专利名称：用于提高动物免疫力的含半胱胺组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及半胱胺或含半胱胺组合物在调节动物免疫力，尤其是提高脊椎动物免疫力方面的用途。
背景技术：
动物的生存依赖于有效的免疫系统。动物、尤其是脊椎动物的免疫系统由许多器官和细胞构成，免疫系统保护身体免受感染、疾病和异物如病毒和细菌的侵害。已提出各种提高身体免疫力的组合物来治疗疾病或仅仅改善身体的全面良好状态。例如，某些用于HIV感染治疗的药物通过设法提高患者的全身免疫力来治疗感染HIV的患者。然而，这些药物并非总是可靠的并且倾向于导致许多不受欢迎的副作用。
发明内容
因而本发明的目的是解决以上问题，或者至少向公众提供一种有用的替代物。本发明提供用于调节动物免疫力的组合物；该组合物可单独使用或与其它现有组合物或药物组合使用。
根据本发明的第一方面，提供半胱胺、半胱胺盐、或含有半胱胺或其盐的组合物用于提高动物免疫力的用途。
根据本发明的第二方面，提供用于提高动物免疫力的组合物，包含半胱胺、半胱胺盐、或含有半胱胺或其盐的组合物。
根据本发明的第三方面，提供含有上述组合物的用来提高动物免疫力的动物饲料添加剂。
根据本发明的第四方面，提供含有上述组合物的用来提高动物免疫力的动物饲料。
根据本发明的第五方面，提供一种提高动物免疫力的方法，包括将半胱胺、半胱胺盐、或含有半胱胺或其盐的组合物施用到动物体内。
提高免疫力可以包括增加动物体内白介素-2(IL-2)的水平。提高免疫力还可包括增加动物体内白介素-6(IL-6)的水平。具体地，提高免疫力还可包括刺激动物体内淋巴细胞的产生。研究表明IL-2或IL-6的水平越高则免疫系统通常就相应地越强。已经确定上述用途对于脊椎动物如牛和家禽尤其有效。
优选的是，所述组合物可包含1-95重量％的半胱胺或其盐，和包含选自环糊精及其衍生物的稳定剂的包合物主分子(host material)组合物。合适的是，含半胱胺组合物可包含1-75重量％的半胱胺或其盐。更合适的是，含半胱胺组合物可包含1-40重量％的半胱胺或其盐。
优选的是，所述含半胱胺组合物可包含1-60重量％的包合物主分子组合物。合适的是，所述含半胱胺组合物可包含10-40重量％的包合物主分子组合物。所述包含在包合物主分子组合物中的稳定剂可选自环糊精(-CD)、甲基β-环糊精(M-β-CD)、羟丙基β-环糊精(HP-β-CD)、羟乙基β-环糊精(HE-β-CD)、聚环糊精、乙基β-环糊精(E-β-CD)和支化环糊精。
优选的是，所述含半胱胺组合物可包含填料、崩解剂、粘结剂、调味剂和气味剂、以及包衣材料中的至少一种。具体地，所述含半胱胺组合物可包含1-20重量％的包衣材料。有利的是，所述包衣材料可为肠溶性的，并选自邻苯二甲酸醋酸纤维素、邻苯二甲酸醋酸淀粉(starch acetate phthalate)、邻苯二甲酸甲基纤维素、邻苯二甲酸的葡萄糖或果糖衍生物、丙烯酸和甲基丙烯酸的共聚物、聚甲基乙烯基醚、马来酸酐共聚物的部分酯化物和甲明胶。
优选的是，所述含半胱胺组合物可包含1-90重量％的填料。合适的是，所述含半胱胺组合物可包含1-60重量％的填料，并且所述填料可选自粉末状的纤维素、淀粉和硫酸钙。
优选的是，所述含半胱胺组合物可包含5-50重量％的粘结剂和崩解剂。合适的是，所述含半胱胺组合物可包含15-35重量％的粘结剂和崩解剂。所述粘结剂和崩解剂可选自羟丙基淀粉、微生物藻酸盐、微晶纤维素和淀粉。
优选的是，所述含半胱胺组合物可包含0.05-0.3重量％的用来增强其味道的调味剂和气味剂。
合适的是，所述含半胱胺组合物可形成为颗粒，每个颗粒包含至少一层包衣材料。所述含半胱胺组合物可优选形成为颗粒，其中的半胱胺或其盐受到所述包合物主分子组合物的保护而免受其周围环境的影响。每个所述含半胱胺组合物颗粒可具有0.28-0.90mm尺寸的直径。该尺寸范围内的所述颗粒能够更容易被动物吞服。所述含半胱胺组合物可优选由肠溶性包衣材料包封。
