专利名称：作为nep抑制剂的3－(1－[3－(1,3－苯并噻唑－6－基)丙基氨基甲酰基]环烷基)丙酸衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及中性内肽酶(NEP)的抑制剂及其用途、其制备方法、其制备中所用的中间体和含有所述抑制剂的组合物。这些抑制剂在各种治疗领域中具有应用，包括治疗男性和女性性功能障碍，特别是女性性功能障碍(FSD)，尤其是其中FSD为女性性唤起障碍(FSAD)。
NEP抑制剂公开在WO 91/07386、WO 91/10644、WO 02/02513、WO 02/079143和EP 1,258,474中。
NEP抑制剂在治疗FSD中的应用公开在EP 1,097,719-A1中。NEP抑制剂在治疗男性性功能障碍(MSD)中的应用公开在WO 02/03995中。
本发明提供了一类有效的NEP抑制剂，它们具有对NEP的选择性超过可溶性分泌型内肽酶(SEP)的优点。本发明的化合物对NEP的选择性也超过了ACE。除选择性外，本发明的化合物还具有令人意外的良好药代动力学特性，特别是良好的口服生物利用度和对体内功效而言合适的作用期限。
本发明的第一个方面提供了一般通式(I)的化合物或其药物上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物 其中R1为H或CH3；
R2为C1-C2烷基；且n为1或2。
本发明的一个优选方面提供了通式(I)的化合物，其中n为1。
在另一个优选实施方案中，R1为甲基。
在又一个优选实施方案中，R2为甲基。
本发明特别优选的实施方案为通式(I)的化合物，其中R1为甲基，R2为甲基且n为1；R1为氢，R2为乙基且n为1；R1为甲基，R2为乙基且n为1；以及R1为氢，R2为乙基且n为2。
本发明的化合物为(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例1)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例2)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例4)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸(实施例3)；3-(1-([3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸(实施例5)；3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例6)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸；和(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸。
本发明优选的化合物为(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例1)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基}丙酸(实施例2)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例4)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基}丙酸(实施例3)；3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基}丙酸(实施例5)；和3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例6)。
最优选的化合物为(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例1)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例2)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例4)；和3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸(实施例3)。
通式(I)化合物的药物上可接受的盐包括其酸加成的盐和碱式盐(包括二盐)。
合适的酸加成的盐由形成无毒性盐的酸形成。其实例包括乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、羟苯酰苯酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、磷酸氢盐、羟乙基磺酸盐、D-和L-乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、棕榈酸盐、磷酸盐、糖二酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、D-和L-酒石酸盐以及甲苯磺酸盐。
合适的碱式盐由形成无毒性盐的碱形成。其实例包括铝、铵、精氨酸、苄星青霉素、钙、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、甘氨酸、赖氨酸、镁、葡甲胺、乙醇胺、钾、钠、氨丁三醇和锌盐。
有关合适的盐的综述参见Stahl和Wermuth《药用盐手册特性、选择和应用》(Handbook of Pharmaceutical SaltsProperties，Selection，and Use)，Wiley-VCH，Weinheim，Germany(2002)。
如果合适，通过将通式(I)的化合物与所需酸或碱的溶液彼此混合易于制备通式(I)化合物的药物上可接受的盐。盐可以从溶液中沉淀且通过过滤收集或可以通过蒸发溶剂回收。
本发明中的药物上可接受的溶剂化物包括水合物和溶剂化物，其中结晶的溶剂可以被同位素取代，例如D2O、丙酮-d6、DMSO-d6。
本发明范围内还包括笼形物，即药物-主体笼形配合物，其中与上述溶剂化物相反，所述的药物和主体以非化学计量存在。有关这类配合物的综述参见Haleblian的《药物科学杂志》(J Pharm Sci)，64(8)，1269-1288(1975年8月)。
下文提及通式(I)的化合物时均包括其盐以及通式(I)化合物的溶剂化物和笼形物以及它们的盐。
本发明包括如上文定义的通式(I)化合物的所有多晶型物。
本发明范围内还包括通式(I)化合物的所谓″前体药物″。因此，自身没有或几乎没有药理活性的通式(I)化合物的某些衍生物在给药入体内或身体上而代谢时将产生具有所需活性的通式(I)的化合物。这类衍生物称作″前体药物″。
例如，可以通过下列步骤生产本发明的前体药物用本领域技术人员已知的某些部分取代通式(I)化合物上存在的合适的官能团，作为例如H Bundgaard在《前体药物设计》(″Design of Prodrugs″)(Elsevier，1985)中所述的″前体部分″。
最后，某些通式(I)的化合物自身可以作为通式(I)的其它化合物的前体药物起作用。
含有一个或多个不对称碳原子的通式(I)化合物可以作为两种或多种旋光异构体存在。如果通式(I)的化合物含有链烯基或亚链烯基，那么有可能存在顺式/反式(或Z/E)几何异构体，并且，如果该化合物含有例如酮基或肟基，那么可以出现互变异构现象(′互变异构′)。这样，单一化合物可以表现出一种以上类型的异构现象。
本发明范围内包括通式(I)化合物的所有旋光异构体、几何异构体和互变形式，包括表现出一种以上类型的异构现象的化合物及其一种或多种的混合物。
可以通过本领域技术人员众所周知的常规技术分离顺式/反式异构体，例如分级结晶和色谱法。
用于制备/分离各立体异构体的常规技术包括转化合适的旋光纯前体、使用例如手性HPLC拆分外消旋物(或者盐或衍生物的外消旋物)，或者对通过使所述外消旋物与合适的旋光酸或碱(例如酒石酸反应)而形成的非对映异构体盐进行分级结晶。
本发明还包括通式(I)化合物的所有药物上可接受的同位素变化形式。将同位素变化形式定义为至少一个原子被具有相同原子数、而原子量不同于通常在自然界中发现的原子量的原子取代的化合物。
适合于包含在本发明化合物中的同位素实例包括氢的同位素，诸如2H和3H；碳的同位素，诸如13C和14C；氮的同位素，诸如15N；氧的同位素，诸如17O和18O，磷的同位素，诸如32P；硫的同位素，诸如35S；氟的同位素，诸如18F；和氯的同位素，诸如36CI。
用同位素、诸如氘(即2H)取代本发明的化合物可以提供一定的因较大的代谢稳定性(例如体内半衰期增加或剂量需求降低)产生的治疗优势，由此在某些情况中优选。
通式(I)化合物的某些同位素变化形式，例如那些引入了放射性同位素的变化形式，可用于药物和/或底物组织分布研究。放射性同位素氚(即3H)和碳-14(即14C)因其特别易于引入和便于检测而特别可用于该目的。
一般可以通过本领域技术人员公知的常规技术或通过与所附实施例和制备中所述相似的方法，使用合适试剂的适宜同位素变化形式制备通式(I)化合物的同位素变化形式。
可以将通式(I)的化合物冻干、喷雾干燥或蒸发干燥而得到结晶固体或无定形物质的固体栓块、粉末或薄膜。可以将微波或射频干燥用于该目的。
可以通过如下文方案(I)中所述的方法制备通式(I)的化合物 可以在工艺步骤(a)的酰胺键形成的条件下使通式(II)与(III)的化合物反应而制备通式(IV)的化合物-这类反应可以在本领域技术人员众所周知的多种条件下进行。
一般来说，可以通过用诸如1，1′-羰基二咪唑(CDI)、氟-N，N，N′，N′-四甲基甲脒鎓(formamidinium)六氟磷酸盐(TFFH)这类试剂或者诸如氮杂苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷并)鏻六氟磷酸盐(PyAOP)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAt)这类试剂的组合处理活化羧酸。另一方面，可以通过将肽偶联试剂加入到酸与胺的混合物中进行该反应，所述的肽偶联试剂例如是O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-铀六氟磷酸盐(HATU)或O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-铀六氟磷酸盐(HBTU)或N，N′-二环己基碳化二亚胺(DCC)、1，3-二异丙基碳化二亚胺(DIC)。该反应在合适的溶剂中在0℃-溶剂的沸点之间进行，所述的溶剂诸如CH2Cl2、吡啶、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)或1-甲基-2-吡咯烷酮。
优选使用CDI、三乙胺和乙酸异丙酯作为溶剂进行转化。
然后在工艺步骤(b)的条件下处理工艺步骤(a)的产物。除去保护基PG。合适的基团描述在T.W.Greene和P.G.M.Wuts的《有机合成中的保护基》(″Protective Groups in Organic Synthesis″)，John Wiley和Sons Inc，1991中。
除去保护基所需的条件通常对该保护基而言是特定的；用于除去它们的条件可以在参考文献中找到，诸如Greene T.W.，Wuts，P.G.M.《有机合成中的保护基》(Protective Groups in OrganicSynthesis)，Wiley-Interscience和Kocienski，P.J.《保护基》(Protecting Groups)，Thieme。
优选地，PG为叔丁基，使用合适的溶剂在室温下进行酸催化的脱保护。优选的条件为在二氯甲烷中用三氟乙酸。
在可选的方法中，可以通过包括芳基-烯丙基偶联的工艺步骤(a)由通式(X)和(VI)的化合物制备通式(IV)的化合物。合适的条件为本领域技术人员众所周知。可以通过包括酰胺键形成的工艺步骤(b)由通式(II)的化合物和烯丙基胺制备通式(X)的化合物。这类反应可以在本领域技术人员众所周知的各种条件下进行。
可以按照WO02/079143中所述的方法制备通式(II)和(III)的化合物。
此外，可以如下所述制备通式(III)的化合物
可以通过包括芳基-烯丙基偶联的工艺步骤(c)由通式(V)和(VI)的化合物制备通式(VII)的化合物。合适的条件为本领域技术人员众所周知。特别合适的条件为Suzuki-Miyaura偶联反应中的那些条件[Angew.Chem.Int.Ed.2001，40(24)，4544-4568]，其中使用由适当保护的烯丙基胺衍生物(例如烯丙基亚氨基二碳酸二(叔丁基)酯，《生物有机和药物化学通讯》(Bioorganic & Medicinal ChemistryLetters)，1999，7，1625-1636)和诸如9-BBN这类硼烷衍生物制备的硼氢化中间体。
