来源。
优选地，所述分子的量为至少1mg/kg体重/天，更优选1mg至1g/kg体重/天。
抗氧化剂是可减少蛋白质氧化(例如防止蛋白质羰基的形成)的化合物。它们可以是例如硫醇的来源(例如硫辛酸、半胱氨酸、胱氨酸、甲硫氨酸、S-腺苷-甲硫氨酸、牛磺酸、谷胱甘肽以及它们的天然来源)，或者是可上调它们的体内生物合成的化合物。本发明的抗氧化剂还可以是其它抗氧化剂，例如维生素C、维生素E(生育酚和生育三烯酚)、类胡萝卜素(胡萝卜素、番茄红素、叶黄素、玉米黄质)、泛醌(例如CoQ10)、茶叶儿茶素(例如表儿茶素没食子酸酯)、含多酚和/或二萜(例如kawheol和咖啡醇)的咖啡提取物、银杏提取物、富含原花色素的葡萄或葡萄籽提取物、香料提取物(例如迷迭香)、含异黄酮及相关植物雌激素的大豆提取物以及具有抗氧化活性的黄酮的其它来源、可上调细胞抗氧化防御的化合物(例如增加谷胱甘肽S-转移酶的乌索脱氧胆酸、增加过氧化氢酶的乌索酸、增加超氧化物歧化酶的人参和人参皂苷(gingenoside)以及它们的天然来源即中草药)。
优选地，抗氧化剂的量为至少0.025mg/kg体重/天，更优选0.025mg至250mg/kg体重/天。
载体可以是任何食品或药学产品，或者口服施用的营养补充剂或组合物。食品或药学载体的实例有乳、酸乳、凝乳、乳酪、发酵乳、乳制发酵产品、冰淇淋、发酵谷制产品、乳制粉、婴儿制剂或片剂、液体混悬剂、干燥口服补充剂、湿口服补充剂、干管灌膳食(tube-feeding)、宠物食品。口服施用的组合物可以是胶囊、软胶囊、片剂、糊剂或锭剂、胶或者饮用溶液或乳剂形式。制备载体的方法是公知常识。
本发明的组合物还可以包含常规赋形剂，特别是甜味剂、矫味剂或防腐剂。其还可包含益生素和/或益生微生物。
本发明的组合物可以根据本领域公知的技术进行配制。
在一个实施方案中，可以制备含有至少一种活性成分的药物组合物，所述活性成分的量足以在个体中达到所需的效果。该组合物可以是片剂、液体、干燥口服补充剂、湿口服补充剂、干管灌膳食、湿管灌膳食等。该药物组合物还可以含有适于将具有不同性质的各个活性分子递送至靶组织的载体和赋形剂。所述载体/赋形剂的种类及其用量取决于物质的性质以及所涉及的药物递送和/或施用方式。可以理解的是熟练技术人员可依据其本身的知识来选择适宜的成分和盖仑形式以将活性物质靶向递送至皮肤。
在另一个实施方案中，制备了用于人消耗的食品组合物。该组合物可以是全营养制剂、乳制品、冷冻或贮存稳定的饮料、汤、食品补充剂、替代餐以及营养棒或糖果。
营养制剂优选可经肠施用；例如以粉末、液体浓缩物或即饮饮料的形式施用。如果希望制备粉末状的营养制剂，可将匀化的混合物转移至适宜的干燥设备如喷雾干燥器或冷冻干燥器中并将其转化成粉末。
在另一个实施方案中，常规食品可富含本发明的组合。例如，发酵乳、酸乳、新鲜乳酪、凝乳、糖果棒、早餐谷物片或棒、饮品、奶粉、豆制品、非乳制发酵产品或用于临床营养的营养补充剂。那么，刺激能量代谢的分子的量优选为以重量计至少50ppm，可高达2000mg/天，抗氧化剂的量优选为以重量计至少10ppm。
在另一个实施方案中，可以制备宠物食品。宠物食品制剂优选是全营养平衡宠物食品。其还可以是用于宠物的食品补充剂或是药物组合物的形式。本发明的全营养宠物食品制剂可以是任何适宜的形式，例如粉末、干燥粗粒或小丸或者其它干燥形式、挤出形式、半湿形式或湿形式，如厚块或条状或布丁。其可以被冷冻或者以贮存稳定的产品形式提供。该宠物食品可用常规方法制备。