所述含半胱胺组合物可用于制造动物饲料添加剂。所述含半胱胺组合物还可用于制造动物饲料。具体地，所述含半胱胺组合物可适用于动物口服。不过，用于提高动物免疫力的半胱胺可通过其它手段如通过直接注射来施用于动物。
本发明基于以下论证，即当施用于动物如牛时，半胱胺或含半胱胺组合物具有调节免疫力尤其是提高其免疫力的功效。在此发现之前，不存在半胱胺或其变体或衍生物会具有这种功效的提示或充分的暗示。本发明还提供用于提高动物免疫力的饲料和饲料添加剂以及提高动物免疫力的方法。
具体实施例方式
在中国专利公开No.CN1358499和国际专利公开No.WO02/48110中描述了半胱胺的一种作用，其内容在此处引入。然而，先前未知的半胱胺的作用是其对提高动物免疫力的作用。半胱胺或含半胱胺组合物对动物免疫力的作用阐述如下。具有生理活性的半胱胺被认为起生长刺激剂的作用。天然半胱胺是泛酸辅酶模式的辅酶A(也称为CoA-SH或CoA)的一部分。在新陈代谢过程中，辅酶A充当二氢磺酰基或氢磺酰基变体的载体，其链接辅酶A的氢磺酰基。
对其它动物如猪、家禽、禽鸟、山羊、兔和鱼进行的实验已表明半胱胺能够减少动物体内的生长激素抑制素(SS)。这增加动物血液中生长激素的水平，同时提高包括胰岛素样生长因子I(IGF-I)、胰岛素、三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(trthyroxine，T4)和β-内啡肽(β-END)的各种其它生长刺激因子的水平。
至于本发明，表明半胱胺可以通过增加白介素-2(IL-2)和/或白介素-6(IL-6)的水平来提高免疫力。
IL-2属于称作细胞因子的一类可溶性的调节蛋白。IL-2是由T(H)淋巴细胞和其它细胞受抗原、有丝分裂原和其它细胞因子活化后分泌的133-氨基酸糖蛋白。IL-2刺激T淋巴细胞的增殖和细胞毒性，增强NK细胞、B-淋巴细胞、巨噬细胞和单核细胞的微生物杀伤活性和细胞毒性(Sule NS，Nerurkar RP，Kamath S；2001；Interleukin as a therapeutic agent；J Assoc Physicians India.49897-900)。表明IL-2在免疫系统中起着重要的作用。
研究已表明IL-2导致在HIV疾病的所有阶段的HIV感染患者中限制HIV的传播(Paredes R，Lopez Benaldo de Quiros JC，Femandez-Cruz E，Clotet B，Lane HC；2002；The potential role of interleukin-2 in patients with HIV infection.AIDS Rev4(1)36-40)。IL-2还是一种有前景的免疫治疗药，介导人体内慢性生长癌(RosenbergSA.200；Progress in the development of immunotherapy for the treatment of patients withcancer；J Intern Med 250(6)462-75)、转移性黑细胞癌、急性粒细胞白血病和转移性肾细胞癌(Atkins MB；2002；Interleukin-2Clinical applications；Semin Oncol 29(3 Suppl7)12-7)的消退。
然而，在提交本申请时，自医学文献中出现第一例IL-2阳性临床报告以来已有约15年，自欧洲批准中等剂量连续输注IL-2以来已有10年，自美国批准通用高剂量IL-2丸剂也已有5年，现在IL-2已被当作一种标准疗法，单独或结合化学疗法或生物疗法用于疾病治疗(Dillman RO.1999.What to do with IL-2？Cancer BiotherRadiopharm 14(6)423-34)。在IL-2被广泛接受用于提高动物免疫力之前经历了相当长的时间。