可以在工艺步骤(b)除去本文所述的保护基PG的条件下由通式(VII)的化合物制备通式(III)的化合物。
另一方面，可以通过包括还原碳-碳和碳-氮多键的工艺步骤(a)由通式(VIII)的化合物制备胺(III)。合适的条件为本领域技术人员众所周知。特别合适的条件包括用Boc2O、NiCl2和NaBH4处理，随后如上所述对所得叔丁基脱保护。可以通过包括芳基-烯丙基偶联的工艺步骤(b)由丙烯腈和通式(VI)的化合物制备通式(VIII)的化合物，其中X为卤素，优选碘。合适的条件为本领域技术人员众所周知。特别合适的条件包括用在DMF中的Pd(OAc)2、P(邻-甲苯基)3和NaOAc处理。
另一方面，可以通过工艺步骤(a)的缩合由氰基乙酸和通式(IX)的化合物制备通式(VIII)的化合物。合适的条件为本领域技术人员众所周知。合适的条件描述在Jerry March的《高级有机化学》(″AdvancedOrganic Chemistry″)第4版，Wiley-Interscience，945页中。通式(IX)的化合物在文献中已知(例如Zhurnal Obshchei Khimii(1964)，34(11)，3801-6)。
所有上述反应和用于上述方法的新原料的制备均是常规的。合适的试剂及其进行反应或制备的条件以及分离所需产物的步骤为本领域技术人员参照文献条件以及下文实施例和制备而众所周知。
本发明的化合物为一类对NEP的选择性超过SEP的NEP抑制剂。
一般来说，对药物而言重要的是尽可能对其所需的靶酶具有选择性；其它活性具有产生副作用的可能性。近来相对鉴定了SEP，其确切的生理作用仍然必须得到完整确定。然而，无论SEP可能起还是不起何种作用，它均是可能的医药化学方案，以确保任何药物具有优于未知生理功能的极为相关的机制靶的选择性。
不受任何理论束缚，逐步明确的是NEP和SEP能够水解许多生物学上同等重要的肽类，诸如脑啡肽(enkaphalin)、内皮素(ET)、big-内皮素(Big ET)、缓激肽、P物质、血管紧张肽1、心房钠尿肽(ANP)和促性腺素释放激素(GnRH)。
如果用抑制NEP和SEP的药物治疗患者，那么可以减少这些肽类中许多的水解(其中大部分不涉及与NEP抑制相关的性功能改善)，这些肽类的水平由此得到增加。可以断定与这些肽类水平升高相关的许多副作用血压在ANP水平增加时降低；脑啡肽水平增加可以导致疼痛感觉改变；内皮素-1是降低Big ET转化成ET的水平的有效血管收缩药；或ET-1水解可以导致血压改变。
因此，如果对患者给予NEP选择性抑制剂，那么这些底物肽类的水平的增加就会减少，因为活性SEP酶仍然存在。与这些肽类水平改变相关的任何副作用由此也会减少。
此外，在其它组织中可以发现可变水平的SEP的mRNA，包括在睾丸、心脏、脑、肾、唾液腺、甲状腺、胎盘、小肠和卵巢中(内部数据和Bonvouloir等)。就小鼠而言，已经在脾和肾上腺中检测到了SEPRNA。不抑制SEP的NEP抑制剂由此很可能具有引起更明确的生理特性的更大潜能的优势。
令人意外的是在鉴定一类对NEP的选择性超过SEP的NEP抑制剂的过程中，已经发现这些化合物具有用于口服给药的有利药代动力学特性。
口服给予的药物应具有良好的生物利用度，即易于通过胃肠(GI)道的能力和具有一定的代谢速率，使得它在从GI道进入全身循环时不被广泛代谢。快速代谢的分子具有较低的生物利用度，因为将有更多的化合物在进入全身循环时因代谢而被除去。一旦药物进入全身循环，则代谢速率在确定药物在体内的停留时间方面也是重要的-药物快速代谢会导致它具有较短的作用持续时间。
因此，对药物分子而言，显然有利的是具有能够易于通过GI道且在体内仅缓慢代谢的特性。
CACO-2试验是用于预测指定分子通过GI道的能力的广泛接受的模型。本发明的分子具有良好的CACO-2流量。
大部分药物分子的代谢一般发生在肝中。因此，人肝微粒体(HLM)的应用是测定指定分子对肝内代谢的敏感性的广泛接受的方法。本发明的化合物对HLM稳定。
预计具有良好的CACO-2流量且对HLM稳定的化合物具有良好的口服生物利用度(通过GI道吸收良好且在通过肝时化合物的浸出最少)，并且在体内有较长的停留时间-足以使药物有效。
另外，本发明的化合物为游离酸形式的结晶，不依赖于盐形成，由此特别易于处理。
本发明的化合物为锌依赖性中性内肽酶EC.3.4.24.11.的抑制剂，推测本发明的化合物可用于治疗下列疾病情况。这种酶参与几种生物活性寡肽类的分解，在疏水性氨基酸残基的氨基侧切割肽键。所代谢的肽类包括心房钠尿肽类(ANP)、铃蟾肽、缓激肽、降钙素基因相关肽、内皮素、脑啡肽类、神经降压肽、P物质和血管活性肠肽。这些肽类中的某些具有有效的血管舒张和神经激素功能、利尿和钠尿活性或介导行为作用。
因此，本发明的化合物通过抑制中性内肽酶EC.3.4.24.11可以加强活性肽类的生物作用。因此，这些化合物特别具有治疗许多疾病的应用，包括高血压、肺动脉高压、周围血管疾病、心力衰竭、心绞痛、肾机能不全、急性肾功能衰竭、周期性水肿、美尼尔症、高醛固酮血症(hyperaldosteroneism)(原发性和继发性)和多钙尿。术语高血压包括所有特征在于超常血压的疾病，诸如原发性高血压、肺动脉高压、继发性高血压、单纯收缩期高血压、与糖尿病相关的高血压、与动脉粥样硬化相关的高血压和肾血管性高血压，并进一步扩展至血压升高为已知危险因素的疾病。因此，术语″治疗高血压″包括治疗或预防因高血压引起的并发症和其它相关并存病，包括充血性心力衰竭；心绞痛；中风；青光眼；肾功能受损，包括肾衰竭；肥胖；和代谢病(包括代谢综合征)。代谢病特别包括糖尿病和葡萄糖耐量降低，包括其并发症，诸如糖尿病性视网膜病和糖尿病性神经病。
此外，由于所述化合物具有加强ANF的作用的能力，所以它们可用于治疗青光眼。抑制中性内肽酶E.C.3.4.24.11的能力的另一个结果是，本发明的化合物可以在其它治疗领域具有活性，包括例如治疗月经紊乱、未足月产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖性疾病(尤其是男性和女性不孕症、多囊性卵巢综合征、着床失败(implantationfailure))。本发明的化合物还可用于治疗哮喘、炎症、白血病、疼痛、癌痛、抑郁症、药物滥用、肝硬化、癫痫、情感障碍、痴呆和老年性意识错乱、肥胖和胃肠道病症(尤其是腹泻和过敏性肠综合征)、创伤愈合(尤其是糖尿病性和静脉曲张性溃疡和褥疮)、脓毒性休克；调节胃酸分泌；治疗血内血管紧张肽原酶过多、囊性纤维化、再狭窄、糖尿病并发症和动脉粥样硬化。
在优选的实施方案中，本发明的化合物可用于治疗男性和女性性功能障碍。本发明的化合物特别有益于治疗FSD(尤其是FSAD)和男性性功能障碍(尤其是男性勃起机能障碍(MED))。
按照本发明，可以将FSD定义为女性有困难或不能在性表达中得到满足。FSD是几种不同女性性功能障碍的总称(Leiblum，S.R.(1998)“女性性功能障碍的定义和分类”(Definition and classificationof female sexualdisorders)-《国际阳痿研究杂志》(Int.J.Impotence Res.)，10，S104-S106；Berman，J.R.，Berman，L.&Goldstein，I.(1999)“女性性功能障碍发病率、病理生理学、评价和治疗选择”(Female sexual dysfunctionIncidence，pathophysiology，evaluations and treatment options.)-《泌尿科学》(Urology)，54，385-391)。女性可能存在缺乏性欲、性唤醒或性欲高潮困难、性交疼痛或这些问题的组合。几种类型的疾病、药物、损伤或心理问题均可以导致FSD。研发中的治疗手段的目的在于治疗具体亚型的FSD，主要是性欲和性唤醒障碍。
通过与正常女性性反应期进行对比可以最好地定义FSD的类别性欲、性唤醒和性欲高潮(Leiblum，S.R.(1998)“女性性功能障碍的定义和分类”(Definition and classification of female sexualdisorders)-《国际阳痿研究杂志》(Int.J.Impotence Res.)，10，S104-S06)。欲望或性欲是性表达方式的推动力。其表现通常包括在与感兴趣的伴侣交际或当接触其它性欲刺激时的性思维。性唤醒是对性刺激的血管反应，其重要组成是生殖器充血，包括阴道润滑增加、阴道伸长和生殖器感觉/敏感性增加。性欲高潮是在性唤醒过程中达到高潮的性压力的释放。
因此，FSD在女性在通常为性欲、性唤醒或性欲高潮中的任意阶段中具有不足或令人不满意的反应时发生。FSD类别包括机能减退的性欲障碍、性唤起障碍、性欲高潮障碍和性交疼痛疾病。尽管本发明的化合物会改善生殖器对性刺激的反应(如在女性性唤起障碍中)，但是在这种情况中还可以改善相关的疼痛、与性交相关的痛苦和不适，由此可治疗其它女性性功能障碍。
如果女性没有或几乎没有性交欲望，并且没有或几乎没有性思维或幻想，那么就存在机能减退的性欲障碍。这种类型的FSD可以因低睾酮水平所致，原因可以是天然绝经或手术绝经。其它原因包括疾病、药物、疲劳、抑郁症和焦虑。
女性性唤起障碍(FSAD)的特征在于生殖器对性刺激的反应不充分。外生殖器不发生正常性唤醒中特征性的充血。阴道壁润滑很差，从而发生性交疼痛。性欲高潮受阻。性唤醒障碍可能因绝经时或分娩后和哺乳期中雌激素减少所致，也可以由带有诸如糖尿病和动脉粥样硬化这类血管因素的疾病所致。其它原因可以是因使用利尿药、抗组胺药、抗抑郁药(例如SSRIs)或抗高血压药所致。
性交疼痛障碍(例如交媾困难和阴道痉挛)的特征在于因插入所致的疼痛，可以因减少润滑的药物、子宫内膜异位、盆腔炎症性疾病、炎性肠疾病或尿道问题所导致。
FSD的患病率难以估计，因为该术语覆盖了数种类型的问题，它们中的某些难以度量，并且还因为在近来才相对关注治疗FSD。许多女性的性问题或者直接与女性衰老过程或者与诸如糖尿病和高血压这类慢性病相关。
因为FSD由在性反应周期的各阶段中表现症状的几种亚类组成，故没有单一的疗法。目前对FSD的治疗主要集中在心理或关系问题。FSD的治疗正在逐步发展，因为更多的临床和基础科学研究正致力于研究这一医学难题。在病理生理学中，女性性不适并非均是心理上的，尤其是对那些可能存在导致女性所有性不适的血管发生机能障碍因素的个体而言(例如FSAD)。目前还没有被批准用于治疗FSD的药物。经验药物疗法包括雌激素给药(局部或作为激素代替疗法)、雄激素或改变情绪的药物，诸如丁螺环酮或曲唑酮。这些治疗方案通常因低功效或不可接受的副作用而不令人满意。
由于在药理学上治疗FSD的研究只是相对比较近期的事，所以疗法组成如下心理咨询；非处方药的性交润滑剂；和研究中的候选物，包括批准用于其它疾病的药物。这些药物由已经证实可有效用于男性勃起机能障碍的激素药，可以是睾酮或雌激素与睾酮的组合，以及更近来的血管药物。尚未证实这些活性剂中的任何一种可极为有效地治疗FSD。
美国精神病协会的诊断和统计指南(DSM)IV中将女性性唤起障碍(FSAD)定义为″持久或复发性地不能获得或维持足够润滑-性冲动的肿胀反应直至活动结束。这种障碍必定导致明显的苦恼或人际之间关系紧张。″性唤起反应由盆腔充血、阴道润滑以及外生殖器的膨大和隆起所组成。这种障碍会导致明显的苦恼或人际关系紧张。
FSAD是影响绝经前、近绝经和绝经后(HRT)女性的高发生率的性功能障碍。它与伴随的疾病有关，诸如抑郁症、心血管疾病、糖尿病和UG病症。
FSAD的原发性后果在于缺乏充血/隆起、缺乏润滑和缺乏令人愉快的生殖器感觉。FSAD的继发性后果在于性欲减少、性交过程中疼痛和难以达到性欲高潮。
近来已经推定至少一定比例的具有FSAD症状的患者存在血管基础(Goldstein等，《国际阳痿研究杂志》(Int.J.Impot.Res.)，10，S84-S90，1998)，有关动物的数据支持了这一观点(Park等，《国际阳痿研究杂志》(Int.J.Impot.Res.)，9，27-37，1997)。
处于功效研究中的、用于治疗FSAD的药物候选物主要为促进对男性外生殖器循环的勃起机能障碍疗法。它们由两类制剂组成，即口服或舌下药物(阿扑吗啡、酚妥拉明、5型磷酸二酯酶(PDE5)抑制剂，例如西地那非)和经注射或经尿道给药到男性以及局部对女性外生殖器给药的前列腺素(PGE1)。
本发明的化合物可以有利地提供恢复正常性唤醒反应的方式-即增加生殖器血流，使阴道、阴蒂和阴唇充血。这使得通过血浆渗出增加阴道润滑、增加阴道顺应性和增加生殖器敏感性。因此，本发明的化合物提供了恢复或增强正常性唤醒反应的方式。
不受理论束缚，我们认为神经肽类，诸如肠道血管活性肽(VIP)是控制女性性唤醒反应、尤其是控制生殖器血流的神经递质候选物。VIP和其它神经肽类被NEP EC3.4.24.11降解/代谢。因此，NEP抑制剂可增强唤醒过程中释放的VIP的内源性血管舒张作用。这可以导致诸如通过强化生殖器血流以及生殖器充血而治疗FSAD。我们已经证实NEP EC 3.4.24.11的选择性抑制剂可以增强骨盆神经刺激和VIP-诱导的阴道和阴蒂血流增加。此外，选择性NEP抑制剂可增强VIP和神经介导的分离的阴道壁的松弛。
