专利名称：大蒜油抗辐射引起的白细胞减少和dna损伤药物制备的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及大蒜油的一种新用途，具体涉及大蒜油在对抗辐射引起的白细胞减少和DNA损伤药物制备的应用。
背景技术：
大蒜(allium sativum L.)为百合科葱属植物大蒜的鳞茎。中医药学认为大蒜具有行滞气、暖脾胃、消瘀积、解毒杀虫之功效，主治饮食积滞、脘腹冷痛、水肿胀满、泻泄、痢疾、疟疾、痈疽肿毒、白秃癣疮、蛇虫咬伤。大蒜油(garlic oil)是从大蒜中提取的油状物质，含有大蒜素(allicin)、大蒜烯(ajoene)和大蒜新素(allitridin)等多种含硫的功效成分。大蒜的抗菌消炎、杀虫、抗癌、降血压、降血脂、预防动脉粥样硬化、调节免疫功能等作用均于大蒜油有关。对大蒜具有抗癌、降血压、降血脂、预防动脉粥样硬化、调节免疫等作用的报道，国内外研究甚多，有关报道见金燕，刘桂洁，大蒜药理作用的研究进展，中医药信息，2000，(6)33-35；刘萍，大蒜的药理作用及临床应用，天津药学，1999，11(4)18；高玉民，谢锦玉，刘铭福.大蒜油抗动物肿瘤的整体疗效观察。中国中医基础医学杂志，1998；4(8)29；张晓利等，大蒜素对小鼠免疫功能的影响，中医药学报，1998，(1)57-58。目前尚未有对抗辐射、阻止和恢复辐射造成的白细胞减少和细胞DNA损伤作用报道。
发明内容本发明针对现有技术的不足，提供大蒜油的一种新用途，即大蒜油在对抗辐射引起的白细胞减少和DNA损伤药物制备的应用。
本发明的技术方案是将大蒜油用于制备对抗辐射引起的白细胞减少和DNA损伤药物。
具有抗3Gy剂量的γ射线照射引起的白细胞减少和细胞DNA损伤作用的大蒜油药物中大蒜素剂量在10～32mg/kg体重。
上述的大蒜油中大蒜素有效剂量为10～32mg/kg体重。使用方法是口服。
大蒜油可用玉米油稀释。
为了更好的理解本发明的实质，下面用大蒜油抗辐射引起的白细胞减少和DNA损伤的实验结果来说明大蒜油在对抗辐射引起的白细胞减少和DNA损伤中的作用。
1材料与方法1.1材料 SPF级BALB/c健康雄性小鼠由山东大学实验动物中心提供；含35％大蒜素的大蒜油(药品级)由河南许昌元化生物科技有限公司提供。γ辐射源山东农业科学院提供。
1.2方法1.2.1 辐射致白细胞减少模型用60只体重18～22g的雄性小鼠，将小鼠随机分为辐射模型对照组，大蒜油低、中、高剂量四组，每组15只。大蒜油用玉米油分别稀释，低、中、高剂量分别含大蒜素为5.3、10.5和31.6mg/kg，经口灌胃，每天一次，连续30天。对照组用同体积玉米油。在灌胃第15天，四组小鼠均接受同一剂量的γ射线全身照射一次，照射总剂量为3Gy(辐射源距动物20cm，照射时间为7′30″，剂量率39.96rad/min)。照射后15天继续给大蒜油和玉米油。每周称重一次，并观察动物表现。30天后处死动物，取肝、脾和肾脏进行脏器系数比较。白细胞计数用手工操作，于照射前15天、3天和照射后3天、15天四次采眼眶内眦血，每次20μl，加入0.38ml1％盐酸，混匀后入血球计数板，镜下计算计数池中四个大方格中白细胞总数，以辐射模型对照组为对照。
1.2.2 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 用60只体重18～22g的雄性小鼠，辐射模型对照组，大蒜油低、中、高剂量组同辐射致白细胞减少模型。经口灌胃，每天一次，连续18天。在灌胃第15天，四组小鼠均接受3Gy剂量的r射线全身照射一次。照射后第3天，颈椎脱臼处死动物，取股骨，用止血钳挤出骨髓液与小牛血清混匀，涂片。自然干燥后，甲醇固定，Giemsa染色，在光学显微镜下，每只动物计数1000个嗜多染红细胞中微核细胞数，微核发生率以千分率计，并以辐射模型对照组为对照。
2结果2.1辐射致白细胞减少模型动物体重的变化 辐射模型对照组，大蒜油低、中、高剂量组，四组动物初始体重相同；第二周、第三周、第四周体重各剂量组和对照组也未见显著性差异(P＞0.05)；第三周照射后动物体重也未见明显改变。见表1。整个实验期间，没有发现动物行为、摄食等活动异常。