大量报导已表明重组(rb)IL-2对重要乳腺免疫细胞功能的免疫调节作用。体外或体内研究表明rbIL-2显著增强单核细胞的增殖(Torre，PM.Konur PK.and OliverSP；1992；Proliferative response of mammary gland mononuclear cells to recombinatantbovine interleukin-2；Vet；Immunol.Immunopathol.32351)。研究已表明分离自乳腺组织的淋巴细胞群在与经IL-2体外培养后增加了细胞毒性和杀菌活性(Shafer WeaverKA.and Sordillo LM；1996；Enhancing bactericidal activity of bovine lymphoid cellsduring the peripartument period；J.Dairy Sci.791347)(Sordillo LM.Campos M.andBabiuk LA；1991；Antibacterial activity of bovine mammary gland lymphocytes followingtreatment with interluekine-2；J.Dairy Sci.743370)。
至于IL-6，IL-6作用于免疫系统的大多数主要效应细胞，包括B-淋巴细胞、辅助T-淋巴细胞、细胞毒性T-淋巴细胞和杀伤细胞。在体外培养的B-淋巴细胞中，IL-6作为后期分化因子在B-细胞转化为分泌免疫球蛋白的浆细胞的过程中是必需的。此外，已表明IL-6在体内增加二级、而非初级的抗体应答。这些和其它数据表明IL-6在抗原特异性免疫应答的进程中起着主要作用。
许多研究表明IL-6可以影响外周和胸腺T-细胞的增殖。此外，IL-6可以刺激细胞毒性T-细胞从胸腺前体的分化。已表明IL-6增加自然杀伤细胞的活性。
近期对造血过程中细胞因子功能的研究已经表明IL-6与白介素-3(IL-3)协同增强干细胞的分化。
在体内，IL-6在炎症中的作用是启动生成急性期蛋白质的肝应答，所述的急性期蛋白如胶原酶、基质溶素和72-kDa明胶酶，这些蛋白质催化降解结缔组织基质。IL-6还可能通过调节组织降解活性的平衡在局部组织部位的炎症中发挥作用。(Richards CD，Scamurra RW，and Murtaugh MP.Interleukin-6.p155-157.InCytokinesin animal health and disease.1995.Edited by Michael J.Myers and Michael P.Murtaugh.Marcel Deckker，Inc.New York，Basel，Hong Kong)两种效应物机制介导免疫应答。称作抗体的特异分子介导某些免疫应答。抗体的合成发生在称作B-淋巴细胞或B-细胞的淋巴细胞亚群中。抗体介导的免疫称作体液免疫。其它免疫应答由细胞介导。血液中所有类型的淋巴细胞均参与细胞介导的免疫。然而，应答的特异性取决于称为T-淋巴细胞或T-细胞的淋巴细胞亚群。成熟的T-细胞包括辅助T-细胞、细胞毒性抑制T-细胞和记忆T-细胞。需要辅助T-细胞通过识别外来抗原并释放能促进其它淋巴细胞(B-细胞和T-细胞)对该抗原应答的因子来启动免疫应答。细胞毒性T-细胞在接触靶细胞时，给予“致命一击”以破坏靶细胞，如肿瘤或外源细胞。
某些天然化合物具有引起淋巴细胞分裂的能力。这些化合物中最重要的是称为凝集素的一类蛋白质，其通常分离自植物。凝集素的实例包括可得自红芸豆(菜豆)的植物血凝素(PHA)和可得自刀豆(canavalis ensiformis)的伴刀豆球蛋白A(ConA)。这些凝集素能够特异性结合淋巴细胞膜上的糖以刺激核苷酸掺入、磷脂合成、DNA合成和细胞分裂。PHA刺激原代T-细胞分裂。这些有丝分裂圆可用来帮助T-细胞分化，以及通过测量所引起的应答来证明T-细胞系统应答非免疫刺激的能力(Sule NS，Nerurkar RP，Kamath S.2001.Interleukin-2 as a therapeutic agent.J AssocPhysicians India.49P897-900)。