因此，本发明是有利的，因为它有助于提供恢复正常性唤醒反应的方式-即增加生殖器血流，使阴道、阴蒂和阴唇充血。这使得通过血浆渗出增加了阴道润滑、增加了阴道顺应性以及增加了生殖器敏感性。因此，本发明提供了恢复或增强正常性唤醒反应的方式。
男性性功能障碍包括男性勃起机能障碍；射精障碍，诸如早泄(PE)；性快感缺失(不能获得性欲高潮)；和性欲障碍，诸如机能减退的性欲障碍(缺乏性趣)。
应理解本文涉及的所有治疗包括治愈、缓解和预防性治疗。
本发明的化合物可应用于下列患有FSD的患者亚群年轻人、老年人、使用或未使用激素代替疗法的绝经前、绝经左右、绝经后女性。
本发明的化合物可应用于患有因如下情况导致的FSD的患者i)血管发生性病因，例如心血管或动脉粥样硬化疾病、高胆固醇血症、吸烟、糖尿病、高血压、放射和会阴创伤、髂腹下阴部血管系统的挫伤。
ii)神经性病因，诸如脊髓损伤或中枢神经系统疾病，包括多发性硬化、糖尿病、帕金森综合征、脑血管意外、周围神经病、创伤或根本的盆腔手术。
iii)激素/内分泌病因，诸如下丘脑/垂体/生殖腺轴机能障碍或卵巢机能障碍；胰腺机能障碍；手术或医学阉割；雄激素缺乏；高循环水平的催乳素，例如高催乳素血症；天然绝经；卵巢功能早衰；甲状腺功能亢进和甲状腺功能减退。
iv)心理性病因，诸如抑郁症、强迫症、焦虑障碍、产后抑郁症/″青紫婴儿(Baby Blue)″、情绪和关系问题、表现焦虑、婚姻不协调、机能障碍性体态、性恐怖症、宗教性压抑或经历外伤。
v)因使用选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRis)和其它抗抑郁药疗法(三环类和强安定剂)、抗高血压疗法、抗交感神经药物、长期口服避孕丸疗法导致的药物诱发的性功能障碍。
患有轻度到中度MED的患者应当可以在用本发明化合物进行的治疗中受益并且患有重度MED的患者也可以有反应。然而，早期研究提示患有轻度、中度和重度MED的患者在与PDE5抑制剂的联合疗法中的反应率更高。轻度、中度和重度MED为本领域技术人员公知的术语，有关指导可以参见《泌尿学杂志》(The Journal of Urology)，151卷，54-61(19941月)。
本发明的化合物可应用于下列患有MED的患者亚群精神性、内分泌性、神经性、动脉性、药物诱发的性功能障碍(催乳性)和与肺空洞因素(cavernosal factor)，特别是静脉原因相关的性功能障碍。在《临床男性学》(Clinical Andrology)23卷，4期，773-782页和Mosby-Wolfe出版的I.Eardley和K.Sethia的著作《勃起机能障碍-最新研究和控制》(″Erectile Dysfunction-Current Investigationand Management)第3章中更具体地描述了这些患者群。
试验条件天然NEP酶的生产按照Kenny和Booth的方法从肾中分离NEP(Booth，A.G.& Kenny，A.J.(1974)《生物化学杂志》(Biochem.J.)142，575-581)。
使用两种可选方法之一生产重组SEP酶方法1用NCIMB保藏号为41110的质粒，采用lipofectamine试剂方案(Invitrogen Ltd，Paisley，UK)中所述的lipofectamine法转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞培养物。在转染后24或48小时时收集细胞培养基，并通过以3000g离心5min清除细胞碎片。然后在4℃下使用来自Pierce和Warner，Chester UK的″载物片细胞溶解器(slide a lyser)″将培养基对50mM HEPES pH7.4/10％甘油透析。然后以等分部分冷冻经过透析的样品，并储存在液氮中。
方法2按照标准分子和细胞生物学方法在室内制备了产生重组SEP的稳定人胚肾(HEK)细胞系。按照用于HEK细胞的标准方案在烧瓶或滚瓶内补充了潮霉素B的培养基中培养这种HEK-SEP细胞系。收集培养基，并在室温下以3000g离心15分钟以除去细胞碎片，然后使用来自Pierce和Warner，Chester UK的″载物片细胞溶解器(slide alyser)，应用透析缓冲液(50mM HEPES pH7.4/10％甘油)透析至少6小时，在这6小时过程中至少改变一次透析缓冲液。
SEP或NEP肽酶活性的测定通过监测其对合成肽底物若丹明绿-Gly-Gly-dPhe-Leu-Arg-Arg-Val-Cys(QSY7)-βAla-NH2进行蛋白水解的能力测定SEP或NEP的肽酶活性
首先如下制备用于测定的试剂通过在50mM pH7.4的HEPES缓冲液(Sigma，UK)中将2mM/100％DMSO若丹明绿-Gly-Gly-dPhe-Leu-Arg-Arg-Val-Cys(QSY7)-βAla-NH2储备溶液稀释成2μM浓度而制成底物溶液。
融化上述SEP或NEP酶的等分部分，然后在含有1片无EDTA的蛋白酶抑制剂混合物(Roche Diagnostics，Ut)/25ml的50mM HEPES(pH7.4)中稀释。稀释度依每一酶批量具体的预定因素而定，使得在本试验中15μl含有足以将约30％底物转化成产物的酶。
制备由4ml DMSO+96ml 50mM HEPES(pH7.4)组成的4％DMSO溶液。
通过将500μl底物溶液加入到250μl酶溶液+250μl 4％DMSO溶液中并在37℃下温育16小时来制备产物溶液。
如下设定试验在黑色384孔微量滴定板中，将15μl酶溶液加入到15μl的4％DMSO溶液中。还设定了类似的非特异性本底空白，其中该15μl 4％DMSO溶液中还含有40uM磷酸阿米酮。然后将30ul底物溶液加入到测定和空白孔中，将平板在37℃下温育1小时。温育后，取荧光测定值(Ex485/Em538)。BMG豪华(galaxy)荧光读出器(BMG Labtechnologies，Offenberg，Germany)。
酶的蛋白水解活性相当于样品荧光减去非特异性本底空白的荧光。
可以取从相同微量滴定板上的孔内60μl产物中获得的荧光测定值。如果需要，那么使用该值以及来自SEP测定中的荧光单位，以便计算1小时温育期中发生蛋白水解的底物％或将测定的荧光增加值转化成其它有用的单位，诸如发生蛋白水解的底物ng数/min/ml酶。
使用该试验测定NEP和SEP抑制剂的IC50′s为了测定SEP或NEP抑制剂(例如磷酸阿米酮)的IC50，如上所述使用一定测试浓度范围的包括在15μl DMSO溶液中的抑制剂进行多次试验。(通过使用4％DMSO/50mM HEPES pH7.4适当稀释抑制剂的10mM100％DMSO储备溶液制成。)使用合适的标准图拟合电脑程序，将S形剂量反应曲线拟合成log抑制剂浓度对抑制％或活性％的图。将IC50计算为产生50％最大抑制的抑制剂浓度。一般来说，对指定的IC50测定而言，使用以半对数单位递增的至少10种所用抑制剂浓度的剂量范围。
就IC50结果低于约2nM的抑制剂而言，在改变的试验条件下重复本试验，其中将所用酶的量减少至约1/10-1/20；底物浓度增加至5μM；且温育时间增加至3小时。这一条件将本试验的功效极限(紧密结合极限)降至Ki为～0.2-2nM的化合物的IC50估计值不受酶浓度限制的水平。
已经在上述试验中测试了本发明的化合物。所有化合物均为有效的NEP抑制剂，其中IC50＜20nM，并且对NEP的选择性超过SEP至少1000倍。
(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例1)对NEP具有活性，表示为IC50为1nm，并且对NEP的选择性超过SEP 1900倍。
可以使用WO02/079143中所述的技术进一步测定本发明化合物在治疗FSD和MED中的应用。
可以通过使用CaCO-2试验证实本发明化合物的有利药代动力学特性。CACO-2试验是用于预测指定分子通过GI道能力的广泛接受的模型。本发明的化合物具有如下定义的良好CACO-2流量。将在CACO-2细胞中的表观渗透性(Papp)值＞5×10-6cm/s(在pH7.4下)和＞15×10-6cm/s(在pH6.5下)的化合物看作具有良好渗透性，预计可通过GI道充分吸收。
如下所述进行试验细胞培养物以4.0×104细胞/孔将Caco-2细胞接种在24-孔FalconMultiwell平板上。使细胞生长在由极限必需培养基(Gibco21090-022)组成的培养基中，所述的极限必需培养基(Gibco21090-022)中补充了20％胎牛血清、1％非必需氨基酸、2mM L-谷氨酰胺和2mM丙酮酸钠。每周更换培养基三次，并将细胞维持在37℃，5％CO2和90％相对湿度下。当单层为15-18日龄时，进行渗透性研究。使用23-40代的细胞。
渗透性研究将每种测试化合物制成10mM DMSO溶液，然后将62.5μl的该溶液加入到25mL转运缓冲液中。将纳多洛尔(25μM)加入到每一孔中作为膜完整性的标记。然后将这些溶液与转运缓冲液温至37℃。转运缓冲液为在pH7.4或pH6.5下的HBSS(Hank′s平衡盐溶液)。在开始每次研究前，用HBSS将每一单层洗涤三次。将未加入化合物的转运缓冲液置于各接受孔中，其中将250μl置于顶面上，1mL置于底外侧孔。通过将药物溶液添加到各供体孔中开始本研究，其中将250μl加入顶部孔中，将1mL加入底外侧孔中。在37℃下温育2小时后，从所有孔中取出样品用于LC-MS-MS分析。
本发明的化合物具有的CACO-2 A-B流量＞5。
人肝脏微粒体是用于预测药物分子对肝内代谢的代谢稳定性的广泛接受的模型。本发明的化合物对HLM的代谢稳定。在HLM中具有的半衰期＜90mins的化合物代谢过快，预计与代谢稳定的化合物相比表现出在体内不可接受的短停留时间和降低的生物利用度。本发明的化合物在HLM中具有的半衰期＞110mins。
试验如下进行微粒体的温育所有温育均在37℃下恒温振动的水浴中进行。各温育物中含有0.5μM CYP。加入辅因子作为NADPH再生系统。它由1.2mM NADP、5mM MgCl2×6H2O、5mM DL-异柠檬酸和1个单位/ml高度纯化的异柠檬酸脱氢酶组成。将全部试剂溶于磷酸盐缓冲液(50mM；pH7.4)。底物浓度为1M。将底物溶于乙腈，使温育混合物中乙腈的最终浓度低于0.1％(v/v)。从对照温育中除去NADP。在所有实验中，在37℃下将样品与微粒体、底物和再生系统在没有NADP存在下一起预温育5min。通过添加NADP启动反应。温育时间为1h。在0、3、5、10、15、20、30、45 & 60min后取出100μl等分部分。用400μl 1M-乙酸和2.0ml乙酸乙酯萃取所述的等分部分，并通过LC-MS-MS进行分析。
可以将本发明的化合物与一种或多种其它活性组分组合，所述的活性组分选自下组1)一种或多种天然存在或合成的前列腺素或其酯类。本文所用的合适的前列腺素包括如下化合物，诸如前列地尔、前列腺素E1、前列腺素E0、13，14-二氢前列腺素E1、前列腺素E2；eprostinol；天然合成和半合成的前列腺素及其衍生物，包括WO-00033825和/或2000年3月14日授权的US 6,037,346中公开的化合物，将所有这些文献引入本文作为参考；PGE0、PGE1、PGA1、PGB1、PGF1α、19-羟基PGA1、19-羟基-PGB1、PGE2、PGB2、19-羟基-PGA2、19-羟基-PGB2、PGE3α、卡前列氨丁三醇、地诺前列素、氨丁三醇、地诺前列酮、lipo prost、吉美前列素、甲烯前列素(metenoprost)、硫前列酮(sulprostune)、噻前列素和莫西赛利(moxisylate)。
2)如下一种或多种α-肾上腺素能受体拮抗剂化合物，也称作α-肾上腺素受体或α-受体或α-阻滞剂。本文所用的合适的化合物包括:如1998年6月14日公开的PCT申请WO99/30697中所述的α-肾上腺素能受体阻滞剂(将该文献中涉及α-肾上腺素能受体的公开内容引入本文作为参考)，包括选择性α1-肾上腺素受体或α2-肾上腺素受体阻滞剂和非选择性肾上腺素受体阻滞剂，合适的α1-肾上腺素受体阻滞剂包括酚妥拉明、甲磺酸酚妥拉明、曲唑酮、阿夫唑嗪、吲哚拉明、萘哌地尔、坦索洛新、达哌唑、酚苄明、咪唑克生、依法克生(efaraxan)、育亨宾、罗芙木生物碱(rauwolfa alkaloids)、Recordati 15/2739、SNAP 1069、SNAP 5089、RS17053、SL89.0591、多沙唑嗪、特拉唑嗪、阿巴诺喹和哌唑嗪；来自US 6,037,346[2000年3月14日]的α2-阻滞剂二苄明(dibenarnine)、妥拉唑林、曲马唑嗪和二苄明(dibenarnine)；如下列美国专利中所述的α2-肾上腺素能受体US4,188,390；US 4,026,894；US 3,511,836；US 4,315,007；US 3,527,761；US 3,997,666；US 2,503,059；US 4,703,063；US 3,381,009；US 4,252,721和US 2,599,000，将它们各自引入本文作为参考；α2-肾上腺素受体阻滞剂包括任选在有诸如pirxamine这类cariotonic agent存在下的可乐定、罂粟碱、盐酸罂粟碱。