在另一个实施方案中，可以制备食品补充剂以改善宠物食品质量。作为食品辅剂，它们可以被包封或者可以以粉末形式提供，并与主要食物联合或分开包装，其可以是湿的或干的。根据实施例，含有根据本发明所选择的物质的粉末可以以粉末形式包入小药囊中，或者包在凝胶或脂质或其它适宜的载体中。根据用户使用说明，这些单独包装的单元可以与主要食物一起提供，或者以用于与主要食物或治疗一起使用的多单元包装形式提供。
本发明的食品组合物旨在改善皮肤水合作用、皮肤弹性、皮肤外观和减少或逆转皮肤干燥、起皱纹、毛孔大小和皮肤粗糙。
根据另一方面，本发明还涉及以上所述的刺激细胞能量代谢的分子、抗氧化剂或其组合在制备用于在人或动物中改善皮肤质量和预防或修复老化性变化的口服施用组合物中的用途。
根据最后一个方面，本发明提供了在人或动物中改善皮肤质量和预防或修复皮肤的老化性变化的方法，该方法包括对个体施用以上所述的组合物。
所述组合物可作为正常食物的补充剂或作为全营养食品的成分施用于哺乳动物。优选制备以上所述的全营养食品。
优选地，用于个体消耗以获得有益效果的组合物的量取决于所述个体的大小、种属和年龄。然而，至少1mg/kg体重/天的肉碱量和至少0.025mg/kg体重/天的抗氧化剂量通常是足够的。
以下实施例仅以举例的方式给出，决不应曲解为对本申请的主题内容的限定。除非另有说明，否则所有百分数均为重量百分数。
实施例1对本发明的食品营养素的效果的体内试验·研究方案对12月龄的小鼠进行饮食介入3个月。所有动物组均无限制地喂养。每周一次对动物进行称重。
·动物由IFFA credo(法国)获得9周龄的雄性小鼠C57/BL6。在适应3周后，将小鼠(12周龄)单独圈养并用对照食物A进行喂养直至开始营养介入。在12月龄时，将小鼠随机分为5组(A、B、C、D和E)，每组10只。饮食介入3个月；使小鼠自由摄食和饮水，并将其置于12小时光照和黑暗循环中。
·食物将由18％蛋白质(大豆和乳清)、11％脂肪(豆油)、59％碳水化合物(淀粉+蔗糖)和10％纤维素组成的对照食物(食物A)补充入银杏提取物(食物D)或包含维生素C、维生素E、葡萄籽提取物和半胱氨酸的抗氧化剂合剂(食物B)和/或L-肉碱(分别为食物C和E)。这些食物如下食物A-对照18％蛋白质(大豆和乳清)、11％脂肪、59％碳水化合物、5％纤维素食物B-抗氧化剂合剂食物A+0.19％维生素C、0.03％维生素E、0.075％葡萄籽提取物、0.4％半胱氨酸食物C食物A+0.3％L-肉碱+食物C的抗氧化剂合剂食物D食物A+0.0375％银杏提取物(Linnea)食物E食物A+0.3％L-肉碱。
·糖胺聚糖测定在饮食介入3个月后，将动物处死并进行标准化活组织检查。采集除去毛的背部皮肤(中线，下背部)，称重，切成0.5×0.5mm的方块。将这些方块用体积为10倍于其重量的0.1％醋酸、1M NaCl在4℃、持续搅拌下提取24小时。通过离心使样品与不溶物(残留的毛、表皮)分离而使样品澄清，得到上面的脂层、含有溶解的真皮的水层以及含有不溶物的沉淀。保留水层并测定蛋白质。在25微升的该上清液中补充入200微升BCA试剂(根据生产商的使用说明，将BCA试剂A和BCA试剂B预先混合，Pierce，Rockford，IL，USA)并在持续搅拌下孵育30秒。在562nm处对显色进行测定。通过BSA标准曲线计算蛋白质浓度。
