专利名称：活性乳酸菌素的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种活性(活菌)乳酸菌素的制备方法。
背景技术：
人们早就发现经常饮用酸奶的人能长寿。在100多年前，俄国科学家梅契尼科夫认为保加利亚杆菌能在人的肠道内产酸、抑制了腐败菌类的生长，从而能医治胃肠疾患。后来证明嗜酸乳杆菌能产生多种活性物质，而不是保加利亚杆菌。目前市场上销售和使用的乳酸菌素是采用嗜酸乳杆菌在乳中发酵，经高温喷雾干燥制成的产品，该方法存在以下缺点(1)由于采用高温喷粉，嗜酸乳杆菌已被杀死，产品无活菌；(2)已往只采用一个品系嗜酸乳杆菌进行生产，据报导嗜酸乳杆菌可产生多种不同的抗生物质，只有采用多个品系才能产生较全面的抗生物质，平衡肠道菌系，治疗疾病和增进身体健康效果会更好；(3)现有产品不溶于水，有酸涩味，适口性差，不宜被婴儿接受。
发明内容
本发明的目的是提供一种活性乳酸菌素的制备方法，该方法打破了直接用乳培养嗜酸乳杆菌制造乳酸菌素的传统做法，而改用人工合成营养液，用低温冻干的方法进行干燥，使嗜酸乳杆菌产生的抗生物质最大限度的保留在产品中，解决了产品中存在变性乳蛋白不溶于水的问题。本发明按照下述步骤进行制备a、鲜乳经脱脂后去除稀奶油，将脱脂乳调整pH值至4～5，去除蛋白质，得到黄绿色透明乳清液；b、按如下配方调制培养液每升乳清中加入蛋白胨5～15克，酵母膏2～5克，调整pH值为中性；c、然后将上述培养液在100～120℃下灭菌10～20分钟，冷却至30～40℃时分别按2～5％的接种量接入三株嗜酸乳杆菌培养18～24小时，控制pH值为6～7；d、发酵结束后混入重量浓度为50～70％的灭菌葡萄糖和变性淀粉的混合浓浆，其中发酵液与混合浓浆的重量比为(1～3)∶1，最后在-30～-50℃下冷冻干燥得到活性乳酸菌素，该活性乳酸菌素是嗜酸乳杆菌在人工合成的透明营养液中进行旺盛繁殖产生的活性抗生物质，活的嗜酸乳杆菌进入人的体内能定植肠道内，而且活的嗜酸乳杆菌和其产生的活性抗生物质可抑制肠道内的致病菌，维持肠道生理功能稳定，治疗各种肠道疾患。本发明不是直接使用哺乳动物汁来制备乳酸菌素，而是改用人工调制的营养液制备带有活菌的乳酸菌素的工艺方法，该方法采用多个品系嗜酸乳杆菌作为种子液，其中有能在人体肠道中定植的品系，而且由于采用冻干技术，产品中不仅有该菌产生的活性抗生物质，还含有活菌(每克达10亿)，对于治疗和预防某些疾病和保健作用更为明显，适口性好，易被人们接受，所得产品是乳酸菌素的更新换代产品，产品由多个品系嗜酸乳杆菌发酵制成，溶于水后无肉眼可见的悬浮物和沉淀物；该产品为活菌制剂，在产品中既有活菌又有该菌的活性抗生物质。本发明使用的菌种经实验证明具有抑制肠道致菌的性能，该菌种具有较强的活性，在牛乳中生长时，产酸能力强，滴定酸度超过200°T，所使用的嗜酸乳杆菌不是一个品系，而是三个品系，其中含有近期从人肠道中新分离的品系，这会保证它们在人肠道内定植，另外也会保证产生多种活性抗生物质。
具体实施例方式具体实施方式
一本实施方式是这样实现的a、鲜乳经脱脂后去除稀奶油，将脱脂乳调整pH值至4～5，去除蛋白质，得到黄绿色透明乳清液；b、按如下配方调制培养液每升乳清中加入蛋白胨5～15克，酵母膏2～5克，调整pH值为中性；c、然后将上述培养液在100～120℃下灭菌10～20分钟，冷却至30～40℃时分别按2～5％的接种量接入三株嗜酸乳杆菌培养18～24小时，控制pH值为6～7；d、发酵结束后混入重量浓度为50～70％的灭菌葡萄糖和变性淀粉的混合浓浆，其中发酵液与混合浓浆的重量比为(1～3)∶1，最后在-30～-50℃下冷冻干燥得到活性乳酸菌素。所述嗜酸乳杆菌为F304024嗜酸乳杆菌、S201136嗜酸乳杆菌和NY894027嗜酸乳杆菌。
具体实施例方式
二本实施方式与具体实施方式