本发明教导半胱胺用于提高动物免疫力的用途。据信，半胱胺降低生长激素抑制素的水平并提高生长激素的水平，这导致促分裂素诱导的淋巴细胞增殖增加。具体而言，本发明采用含半胱胺组合物，即包封在微胶囊中的半胱胺化合物。以下实验试图证明半胱胺或含半胱胺组合物对动物的免疫系统和免疫力的影响。所述实验还试图证明半胱胺或含半胱胺组合物对动物体内血清IL-2浓度和血浆IL-6浓度的影响。
所述适用于本发明的含半胱胺组合物包含两种主要成份，即1-95重量％的半胱胺(或其盐，例如半胱胺盐酸盐，或半胱胺的其它药学上可接受的酸加成盐)和1-80重量％的载体，如包合物主分子。半胱胺的化学式为HSCH2CH2NH2。下文所提到的术语“半胱胺”指半胱胺和/或其盐类化合物。半胱胺及其盐在化学文献中是公知的。
半胱胺盐的通用化学式为C2H7NS·X，其中X可以是HCl、H3PO4、酒石酸氢盐、水杨酸盐等。所用半胱胺优选达到药学上可接受的标准，并且其中碳、氢、氮和硫的含量基本上分别为31.14重量％、9.15重量％、18.16重量％和41.56重量％。虽然含半胱胺组合物中半胱胺的可用含量为1-95重量％，但是可使用优选1-75重量％、更优选1-40重量％的半胱胺。半胱胺是含半胱胺组合物的主要活性成分之一。然而，已经确认如果含半胱胺组合物中半胱胺的含量超过95重量％，则该组合物与基础饲料的混合会相当困难，并且该组合物提高动物免疫力的效果将受到妨碍。
所述包合物主分子可主要包含选自甲基β-环糊精(M-β-CD)、羟丙基β-环糊精(HP-β-CD)、羟乙基β-环糊精(HE-β-CD)、聚环糊精、乙基β-环糊精(E-β-CD)和支化环糊精的环糊精和/或其衍生物。环糊精的通用化学式为(C6O5H9)n·(C6O5H9)2并且其结构式如下。
其中α-CD n＝4；β-CD n＝5；γ-CD n＝6。(环糊精是α-D-吡喃型葡萄糖的环状低聚体)。
值得注意的是，优选使用β-CD形式的环糊精，因为其分子内径为约6-8，使其特别适合选择用作制备含半胱胺组合物包括使用包合方法的包合物主分子。下文所提到的术语“环糊精”指环糊精和/或其衍生物。可以使用具有稳定并保护半胱胺免受降解的性质的任何环糊精衍生物。例如，可以使用以上提及的任意一种环糊精或其衍生物。
虽然含半胱胺组合物中包合物主分子的可用含量为1-80重量％，但是也可使用优选可用范围1-60重量％和更优选可用范围10-40重量％的包合物主分子。在制备含半胱胺组合物时，所述包合物主分子的实际用量将取决于半胱胺的实际用量。
所述含半胱胺组合物还可以包含1-90重量％的填料，但是也可以在该组合物中使用优选可用范围1-60重量、更优选可用范围1-40重量％的填料。实际含量将取决于半胱胺和包合物主分子的实际用量。所述填料可选自粉末状的纤维素、淀粉和硫酸钙(如CaSO4·2H2O)。应该注意的是，如果在含半胱胺组合物中填料含量超过90重量％，则主要活性成分的含量会因此减少，并且所述含半胱胺组合物在提高施用该组合物的动物的免疫力方面的效果下降。
含半胱胺组合物还可以包含5-50重量％的崩解剂和粘结剂，但是也可使用10-40重量％的优选可用范围和15-35重量％的更优选可用范围。实际含量将取决于半胱胺、包合物主分子和其它成分的实际用量。粘结剂和崩解剂可选自羟丙基淀粉、微生物藻酸盐、微晶纤维素和淀粉。已确认如果该组合物中崩解剂和粘结剂的含量低于5重量％，则所制得的该组合物颗粒将失去所需硬度。
此外，该组合物的制造将变得非常困难。然而，如果崩解剂和粘结剂的含量大于50重量％，则所得组合物将具有过大的硬度，在粘结剂的含量占据崩解剂和粘结剂混合物的大部分时尤其如此。这将导致该组合物难以被动物的肠所吸收。