表1大蒜油小鼠不同时间的体重变化(g)组别 大蒜素(mg/kg) 第一周 第二周 第三周第四周辐射对照 20.8±1.6 22.1±1.9 23.7±2.1 24.2±2.1低剂量组5.3 20.8±1.1 21.7±1.7 23.0±1.6 23.9±1.7中剂量组10.5 21.1±2.2 22.4±2.0 23.6±2.1 24.4±2.0高剂量组31.6 21.0±1.6 22.4±1.8 24.3±2.1 24.4±2.2n＝15；P＞0.05vs辐射对照2.2辐射致白细胞减少模型动物脏器系数的变化 用大蒜油30天后，小鼠肝脏、肾脏重量有减小的趋势，肝/体比值、肾/体比值下降，高剂量组与对照相比有显著差异(P＜0.05)；脾脏表现双向改变。低剂量组降低，高剂量组增高。重量和脾/体比值与对照相比均有显著差异(P＜0.01)。见表2。
表2各组小鼠的脏器系数比较组别 肝(g) 肝/体重(％) 脾(mg) 脾/体重(％) 肾(g)肾/体重(％)辐射对照 1.28±0.15 5.26±0.34 97.9±12.8 0.40±0.040.40±0.05 1.64±0.13低剂量组 1.24±0.14 5.16±0.32 75.9±7.3**0.32±0.03**0.38±0.05 1.60±0.12中剂量组 1.24±0.16 5.06±0.46 109.4±41.50.45±0.170.39±0.06 1.58±0.15高剂量组 1.23±0.17 5.03±0.28*124.1±17.6**0.51±0.07**0.38±0.05 1.55±0.09*2.3大蒜油对辐射小鼠外周血白细胞计数改变表3 小鼠外周血白细胞计数(×109/L)组别照射前15天 照射前3天 照射后3天 照射后15天辐射对照6.57±1.836.11±1.58 2.67±0.902.81±0.56低剂量组7.07±2.157.45±1.30*2.70±0.903.11±0.98中剂量组7.07±1.7210.98±3.52**3.89±1.67*4.65±1.48**高剂量组7.23±1.9410.45±2.89**3.91±2.43*4.74±2.21**由表3可见，照射前第15天，各剂量组小鼠外周血白细胞数与对照组比较，无显著性差异(P＞0.05)；照射前第3天白细胞总数增多，低、中、高剂量分别增加了22％、80％和71％(P＜0.05，P＜0.01)；照射后第3天中、高剂量白细胞总数均增加了46％(P＜0.05)；照射后第15天中、高剂量白细胞总数分别增加65％和69％(P＜0.01)。
2.1.2大蒜油对辐射诱发小鼠骨髓细胞微核的影响表4 大蒜油对辐射诱发小鼠骨髓细胞微核的影响组别 剂量(mg/kg) 动物数(只) 细胞数(个) 微核数(个) 微核率(‰)辐射对照 1515000 313 20.9±5.1 20.9低剂量组5.3 1515000 274 18.3±3.6 18.3中剂量组10.5 1515000 255 17.0±4.7*17.0高剂量组31.6 1515000 220 14.7±3.0**14.7各组均与对照组比较P＜0.01由表4可见，经口给予小鼠不同剂量样品15天，高剂量组与对照组比较，小鼠微核率显著降低，有显著性差异(P＜0.01)。
以上结果显示，大蒜油具有对抗辐射引起的白细胞减少和DNA损伤作用。
权利要求
1.大蒜油用于制备对抗辐射引起的白细胞减少和DNA损伤药物。
2.如权利要求1中所述的应用，具有抗3Gy剂量的γ射线照射引起的白细胞减少和细胞DNA损伤作用的大蒜油中大蒜素含量在10～32mg/kg。
全文摘要
大蒜油抗辐射引起的白细胞减少和DNA损伤药物制备的应用。大蒜油中大蒜素含量在10～32mg/kg时具有抗3Gy剂量的γ射线照射引起的白细胞减少和细胞DNA损伤作用。为放化疗方法治疗肿瘤引起的机体白细胞减低和细胞DNA损伤药物的制备又开辟了一条新的应用途径。
文档编号A61P43/00GK1559583SQ20041002370
公开日2005年1月5日 申请日期2004年2月27日 优先权日2004年2月27日
发明者谢克勤, 于丽华, 朱振平, 赵秀兰 申请人:山东大学