3)一种或多种NO-供体(NO-激动剂)化合物。本文所用的合适NO-供体化合物包括有机硝酸盐，诸如一-、二或三-硝酸盐或有机硝酸酯类，包括glyceryl brinitrate(也称作硝酸甘油)、5-单硝酸异山梨酯、硝酸异山梨酯、戊四硝酯、丁四硝酯、硝普钠(SNP)、3-吗啉代斯德酮亚胺吗多明、S-亚硝基-N-乙酰基青霉胺(SNAP)、S-亚硝基-N-谷胱甘肽(SNO-GLU)、N-羟基-L-精氨酸、亚硝酸异戊酯、林西多明、盐酸林西多明、(SIN-1)S-亚硝基-N-半胱氨酸、二醇二氮烯鎓(diazenium diolates)、(NO Nates)、1，5-戊二硝酸酯、L-精氨酸(L-arginene)、人参、zizphi fructus、吗多明、Re-2047、nitrosylatedmaxisylyte衍生物，诸如公开的PCT申请WO 0012075中所述的NMI-678-11和NMI-937。
4)一种或多种钾通道开放剂或调节剂。本文可用的合适的钾通道开放剂/调节剂包括尼可地尔、cromokalim、左色满卡林、来马卡林、吡那地尔、cliazoxide、米诺地尔、北非蝎毒素(charybdotoxin)、格列本脲、4-氨基吡啶(4-amini pyridine)、BaCl2。
5)一种或多种多巴胺能药，优选阿扑吗啡；或选择性D2、D3或D2/D3激动剂，诸如普拉克索和ropirinol(如WO-0023056中所述的)、PNU95666(如WO-0040226中所述的)。
6)一种或多种血管舒张药。本文所用的合适的血管舒张药包括尼莫地平、吡那地尔、环扁桃酯、异克舒令、chloroprumazine、氟哌啶醇、Rec 15/2739、曲唑酮。
7)一种或多种血栓烷A2激动剂。
8)一种或多种CNS活性剂。
9)一种或多种麦角生物碱(ergot alkoloids)。合适的麦角生物碱描述在2000年3月14日授权的美国专利US 6,037,346中，包括乙酰二氢麦角胺、溴麦角林、溴麦角脲、氰麦角林、delorgotrile、地舒勒近、马来酸麦角新碱、酒石酸麦角胺、乙舒麦角、麦角腈、麦角二乙胺、美舒麦角、甲麦角林、甲麦角胺、麦角溴烟酯、培高利特、普罗麦角、丙麦角脲、特麦角脲。
10)一种或多种调节利钠因子，特别是心房利钠因子(也称作心房利钠肽)、B型和C型利钠因子、诸如抑制剂或中性内肽酶的作用的化合物。
11)一种或多种抑制血管紧张肽转化酶的化合物，诸如enapril；以及血管紧张肽转化酶和中性内肽酶的合并抑制剂，诸如奥马曲拉。
12)一种或多种血管紧张肽受体拮抗剂，诸如氯沙坦。
13)一种或多种NO-合酶底物，诸如L-精氨酸。
14)一种或多种钙通道阻滞剂，诸如氨氯地平。
15)一种或多种内皮素受体拮抗剂和抑制剂或内皮素转化酶。
16)一种或多种降胆固醇药，诸如他汀类药物(例如阿托伐他汀/Lipitor-商标)和fibrates。
17)一种或多种抗血小板和抗血栓形成药，例如tPA、uPA、华法林、水蛭素和其它凝血酶抑制剂、肝素、促凝血酶原激酶活化因子抑制剂。
18)一种或多种胰岛素致敏剂，诸如曲格列酮片剂；和降血糖药，诸如格列吡嗪。
19)L-DOPA或卡比多巴。
20)一种或多种乙酰胆碱酯酶抑制剂，诸如donezipil。
21)一种或多种类固醇或非类固醇抗炎药。
22)一种或多种雌激素受体调节剂和/和雌激素激动剂和/或雌激素拮抗剂，优选雷洛昔芬、替勃龙或拉索昔芬、(-)-顺式-6-苯基-5-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-5，6，7，8-四氢萘-2-醇及其药物上可接受的盐，它们的制备方法具体描述在WO 96/21656中。
23)一种或多种大麻素受体调节剂。
24)一种或多种NPY(神经肽Y)抑制剂，更具体地NPY1或NPY5抑制剂，优选NPY1抑制剂，优选所述的NPY抑制剂(包括NPY Y1和NPY Y5)具有的IC50低于100nM，更优选低于50nM。WO-A-98/52890中提供了鉴定NPY抑制剂的试验(参见96页2-28行)。
25)一种或多种血管活性肠蛋白(VIP)；VIP模拟物；VIP类似物；更具体地被一种或多种VIP受体亚型VPAC1、VPAC或PACAP(垂体腺苷酸环化酶活化肽)介导；一种或多种VIP受体激动剂或VIP类似物(例如Ro-125-1553)或VIP片段；一种或多种α-肾上腺素受体拮抗剂与VIP(例如Invicorp，Aviptadil)的组合。
26)一种或多种黑皮质素受体激动剂或调节剂或黑皮质素促进剂，诸如melanotan II、PT-14、PT-141或WO-09964002、WO-00074679、WO-09955679、WO-00105401、WO-00058361、WO-00114879、WO-00113112、WO-09954358中所述的化合物。
27)一种或多种5-羟色胺受体激动剂、拮抗剂或调节剂，更具体地说为5HT1A(包括VML 670)、5HT2A、5HT2C、5HT3和/或5HT6受体激动剂、拮抗剂或调节剂，包括WO-09902159、WO-00002550和/或WO-00028993中所述的那些。
28)一种或多种雄激素，诸如雄酮、脱氢雄酮、睾酮、雄烷二酮和合成雄激素。
29)一种或多种雌激素，诸如雌二醇、雌酮、雌三醇和合成雌激素，诸如雌二醇苯甲酸盐。
30)一种或多种用于去甲肾上腺素、多巴胺和/或5-羟色胺的转运蛋白的调节剂，诸如丁氨苯丙酮、GW-320659。
31)一种或多种嘌呤能受体激动剂和/或调节剂。
32)一种或多种神经激肽(NK)受体拮抗剂，包括WO-09964008中所述的那些。
33)一种或多种阿片样受体激动剂、拮抗剂或调节剂，优选ORL-1受体的激动剂。
34)一种或多种催产素/加压素受体激动剂或调节剂，优选选择性催产素激动剂或调节剂。
35)一种或多种PDE抑制剂，更具体地说为PDE 2、3、4、5、7或8抑制剂，优选PDE2或PDE5抑制剂，最优选PDE5抑制剂(参见下文)，所述的抑制剂优选地对相应酶的IC50低于100nM。用于本发明的合适的cGMP PDE5抑制剂包括EP-A-0463756中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；EP-A-0526004中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；公布的国际专利申请WO 93/06104中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮类；公布的国际专利申请WO93/07149中公开的异构体吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮类；公布的国际专利申请WO 93/12095中公开的喹唑啉-4-酮类；公布的国际专利申请WO 94/05661中公开的吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-酮类；公布的国际专利申请WO 94/00453公开的嘌呤-6-酮类；公布的国际专利申请WO98/49166中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮类；公布的国际专利申请WO 99/54333中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮类；EP-A-0995751中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-4-酮类；公布的国际专利申请WO00/24745中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮类；EP-A-0995750中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-4-酮类；公布的国际申请WO95/19978中公开的化合物；公布的国际申请WO 99/24433公开的化合物和公布的国际申请WO 93/07124中公开的化合物。公布的国际申请WO 01/27112中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮类；公布的国际申请WO 01/27113中公开的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮类；EP-A-1092718中公开的化合物和EP-A-1092719中公开的化合物。
用于本发明的其它合适的PDE5抑制剂包括5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)，也称作1-[[3-(6，7-二氢-1-甲基-7-氧代-3-丙基-1H吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基)-4-乙氧基苯基]磺酰基]-4-甲基哌嗪(参见EP-A-0463756)；5-(2-乙氧基-5-吗啉代乙酰基苯基)-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见EP-A-0526004)；3-乙基-5-[5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)-2-正丙氧基苯基]-2-(吡啶-2-基)甲基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO98/49166)；3-乙基-5-[5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)-2-(2-甲氧基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(吡啶-2-基)甲基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO99/54333)；(+)-3-乙基-5-[5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)-2-(2-甲氧基-1(R)-甲基乙氧基)吡啶-3-基]-2-甲基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮，也称作3-乙基-5-{5-[4-乙基哌嗪-1-基磺酰基]-2-([(1R)-2-甲氧基-1-甲基乙基]氧基)吡啶-3-基}-2-甲基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO99/54333)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮，也称作1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氢-2-(2-甲氧基乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基}-4-乙基哌嗪(参见WO 01/27113，实施例8)；5-[2-异-丁氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-(1-甲基哌啶-4-基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO 01/27113，实施例15)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-苯基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO 01/27113，实施例66)；5-(5-乙酰基-2-丙氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-异丙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO01/27112，实施例124)；5-(5-乙酰基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO 01/27112，实施例132)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氢-2-甲基-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)吡嗪并[2′，1′6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)，即公开的国际申请WO95/19978中实施例78和95的化合物以及实施例1、3、7和8的化合物；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺酰基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)，也称作1-[[3-(3，4二氢-5-甲基-4-氧代-7-丙基咪唑并[5，1-f]-as-三嗪-2-基)-4-乙氧基苯基]磺酰基]-4-乙基哌嗪，即公开的国际申请WO99/24433中实施例20、19、337和336的化合物；以及公开的国际申请WO93/07124(EISAI)中实施例11的化合物；和来自Rotella DP《药物化学杂志》(J.Med.Chem.)，2000，43，1257的化合物3和14。