一不同的是，所述培养液为每升乳清中加入蛋白胨10克，酵母膏2克，调整pH值为中性。其他步骤和工艺参数与具体实施方式
一相同。
具体实施例方式
三本实施方式是这样实现的a、原料采用新鲜、无抗生素的牛乳，鲜乳经脱脂后去除稀奶油，将脱脂乳调整pH值至4.6，去除蛋白质，得到黄绿色透明乳清液；b、按如下配方调制培养液每升乳清液中加入蛋白胨10克，酵母膏2克，调整pH值为中性；c、然后将上述培养液在115℃下灭菌15分钟，冷却至37℃时分别按2％的接种量接入F304024嗜酸乳杆菌(该株菌是从成年人粪便分离出来的)、S201136嗜酸乳杆菌(该株菌是从发酵酸菜中分离出来的)和NY894027嗜酸乳杆菌(该株菌从国外引进的)，培养18～24小时，控制pH值为6.5～7；d、发酵结束后混入重量浓度为60％的灭菌葡萄糖和变性淀粉的混合浓浆，其中发酵液与混合浓浆的重量比为1∶1，最后在-40℃下冷冻干燥得到活性乳酸菌素，所得活性乳酸菌素为微淡黄色粉末或粹片状，pH值为中性，溶于水，无沉淀。
将按照本实施方式得到的活性乳酸菌素与乳酸菌素抑菌效果进行比较，其比较过程如下i、分别将一次服用量的活性乳酸菌素与乳酸菌素放入灭菌容量瓶中，加生理盐水至10ml，振荡溶解、静止；ii、取试验菌种Salmoella enteritidis AL990243、Enteropathogenic Escherichia coliN896214，分别将24小时培养物调至108/ml的菌液；iii、滤纸片Ф8mm；iv、测定结果见表1表1 抑菌圈直径 单位mm
结论两者抑菌效果差异显著，活性乳酸菌素抑菌效果好。
将按照本实施方式得到的活性乳酸菌素同乳酸菌素治疗某些胃肠疾患效果进行比较，其比较结果见表2表2
结论活性乳酸菌素治疗某些胃肠炎疾病的效果明显好于乳酸菌素，其有效率大于等于89％，统计学差异显著，这与国外医学试验结果基本一致。
权利要求
1.活性乳酸菌素的制备方法，其特征在于它按照下述步骤进行制备a、鲜乳经脱脂后去除稀奶油，将脱脂乳调整pH值至4～5，去除蛋白质，得到黄绿色透明乳清液；b、按如下配方调制培养液每升乳清中加入蛋白胨5～15克，酵母膏2～5克，调整pH值为中性；c、然后将上述培养液在100～120℃下灭菌10～20分钟，冷却至30～40℃时分别按2～5％的接种量接入三株嗜酸乳杆菌培养18～24小时，控制pH值为6～7；d、发酵结束后混入重量浓度为50～70％的灭菌葡萄糖和变性淀粉的混合浓浆，其中发酵液与混合浓浆的重量比为(1～3)∶1，最后在-30～-50℃下冷冻干燥得到活性乳酸菌素。
2.根据权利要求1所述的活性乳酸菌素的制备方法，其特征在于所述嗜酸乳杆菌为F304024嗜酸乳杆菌、S201136嗜酸乳杆菌和NY894027嗜酸乳杆菌。
3.根据权利要求1所述的活性乳酸菌素的制备方法，其特征在于所述培养液为每升乳清中加入蛋白胨10克，酵母膏2克，调整pH值为中性。
全文摘要
活性乳酸菌素的制备方法，它涉及一种乳酸菌素的制备方法。本发明按照下述步骤进行制备a.鲜乳经脱脂后去除稀奶油，去除蛋白质得到黄绿色透明乳清液；b.调制培养液；c.然后将上述培养液灭菌后冷却，分别接入三株嗜酸乳杆菌培养；d.发酵结束后混入灭菌葡萄糖和变性淀粉的混合浓浆，最后冷冻干燥得到活性乳酸菌素。本发明采用多个品系嗜酸乳杆菌作为种子液，其中有能在人体肠道中定植的品系，而且由于采用冻干技术，产品中不单有该菌产生的活性抗生物质，还含有活菌(每克达10亿)，使用的菌种经实验证明具有抑制肠道致菌的性能，该菌种具有较强的活性，在牛乳中生长时，产酸能力强，滴定酸度超过200°T。
文档编号A61K35/20GK1626111SQ200410043778
公开日2005年6月15日 申请日期2004年8月6日 优先权日2004年8月6日
发明者骆承庠, 师守信, 魏宝良 申请人:骆承庠, 师守信, 魏宝良