根据Chandrasekhar等人，Anal.Biochem.161103-108(1987)的方案，测定提取物中的糖胺聚糖。将50微升的该提取物与200微升DMB试剂(19mg二亚甲基蓝(dimethylene blue)、2.0ml甲酸、2.0g甲酸钠，在1000ml重蒸水中)混合。立即将板在550nm和610nm处读数，并测定比率OD550/610。使用纯化硫酸软骨素的稀释液作为标准。
结果自12月龄时开始进行3个月的饮食介入后，将四种实验食物与对照食物进行比较。皮肤用酸性高盐缓冲液提取并测定提取物中的GAG和总蛋苯氧基]烟酰胺质谱(离子喷雾)m/z＝348.1(M+1)；1H NMR(CDCl3)8.58(d，1H)，8.15(dd，1H)，7.34-7.24(m，7H)，7.06(d，2H)，6.93(d，1H)，6.08(br s，2H)，3.82(s，2H)，2.92(t，2H)，2.84(t，2H)，1.33(br s，1H)。
实施例26-{4-[2-(苄基-苯乙基-氨基)-乙基]-苯氧基}-烟酰胺
将碳酸氢钠(0.0823克，.0980mmol)加入到6-[4-(2-苄基氨基-乙基)-苯氧基]-烟酰胺(0.3061克，.0881mmol)，(2-溴乙基)苯(0.135ml，0.988mmol)，和DMF(5ml)的搅拌溶液中。在氮气氛下将反应加热回流3小时，然后冷却至室温。然后将反应物倒在水(50ml)中，并用乙醚(3×50ml)提取。用硫酸镁干燥乙醚提取液，然后滤出硫酸镁。在旋转蒸发器上浓缩，并将粗产品用硅胶快速柱色谱纯化，用90％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到0.1538克(39％)6-{4-[2-(苄基-苯乙基-氨基)-乙基]-苯氧基}-烟酰胺质谱(离子喷雾离子喷雾)m/z＝452.1(M+1)；1H NMR(CDCl3)8.55(d，1H)，8.13(dd，1H)，7.29-7.11(m，14H)，7.01(d，2H)，6.92(d，1H)，3.71(s，1H)，2.94-2.77(m，9H)。
通过实施例1的方法制备以下化合物
<p>与GAG含量相比，在各食物之间所提取的蛋白质变化较小。与对照食物A相比，食物C所具有的蛋白质含量几乎低30％。不同食物较对照食物A的变化更不明显，该变化不超过10％。
将接受对照食物A的6月龄小鼠与15月龄组中的对照食物A组进行比较，计算GAG和蛋白质浓度的结果，如表4所示。
表4.6月龄和15月龄小鼠的皮肤提取物中GAG和总蛋白质含量的比较
在15月龄小鼠中，GAG以及所提取的蛋白质浓度呈年龄依赖型下降。GAG浓度的下降比所提取的蛋白质含量的下降更为明显。
结论从这些数据可以看出，用不同食物B、C、D和E对12月龄小鼠进行3个月的饮食介入能逆转GAG含量的年龄依赖型下降。饮食介入可有效地使GAG含量朝着在年轻皮肤中所观察到的模式增加。由于GAG是结合大量组织液的有效分子，因此它们可增加间质水合作用并逆转皮肤老化迹象。
实施例2干宠物食品饲料混合物的组成为约58％重量的玉米、约5.5％重量的玉米谷蛋白、约22％重量的鸡肉粉、2.5％干燥菊苣、1％肉碱、作为抗氧化剂的0.1％维生素C、维生素E(150IU/kg)、0.05％葡萄籽原花色素提取物和1％半胱氨酸，其余为盐、维生素和矿物质。
将饲料混合物置于预调节器中并润湿。然后，将润湿的饲料置于挤压机-蒸煮器中并胶凝化。将离开挤压机的胶凝化基质通过模具加压并挤出。将挤出物切成适于对犬喂食的块、在约110℃下干燥约20分钟并冷却形成小丸。