其它合适的PDE5抑制剂包括4-溴-5-(吡啶基甲氨基)-6-[3-(4-氯苯基)-丙氧基]-3(2H)哒嗪酮；1-[4-[(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基甲基)氨基]-6-氯-2-喹唑啉基(quinozolinyl)]-4-哌啶-4-甲酸一钠盐；(+)-顺式-5，6a，7，9，9，9a-六氢-2-[4-(三氟甲基)-苯基甲基-5-甲基-环戊-4，5]咪唑并[2，1b]嘌呤-4(3H)酮；furazlocillin；顺式-2-己基-5-甲基-3，4，5，6a，7，8，9，9a-八氢环戊[4，5]-咪唑并[2，1-b]嘌呤-4-酮；3-乙酰基-1-(2-氯苄基)-2-丙基吲哚-5-甲酸酯；3-乙酰基-1-(2-氯苄基)-2-丙基吲哚-6-甲酸酯；4-溴-5-(3-吡啶基甲氨基)-6-(3-(4-氯苯基)丙氧基)-3-(2H)哒嗪酮；1-甲基-5(5-吗啉代乙酰基-2-正丙氧基苯基)-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并(4，3-d)嘧啶-7-酮；1-[4-[(1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基甲基)氨基]-6-氯-2-喹唑啉基]-4-哌啶甲酸一钠盐；Pharmaprojects No.4516(GlaxoWellcome)；Pharmaprojects No.5051(Bayer)；PharmaprojectsNo.5064(Kyowa Hakko；参见WO 96/26940)；Pharmaprojects No.5069(Schering Plough)；GF-196960(Glaxo Wellcome)；E-8010和E-4010(Eisai)；Bay-38-3045 & 38-9456(Bayer)和Sch-51866。
为了治疗FSD，可以优选将本发明的化合物与一种或多种活性组分组合，所述的活性组分选自下组a)PDE5抑制剂，更优选5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氢-2-甲基-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡嗪并[2′，1′6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺酰基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；和5-(5-乙酰基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；及其药物上可接受的盐；b)NPY Y1抑制剂；c)多巴胺激动剂，诸如阿扑吗啡；或选择性D2、D3或D2/D3激动剂，诸如普拉克索和ropirinol；d)黑皮质素受体激动剂或调节剂或黑皮质素促进剂，优选melanotan II、PT-14、PT-141；e)5HT2C激动剂、拮抗剂或调节剂；f)雌激素受体调节剂、雌激素激动剂和/或雌激素拮抗剂，优选雷洛昔芬、替勃龙或拉索昔芬；g)雄激素，诸如雄酮，脱氢雄酮、睾酮、雄甾烷二酮和合成雄激素；和h)雌激素，诸如雌二醇，雌酮、雌三醇和合成雌激素，诸如雌激素苯甲酸盐。
为了治疗MED，可以优选将本发明的化合物与一种或多种活性组分组合，所述的活性组分选自下组a)PDE5抑制剂，更优选5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氢-2-甲基-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡嗪并[2′，1′6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺酰基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；和5-(5-乙酰基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-dJ嘧啶-7-酮；及其药物上可接受的盐；b)NPY Y1抑制剂；
c)多巴胺激动剂(优选阿扑吗啡)或选择性D2、D3或D2/D3激动剂，诸如普拉克索和ropirinol；d)黑皮质素受体激动剂或调节剂或黑皮质素促进剂，优选melanotan II、PT-14、PT-141；和e)5HT2C激动剂、拮抗剂或调节剂；用于治疗FSD的特别优选的组合为本发明的化合物与一种或多种选自下组的活性组分5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氢-2-甲基-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡嗪并[2′，1′6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺酰基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；5-(5-乙酰基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；阿扑吗啡；melanotan II；PT-141；拉索昔芬；雷洛昔芬；替勃龙；雄激素，诸如雄酮，脱氢雄酮、睾酮、雄甾烷二酮和合成雄激素；以及雌激素，诸如雌二醇，雌酮、雌三醇和合成雌激素，诸如雌激素苯甲酸盐。
用于治疗MED的特别优选的组合为本发明的化合物与一种或多种选自下组的活性组分5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氢-2-甲基-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡嗪并[2′，1′6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺酰基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；5-(5-乙酰基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；阿扑吗啡；melanotan II；和PT-141。
为了治疗心血管疾病，特别是高血压，可以优选将本发明的化合物与一种或多种活性组分组合，所述的活性组分选自下组a)血管紧张肽受体阻断剂(ARB)，诸如氯沙坦、缬沙坦、替米沙坦、坎地沙坦、厄贝沙坦、依普罗沙坦和奥美沙坦；b)钙通道阻滞剂(CCB)，诸如氨氯地平；c)他汀类药物，诸如阿托伐他汀；d)PDE5抑制剂，诸如西地那非、tadalafil、伐地那非、5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；5-(5-乙酰基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；和公开在WO00/27848中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-4-酮类，特别是N-[[3-(4，7-二氢-1-甲基-7-氧代-3-丙基-1H-吡唑并[4，3-d]-嘧啶-5-基)-4-丙氧基苯基]磺酰基]-1-甲基2-吡咯烷丙酰胺[DA-8159(WO00/27848的实施例68)]；e)β-阻滞剂，诸如阿替洛尔或卡维地洛；f)ACE抑制剂，诸如喹那普利、依那普利和赖诺普利；g)α-阻滞剂，诸如多沙唑嗪；h)选择性醛固酮受体拮抗剂(SARA)，诸如依普利酮或螺内酯；和
i)咪唑啉I1激动剂，诸如利美尼定和莫索尼定。
如果给予活性剂的组合，那么可以同时、分别或依次给予它们。
可以单独给予本发明的化合物，但是在人体疗法中，一般将本发明的化合物以与合适的药物赋形剂、稀释剂或载体的混合物形式给药，所述的药物赋形剂、稀释剂或载体根据所用给药途径和标准制药实践选择。
本发明提供了药物组合物，其中包含通式(I)的化合物或其药物上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物以及药物上可接受的稀释剂或载体。
口服给药可以通过口服给予本发明的化合物。口服给药可以包括吞咽，使得化合物进入胃肠道；或可以使用口含或舌下给药，通过这种方式化合物从口腔中直接进入血流。
适合于口服给药的制剂包括固体制剂，诸如片剂、含有颗粒、液体或粉末的胶囊、锭剂(包括液体-填充的)、咀嚼剂、多颗粒和纳米颗粒、凝胶、薄膜(包括粘膜粘着剂)、阴道栓(ovule)、喷雾剂；和液体制剂。
液体制剂包括混悬液、溶液、糖浆剂和酏剂。可以将这类制剂用作软胶囊或硬胶囊的填充物，其中一般包括载体，例如水、乙醇、丙二醇、甲基纤维素或合适的油以及一种或多种乳化剂和/或悬浮剂。还可以通过例如再溶解来自小药囊中的固体制备液体制剂。
本发明的化合物还可以用于速溶、快速崩解剂型，诸如那些描述在Liang和Chen的《治疗专利中的成熟观点》(Expert Opinion inTherapeutic Patents)，11(6)，981-986(2001)中的剂型。
可以使用药剂师公知的标准方法，例如通过直接压制、制粒(干、湿或熔化)、熔化凝结或挤压制备典型片剂。片剂可以包含一层或多层，并且可以对其包衣或不包衣。
适合于口服给药的赋形剂实例包括载体，例如纤维素、碳酸钙、磷酸二氢钙、甘露糖醇和柠檬酸钠；制粒粘合剂，例如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素和明胶；崩解剂，例如羟基乙酸淀粉钠和硅酸盐；润滑剂，例如硬脂酸镁和硬脂酸；湿润剂，例如十二烷基硫酸钠；防腐剂；抗氧化剂；矫味剂；和着色剂。
可以配制用于即刻和/或改进释放的口服给药用固体制剂。改进释放制剂包括延迟释放、缓释、脉动释放、受控双向释放、靶向释放和按程序释放。在Verma等《在线制药技术》(PharmaceuticalTechnology On-line)25(2)，1-14(2001)中可以找到合适的改进释放技术的详细内容，诸如高能分散、渗透和包衣颗粒。其它改进释放制剂描述在美国专利US 6,106,864中。
胃肠道外给药还可以将本发明的化合物直接给药到血流内、肌肉内或内脏器官内。适于胃肠道外给药的合适方式包括静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内和皮下。用于胃肠道外给药的合适的装置包括针头(包括显微针)注射器、无针头注射器和输注技术。
胃肠道外制剂一般为水溶液，它们可以含有赋形剂，诸如盐、碳水化合物和缓冲剂(优选至pH 3-9)，而在某些应用中，更适合于将它们配制成无菌的非水溶液或干燥形式，以便与合适的媒介物(诸如无菌的不含致热原的水)结合使用。
使用本领域技术人员众所周知的标准制药技术可以容易地在无菌条件下，(例如通过冻干)制备胃肠道外制剂。
可以通过适当加工，例如使用高能喷雾干燥分散(参见WO01/47495)和/或通过使用合适的制剂技术，诸如使用增加溶解度的试剂，增加用于制备胃肠道外溶液中所用的通式(I)化合物的溶解度。
可以将胃肠道外给药用制剂配制成即刻和/或改进释放剂型。改进释放制剂包括延迟释放、缓释、脉动释放、受控双向释放、靶向释放和按程序释放。
局部给药还可以通过局部途径，即通过皮肤或透皮对皮肤(优选对外生殖器)或粘膜给予本发明的化合物。用于该目的的典型制剂包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、霜剂、软膏剂、撒粉、敷料、泡沫、薄膜、皮肤贴剂、糯米纸囊剂(wafer)、植入物、海绵、纤维、绷带和微乳剂。还可以使用脂质体。典型载体包括醇、水、矿物油、液体石蜡、白凡士林、甘油和丙二醇。可以混入渗透促进剂，参见例如Finnin和Morgan，《药物科学杂志》(J Pharm Sci)，88(10)，955-958(1999年10月).