该含半胱胺组合物还可以包含0.05-0.3重量％的可为香精的调味剂和气味剂。
该含半胱胺组合物还可以包含1-20重量％的包衣材料，但优选可用范围是1-15重量％，更优选可用范围是2-10重量％。实际含量将取决于半胱胺、包合物主分子和其它成分的实际用量。该包衣材料优选为肠溶性的，可溶解于碱性环境如肠内环境。该包衣材料可由选自邻苯二甲酸醋酸纤维素、邻苯二甲酸醋酸淀粉、邻苯二甲酸甲基纤维素、邻苯二甲酸的葡萄糖或果糖衍生物、丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物、聚甲基乙烯基醚、马来酸酐共聚物的部分酯化物、虫胶和甲明胶的物质制得。已经确认如果包衣材料含量低于1重量％，则组合物颗粒不能完全被作为保护层的包衣材料所包覆。因而该含半胱胺组合物可在经肠管吸收至动物血流中之前降解。另一方面，如果包衣材料含量超过15重量％，则组合物中的活性成分可能不能从该组合物中有效释放。因而，将不能实现预期的免疫调节。
用于本发明的含半胱胺组合物为小颗粒形式，每一个小颗粒均具有基本上为0.28-0.90mm的优选直径。这些颗粒使用微胶囊法制备。该方法包括使用具有包合性质的大分子物质。该大分子物质可以是上述包合物主分子(其可主要包含环糊精)。该大分子物质作为分子胶囊以吞没半胱胺分子，由此保护组合物中的半胱胺并使其与周围的光、热、空气和水分隔离。从而保持半胱胺的稳定性。用于微胶囊法的包合物主分子优选包含具有6-12个葡萄糖分子的环状多糖化合物，通过在杆菌存在下使环糊精糖苷转移酶和淀粉反应而生成。
各种急性、亚急性和慢性毒性测试研究已经表明该大分子物质是无毒的。在微胶囊工艺之后，每个颗粒可包覆有至少一层并优选多层上述包衣材料。以下提供用于本发明的含半胱胺组合物的制备方法的更详细描述。
在连接聚四氟乙烯且配备聚四氟乙烯包覆搅拌器的夹套反应器中，在主要是氮气的气氛中加入4080g的75重量％的半胱胺盐酸盐乙醇溶液。所用半胱胺的纯度、熔点和灼烧残余物分别优选为98％或以上、66-70℃和0.05％或以下。随后同样在氮气保护下将1200g β-环糊精加入反应器中。(该β-环糊精的质量符合食品添加剂的要求。具体而言，干基纯度大于98％；干燥失重小于10.0％；灼烧残余物少于0.2％；重金属含量低于10ppm；砷含量低于2ppm。)随后将该混合物于40℃加热3小时。随后停止加热并继续搅拌2小时，之后在将由此所得产物在40-50℃温度下真空干燥之后，将其研磨并通过筛网(例如40目)过滤器筛分。可接触组合物成分的所述设备的所有部件应优选由不锈钢制造。
在一箱式混合器中，在干燥环境的保护下加入经过上述包合工艺的4200g(以干基计)半胱胺、2600g填料、1200g崩解剂和1700g粘结剂。随后将这些成分充分混合，并且可加入适量的无水乙醇并随后与之混合。所得混合物表现为具有中等硬度的软质材料，从而其可通过手掌轻握成型为球状。随后使该球形所得混合物通过轻微碰触而破碎。在氮气保护下将该混合物经造粒机造粒之后，立刻将由此所得小颗粒引入流化床干燥器，并且随后在40-50℃温度下于基本上为真空的环境中干燥。
之后通过配方如下的方法制备肠溶性包衣材料邻苯二甲酸醋酸纤维素8.0g、聚对苯二甲酸乙二醇酯2.4ml、乙酸乙酯33.0ml和乙酸异丙酯33.6ml。上述所得生成物颗粒在氮气保护下均匀包覆至少一层但优选多层上述肠溶性包衣材料。该肠溶性包衣材料仅溶于碱性环境中。这可以防止半胱胺在仍处于动物胃中时，过早地从组合物中逸出或以其它方式降解。半胱胺可不利地刺激动物胃的胃粘膜。然而，值得注意的是，半胱胺具有较小的副作用。
随后在真空干燥器中于40-50℃温度下彻底干燥含半胱胺组合物的所得颗粒。之后，除去所有溶剂。其后，将所得颗粒冷却至室温，并且利用悬臂双螺旋混合器使微胶囊与适量的调味剂和气味剂混合。该含半胱胺组合物是内部具有半胱胺盐酸盐和环糊精、外部包覆有肠溶性包衣材料的微胶囊。