该干犬粮能改善犬的皮肤质量。
实施例3干宠物食品按照实施例2，用2％肉碱和作为抗氧化剂的0.05％银杏提取物制备饲料混合物。然后，按照实施例2对饲料混合物进行加工。该干犬粮特别可用于改善或修复犬的老化性皮肤变化。
实施例4营养制剂制备含有100g下述粉末的营养组合物15％蛋白质水解产物、25％脂肪、55％碳水化合物(包括麦芽糖糊精37％、淀粉6％、蔗糖12％)、满足每日需求的痕量维生素和微量元素、2％矿物质、3％水分以及作为抗氧化剂的2％丙酮酸盐(酯)和1％肌肽或肌肽前体。
将13g该粉末与100ml水混合。所得制剂特别可用于在人中改善皮肤质量和预防皮肤的老化性变化。
实施例5口服补充剂用于改善皮肤质量、特别是刺激糖胺聚糖在皮肤中生成和沉积的每日口服施用的组合物含有240mg银杏提取物和Glucidex IT 19(麦芽糖糊精粉末)QSP 500mg。
该组合物对皮肤变化、特别是由于老化过程而引起的皮肤变化具有保护和预防作用。
权利要求
1.用于在人或动物中改善皮肤质量和预防或修复皮肤的老化性变化的口服施用组合物，该组合物含有在可口服用载体中的作为活性成分的有效量的刺激细胞能量代谢的分子或抗氧化剂或其组合混合物。
2.权利要求1的组合物，其中所述的分子是L-肉碱、肌酸、脂肪酸(单不饱和及多不饱和的、特别是ω-3脂肪酸)、心磷脂、烟酰胺或碳水化合物以及它们的天然来源。
3.权利要求1或2的组合物，其中的抗氧化剂是硫醇的来源如硫辛酸、半胱氨酸、胱氨酸、甲硫氨酸、S-腺苷-甲硫氨酸、牛磺酸、谷胱甘肽或它们的天然来源，或者是可上调它们的体内生物合成的化合物，或者是其它抗氧化剂如维生素C、维生素E、类胡萝卜素、泛醌、茶叶儿茶素、含多酚和/或二萜的咖啡提取物、富含原花色素的葡萄或葡萄籽提取物、香料提取物、大豆提取物以及具有抗氧化活性的黄酮的其它来源，或者是化合物如乌索脱氧胆酸、乌索酸、人参和人参皂苷以及它们的天然来源。
4.权利要求1至3中任一项的组合物，其是用于动物消耗的药物组合物、全营养宠物食品或食品补充剂。
5.权利要求1至3中任一项的组合物，其是用于人消耗的药物组合物、全营养人类食品或食品补充剂。
6.权利要求1至5中任一项的组合物，其可刺激胞外基质的生成、特别是与组织液结合并改善皮肤饱满度的糖胺聚糖的合成。
7.权利要求1至6之一的组合物，其包含肉碱或银杏提取物或抗氧化剂或其组合混合物。
8.刺激细胞能量代谢的分子、抗氧化剂或其组合在制备用于改善人或动物的皮肤质量、特别是皮肤饱满度的口服施用组合物中的用途。
9.刺激细胞能量代谢的分子或抗氧化剂或其组合在制备用于预防或修复人或动物皮肤的老化性变化的口服施用组合物中的用途。
10.改善人或动物的皮肤质量的方法，该方法包括对个体施用权利要求1至6之一的组合物。
11.预防或修复人或动物皮肤的老化性变化的方法，该方法包括对个体施用权利要求1至6之一的组合物。
全文摘要
本发明涉及用于在人或动物中改善皮肤质量和预防或修复皮肤的老化性变化的口服施用组合物，该组合物含有在可口服用载体中的作为活性成分的有效量的刺激细胞能量代谢的分子或抗氧化剂或其组合混合物。
文档编号A61K31/19GK1681484SQ03821335
公开日2005年10月12日 申请日期2003年9月1日 优先权日2002年9月9日
发明者H·斯莫拉, S·普里莫尔-梅尔腾, E·卢拉提 申请人:雀巢技术公司