局部给药的其它方式包括通过电离子透入疗法、电穿孔、超声药物透入疗法、超声促渗法和无针头或显微针注射递送药物。
可以将局部给药用制剂配制成即刻和/或改进释放剂型。改进释放制剂包括延迟释放、缓释、脉动释放、受控双向释放、靶向释放和按程序释放。因此，可以将本发明的化合物配制成更为固体化的形式，从而作为可植入的长效制剂给药，提供活性化合物的长期释放。
吸入/鼻内给药还可以通过鼻内或通过吸入给予本发明的化合物，一般以来自干粉吸入器的干粉(单独地，作为例如与乳糖的干燥掺合物的混合物形式，或作为混合的成分颗粒，例如混有磷脂类)或作为来自加压容器、泵、喷雾器、雾化器(优选使用电流体动力学产生细雾的雾化器)或喷洒器的气溶胶喷雾剂形式，其中使用或不使用合适的推进剂，诸如二氯氟甲烷。
加压容器、泵、喷雾器、雾化器或喷洒器中含有活性化合物的溶液或混悬液，例如包括乙醇(任选乙醇水溶液)或用于分散、溶解或延长活性成分释放的合适的可选试剂、作为溶剂的推进剂和可选的表面活性剂，诸如脱水山梨糖醇三油酸酯或低聚乳酸。
在用于干粉或混悬液制剂前，将药物产品微粉化至适合于通过吸入递送的大小(一般低于5微米)。可以通过任意合适的粉碎方法获得这一尺寸，诸如螺旋气流粉碎、流化床气流粉碎、超临界流体加工成纳米粒、高压匀浆或喷雾干燥。
用于使用电流体动力学产生细雾的雾化器的合适的溶液制剂可以含有1μg-10mg本发明化合物/揿，每揿体积可以在1ul-100μl之间变动。典型制剂可以包括通式(I)的化合物、丙二醇、无菌水、乙醇和氯化钠。可以代替丙二醇使用的可选溶剂包括甘油和聚乙二醇。
可以配制含有本发明化合物、诸如乳糖或淀粉这类合适的粉末基质和诸如/-亮氨酸、甘露糖醇或硬脂酸镁这类性能改进剂的粉末混合物的胶囊、泡罩包和药筒(例如由明胶或HPMC制成)，以便用作吸入剂或吹入剂。
就干粉吸入器和气溶胶而言，通过递送计量量的阀门测定剂量单位。一般将本发明的单位安排成给予计量剂量或含有1μg-50mg通式(I)化合物的″泡罩包″。每日总剂量一般在1μg-50mg范围，诸如1mg-50mg，可以将其以单剂量或更通常的情况是作为全天内的分次剂量给药。
可以将吸入/鼻内给药用制剂配制成即刻和/或改进释放剂型。改进释放制剂包括延迟释放、缓释、脉动释放、受控双向释放、靶向释放和按程序释放。
直肠/阴道内给药可以通过直肠或阴道给予本发明的化合物，例如以栓剂、阴道栓或灌肠剂形式。可可脂是传统的栓剂基质，而如果合适，也可以使用各种选择。可以将直肠/阴道内给药用制剂配制成即刻和/或改进释放剂型。改进释放制剂包括延迟释放、缓释、脉动释放、受控双向释放、靶向释放和按程序释放。
眼部/Andial给药还可以对眼或耳直接给予本发明的化合物，一般以在调节过pH的等渗无菌盐水中的微粒化混悬液或溶液的滴剂形式。适合于眼部和andial给药的其它制剂包括软膏剂、生物可降解(例如可吸收的凝胶海绵状物、胶原蛋白)和不可生物降解的(例如硅氧烷)植入物、糯米纸囊剂、镜片和颗粒或囊泡系统，诸如niosomes或脂质体。可以混入聚合物与防腐剂，所述的聚合物诸如为交联聚丙烯酸；聚乙烯醇；透明质酸；纤维素聚合物，例如羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素或甲基纤维素；或杂多糖聚合物，例如琼脂糖树胶；所述的防腐剂诸如为苯扎氯铵。还可以通过离子透入疗法递送这类制剂。
可以将眼部/andial给药用制剂配制成即刻和/或改进释放剂型。改进释放制剂包括延迟释放、缓释、脉动释放、受控双向释放、靶向释放和按程序释放。
可能使用的技术可以将本发明的化合物与可溶性大分子诸如环糊精或含有聚乙二醇的聚合物实体合并，以改善其溶解性、溶出率、味道掩蔽、生物利用度和/或稳定性。
已发现药物-环糊精复合物普遍可用于大部分剂型和给药途径。可以使用笼形复合物和非笼形复合物。作为直接与药物笼形的选择，可以将环糊精用作辅助添加剂，即作为载体、稀释剂或增溶剂。最常用于这些目的的是α-、β-和γ-环糊精，其实例可以在国际专利申请WO91/11172、WO 94/02518和WO 98/55148中找到。
剂量就对人体患者给药而言，本发明化合物的每日总剂量一般为0.1mg-1000mg，当然，这取决于给药方式。例如，口服给药可能需要的每日总剂量为5mg-1000mg，诸如5-500mg，而静脉内给药可能仅需要0.01-30mg/kg体重，诸如0.1-10mg/kg，更优选0.1-1mg/kg体重。可以将每日总剂量作为单剂量或分次剂量给药。
这些剂量基于的是具有约65-70kg体重的普通人体受试者。临床医师能够确定对于体重超出该范围的受试者，诸如婴儿和中老年人的使用剂量。
本领域技术人员还可以理解在治疗某些疾病(包括FSD和MED)的过程中，可以基于″需要″(即根据需要或要求)以单剂量形式给予本发明化合物。
在优选的实施方案中，可以通过全身递送本发明的化合物(诸如口服、经颊和舌下)，更优选口服。优选采用这类全身(最优选口服)给药方式治疗女性性功能障碍，优选FSAD。
因此，在特别优选的实施方案中，提供了本发明化合物在制备用于治疗或预防FSD，更优选FSAD的经全身递送(优选口服递送)的药物中的应用。
优选的口服制剂使用即刻释放片剂；或者快速分散或溶解的剂型(FDDFs)。
在另一个优选的实施方案中，通过局部，优选对女性外生殖器，尤其是阴道直接给予本发明的化合物。
由于NEP在整个体内存在，所以极为令人意外的是可以通过全身给予本发明的化合物而在女性外生殖器上获得了治疗反应，并且没有诱发不能忍受的(不良)副作用。在EP 1097719-A1和下文的动物模型中，我们已经证实对家兔模型经全身给予的NEP抑制剂(体内)在性唤醒(通过骨盆神经刺激模拟)时增加了生殖器血流，并且没有对心血管参数产生不良影响，诸如导致明显的低血压或高血压。
优选给予本发明的化合物以治疗性刺激(所谓性刺激，我们指的是包括视觉、听觉或触觉刺激)患者中的FSD。可以在该给药之前、之后或过程中进行刺激。
因此，本发明的化合物强化了以恢复或改善对性刺激的性唤醒反应的女性外生殖器中性唤醒为基础的途经/机制。
因此，优选实施方案提供了本发明化合物在制备用于治疗或预防受刺激患者中FSD的药物中的应用。
就兽药应用而言，将本发明的化合物作为合适的可接受制剂按照一般的兽药实践进行给药，兽医会确定最适合于特定动物的给药方案和给药途径。
下列制剂实施例仅是解释性的，并且旨在限定本发明的范围。″活性组分″指的是本发明的化合物。
制剂1使用下列组分制备片剂重量/mg活性组分 250微晶纤维素 400火成二氧化硅 10硬脂酸 5总计 665掺合所述成分并压制成片剂。
制剂2如下制备静脉内制剂活性组分 100mg等渗盐水 1,000ml用于将本发明化合物经局部对外生殖器给药的典型制剂如下制剂3活性组分(1.0％)在异丙醇(30％)和水中的喷雾剂。
制剂4泡沫活性组分、冰醋酸、苯甲酸、鲸蜡醇、对羟基苯甲酸甲酯、磷酸、聚乙烯醇、丙二醇、羧甲基纤维素钠、硬脂酸、二乙基硬脂酰胺、vanDyke香料No.6301、纯化水和异丁烷。
制剂5凝胶活性组分、多库酯钠(docusate sodium)BP、异丙醇BP、丙二醇、氢氧化钠、卡波姆934P、苯甲酸和纯化水。
制剂6霜剂活性组分、苯甲酸、鲸蜡醇、薰衣草、化合物13091、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、丙二醇、羧甲基纤维素钠、十二烷基硫酸钠、硬脂酸、三乙醇胺、冰醋酸、蓖麻油、氢氧化钾、山梨酸和纯化水。
制剂7阴道栓活性组分、西土马哥1000BP(cetomacrogol 100BP)、柠檬酸、PEG 1500和1000以及纯化水。
本发明还包括(i)包含本发明化合物与药物上可接受的赋形剂、稀释剂或载体的药物组合物。
(ii)本发明的化合物或其药物上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，用作药物。
(iii)本发明的化合物作为治疗或预防疾病的药物的应用，所述的疾病可以通过抑制中性内肽酶得到有益的治疗反应。
(iv)本发明的化合物作为治疗或预防下列疾病的药物的应用机能减退的性欲障碍；性唤起障碍；性欲高潮障碍或性交疼痛障碍，优选性唤起障碍、性欲高潮障碍或性交疼痛障碍，更优选性唤起障碍。
(v)治疗哺乳动物FSD或MED的方法，包括用有效量的本发明化合物治疗所述的哺乳动物。
(vi)治疗FSD或MED的药物组合物，其中包含本发明的化合物与药物上可接受的赋形剂、稀释剂或载体。
(vii)本发明化合物在治疗FSD或MED中的应用。
(viii)本发明化合物在制备用于治疗或预防FSD或MED的药物中的应用。
通过下列非限制性实施例进一步阐明本发明，其中使用如下的缩写和定义Arbocel 过滤剂br宽峰brm 宽多重峰Boc 叔丁氧羰基CDI 1，1′-羰基二咪唑
δ 化学位移d 双峰Δ 加热DCCI 二环己基碳化二亚胺DCM 二氯甲烷DMA 二甲基乙酰胺DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO 二甲亚砜ES+电喷射离子化阳性扫描ES-电喷射离子化阴性扫描Ex实施例h 小时HOBt 1-羟基苯并三唑HPLC 高压液相色谱法m 多重峰m/z 质谱峰min 分钟m.p. 熔点MiBK 甲基异-丁基酮MS质谱NMR 核磁共振Prec 前体Prep 制备(制剂)q 四重峰quin 五重峰s 单峰t 三重峰t-BMA 叔丁基甲基醚Tf三氟甲磺酰基
TFA三氟乙酸THF四氢呋喃TLC薄层色谱法TS+热喷雾电离阳性扫描WSCDI 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐。
1H核磁共振(NMR)光谱在所有情况中均与所提出的结构一致。以来自四甲基硅烷的低场的ppm给出特征性化学位移(δ)，其中使用常用缩写命名主峰例如s单峰；d双峰；t三重峰；q四重峰；m多重峰；br宽峰。已经将下列缩写用于常用溶剂CDCl3，氘氯仿；DMSO，二甲亚砜。缩写psi指的是每平方英寸的磅数，LRMS指的是低分辨率质谱法。如果使用薄层色谱法(TLC)，那么它指的是使用硅胶60F254板的硅胶TLC，Rf为化合物在TLC板上移动的距离除以在TLC板上前部溶剂移动的距离。使用Perkin Elmer DSC7以20℃/分钟的加热速率测定熔点。
实施例1(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸 将(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]-氨基}羰基)环戊基]丙酸叔丁酯(制备7和制备8)(7.4g，16.7mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，加入三氟乙酸(10mL)，将该混合物在室温下搅拌5小时。通过添加碳酸钾(10％水溶液)将pH调节至约3使反应停止(需要约120mL)。用二氯甲烷(3×100mL)提取所得混合物，合并有机层，并用MgSO4干燥，蒸发。通过快速色谱法纯化残余物[SiO2；在二氯甲烷中的甲醇1％-2％]而得到所需酸，为澄清油状物(5.66g，87％)。将该批量与1.4g来自上述试验过程的物质合并，并在戊烷(100mL)中搅拌3小时。除去戊烷层，刮取残余物以使树胶状残余物松散，再与另一部分戊烷(100mL)一起搅拌2小时。用烧结漏斗收集所得白色粉末，在45℃的真空中干燥，得到标题化合物，为自由流动的白色粉末(m.p.105-106℃)(6.52g)。测定值；C，64.93；H，7.29；N，7.18。
C21H28N2O3S理论值C，64.92；H，7.26；N，7.21.1H NMR(CDCl3，500MHz)δH7.85(1H，d)，7.61(1H，d)，7.23(1H，dd)，5.89(1H，brm)，3.25-3.35(2H，m)，2.81(3H，s)，2.74(2H，m)，2.45(1H，m)，2.10(1H，m)，1.98(1H，m)，1.89(1H，m)，1.88(2H，m)，1.55-1.68(5H，m)，1.49(2H，m)1.17(3H，d).13C NMR(CDCl3，125MHz)δC180.5，177.4，166.7，151.7，138.5，135.9，126.7，122.1，120.7，54.5，42.7，39.6，37.4，36.6，36.1，33.4，31.3，24.0，24.3，19.9，19.3m/z(电雾化阴离子)387(M-H+)在甲醇溶液中测定旋光度值(5.7mg，在5mL中)，得到如下结果
使用5种不同的反相柱，通过HPLC分析估计纯度为＞99％
HPLC条件 分析型温度 环境温度检测 225，254nm移动相 A水∶MeCN∶TFA95∶5∶0.1％(v/v)BMeCN线性梯度洗脱(参见下文)流速 1ml/min溶剂梯度条件时间 ％B0.000.205.0957.1958.00
使用下述条件，通过与经类似途径制备的相对的对映体真实样品比较，由毛细管电泳将手性纯度估计为98％
用于生产标题化合物的可选步骤如下将(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]-氨基}羰基)环戊基]丙酸叔丁酯(制备7和制备8)(2.4g，5.4mmol)溶于甲苯(7ml)，加入三氟乙酸(4.1ml)，将该混合物在17℃下搅拌6小时。通过添加碳酸钠(9％水溶液)将pH调节至3使反应停止(需要30ml)。加入MiBK(15ml)。分离有机相并将产物萃取入碳酸钠(9％水溶液，2×5ml)中。通过在1小时内用5M HCl将pH调节至pH4.5而将产物萃取入乙酸异丙酯(35ml)。通过常压蒸馏将有机相浓缩至相当于原料为5ml/g。将该油状物冷却至环境温度、结晶并在0-5℃下粒化1小时。使用真空过滤收集固体、用乙酸异丙酯(5ml)洗涤，并在40℃下真空中干燥过夜，得到标题化合物，为自由流动的白色粉末(m.p.105-106℃)[1.3g，3.3mmol，(62％)]。
实施例23-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸
使用与实施例1中所述类似的步骤，以来自制备9的3-[1-({[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基}羰基)-环戊基]丙酸叔丁酯为原料制备该化合物。
m.p.127.5-129.5℃；1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δH7.89(1H，d)，7.63(1H，s)，7.25(1H，d)，5.69(1H，brm)，3.37(2H，m)，3.15(2H，q)，2.76(2H，m)，2.31(2H，m)，1.96-1.87(6H，m)，1.70-1.55(4H，m)，1.47(3H，t)；m/z(ES+)411(MNa+)，389(MH+)；m/z(ES-)387(M-H+).
测定值C，64.74；H，7.28；N，7.14.