所制得的组合物将表现为具有平滑表面、良好流动性和易于与各种动物饲料混合的小颗粒(或微粒)形状。该组合物的每个颗粒均具有优选0.28-0.90mm的直径。该组合物也具有优异的稳定性。已经发现，该组合物在用密封塑料袋包装并在凉爽、黑暗和干燥场所储存一年之后，其性质保持不变。因此，其符合饲料添加剂的要求。
具有上述具体构造的组合物具有优于半胱胺本身的许多功能优点。第一，该组合物生产出来之后，包含在组合物中的半胱胺的活性保持不变。这在将组合物用作饲料添加剂并在使用前储存较长时间的情况下是重要的。第二，该组合物不会对服用其的动物产生任何可觉察的胃部副反应。第三，不仅在储存期间而且更重要的是直至到达动物肠道时，该组合物的活性都保持不变。第四，该组合物可以容易地大规模地低成本地施用于饲养动物，这是因为该组合物可以方便地与任意基础饲料混合。完全不需要分离程序或注射。
已经进行了各种实验以证明施用具有半胱胺或含半胱胺组合物的饲料提高动物的免疫力，其中的两个实验详述如下。
实验实验1背景信息本实验使用100头荷尔斯坦因种奶牛(Holstein cow)。所述奶牛的平均重量为约600kg。所述奶牛以上述含半胱胺组合物预处理2天。实际实验持续13周。
材料制成微型药丸形式的含半胱胺组合物包含约30重量％的半胱胺以及包括用作稳定剂的环糊精的其它成分。该组合物中环糊精含量为10重量％。该组合物由Walcom Bio-Chemicals Industry Limited制备。
程序所述奶牛分为测试组和对照组。测试组通过它们的玉米粉膳食施用预定量的含半胱胺组合物，对照组不施用含半胱胺组合物。所述奶牛每天三次于07:30、14:30和21:30喂食。
十五周治疗期结束时通过尾部静脉穿刺收集所述奶牛的血液样本。将2ml各血液样本以1500rpm离心15分钟。收集上层清液并储存于-20℃用于IL-2分析。利用IL-2RIA试剂盒(由中国军队医院放免技术研究所生产)测定IL-2浓度。还对所述奶牛血液样本测定淋巴细胞数量。同样测定IL-6浓度。
将测试组和对照组奶牛的数据进行分析并表示为平均±标准误差。所述两组奶牛的结果通过T-检验进行比较。
结果和讨论施用30g/天的含半胱胺组合物的测试组奶牛的IL-2血清浓度比对照组奶牛高约29％。以下表1总结了所述两组奶牛的IL-2、IL-6和白细胞(leukocyte)的水平。
表1
IL-2浓度增加29％具有显著的统计学意义(P＜0.01)。应该注意的是，同样测定了外周血白细胞的数量，但发现在测试组和对照组奶牛之间并无明显差异。这表明所检测到的IL-2高浓度是由含半胱胺组合物而非其它因素所导致的。
该结果还显示测试组奶牛具有高出22.8％的血浆IL-6浓度。
实验结果表明半胱胺通过增加IL-2和IL-6水平来调节和强化动物的免疫系统。
实验2背景信息本实验使用64头荷尔斯坦因种奶牛(Holstein cow)。所述奶牛被随机分成测试组和对照组，每组32头奶牛。
材料本实验使用实验1中所用的相同的含半胱胺组合物。
程序从产犊后约20周开始，测试组的每头奶牛初次施用用量为20g/天的含半胱胺组合物。随后该含半胱胺组合物的剂量逐步增加直至60g/天，接着在接近实验末期时降低至30g/天。用含半胱胺组合物的处理持续140天。所述奶牛通过日常饮食施用含半胱胺组合物。所述饮食包含玉米粉。对照组奶牛不施用任何含半胱胺组合物。所述奶牛每天喂食三次。
140天实验周期结束时，通过尾部静脉得到所述两组奶牛的血液样本。为了抗凝，将所述血液样本与肝素混合。将所述血液样本在培养基(RMPI 1640)中培养并从中分离出白细胞。
从测试组奶牛样本中分离出的白细胞分成两批。一批加入植物血凝素(PHA)，另一批不加入任何PHA。随后，在这两批血液样本中加入3H-TdR并孵育72小时。
之后通过闪烁计数仪测量所述样本中的3H-TdR掺入水平。3H-TdR掺入水平以cpm表示。
随后，基于以下公式计算刺激指数(SI) 同样处理来自对照组奶牛的血液样本并计算其SI。
结果与讨论以下表2总结了所述两组奶牛的平均SI值。