C21H28N2O3S理论值C，64.92；H，7.26；N，7.21。
使用3种不同的反相柱，通过HPLC分析估计纯度为＞98％
HPLC条件 分析型温度 环境温度检测 225，254nm移动相A水∶MeCN∶TFA95∶5∶0.1％(v/v)BMeCN梯度洗脱(参见下文)流速 1ml/min溶剂梯度条件时间(分钟)％B0.2-150-10015-18 10018-18.2 100-018.2-20 0实施例33-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)-丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸 使用与实施例1中所述类似的步骤，以来自制备12的3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)-丙酸叔丁酯为原料制备该化合物。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δH7.86(1H，d)，7.64(1H，d)，7.24(1H，dd)，5.72(1H，brs)，3.32(2H，m)，3.13(2H，q)，2.75(2H，m)，2.27(2H，m)，1.88(2H，quin)，1.85-1.73(4H，m)，1.60-1.23(8H，m)，1.46(3H，t)；m/z(ES+) 425(MNa+)，403(MH+)；m/z(ES-)401(M-H+)实施例4(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸 使用实施例1中所述的步骤，以来自制备10的(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基}羰基)环戊基]丙酸叔丁酯为原料制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.86(1H，d)，7.62(1H，d)，7.24(1H，dd)，5.81(1H，brm)，3.27(2H，m)，3.12(2H，q)，2.74(2H，m)，2.43(1H，m)，2.11-2.05(1H，m)，1.98-1.81(4H，m)，1.69-1.40(7H，m)，1.45(3H，t)，1.16(3H，d)；m/z(ES+)425(MNa+)，403(MH+)；m/z(ES-)401(M-H+)实施例53-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸 使用与实施例1中所述类似的步骤，以来自制备13的3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)-丙酸叔丁酯为原料制备标题化合物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δH7.78(1H，d)，7.71(1H，brm)，7.34(1H，d)，3.29-3.23(掩敝)(2H，m)，2.80(3H，s)，2.77(2H，m)，2.22-2.17(2H，m)，2.05-1.98(2H，m)，1.92-1.85(2H，m)，1.78-1.74(2H，m)，1.63-1.51(3H，m)，1.44-1.22(5H，m)；m/z(APCI+)389(MH+).
测定值C，64.05；H，7.39；N，8.82。
C21H28N2O3S.0.25H2O理论值C，64.18；H，7.31；N，7.13。
实施例63-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸 使用与实施例1中所述类似的步骤，以来自制备14的3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸叔丁酯为原料制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.85(1H，d)，7.61(1H，d)，7.24(1H，dd)，5.70(1H，brs)，3.30(1H，m)，2.81(3H，s)，2.74(2H，m)，2.30(2H，m)，1.97-1.84(6H，m)，1.69-1.56(4H，m)，1.50-1.41(2H，m)；m/z(APCI+)375(MH+)；(APCI-)373(MH+)制备13-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基亚氨基二碳酸二(叔丁基)酯
在0℃下用9-BBN[Aldrich](136mL，0.5M在四氢呋喃中的溶液，2当量，68mmol)处理烯丙基亚氨基二碳酸二(叔丁基)酯[《生物有机和药物化学通讯》(Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters)，1999，7，(1625-1636)(8.75g，34mmol)，并将该溶液在室温下搅拌45min。谨慎加入磷酸钾(23mL，3M水溶液，2.0当量，69mmol)，然后用铝箔覆盖反应烧瓶。加入6-溴-2-甲基苯并噻唑[《化学协会杂志》(J.Chem.Soc.)1936，1225；DE3528032A1](7.80g，34mmol，1当量)在二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液，随后加入1，1′-双(二丙基膦基)二茂铁钯(II)二氯化物-二氯甲烷[1∶1复合物](2.77g，3.4mmol，0.1当量)，并将该反应混合物在室温下搅拌18小时。在真空中浓缩该反应混合物，并通过柱色谱法纯化残余物[SiO2，戊烷∶乙酸乙酯，5∶1，然后3∶1]，得到所需产物，为澄清油状物(11.2g，84％)。1HNMR分析显示该物质中轻度污染有痕量的溶剂和9-BBN残余物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.81(1H，d)，7.60(1H，s)，7.23(1H，d)，3.60(2H，t)，2.77(3H，s)，2.71(2H，t)，1.97-1.88(2H，m)，1.45(18H，s)m/z(APCI+)407(MH+)，307(MH+-Boc)制备23-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基亚氨基二碳酸二(叔丁基)酯 按照与制备1中类似的方式，使用6-溴-2-乙基苯并噻唑[《法国化学协会简报》(Bull.Soc.Chim.Fr.)1967，2812-23]作为芳基溴成分制备这种2-乙基噻唑中间体。1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δH7.84(1H，d)，7.64(1H，s)，7.26(1H，d)，3.60(2H，m)，3.12(2H，q)，2.73(2H，t)，1.07-1.86(2H，m)，1.47(9H，s)，1.45(3H，t)m/z(APCI+)421(MH+)，321(MH+-Boc)
制备33-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐 将N，N-二叔丁氧羰基-3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺(11.2g，27.5mmol)溶于1，4-二噁烷(30mL)，并用氯化氢(25mL，4M在1，4-二噁烷中的溶液，100mmol)处理，将该溶液在室温下搅拌18小时。将该反应混合物蒸发至白色固体，与戊烷和乙醚的混合物(3∶1)研磨，得到所需胺双-HCl盐，为白色固体(6.05g，78％)。1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δH7.98(3H，brs)，7.85(1H，s)，7.81(1H，d)，7.31(1H，d)，2.78-2.73(4H，m)，2.75(3H，s)，1.94-1.85(2H，m)m/z(APCI+) 207.
下文的制备4和5中给出了标题化合物的可选生产步骤。
制备43-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐(变通方案)步骤(1)3-(2-甲基-苯并噻唑-6-基)-丙烯腈 向在室温下处于N2环境中的6-碘-2-甲基-苯并噻唑[WO2002090443A1](13.1g，47.64mmol)在DMF(500mL)中的搅拌溶液中加入丙烯腈(6.27mL，95.28mmol)，然后加入NaOAc(2.86g，47.04mmol)，然后加入Pd(OAc)2(1.07g，4.76mol)，再加入P(邻-甲苯基)3(2.90g，9.53mmol)。将所得混合物在130℃下在N2环境中搅拌～24hrs，然后在室温下搅拌2天。用水使反应停止(750mL)，然后萃取(Et2O，3×200mL)。干燥合并的有机层(MgSO4)、过滤并在真空中浓缩。通过闪蒸塔色谱法纯化所得残余物，用10∶1戊烷∶EtOAc、然后用3∶1戊烷∶EtoAc洗脱，得到标题化合物，为油状物(9.00g，94％)，～3∶1的反式∶顺式异构体混合物。
1H NMR(δH)2.85(3H，m)，5.45和5.90(1H，m)，7.50(2H，m)，7.90(2H，m)；APCI-MS 201(100％)[MH+].
步骤(2)[3-(2-甲基-苯并噻唑-6-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯 向在室温下处于N2环境中的3-(2-甲基-苯并噻唑-6-基)-丙烯腈(9.00g，45.00mmol)在MeOH(1L)中的搅拌溶液中加入Boc2O(19.64mL，90.00mmol)，然后加入NiCl2(5.84g，45.00mmol)。在～20mins内向所得混合物中谨慎地分批加入NaBH4(13.62g，300.00mmol)。将所得混合物在室温下N2环境中搅拌～1.5hrs，通过Arbocel过滤，并在真空中浓缩。通过闪蒸塔色谱法纯化所得残余物，用3∶1戊烷∶EtOAc、然后用1∶1戊烷∶EtoAc洗脱，得到标题化合物，为油状物(5.00g，36％).1H NMR(δH)1.40(9H，s)，1.85(1H，m)，2.65(1H，m)，2.75(1H，m)，2.90(3H，m)，3.05(1H，m)，3.15(1H，m)，3.50(2H，m)，7.30(1H，m)，7.65(1H，m)，7.90(1H，m)；APCI-MS 307(75％)[MH+]，251(50％)，203(100％).
步骤(3)3-(2-甲基-苯并噻唑-6-基)-丙基胺二盐酸盐
向在室温下处于N2环境中的[3-(2-甲基-苯并噻唑-6-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(248mg，0.78mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中加入4N在二噁烷中的HCl(5mL)，并将所得混合物在室温下N2环境中搅拌4hrs。在真空中除去溶剂，并将残余物与Et2O(3×10mL)一起研磨。在真空中浓缩滤液而得到标题化合物，为无色泡沫(195mg，99％)，通过1H NMR判定其纯度足以不经进一步纯化即用于下一步。
制备53-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐(变通方案)步骤(1)2-[3-(2-甲基-苯并噻唑-5-基)-丙基]-异吲哚-1，3-二酮 在45分钟内向2-(2-丙烯基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(18.7g，0.1mol)(烯丙基邻苯二甲酰亚胺《有机化学杂志》(Journal ofOrganic Chemistry)(1952)，1768-76)在THF(38ml，2ml/g)中的淤浆中加入9-BBN在THF(240ml，1.2eq)中的溶液(0.5M)，同时保持温度在0℃-5℃。然后在1小时内将该溶液温至环境温度并再搅拌1小时。在15分钟内加入K2CO3(27.6g，0.20mol，2eq)在50ml水中的溶液，随后加入溶于DMF(120ml)的2-甲基-6-溴-苯并噻唑(20.5g，0.09mol，0.9eq.)和二氯[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(2.4g，0.03eq)。将该反应体系在1小时内温至50℃，然后立即冷却至环境温度。加入水(260ml，19ml/g)和t-BME(560ml，30ml/g)并搅拌该溶液。通过滤器过滤反应物，以除去任何颗粒。进行相分离，并保留上部的有机相。通过真空过滤浓缩有机相至相当于理论产物约3ml/g。使深色淤浆在0℃--5℃下沉淀30分钟，在真空中过滤，然后用冷t-BME(0.4L，4.5ml/g)洗涤。在55℃真空中干燥所得固体，得到2-[3-(2-甲基-苯并噻唑-5-基)-丙基]-异吲哚-1，3-二酮(20.5g，0.061mol，68％)。
m.p.126℃；1H-NMR(d6-DMSO，300MHz)，δ1.95-1.98(m，2H)，2.72-2.77(m，5H)，3.63(t，2H)，7.32(d，1H)，7.75(d，1H)，7.74-7.83(m，5H).
步骤(2)3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐 在10分钟内向2-[3-(2-甲基-苯并噻唑-5-基)-丙基]-异吲哚-1，3-二酮(20g，0.06mol)在水(130ml，6.5ml/g)和乙醇(200ml，10ml/g)中的淤浆中加入甲胺水溶液(40％w/w溶液，117g，1.54mol，26eq)以形成溶液。将该溶液在25℃下搅拌18小时。加入二氯甲烷(300ml，15ml/g)，并将该反应体系搅拌15分钟。进行相分离并保留有机产物相。用二氯甲烷从水相中萃取残余产物(100ml，5ml/g)。用1M K2CO3洗涤合并的有机相(300ml，15ml/g)。进行相分离并用水洗涤有机相(300ml，15ml/g)。在真空中反萃取有机相至小体积，并用异丙醇交换，得到相当于10ml/g 2-[3-(2-甲基-苯并噻唑-5-基)-丙基]-异吲哚-1，3-二酮的最终反应体积。将该异丙醇溶液温至70℃并浓缩，在10分钟内加入浓HCl(12.5ml，0.125mol，2.1eq)。通过在大气压下蒸馏除去IPA(90ml，4.5ml/g)。将淤浆冷却，使反应溶液达到25℃，在0--5℃下制粒1小时，在真空中过滤，并用冷IPA洗涤(40ml，2ml/g)。在55℃真空中将产物干燥过夜，得到3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐[12.0g，0.058mol(72％)]；m.p.215℃。
制备63-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐 按照与制备3类似的方式制备这种2-乙基噻唑中间体，但将二氯甲烷代替二噁烷用作起始溶剂。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH8.04(1H，s)，7.95(1H，d)，7.62(1H，d)，3.36(2H，q)，3.02-2.88(4H，m)，2.10-2.02(2H，m)，1.53(3H，t)m/z 221(MH+)制备7(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]-氨基}羰基)环戊基]丙酸叔丁酯 将1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]环戊烷羧酸[WO0279143A1](6.8g，26.5mmol)在乙酸异丙酯(30mL)中的溶液中加入1，1′-羰基二咪唑(4.76g，29.3mmol，1.1当量)在乙酸异丙酯(60mL)中的溶液，将该混合物在60℃下加热3小时，然后在室温下加热过夜。取出等分部分并蒸发至干，通过1H NMR光谱法检测。结果显示反应进行至约90％转化(起始酸的Me双峰δ1.15，acylimidazolide的Me双峰δ1.05)。再加入一份1，1′-羰基二咪唑(645mg，4mmol，0.15当量)，并将该混合物在60℃下再搅拌1小时。将该反应混合物冷却至40℃，并加入三乙胺(4.3mL，31mmol，1.1当量)和来自制备3、4或5的3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐(7.1g，25.4mmol，0.96当量)，将该混合物在60℃下加热过夜。薄层色谱显示反应不完全，因此再加入一份胺二盐酸盐(650mg，2.3mmol，0.09当量)与三乙胺(330μl，2.3mmol，0.09当量)，将该混合物在60℃下加热过夜。将该反应混合物冷却至室温，然后用水(120mL)和2M盐酸(120mL)稀释。用乙醚(2×400mL)萃取该混合物，并用2M NaOH(2×100mL)洗涤合并的萃取物，干燥(MgSO4)并蒸发。通过快速色谱法纯化获得的油状残余物[SiO2，在二氯甲烷中的甲醇0.5％-1.5％]，得到标题化合物，为澄清油状物(11.5g，98％)。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δH7.85(1H，d)，7.63(1H，d)，7.27(1H，dd)，5.77(1H，brs)，3.35-3.25(2H，m)，2.82(3H，s)，2.77(2H，m)，2.33(1H，m)，2.03-2.03(2H，m)，1.89(3H，m)，1.68-1.55(5H，m)，1.45-1.44(2H，s)，1.42(9H，s)1.10(3H，d).13C NMR(CDCl3，125MHz)δC176.6，176.6，166.5，151.5，135.8，126.9，122.1，120.8，80.2，54.6，42.4，39.3，38.4，37.3，35.0，33.4，31.6，28.0，24.3，23.8，20.0，19.6.m/z(ES+)467MNa+.
如下的制备8中给出了用于标题化合物的变通方案制备8(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]-氨基}羰基)环戊基]丙酸叔丁酯(变通方案) 在2小时内，在氮气层下向维持在60℃的1，1′-羰基二咪唑(154.6g，1.02mols)在乙酸异丙酯(2.5ml/g)中的淤浆中加入1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]环戊烷羧酸[WO0279143A1](238.4g，0.93mol)在乙酸异丙酯(2.2ml/g)中的溶液。用乙酸异丙酯洗涤残余的1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]环戊烷羧酸溶液(0.3ml/g)。搅拌该溶液，并再在60℃下维持5小时，然后冷却至室温。向该溶液中加入来自制备3、4或5的3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐(259.8g，0.93mols)。在30分钟内加入三乙胺(188.3g，1.86mols)。在10分钟内将该混合物加热至回流，然后维持在回流状态下4小时，再冷却至室温。过滤该混合物以除去不溶性物质，用乙酸异丙酯洗涤(2.0ml/g)。将洗涤液与滤液合并。加入水(2.0ml/g)，并通过添加5M盐酸(375ml)而将该混合物酸化至pH5.0。过滤该混合物以除去不溶性物质。进行相分离，保留上部有机相。然后用0.5M碳酸钾水溶液(238ml)洗涤，进行相分离，保留上部有机相。将其用饱和盐水溶液洗涤至pH低于9.0。用乙酸异丙酯将该溶液稀释至5ml/g，然后蒸馏，并在大气压下用甲苯取代，维持恒定体积。为分析目的，可以将样品蒸发至干以得到产物，为油状物(389g，0.87mol，产率94％)。
制备93-[1-({[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基}羰基)环戊基]丙酸叔丁酯 将1-(3-叔丁氧基-3-氧代丙基)环戊烷羧酸[WO0279143A1](180mg，0.7mmol)与来自制备6的3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐(180mg，0.65mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(135mg，0.7mmol)、1-羟基苯并三唑(95mg，0.7mmol)和三乙胺(400μl，2.8mmol)在二甲基甲酰胺(7mL)中混合。将该反应混合物在60℃下搅拌过夜。在冷却至室温后，在真空中蒸发该混合物，并用水(50mL)稀释残余物。用乙醚(3×50mL)萃取该混合物，并用MgSO4干燥合并的有机级分，然后蒸发。通过快速色谱法纯化[SiO2；在戊烷中的乙酸乙酯(15％-20％)]而得到所需化合物，为淡棕色油状物。1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.87(1H，d)，7.65(1H，d)，7.26(1H，dd)，5.63(1H，brs)，3.30(2H，q)，3.12(2H，q)，2.75(2H，t)，2.20-2.14(2H，m)，1.98-1.80(6H，m)，1.68-1.58(5H，m)，1.45(3H，t)，1.42(9H，s)m/z(ES+)467(MNa+)，445(MH+).
或者，使用与制备7中所述类似的方法制备标题化合物。
制备10(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基}羰基)环戊基]丙酸叔丁酯 使用与制备9中类似的方法，通过使来自制备6的3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐与1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]环戊烷羧酸[WO0279143A1]相偶联而制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.87(1H，d)，7.66(1H，s)，7.27(1H，m)，5.77(1H，brm)，3.29(2H，m)，3.13(2H，q)，2.77(2H，m)，2.31(1H，m)，2.08-1.96(2H，m)，1.70-1.43(10H，m)，1.45(3H，t)，1.43(9H，s)，1.10(3H，d)m/z(ES+)481(MNa+)，459(MH+)制备111-(2-叔丁氧羰基-乙基)-环己烷羧酸 将环己烷羧酸(2.89g，22.6mmol)溶于THF(30mL)，将该溶液加入到冷却至-15℃的二异丙基酰胺锂溶液(在THF/正庚烷/乙基苯中2M，Aldrich)24.3mL(48.6mmol)中，加入速率能够保持温度低于0℃。然后将该反应混合物在0℃下搅拌2.5小时，此后再冷却至-15℃，添加在THF(50mL)中的3-溴丙酸叔丁酯(5g，23.9mmol)，加入速率应可以保持温度低于0℃。使该反应混合物达到室温并搅拌过夜，此后通过添加2M HCl使该反应混合物猝灭，用乙酸乙酯2×200mL萃取。干燥合并的有机层(MgSO4)，然后蒸发，得到橙色油状物。通过快速色谱法纯化[SiO2；二氯甲烷/甲醇/.880NH3(97∶3∶0.5)]而得到标题化合物，为树胶状油状物(800mg，14％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δH2.22(2H，m)，2.07-2.00(2H，m)，1.86(2H，m)，1.45-1.16(8H，m)，1.41(9H，s)m/z(ES+)279(MNa+)；m/z(ES-)255M-H+)制备123-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸叔丁酯 通过与制备9中类似的方法，使用来自制备6的3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐与来自制备11的1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]环己烷羧酸制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.88(1H，d)，7.65(1H，s)，7.27(1H，m)，5.65(1H，brm)，3.34(2H，m)，3.14(2H，q)，2.77(2H，m)，2.15(1H，m)，1.95-1.27(14H，m)，1.45(3H，t)，1.41(9H，s)m/z(ES+)481(MNa+)，459(MH+)制备13(3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸叔丁酯
通过与制备9中类似的方法，使用来自制备3、4或5的3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐与来自制备11的1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]环己烷羧酸制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.85(1H，d)，7.64(1H，d)，7.27(掩敝)(1H，dd)，5.65(1H，brm)，3.33(2H，m)，2.81(3H，s)，2.77(2H，m)，2.18-2.13(2H，m)，1.93-1.79(4H，m)，1.74-1.68(2H，m)，1.60-1.23(7H，m)，1.40(9H，s)m/z(ES+)467(MNa+)，445(MH+)制备143-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸叔丁酯 使用与制备9中类似的方法，通过使来自制备3、4或5的3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基胺二盐酸盐与叔丁基-3-1-羧基环戊基)丙酸酯[WO0279143A1]偶联制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.85(1H，d)，7.62(1H，d)，7.25(1H，m)，5.63(1H，brm)，3.29(2H，m)，2.81(3H，s)，2.75(2H，m)，2.19-2.15(2H，m)，2.00-1.36(11H，m)，1.42(9H，s)；m/z(APCI+)431(MH+).
权利要求
1.通式(I)的化合物、其互变体或所述化合物或互变体的药物上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物 其中R1为H或CH3；R2为C1-C2烷基；且n为1或2。
2.权利要求1的化合物，其中n为1。
3.权利要求1或2的化合物，其中R1为氢。
4.权利要求1或2的化合物，其中R1为甲基。
5.权利要求1-4中任意一项的化合物，其中R2为甲基。
6.权利要求1-4中任意一项的化合物，其中R2为乙基。
7.权利要求1的化合物，其选自(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例1)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例2)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环戊基)丙酸(实施例4)；和3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯并噻唑-6-基)丙基]氨基甲酰基}环己基)丙酸(实施例3)。
8.药物组合物，其中包含如权利要求1-7中任意一项所述的通式(I)的化合物或其药物上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，以及药物上可接受的稀释剂或载体。
9.如权利要求1-7中任意一项所述的通式(I)的化合物或其药物上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，用作药物。
10.治疗障碍或疾病的方法，其中已知或可以证实抑制NEP在哺乳动物中将产生有益作用，该方法包括对所述的哺乳动物给予治疗有效量的如权利要求1-7中任意一项所述的通式(I)化合物或其药物上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物。
11.如权利要求1-7中任意一项所述的通式(I)的化合物或其药物上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物在制备用于治疗障碍或疾病的药物中的应用，在所述的障碍或疾病中，已知或可以证实抑制NEP将产生有益作用。
12.权利要求9的化合物、权利要求10的方法或权利要求11的应用，其中所述的障碍或疾病选自高血压、原发性高血压、肺动脉高压、继发性高血压、单纯收缩期高血压、与糖尿病相关的高血压、与动脉粥样硬化相关的高血压和肾血管性高血压、周围血管疾病、心力衰竭、心绞痛、肾机能不全、急性肾功能衰竭、周期性水肿、美尼尔病、高醛固酮血症(hyperaldosteroneism)(原发性和继发性)、多钙尿、中风、青光眼、肥胖、代谢病、代谢综合征、糖尿病、葡萄糖耐量降低、糖尿病性视网膜病、糖尿病性神经病、月经紊乱、未足月产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖性疾病、男性和女性不孕症、多囊性卵巢综合征、着床失败(implantationfailure)、哮喘、炎症、白血病、疼痛、癌痛、抑郁症、药物滥用、肝硬化、癫痫、情感障碍、痴呆和老年性意识错乱、胃肠道病症、腹泻、过敏性肠综合征、创伤愈合、糖尿病性和静脉曲张性溃疡和褥疮、脓毒性休克、胃酸分泌、血内血管紧张肽原酶过多、囊性纤维化、再狭窄、动脉粥样硬化、女性性功能障碍(FSD)、性唤起障碍、女性性唤起障碍(FSAD)、男性性功能障碍(MSD)、男性勃起机能障碍(MED)、机能减退的性欲障碍、性欲高潮障碍和性交痛障碍。
13.权利要求12的化合物、方法或应用，其中所述的障碍或疾病选自女性性功能障碍(FSD)、性唤起障碍、女性性唤起障碍(FSAD)、男性性功能障碍(MSD)、男性勃起机能障碍(MED)、机能减退的性欲障碍、性欲高潮障碍和性交痛障碍。
14.权利要求13的化合物、方法或应用，其中所述的障碍或疾病选自女性性功能障碍(FSD)、女性性唤起障碍(FSAD)、男性性功能障碍(MSD)和男性勃起机能障碍(MED)。
全文摘要
本发明涉及通式(I)的中性内肽酶(NEP)抑制剂及其用途、其制备方法、其制备中所用的中间体和含有所述抑制剂的组合物。这些抑制剂在多种治疗领域中具有应用，包括治疗男性和女性性功能障碍，特别是女性性功能障碍(FSD)，尤其是其中FSD为女性性唤起障碍(FSAD)。
文档编号A61P15/00GK1761656SQ200480006939
公开日2006年4月19日 申请日期2004年3月9日 优先权日2003年3月14日
发明者D·赫普沃斯 申请人:辉瑞大药厂