表2 *p＜0.05如表2所示，测试组奶牛的SI指数为29.73±3.53，这比对照组奶牛高36％。更高的SI指数意味着在测试组奶牛血液中存在更高数量的淋巴细胞，这表明免疫力普遍提高。
由上述两个实验，表明半胱胺或含半胱胺组合物具有提高动物免疫力的效果。具体而言，半胱胺或含半胱胺组合物具有增加白介素-2的水平以及刺激T细胞生成的效果。
进一步的研究表明半胱胺对于提高脊椎动物的免疫力尤其有效。
可以想像，随着免疫力提高，饲养动物的饲养场将更为多产。例如，饲养肉牛的饲养场将会由于其提高的免疫力导致动物的低死亡率而具有更高的产量。还可想像，根据本发明的半胱胺或含半胱胺组合物也可以用于人类以提高患者的免疫力。例如，半胱胺可与治疗HIV感染患者的传统AIDS药物组合使用。
上述各参考文献的内容，包括本文所引用的和以下所列的参考文献的内容，在此完整并入本文。应该注意的是，多种变化、改进和其它实施方案都是可能的，因此，所有这些变化、改进和实施方案都认为处于本发明的范围之内。
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1.一种半胱胺、半胱胺盐或含半胱胺或其盐的组合物在提高动物免疫力方面的用途。
2.根据权利要求1的用途，其中所述提高免疫力包括增加所述动物体内白介素-2(IL-2)的水平。
3.根据权利要求1或2的用途，其中所述提高免疫力包括增加所述动物体内白介素-6(IL-6)的水平。
4.根据权利要求1、2或3的用途，其中所述提高免疫力包括刺激所述动物体内淋巴细胞的产生。
5.根据任一项前述权利要求的用途，其中所述动物是脊椎动物。
6.根据任一项前述权利要求的用途，其中所述组合物包含1-95重量％的半胱胺或其盐、和包含选自环糊精及其衍生物的稳定剂的包合物主分子组合物。
7.根据权利要求6的用途，其中所述含半胱胺组合物包含1-60重量％的所述包合物主分子组合物。
8.根据任一项前述权利要求的用途，其中所述含半胱胺组合物包含填料、崩解剂、粘结剂和调味剂与气味剂中的至少一种。
9.根据任一项前述权利要求的用途，其中所述含半胱胺组合物包含包衣材料。
10.根据权利要求9的用途，其中所述含半胱胺组合物包含1-20重量％的所述包衣材料。
11.根据权利要求9或10的用途，其中所述包衣材料是肠溶性的。
12.根据权利要求9-11任一项的用途，其中所述包衣材料选自邻苯二甲酸醋酸纤维素、邻苯二甲酸醋酸淀粉、邻苯二甲酸甲基纤维素、邻苯二甲酸的葡萄糖或果糖衍生物、丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物、聚甲基乙烯基醚、马来酸酐共聚物的部分酯化物和甲明胶。
13.根据权利要求8的用途，其中所述含半胱胺组合物包含1-90重量％的所述填料。
14.根据权利要求8或13的用途，其中所述填料选自粉末状的纤维素、淀粉和硫酸钙。
15.根据权利要求8、13或14的用途，其中所述含半胱胺组合物包含5-50重量％的所述粘结剂和所述崩解剂。
16.根据权利要求8和13-15的任一项的用途，其中所述粘结剂和所述崩解剂选自羟丙基淀粉、微生物藻酸盐、微晶纤维素和淀粉。
17.根据权利要求8和13-16的任一项的用途，其中所述含半胱胺组合物包含0.05-0.3重量％的调味剂和气味剂，用于增强所述组合物味道。
18.根据权利要求9-12的任一项的用途，其中所述含半胱胺组合物成型为颗粒，每个所述颗粒包含至少一层所述包衣材料。
19.根据权利要求6或7的用途，其中所述含半胱胺组合物成型为颗粒，其中的半胱胺或其盐受到所述包合物主分子组合物的保护而免受其周围环境的影响。
20.根据权利要求18或19的用途，其中所述含半胱胺组合物的每个所述颗粒具有0.28-0.90mm尺寸的直径。
21.根据权利要求11的用途，其中所述含半胱胺组合物被所述肠溶性包衣材料包封。
22.根据任一项前述权利要求的用途，用于制造动物饲料添加剂。
23.根据任一项前述权利要求的用途，用于制造动物饲料。
24.一种用于提高动物免疫力的组合物，包含半胱胺或其盐。
25.根据权利要求24的组合物，其中所述所述提高免疫力包括提高所述动物体内白介素-2(IL-2)的水平。
26.根据权利要求24或25的组合物，其中所述提高免疫力包括提高所述动物体内白介素-6(IL-6)的水平。
27.根据权利要求24、25或26的组合物，其中所述提高免疫力包括刺激所述动物体内淋巴细胞的产生。
28.根据权利要求24-27的任一项的组合物，其中所述动物是脊椎动物。
29.根据权利要求24-28的任一项的组合物，包含1-95重量％的半胱胺或其盐、和包含选自环糊精及其衍生物的稳定剂的包合物主分子组合物。
30.根据权利要求29的组合物，其中所述含半胱胺组合物包含1-60重量％的所述包合物主分子组合物。
31.根据权利要求24-30的任一项的组合物，其中所述含半胱胺组合物包含填料、崩解剂、粘结剂和调味剂与气味剂中的至少一种。
32.根据权利要求24-31的任一项的组合物，其中所述含半胱胺组合物包含包衣材料。
33.根据权利要求32的组合物，其中所述含半胱胺组合物包含1-20重量％的所述包衣材料。
34.根据权利要求32或33的组合物，其中所述包衣材料是肠溶性的。
35.根据权利要求32-34的任一项的组合物，其中所述包衣材料选自邻苯二甲酸醋酸纤维素、邻苯二甲酸醋酸淀粉、邻苯二甲酸甲基纤维素、邻苯二甲酸的葡萄糖或果糖衍生物、丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物、聚甲基乙烯基醚、马来酸酐共聚物的部分酯化物和甲明胶。
36.根据权利要求31的组合物，其中所述含半胱胺组合物包含1-90重量％的所述填料。
37.根据权利要求31或36的组合物，其中所述填料选自粉末状的纤维素、淀粉和硫酸钙。
38.根据权利要求31的组合物，其中所述含半胱胺组合物包含5-50重量％的所述粘结剂和所述崩解剂。
39.根据权利要求31或38的组合物，其中所述粘结剂和所述崩解剂选自羟丙基淀粉、微生物藻酸盐、微晶纤维素和淀粉。
40.根据权利要求31的组合物，其中所述含半胱胺组合物包含0.05-0.3重量％的所述调味剂和气味剂，用于增强所述组合物味道。
41.根据权利要求32-40的任一项的组合物，其中所述含半胱胺组合物成型为颗粒，每个所述颗粒包含至少一层所述包衣材料。
42.根据权利要求29或30的组合物，其中所述含半胱胺组合物成型为颗粒，其中的半胱胺或其盐受到所述包合物主分子组合物的保护而免受其周围环境的影响。
43.根据权利要求41或42的组合物，其中所述含半胱胺组合物的每个所述颗粒具有0.28-0.90mm尺寸的直径。
44.根据权利要求34的组合物，其中所述含半胱胺组合物被所述肠溶性包衣材料包封。
45.一种用于提高动物免疫力的动物饲料添加剂，包含半胱胺、半胱胺盐或权利要求24-44的任一项中所限定的含半胱胺组合物。
46.一种用于提高动物免疫力的动物饲料，包含半胱胺、半胱胺盐或权利要求24-44的任一项中所限定的含半胱胺组合物。
47.一种用于提高动物免疫力的方法，包括在动物体内施用半胱胺、半胱胺盐或权利要求24-44的任一项中所限定的组合物。
48.半胱胺、半胱胺盐或含半胱胺或其盐的组合物的用途，基本上如上文所述。
49.一种用于提高动物免疫力的组合物，基本上如上文所述。
50.一种用于提高动物免疫力的动物饲料添加剂，基本上如上文所述。
51.一种用于提高动物免疫力的动物饲料，基本上如上文所述。
52.一种用于提高动物免疫力的方法，基本上如上文所述。
全文摘要
提供半胱胺、半胱胺盐、或含有半胱胺或其盐的组合物在提高动物免疫力方面的一种新用途。
文档编号A61P37/04GK1750816SQ200480004630
公开日2006年3月22日 申请日期2004年2月17日 优先权日2003年2月19日
发明者池豪, 闻芹堂 申请人:欧米加生物制药(I.P.2)有限公司